调理培养基和其应用的制作方法

专利名称：调理培养基和其应用的制作方法
调理^# 卩其应用本发明涉及调理(conditioned)培养基和其用途，特别是在化妆和皮l^员 域。从而涉及所述调理培养基、其提取物或包含它们的组合物对炎症或免疫紊 乱的刺激体征的治疗和预防。本发明还涉及一种组合物，所述组^tl包含至少 一种化妆品或药物化合物和至少一种根据本发明的调理培养基或其提取物的组 合，所述化合物或能引^皮肤的刺激。人的皮肤是由两层组成的，即表层，表皮层，和深层，真皮层。表皮主要是由三种类型的细胞构成的，艮卩角质化细胞(主要的)、黑色素细 胞和郎格罕氏(Langerfians)细胞。这些细胞鄉中的每一^f昔助它固有的功能 在人体内皮肤位置起到重要的作用，特别是保护人体对抗外来攻击的作用。真 皮为表皮提供牢固的支撑。它也是供养要素。它主要由成纤维细胞和细胞外基 质组成，它本身主要是由胶原、弹性蛋白和基质构成。其中也可以找到白细胞、 肥大细胞和组织巨噬细胞。最后，血管和神经^B佳横贯真皮层。皿构成了一个屏障对微卜来攻击，特别是,，化学的、机械的和感染性的 攻击，和在这方面，在这里发生的对抗环境因素(气候、紫外线、烟草、污染、 传染等等)禾口/或生物体内^/因素(例如，某药齐IJ)的^T防御反应。因此，保持或重建它的多种功能的完整性和平衡Ji^要的，特别是细胞的 更新和分鹏呈，繊圭鹏。自l」激通常被定义为是一个可逆的和非免疫学的局部炎症反应，以浮肿 和红斑为特征，所述浮肿和红斑是由化学物质和皿之间一次或重复接触诱发 的。急性的刺激,性皮炎(ICD)主要以炎症为特征，而慢性的ICD以角质 化细胞，增殖和暂时的表皮角化病为特征。ICD是一种多因子的疾病，其由 内因和外因两者共同引发。年龄、遗传背景和性别都构成可以影响病理学发展 的因素。此外，刺激齐啲效果与它们的化学'M和应用的浓度直接相关，所述浓度影响赚的吸收。鹏臓是非常重要的1^现，因为其4谅大约在60%到80%之间的接 触性皮炎的临床病例。其鹏例的大多数表现为顿性撤虫性皮炎。属于非常不同的化学产品的不同种类的物质，例如角蛋白溶剂、脱7jC剂或氧化，原剂可能被认为 赚剂。由于这种多相性，难以给出一个方法，以 利用它的化学结构作为基础来辨别刺激性产品。不同的刺激剂可以诱导不同类 型的炎症。除了它们的腐蚀作用之外，其诱导预先形成的炎性介质的释放，化 学产品可以损害细胞的功能或诱导先天免疫的皮肤细胞的活化。这导致多种炎 症特异性的化合物例如细胞因子、化学增活素、补体化，和血管扩张化合物 例如 或花生四烯酸途径的代谢产物的释放，其调整，炎症和细胞的聚集。 在粒ICD生理病理学中化^l对赚的穿離是主要参数(Norlen L等, J. Invest Dermatol 117 : 823 - 829, 2001, Mizutani H等，J. Clin Invest 87 :讓 -1071,1991)。所述的穿逸变与皮肤的3til性的f號(其与它的生理情况有关系)和化，的被认为限制iax的物理化学性质(M量、极性、离子似呈度)和携带物质与舰劍虫的自然环境(,剂、载体)有关系。这个基本步骤对应的是艘扩散的肝M卜部环境或载体的释放，并因此 成为身体可获得的。当刺激剂与舰撤虫时，角质化细胞是首先被化^T撒活的细胞。因此， 在ICD上大部分研究集中于这种细胞类型，并已知有关它们对ICD生理病理的 参与的大量数据。角质化细胞在皮肤炎症反应的初始化中通过释放多种介质和 细胞因子扮演重要角色，所述多种介质和细胞因子引发产生ICD临床症状的完 整的一系列炎症反应。其中，IHa和花生四烯酸衍生物在炎症的发展中具有特 别的重要性。IL"la的释M过活化NF-kB转录因T^诱导涉及炎症的基因转录，例如 细胞因子IL"1(3、 IL"6、 GM《SF、 TNFa、化学增活素、包括IL"8、 MCP-1、 MIP-la和嗜酸细胞活4t^化因子(chemokine)、以及粘附M的^i例如E -选择蛋白或ICAM -1和VCAM -1 (Gordon取Nature 19:346 ( 6281): 274 - 276)。从角质化细胞激活产生的信号级断始于预存关键介质的释放。事实上， 静止角质化细胞包含大量予跌形戯n生物学活性的IMa (Marks F等，Toxicol Lett 96: 111 -118,1998)、以及花生四烯敏Murphy正等，J Invest Dermatol 114:602 -608,2000)。因为这两种化合物是由角质，Ma^性产生的，并保, 存在细胞中，表皮可以被认为是高炎性介质的主要贮存处。由于化合物腐蚀作 用、離麟露于紫外线对角质化细胞的损伤导致IMa和花生四烯酸的释放， 其成为躯体的首先的防御反应。IMa不但具有自分泌作用，而且已经被描述为， i!3i激活NF - kB转录因子通道，在多种皮自胞类型中诱导皿90种不同基 因的转录，例如角质化细胞、内皮细胞舰纤维细胞(Gordon取Nature 19:346 (6281) :274-276)。为了发挥它的作用，花生四烯酸' 的代谢为许多高活性的化，，类花 生酸类物质如前列腺素、凝血嘴烷和白细BfiH烯充当短持续期的局部介质的角 色,涉及到增殖、分化、凋亡的控制，或其他浮肿的形成或白细胞的撒活(Minphy 正等，JInvestDermatol 114:602 - 608,2000)。因此，IMa和花生四烯酸可以被认为劍虫发应^^七学应力的刺激5嫁的关 键性介质(MurphyJE等，J Invest Dermatol 114:602 - 608， 2000)。^^ 有的炎性介质中，除lHs和花生四烯^t外，仅有TNF力可以激「活 足够数量的机制以独立产生皮肤炎症。这个,炎症主要的细胞因子已经预存 在舰的肥大细胞中(Lanick JW等，J Leukoc Biol 45 : 429 - 433,1989),但也 可以御微之后由角质化细胞和郎格罕氏细胞产生(Groves RW,等，J Invest Dermatol 98:384-387,1992)。 TNF-ct对炎症，最有影响的一个机制是诱导粘 附分子与IL"1产生协同作用。粘附0在白细胞的循环和从周围血管向真皮和 表皮的渗透中扮演重要的角色(Holliday MR等，Am J Contact Dermat 8 : 158 -164,1997)0大量化学产品可以诱导 刺激反应；然而，它们产出前炎症细胞因子的 能力是不同的，并且皮肤炎症不縣,繊于TNF"a的产生。鹏当着重注意至赃炎症位点由撒活的巨噬细,生的IM2和IM8在局部的放大循环中也起了重要的作用。这是因为M细胞因子m:附近的T淋巴细MU激产生之后其成为对巨噬细胞和角质化细胞的强大的共撒活因素。财卜，发生血管细胞和角质簡胞弓胞的趋化因子分泌。CC 3EM (如此 命名是因为第一个半胱氨酸是相邻的)的趋化因子对于多形核细胞和特定淋巴 细胞驗化性的，其原型是IL"8。 CXC型(如此命名是因为一4^SM^在前两个半胱氨酸之间)的趋化因子对于雜细脚巨噬细胞和特定淋巴细胞魏化性的，其原型是MCP-1 (靴细鹏化因子-l)。这两种趋化因子在炎症位点 的释放阐明了在发炎组织中发现多核细胞浸润的原因。IL"6也是一种由角质化细胞、巨噬细胞和血管细胞在炎症期间t^活分泌的 细胞因子。这个重要的细胞因子包含于许多体系中，例如免疫反应、血细胞生成、成骨细胞增殖等等。在^刺激反应中，n乂可以在局部生成，可以到达体循环并触发局部和整体的反应。与细胞因子和趋化因子以及花生四烯酸代谢产物平行的，另一个主要的炎症介质是氧鹏激(oxidative sfress)。特定的化学刺激物已知产生自由M口 ROS (活性氧物质)，能诱导脂质过氧 化或DNA改变。氧化应激在由化合物诱导的剌激I，的表征中起作用的假设被 ROS抑制靴清除齐柳制舰炎症的事实所支銜Zhang L等，J Invest Dermatol 115:168-176,2000)。虽然郎格罕氏细胞(LC)在抗原特异反应的诱导中扮演了一个絲的角色， 它们看来似乎在ICD的生理病理中不具有S^作用。许多研究已经描述了 LC 在刺激剂上皮应用(epicutaneous application)之后的形态或密度上的变化 (Mikulowska A等，Contact Dermatitis 34 : 397 - 401， 1996; Kimber I等，J Invest Dermatol 99:48S-50S, 1992)。然而，这个结果更可能代表对炎症g产生的一 个非特异的反应。显然在ICD期间产生的IWa和TNF^a具有以剂量依赖的方 式引起LC迁移的能力。因此，可能是由刺激剂诱导的IL-la和TNF《的局部 浓度可以产生LC可变的迁移(Kimber I等，J Invest Dermatol 99 : 48S - 50S， 魔)。在i^5fe天免疫系统的各种群体中，肥大细胞是在ICD发展中的主要细胞。 肥大细胞存在于接近血管的真皮中，并Ji^含预存和生理活性的TNF"Ct的唯一 细胞(LanickJW等，JLeukocBiol45 :429-433,1989)。与这些前炎性细胞因子相反，还存在抗炎细胞因子例如TGF—-卩和IW0 以及己知能调整^K'危险'信号的休克蛋白(即，BiP ( grp78)和HSP27) (Panayi G等，Cur Opinion Immunol 16 : 531 - 534， 2004)。因此，期望发现新的增强皮自这些有害机制的抵抗力的方法，并用， 免、治疗和预防炎症和免疫紊乱。专利申请WO 02/098365 (高级组织科学)给出了调理培养基用于化妆品或药物应用的用途。调理培养基JM5it^人皮肤细胞获得的，特别是成纤维细胞或角质化细胞。这些细胞被遗传性的修饰以增加它们生长因子或培养基中抗 氧化剂的产量，其通常包含可溶',原。US 2005/0249691描述了化妆品^^组糊，包括与繊基质结合，用 于i^M角质层细胞的i歸基；组合物必须包含胶原、壳聚糖和氨基多糖。US 2006/0182701还描述了化妆品^^组^j,包括用于皮肤细胞的培 养基。其目的的是为组合物的施用的舰细胞提供一个培养基，所述培养割每 允许皿细胞按其在体外被获得的类似方式生长。出A^意料的，本发明发现，以完全不同于皮 胞的细胞调理的培养基可 以被用于皿皿的或它的附属物保持^ 状态，并可对抗炎症和/鄉赚J， 和/或免,乱。为此，本发明的一个目的的是至少一种调理细胞培养基或其提取物用于制备治疗炎症和/或免疫紊乱病征的组合物的用途，所述培养基肖^I51使至少一种消化3t^胞培养物和至少益生菌微生物,来获得。有益的，细胞培养基，根据本发明还可以称为调理培养基，可以通过接触外周血细胞，特别是白细M获得。这些白细胞可以，例如，在消^ffl胞的培养基的培糊中。雌的，这些白细Jte要包含淋巴细胞，但还可以包含其f砂卜周血细胞例如单核细胞，其被与培养基接触。根据本发明一个有益的实施例，消化道细胞培，是三维培养物。 被用于实现本发明的消化 胞可以来源于消，的不同部分，例如會管、胃自。有益的，4顿来源于肠道上皮的细胞；这种肠道上皮细胞是本领域技术员已知的。作为非限定性的实施例，肠来源的A^胞帝恪的称为Caco2、 HT29或T84。相应的株被^l^Arcc的培养m藏中心，编号如下Caco2:ATCCNo. HTB-37 HT29: ATCCNo. HTB-38T84: ATCCNo. CCL248对于本发明的目的的，术语"益生菌微生物'駒来意指一个活的微生物， 其被使用足够数量时，对它的宿主的健康具有积极的效果，"joint FAO/WHO Expert Consultation on Evaluation of Health and Nutritional Properties of Probiotic in Food Including Powder Milk with Live Lactic Acid Bacteria FAO/WHO专家 鉴定食物中益生菌对健康的价值和营养M，包括具有活孚L酸菌的娜)，2001 年10月6日"，并且其可以特别改善肠道的 物平衡。益生駒以用活细胞混悬液的形式引扁胞培养基，微度可以由本领域技术人员根据混合物其他成分的量来调整。作为启示，可以i^包括大约io4到109Cfii/ml的接种物(dU^"集落形成单位"，即"能形成一，落的单位")， iti^至少105 cfo/ml。益生菌接种物可以通常浓度为大约106到107cfii。适合本发明的微生物可以特别选自子囊菌(ascomycetes)例如酵母 (Saccharomyces)、耶罗威亚酵母(Ya订owia)、克卢费氏酵母属(Kluyveromyces)、 有孢圆酵母属(Torul鄉ora)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomycespombe)、德巴 利酵母属(Debaromyces)、假丝酵母(Candida)、毕赤氏酵母(Pichia〉、曲霉 (Aspergillus)和青霉菌(Penicillium)，和如下属的细菌双歧杆菌属 (B迅dobacterium)、畸形菌体(Bacteraides)、梭菌属(Fusobacterium)、蜜l1^ 菌属(Melissococcus)、丙酸杆菌属(Propionibacterium)、肠球菌(Enterococcus)、 乳酸球菌属(Lactococcus)、葡萄球菌(Staphylococcus )、消化链球菌属 (Peptostrepococcus)、杆菌(Bacillus )、小球菌属(Pediococcus )、微球菌 (Micrococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、魏斯氏菌属(Weissella)、气球菌属 (Aerococcus)、乳球菌属(Oenococcus)鄉L杆菌属(Lactobacillus),和其混合物。作为最适合于本发明的子囊菌(ascomycetes),特别的提及耶罗威亚酵母 (Yairowia lipolitica)和乳麟鲁维斯酵^(Kluyveromyces lactis)，以及有孢圆酵母 属(Torulaspora)、粟酒l^i酵^(Schizosaccharomyces pombe)、假丝酵母(Candida) 和毕赤氏酵母(Pichia),或者可替换的酵母，例如酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或酵母菌(boulardii)。关于益生菌微生物，通常使用下列细菌和酵母属—乳酸菌(lactic acid bacteria):其舰发,产生乳酸。它们按照脇 学被分为两个群*乳杆菌类(Lactobacillus species)..嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus(LCl， NCFB 1748));乳酸杆菌(amylovorus)、干酪乳杆菌 (casei(Shirota))、鼠李糖乳杆菌(rfiamnosus(strainGO))、短乳杆菌(brevis)、巻 曲乳杆菌(crispatus)、德氏乳杆菌(delbnieckii(保加利30E种subsp bulgaricus, lactis))、发酵乳杆菌(fermentum)、瑞士乳杆菌(helveticus)、鸡乳杆菌 (gallinarum)、格氏乳酸杆菌(gasserijohnsonii)、副干酪乳杆菌(paracasd)、植物 乳杆菌(plantarum)、罗伊氏乳杆菌(reuteri)、鼠李糖乳杆菌(rhamnosus)、唾液 乳杆菌(salivarius))、消化乳杆菌(alimentarius)、弯曲乳杆菌(curvatus)、干 酪乳杆菌干酪亚种(casei subsp. Casei)、清酒乳杆菌(sake); Gocci:肠球菌(Enterococcus )(粪肠球菌faecalis、尿肠球菌 faecium)、乳酸孚L球菌(Lactococcus lactis (subspp lactis或cremoris))、肠膜明 串珠菌葡聚糖亚禾中(Leuconstoc mesenteroides subsp dextranicum)、乳酸片球菌 (Pediococcus acidilactici)、嗜酸芽孢乳酸菌(Sporolactobacillus inulinus)、 Streptococcus salvarius subsp.Thermophilus、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus )、 肉葡萄球菌(S鄉hylococcus camosus )、 木糖葡萄球菌 (Staphylococcus xylosus);—双歧杆菌舰歧杆菌属类青春双歧杆菌(adolescentis)、动物双il^F菌 (animalis)、两it规歧杆菌(b迅dum)、舰,菌(breve)、乳^jt支杆菌(lactis)、 长双歧杆菌(longum)、婴儿双歧杆菌(infantis)、假小链双歧杆菌 (pseudocatenulatum );一其他生成孢子的细菌杆菌(Bacillus) (Toyo菌cereusvartoyo淑古草芽 孢杆菌subtilis)、凝结芽胞杆菌(Bacillus coagulans)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、 Escherichia coli strain nissle、费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii)。特定的益生菌微生物实施例是^#双歧杆菌(B迅dobacterium adolescentis)、 动物双岐杆菌(Bifidobacterium animalis)、两歧双歧杆菌(B迅dobacterium b迅dum)、短双岐杆菌(B迅dobacterium breve )、乳双歧杆菌(B迅dobacterium lactis)、长双it新菌(B迅dobacterium longum)、婴JU5^i杆菌(B迅dobacterium infentis)、假小链双歧杆菌(B迅dobacterium pseudocatenulatum)、嗜酸乳杆菌 (Lactobacillus acidophilus (LCI， NCFB 1748));貪淀粉学L杆菌(Lactobacillusamylovorus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei (Shirota))、鼠李糖乳杆菌 (Lactobacillus rhamnosus (GG菌株))、短孚L杆菌(Lactobacillus brevis)、巻曲孚L杆 菌(Lactobacillus crispatus)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbmeckii (保力诉廿亚 亚禾中subsp bulgaricus, lactis))、发麟L杆菌(Lactobacillus fermentum)、瑞士 乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、鸡乳酸杆菌(Lactobacillus gallinarum)、格氏 乳酸杆菌(Lactobacillus gasseri) ， Lactobacillus johnsonii、畐ij干酷乳杆菌 (Lactobacillus paracasei)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、罗伊氏乳杆 菌(Lactobacillus reuteri)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、唾液乳杆 菌(Lactobacillus salivarius)、消化乳杆菌(Lactobacillus alimentarius)、弯曲乳杆 菌(Lactobacillus curvatus)、干酪乳杆菌干酪亚禾中(Lactobacillus casei subsp.casei)、淸酒乳杆菌(Lactobacillus sake)、孚L酸乳球菌(Lactococcuslactis)、 肠球菌(Enterococcus(类肠球菌fkecalis、尿肠球菌faecium))、乳酸孚L球菌 (Lactococcus lactis (subspp lactis或cremoris))、肠膜明串珠菌葡聚糖亚禾中 (Leuconstoc me鄉teroides subsp dextranicum)、 乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、嗜^^ fe乳酸菌(Sporolactobacillus inulinus ) 、 Streptococcus salvarius subsp. Thermophilus、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、 肉葡萄球菌 (Staphylococcus camosus)、木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus)、酵母 (Saccharomyces (cerevisiae ^^他的boulardii))、杆菌BacillusCToyoi菌cereus var toyo或枯草芽孢杆菌subtilis)、凝结芽胞杆菌(Bacillus coagulans)、地衣，杆 菌(Bacillus licheniformis)、 Escherichia coli strain nissle禾口费氏丙酸杆菌 (Propionibacterium freudenreichii),和它们的混^J。有益的，至少一个益生菌微生物魏自乳酸菌(lactic acid bacteria)、双歧 杆菌(bifidobacteria)禾口酵母菌(Saccharomyces yeasts)的。更特别的，它们是来源于乳酸菌群的益生菌微生物，例如尤其是乳杆菌属 和/或双歧杆菌属，特别乳杆菌属。作为这些乳酸菌的例证，更特别的可提及 Lactobacillus johnsonii、罗伊氏学L杆菌(Lactobacillus reuteri)、 鼠李糖乳杆菌 (Lactobacillus riiamnosus )、 畐廿干酷孚L杆菌(Lactobacillus paracasei)、 Lactobacillus casei或两歧双歧杆菌(B迅dobacterium b迅dum)、短双岐杆菌 (B迅dobacterium breve)、 "fe^歧杆菌(Bifidobacterium longum)、 ^/双il^f菌 (B迅dobacterium animalis)、孚U50^杆菌(B迅dobacterium lactis)、婴JU^杆菌(Bifidobacterium infentis)、 #^^歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis) ^i假刁、 ^X歧杆菌(B迅dobacteriumpseudocatenulatum),和它们的混^1。最适合的种类是Lactobacillus johnsonii、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、长双歧杆菌 (B迅dobacterium longum)和孚改歧杆菌(B迅dobacterium lactis NCC 2818)(也 标识为Bbl2ATCC 27536);还可以特别皿下列菌株，按照布达Wf条约, 在culture collection of the Institut Pasteur (28 rue du Docteur Ro叫F - 75024 Paris cedex 15)的30/06/92、 12/01/99、 15/04/99、 15/04/99和07/06/05: Lactobacillus johnsonii ( CNCM I - 1225)、 Lactobacillus paracasei( CNCM I _ 2116)、 Bifidobacterium adolescentis (CNCM I - 2168)禾卩Bifidobacterium longum (CNCM I 曙2170)和Bifidobacterium lactis ( CNCM I - 3446)、和属B迅dobacterium 1ongum(BB536)。 Bifidobacterium lactis CNCM I - 3446株可以获自Hansen (Chr. Hansen A/S, 10 -12 Boege Alle， RO. Box 407， DK - 2970 Hoersholn^ Denmark)。用于与细胞接触的细胞培养基是适合所使用的不同类型的细胞存活和/或 培养的任何营养培养基。其通常包含碳和氮源、矿物质、维生素禾P/或痕量元素，例如氨基酸、糖、蛋白质和脂肪酸。细胞可以在它们的来源组织之外培养。为此，它们将在接近于它们在组织 中的自然条件的环境下培养。这些培养在它们的培养基中需要基本的因子。该 环境应该具有确定的由矿物质和生物材料组成的组合物，被称为培养基。所述 培养基通常由专业的供应商提供，并且根据细胞类型具有特定的特征。培养基 通常还包含适当数量的水、碳和氮源、磷,和硫,、矿物质、生长因子和维生素。在这种类型的培养辭巾培养的细M常需要添加血清。所 淸具有复杂 的组分，并至少为细胞提供激素、粘附因子和氨基酸。该血清可以，例如，全 部或部分被本发明的调理培养基的添加所替代。事实上，调理培养基也可以另 外t赚加到培养基中，如同增浓。本领域技术人员能容易的确定合适的培养基。非限定性的，可提及的有RPMI薩培养基、Dulbecco's Modified Eagle's麟基PMEM)，、最小基 本培养S(MEM)、 M199、 RPMI 1640或Iscove's Modified Dulbecco's ^#基 (EDMEM)、 Ham'sF-12、 Ham'sF-lO、 NCTC109和NCTC 135。这些培养基可以以通常棚于细胞培养的任何添加剂补充，例如，非限定 性的，磷脂前体、非必需氨基酸、核酸、维生素、抗生素、酶辅助因子、无机盐、胰岛素、转铁蛋白、三碘甲腺原氨酸、乙醇胺、o-磷酸乙醇胺或生长因子例如神经生长因子或神经营养因子-3 。通常被用来补充细胞培养基的各种添加齐啲浓度可以被本领域财人员特 别地根据被培养的细胞的类型确定和调整。其他的培养基描述于Ham和McKeehan， "Methods in Enzymology", 58:44-93,1979中，或于Bottenstein等,'Melhods in Enzymology", 58:94 -109， 1979，其内teitk引入作为参考。此外，还可以使用不同培养基的混合物，特别是上述培养基的，例如DMEM/HAM F12的混，。这些培养基可以由特定生长因子补充，或例如血清，不过后一组分也可以 不补充。根据一个实施例，没有胶原被添加到培养基中。所述培养基可以是液体、半液体、？鹏或固体，雌至少部分是液体。措词"调理培养基的提取物'是用来特另億指i!Mii渗析、，法、相分离、 ^^过滤层析、亲和色谱法、沉淀、浓缩、冻干法等方法得到的所述调理培养 基的部份或亚化^tl。调理培养基可以从缺少血清和动物产品的培养基中产生。该调理培养靴 选在存在人白细胞的情况下(并且特别是乳杆菌属或双歧杆菌属类的益生菌存 在下)由消化道细胞的刺激之后得到，具有益生菌。有益的，鹏于本发明组合物的培养基(或它的提取物)是稳定了的培养 基即，它己经经受了用于保存其在选择的给定瞬间的状态的操作，通常是在 制备过程的最后，同时已经保存了它的固有性状。特别的，，作是用刺妙万 述培养基变得无菌的，即，育巨够抑制微生物生长，同时保存了其具有的生物学 1M。培养基的稳定可以M3tt领職术人员已知的樹可方法获得，例如，灭 菌过滤、高压蒸汽灭菌、超高温(UHT方法)、高压灭菌、Y-辐射或冷冻。根据本发明的调理培养基、它的提取物或含有该成分的组^l特别适用于 预防、减少或治疗皿刺激的病症。皮肤反应，特别是鹏懺腿，可能是由化学起源的夕卜源性因素所诱发，例如能引起皮肤刺激的生物体内,、抗原、变态反应原、化学产品、化糊，或剥落导致的夕卜源性因素，跡繊源的夕卜源性因素c鹏、气候、紫外辐射、大气污染、特别是重金属、臭氧、抽烟等等)，鄉nw^源的外源性因素(摩擦、 刮)，和内源性因素例如紊乱包括影响皮肤、粘膜、头皮和/或毛发的炎性和/或 、 反应机制。生理性内源性因素可以，例如，是与前炎症介质的异常产生(神经介质、细胞因子、趋化因子)^i餘激素'm发相关的。特别的，本发明的目的是至少一种调理培养基^s少一种J^定义的提取 物在制备用于治疗舰禾p/救戯微j嫁症状组合物中的用途。因此，发明涉及至少一种调理培养基或其提取物的非治疗用途，如镇静剂。 本发明的目的还是至少一种根据本发明的调理培养基或其提取物的所述 非治疗用途，用于预防和/或治疗皮肤反应，选自发红、痒、发热感、烧灼感、 刺痛和肌鹏张。本发明的目的还是根据本发明的所述用途，其特征在于戶脱调理培养基或 其提取物是用于预防称或降低由至少一个割牛诱发的所述皮肤反应，所述割牛 选自能弓胞皮鹏臓的生物体内异物、抗原、变态反应原、化学产品、化合物 的作用，或剥落的作用，或、鹏、气候、紫外辐射或大气污染的作用，或者由 摩擦、前炎症介质的异常产生和雄激素'm发弓胞的作用。特别的，调理培养基或其提取物可以OT于预防和/或斷氐化妆品救肤学组合物的刺激效果，所述化妆品，肤学组合物包含一个或多个能引^赚现 象的组合物。本发明的目的还是至少一种调理培养基或其提取物在制备用于预防和/或 治疗涉及皮raij激的皮條乱的化，中的用途，例如具有易朿微的和/或过敏 的^^和/或粘膜称或头皮的个体跟啲皮^i微。更特别的，本发明的目的是用于制，预防称或治疗皮^y激的组合物的 所述用途，其特征在于所述皮^i微是由至少一种^i牛诱生的，所述斜牛选自 能弓胞皮鹏ij激的生物体内异物、抗原、变态反应原、化学产品、化合物的作 用，或剥落的作用，^m、气候、紫外辐射駄气污染的作用，棘由摩擦、 前炎症介质的异常生成和雄激素性脱发弓i起的作用。本发明的目的还是至少一种调理培养基或其提取物在制备用于预防和/或治疗涉及i^^应的皮綠乱的组^t)中的用途，例如炎性或免疫反应鄉。因此，根据本发明的调理培养基或组糊更特别用于鄉鹏薪L所述皮條舌L^自干屑、浮肿和/或丘疹、炎性发红；瘙痒；牛皮癣、^#异鹏、 特应性皮炎；荨麻疹；接触性皮炎；湿疹皮下l^溢性皮炎；痤拖；炎性的色 素敏沉着；免疫性i^^;大疱类免疫性赫(bullous immune diseases);硬 皮病；光化学性弹性组织变性(actinic dastosis);斑禿^^王块微发；白斑病； 全身性红斑狼疫；寻常天疱疫；营养不良性大疱性表皮松解症和自身免疫源性事实上，已知的某些皮絲乱是涉及炎性或免疫反应舰肤反应的，在其 中有炎性的发红、牛皮癣、皮肤特异反应、特应性皮炎、速发型过敏性变态反应、例如荨麻疹、迟鄉过敏性变态反应、例如織虫性皮炎、湿疹；皮下脂溢性皮炎、痤疫、炎性的色素过度沉着、免疫性皮肤病、光化学性的弹性组织变性、斑秃或斑块鄉发；白斑病；系统性红斑鹏；寻常天疱疫；营养不良性大疱性表皮松解症和自身免疫源性^:症。此外，就舰而言，暴驗紫外线中产生严重的炎症反应并且这具前IJ激 剂的效果，其可以导致发红、浮肿和/^皮角化病的产生。这些炎性和/鄉臓 反应与免疫系统中特定参与因素的刺激有关。根据本发明的一个实施方案，根据本发明的调理培养基或组合物用于保护 皮肤细胞免受紫夕卜辐射弓l起的伤害。根据本发明的调理培养基或组合物被有益地用于保护细胞，特别是皿细 胞，使其DNA免受伤害。特别地，组，被用于1) 修复改变的DNA，并因此斷氏了癌变的风险(例如，按照环境相关因素 在皮肤内诱导产生的)。特别的，这，质可以影响哺乳动物中遗传物质修复的 主要机制，核苷切除的修复；2) 在特应性皮炎或接M31敏的情况下抑制胱门蛋白酶(caspases),抑制活 化的T细胞浸润受影响个体的皮肤，所述T细胞浸润诱导临近的角质化细胞的 凋亡。这样，凋亡的角质鄉胞的数目将被M^，因 胞间的粘附力受损(皮 自层松解)和从而形^7夂疱。此外，某些特定局部化合物的用途，在特定的导致出现皮肤反应清况下例如敏感皮肤、受红斑鹏影响的皮肤、高浓度的戶脱化，等等，可以被用于 化妆品M肤学组合物，当然可以用于其他效果。因此，化妆品组，包含，例如，角质层分离齐诉P/繊落活化齐,于防老化，和特另提剥総化齐诉n/劇于细胞再生的活化抓例如a—羟敏特别是乳 酸、羟基乙酸、拧檬酸)，p-羟敏特别是7K杨酸、5-氮-辛itS7K杨酌和类视 黄軟特别是全反式或13—顺视黄酸、视黄酌。不幸的是，如果这些活化剂使 用量太大时，它们会导致皮鹏i微。这些化，的用途，特别舰于具有易刺 激的禾n/舰敏的皮肤和/或易刺激的禾n/舰敏的头皮的患者，因此将鼓顺制。另外，甚至某些被认为在化妆品或皿用组^t/中被认为是惰性的化合物, 例如，防腐剂、表面活性剂、芳香剂、翻喊推进剂，实际上在应用至桷蛋白 材料，和特别是皮肤，包括头皮，具有易刺激的禾n/^l敏的皮肤的个体上，也 可能^ij激性的，所述实际的刺激性依赖于使用的化合物和皮肤的敏感性和使 用者的固有,菌群。能弓胞皮鹏i微的化合物通常4顿较低的剂量。少量这些化合物的4柳可 能被证明与舰其他化合物相比相对没有益处，戶腿其他化合物具有较低活性 但是具有较少的刺激性或根本没有刺激性，和因此大量使用，或与化合物的目 的有关的〗顿，例如在乳齐瞎在博况下保持组合物的稳定性，或在防腐齐瞎在 情况下良好保存组合物。因此，存在发现化^/的需求，所述化合物具有镇静舰，特别是肖舒页防 禾口/或减低包含一个或多个能引起^M赚的化合物的化妆品^肤学组合物的 刺激反应，而且预防和/或治疗与炎性或免;S31敏鄉的^^臓有关的皮條 乱。因此，本发明的目的还是至少一种调理培养基或其提取物用于制备组合物 的用途，其特征在于所述调理培养基或其提取物是用于预防称或^i^含一个或多个能弓胞皮肤刺激的化合物的化妆品^M学组^l的刺激反应。不管是出于化妆或治疗目的，根据本发明的用途特别地是用于治疗易刺激的和/或过敏的,和/^te膜禾n/g皮。本发明的目的还是用于局部施用于皮肤禾o/或粘膜禾n/或头皮的组，，， 生mi:可接受的培养基中包括-一至少一种能引起皿刺激的化妆用或药用化合物，和一至4>~种调理^#基^提取物。至少一种调理培养基或其提取物的使用因而与其他相比特别具有消除由具 有刺激副作用的化合物可能弓l起的皮肤刺激的益处，以及使在化妆品或皮^ffl 组合物中与通常用量相比可能增加所述化^l的用量、意在增加后者的有效性 的益处。因此，可以在包括易刺激的和/皿敏的皮肤禾o/^^膜禾o/或头皮的组合物中4顿能引起^f臓的药抓例如化妆品活性剂(例如角质层分离的种或 脱落药剂)、皮肤活性剂(例如类视黄醇)、某些表面活性剂、防腐剂、芳香 抓翻诉B推进剂、和它们的混合物，剝牛^^f述的组合物中包括至少一种调 理培养基或它的提取物。根据本发明术语"易朿iJ激的禾n/或过敏的皮肤和/或粘膜和/或头皮"是特别意指通常对外来的侵袭以夸大的方式作出反应的赚称鄉膜和/戯皮。与过敏的皿相对，这种皿和/^i^种粘膜和/或这种头皮经历进一步的^^应的发展战呈，这些皮贩应舰红、痒表l^p/離及免疫学或炎性的发病机制。在本文的描述中，除非另作说明，术语"皮肤"是用來意指覆盖人体的， 外层部分，即， 、粘膜和头皮。术语"体表(integument)"指的是指甲、头发和條，例如睫毛。根据本发明在组合物中调理培养基或其提取物的用量将由本领,术人员 调整以便获得预期效果。因此，有效4ffi31常规方法确定，包括体外 和体 内试验，并且特别的，于使用的提取物的l^和选择的配方的类型。通过指定，调理培养基活性物质的浓度相对于组合物的总重量可以在 0.001%至50重量％之间，特别是少于或等于10%，这些量可以在没有任何不 利因素的前提下变化。根据本发明的组合物还包含生理可接受的培养基，特别是一个化妆品或药 学可接受的培养基。更特别的是它们是化妆品或药学的组合物，特别是皮肤学 的组，。对于本发明的目的，术语"化妆品组合物,品"是用来特别意指任何用于 与人体的各种表面部分(表皮、头发和体毛系统、指甲、口唇和外生殖器)、或 牙齿或口腔粘膜接触的物质或制剂，用于专门的或主要的，来清洁它们、来芳香它们、改变它们的外观禾n/繊正鹏p/或^^户他们或使它们维持舰的状态(Cosmetic Guideline(化妆品指]f)76/768/EEC修，)。这些组合物通常具有一 种肖調在人体^J:^A愉快的气嚇卩外观。 ，的，本发明的组合物是被应用到^^占g的。 根据考虑到的〗顿的方法，其可以是招可通常舰的植物制剂的形式。 为了局部施用到皮肤^*占膜，特别地，组合物的形式可以是洗、，血清类型的7K或油溶皿分散体、通过在水相中分散油类(0/W)或^fet亦然(W/0)获得的乳液类型的液体或半液^度的乳剂、或具有水或无水乳膏或^1^， 的具有柔软状态的性质的混悬液或乳剂、或，或微粒、或离子的禾P/或非离子类型的泡状的分散体、或泡沫。它们的形式也可以是用于控审解放的微^纳 ^^旨囊泡或高^f微泡或高分子修补剂和水凝胶。根据一个有益的实齢案，所述组合物是皮肤化妆品组合物，包含根据本 发明的至少一种调理培养基或一种提取物在化妆品或药物可接受的载体中，比 例按重量计为相对于组合物的总重量的至少0.001%, 0.05%到3%。这些组合物按照常用的方法制备。根据本发明的组合物中各种组分的用量是按照本领域的常用量考虑使用 的。其组分和用量雌不会影响调理培养基或它的提取物的活性，即降低所述活性。在化妆品领域，特别地，这些组，组自于脸、用于手、用于脚、用于 大的组织鹏鋼于身体的清洁、保护、治疗鞭理乳膏(例如，日霜、,、 卸妆霜、粉底霜、防晒霜)，粉底液、卸妆乳、护肤乳跡理液、防晒乳、舰 护理洗液、？疑胶或泡沫，例如清洁洗液、人工晒 液、沐浴组合物、包含杀 菌剂的除臭组合物、或须后》 皿液。根据本发明的组合物也可以制备成固体形式，制鄉巴阜或洁肤皂。 组合物还可以包装成气縣腿糊的形式，也包括挤压縱的繊剂。 根据本发明的组合物还可以是头皮护理组合物，特别是洗发剂、头发定型 水、治疗性洗液、定鹏或定型膏、生发洗液、防脱发洗液敏鹏、抗寄生虫 洗发剂、去头屑洗发剂等等。组合物还可以用于口牙用途，例如牙膏。在这种情况下，组合物可以包含 通常用于口腔用组合物的常规辅料和添加剂，特别地，和表面活性剂、增稠剂、 湿润剂、磨光齐,如二氧化硅、各种活性成分例如氟化物、特别是氟化钠、和可选择的甜味剂例如糖,。当组合物是乳剂时，油相的比例按重量i十相对于组，的总重量可以从大约5%到80重1T。变化，和优选按SS计从大约5%到50%。用于乳剂形式的组 合物的油、蜡、乳化齐诉口辅助乳化剂驗自化妆品领域常规j顿的种类。在组 ，中，乳化剂和辅助乳化齐啦錢计相对于组糊总錢以从0.3%到30%的 比例存在，和，按重影十从0.5%到20%。乳剂还可以包含月,。当组，是油性溶 凝胶时，油相可以以^&合物总重量90%的比例 存在。以已知的方式，化妆品组合物还可以包含化妆品领域常用的辅料，例如亲 水的或亲脂性的胶凝剂、亲水的或亲脂性的添加剂、防腐剂、抗氧化剂、翻廿、 芳香剂、填料、遮蔽剂、气味吸收剂和染料。这些各种辅料的用量是化妆品领 域的常用量，和，例如，范围是歸合物总錢的大约0.01%到10%。繊于 它们的自然特性，这些辅料可以被被弓l入油相、引入7K相和/或引入脂质小球中。作为可以被用于本发明的油或蜡,可提及到矿物油(液体石蜡)、植物油(牛 油树脂的液体部份、向日葵油)、鄉油(缝化角鲨烯)、合成油(普赛林)、 硅油，(环甲硅油)和氟代油(^m聚醚)、 、巴西^f司蜡或石蜡。月旨肪 醇和脂肪酸(硬脂酸)也可以被添加到这些油中。作为可以用于本发明的乳化 剂，舰到的乳化剂可以是，例如，^!旨酸甘油酯、聚山梨酸酯60和由Gattefosse 公司以Tefose 63出售的PEG - 6/PEG - 32/5划旨酸乙二醇酯的混合物。作为可用于本发明的^fij，皿到低级醇，特别是乙醇和异丙醇、和丙二醇。作为可用于本发明的亲7k胶凝剂，il^微基乙烯聚，(Caibomer⑧)、 丙烯酸共聚物例如丙烯翻E/丙烯^S酯共聚物、聚丙烯酰胺、多糖例如羟丙 纤维素、天然的胶质和粘土，和作为斜旨性的胶凝剂，舰到改良粘土例如有 机皂土、金属脂肪離例如硬脂麟、船JC性1化硅、乙基纤维素和聚乙烯。育辦弓l起^^U激的化妆品或药学成分特别的，本发明的非治疗用途辦别用于预防和/或陶氏化妆品U^学组 合物的束IJ激反应，所述化妆品或皮肤学组合物包含一个或多个能弓胞皮鹏赚 的化糊。根据本发明的组合物包括至少一种能引起皮肤刺激的化妆品或药学化合物。在这些化^l中，可特别提及的是化妆品化^/或活性剂、皮自化， 或活性剂、表面活性剂，特别是离子表面活性剂、防腐抓清洁剂、芳香剂，和特别是芳香s享溶液、、翻卿概剂、和它们的混合物。更特别的，作为皮肤学或化妆品活性剂，可提及某些也可以作为剥落剂的 脱落剂。在这些特别用于剥落的药剂中，可^^矿物质来源的、天然的或合^le源 的研磨的/片 落微粒。更特另,可皿浮石微粒、二氧化硅微粒、聚乙烯小 球、尼龙小辦n果仁粉末。在这些脱落剂中，下列可能弓胞i^l微饱和的一元羧酸(乙酸)和不 饱和的一元羧酸、饱和的和不饱和的二元羧酸、饱和的和不饱和的三元羧酸； —元羧酸的a-羟酸和卩一羟酸；二元羧酸的a—羟酸和p-羟酸；三元羧酸的a—羟酸和p-羟酸，酮酸，多元羧酸、多羟基一元羧酸、多羟基二元羧酸和多羟基三羧酸的a—酮酸或卩一酮酸。在a—羟酸或其酯中，特别舰的有羟基乙酸、二元酸，例如十八 二酸或由Uniqema公司出售的ArlatonediocDCA、拧檬酸、乳酸、酒石酸、马 来酸或杏仁酸、和它们的酯，例如二赚CVd3)酒石酸酯或CosmacolETI、和 支链C12.13三乙醇拧檬酸酯或由Sasol公司出售的Cosmacol ECI。在卩一羟酸中，可皿水杨酸和其衍生物(包括5—正辛S5tS7K杨酸)。在a—酮酸中，可,抗坏血酸和其衍生物。在其他脱落剂中，可提及丙酮酸、葡糖酸、葡糖醛酸、草酸、丙二酸、 丁二酸、乙酸、鹏酸、肉桂酸、壬二酸；苯酚；间苯二酚、尿素和其衍生物, 羟乙基尿素或源自天然淀粉的Hydrovance②；寡海藻糖；^酸和其衍生物；抗 坏血酸和其衍生物、三氯乙酸；槐和白藜戸醇的提取物。娜落剂中，肯旨作用于涉及脱落鄉化丰M化的酶的那些也可能能够弓胞 鹏臘。在这些中，特别可舰无机盐螯合齐,如EDTA; N-酰吝N，N',N'-乙烯二 胺三乙酸；氨基磺酸化合物，且特别是(N-2-羟乙基-哌嗪-N-2-乙焼)磺酸 (HEPES); 2-氧噻1^^-4-羧敏丙环司坦)的衍生物甘氨^M的a—MS酸 衍生物(如EP0 852 949所述的，以及由BASF以商品名TrilonM^出售的甲基甘氨舰醋,)；蜂密；和糖衍生物例如0-辛^6-D-麦芽糖、0-亚油基6-D-葡萄糖和N-乙,糖胺。!^见黄醇也是能弓胞皮^Ij激的化合物。其可被舰的实例包括视黄醇和 其酯、视黄醛、视黄酸和其衍生物例如在文献FR-A-2 570377,EP-A-199636， EP-A-325540和EP-A-402072所述的，和阿达帕林。盐和衍生物，例如顺式或反式，，化合物的外消旋混^l和右旋的^旋的形式也被认为是能弓胞皮ray激的化合物。下面也舰了能引起皮鹏IJ激的其他舰学的或化妆品活性剂 一尿素和其衍生物，例如羟乙基脲或来自于^淀粉的Hydrovance , -某些维生素例如维生素D和其衍生物例如维生素D3或维生素D2、铐三 醇、卡泊三醇、他卡西醇、24^25-二羟基维生素D3、 l-羟基维生素D2和l，24-二羟基维生素 D2;维生素B9和其衍生物， 一过氧化物例如过氧化苯甲酰^X氧水， —用于抗脱发的药剂，例如米诺地尔和其衍生物例如aminexil, —毛发染料和毛发着色抓例如氨基苯酚和其衍生物例如对间苯二胺(P" PDA)、 N-苯基P"PDA、 2，5-甲苯二胺硫離、间一间苯二腐m - PDA)、 3，4-甲苯二胺和邻一 间苯二胺(o - PDA)，一防汗剂，例如铝盐例如铝羟基氯化物， 一除臭剂，一脱毛和/或永久的烫发活性剂例如巯基乙酸酯或氨水，—巯基乙酸酯和其盐，一苯氧乙醇，一l，2-戊二醇，一芳香醇溶液(芳香剂、eauxdetoilette、须后7K或除臭剂)， —蒽晰蒽三斷—结合蒽醌(例如，文献EP-A-319028中描述的)， —锂盐梦一脱色齐0(例如氢醌、高浓度维生素C、曲酸)， 一某些具有热，的MI巴活性剂，-烟鹏和其衍生物，一辣椒素，一抗虱活性齐O(除虫菊酯)，一抗增殖齐,如5-,嘧徒或氨甲蝶呤，一抗病毒剂，-抗寄生虫药，一抗真菌剂，一止痒剂，一抗皮脂溢剂，-色素原药剂例如补骨"諫和methylangeciline，和一它们的混合物。作为防腐剂，可皿苯氧乙醇、洗必泰和洁尔灭。作为表面活性剂，可提及阴离子的、阳离子的和两性表面活性剂，更特别 是阴离子表面活性剂例如垸基硫酸盐和烷基M酸盐，例如月桂 酸盐和月 桂基鹏離，禾口特别的它们的钠盐。根据本发明雌的实施方案，育辦引起^WU激的化，选自类视黄醇、a 一羟酸、卩一羟酸、饱和的和不饱和的二元羧酸例如十八烯二酸或由Uniqema 公司出售的AriatoneDIOCDCA,阴离子的、阳离子的或两,面活性剂，5 — 正辛酰基水杨酸、防汗活性剂例如铝盐、(N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷)磺酸 (HEPES)和肉桂酸。肖巨弓胞皮鹏U激的化合物可以在根据本发明的组糊中以足够弓胞^^1J 激反应的数量存在。，IJ来说，相对于组合物的总重量，按重量计其含量可以 在从0.0001%到70%,雌按Mfi计从0.01%到50%、和更好是按Sfi计从0.1% 到30%。在根据本发明的皮肤化妆品组合物中，调理培养SJI取物可以i^类视黄 醇或颇甾类、或与自由麟除剂、a-羟酸或(x-酮酸或它们的衍生物、或离子 鹏阻滞剂相结合。根据本发明的皿化妆品组，还可以包含惰性的或乃至药效 性 的添加剂或这些添加齐啲组合，且特别是润湿剂、脱色剂例如氢醌、壬二酸、 咖啡酸或曲酸；软化剂润湿剂例如甘油、PEG-400舰氣抗^^剂、舰 腊溢剂或抗痤拖剂，例如S-羧甲基半胱氨酸、S-苯甲S^乙胺、它们的盐和它们的衍生物，或苯甲,氧化物；抗生素例如红霉素和其酯、新霉素、氯洁 霉素和其酯、四环素；抗真菌剂例如酮康唑或4,5 -聚亚甲吝3-异噻唑，毛 发再生的药剂，例如米诺地尔(2，4 -二^6 -哌啶基嘧啶-3 -氧化物)和其衍生 物、二氮嗪(7-氯-3-甲基-1>2，4-苯丙噻二嗪1,1-1化物)和苯妥英(5，4-二 苯 ^2,4-二酮)；非甾^^炎剂、类胡萝卜素，和特别的卩一胡萝卜氣 牛皮癣治疗齐,如蒽林和其衍生物,和最后的二十碳-5,8,11,14 -四烯酸和二十碳 -5,8,11-—c酸、其酯和繊。 另外的活性剂根据本发明使用的调理培养基或其提取物，还可以与按重量计至少 0.00001%到95%的抗炎剂、其他镇静剂或它们的混合物结合。 作为"抗炎齐if的实施例，可提及一炎性细胞因子的^:剂；一甾体抗炎剂(氢化可的松、倍flfe^松、itt^^等等)；-非甾体类抗炎剂例如阿司匹林；和它们的混合物。优选的，抗炎剂在根据本发明的组合物中以按重量计相对于组，总重量 的大约在0.00001%和10%之间的浓度存在。更,的，组合物中的抗炎化， 可以在按重Si十相对于组，总重量的0.0005%和2%之间。特别的，其他镇静剂可以有益的选自尿囊素，p-甘草次酸，包含相同物质 的提取物，例如，甘草Glycyirhizaglabra (甘草)的提取物，和包含相同物质的 复，，例如尿囊素/甘草次酸的复糊；冻干或非冻千的 鄉生物，其提取物 和其复合抓花和植物的水和提取物甘菊zK、酸柚tK、玫瑰ZK、桦提取物； 没药醇；精油，例如芫荽油；藻类，特别是^iT鄉的(例如红^l菊，例如 褐藻尸a^w pavo"/ca的提取物，例如Alban Muller公司出售的HPS 3 Padina Pavonica;醋己氨酸和 酸4-反式-錢甲新己烷羧酸)；熊果酸和包含它的 提取物，例如鹏香叶提取物；包含海藻糖的多糖，例如由Solabia公司出售的 Fucogel 1000;柳质，且特别是水的混合物例女n"鹏沐浴盐(Dead Sea bath salts) "; ES酸，例如来自S邻pic的SepicalmS和VG，和二^^|&例如葡萄糖根据本发明的组合物，特别是化妆品M肤学组合吻，特别的可以M31包括第一阶段的方法制备，在所述的第一阶段中制备调理培养基，可选m制备 所述调理培养基的提取物。这种方法至^^括下述步骤a) 在第一营养培养基中的载体上培养来源于肠道上皮的细胞一段时间，培 养的时间足以获得它们的分化；b) 在MM有白细胞的腔室中制备第二细胞培养基；c) 回收步骤a)结束时获得的在载体(特别是多孔载体)上的分化细胞培养物，并转移至步骤b)结束时获得的第二培养基；d) 把在第二培养基中来源于肠道上皮的所述的分化细胞的培养物与至少包括益生菌的微生物培自相接触足够的时间，以使细胞之间产生CT作用，所述益生菌可以是，例如，乳杆菌属种类的(Lactobacillus species);e) 除去细胞培养物并回收第二细胞培养基，去除白细胞，以获得调理培养基；f) 将调理培养基，或其提取物，合并到化妆品^肤学组合物中。 雌的，步骤a)中的载体是多孔载体。术语"多孔载体"OT赚别意指骨架上包括小孔的插入单元。例如，孔径大小可以瓶0.001到10Mm，雌大于或等于0.3Mm。作为非 限定性的例子，因lttg用于本发明的多孑L插入单元的骨架可以包含选择性地包括氨基多糖禾n/或成纤维细胞的多孔的胶原基质，透明质酸和/，原禾q/,连蛋 白禾n/或纤维蛋白 鹏或薄膜、^t透性的硝化纤维、尼龙、織隆、聚碳酸酯、聚乙烯、聚丙烯或，苯二甲酸乙二醇iKPET)薄膜、半渗透性的Anopore⑧无机 膜、S昔酸纤维薄膜、Biopore - CM^半纖、^f透性的聚酯薄膜和聚羟基乙酸 薄膜。在步骤a)中的撤虫时间可以由本领域技术人员调整，但通常在几小时和 几天之间，特别是在1天和35天之间，例如从18到22天，雌大约21天。 细胞初始被以单层的形^S，因而在步骤a)结束时，得到一个具有若干层分 化细胞的三维体系。有益的，培养纖被有规律地更新，例如每2天，以j魏 源于肠道上皮的细胞，例如Caco2细胞，获得最佳的分化。在步骤b)中，白细胞形成了细胞的毪状物；即腔室的表面实质上均匀的覆 盖了白细胞；后者可以是单层或多层的形式。特别的，这些白细胞是收集自至少经过一个分离步骤(特别是离心分离) 然后至少部分的去除单核细胞之后的血液样品。随后它们被悬浮在与它们的生存能力相鹏的营养培养基中，特别是RPMI i歸基。通常，培养基可以由本领域技术人员根据他们的常识逃择，特别是;!mi 培养基中选择。鄉俠说，适合用于本发明的腔室，可舰培养平板的孔，例如通常用于 细胞培养的6-、 12-、 24-、 48-孔或96-孔细胞培养板。有益的，在步骤c)中的转移之前，分化细胞培#^将要使用适合于白细胞 生存能力的i歸繊。分化细胞和益生菌之间的繊，在白细胞参与的情况下， 将要迸行允许^:^:作用的时间，即在不同细胞类型之间的化学或生物学的 魏。对于本发明，措辞"细胞的化学交换"是用^^由^^f樣的所有信号， 所述分子从细胞中释放并會鄉影响远处的另一个细胞的活性，所述的另一个细 胞可以属于或不属于相同的细胞类型。非限定性的，所述M可以，例如，是 肽、蛋白质、月旨质、糖、甾类麟或儿^^胺。其可以舰分泌的形辦放。应该理解，这种交互作用可以在没有直接物理性接触的不同细胞类型之间 发生；特别的，通过安排第一、来源于肠道上皮的细胞和，第二可以是或不 是放置在单独腔室中的白细胞的细胞毪状物，依靠将它们培养在其中的培养基 开始彼此交换，没有肠道细胞培养物的细胞會辦与其他细胞毪状物的细M接 撤虫，例如在细胞体之间顿鄉胞延伸的方法繊虫。有益的，益生菌微生物被皿顶端添加到肠it^胞培^tf中。适合粒这种交互作用的时段可以是几个小时到几天，通常至少6小时， tt^M少10,特别的大于或等于16小时，但可以无限扩展。益生菌被，例如， 与Mil^胞在包括白细胞的腔室中接触6到36小时。随后，M^f有细胞中分离回收出培养基，例如，在基翩'冰平釆集获得 这种培养基已经穀俩种细胞鄉和它们的相互关系的影响。在作为成分被弓l入组合物，特别是根据本发明的化妆品或药学皿肤化妆 品组合物之前，其随后可以经受本领域S^人员本身公知的浓缩、提取和/或分 馏步骤。本发明将在下述的实施例中更详细的说明。实施例l:制备调理織基接近于人MiUl皮细胞的细胞，(^ )2(顿道60和65之间)以2>105细 鹏ml的浓度接种在25mm培自入单元中(具有0.4Mm的核孔,Becton Dickinson, Basle, Switzerland)-这种插入单元tt^a在培养皿(Nunc)中，并在37。C/腦 C02的DMEM (包含谷氨酰胺和高浓度葡萄糖(Amime4 Allschwill， Switzerland))中培养18到22天，所述DMEM补充了非必需縫敏Gibco, BRL)、 10 mg/ml庆大霉素(G氾CO BRL)和0.1%的青霉素/链霉素(10 000 IU/ml 和10 00(Vg/ml) (GIBCO)。每2天更换一次培养基直到细胞完全分化(21天)。 当Caco2细胞融合成一个单层时，舰多孔(multicell) - ERS电极(伏^i十/ E^i十)不断的测M^上皮的电阻大小。财卜，通过淋巴细胞的离心，从无关的正常供血者的周围血液中分离来自 于正常志愿者的血白细胞。细胞悬液(107细胞/ml)^g在陪替氏培养皿中， 在37'C培养1小时30她单核细胞粘附。因此，包含在非粘附细鹏中的白细 胞，主要是T淋巴细胞，用它们的在有绵羊红细胞雜的情况下形微瑰娜 的性质被纯化。随后在，NH4Cl(8.7mg/D的情况下ffi31渗it!4冲击去除绵 羊红细胞。最终，白细胞悬液的存活力大于95%。随后这些白细胞被稀释在包含20%去补体人AB血清(在56'C去补体30分 钟，Sigma^ St Louis, Missouri, USA)的RPMI1640中。随后可以制备Caco2/白细胞共培辨莫型。为此，Caco2细胞i^i入单元 在RPMI 1640 i歸基中洗两次，并转移到一^含RPMI ^#基的6—孑L培养 平板中，其中孔已经提#凃雜状物的 纯化的白细胞(2xl06细鹏ml)。因 此，白细胞在基廳和Caco2细胞在顶端层。根据如下所述的条件对具有益生菌的Caco2/白细胞(外周血白细胞)共培 养物进行刺激如此，lxl()7dU/ml的益生菌m顶端加入。與虫的歸基作为阴舰照。 在共培养物刺激6到36小时(37°C,10%CO2)后，从基鄉ij收集调理:l:歸基。 Lactobacillus paracasei，特别是在CNCM以编号No. CNCMI-2116保藏的菌株，被特别用作益生菌。实施例2:肠道细胞系Caco2以2xl05细鹏L的比率在10.5 mm的插入单元(BectonDickinson)上培养。随后这些插入单元M[g在12—孔板(Nunc)中培养。随 后细胞被在37"/10% C02的DMEM中培养21天，所述DMEM补充有10% FCS 和0.1%青霉素/||^素(10 000 IU/ml， Gibco BRL)。鹏离心穿过Ficoll - Hypaque 1077柱(Pharmacia);!)MaL^白细鹏纯化得 到人周围血液单核细胞(白细卿，随后被悬》雜补充有人AB血清(Gibco BRL) 的魏的RPMI培养基中。随后白细胞(2xl()6细ifi/ml) 加封' >孑L" 培养物的基廳中，此时后者显示出Caco2细胞融合层，其已经提前{顿它们 的培养^feil。如此建立的共培养物通过在单层上皮细胞(Caco2)的顶端表面添加1 x 107 cfo/ml的益生菌^flj激。随后系统在37'C/5XC02培养16小时。在培养4小时 之后向培养基中添加150^ig/ml庆大霉素。在培养结束时(16h)，在基底层中的培养基被移出进m，。下表说明由使用lxl07cfii/ml副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)和长 双歧杆菌(B迅dobacterium longum)刺激16h获得的调理培养基的细胞因子分布。IL10pg/ml IFNYPg^ilB. longum 170 110L. paracasei 80 40B. longum +L. paracasei 110 40这些结果显示益生菌优先地诱导常规细胞因子IL-10的产生而不是前炎症细胞因子IFN"T。SMfllL在生存状态下人皿模型中抑制炎症的评价根据实施例1的方案，i顿lxio7 db/ml的副干酪学L杆菌(Lactobacillus paracasei)制备得到调理,基。4柳维持在生存状态的用神经介质(P物质、SP)刺激的人^M莫型。这种 神经介质实际上一个负责炎性反应的因子。伴随SP的血管，(浮肿、血管舒 张、在内皮细M上ELAM-1的鋭)，在测试的剝牛下，SP还诱导释放前炎 症介质(lLla， IL6， TNFa)的生化MiS以及肥;^M^t(LembeckF., 1983; MatsudaH.等,1989;AVeidnerC等，2000)。if^在组织学(评价浮肿、改变毛细血管直径以M^粒的肥大细胞的数目)和生物化学范围内(分析TNF(x)进行。来自不同供体者的皮肤片段l^置在插入单元中，所i^f入单元自己被放 置在培养 LL悬浮液中。培养基(Dulbecco的最小基本培养基，DMEM)(抗生 氣FCS)波添加至吼的底部，在两个室之间经由多 LM (0.45Mm)缓,驗 生转移。在开始方^t前必须再平衡五个小时。在5小时的再平衡之后，用L. paracasd (或不用)刺激的调理培养基以浓 度30% 1加到DMEM培养靴为予舰理。随后^t段在培养箱中，在潮 湿空气、37'C和存在5%C02的调理下保持器官培养24小时。在第一天，舰向培养基中添力口 IOmM的P物质来制备实验炎症模型。对 于所有的情况，更新营养i^S^进一步培养24小时。因此，在下列的8种情况之间进行比较研究-SP刺'激莫型与对照舰比较-具有DMEM培养基的对照皮肤(基本情况舰非刺激，非处理)， -在DMEM培养基中{顿5^M的P物质刺激的皮肤， 乡W"对照(情况A):—在30%营养培养基(RPMI)的DMEM培养基中培养的皮肤，—使用P物质刺激的和在30。/。营养培养基(RPMI)的DMEM培养基中培养的皮肤，阴性对照(情况B):一用来源于Caco2/PBMC共培，的、未《OT乳酸菌(lactic ferments)剌 激的30%营养培养基(RPMI)培养的皮肤，—P物质刺激和^ffi没有副干酪乳杆菌(Z^cto6Go7/us戸raca^)刺激 的调理培养基培养的皮肤，附性对照(情况C):一用来源于Caco2/PBMC共培养物的、^ffi副干酪乳杆菌O^otoc///ws 戶ram^/)朿臓的30%营养培养基(RPMI)培养的舰，一i顿P物质刺激和4柳副干酪乳杆菌(Lpawc^/朿,)的调理培养基 培养的皮肤。l-浮肿和糊血管直径改变的组织学i判介^片段被固定在布安氏液中，并石蜡包埋。在^ffihemalun-eosin染色之后，在J^^i刊介2个指标毛细血管口径和浮肿。 结果如下a) 扩张毛细血管的整体百分率的评价 SP朿IJ謝難与对照舰比较应用SP诱导的血管舒张与对照皮肤比较是统计学上是有显著意义的 84.5%对58.3% (p< 0.05)。 舰对照(情况A).'如实验模型，在应用P物质之后观察到了统计上有显著意义的毛细血管扩 张78.3%对61.5%(口<0.05)。阴'IW照(情况B):结果类似于瞎况A获得的结果，ffi用P物质之后观察到统计上有显著意 义的毛细血管扩张，证明未刺激的调理培养基缺乏抗炎的效果82.2%对56.7% (p<0.05)。阳'舰照(情况C):在瞎况C和C+SP之间扩张毛细血管的百分率没有区别(60.9%对54.9%), 证明使用副干酪乳杆菌(Lacto&c///uy/wmcay^剌激的调理，基有抗炎的效 果。在瞎况C+SP和其他瞎肚间存在统计±^著性的差彌认了这个结果 对照+ SP， A+ SP和B + SP (p < 0.05 )。b) 测量毛细血管的平均表面积有关测量毛细血管平均表面积的结果类似于分析扩张毛细血管的整体百分 得的结果。SP刺嫩莫型与对照皿比较应用SP诱导的血管舒张与对照组皮肤比^Ji统计学上显著的164.5Mm2 对69Mm2(p〈0.05)。,对照(情况A): 如实验模型，我们观察到舰用P物质之后出现了统计上有显著意义的毛细血管扩张127.8Mm2对57Mm2(p〈0.05)。 阴tM照(情况B):结果类似于瞎况A获得的结果，我们观察到舰用P物质之后出现了统计上有显著意义的毛细血管扩张，证明未刺激的调理培养基缺乏抗炎的效果154Mm2对67nm2 (p<0.05)。附性对照(情况C):与情况c相比，情况C + SP的扩张的毛细血管的表面积呈显著的下降 (59.2Min2对87Mm2),证明使用副干酪乳杆菌(L/7araca敏J刺激的调理培养基 有抗炎的效^(p < 0.05)。在瞎况C+SP和其他瞎况之间存在统计上显著性的差 彌证了这个结果对照+SP、 A+SP禾口B + SP (p<0.05)。舰浮肿的imSP刺激魏与对照舰比较应用SP诱导的浮肿与对照，比^i统计学上有显著意义的计分1.8对 0.7 (p< 0.05)。舰对照(情况A):如实验模型，在应用P物质之后观察到了统计上有显著'瞎异的浮肿计分1.9对l,3(p〈0.05)。阴',照(情况B):结果类似于瞎况A获得的结果，鹏用P物质之后记录到浮肿，证明未刺 激的调理培养基缺乏抗炎的效果计分1.9对0.8 (p<0.05)。 阳',照(情况C):与情况C相比，情况C + SP在浮肿方面没有增加(0.9对l)，证明使用副 干酪乳杆菌a./wracmeU刺激的调理培养SW抗炎的效果。在情况C+SP和 其他瞎况之间存在统计J^著性的差彌认了这个结果:对照+ SP、 A+ SP和B + SP (p<0.05)。2—肥大细胞fl,粒的组织学im3!51使用甲苯胺蓝染色，存在于真皮的肥大细胞显示蓝紫色。组织学上， 月巴大细胞显示出更多或更少的强蓝紫色和颗丰树应于在它们的细胞质中存在更 多自少的物质，戶，物质是嗜碱的且变色的颗粒特别包含细按。在保持在生靴态的皮肤SP刺、鹏型中，在高鹏粒化的肥大细胞(计分 3)的百分率中观察到统计i:M著性的下降32.1%对根据对照舰的53%,并观 察到计分1的细胞百分率的增加26.5%对9.5%。这样实P示上获得了 P物质诱 导的 粒。,对照(情况A):如实验模型，观察到具有计分3的肥大细胞百分率的下降:14.8%对41.7%， 和计分l的增加36.9%对12.2% (p<0.05)。阴性对照(情况B):结果类似于瞎况A获得的结果，计分3柳巴大细胞的百分率下降17.5% 对38.5%，和计分1的细胞百分率增加33.3%对20.4% (p < 0.05)。这个结果 可以得出结论是未刺激的调理培养^F肖树抗P物质诱导的M粒。阳舰照(情况C)-在瞎况C和瞎况C+SP之间的计分3的肥大细胞百分率上没有获得显著性 的差异(计分46.9%对37.2%)。因此，缺乏差异证明使用副干酪乳杆菌 仏戸rao^"刺激的调理培养基对于P物质诱导的M粒有适度的保护效果。 这个结果部分是因为与其他瞎况比较计分1的肥大细胞百分率增加但只是较低 水平的增加对照+SP、 A+SP和B + SP (p<0.05)。然而，因为增加很少， 在瞎况C+SP和其他像脱间雜统计上显著的差异对照+ SP、 A+ SP和B + SP (p<0.05)。3—前炎症细胞因子分析研究了细胞因子分泌的调节例如TNF力。这种细胞因子鹏免疫测定方劍顿錢光度法读取浓度来分析(pg^ml) (Chemicon International Inc.分^i式剂盒)。因为皿片段具有相同的表面积(每 个片ra量证实)，i顿培^上清、^iS行分析。TNF分析的结果如下相应于绝对对照的对照皿和情况A，与对照^^相比SP的应用诱导了 TNF数量的统计上显著的的增加分别，计分31.5对10.7和计分28.6对8.32 pg/ml (p<0.05)。情况C + SP统计上地不同于调舰照^" SP (p = 0.017),际副干酪乳 杆菌(丄./wrao7犯U调理的培养，少了 TNF"Ct的产生(量10.9对16.3 pg/ml)。结论在维持在生^R态的这个A^肤模型中，使用副干酪乳杆菌(Z^araca附') (C)刺激的调理培养基的抗炎M被证实,与情况A+ SP (RPM :t歸基)和B + SP (未刺 理培养基)相比，由P物质诱导的血管舒张、浮肿、月巴大细胞M粒 和TNF的释放有客观的和统计学上显著性的下降。实jf^例4:在生存状态下的A^肤模型中抑制炎症的im根据实施例1的方案，使用lxio7 cfii/ml的副干酪乳杆菌(Lactobac迅us paracaseO或"^歧杆菌(B迅dobacteriumlongum)制备得到调理培养基。使用维持在生存状态的用神经介质(P物质、SP)刺激的人^^模型。这 种神经介质实际上Ji^炎性反应和血管效应(浮肿、血管舒张、在内皮细胞壁 上ELAM-1的,)负责的因子。评价在组织学范围内进行(浮肿、毛细血管 直径的改变的评价)。来自不同供体者的舰片段，微置在插入单元中，所繊入单元自己被放 置在培养 Lt悬浮液中。培养基(Dulbecco最小的基本培养蜀(DMEM)(抗生 素，FCS)被添加到孔的底部，经由多子頃0.45Mm)在两个室之间缓'斷广散来产 生Sito在开始方^t前必须再平衡五个小时。在5小时的再平衡之后，用副干酪乳杆菌CLpamco^O柳或^歧杆菌 (及/o"gwm,(或不用)刺激的调理i歸基以30%浓度|^^加到DMEM培养基 作为预处理。随后皿片段在培养箱中，在潮湿空气、37'C和存在5。/。CQ2的条 件下保持器官培养24小时。在第一天，Mil添力卩10nM P物质到培养基中制备 炎症模型。对于所 有的情况，更新营养培养 15进一步培养24小时。因此，在下列的8种瞎况之间进行比较研究-SP刺激寞型与对照舰比较—具有DMEM培养基的对照舰(基本情况赚非刺激，非处理)， —在DMEM培养基中^ffi 5mM p物质刺激的皿， 绝对对照(情况l):一在30%RPMI营养培养基的DMEM培养基中培养的皿，—{顿P物质刺激的在30%营养培养基(RPMI)的DMEM培养基中培阴tW照(情况2):一用来源于Caco2/PBMC共培养物的、未^ffl乳酸菌(lactic ferments)刺 激的30%营养培养基(RPM) i歸的舰。—P物质刺激和^ 没有益生菌刺激的调理培养^#的皿，一用来源于Caco2/PBMC共i歸物的、〗柳副干酪乳杆菌Oacto6"a7/wy ) +微歧杆菌(及,tom'鄉/o",J刺激的30o/o营养i^基;^的舰一4顿P物质刺激和4顿副干酪乳杆菌(丄.pamcaseU+顿歧杆菌(及 /o"gw^刺激的调理培养掛音养的皮肤。 情况4:-用来源于Caco2/PBMC共培养物的、使用副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)刺激的30%营养培养基培养的皮肤，一使用P物质刺激和使用副干酪乳杆菌(丄.paraco9e/;刺激的调理培养基 培养的皮肤。情况5:一用来源于Caco2/PBMC共培养物的、^ffiM歧杆菌(Sj^oZwctew'ww /o"gw/TO朿l微的30%营养培养驗养的舰，H顿P物质刺激和i顿顿歧杆菌(A/o^w加J刺激的调理培养基i歸 的舰。浮肿和，血管直径e^的^R^imi^H"段被固定在布安氏液中，并用石蜡包埋。在^fflhemalun-eosin染 色之后，在i^M评价2个指标毛细血管口径和浮肿。 结果如下a)扩张毛细血管的整体百分率的评价 舰对照(情况l):如实验模型，在应用p物质之后观察到了统计学上有显著意义的毛细血管扩张86.6%对63.8%(p<0.05)。阴'舰照(情况2):结果类似于瞎况1获得的结果，在应用p物质之后观察到统计学上有显著意义的毛细血管扩张,证明未刺激的调理培养基缺乏抗炎的鄉:86.1%对75.3% (p<0.05)。 情况3:在情况3和3+SP之间扩张毛细血管的百分率没有改变(72.4%对72.4%)， 证明4顿副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei ) +^歧杆菌(B,longum)刺激的调理培养基具有抗炎的效果。在情况3+SP和其他情 议间雜统计学上 显著'瞎异确认了这个结果对照+SP、 l+SP和2 + SP (p<0.05)。 情况4:在瞎况4和4+SP之间扩张毛细血管的百分率没有改变(73.2%对71.6%)， 证明使用副干酪乳杆菌(Z^cto6"c//^/wracoseU刺激的调理培养基有抗炎的效 果。在情况4+SP和其他斷^间雜统计学_ 著'瞎糊认了这个结果 对照+SP,l + SP禾卩2 + SP (p<0.05)。情况5:在瞎况5和5+SP之间扩张毛细血管的百分率没有改变(75.6%对66.9%)， 证明使用长双歧杆菌(B.kmgum)刺激的调理培养基有抗炎的效果。在情况5 +5 和其他瞎况之间雜统计学±^著性差彌认了这个结果对照+SP、 1 + SP禾口2 + SP (p<0.05)。b)测量毛细血管的平均表面积有关测量毛细血管平均表面积的结果类似于分析扩张毛细血管的整体百分 率获得的结果。舰对照(情况l):如实验模型，在应用P物质之后观察的统计学上有显著意义的毛细血管扩 张172.6nm2对95.36nm2 (p<0.05)。阴舰照(情况2):结果类似于瞎况1得到的结果，在应用p物质之后观察到统计学上有显著意义的毛细血管扩张，证明未刺激的调理培养基缺乏抗炎的效果163.8拜2对 110.3拜2 (p<0.05)。 情况3:情况3 + SP与情况3相比扩张毛细血管的表面积有显著的下降(121.9nrn2 对102脾2)，证明使用副干酪乳杆菌a./wracose/ ) +长双歧杆菌(及/o"gwwJ 刺激的调理i歸基有抗炎^(p < 0.05)。在情况3+SP和其他情况之间存在统 计学JiM著性的差彌认了这个结果1 + SP和2 + SP (p < 0.05 )。情况4:情况3 + SP与瞎况4相比扩张毛细血管的表面积显著的下降(112.3,2对 117.4Mm2)，证明使用副干酪乳杆菌(L.paracasei )剌激的调理培养g抗炎效 < 0.05)。在情况4+SP和其他情况之间，统计上显著的差异确证了这个 结果l + SP禾口2 + SP (p<0.05)。 情况5:情况5 + SP与情况5相比扩张毛细血管的表面积呈显著的下降(110.4Mm2 对105.7脾2)，证明使用，歧杆菌(丑/朋gw附J刺激的调理培养基有抗炎效 m(p<0.05)。在瞎况5+SP和其他瞎况之间雜统计学上显著性的差异确认了 i^个结果l + SP禾口2 + SP (p<0.05)。舰浮肿的微舰对照(情况l):如实验模型，在应用P物质之后观察到了统计上显著的浮肿计分1.7对1.05(p<0.05)。阴'tW照(情况2):结果类似于瞎况1获得的结果，在应用P物质之后记录到浮肿，证明未刺 激的调理培养基缺乏抗炎的效果计分1.4对1.3 (p<0.05)。情况3:与情况3相比，情况3 + SP在浮肿方面没有增加(l,23对1.17),证明使用 副干酪乳杆菌a.paracmeU +做歧杆菌(A /o"gw/wJ刺激的调理培养基有 抗炎的效果。在情况3+SP和其他情况之间^统计学上的显著，异确认了 这个结果l + SP禾口2 + SP (p<0.05)。情况4:情况4 + SP与情况4相比在浮肿方面没有增加(1.37对1.38)，证明i^l副 干酪乳杆菌(丄.戸mcmW刺激的调理培养基有抗炎的效果。在瞎况3+SP和其 他膚 脱间雜统计学上显著性的差异确认了这个结果1 + SP和2 + SP (p < 0.05)。情况5:情况5 + SP与情况5相比在浮肿方面没有增加(1.4对1.06),证明l鲷长 双歧杆菌(B.longum)朿U激的调理i錄基有抗炎的效果。在瞎况3+SP和其他 情况之间存在统计学上显著性的差异确认了这个结果1 + SP和2 + SP (p < 0.05)。娜例S:组，用于^^S^日晒的组^tf刺激的调理培养基* 2.5%防腐剂 1.35%機, 0.035%PEG-40 1.25%季戊四醉四辛酸酯 4%甘油 7% 去水山梨糖醇三硬脂酸酯 0.3% 杏核油 2% 鲸蜡醇 0.7% 丙二醇 2%三乙醇胺 0.4%环己硅氧烷 2%卡鹏 0.75%维生素E 1%二氧化硅 2%维生素C配糖体 0.1%聚己酸内醞P—胡萝卜素 5%水适量至 100%*根据实施例1获得包鄉光剂的组糊刺激的调理培养基* * 3.5% 鲸蜡凝更脂SS享和氧乙烯化的鲸蜡對划旨基醇的混^1(33 EO) 80/20 7.0%单硬脂酸甘油酯和二硬脂TO油酯的混』 2.0%鵷醇 1.5%聚二甲硅皿 1.5%液体凡士林 15.0%丁基甲氧基Z^甲麟甲烷 3.0%欧 雷(octociylene〉 7.0%甘油 20.0%去离子水 100%* *根据实施例1获得，但具有副干酪乳杆菌a.pom咖eU和顿歧杆菌 /o"gw附J的混合物调理培养親取物*1.5%硬脂TO油酯和PEG100 5到旨酸酯5.0%异十六烷8.0%牛油树脂5,0%甘油3.0%聚羧乙烯(carbopol) 981 0.2%0.2%Lubragd5.0%苯氧乙醇1.0%1.0%二丁基羟基甲，HT)0.05%水适量至100%*根据实施例1获得，并冻干
权利要求
1、至少一种调理细胞培养基或其提取物用于制备治疗炎症和/或免疫紊乱症状的组合物的用途，所述培养基能通过接触至少一种消化道细胞培养物和至少益生菌微生物来获得。
2、 根据权利要求1的用途，其特征在于戶腐培养基可S31iS—步接角妙卜周 血细胞获得。
3、 根据权利要求2的用途，辦征在于外周血细胞是白细胞。
4、 根据前述任一权利要求的用途，其特征在于消雌细胞是肠处皮细胞。
5、 根据前述任一权利要求的用途，其特征在于至少一种益生菌微生物选自 酵母、耶罗威亚酵母、克卢费氏酵母属、有孢圆酵母属、粟酒裂殖酵母、德巴 利酵母属、假丝酵母、毕赤氏酵母、曲霉、青霉菌、双歧杆菌属、畸形菌体、 梭菌属、蜜,菌属、丙酸杆菌属、肠球菌、乳,菌属、葡萄球菌、消化链 球菌属、杆菌、小球菌属、微球菌、明串珠菌属、魏斯氏菌属、气球菌属、乳 球菌属和乳杆菌属。
6、 根据前述任一权利要求的用途，其特征在于至少一种益生菌微生物选自 乳酸菌、双歧杆菌和酵母。
7、 根据前述任一权利要求的用途，其特征在于至少一种1^生物选自乳杆菌 和双歧杆菌种类。
8、 根据前述任一权利要求的至少一种#基或至少一种提取物的用途，其 特征在于组^)用于治疗^和/或头皮的刺、 状。
9、 根据前述任一权利要求的至少一种，基^mii取物的用途，其特征在于组合物用于保护皿细胞免受紫外辐射引起的伤害。
10、 根据前述任一权利要求的用途，辦征在于组合物用于保护细鹏抗 对它化DNA的损害。
11、 根据前述任一权禾腰求的用途，辦征在于组合物是化妆品或药学组，。
12、 根据前述权利要求的用途，其特征在于组糊是适合局部施用至帔肤 或体表的组^i。
13、 化妆品皿肤学的组^/,其特征在于其包含如权利要求1至7中的一项所定义的至少一种调理培养基或调理培养基的提取物和至少一种具有刺激 性副作用的因子。
全文摘要
本发明涉及至少一种调理细胞培养基或其提取物用于制备治疗炎症和/或免疫紊乱症状的组合物的用途，所述培养基能通过接触至少一个消化道细胞培养物和至少益生菌微生物来获得。其还涉及包含调理培养基和具有刺激副作用的因子的组合物。
文档编号A61K8/99GK101254213SQ20081009207
公开日2008年9月3日 申请日期2008年2月26日 优先权日2007年2月26日
发明者A·古尼切 申请人:莱雅公司