专利名称：一种具有抗癌活性的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及的是从海芒果茎皮中提取得到具有抗癌活性的组合物。
技术背景肿瘤是目前危害人民生命和健康的严重疾病之一，目前治疗癌症的方 法主要有手术、放疗、化疗、免疫治疗、中医中药治疗等多种。而化疗主要依靠 化学药物，化学合成的抗癌药多半对人体正常细胞产生毒副作用，因此从天然动 植物中寻找低毒、高效的抗癌活性成分成为近年来研究的热点之一。
海芒果为夹竹桃科海芒果属植物(Cerberaffl朋gi7asL.)，其提取物具有止痛、 抗惊厥、强心及降血压的药理作用，我们在前期的体外抗肿瘤实验筛查时发现其 醇提物具有显著的抗癌活性
发明内容
本发明涉及的抗癌组合物对所测试的几种肿瘤细胞均显示了良好的 活性结果。
发明目的本发明目的是开发出具有显著活性及低毒的抗癌药物。
具体实施方式
海芒果茎皮4kg，阴干后粉碎，醇类溶剂进行提取。提取液经浓 縮至无醇味后，浓縮后得到提取物A，溶剂分配法进行萃取，得到部位B、 C、 D。 其中C萃取部位(54.0g)经体外实验发现具有显著的抗肿瘤活性，结果见表3。对 C萃取部位进行系统分离。利用薄层色谱法对C萃取物进行展丌条件的选择。经 过大量实验发现氯仿-甲醇体系下，展开效果较好。利用柱色谱进行粗分离。经 过柱色谱粗分离后共收集8个流份(I 一VI)。 Fr. II经过薄层检查发现其中有蓝 色荧光斑点(254nm)为其主要成分。该流份中混有许多色素类物质，利用 S印hdaex LH-20柱色谱进行纯化，从中得到无色针晶，经丙酮重结晶后得到化合 物B。通过利用现代波谱技术(IR， UV，丽R)鉴定化合物B为水杨酸。Fr.III经 过薄层检查后发现，其主要成分在254nm下为一暗斑，且有拖尾现象。经过 S印hdaex LH-20柱色谱进行纯化，从中得到白色粉末，经过薄层检查后发现，该 化合物为流份Fr.III的主成分。经过斑点反应后证实该化合物溴甲酚绿反应阳 性。甲醇重结晶后得到化合物C。通过利用现代波谱技术(IR， UV， MS， ID-， 2D-NMR) 鉴定化合物C为一新化合物，命名为海芒果酸A，其波谱数据见表2及结构见表 1。 Fr. IV经过薄层检查后发现，在254nm下有两个暗斑为其主要成分。经过薄层 条件选择后发现，氯仿-丙酮体系下分离效果良好。选用柱色谱分离，得到化合 物D和E。甲醇重结品后进行结构鉴定。利用现代波谱技术(IR， UV, 1D-， 2D—證，MS)鉴定化合物D为一新天然产物，命名为海芒果酸B，化合物E为一新化合物， 命名为海芒果酸C，其波谱数据见表2及结构见下表1。 表1化合物的结构
海芒果酸A 海芒果酸B 海芒果酸C
表2化合物的波谱数据NO.海芒果酸A海芒果酸C海芒果酸B
SHScsH5C
13.98 (2H, s)48,13.77 (dd, 10.8Hz)53.8—138.0
2—205.23.26 (1H, m)50.97.76 (1H, s)130.3
33.98 (2H, s)48.12.90 (d, 10.8 Hz) 2.97 (d, ]0.8Hz)37,0—131.0
4—135.2—〗37.57.80 (d, 7.8Hz)129.2
7.76 (1H, brs)130.97.76 (1H, brs)129.67.41 0, 7.8Hz)129.5
6130.9—130.97.50 (d, 7.8Hz)135.1
77.79 (d, 7.8Hz)127.67.78 Cbrd， 8.0Hz)127.63.67 C2H， s)41.6
87.42 (d, 7.8Hz)128.57.44 (t, 8.0Hz)128.5—]75.1
97.41 (1H, m)133.47,41 (d, 8.0Hz)133.3一167.4
10—167.4—167.1——
11———172.1——
12—一—172.9——
r—135.2—139.0—一
2,7.76 (1H, brs)130.97.91 (1H, brs)129.1——
3，130.9—130.9——
4,7.79 (d, J=7.8Hz)127.67.80 (d,./=7.8Hz)128.6—一
5，7.42 (d, J=7.8Hz)128.57.45 0,./=7.8Hz)128.8——
6,7.41 (lH，m)133.47.56 (d, J=7.8Hz)133.0—一
7,—〗67.4—167.3—一
OH12.70 (2H,brs)—12.82 (4H,brs)—12.70 (2H,brs)—
药理筛査组合物进行体外抗肿瘤活性筛选试验(Hela、 KB-3-l、 NCI-H460), 结果见表3:
细胞株H印G2KB-3-1NCI-H460
部位c5.50 (吗/ml)4.56 (吗/ml)3.38 (吗/ml)
权利要求
1.一种具有抗癌活性的海芒果茎皮组合物。其特征在于它是纯天然产物，体外抗肿瘤活性显著。
2. 利用各种柱色谱等分离手段及重结晶等纯化手段对权利要求1所述的组合物进行分离 得到了 4个化合物。采用现代波谱技术(IR、 UV、 MS、 1D、 2D-NMR)鉴定分离所 得的化合物，分别为确定为水杨酸、海芒果酸A、海芒果酸B、海芒果酸C。其特征 是其中海芒果酸A、 B、 C为结构新颖的苯甲酸类衍生物。
3. 权利要求1所述的组分，利用MTT法进行体外抗肿瘤实验，所用的三种细胞株为HepG2、 KB-3-l、 NCI-H460。
全文摘要
本发明涉及的是从海芒果茎皮中提取得到具有抗癌活性的组合物及其化学成分的组成。利用醇类溶剂对海芒果茎皮进行提取，得到提取物A。有机溶剂萃取后，得到萃取物B、C、D，经过体外抗肿瘤实验发现，萃取物C具有显著的抗肿瘤活性。利用各种柱色谱等分离技术及重结晶等纯化手段从萃取物C中分离得到了4个化合物。采用现代波谱技术(IR、UV、MS、1D、2D-NMR)鉴定分离所得的化合物，分别确定为水杨酸、海芒果酸A、海芒果酸B、海芒果酸C。其特征是其中海芒果酸A、B、C为结构新颖的苯甲酸类衍生物。
文档编号A61K36/185GK101618054SQ20081013046
公开日2010年1月6日 申请日期2008年7月3日 优先权日2008年7月3日
发明者刘明生, 康胜利, 张俊清, 张小坡, 戴水平, 峰 陈, 娜 魏 申请人:海南医学院