专利名称：：茶多酚的新用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及茶多酚的新用途，具体地，是在抗空肠弯曲杆菌的禽类药物中的用途。属兽药领域。
背景技术：
：空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejimi,Cj)是弯曲菌属的一种，是革兰氏阴性菌。1973年Dekeyser和Butzler从急性肠炎患者粪便分离到该菌并首次确定其致病性，后来发现可引起人和动物的各种疾病，如人类发烧、急性肠炎和格林-巴利综合征。近年报道中，空肠弯曲杆菌常在儿童引起肠道外感染，如败血症、脑膜炎、胆囊炎、腹膜炎、心内膜炎、血栓性静脉炎和反应性关节炎等；此外，还可引起牛和绵羊流产，火鸡的肝炎和蓝冠病，童子鸡和雏鸡坏死性肝炎，雏鸡、犊牛、仔猪的腹泻等多种疾病。据调查，市场上出售的75%的活禽和80%的禽肉中含有弯曲杆菌，接触或食用禽类产品被认为是主要感染途径。鸡盲肠一旦被空弯曲菌感染，这些细菌可在长达8周的实验期内持续存在，且鸡源性菌株经传代后毒力增强。由此可见，禽群空肠弯曲菌水平传播，长期带菌是家禽随日龄增长，带菌升高的主要原因。至今在食品安全问题上仍然是世界范围内关注的焦点，世界公共卫生的重要课题之一。目前尚无预防弯曲杆菌感染的疫苗，对弯曲杆菌的预防和控制只能针对其流行环节和发病特点采取对症治疗的原则。国内暴发弯曲杆菌主要采用中西结合的疗法，如张立富等对发病严重的鸡舍，每只鸡肌肉注射氨苄青霉素5mg，连注35天，同时用氯霉素水溶液饮用7天。在每吨饲料中拌入500g强力霉素饲喂5天后，改用氯霉素饮水5天，配合使用中药熟地、当归、白菊花、枸杞子各150g，茺蔚子、柴胡、青箱子、车前子、草决明、黄芩各100g，水煎供200只育成鸡内服，1天1剂，连用1015天，经治疗，3天后病情逐渐好转，除个别严重病鸡不能控制死亡外，l周后基本完全康复。廖琼妃等对上杭县旧县乡暴发鸡弧菌性肝炎的诊治种，采用环丙沙星原粉，按lg加15kg水进行全群饮水，连用5d;挑出病鸡或疑似病鸡50羽，庆大霉素按l万u/kg体重肌注，每天1次，连用3d，5d后病情得到控制。刘宗凤等治疗该病严重的孔雀，每只孔雀肌肉注射氮苄青霉素10mg，35天为1个疗程；同时用氯霉素水溶液饮用7天，在每吨饲料中拌入500g强力霉素词喂5天后，改用氯霉素饮归、白菊花、枸杞子各100g，柴胡、青葙子、草决明、车前子、黄芩、茺蔚子各70g，煎水，供100只雏孔雀内服，每天1剂，连用510天；经治疗，5天后病情逐渐好转，除个别严重病例不能控制死亡夕卜，其余的10天基本恢复正常。弯曲杆菌的血清型多，目前弯曲杆菌有5660个血清型，而且人畜感染途径仍然不完全清楚，预防和治疗带来了巨大的困难。单纯靠疫苗不能完全控制，而且目前临床上应用的疫苗效果并不理想；噬菌体、细菌素的应用还处于研究阶段；抗生素治疗极易产生耐药性及药物残留；而天然药物无残留，不产生耐药性，无毒性或毒性小。因此，很有必要大力开发天然药物来预防和治疗弯曲杆菌病，解决临床耐药性问题和食品安全问题。茶多酚(TeaPolyphenols)是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄垸醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等，其中以黄烷醇类物质(儿茶素)最为重要。茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。茶多酚用途广泛，如清除活性氧自由基，阻断脂质过氧化过程，提高人体内酶的活性，从而起到抗突变、抗癌症的功效；防治高脂血症引起的疾病增强微血管强韧性、降血脂，预防肝脏及冠状动脉粥样硬化；降血压；降血糖；防止脑中风；抗血栓；提高人体的综合免疫能力的功效，可用于通过调节免疫球蛋白的活性，间接实现提高人体综合免疫能力；抗风湿因子；抗菌抗病毒的功效，抗变态反应和皮肤过敏反应；舒缓肠胃紧张、防炎止泻和利尿作用；促进VC的吸收，防治坏血病；改进人体对铁的吸收，有效防止贫血；抗脂质过氧化，预防衰老；对重金属盐和生物碱中毒的抗解作用；防辐射损伤，减轻放疗的不良反应；茶多酚具有优异的抗辐射功能，茶多酚可吸收放射性物质，阻止其在人体内扩散，被称为天然的紫外线过滤器；茶多酚能够阻挡紫外线和清除紫外线诱导的自由基，从而保护黑色素细胞的正常功能，抑制黑色素的形成；同时对脂质氧化产生抑制，减轻色素沉着，防龋固齿和清除口臭的作用；助消化作用等等。目前茶多酚多用于人体疾病，用于动物(兽药)中的报道较少。人用药与兽药在使用上有较大的差别。兽药是用来预防、治疗和诊断动物疾病的药物。兽药的使用对象是动物，它包括所有的家禽、各种飞禽走兽等野生动物和鱼类等；它是专门为防治动物的疾病而生产的，它适合于动物的生理机能、代谢特点和一些特有的动物病。兽药的许多剂型，规定的用药剂量，投药的途径与方法，都是根据动物本身的特点而制定的。树如许多药物都是大剂量规格，是专门为某些大动物生产的；某些药物适合于混在水或饲料内，只适合动物使用。人用药物是专门用于医治人类疾病的药。人与种属不同的4各种动物，对药物的反应差异有时很大。比如反刍动物对某些麻醉药比较敏感；牛对汞剂耐受性很低；禽类对呋喃类药物易发生中毒；抗生素对草1^动物易引起消化机能失常等等。
发明内容本发明的技术方案是提供了茶多酚的新用途，具体地，是在制备抗空肠弯曲杆菌的禽类药物中的用途。本发明的另一技术方案是提供了该含有茶多酚的用于抗空肠弯曲杆菌的药物组合物。本发明提供了茶多酚在制备抗空肠弯曲杆菌的禽类药物中的用途。其中，所述的药物是治疗禽类细菌性痢疾的药物。本发明还提供了一种抗空肠弯曲杆菌的药物组合物，它是含有有效量的茶多酚为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。所述的茶多酚的有效剂量为0.01g7g/kg禽体重/天。进一步优选地，所述的茶多酚的有效剂量为0.251.0g/kg禽体重/天。更进一步优选地，所述的茶多酚的有效剂量为0.5g/kg禽体重/天。其中，所述的制剂为散剂、片剂、丸剂、颗粒剂或胶囊剂。本发明还提供了该药物组合物在制备治疗禽类细菌性痢疾的药物中的用途。本发明药物组合物是通过开发天然药物来预防和治疗弯曲杆菌病及治疗禽类细菌性痢疾，解决了临床耐药性问题和食品安全问题。以下通过具体实施方式对本发明作进--步的详细描述，但并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变和变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。具体实施例方式实施例1本发明治疗禽类细菌性痢疾的药物取茶多酚40g，加入药学上常用的辅料，制备成散剂。将该制剂溶于水，按每天茶多酚的用量为0.5g/kg体重口服，连续用药5天。以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。试验例1本发明药物的抑菌试验一、材料器材平皿离心管(1.5ml、10ml)移液枪枪头酒精灯打孔器三角瓶直尺酒精棉球普通营养琼脂培养基空肠弯曲杆菌基础培基受试药物茶多酚待测细菌空肠弯曲杆菌二、方法1、空肠弯曲杆菌含菌培养基的制备取布氏肉汤增菌液每100ml空肠弯曲菌基础培养基加入lml布氏肉汤增菌液，并加入5%绵羊血。分装培养基，打孔备用。2、抑菌试验将茶多酚配成100mg/ml的溶液，5种液体样品(29、35、37、41、44)直接用原样筛选，分别加样(约6()ul)，将平皿培养基置于37r:温箱中培养24小时后，观察结果。3、MIC测定首先对茶多酚对倍稀释，做六个稀释度使浓度分别为50g/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml、3.125mg/ml、1.5625mg/ml。分别加入制备好的培养基中。三、实验结果_抑菌圈直径(mm)药品编号_空肠弯曲杆菌茶多酚30备注加样孔直径为6mm最小抑菌浓度(MIC)测定结果(mg/ml)药品编号_空肠弯曲杆菌茶多酚3.125mg/ml上述试验证明，茶多酚对于空肠弯曲杆菌有明显的抑制作用。试验例2本发明药物对细菌性痢疾的治疗效果的临床试验1目的评价茶多酚对细菌性痢疾的临床用药效果。2材料2.1茶多酚由实施例1的方法制备，为黄褐色干燥粉末；试验动物来自成都新津商品鸡场，为80日龄商品蛋鸡，表现为腹泻，粪便稀薄成黄绿色，但采食和饮水未见异常，随机选择病鸡400只，并随机分成高、中、低、不加药物的对照组，每组100只。2.2试剂及仪器亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)、SS琼脂培养基、超净工作台、隔水式恒温培养箱、干燥箱、振荡培养箱、高压灭菌锅等。3方法3.1鸡群空肠弯曲杆菌带菌率的检测3丄1采集肛门拭子1份，棉拭子直接用生理盐水洗涤，提取DNA，用PCR直接检测空肠弯曲杆菌带菌率，PCR的反应条件为94°C5min，94°Clmin，58°Clmin，72°Clmin，共35个循环，72°C10min结束反应。3.2给药方法3.2.1将茶多酚溶于水，每天按每公斤体重口服A组0.25g/kg;B:0.5g/kg;C:lg/kg;D:对照组，连续用药5天。3.2.2用药后鸡群带菌率的测定分别于用药第5天采集各组肛门拭子用于测定空肠弯曲杆菌带菌率。4结果4.1鸡群对药物的反应A组用3天药后，有31只腹泻症状减轻，69只腹泻症状很严重；用药5天后，有46只腹泻症状减轻，54只仍然有严重的腹泻症状。B组鸡群在用药后第3天，有67只病鸡腹泻症状消失，精神状态比用药前有一定程度的好转，用药后第5天，仅ll只弱鸡有轻度腹泻，但病鸡的精神状态明显好转。C组用药3天后，71只腹泻症状减轻，29只有严重腹泻，但采食量降低，精神沉郁，用药5天后，有75只未出现腹泻症状，但精神沉郁，采食量仍然没有恢复，有7只出现死亡，19只腹泻症状减轻。D组为不加药的对照组，100只仍然见腹泻，粪便稀薄成黄绿色，但采食和饮水未见异常。鸡群用药后的有效率见表1<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>茶多酚在每天0.251.0g/kg体重口服，连续用药5天，治疗细菌性痢疾，药效明显，且对鸡群空肠弯曲杆菌带菌率有一定程度的消除作用。试验例3茶多酚的毒理实验通过小鼠骨髓细胞微核遗传毒性试验，高中低三个剂量组89.56、45.63、23.10mg/mL中，茶多酚中剂量组(1/4LD50)和高剂量组(1/2LD50)小鼠嗜多染红细胞微核率较阴性对照组有显著性差异，并且随着剂量的增加，对小鼠的遗传毒性也相应的增加，存在剂量一效应关系，但其微核率少于环磷酰胺的微核率，说明该中药制剂有对小鼠骨髓嗜多染红细胞一定的遗传毒性，但小于环磷酰胺的遗传毒性。茶多酚制剂对小鼠精子畸形影响的检测试验结果可知，茶多酚组精子畸变率高于阴性对照组精子畸变率，经Wilcoxon秩和检验法检验有统计学显著性差异(其显著水平cx=0.05)。但是因为在实验组所选剂量范围内并未出现随染毒剂量的增加精子畸变率升高的剂量反应关系，所以依照小鼠精子畸形试验的国家标准(GB15193[1].07-2003)不能判定茶多酚为致精子畸变阳性物。试验组和对照组畸变精子各型构成较为一致，均以无定型和无钩形为主。茶多酚小鼠半数致死量的测定报告，以茶多酚的剂量为1280mg/kg、2560mg/kg、5000mg/kg、10000mg/kg、15000mg/kg做为预实验剂量。结果1280mg/kg、2560mg/kg剂量组的小鼠全部成活，5000mg/kg、10000mg/kg、15000mg/kg剂量组的小鼠全部死亡。小白鼠的死亡高峰出现在灌胃后的34h。该茶多酚的半数致死量为3577.7mg/kg，95%可信限为3105.0mg/kg4122.4mg/kg。根据药物的毒性分级，茶多酚属于安全药品。根据上述三个试验，茶多酚用于抑制弯曲杆菌病，治疗禽类细菌性痢疾的有效剂量为0.01g7g/kg禽体重/天。在该剂量范围内，具有明显的药效，且能解决临床耐药性问题和食品安全问题。权利要求1、茶多酚在制备抗空肠弯曲杆菌的禽类药物中的用途。2、根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述的药物是治疗禽类细菌性痢疾的药物。3、一种抗空肠弯曲杆菌的药物组合物，其特征在于它是含有有效量的茶多酚为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。4、根据权利要求3所述的抗空肠弯曲杆菌的药物组合物，其特征在于:所述的茶多酚的有效剂量为0.01g7g/kg禽体重/天。5、根据权利要求4所述的抗空肠弯曲杆菌的药物组合物，其特征在于:所述的茶多酚的有效剂量为0.251.0g/kg禽体重/天。6、根据权利要求5所述的抗空肠弯曲杆菌的药物组合物，其特征在于:所述的茶多酚的有效剂量为0.5g/kg禽体重/天。7、根据权利要求3-6任一一项所述的抗空肠弯曲杆菌的药物组合物，其特征在于所述的制剂为散剂、片剂、丸剂、颗粒剂或胶囊剂。8、权利要求3-7任一一项所述的药物组合物在制备治疗禽类细菌性痢疾的药物中的用途。全文摘要本发明提供了茶多酚的新用途，用于治疗禽类细菌性痢疾。本发明药物组合物是通过开发天然药物来预防和治疗禽类细菌性痢疾，对弯曲杆菌病有抑制作用，解决了临床耐药性问题和食品安全问题。文档编号A61P1/00GK101439035SQ200810181108公开日2009年5月27日申请日期2008年11月21日优先权日2007年11月23日发明者刘海燕,琦康,敏李,丹肖,边燕红申请人:通威股份有限公司