专利名称：新型基于紫杉醇类化合物的组合物的制作方法
专利说明新型基于紫杉醇类化合物的组合物 本发明涉及新型的基于具有抗肿瘤和抗白血病活性的治疗剂的药物形式。更特别地涉及新型包含下面通式(I)衍生物
或者在下面通式(II)的衍生物的可注射形式
式(I)化合物以国际通用名larotaxel而熟知，它目前在临床试验中并且被称为缩写XRP9881。式(II)化合物目前也在临床试验中并且被称为XRP6258。
这些产物在体内显示出对恶性肿瘤的重要活性，这种活性使得对它们在治疗耐所有其它抗癌症治疗的疾病中进行研究。
不幸地，这类产物(特别地多西紫杉或者紫杉醇)在水中具有非常低的溶解度使得其需要制备用于基于表面活性剂和乙醇的可注射制剂的配制剂。乙醇是最好的可以溶解对应于式(I)和式(II)的分子的药物溶剂。这种配制剂例如描述在专利EP0593656或者在下面出版物中。
举例来说，根据由Rowinsky，Lorraine，Cazenave和Donehower在Journal of the National Cancer Institute，Vol.82，No.15，第1247-1259页lst August 1990上发表的涉及具有与式(I)或者(II)化合物接近的溶解度的紫杉酚的公开，制备了第一溶液(被称为“储备溶液”)，其包含大约6毫克/毫升在溶剂混合物中的紫杉酚，该溶剂混合物由以下组成 -50体积％乙醇；和 -50体积％聚氧乙烯化蓖麻油(例如Crémophor EL)。
仍然根据该公开物，为了获得浓度(0.3-1毫克/毫升)，需要向注入包含多种浓度的以下每种化合物(同时作为活性成分)，乙醇和尤其Crémophor(大约8g每100输注溶液)的溶液。因为治疗通常要求给药高剂量的活性成分，并且由于活性成分在溶液中的浓度是相对低的，这种大体积的注射在治疗期间除了引起过敏现象外还具有醇中毒现象的效果。
根据欧洲专利EP 0593601已经发现，使用不同药物形式可以极大地降低乙醇浓度或完全地除去Crémophor和在输注液溶解物中的乙醇。
为此，制备在溶剂混合物中包含活性成分的储备溶液，该溶剂混合物由乙醇(其是紫杉烷(taxane)类活性成分的最好的生物相容性溶剂)和表面活性剂组成，所述表面活性剂选自特别地以名称Tween和Montanox销售的聚山梨酸酯，或者例如以名称Crémophor或者Emulphor销售的环氧乙烷和脂肪酸甘油酯的酯-醚(氢化或者非氢化蓖麻油)。
该具有低乙醇含量的储备溶液，优选地包含低于5％的乙醇，更加优选地它包含低于2％的乙醇。这种溶液是稳定的并且因此在表面活性剂中可以包含最高200毫克/毫升，优选地最高80毫克/毫升的活性成分。
根据本发明，该紫杉醇储备溶液具有在表面活性剂中为6-20毫克/毫升活性成分的浓度。多西紫杉的储备溶液优选地具有在表面活性剂中为20-80毫克/毫升活性成分的浓度。
这些在表面活性剂中任选地包含少量乙醇的溶液可以被溶于输注液溶解物中但是使用极其强烈搅拌，例如使用涡动型设备。
在专利EP 0671912中描述的发明可以解决由前面的专利留下的问题，并因此在于制备在紫杉烷类衍生物在表面活性剂中的溶液和包含添加剂的水溶液之间的中间溶液(solution intermédiaire)，所述添加剂随后促进所述中间溶液在输注液溶解物中的溶解。
这些添加剂选自能够中断或者避免胶凝化相(phase gélifiée)(其在包含紫杉烷类衍生物的乳化剂和水之间形成的)形成的系列添加剂。
在可以中断或者避免这种胶凝化相形成的添加剂中，作为实例给出以下 -乙醇； -葡萄糖； -甘油； -丙二醇； -甘氨酸； -山梨糖醇； -甘露醇； -苯甲醇；和 -聚乙二醇。
然后以根据希望注射活性成分的量预先确定的流速将多西紫杉或者紫杉醇的输注液注射到人体中。
使用现有技术的所有配制剂观察到或多或少温和的过敏性休克现象，其通过在输注之前给药抗组胺剂和/或皮质类甾醇已经得到预期。
在已可以避免这些过敏现象出现的最新的溶液中，其中紫杉醇类化合物(taxoide)被包封在清蛋白基外壳中的配制剂已经出现。这种解决方案避免过敏性休克的出现，并因此避免用抗组胺剂和/或皮质类甾醇的预处理，并且相对于现有技术的解决方案可以给药更强的剂量同时降低副作用。这种配制剂例如描述在专利US 6537579中。
专利申请US 2003/0099674要求保护由溶于用表面活性剂包封的油珠中的紫杉醇类化合物组成的冻干组合物。这种冻干配制剂在储存期间不崩解和不降解。所述油包含具有中链的甘油三酯(Miglyol 812N或MCT)和豆油(属于许多其它油)。在第7页
记载了这些冻干物比液体乳状液遭受更少的损失和更少的变质。还提到
的是，当制备乳状液时，其必须在随后几个小时或几分钟内经受冷冻干燥，并且当它重建时，该冻干物也必须在随后几个小时或者分钟内使用。
在所述实例中，表2描述了紫杉醇(paclitaxel)在具有卵磷脂的油中的溶液，它们在TA时在一个月后的稳定性是优良的(对于Miglyol和大豆油)。还描述了含水与芝麻油的溶液。
在通过溶解该冻干物获得的乳状液中，仅描述了在-20℃在1个月期间实现稳定性。这些稳定性条件与在最先几个专利中描述的方案相比在它们的稳定性方面不显示任何优点，我们的目的是获得在环境温度下在至少一年期间是稳定的即用配制剂。
迄今为止，总是寻求可以给药足够剂量的紫杉醇类药剂同时避免使用聚氧乙烯化蓖麻油或者聚山梨酸酯类型的表面活性剂的配方，其中紫杉烷在环境温度下是稳定的并且为可以与输注液溶解物混合的液体形式，不出现引起相分离的物理现象，即沉淀或者液相分离。另外，寻求能以丸剂给药紫杉醇类化合物同时避免输注液的配方。
另外，期望的配方必须允许产物在环境温度下随着时间保持稳定并且必须避免紫杉醇类化合物的降解，例如通过水解的降解。
本发明解决这些目的并且涉及在卵磷脂或者半合成磷脂存在时基于在水中的可药用油的乳状液，该乳状液包含紫杉醇类化合物。
在可药用油中，可以提到单独使用的大豆油或单独使用的具有中链的甘油三酯(C8-C10)，如MiglyolTM或MCTTM，或优选地可以使用大豆油和MCT的混合物。特别地，大豆油与甘油三酯的重量比是1∶1。
乳状液通过加入大豆或者蛋卵磷酯(优选如以商标
E80销售的蛋卵磷酯)形成或者通过优选加入为两性离子表面活性剂的磷脂酰胆碱形成。
当卵磷脂或者磷脂酰胆碱与特别地选自磷脂酰甘油或者磷脂酸类的阴离子磷脂结合时，该乳状液具有较好的物理稳定性。
在磷脂酰甘油中，可以提到二月桂酰基磷脂酰甘油(DLPG)、二肉豆蔻酰基磷脂酰甘油(DMPG)或二棕榈酰基磷脂酰甘油(DPPG)。在磷脂酸中，可以提到二月桂酰基甘油基磷脂酸(DLPA)、二肉豆蔻酰基甘油基磷脂酸(DMPA)或者二棕榈酰基甘油基磷脂酸(DPPA)的钠盐。
分别地，卵磷脂或者磷脂酰胆碱与磷脂酰甘油或者与磷脂酸的重量比优选地为500-3，更优选地100-10。在所有的阴离子磷脂中，二月桂酰基磷脂酰甘油是优选的。
该配制剂的pH可以通过加入酸被调节至3-7。优选地，缓冲液用来使pH保持在该区域内，该缓冲液与酸组合或不组合。缓冲液优选地是组氨酸。优选使用在溶液中的5mM-50mM组氨酸。该酸优选地选自盐酸、柠檬酸或者抗坏血酸。
溶液的等渗性可以通过加入甘油进行调节。
可以使用0-2％乙醇便于制备该配制剂。
优选地，配制剂的重量组成在以下范围内 -油相 10-30％ -卵磷脂或者磷脂酰胆碱 0.6-5％ -磷脂酰甘油0.01-0.2％ -甘油 0-2.5％ -乙醇 0-2％ -水适量至100％ 乳状液的制备优选地使用微流化设备(appareil de microfluidisation)或者高压匀化器进行以便获得的尺寸为100纳米-1微米的小滴，优选地100-500纳米。更加特别优选其中小滴的平均尺寸为150-350纳米的配制剂。最终的配制剂进行惰性化(inertée)，优选地通过氮气或者通过不包含氧的惰性气体进行惰性化。
式(I)或者式(II)的活性成分的浓度低于10毫克/毫升，特别地以0.5-6毫克/毫升并且优选地约4毫克/毫升的浓度进行使用。
本发明借助于以下实施例进行将完全地进行描述，这些实施例不应被认为限制本发明。
实施例1 在60℃将1g DPPC和0.03g DLPG溶解在MCT(10g)、大豆油(10g)和乙醇(0.4g)的混合物中。
将0.4g式(I)化合物溶于先前获得的脂类溶液中。
在搅拌下，将2.5g甘油加入到75.7g 10mM组氨酸水缓冲液中直到获得均匀混合物。
将水相加入到油相中，并且全部混合物使用磨机(Ultraturrax)进行均匀化然后通过Microfluidiseur(11个循环在11000PSI)。获得的小滴的尺寸为约250纳米。
实施例2 在60℃将1g DPPC和0.03g DLPG溶解在MCT(10g)、大豆油(10g)和乙醇(2g)的混合物中。
将0.4g式(I)化合物溶于先前获得的脂类溶液中。
在搅拌下，将2.5g甘油加入到75.7克被调节(HCl)至pH6的10mM组氨酸水缓冲液中直到获得均匀混合物。
将水相加入到油相中，并且全部混合物使用Ultraturrax然后通过Microfluidiseur(11次循环在11000PSI)进行均匀化。获得的小滴的尺寸为约280nm。
实施例3 在60℃将1.2g
E80和0.03g DLPG溶解在MCT(10g)和大豆油(10g)的混合物中。
将0.4g式(IXRP9881)化合物溶于先前获得的脂类溶液中。
在搅拌下，将2.5g甘油加入到75.7g 10mM组氨酸水缓冲液中直到获得均匀混合物。
将水相加入到油相中，并且全部混合物使用Ultraturrax然后通过Microfluidiseur(11次循环在11000PSI)进行均匀化。获得的小滴的平均尺寸为约140nm(Dv50)。
在60℃，1个月的物理稳定性无变化的尺寸(Dv50和Dv90)。
实施例4 在60℃，将1.2g
E80和0.03g DLPG溶解在MCT(10g)和大豆油(10g)的混合物中。
将0.4g式(IXRP9881)化合物溶于先前获得的脂类溶液中。
在搅拌下，将2.5g甘油加入到75.7克被调节(HCl)至pH6的10mM组氨酸水缓冲液中直到获得均匀混合物。
将水相加入到油相中，并且全部混合物使用Ultraturrax然后通过Microfluidiseur(11次循环在11000PSI)进行均匀化。获得的小滴的平均尺寸为约140nm(Dv50)。
在60℃，1个月后的物理稳定性无变化的尺寸(Dv50和Dv90)。
实施例5 在60℃时，将1g DPPC和0.03g DLPG溶解在MCT(10g)、大豆油(10g)和乙醇(0.4g)的混合物中。
将0.4g式(IXRP9881)化合物溶于先前获得的脂类溶液中。
在搅拌下，将2.5g甘油加入到75.7克被调节(HCl)至pH6的10mM组氨酸水缓冲液中直到获得均匀混合物。
将水相加入到油相中，并且全部混合物使用Ultraturrax然后通过Microfluidiseur(11次循环在11000PSI)进行均匀化。获得的小滴的平均尺寸为约280nm(Dv50)。
在60℃，1个月后的物理稳定性无变化的尺寸(Dv50和Dv90)。
实施例6 在60℃时，将1.2％
E80和0.03g DMPG溶解在MCT(10g)和大豆油(10g)的混合物中。
将0.4g式(I XRP9881)化合物溶于先前获得的脂类溶液中。
在搅拌下，将2.5g甘油加入到75.7g PPI水中直到获得均匀混合物。
将水相加入到油相中，并且全部混合物使用Ultraturrax然后通过Microfluidiseur(11次循环在11000PSI)进行均匀化。获得的小滴的平均尺寸为约140nm(Dv50)。
在60℃，1个月后的物理稳定性无变化的尺寸(Dv50和Dv90)。
实施例7 在60℃时，将1.2g
E80和0.03g DPPA溶解在MCT(10g)和大豆油(10g)的混合物中。
将0.4g式(I XRP9881)化合物溶于先前获得的脂类溶液中。
在搅拌下，将2.5g甘油加入到75.7g PPI水中直到获得均匀混合物。
将水相加入到油相中，并且全部混合物使用Ultraturrax然后通过Microfluidiseur(11次循环在11000PSI)进行均匀化。获得的小滴的平均尺寸为约140nm(Dv50)。
在60℃，1个月后的物理稳定性无变化的尺寸(Dv50和Dv90)。
实施例8 在60℃，将1g DPPC和0.03g DLPG溶解在MCT(10g)，大豆油(10g)和乙醇(0.4g)的混合物中。
将0.4g式(II XRP6258)化合物溶于先前获得的脂类溶液中。
在搅拌下，将2.5g甘油加入到75.7克被调节(HCl)至pH6的10mM组氨酸水缓冲液中直到获得均匀混合物。
将水相加入到油相中，并且全部混合物使用Ultraturrax然后通过Microfluidiseur(11次循环在11000PSI)进行均匀化。
获得的小滴的平均尺寸为约260nm。
对比实施例 通过与专利申请US 2003/0099674比较，进行以下实施例以显示冷冻干燥是不能应用于本发明的配制剂的技术，因为它导致本发明的脂质颗粒增大。
1.材料和方法 1.1.材料
E80-批料1031471-7/906供应商
KG. Miglyol 812 麦芽糖一水合物。
蔗糖。
1.2.配方
*纯的无溶剂产物 1.3.乳状液制备方法 1)将活性成分溶解在油中。
2)使用Ultraturrax使油相预分散在水+卵磷脂中。
3)通过在11000PSI的微流化器均匀化(11次通过)。
4)将乳状液分为2部分-加入15％麦芽糖或者蔗糖。
5)适当展开1mm和6mm高度。
6)冷冻干燥施加的条件描述如下，冷冻存放温度(températuretagère)-45℃-产品温度-39℃ 升华存放温度-25℃-压力50微巴 在30℃的第二次干燥。
2.结果 2.1.冷冻干燥之前 在加入低温防护剂250nm(Coulter N4+，测量方法准弹性光散射)。
在加入低温防护剂之后尺寸无变化(冷冻干燥之前)。
2.2.在冷冻干燥后 2.2.1.外观和重建(reconstitution) 冻干物的外观没有崩解也没收缩→正确外观。
使用PPI水重建直接重建，获得的乳状液具有均匀的外观。
2.2.2.在重建之后的尺寸 具有300纳米-10微米尺寸的泡囊存在(亚稳系)。
在麦芽糖和蔗糖之间没有可见的或者测量的差异，在1mm和6mm之间的冻干物高度之间也没有。
权利要求
1.呈乳状液形式的包含紫杉烷类衍生物的可注射组合物，该组合物由基于在水中的可药用油和卵磷脂组合物的乳状液组成，紫杉烷溶解在其中且对应于下面通式(I)或(II)
特征在于它还包含阴离子表面活性剂。
2.根据权利要求1的组合物，特征在于所述可药用油选自大豆油和中链甘油三酯的混合物。
3.根据权利要求1的组合物，特征在于该卵磷脂是选自蛋卵磷酯或者大豆卵磷脂的天然卵磷脂或者选自磷脂酰胆碱的半合成卵磷脂。
4.根据权利要求1的组合物，特征在于阴离子表面活性剂是磷脂酰甘油或者磷脂酸。
5.根据权利要求4的组合物，特征在于磷脂酰甘油选自二月桂酰基磷脂酰甘油(DLPG)、二肉豆蔻酰基磷脂酰甘油(DMPG)或二棕榈酰基磷脂酰甘油(DPPG)。
6.根据权利要求4的组合物，特征在于磷脂酸选自二月桂酰基甘油基磷脂酸(DLPA)、二肉豆蔻酰基甘油基磷脂酸(DMPA)或者二棕榈酰基甘油基磷脂酸(DPPA)的钠盐。
7.根据权利要求1的组合物，特征在于磷脂酰胆碱或者卵磷脂与磷脂酰甘油或者磷脂酸的重量比优选地为500-3。
8.根据权利要求7的组合物，特征在于该重量比优选地为100-10。
9.根据权利要求1的组合物，特征在于该配制剂的pH通过加入酸被调节至3-7。
10.根据权利要求9的组合物，特征在于该酸选自盐酸、柠檬酸或者抗坏血酸。
11.根据权利要求1的组合物，特征在于加入缓冲液，该缓冲液为组氨酸。
12.根据权利要求1的组合物，特征在于溶液的等渗性通过加入甘油进行调节。
13.根据权利要求1的组合物，特征在于配制剂的重量组成在以下范围内
-油相10-30％
-卵磷脂或者磷脂酰胆碱0.6-5％
-磷脂酰甘油 0.01-0.2％
-甘油0-2.5％
-乙醇0-2％
-水 适量至100％
14.根据前述权利要求任一项的组合物，特征在于它们以丸剂形式通过静脉内给药。
15.根据前述权利要求任一项的组合物，特征在于所述颗粒具有为100纳米-1微米的尺寸。
16.制备根据前述权利要求任一项的组合物的方法，特征在于乳状液借助于微流化设备或高压匀化器进行制备。
全文摘要
本发明涉及基于紫杉醇类化合物的新型组合物，其由呈乳状液形式的这些衍生物的可注射配制剂。这些配制剂用于通过静脉内进行直接注射。
文档编号A61K47/44GK101820918SQ200880110996
公开日2010年9月1日 申请日期2008年10月9日 优先权日2007年10月10日
发明者P·罗泰斯, C·加乔恩 申请人:艾文蒂斯药品公司