专利名称：：一种藏茵陈提取物和制备方法及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种来源于青藏高原高寒生境特有的龙胆科(Gentianacese)喉毛花属植物长梗喉毛花植物的提取物及其制备方法，该植物在藏医药中被用作藏药藏茵陈广泛应用，该提取物具有显著的治疗肝胆疾病的药物活性。
背景技术：
：藏茵陈是生长在高寒地区的传统藏药，为藏药八珍之一，在我国，藏医药是少数几个具有自己独特理论体系的民族医学，其内容丰富、系统，是仅次于中医学的一个完整的民族医学体系。藏医药对肝胆疾病等多种急慢性疾病和疑难疾病有着独特的诊疗方法和验方，积累了丰富临床经验与方药，其中藏茵陈是藏医临床最为常用的治疗肝胆疾病的药物之一。藏茵陈来源于青藏高原高寒生境特有的几类植物，其原植物主要包括龙胆科獐牙菜属、花锚属、喉毛花属和扁蕾属数种植物以及虎耳草科等约二十几种植物，在我国主要分布于西藏、青海、四川等海拔30004800米的地区。藏茵陈在藏医药经典著作《晶珠本草》、《藏药晶镜本草》等典籍中均有记载，藏药名称为"蒂达"。藏医认为藏茵陈具有清热消炎、利胆退黄的功能，主治各种热病，尤其对肝胆实热性疾病具有独特疗效。《百科全书'藏医分巻》中汇集了历代以藏茵陈命名的著名方剂共十余方，其中八味藏茵陈散、二十五味藏茵陈散均属临床常用且疗效十分显著的方剂。近些年来以藏茵陈为主要原料经现代工艺加工制备的藏药新药有晶珠肝泰舒胶囊、蒂达丸、藏茵陈片/胶囊、急肝宁/乙肝宁等，均应用于临床主要用以治疗急慢性肝炎、胆囊炎等，疗效十分显著。以前，由于该草药主要是少数民族民间用药，对有效成分、作用机理和安全性都不是十分清楚，这就影响了该药在临床上的进一步应用。近年来从天然4药物、民族药物中寻找和开发有效的药物成为国内外研究工作的热点，藏药藏茵陈以长期的民间药用基础和确切的临床疗效倍受国内外学者的关注，对其化学、药理、临床应用及人工栽培等方面均展开了一系列研究，取得了很多进展。尤其是对该藏药的保肝作用及其化学物质基础进行了初步的实验研究，为发展藏药提供了研究基础。
发明内容针对藏茵陈植物的研究现状，本发明的目的就是通过实验性研究，阐明该药材的有效成分、作用机理和安全性，以便临床更好使用。本研究中藏茵陈来源于龙胆科(Gentianacese)喉毛花属植物长梗喉毛花CcwaWomaPedw"/w/a^w[RogleexD.Dou〗Holub的干燥全草，采于青海省共和县，经鉴定为龙胆科喉毛花属植物长梗喉毛花ComwtowaPe^^/w/amw[RogleexD.Dou]Holub。本发明人通过大量的试验研究，从藏茵陈中提取得到了含有总黄酮的藏茵陈有效部位(提取物)，该有效部位称为藏茵陈提取物，该提取物是藏茵陈粗提取物经过精制而制得，其中的有效成分明确，总黄酮类化学成分含量较高，达到了明确藏茵陈在治疗肝胆疾病方面的有效部位其相对比较明确的组成和含量的目的，从而提高了生物利用度。本发明的目的在于提供一种藏茵陈提取物，该提取物具有明显的治疗肝胆疾病的活性。本发明的目的还在于提供上述藏茵陈提取物的制备方法，该方法包括提取和精制纯化的过程，尤其是采用特定浓度的乙醇提取和洗脱以进行有效成分(部位)的富集等，使得藏茵陈提取物中具有治疗肝胆疾病作用的有效成分明确、含量高、杂质少，更有利于其在治疗肝胆疾病的制剂上的应用。本发明提供一种藏茵陈提取物，其中含有总黄酮，以该藏茵陈提取物重量为100%计，该总黄酮占至少20%。该藏茵陈提取物具有治疗肝胆疾病的活性。其中，本发明的藏茵陈提取物中的总黄酮占该藏茵陈提取物重量的20-75%。本发明提供的上述藏茵陈提取物，其含有的总黄酮是最主要的活性部位，该总黄酮中代表性化合物为l-0-(3-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基Cllli酮和齐墩果酸，其在该总黄酮中各自的含量为0.1。/。-10。/。wt，优选0.5X-2Xwt。艮P，本发明提供一种藏茵陈提取物，其中含有总黄酮，以该藏茵陈提取物重量为100%计，该总黄酮占至少20%;该总黄酮中含有l-O-P-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基帥酮和齐墩果酸，该l-0-卩-D-吡喃葡萄糖-3,8-二羟基-7-甲氧基帥酮和齐墩果酸每种在该总黄酮均占0.1%-10°/。wt，优选0.5^-2^wt。根据精制步骤的不同，总黄酮(或称为总黄酮类化合物)一般可达到藏茵陈提取物重量的20-75%，在本发明优选实施例中，总黄酮占30-65%;其中，上述总黄酮中包括l-0-p-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基Q(lj酮(喉毛花苷)、齐墩果酸、乌苏酸、1，3，8-三羟基-7-甲氧基口山酮、l-羟基-3，7-二甲氧基P山酮、l-羟基-3，7，8-三甲氧基叫酮、7，22-豆甾二烯3醇、十六酸、1,8-二羟基-3，7-二甲氧基Q山酮和当药黄素，上述这些化合物各自占所述总黄酮的重量的至少0.1%，一般为1%至20%，优选1%-15%;通常上述这些化合物可以占藏茵陈提取物总重的0.1-15%，优选0.5-10%;在优选实施例中，l-O-卩-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基^酮(喉毛花苷)等上述化合物的总的含量为藏茵陈提取物的20-75%，优选25-65%，更优选30-60%。经过药理试验测试，本发明的含有上述成分的提取物具有治疗肝胆疾病的药理活性，尤其对肝损伤具有显著的抑制作用。因此，本发明还提供了上述藏茵陈提取物，其为至少含有占该提取物重量20%的总黄酮的藏茵陈提取物，该提取物一般为藏茵陈药材经过乙醇回流提取得到，该藏茵陈提取物还含有l-0-(3-D-吡喃葡萄糖-3,8-二羟基-7-甲氧基Dllj酮(喉毛花苷)、齐墩果酸、乌苏酸、1，3，8-三羟基-7-甲氧基帥酮、1，8-二羟基-3-;7-二甲氧基叫酮和当药黄素，这些化合物各占藏茵陈提取物总重的至少0.1%，通常可占提取物总重0.5-10%。本发明还提供了上述藏茵陈提取物，其为至少含有占该提取物重量20%的总黄酮的藏茵陈提取物，该提取物优选为藏茵陈药材经过乙醇回流提取得到，该藏茵陈提取物含有的总黄酮其中包括含有1-0-(3-0-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基Q山酮、齐墩果酸、乌苏酸、1，3,8-三羟基-7-甲氧基Q山酮、l-羟基-3，7-二甲氧基n山酮、l-羟基-3,7,8-三甲氧基加酮、7,22-豆甾二烯3醇、十六酸、1,8-二羟基-3，7-二甲氧基n山酮和当药黄素，上述这些化合物各自占本发明的藏茵陈提取物总重的至少0.1%，通常可以占提取物总重0.5-10%,在本发明优选实施例中，l-0-(3-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基口llj酮(喉毛花苷)等上述化合物的总含量(重量)为本发明的藏茵陈提取物总重量的30-60。％。本发明还提供了上述藏茵陈提取物的制备方法，该制备方法的步骤包括将藏茵陈药材用至少2倍量(重量)的55-95%(wt%)的醇加热回流提取，优选同样的方法再重复提取至少1次，合并提取液，回收溶剂，得到藏茵陈的醇提取物，即，本发明的藏茵陈粗提取物。藏茵陈粗提取物的收率约为19%。本发明提供了一种藏茵陈粗提取物的制备(提取)方法，步骤为将藏茵陈药材用至少2倍量(重量)的55-95%(wt%)的醇加热回流提取，提取液回收溶剂，得到藏茵陈的醇提取物；其中上述步骤中提取用醇优选乙醇，.质量浓度一般为55-95%，更优选60-90%，最优选65-85%，为了节省成本以及综合考量，最优选70-80%,得到藏茵陈的粗提取物；上述藏茵陈粗提取物依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，收集乙酸乙酯萃取液，回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物TE，以及收集正丁醇萃取液，回收溶剂后得到正丁醇萃取物TN，合并TE和TN，得本发明的藏茵陈提取物。在本发明的优选实施例中，本发明的藏茵陈粗提取物的制备方法包括干燥植物全草用210倍量(重量)的60-90%(wt%)的乙醇加热回流提取l-3小时，例如2小时或者1.55小时中任一时间，同样的方法再提取2次，合并提取液，回收溶剂乙醇，得到藏茵陈的乙醇提取物，浓縮至大约0.95kg，得到藏茵陈粗提取物或藏茵陈总提取物浸膏ZYCT;藏茵陈粗提取物浸膏加水悬浮，加石油醚萃取，得到石油醚萃取液和水层A,水层A加入乙酸乙酯(约1:1)体积萃取至少1次，得到乙酸乙酯萃取液和水层B，乙酸乙酯萃取液回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物TE(95/950g)，水层B加入正丁醇(约l:l)体积萃取至少l次，得到正丁醇萃取液和水层，正丁醇萃取液回收溶剂后得到正丁醇萃取物TN(240/950g)，合并TE和TN，即得本发明的藏茵陈提取物。为了更加准确地得到具有抗肝胆损伤的有效成分和活性部位，在另一优选实施例中，本发明的藏茵陈提取物的制备方法包括将上述得到的正丁醇萃取物(TN)和乙酸乙酯萃取物(TIE)分别采用大孔吸附树脂色谱法进行粗分离，每种萃取物均采用40%、60%、80。％和95%质量浓度的乙醇进行梯度洗脱，其中包括乙酸乙酯萃取物上大孔吸附树脂柱并经过乙醇梯度洗脱后，依次得到40%乙醇洗脱液、60%乙醇洗脱液、805^乙醇洗脱液、95%乙醇洗脱液，收集并保留60%乙醇洗脱液(ES)和80%乙醇洗脱液(EE)，回收溶剂，得到藏茵陈的乙酸乙酯萃取再经60%80%乙醇洗脱的纯化物Y，其约占乙酸乙酯萃取物的重量的2/5-3/5，大约占藏茵陈总提取物浸膏ZYCT重量的1%-10%;正丁醇萃取物上大孔吸附树脂柱并经过乙醇梯度洗脱后，依次得到40%乙醇洗脱液、60%乙醇洗脱液、80%乙醇洗脱液、95%乙醇洗脱液，收集并保留60%乙醇洗脱液(BF)和80%乙醇洗脱液(BS)，回收溶剂，得到藏茵陈的正丁醇萃取再经60%80%乙醇洗脱的纯化物Z，其大约占正丁醇萃取物的重量的3/10-3/5，大约占藏茵陈总提取物浸膏ZYCT重量的6%-16%;合并上述的纯化物Y和纯化物Z，得到本发明的具有抗肝胆活性的藏茵陈提取物，其约占藏茵陈的有机溶剂(乙酸乙酯和正丁醇)萃取物重量的30-55%，约占藏茵陈总提取物浸膏ZYCT重量的10%-20%。经过吸附树脂色谱粗分得到的极性部位，经过除杂取精，得到的具有抗肝胆活性的藏茵陈提取物，然后采用Si-gel(硅胶柱色谱)(色谱溶剂系统为CHC13-MeOH20:13:1)、SephadexLH-20(凝胶柱色谱)(色谱溶剂系统为CHC13-MeOH10:13:1)和HPLC(制备用高效液相色谱)(色谱溶剂系统为MeOH-H2065:3580:20)方法进一步分离精制，将分离得到的单体化合物经物理常数测定，应用UV、MS、^-NMR和。C-NMR等现代波谱方法和技术对其结构进行鉴定，分离得到D16个化合物结构分别为卩-谷甾醇(卩-sitosterol，ENl)、胡萝卜苷(daucosterol，EN2)、1,5，8-三羟基-3-甲氧基卩山酮(1,5，8-trihydroxy-3-methoxyxanthone，EN3)、1,8画二羟基-3，7-二甲氧基口山酮(methylswertiamin,EN4)、1-二十六醇(l-hexacosanol，EN5)、二十八酸甲酯(MethylOctacosanoate,EN6):、乌苏酸(Ursolicacid，EE1)、1，3,8-三羟基-7-甲氧基Q山酮(1,3，8-tridroxy-7-methoxyxanthone，EE2)、l隱羟基-3,7-二甲氧基口山酮(l-droxy-3，7-dimethoxyxanthone，EE3)、l-羟基-3,7,8-三甲氧基n山酮(l-droxy陽3，7，8-trimethoxyxanthone,EE4)、7，22-豆甾二'烯3醇(stigmasta-7，22-3-dienol,EE5)、十六酸(hexadecanoicacid,EE6)、1,8-二羟基-3,7-二甲氧基口山酮(l,8-diidroxy-3,7-dimethoxyxanthone,ES1)、当药黄素(Swertisin，ES2)、l-0-p-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基n山酮(喉毛花苷，Comastomaside，BSl)、齐墩果酸(OleanolicAcid,BS2)等化合物。其中，藏茵陈提取物中最具代表性的药效学活性成分为总黄酮，以该藏茵陈提取物重量为100%为基准，该类化学成分占藏茵陈提取物重量的至少20%，优选40%-60%。本发明经过大量的工艺筛选实验，利用溶剂法对藏茵陈进行提取，并对其主要有效部位进行纯化富集工艺研究，得到主要有效成分含量较高的有效部位，并分离鉴定其中单体化学成分，如上述的1-0-3-0-吡喃葡萄糖-3,8-二羟基-7-甲氧基d山酮(喉毛花苷，Comastomaside)、齐墩果酸(OleanolicAcid)等化合物，因此得到了具有明显的治疗肝胆疾病的药理活性的提取物，筛选实验截选如下1、提取条件的选择采用乙醇为提取溶媒，先以超声提取、回流提取、水浴提取3种方法进行方法学考察，确定回流提取方法提取率较高。92、正交设计实验优选提取工艺(1)样品处理方法样品经等前处理后，按正交设计的因素水平进行提取，提取液进行经脱脂等处理，得供试样品。(2)方法学考察以芦丁为指标成分，标准曲线的回归方程Y-12.968x-0.0189，R2-0.9992,线性良好，按分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，用紫外分光光度法在510nm处测定总黄酮含量，以总黄酮含量为评价标准。(3)工艺的优选根据药材性质和生产实际要求，拟定影响提取率的3个考察因素，液料比(A)、乙醇浓度(B)和提取时间(C)，分别设立3个水平，编制因素水平表进行工艺优选实验；按(2)项中方法学进行正交实验，分别测定实验样品中总黄酮的含量；实验研究表明乙醇浓度对其有显著性影响，且对总黄酮的影响程度依次为乙醇浓度〉液料比>提取时间，通过正交试验结果直观分析和方差分析得出藏茵陈总黄酮提取的最佳工艺条件(附表l、2和3)。(4)实验结果实验研究表明乙醇的浓度对实验结果具有显著性影响，且每个因素对指标的影响的大小顺序为B>A>C，即乙醇浓度对实验结果影响最大，料液比次之，提取时间对该工艺的影响最小。从方差分析的结果也可以看出，最佳的提取工艺为A1B3C3。由直观分析可以看出，实验组3、6、9中总黄酮的产率均较高，且相差不大，综合分析各组实验条件，综合考虑溶剂提取杂质情况，且从经济、环保的角度考虑，长时间的提取会带来的经济成本，对环境的污染，所以综合考虑选用工艺A1B3C2，即采用6倍量50%乙醇提取2小时。(5)验证行实验工艺筛选完成后，为考察上述最佳工艺的稳定性，按该工艺条件与方法进行重复性验证试验3次，分别测定喉毛花总黄酮的含量，提取率分别为1，510°/。，1.742%和1.720°/。。试验结果普遍优于正交实验表的试验结果，重现性好，证明工艺稳定可行。10表l因素水平表<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>采用常规溶剂乙醇提取法提取藏茵陈的提取物，经大量的筛选实验验证，约50%(wt%)浓度的乙醇溶液作为提取溶剂极性过大，可能会增加提取物中极性杂质的含量，改用75%(wt%)浓度的乙醇溶液进行提取得到的藏茵陈的乙醇提取物，经反复实验验证，其中极性杂质的含量明显减少。因此形成了本发明提取方法的优选方案。优选的提取方法具体如下千燥植物全草5kg，经粗略粉碎，用4-8倍量(重量)的70-80%(wt%)的乙醇浸泡，更优选6倍量(重量)的大约75%(wt%)的乙醇浸泡2h，然后加热回流提取至少1小时或者2小时或者更长时间，优选同样的方法再提取2次，合并提取液，回收溶剂，得到藏茵陈的乙醇提取物。本发明还进行了藏茵陈中化学成分的分离和鉴定方面的大量实验，如下1、藏茵陈粗提取物，提取流程如上所述。2、有效部位富集和纯化经溶剂法提取制备的总提取物浸膏ZYCT(950g)，再经系统溶剂法逐步分:'离得到四个不同极性部位。分离流程如下上述所得到的藏茵陈的乙醇提取物或者将其浓縮得到的藏茵陈总提取物浸膏(ZYCT)，加水悬浮，加石油醚萃取，得到石油醚萃取液和水层A，其中石油醚萃取液回收溶剂后得到石油醚萃取物TP(25/950g)，水层A加入乙酸乙酯(约l:l)体积萃取至少l次，得到乙酸乙酯萃取液和水层B，乙酸乙酯萃取液回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物TE(95/950g)，水层B加入正丁醇(约l:l)体积萃取至少l次，得到正丁醇萃取液和水层，正丁醇萃取液回收溶剂后得到正丁醇萃取物TN(240/950g)。在活性筛选试验结果基础上，针对具有抗肝损伤活性的2个有效部位正丁醇萃取物(TNO和乙酸乙酯萃取物(TE)中的化学成分进行富集纯化。其富1纯化流程如下乙酸乙酯萃取物(90g)溶解后，优选20^wt的乙醇溶解，上AB-8大孔吸附树脂柱进行吸附杂质的粗分离，采用40%、60%、80%和95%质量浓度的乙醇进行梯度乙醇洗脱，依次得到40%乙醇洗脱(EF，8g)、60%乙醇洗脱(ES，12g)、80%乙醇洗脱(EE，29g)、95%乙醇洗脱(EN，40g)。在优选实施例中，乙酸乙酯萃取物用20。/QWt的乙醇超声溶解，效果更好。正丁醇萃取物(230g)溶解后优选20^wt的乙醇溶解，上AB-8大孔吸附树脂柱进行吸附杂质的粗分离，采用40%、60%、80%和95%质量浓度的乙醇进行梯度乙醇洗脱，依次得到40%乙醇洗脱(BT，42g)、60%乙醇洗脱(BF，45g)、80%乙醇洗脱(BS，52g)、95%乙醇洗脱(BN，31g)。在另一优选实施例中，正丁醇萃取物用20Q/。wt的乙醇超声溶解，效果更好。经上述富集纯化后得到的部位，其中ES、EE部位和BF、BS部位均为藏茵陈中主要有效成分富集部位，因此，将此4个部位进行合并，合并后得到的藏茵陈有效部位，在本发明中称为藏茵陈提取物。3.活性部位的筛选试验采用四氯化碳致急性肝损伤小鼠的实验动物30只，考察藏茵陈粗提取物(ZYCT)、石油醚提取部位(TP)、乙酸乙酯提取部位(TE)和正丁醇提取部位(TN)对试验动物血清中ALT、AST的影响，初步考察其抗肝损伤作用。试验结果表明给药7天后，与空白对照组比较，CCU模型组小鼠血清ALT、AST含量显著升高；粗提取物(ZYCT)、正丁醇萃取物(TN)和乙酸乙酯萃取物(TE)均有明显的降低实验性肝损伤动物血清中ALT和AST水平的作用，石油醚萃取物(TP)无明显改变。实验结果提示，藏茵陈粗提取物具有抗肝损伤作用，其中TN和TE部位为其抗肝损伤作用的活性部位。经过分离和鉴定，实验证明，60%以下的乙醇以及95%以上的乙醇洗脱得到的洗脱液，虽然可能包含某种类型的有药理活性的化合物，但这些类化合物更多的是几乎无抗肝胆疾病活性或者这些成分起到不利于治疗肝胆疾病甚至反而有害的副作用，正丁醇萃取物和乙酸乙酯萃取物采用乙醇浓度在60%以下&及95%以上洗脱得到的洗脱液包含的成分并不适合本发明欲达到的安全有效的治疗肝胆疾病的目的，即，不是本发明所要求保护的藏茵陈提取物。因此，本发明提供的藏茵陈提取物的提取方法为(1)将藏茵陈药材用至少2倍重量的质量浓度为55-95%的醇回流提取，提13取液回收溶剂，得到藏茵陈的粗提取物；(2)上述步骤(1)得到的藏茵陈的粗提取物依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，收集乙酸乙酯萃取液，回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物；收集正丁醇萃取液，回收溶剂后得到正丁醇萃取物；(3)合并乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；提取之后的精制方法，即富集纯化方法，优选为-将乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物分别采用大孔吸附树脂色谱法进行质量浓度为40-95%的乙醇的梯度洗脱，收集该乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物各自的40-95%乙醇洗脱液，回收溶剂，合并，得到藏茵陈提取物。上述富集纯化方法更优选为乙酸乙酯萃取物上大孔吸附树脂柱并经过质量浓度为40%、60%、80%和95%的乙醇梯度洗脱后，依次得到40%乙醇洗脱液、60%乙醇洗脱液、80%乙醇洗脱液、95%乙醇洗脱液，收集并保留60%乙醇洗脱液和80%乙醇洗脱液，回收溶剂，得到藏茵陈的乙酸乙酯萃取再经60%80%乙醇洗脱的纯化物￥;正丁醇萃取物上大孔吸附树脂柱并经质量浓度为40%、60%、80%和95%的梯度洗脱后，依次得到40%乙醇洗脱液、60%乙醇洗脱液、80%乙醇洗脱液、95%乙醇洗脱液，收集并保留60%乙醇洗脱液和80%乙醇洗脱液，回收溶剂，得到藏茵陈的正丁醇萃取再经60%80%乙醇洗脱的纯化物Z;合并上述的纯化物Y和纯化物Z，得到本发明的藏茵陈提取物。在本发明的优选实施例中，具有活性作用的藏茵陈提取物的制备方法的具体步骤为l.有效部位的提取藏茵陈干燥植物全草，经粗略粉碎，用4-8倍量(重量)的70-80%(wt%)的乙醇浸泡，更优选6倍量(重量)的大约75%(wt%)的乙醇浸泡2h，然后加热回流提取至少1小时或者2小时或更长时间，同样的方法提取2次，合并提取液，回收溶剂，得到藏茵陈的乙醇提取物，或将其浓缩成大约相当于干燥的原料药材重量的l/6-l/4的藏茵陈粗提取物或藏茵陈总提取物浸膏ZYCT(950g/5kg)。2.有效部位的富集上述所得到的藏茵陈粗提取物或藏茵陈总提取物浸膏(ZYCT)，加水(水与总提取物浸膏的质量比例约为2:1)使其悬浮，加石油醚萃取(石油醚与水的体积比例约为2:1)，得到石油醚萃取液和水层A，弃去石油醚萃取液或者回收溶剂另作他用，在水层A中加入乙酸乙酯(水的体积与乙酸乙酯的体积约1:1)萃取至少1次，得到乙酸乙酯萃取液和水层B，水层B加入正丁醇(水的体积与正丁醇的体积约1:1)萃取至少1次，得到正丁醇萃取液和水层，弃去水层；将乙酸乙酯萃取液回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物TE，其大约为藏茵陈总提取物浸膏ZYCT的质量的1/10(95/950g)，将正丁醇萃取液回收溶剂后得到正丁醇萃取物TN，其大约为藏茵陈总提取物浸膏ZYCT的质量的1/4(240/950g);实验结果提示，藏茵陈提取物具有抗肝损伤作用，其中上述得到的TN和TE部位为其抗肝损伤作用的活性部位，也是藏茵陈提取物，该活性部位占藏齒陈总提取物浸膏ZYCT重量的1/2-1/3(335/950)。3.有效部位的纯化将正丁醇萃取物(TN)和乙酸乙酯萃取物(TE)分别采用大孔吸附树脂色谱法进行粗分，每种萃取物均釆用40%、60%、80%和95%质量浓度的乙醇进行梯度洗脱，其中乙酸乙酯萃取物(90g)上大孔吸附树脂柱并经过乙醇梯度洗脱后，依次得到40%乙醇洗脱液、60%乙醇洗脱液、80%乙醇洗脱液、95%乙醇洗脱液，收集并保留60%乙醇洗脱液(ES)和80%乙醇洗脱液(EE)，回收溶剂，得到藏茵陈的乙酸乙酯萃取再经60%80%乙醇洗脱的纯化物￥(约41g)，其大约占乙酸乙酯萃取物的重量的2/5-3/5(41/90)，大约占藏茵陈总提取物浸膏ZYCT重量的1%-10%(41/950)，其中包括60%乙醇洗脱的纯化物(约12g)和80%乙醇洗脱的纯化物(约29g);正丁醇萃取物(230g)上大孔吸附树脂柱并经过乙醇梯度洗脱后，依次得到40%乙醇洗脱液、60%乙醇洗脱液、80%乙醇洗脱液、95%乙醇洗脱液，收集并保留60%乙醇洗脱液(BF，45g)和80%乙醇洗脱液(BS，52g)，回收溶剂，得到藏茵陈的正丁醇萃取再经60X80X乙醇洗脱的纯化物Z(约97g)，其大约占正丁醇萃取物的重量的3/10-3/5(97/230)，大约占藏茵陈总提取物浸膏ZYCT重量的6%-16%(97/950),其中包括60%乙醇洗脱的纯化物(约45g)和80%乙醇洗脱的纯化物(约52g);合并上述的纯化物Y和纯化物Z，得到本发明的具有肝胆活性的藏茵陈提取物，其约占藏茵陈的有机溶剂(乙酸乙酯和正丁醇)萃取物重量的30-55%(138/320)，约占藏茵陈总提取物浸膏ZYCT重量的10%-20%(138X『335簡』/950)。上述经过吸附树脂色谱粗分得到的极性部位，经过除杂取精，得到的具有抗肝胆活性的藏茵陈提取物，再进一步经过反复采用Si-gel(硅胶柱色谱)、SephadexLH-20(凝胶柱色谱)和HPLC(制备用高效液相色谱)的方法进行进一步的分离精制，从中得到数个化合物所组成的有效成分和活性部位，即，本发明的藏茵陈提取物所含有的化合物包括l-O-P-0-妣喃葡萄糖-3,8-二羟基-7-甲氧基口山酮、齐墩果酸、乌苏酸、1，3，8-三羟基-7-甲氧基Q山酮、l-羟基-3，7-二甲氧基口山酮、l-羟基-3，7，8-三甲氧基n山酮、7，22-豆甾二烯3醇、十六酸、1，8-二羟基-3，7-二甲氧基口llj酮、当药黄素。因此，本发明的藏茵陈活性部位，即本发明的藏茵陈提取物，该提取物为经过上述制备方法(包括提取、分离、纯化的制备步骤)得到的纯化物Y和纯化物Z的混合物，以该提取物的总重量为100%做为计算基准，该提取物中含有总黄酮，以该藏茵陈提取物总重为100%计，该总黄酮约占40-60%。其中，该总黄酮中包括l-0-P-D-吡喃葡萄糖-3,8-二羟基-7-甲氧基口ili酮(喉毛花苷，BSl)、齐墩果酸(BS2)、乌苏酸(EE1)、1，3，8-三羟基-7-甲氧基Q山酮(EE2)、l-羟基-3，7-二甲氧基口山酮(EE3)、l-羟基-3，7，8-三甲氧基卩山酮(EE4)、7，22-豆甾二烯3醇(EE5)、十六酸(EE6)、1，8-二羟基-3，7-二甲氧基,酮(ES1)和当药黄素(ES2)。其中，最主要的活性部位的代表性化合物为l-0-(3-D-吡喃葡萄糖-3,8-二羟基-7-甲氧基帥酮(喉毛花苷，BSO及齐墩果酸(BS2)，其各自的含量(wt%)为0.1%-10%，优选0.5%-2%。SephadexLH-20是凝胶色谱的一种，种类为交联葡聚糖凝胶(Sephadex),依据不同的溶剂系统，SephadexLH-20适用于分离不同极性的化学成分。本发明中应用溶剂系统CHC13-MeOH(10:13:1)进行化学成分的柱色谱分离，得到上述化学成分1，3，8-三羟基-7-甲氧基口山酮(EE2)、l-羟基-3，7-二甲氧基口山酮(EE3)、l-羟基-3，7，8-三甲氧基帥酮(EE4)、7，22-豆甾二烯3醇(EE5)、十六酸(EE6)、1，8-二羟基-3，7-二甲氧基Q山酮(ES1)和当药黄素(ES2)。高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography,HPLC)也叫高压液相色谱、高速液相色谱等。本发明应用溶剂系统MeOH-H20(65:3580:20)进行化学成分分离纯化，得到上述化学成分1-0-卩-0-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基mlj酮(喉毛花苷，BS1)、齐墩果酸(BS2)和乌苏酸(EE1)。由于本发明的提取物中所含有的有效成分为混合物，其所含有的经检测已经明确的化学成分主要为黄酮类化合物，有效部位中具体的化合物成分包括l-0-(3-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基Qllj酮(喉毛花苷)、齐墩果酸、乌苏酸、1，3,8-三羟基-7-甲氧基口山酮、1-羟基-3,7-二甲氧基Q山酮、l-羟基-3，7，8-三甲氧基口山酮、7，22-豆甾二烯3醇、十六酸、1，8-二羟基-3，7-二甲氧基口山酮、当药黄素等。迄今为止，没有文献公幵报道藏茵陈在治疗肝胆疾病等方面的有效成分具体包括那些成分，其合理组成是什么，优选的治疗量是多少，这样势必导致出现量效关系不容易把握、疗效不稳定等缺陷性特点，尤其对于治疗黄疸、肝炎等的中药剂型来说，组成成分确切、含量准确能促使更易于把握制剂质量，是制剂以及临床用药的关键。申请人发现，本发明的制备方法得到的提取物中，最具代表性的药效学成分为总黄酮，实验证明，本发明的藏茵陈提取物其治疗效果是最佳的。确切的有效成分以治疗有效量的黄酮类化合物为主，且排除P-谷甾醇(g-sitosterol,EN1)、胡萝卜苷(daucosterol，EN2)、1，5，8-三羟基-3-甲氧基口山酮(1，5,8画trihydroxy-3-methoxyxanthone，EN3)、1，8-二羟基画3，7-二甲氧基口山酮(methylswertiamin，EN4)、l漏二十六醇(l-hexacosanol，EN5)、二十八酸甲酯(MethylOctacosanoate，EN6)等无效或几乎无效的杂质类成分。本发明还进行了大量的实验检测，结果证实，藏茵陈提取物中以l-O-P-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基帥酮(喉毛花苷，Comastomaside)为代表的总黄酮类化合物为主。本发明的藏茵陈提取物中含有总黄酮的量一般在30-60%。通过跟踪研究，不同批次不同采收季节的藏茵陈植物，经过上述同样的提取制备，得到的藏茵陈提取物中总黄酮的含量可达到该藏茵陈提取物总重20。％，甚至质量更高的原料药经过重复上述提取精制分离除杂过程后，藏茵陈提取物中总黄酮的含量可达到藏茵陈提取物总重的65%，一般可达到30-60Q%。本发明还提供了一种药物组合物，其含有临床治疗有效量的上述藏茵陈提取物和药物辅料。上述药物组合物包括口服剂型和注射剂型。口服制剂包括片剂(普通片、分散片、缓/控释片、泡腾片、口崩片)、胶囊剂、颗粒剂、滴丸、口服液、栓剂力本发明还提供了所述藏茵陈提取物在制备治疗肝胆疾病药物中的应用。及，含有藏茵陈提取物的组合物在制备治疗肝胆疾病药物中的应用。本发明的藏茵陈提取物药效试验以及结果如下本发明下述的"藏茵陈粗提取物"是指藏药材藏茵陈的乙醇提取物，或是藏茵陈的乙醇提取物浓縮成大约相当于药材原料重量的1/6-1/4的藏茵陈的乙醇提取物浸膏，简称为藏茵陈粗提取物或者藏茵陈总提取物浸膏ZYCT。一.采用四氯化碳致急性肝损伤小鼠的实验动物30只，考察藏茵陈粗提取物(ZYC丁)、石油醚提取部位(TP)、乙酸乙酯提取部位(TE)和正丁醇提取部位(TN)对试验动物血清中ALT、AST的影响，考察抗肝损伤作用。试验结果给药7天后与空白对照组比较，CCU模型组血清ALT、AST含量显著升高；粗18提取物(TZYC)、正丁醇萃取物(TN)和乙酸乙酯萃取物(TE)均明显降低实验性肝损伤动物血清中ALT和AST水平，石油醚萃取物(TP)无明显改变。实验结果提示，藏茵陈粗提取物具有抗肝损伤作用，其中乙酸乙酯萃取和正丁醇萃取部分是其抗肝损伤作用的活性部位，而藏茵陈粗提取物中的石油醚萃取物部分则不具有抗肝损伤的活性作用。二.应用经典的实验性肝损伤动物模型(CC14致急性肝损伤小鼠)，60只小鼠分为6组，分别为正常组、模型组、联苯双酯对照组、藏茵陈提取物(ZTG)高、中、低剂量组。除正常组外，其余各组用50%四氯化碳腹腔注射造模。其中4组动物分别给药藏茵陈提取物高、中、低剂量和阳性对照药联苯双酯，正常和模型组仅给予等量生理盐水，l次/天。各组动物第12周后取血分离血清，检测血清肝功能生化指标，同时采用心内灌注固定法取大鼠肝脏做石蜡切片，观察肝脏病理形态学的改变。实验结果1.藏茵陈提取物对CC14致急性肝损伤小鼠血清ALT、AST的影响结果显示(见表1)，与空白对照组比较，CC14模型组小鼠血清ALT、AST含量显著升高(P<0.01);与模型组比较，藏茵陈提取物300、200mg/kg两个剂量组和联苯双酯组ALT、AST含量明显降低(PO.05或P〈0.01)，藏茵陈提取物100mg/kg剂量组对ALT、AST含量的降低无统计学意义。表1藏茵陈提取物对CC14致急性肝损伤小鼠血清ALT、AST的影响(n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>与正常组相比，AP0.05,AAP0.01与模型组相比*P<0.05，**P<0.012.肝组织HE染色观察肝组织标本经HE染色后进行光学显微镜下观察，发现除正常对照组外各组大鼠肝脏均显示了明显的组织学病理改变。(1)正常对照组正常对照组大鼠肝组织无异常现象。光镜观察可见该组肝组织中肝细胞索排列整齐，肝小叶结构清晰完整，无纤维组织增生及汇管区扩大，也无肝细胞脂肪变性、坏死，无炎细胞浸润。(2)模型组模型组大鼠肝组织病理损害严重。肝细胞索排列紊乱，部分肝窦消失，肝小叶结构破坏，胶原增生结缔组织沉入肝组织分割包绕肝细胞，分隔出大量大小不等的假小叶，假小叶内肝细胞明显肿胀、变性，中央静脉周围见有少量坏死肝细胞，并伴有炎性细胞浸润。(3)给药组藏茵陈提取物大、中剂量组和联苯双酯组治疗效果较好，肝细胞索排列基本清晰，肝小叶结构轻度破坏，未出现假小叶，少量炎细胞浸润，肝细胞脂肪变性较轻；藏茵陈提取物小剂量组治疗效果较不明显，可见假小叶已形成，肝细胞脂肪变性、坏死及细胞肿胀较严重。本发明的药理实验中涉及的提取物按照实施例1的方法制得。利用本发明的藏茵陈提取物对实验性肝损伤动物模型进行实验研究，通过观察藏茵陈提取物对实验性肝损伤动物血清肝功能指标和肝组织显微结构的影响，可以看出本发明的藏茵陈提取物具有抗肝胆损伤的药理活性。具体实施例方式以下实施例是为了更详细地说明本发明，并非对本发明构成限制。实施例1藏茵陈粗提取物干燥植物全草5kg，经粗略粉碎，用6倍量(重量)的75%(wt%)的乙20醇浸泡2小时，然后加热回流提取1-3小时，例如2小时或者1.55小时中任一时间，同样的方法再提取2次，合并提取液，回收溶剂乙醇，得到藏茵陈乙醇提取物，浓縮至约0.95kg，得到藏茵陈粗提取物或藏茵陈总提取物浸膏ZYCT。藏茵陈粗提取物的收率约为19%;其中藏茵陈提取物中总黄酮的含量为藏茵陈提取物总重的20^wt。经过检测和药理实验验证，该藏茵陈粗提取物具有抗肝胆损伤的药理作用。检测方法包括先采用有机溶剂(包括石油醚、乙酸乙酯和正丁醇)萃取，再采用大孔吸附树脂色谱法进行乙醇梯度洗脱和分离，然后采用Si-gel(硅胶柱色谱)、SephadexLH-20(凝胶柱色谱)和HPLC(制备用高效液相色谱)的方法进行进一步的分离精制，最后应用UV、MS、iH-NMR和13C-NMR等现代被谱方法和技术对其结构进行鉴定，分离得到以l-0-P-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基口山酮(喉毛花苷，051^31011^31€16，;631)、齐墩果酸(0]^1101^Acid，BS2)、乌苏酸(Ursolicacid，EE1)、1，3，8-三羟基-7-甲氧基Q山酮(1，3,8-tridroxy-7-methoxyxanthone，EE2)、l-羟基-3，7-二甲氧基口山酮(l-droxy-3，7-dimethoxyxanthone，EE3)、1-羟基-3,7，8-三甲氧基口山酮(l-droxy-3,7，8-trimethoxyxanthone，EE4)、7，22-豆甾二烯3醇(stigmasta-7,22-3-dieno1，EE5)、十六酸(hexadecanoicacid，EE6)、1，8-二羟基-3，7-二甲氧基口山酮(l，8-diidroxy-3，7-dimethoxyxanthone，ES1)、当药黄素(Swertisin，ES2)为代表的化合物。实施例2本发明的藏茵陈提取物的有效部位的制备实施例l得到的藏茵陈的粗提取物或藏茵陈总提取物浸膏(ZYCT)(950g)，加水(水与总提取物浸膏的质量比例约为2:1)使其悬浮，加石油醚萃取(石油醚与水的体积比例约为2:1)萃取，得到石油醚萃取液和水层A，水层A加入约与水层A等体积的乙酸乙酯(萃取23次，得到乙酸乙酯萃取液和水层B，乙酸乙酯萃取液回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物TE(大约是95g)，水层B加入约与水层B等体积的正丁醇萃取23次，得到正丁醇萃取液和水层，正丁醇萃取液回收溶剂后得到正丁醇萃取物TN(大约240g)，收集TE和TN，得藏茵陈提取物。藏茵陈提取物收率(占干燥的藏茵陈药材)约为6.7%(335/5000g);其中总黄酮的含量为该藏茵陈提取物总重的40%。采用四氯化碳致急性肝损伤小鼠的实验动物30只，考察藏茵陈粗提取物(ZYCT)、石油醚提取部位(TP)、乙酸乙酯提取部位(TE)和正丁醇提取部位(TN)对试验动物血清中ALT、AST的影响，考察其抗肝损伤作用。试验结果表明给药7天后，与空白对照组比较，CC14模型组小鼠血清ALT、AST含量显著升高；粗提取物(ZYCT)、正丁醇萃取物(TN)和乙酸乙酯萃取物(TE)均有明显的降低实验性肝损伤动物血清中ALT和AST水平的作用，石油醚萃取物(TP)无明显改变。实验结果提示和证明，藏茵陈粗提取物具有抗肝损伤作用，其中乙酸乙酯萃取和正丁醇萃取部分是其抗肝损伤作用的活性部位，而藏茵陈粗提取物中的石油醚萃取物部分则不具有抗肝胆损伤的活性作用。经过检测和药理实验验证，检测方法同实施例l，该藏茵陈提取物(即，藏茵陈的有效部位)具有抗肝胆损伤的药理作用。实施例3.藏茵陈提取物(藏茵陈有效部位或藏茵陈活性部位)的化学成分的分离和鉴定。(1)化学成分的系统分离实施例2得到的TE，即，乙酸乙酯萃取物(90g)，用20^wt的乙醇超声溶解，上AB-8大孔吸附树脂柱进行吸附杂质的粗分离，依次采用40%、60%、80%和95%质量浓度的乙醇进行梯度乙醇洗脱，依次得到40%乙醇洗脱(EF，8g)、60%乙醇洗脱(ES，12g)、80%乙醇洗脱(EE，29g)、95%乙醇洗脱(EN，40g)，为吸附树脂色谱粗分得到的四个极性部位，再进一步采用Si-gd、SephadexLH-20和HPLC的方法进行分离精制，得到化合物EN1、2、3、4、5、6，化合物EE1、2、3、4、5、6，以及化合物ES1、2、3。实施例2得到的TN，即，正丁醇萃取物(230g)用20^wt的乙醇超声溶解，上AB-8大孔吸附树脂柱进行吸附杂质的粗分离，依次采用40%、60%、800%和95%质量浓度的乙醇进行梯度乙醇洗脱，依次得到40%乙醇洗脱(BT，.42g)、60X乙醇洗脱(BF，45g)、80X乙醇洗脱(BS，52g)、95X乙醇洗脱(BN，31g)，为吸附树脂色谱粗分得到的四个极性部位，再进一步采用Si-gel、SephadexLH-20和HPLC的方法进行分离精制，得到化合物BS1和BS2。(2)化学成分的鉴定将分离得到的单体化合物经物理常数测定，应用UV、MS、'H-NMR和'^-NMR等现代波谱方法和技术对其结构进行鉴定，分离得到的16个化合物的结构分别为卩-谷甾醇(l3-sitostero1,EN1)、胡萝卜苷(daucosterol，EN2)、1，5，8-三羟基-3-甲氧基口山酮(1，5，8-trihydroxy-3画methoxyxanthone，EN3)、1，8-二羟基-3,7-二甲氧基口山酮(methylswertiamin，EN4)、1-二十六醇(l-hexacosanol，EN5)、二十八酸甲酉旨(MethylOctacosanoate，EN6)、乌苏酸(Ursolicadd,EE1)、1，3，8-三羟基-7-甲氧基卩山酮(l，3，8-tridroxy-7-methoxyxanthone，EE2)、l-羟基-3，7-二甲氧基口山酮(l-droxy-3,7-dimethoxyxanthone，EE3)、l-羟基-3，7，8-三甲氧基口山酮(l-droxy-3，7，8-trimethoxyxanthone，EE4)、7，22-豆甾二j:希3醇(stigmasta-7，22-3-dieno1，EE5)、十六酸(hexadecanoicacid，EE6)、1，8-二羟基-3，7-二甲氧基口山酮(1，8画diidroxy-3,7-dimethoxyxanthone，ES1)、当药黄素(Swertisin，ES2)、l-0-卩-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基。山酮(喉毛花苷，Comastomaside，BS1)、齐墩果酸(OleanolicAcid,BS2)。上述分离的化合物在藏茵陈提取物总重中，每种化合物的含量(wt%)—般分布在0.1%-10%之间，集中在0.5%-5%之间。上述化合物组成了本发明的藏茵陈提取物的总黄酮，经常规定量方法测定，该藏茵陈提取物中总黄酮的含量为藏茵陈提取物总重的40%。经过药理实验验证，该藏茵陈提取物中的含有P-谷甾醇((3-sitostero1，EN1)、胡萝卜苷(daucosterol，EN2)、1，5，8-三羟基-3-甲氧基口山酮(1，5，8-trihydroxy國3-methoxyxanthone，EN3)、1，8-二羟基-3，7-二甲氧基H山酮23(methylswertiamin，EN4)、1-二十六醇(l-hexacosanol，EN5)、二十八酸甲酯(MethylOctacosanoate，EN6)上述化合物的部位不具有抗肝胆损伤的药理作用；而含有l-0-p-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基卩山酮(喉毛花苷，Comasto應ide，BS1)、齐墩果酸(OleanolicAcid,BS2)、乌苏酸(Ursolicacid，EE1)、1，3，8画三羟基-7-甲氧基口山酮(1，3,8-tridroxy-7-methoxyxanthone，EE2)、1-羟基-3,7-二甲氧基口山酮(l-droxy-3,7-dimethoxyxanthone，EE3)、l-羟基-3，7，8-三甲氧基口山酮(l-droxy-3，7，8-trimethoxyxanthone，EE4)、7，22-豆甾二烯3醇(stigmasta-7，22-3-dienol，EE5)、十六酸(hexadecanoicacid，EE6)、1，8-二羟基-3，7-二甲氧基卩山酮(1,8-diidroxy-3,7-dimethoxyxanthone，ES1)、当药黄素(Swertisin，ES2)上述化合物的部位则具有抗肝胆损伤的药理活性。通过跟踪研究，不同批次不同采收季节的藏茵陈植物，经过上述同样的提取制备，得到的藏茵陈提取物中总黄酮的含量可达到该藏茵陈提取物总重的20%，甚至质量更高的原料药经过重复上述提取精制分离除杂过程后，藏茵陈提取物中总黄酮的含量可以达到藏茵陈提取物总重的65%，一般均可达到30-60%。对上述藏茵陈提取物与对照品藏茵陈提取物A和B进行简单效果对比实验，其中藏茵陈提取物A是现有技术(文献方法)提取得到的藏茵陈提取物，藏茵陈提取物B是含有总黄酮，但其中总黄酮含量不足20^wt，及该总黄酮不含有或微量含有(含量低于0,l^wt)l-O-P-D-吡喃葡萄糖-3，8-二羟基-7-甲氧基0山酮和齐墩果酸的藏茵陈提取物；经过初步比较发现，只有藏茵陈提取物中含有至少20%wt的总黄酮且其该总黄酮中含有至少0.1%wt的l-0-(3-D-吡喃葡萄糖-3,8-二羟基-7-甲氧基帥酮和齐墩果酸的组才显示出显著的抗肝胆损伤的活性。实施例4藏茵陈提取物的重复实验重复本发明提取纯化过程，不同批次的实验得到不同批次的藏茵陈提取物，其中总黄酮的含量分别为藏茵陈提取物总重的28%、33%、41%、45%、46%55%、61%等。经过科学方法统计，总黄酮在藏茵陈提取物中占据重量百分比数据显示，更多数据集中在总黄酮占藏茵陈提取物30-60%(重量)之间。实施例5含有藏茵陈提取物的组合物(胶囊剂型)的制备取实施例2的方法制得的藏茵陈提取物250g,淀粉100g，以20%乙醇为粘合剂制粒，装胶囊，即得。实施例6含有藏茵陈提取物的组合物(分散片剂型)的制备取实施例2的方法制得的藏茵陈提取物25g，加淀粉50g，混匀，以淀粉桨为粘合剂，制粒，烘干，整粒，压片，即得。实施例7含有藏茵陈提取物的组合物(泡腾片剂型)的制备处方枸橼酸60g，碳酸氢钠50g，实施例2的方法制得的藏茵陈提取物500g,淀粉400g，共制成1000片。制备工艺将处方量的枸櫞酸加取实施例2的方法制得的藏茵陈提取物和适量淀粉制粒，碳酸氢钠加剩余的淀粉制粒，分别干燥后，混合，压片即得。实施例8含有藏茵陈提取物的组合物(颗粒剂)的制备取实施例2的方法制得的提取物250g,葡萄糖100g，糊精200g，以稀淀粉糊为粘合剂制粒，分装，即得。权利要求1、一种藏茵陈提取物，其中，该藏茵陈提取物含有总黄酮，以该藏茵陈提取物总重为100％计，该总黄酮占该藏茵陈提取物的20-75％。2、如权利要求1所述的藏茵陈提取物，其中，该藏茵陈提取物中所述总黄酮包括l-CH3-D-吡喃葡萄糖-3,8-二羟基-7-甲氧基卩llj酮、齐墩果酸、乌苏酸、1，3，8-三羟基-7-甲氧基叫酮、l-羟基-3,7-二甲氧基口山酮、l-羟基-3,7，8-三甲氧基帥酮、7，22-豆甾二烯3醇、十六酸、1,8-二羟基-3，7-二甲氧基叫酮、当药黄素，上述化合物各占所述总黄酮的重量的0.1%-10%。3、如权利要求1所述的藏茵陈提取物，其由以下方法制得(1)将藏茵陈药材用至少2倍重量的质量浓度为55-95%的醇回流提取，提取液回收溶剂，得到藏茵陈的粗提取物；(2)上述步骤(1)得到的藏茵陈的粗提取物依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，收集乙酸乙酯萃取液，回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物；收集正丁醇萃取液，回收溶剂后得到正丁醇萃取物；(3)合并乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物，得到所述的藏茵陈提取物。4、如权利要求3所述的藏茵陈提取物，其中，步骤(2)包括藏茵陈提取物加水，然后加石油醚萃取，得到石油醚萃取液和水层A，水层A加入乙酸乙酯萃取至少1次，得到乙酸乙酯萃取液和水层B，乙酸乙酯萃取液回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物，水层B加入正丁醇萃取至少1次，得到正丁醇萃取液和水层，正丁醇萃取液回收溶剂后得到正丁醇萃取物。5、如权利要求3所述的藏茵陈提取物，其中，步骤(2)之后还包括将乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物分别采用大孔吸附树脂色谱法进行质量浓度为40-95%的乙醇的梯度洗脱，收集该乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物各自的40-95%乙醇洗脱液，回收溶剂，合并，得到藏茵陈提取物。6、权利要求1所述的藏茵陈提取物的制备方法，该方法包括(1)将藏茵陈药材用至少2倍重量的质量浓度为55-95%的醇回流提取，提取液回收溶剂，得到藏茵陈的粗提取物；(2)上述步骤(1)得到的藏茵陈的粗提取物依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，收集乙酸乙酯萃取液，回收溶剂后得到乙酸乙酯萃取物；收集正丁醇萃取液，回收溶剂后得到正丁醇萃取物；(3)合并乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物，得到所述的藏茵陈提取物。7、如权利要求6所述的制备方法，其中，所述的步骤(2)之后还包括将乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物分别采用大孔吸附树脂色谱法进行质量浓度为40-95%的乙醇的梯度洗脱，收集该乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物各自的40-95%乙醇洗脱液，回收溶剂，合并，得到藏茵陈提取物。8、含有权利要求1所述的藏茵陈提取物的药用组合物，其中，该药用组合物含有药学有效量的藏茵陈提取物和药学辅料。9、权利要求1所述的藏茵陈提取物在制备治疗肝胆疾病的药物中的应用。10、权利要求8所述的含有藏茵陈提取物的药用组合物在制备治疗肝胆疾病的药物中的应用。全文摘要本发明提供一种藏茵陈提取物，其中至少含总黄酮，以该藏茵陈提取物总重为100％计，该总黄酮占该藏茵陈提取物的20-75％；该藏茵陈提取物具有治疗肝胆疾病的活性。文档编号A61K36/185GK101480422SQ200910078578公开日2009年7月15日申请日期2009年2月27日优先权日2009年2月27日发明者冯金朝,丽唐,王文蜀申请人:中央民族大学