专利名称：一种用于治疗肝纤维化的中药组合物及制备方法
技术领域：
本发明涉及中药组合物，特别是用于治疗肝纤维化的中药组合物。
背景技术：
在我国的许多慢性疾病中，由于病毒性、酗酒、药物等原因导致的肝炎非常普遍， 从病毒感染和酗酒导致的慢性肝损伤经常会引起肝纤维化和肝硬化。考虑到肝组织的生理 特征和重要意义，以及治疗和预防肝疾病的重要性，急需开发出治疗和预防肝纤维化的药 物。肝纤维化为前病理状态，其中在诸如肝炎的慢性肝病中的损伤的肝组织不能修复 成正常组织，但是作为体内适应性反应的一部分其能转化成纤维组织如胶原。血清透明质 酸(HA)、层粘蛋白(LN)、III型前胶原肽(plllnp)、I型胶原水平、肝组织中羟脯氨酸含量 等是肝纤维化的指标成分，这些成分多寡反映纤维化的轻重；在纤维化过程中，结缔组织生 长因子(CTGF)、金属基质蛋白酶组织抑制物-I(TIMP-I)等是肝纤维化的重要介质，CTGF升 高使纤维化程度加重，TIMP-I降低，可使形成的纤维降解，如能及时调节或阻断之，则肝纤 维化可以逆转；谷丙转氨酶(GPT)活性反映肝损伤的程度。多种中药包括单味药在体内和体外表现出肝保护功能，比如红花、三七、赤芍、 桃仁、丹参等。赶黄草、冬虫夏草即为其中之一，赶黄草为虎耳草科扯根菜属植物扯根菜 (Penthorumchinense Pursh)的干燥地上部分，为苗族民间的草药，主要分布于四川、贵州、 湖南等地。赶黄草具有清热利湿、活血散瘀、平肝健脾之功效，广泛用于治疗各型肝炎、胆囊 炎、脂肪肝等疾病。冬虫夏草具有补虚损、益精气，在动物实验中显示具有肝保护和治疗肝 纤维化作用。但到目前为止，还没有任何一个单味药作为预防和治疗肝纤维化的药物上市，虽 然市场上有一些预防和治疗肝纤维化的药物中成药，但大都是至少包含6味以上药材的大 处方，比如复方鳖甲软肝片含有11味药材。大处方有诸多的弊端，比如药味过多致所含化 学成分复杂，含量控制与药效关联度差，浪费资源等。在现有技术中，赶黄草与冬虫夏草没有合用的文献报道，更没有赶黄草提取物与 冬虫夏草合用可以预防治疗肝纤维化的报道。本发明是基于发现了赶黄草提取物和冬虫夏 草合用具有协同效果而完成。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于治疗肝纤维化的中药组合物。本发明公开了 一种药物组合物，含有赶黄草提取物、冬虫夏草。中医本无肝纤维化一病，根据其临床表现，多归属于“胁痛” “积聚” “瘀血” “痞证” 范畴。中医认为肝纤维化病因多因湿邪、疫毒等外邪侵袭，损伤肝脏，着而不去，其基本病机 为“血瘀阻络、湿热内蕴、肝肾不足”，因此补肝益肾，除湿化瘀即为肝纤维化的治疗原则。 赶黄草清热除湿化瘀，冬虫夏草扶正益肾，二者合用体现了中医治病必求于本的精神。
在本发明中，赶黄草采用其茎、叶的乙醇提取物。赶黄草提取物是将赶黄草茎切 段，与其叶，按质量体积比，加6-10倍浓度为20-95%的乙醇，提取2-3次，每次0. 5-2小时， 提取液浓缩，喷雾干燥所得。 在本发明中，应将冬虫夏草干燥后经粉碎成粉末状后使用；出于环保、降低成本及 工业化的角度出发，更适宜于选择发酵冬虫草夏菌丝体来代替天然冬虫夏草，发酵冬虫草 夏菌丝体为中国冬虫夏草菌(拉丁学名为Cordyc印S sinensis (Berkeley) Sacc)的无性 型-中国被毛孢(拉丁学名为Hirsutella sinensis)采用工业化发酵生产的冬虫夏草菌 丝体，比如杭州中美华东制药有限公司生产的发酵冬虫夏草菌丝体，为了方便于后续工艺， 可将菌丝体干燥后粉碎成粉末状(以下简称虫草粉)。为了提高药效，可优选粉末粒径分布在75 μ以下，平均粒径15μ以下的发酵冬虫 夏草菌丝体微粉(以下简称虫草微粉)，微粉加工工艺可以通过常规微粉工艺微粉化而得 到，比如采用机械冲击式超微粉碎机、气流超碎机。本发明公开的药物组合物中，所述的赶黄草提取物和冬虫夏草的质量比为 1.2-1.7 1，以1.25 1为优。若采用发酵冬虫夏草菌丝体代替冬虫夏草，赶黄草提取物 与其的质量比为1.2-1.7 1，以1.25 1为优。本发明所公开的药物组合物，还可以根据辩证施治增加其他中药，如枸杞、丹参、 三七等，以添加枸杞和/或丹参为佳。本发明还公开了药物组合物的制备方法，包括赶黄草提取物的制备赶黄草茎切 段，与其叶，按质量体积比，加6-10倍浓度为20-95%的乙醇，提取2-3次，每次0. 5-2小时， 提取液浓缩，喷雾干燥所得；若还含有其他中药材，可与赶黄草的茎、叶一起进行提取后使 用；冬虫草夏或发酵冬虫草夏菌丝体可通过常规的生产设备和生产工艺粉碎成粉状，两者
混合ο本发明所公开的药物组合物，与可药用载体或赋形剂，制成片剂、胶囊剂或颗粒 剂。可以选择常规辅料，以常规制剂方法制备成片剂、胶囊剂或颗粒剂。本发明还公开了这种药物组合物在制备预防及治疗肝纤维化药物中的应用。经动物实验证明，将赶黄草提取物与冬虫夏草或其替代品发酵冬虫夏草菌丝体配 伍用于二甲基亚硝胺(DMN)导致的肝纤维化动物，可显著降低血中GPT、透明质酸、I型胶 原、层粘蛋白水平，降低肝脏羟脯氨酸含量。而且二者有协同作用。同样，将赶黄草提取物 与冬虫夏草或其替代品发酵冬虫夏草菌丝体配伍用于酒精导致的肝纤维化动物，也可显著 降低血中CTGF、TIMP-1、LN水平，降低肝脏羟脯氨酸含量，而且二者有协同作用。本发明基 于上述发现得以完成。为了证明将赶黄草提取物与冬虫夏草或其替代品发酵冬虫夏草菌丝体配伍合用 治疗肝纤维化具有显著的协用效果，本发明在两种动物模型上进行药效学研究，其中模型 一是利用二甲基亚硝胺(DMN)损伤肝脏形成纤维化，此模型病理特点相当于中医主要证候 病机为湿热、瘀热内蕴，并兼气虚型。模型二是利用酒精导致的肝纤维化。中医认为酒毒伤 人，损伤人体正气，形成湿热内蕴，是导致脏腑亏虚之始因。故赶黄草提取物和发酵虫草菌 丝体补虚损，清湿热切合两种动物模型病机，可较好反映药物疗效。本发明提供的中药组合物，处方简单，经药效试验，两者配伍的协同效果确切，对 肝纤维化有很好的治疗作用。
具体实施例方式下面的实施例用于进一步说明本发明，但不意味着对本发明的任何限制。实施例1胶囊剂制备1取60目以下杭州中美华东制药有限公司生产的发酵冬虫夏草菌丝体粉，用 QLM-150KA型流化床对撞式气流粉碎机，调频范围为50HZ，频率设为32HZ，将虫草粉粉碎成 粒径分布在75 μ以下，平均粒径15 μ以下的微粉。将赶黄草的茎(切段)与叶，共lOOOg，加6000ml，浓度为80%的乙醇提取2次，每 次1小时，提取液浓缩，喷雾干燥。取按以上制得的虫草微粉200克，赶黄草提取物250克，加入庶糖酯47克、硬酯酸 镁3克混合、填充入硬胶囊、制成1000粒(0. 5g/粒)，即得。实施例2胶囊剂制备2以赶黄草和冬虫夏草或发酵冬虫夏草菌丝体为基本处方，在此基础上可按中医辨 证扩展组方，如对于血瘀症明显者，可加用丹参。赶黄草茎(切段)与叶共750g，丹参450g，加7500毫升，浓度为95%的乙醇提取 1次，每次1小时，提取液浓缩，喷雾干燥。取60目以下杭州中美华东制药有限公司生产的发酵冬虫夏草菌粉85克；赶黄草 丹参的提取物140克，混勻，加入25克微粉硅胶，填充入硬胶囊，制成1000粒(0. 25g/粒)， 即得。实施例3颗粒剂制备将赶黄草茎(切段)与其叶共1200g，加1200ml浓度为20%的乙醇提取3次，每 次2小时，提取液浓缩，喷雾干燥。天然冬虫夏草，干燥后，打粉过60目筛。取赶黄草提取物IOOOg和天然冬虫夏草粉800g，加入甜菊糖3g，胶体微晶纤维素 60g，玉米淀粉1137g混合均勻、制粒、干燥、分装，制成1000袋，3g/袋，即得。实施例4片剂制备取60目以下杭州中美华东制药有限公司生产的发酵冬虫夏草菌丝体，用TC-30型 流化超音速气流粉碎分级机，将虫草粉粉碎成粒径分布在75 μ以下，平均粒径10 μ以下的 微粉。将赶黄草茎(切段)与其叶共1000g，W 8000ml，浓度为90%的乙醇提取2次，每 次0. 5小时，提取液浓缩，喷雾干燥。取赶黄草提取物270g和虫草微粉180g，加入崩解剂交联羧甲基纤维素25g、微晶 纤维素25g，混合均勻、制粒、压片，制成1000片(0. 5g/片)，即得。协同作用的实施例以下的实施例5，实施例6是两个有关与赶黄草提取物和发酵 冬虫夏草菌丝体协同作用的动物试验。
本发明采用CH0U-TALALAY联合指数法(combination index，Cl)对药物联合应用 的效果进行判定，根据公式计算联合用药指数(Cl)，判定联合用药的交互作用,k ζ :CI = Dl combined/Dl alone+D2 combined/D2 alone+ (D1 combined)*(D2combined)/Dl alone氺D2 alone。公式中Dl combined是联合用药中药物1的剂量；Dl alone是单一用药中疗效与 联合用药相当的药物1的剂量；D2 combined是联合用药中药物2的剂量；D2 alone是单一 用药中疗效与联合用药相当的药物2的剂量。当CI < 1提示两药有协同作用，值越小协同作用越强；CI = 1提示两药有相加作 用；CI > 1则说明两药有拈抗作用，值越大拈抗作用越强。实施例5赶黄草提取物和虫草微粉组合物对DMN导致的肝纤维化大鼠的治疗作用。样品取按实施例1所制备的赶黄草提取物和虫草微粉，用蒸馏水为溶媒配制，各 组动物灌胃给予。空白对照组和模型组用蒸馏水给予。实验动物浙江省医学科学院实验动物中心提供。实验方法体重160-170g的大鼠，按0. 2mL/100g的剂量腹腔内注射0. 5% DMN，第 1、2、3周每天1次，连续3天，第4周隔日1次，连续3次。对照动物同法注射生理盐水。于 第28天造模结束后，将大鼠随机分组，设为对照组，模型组，模型+赶黄草组(给药400mg/ kg赶黄草提取物)，模型+虫草组(给药虫草微粉400mg/kg)，模型+赶黄草、虫草组合组 (给药赶黄草提取物、虫草微粉各100mg/kg)；以上各组用药均1次/d，口服连续用药30d 后结束，以2%戊巴比妥钠按2ml/kg体重腹腔注射麻醉，后腔静脉采血，采用ELISA试剂盒 测试血清HA，LN, I型前胶原肽，血清GPT和肝组织羟脯氨酸含量测定采用南京建成生物工 程研究所试剂盒测定。结果见表1。表1不同药物组合对DMN处理大鼠肝纤维化相关因子的影响
权利要求
一种药物组合物，含有赶黄草提取物，冬虫草夏，其中所述的赶黄草提取物为赶黄草茎切段，与其叶,按质量体积比，加6 10倍浓度为20 95%的乙醇，提取2 3次，每次0.5 2小时，提取液浓缩，喷雾干燥所得。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征是所述的冬虫草夏为发酵冬虫草夏菌丝体。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征是所述的发酵冬虫草夏菌丝体为粉末状。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征是所述的发酵冬虫草夏菌丝体粉，是粒 径分布在75微米以下，平均粒径15微米以下的微粉。
5.根据权利要求1-4任一权利要求所述的药物组合物，所述的药物组合物，其特征是 所述的赶黄草提取物与冬虫草夏或发酵冬虫草夏菌丝体的质量比为1. 2-1. 7 :1。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征是所述的赶黄草提取物与冬虫草夏或发 酵冬虫草夏菌丝体的质量比为1. 25 :1。
7.根据权利要求1-4任一权利要求所述的药物组合物，还含有枸杞或/和丹参。
8.制备如权利要求1-4任一权利要求所述的药物组合物的方法，制备赶黄草提取物 赶黄草茎切段，与其叶，按质量体积比，加6-10倍浓度为20-95%的乙醇，提取2-3次，每次 0. 5-2小时，提取液浓缩，喷雾干燥所得；常规设备、工艺粉碎冬虫草夏或发酵冬虫草夏菌 丝体。
9.根据权利要求1-4任一权利要求所述的药物组合物，与可药用载体或赋形剂制成片 剂、胶囊剂或颗粒剂。
10.根据权利要求1-4任一权利要求所述的药物组合物在制备预防及治疗肝纤维化药 物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种治疗肝纤维化的中药组合物及制备方法。本发明公开的中药组合物是以赶黄草乙醇提取物、冬虫夏草或发酵冬虫夏草菌丝体为活性成份，添加药用辅料可以制成各种口服制剂。经药效学实验证明，两味药材合用，对肝纤维化的治疗有明显的协同效果，可用于肝纤维化的预防与治疗。
文档编号A61K36/185GK101953861SQ20101051884
公开日2011年1月26日 申请日期2010年10月26日 优先权日2010年10月26日
发明者傅旭春, 扈荣, 杨建科, 潘福生, 白海波 申请人:杭州华东医药集团生物工程研究所有限公司;浙江大学城市学院