专利名称：具有抗菌消炎作用的中药组合物的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物的检测方法，特别是一种具有抗菌消炎作用的中药组 合物的检测方法。
背景技术：
鱼腥草、金银花是临床上常用的有代表性的清热解毒中药，鱼腥草味辛、性凉，具 有清热解毒、消肿排脓功效，临床上用于防治多种感染性疾病，金银花味甘寒，其气清香，能 清气分、血分之邪热及火毒，亦能通营达表、消肿溃坚，解痈疡之毒，即能清解又长于宣透， 故为治温热病，外感风热，疮痈之要药。鱼金制剂只有注射液一种制剂在临床上使用，鱼腥草，金银花无口服制剂。根据国 家药品不良反应管理监测中心监测，鱼金注射液在临床应用中出现了过敏性休克、全身过 敏性反应、胸闷、心急、呼吸困难和重症药疹等严重不良反应，甚至有引起死亡的病例报告， 现已停止使用和审批，因此，研究开发安全性高、疗效好，生产成本低的鱼金新制剂是当务
ο目前国内有关鱼腥草和金银花口服制剂的专利申请较多，其中本申请人于2007 年10月9号提出的一份申请中，详细地公开了鱼金口服制剂的两味药材配比范围和一种制 备方法。该制备方法将挥发成分、水溶性成分及醇溶性成分分别进行提取，然后混合后再加 入辅料制成制剂。这样的制备方法虽然理论上可以充分提取药材的有效成分，但存在着操 作复杂、药材加热时间过长、有效成分损失较大、生产周期过长、生产成本过高等实际问题。 为了解决这个问题，我们进行了更加深入的研究，进一步优化了制剂处方配比，完善了制剂 制备工艺，为各种病菌感染患者的治疗和康复提供新的治疗手段。
发明内容
本发明的目的在于提供一种既有确切疗效，又能较好地改善临床症状、副作用少、 价格便宜、剂型丰富的具有抗菌消炎作用的中药组合物。本发明的又一目的在于提供该中药组合物的各种制剂的制法。本发明的另外一个目的在于提供该中药组合物的质量控制方法。本发明技术方案是这样实现的按照重量份计，制成该中药组合物有效成分的原料为鱼腥草800g、金银花200g。本发明中药组合物具有清热解毒功效，可用于热毒内盛而致的上呼吸道感染、支 气管肺炎、化脓性疾病、妇科炎症与术后发热。本发明中药组合物可以是药剂学上可接受的剂型，包括丸剂、颗粒剂、硬胶囊剂、 软胶囊剂、片剂、滴丸剂、口服液体制剂等，其中优选口服液体制剂。本发明的制备工艺如下鱼金注射液采用水蒸气蒸馏法只提取了鱼腥草、金银花挥发油部分，而将其具有 提高免疫作用，抗菌消炎、抗病毒的水溶性成分弃之不用，为了提高鱼金口服制剂的临床疗效，合理利用有限资源，发挥鱼金口服制剂多成份、多靶点协同和互补作用，鱼金口服制剂 提取工艺设计为将鱼腥草和金银花水蒸气蒸馏提取挥发油；药渣水煎煮，滤过，与提取挥 发油后的药液合并，提取水溶性黄酮类、绿原酸类成分，与挥发油混合，加入适宜辅料制成 不同剂型。更为详细的制备工艺如下取鱼腥草切段，与金银花混合，加pH2. 0 5. 0酸水8 12倍量水浸泡1 4小 时，经水蒸气蒸馏提取挥发油2 6小时，收集初馏液800 1200ml，将初馏液再进行重 蒸馏，收集重蒸馏液100 400ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药 渣加6 10倍量水煎煮0. 5 2小时，滤过，合并两次滤液，60°C浓缩至相对密度1. 06 1. 10，加乙醇使含醇量至60 90%，静置12 48小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减 压干燥后粉碎成细粉或用适量水溶解浓缩残留物备用；将挥发油用β-环糊精进行包合制 成包合物或加入适宜增溶剂形成溶液，再采用等量递增法与上述操作后的物质混合，加入 适宜辅料制成不同剂型。其中优选的制备工艺如下取鱼腥草切成2 3cm段，与金银花混合，加pH4. 0 4. 5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初 馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过， 放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60°C浓缩至相对密度1. 06 1. 10， 加乙醇使含醇量至75%，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥后粉碎成细 粉或用适量水溶解浓缩残留物备用；将挥发油用β_环糊精进行包合制成包合物或加入适 宜增溶剂形成溶液，再采用等量递增法与上述操作后的物质混合，加入适宜辅料制成不同 剂型。本发明中的辅料可以是药剂学上可接受的任意赋形剂或载体。本发明硬胶囊的制备方法取鱼腥草切成2 3cm段，与金银花混合，加pH4. 0 4. 5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初 馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过， 放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60°C浓缩至相对密度1. 06 1. 10， 加乙醇使含醇量至75%，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100 目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油β-环糊精=1 6，包合温度40°C， 包合时间90min制成β -环糊精包合物，等量递增法与细粉混勻，加入适量辅料，混勻，经制 粒后装入胶囊，即得。本发明颗粒剂的制备方法取鱼腥草切成2 3cm段，与金银花混合，加pH4. 0 4. 5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初 馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过， 放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60°C浓缩至相对密度1. 06 1. 10， 加乙醇使含醇量至75%，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100 目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油β-环糊精=1 6，包合温度40°C， 包合时间90min制成β -环糊精包合物，等量递增法与细粉混勻，加适量淀粉混勻，烘干，粉 碎，加入余量的淀粉、羧甲基纤维素钠、甜菊甙，混勻过80目筛，加适量水制粒，60°C减压干 燥，整粒，分装，即得颗粒剂。
本发明丸剂的制备方法取鱼腥草切成2 3cm段，与金银花混合，加pH4. 0 4. 5 酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液IOOOml，将初馏液 再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置， 药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60°C浓缩至相对密度1. 06 1. 10，加乙 醇使含醇量至75%，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目 粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油β-环糊精=1 6，包合温度40°C，包 合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混勻，与100目可压性淀粉混合， 取出15-20%混合粉备用；备用粉加入5 10%聚乙烯吡咯烷酮无水乙醇液混勻，20目制 粒两次后形成丸芯，上锅滚动，视湿粒情况撒药粉成丸，出锅干燥、筛分，即得丸剂。本发明软胶囊剂的制备方法取鱼腥草切成2 3cm段，与金银花混合，加 PH4. 0 4. 5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液 1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后 的药液滤过，放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60°C浓缩至相对密度 1.06 1. 10，加乙醇使含醇量至75%，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干 燥，粉碎成100目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油β-环糊精=1 6， 包合温度40°C，包合时间90min制成β -环糊精包合物，等量递增法与细粉混勻，将明胶、水 及甘油融胶后保温待用，药粉加适量植物油搅勻，胶体磨研磨成均勻粘稠的糊状物，减压除 气，压制，即得软胶囊剂。本发明片剂的制备方法取鱼腥草切成2 3cm段，与金银花混合，加pH4. 0 4. 5 酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液IOOOml，将初馏液 再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过，放置， 药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60°C浓缩至相对密度1. 06 1. 10，加乙 醇使含醇量至75%，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100目 粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油β-环糊精=1 6，包合温度40°C，包 合时间90min制成β -环糊精包合物，等量递增法与细粉混勻，加淀粉、滑石粉及硬脂酸镁 适量，制粒，压制成片，包衣，即得片剂。本发明滴丸剂的制备方法取鱼腥草切成2 3cm段，与金银花混合，加pH4. 0 4. 5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初 馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，分离出挥发油备用；提取挥发油后的药液滤过， 放置，药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60°C浓缩至相对密度1. 06 1. 10， 加乙醇使含醇量至75%，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，减压干燥，粉碎成100 目粉；挥发油采用饱和水溶液法，包合比例为挥发油β-环糊精=1 6，包合温度40°C， 包合时间90min制成β-环糊精包合物，等量递增法与细粉混勻，加入到3 5倍量2 1 4 1的熔融聚乙二醇4000-聚乙二醇6000中，搅拌均勻，转移至滴丸机，滴制成丸，除去表 面的二甲基硅油，包装，即得滴丸剂。本发明口服液的制备方法取鱼腥草切成2 3cm段，与金银花混合，加pH4. 0 4. 5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初 馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，备用；提取挥发油后的药液滤过，放置，药渣加8 倍量水煎煮1小时，滤过，合并两次滤液，60°C浓缩至相对密度1. 06 1. 10，加乙醇使含醇量至75%，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，加水稀释至约700ml，加热煮沸5分 钟，放置24小时，滤过，备用；将重蒸馏液与吐温-80混勻，加入上述滤液中，混勻，再加入蔗 糖、阿斯巴甜、山梨酸，调pH4. 0 6. 0，加水至1000ml，混勻，分装，灭菌即得口服液。上述口服液的质量控制方法如下一、性状本发明为棕红色的液体，具鱼腥气，味甜、微苦。二、鉴别(1)挥发性成分鉴别取本品1ml，加氢氧化钠试验5滴，摇勻，加二硝基苯胼试液 1 2滴，放置，生成橙黄色沉淀；(2)鱼腥草鉴别取[含量测定]项下的供试品溶液，另取芳樟醇对照品，加正己 烷制成每Iml含20μ g的溶液，作为对照品溶液，照甲基正壬酮含量测定方法试验，精密吸 取对照品溶液和供试品溶液各2μ 1，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，供试品色谱图中应 呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。三、检查相对密度应不低于1.07 (中国药典2005年版一部附录VIIA) ；ρΗ值 应为4. 0 6. 0 (中国药典2005年版一部附录VIIG)；其他应符合合剂项下有关的各项规 定(中国药典2005年版一部附录IJ)。四、含量测定(1)金银花的含量测定以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水_冰醋酸 =15 85 1为流动相；检测波长327nm;理论板数以绿原酸峰计应不低于2000 ；精密称 取绿原酸对照品适量，加50%甲醇制成每Iml含40 μ g的溶液，即得对照品溶液；精密量取 本发明lml，置20ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇勻，即得供试品溶液；精密吸取对照品溶 液和供试品溶液各10 μ 1，分别注入液相色谱仪测定，按外标法以峰面积计算，即得；本发 明每Iml含金银花以绿原酸C16H18O9计，不得少于1. Omg ；(2)鱼腥草的含量测定以聚乙二醇(PEG)-20M(30mX0. 32mmX0. 25 μ m)为固定 相；柱温120°C ；检测器温度为250°C ；进样口温度为230°C ；理论板数按甲基正壬酮峰计应 不低于5000 ；称取萘适量，加正己烷配制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为内标溶液；另精密 称取甲基正壬酮对照品适量，加正己烷置制成每Iml含20μ g的溶液，精密量取2ml，置5ml 量瓶中，加入内标溶液0. 1ml，加正己烷稀释至刻度，摇勻，吸取2μ 1，注入气相色谱仪，计 算校正因子；精密量取本品50ml，加水50ml，照中国药典2005年版一部附录XD挥发油测定 法试验，自挥发器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧瓶为止，加正己烷3ml，连接回流冷 凝管，加热回流2小时，待测定器中水冷却至室温后，放冷，分取正己烷层，置5ml量瓶中，测 定器再用正己烷洗涤3次，每次0. 5ml，合并洗涤液，精密加入内标溶液0. 1ml，加正己烷稀 释至刻度，摇勻，作为供试品溶液；吸取2μ1，注入气相色谱仪，测定，即得；本发明每Iml含 鱼腥草以甲基正壬酮(C11H22O)计，不得少于0.3 μ g。中药制剂疗效不但与处方组成有关而且与处方剂量有关，鱼金注射液处方组成及 配比为鱼腥草2份金银花1份；本发明的处方配比是在大量实验研究中偶然得出的最佳 配比，但药理实验证明其具有显著的疗效，现将其与现有的最接近技术进行比较研究，具体 实验如下1.处方处方一鱼腥草600g、金银花300g。
处方二 鱼腥草800g、金银花200g。2.制备方法上述两个处方中鱼腥草分别切成2 3cm的小段，与各处方中金银花混合，分别加 10倍量水(PH4 5)浸泡3小时，经水蒸气蒸馏得初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏， 收集重蒸馏液200ml，备用。提取挥发油后药液滤过，放置，药渣加水煎煮1小时，滤过，合并 二次滤液，浓缩，加乙醇使含醇量达75%以上，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味， 加入适量水溶解残留物使其形成一定比例浓药液，根据动物给药剂量进行适当稀释后用于 实验。3.药效学试验比较研究①体外抗菌两种配比的鱼金制剂对标准菌株MIC测定结果见表1，对标准菌株的MBC测定结果 见表2。表1两种配比鱼金制剂对标准菌株的MIC
权利要求
一种具有抗菌消炎作用的中药组合物的检测方法，它的制剂按以下方法制备而成鱼腥草800g、金银花200g，鱼腥草切成2～3cm段，与金银花混合，加pH4.0～4.5酸水10倍量水浸泡3小时，经水蒸气蒸馏提取挥发油4小时，收集初馏液1000ml，将初馏液再进行重蒸馏，收集重蒸馏液200ml，备用；提取挥发油后的药液滤过，放置；药渣加8倍量水煎煮1小时，滤过；合并两次滤液，60℃浓缩至相对密度1.06～1.10，加乙醇使含醇量至75％，静置24小时，滤过；滤液回收乙醇至无醇味，加水稀释至约700ml，加热煮沸5分钟，放置24小时，滤过，备用；将重蒸馏液与吐温 80混匀，加入上述滤液中，混匀，再加入蔗糖、阿斯巴甜、山梨酸，调pH4.0～6.0，加水至1000ml，混匀，分装，灭菌，即得口服液，其特征在于该口服液的检测方法为(1)挥发性成分鉴别取本发明1ml，加氢氧化钠试验5滴，摇匀，加二硝基苯肼试液1～2滴，放置，生成橙黄色沉淀；(2)鱼腥草鉴别取[含量测定]项下的供试品溶液，另取芳樟醇对照品，加正己烷制成每1ml含20μg的溶液，作为对照品溶液，照甲基正壬酮含量测定方法试验，精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2μl，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，供试品色谱图中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰；(3)检查方法相对密度应不低于1.07，pH值应为4.0～6.0；(4)含量测定方法(a)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇 水 冰醋酸＝15∶85∶1为流动相；检测波长为327nm；理论板数以绿原酸峰计应不低于2000；精密称取绿原酸对照品适量，加50％甲醇制成每1ml含40μg的溶液，即得对照品溶液；精密量取本发明1ml，置20ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液；精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪测定，按外标法以峰面积计算，即得；本发明口服液每1ml含金银花以绿原酸C16H18O9计，不得少于1.0mg；(b)以聚乙二醇(PEG) 20M(30m×0.32mm×0.25μm)为固定相；柱温120℃；检测器温度为250℃；进样口温度为230℃；理论板数按甲基正壬酮峰计应不低于5000；称取萘适量，加正己烷配制成每1ml含0.5mg的溶液，作为内标溶液；另精密称取甲基正壬酮对照品适量，加正己烷置制成每1ml含20μg的溶液，精密量取2ml，置5ml量瓶中，加入内标溶液0.1ml，加正己烷稀释至刻度，摇匀，吸取2μl，注入气相色谱仪，计算校正因子；精密量取本发明50ml，加水50ml，照中国药典2005年版一部附录X D挥发油测定法试验，自挥发器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧瓶为止，加正己烷3ml，连接回流冷凝管，加热回流2小时，待测定器中水冷却至室温后，放冷，分取正己烷层，置5ml量瓶中，测定器再用正己烷洗涤3次，每次0.5ml，合并洗涤液，精密加入内标溶液0.1ml，加正己烷稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；吸取2μl，注入气相色谱仪，测定，即得；本发明口服液每1ml含鱼腥草以甲基正壬酮(C11H22O)计，不得少于0.3μg。
全文摘要
本发明涉及一种具有抗菌消炎作用的中药组合物的检测方法，由鱼腥草800g、金银花200g为原料制成口服液体制剂，具有疗效确切，较好地改善临床症状，剂型合理、副作用少，价格便宜的特点；口服液的检测方法包括挥发性成分、鱼腥草的鉴别，相对密度、pH值的检查，金银花、鱼腥草的含量测定。
文档编号A61P15/00GK101947274SQ20101051868
公开日2011年1月19日 申请日期2008年9月27日 优先权日2008年9月27日
发明者赵涛 申请人:陕西步长制药有限公司