专利名称：一种用于治疗癌症的药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及生物技术领域，尤其是一种用于治疗癌症的药物组合物及其制备方法。
背景技术：
1893年有位医生发现流感大流行后，有些白血病病人的病情好转，以后不断发现 在流感病毒流行后，有些肿瘤发生自发缓解。1912年意大利医生D印ace发现一个患宫颈癌 的妇女，在被犬咬伤后接种狂犬病疫苗，使宫颈癌得到缓解。这是首次人工注射病毒疫苗引 起肿瘤缓解的例证。一位匈牙利养鸡人患晚期胃癌，在一次病毒性鸡瘟流行后，他的癌肿意 外地消退了。在此启发下，医生们对一位前列腺癌的病人进行活的新城疫病毒接种，数次治 疗后，癌肿全部消退。另外还发现淋巴细胞性白血病患者在治疗过程中患了麻疹，结果使白 血病长期缓解。人们从这些偶然的现象中得到启发，并大胆地进行尝试性治疗，由此为病毒 的肿瘤治疗积累了丰富的实践经验。welA等于1970年报告，在试验过的53种病毒中，已证 明有38种对人或动物的肿瘤有治疗作用，其中28种为RNA病毒，10种为DNA病毒。目前 临床上已试用治疗部分肿瘤，如恶性黑色素瘤，白血病、宫颈癌及恶性淋巴瘤，还有胃癌、乳 腺癌和膀胱癌等。所使用的病毒包括鸡新城疫病毒、和细小病毒等。用病毒治疗肿瘤，在许 多报告病例中的确取得满意的疗效。在病毒肿瘤治疗中应注意两个问题①治疗对象治 疗肿瘤的病毒进入机体后，机体产生免疫反应来限制病毒扩散，故这种治疗往往仅能取得 短期缓解。因而治疗应当早用，即在瘤细胞不多时，效果好。②病毒的选择理想治疗肿瘤 的病毒，应是高效而无毒，但实际很难找到这样的病毒。鸡新城疫病毒的抗肿瘤机制十分复 杂，大致有下面三种1.鸡新城疫病毒对肿瘤细胞直接毒性作用。现已发现很多病毒能直 接杀死肿瘤细胞，生物学家正努力寻找特异性杀伤肿瘤细胞而对正常细胞投有‘毒性”的病 毒。分裂异常旺盛的肿瘤细胞是鸡新城疫病毒的理想宿主。2.免疫性溶解肿瘤细胞的作 用。鸡新城疫病毒能使细胞表面病毒粒子发芽引起肿瘤细胞膜免疫原性增加，这样机体产 生的免疫反应不仅针对病毒而且包括病毒所寄生的肿瘤细胞。这一机制在病毒抗肿瘤中起 重要作用。3.干扰作用。人类的许多肿瘤发生与病毒的感染有密切联系，当机体或肿瘤细 胞再感染另一种鸡新城疫病毒时，就会产生IFN(干扰素)，干扰肿瘤病毒，并抑制肿瘤细胞 的生长。实验证明IFN对动物的病毒性肿瘤有良好的治疗作用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于治疗癌症的药物组合物。本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述用于治疗癌症的药物组合物的制 备方法。为解决上述技术问题，本发明的技术方案是一种用于治疗癌症的药物组合物，主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA酶组成，其 中每1000 10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 10mg、鸡新城疫病毒的血凝效价为1 640。优选的，上述用于治疗癌症的药物组合物，是由下述方法得到的(1)选用鸡新城疫病毒在9 13日龄鸡胚尿囊腔中于37 40°C培养96 130 小时，吸取含有鸡新城疫病毒的鸡胚新城疫病毒尿囊液，并用生理盐水调节病毒血凝效价 至 1 640 ；(2)将步骤(1)收取的鸡胚新城疫病毒尿囊液，按每1000 10000ml鸡胚新城疫 病毒尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 IOmg进行混合；(3)将步骤O)中配好的混合物进行过滤除菌，即得。优选的，上述用于治疗癌症的药物组合物，其中每10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊 液中DNA酶2mg和RNA酶ang、鸡新城疫病毒的血凝效价为1 640。上述用于治疗癌症的药物组合物的制备方法，具体制备步骤如下(1)选用鸡新城疫病毒在9 13日龄鸡胚尿囊腔中于37 40°C培养96 130 小时，吸取含有鸡新城疫病毒的鸡胚新城疫病毒尿囊液，并用生理盐水调节病毒血凝效价 至 1 640 ；(2)将步骤(1)收取的鸡胚新城疫病毒尿囊液，按每1000 10000ml鸡胚新城疫 病毒尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 IOmg进行混合；(3)将步骤O)中配好的混合物进行过滤除菌，即得。优选的，上述用于治疗癌症的药物组合物的制备方法，其中步骤O)中按每 10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶2mg进行混合。本发明的有益效果是上述用于治疗癌症的药物组合物能提高机体免疫功能，有效抑制肿瘤、标本兼治， 其制备方法简单，适合规模化工业生产的需要。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明。实施例1一种用于治疗癌症的药物组合物，主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA酶组成，其 中每10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶ang、鸡新城疫病毒的血凝效价 为1 640。具体制备方法如下(1)鸡胚选择选择受精鸡蛋于38°C孵化10天，检出死胚和寡蛋；(2)病毒接种①鸡新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；②次日在无菌条件下将鸡胚移入操作间，在接种部位打个小孔；③用Iml注射器吸取鸡新城疫病毒液0. anl，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；④于38°C培养96小时；(3)收获鸡新城疫病毒①在无菌条件下对培养后的鸡胚进行消毒；②用无菌的大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取尿囊液；③收获完的鸡新城疫病毒液收集到一个瓶子里，测效价，并用生理盐水调节血凝 效价为1 640，得到10000ml尿囊液；(4)加酶混合在无菌室内，将aiig的DNA酶和^iig的RNA酶加入上述步骤(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)纯化①将经过酶处理好的尿囊液拿进无菌室，在无菌条件下将尿囊液过滤除菌，进行 分装。实施例2一种用于治疗癌症的药物组合物，主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA酶组成，其 中每10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶3mg和RNA酶:3mg、鸡新城疫病毒的血凝效价 为1 640。具体制备方法如下(1)鸡胚选择选择受精鸡蛋于40°C孵化9天，检出死胚和寡蛋；(2)病毒接种①鸡新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；②次日在无菌条件下将鸡胚移入操作间，在接种部位打个小孔；③用Iml注射器吸取鸡新城疫病毒液0. :3ml，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；④于37°C培养130小时；(3)收获鸡新城疫病毒①在无菌条件下对培养后的鸡胚进行消毒；②用无菌的大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取尿囊 液；③收获完的鸡新城疫病毒液收集到一个瓶子里，测效价，并用生理盐水调节血凝 效价为1 640，得到10000ml尿囊液；(4)加酶混合在无菌室内，将:3mg的DNA酶和!Bmg的RNA酶加入上述步骤(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)纯化①将经过酶处理好的尿囊液拿进无菌室，在无菌条件下将尿囊液过滤除菌，进行 分装。实施例3一种用于治疗癌症的药物组合物，主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA酶组成，其 中每IOOOml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶Img和RNA酶lmg、鸡新城疫病毒的血凝效价 为1 640。具体制备方法如下(1)鸡胚选择选择受精鸡蛋于39°C孵化12天，检出死胚和寡蛋；(2)病毒接种
①鸡新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；②次日在无菌条件下将鸡胚移入操作间，在接种部位打个小孔；③用Iml注射器吸取鸡新城疫病毒液0. 1ml，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；④于40°C培养105小时；(3)收获鸡新城疫病毒①在无菌条件下对培养后的鸡胚进行消毒；②用无菌的大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取尿囊 液；③收获完的鸡新城疫病毒液收集到一个瓶子里，测效价，并用生理盐水调节血凝 效价为1 640，得到IOOOml尿囊液；(4)加酶混合在无菌室内，将Img的DNA酶和Img的RNA酶加入上述步骤(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)纯化①将经过酶处理好的尿囊液拿进无菌室，在无菌条件下将尿囊液过滤除菌，进行 分装。实施例4一种用于治疗癌症的药物组合物，主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA酶组成，其 中每5000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶5mg和RNA酶5mg、鸡新城疫病毒的血凝效价 为1 640。具体制备方法如下(1)鸡胚选择选择受精鸡蛋于38°C孵化13天，检出死胚和寡蛋；(2)病毒接种①鸡新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；②次日在无菌条件下将鸡胚移入操作间，在接种部位打个小孔；③用Iml注射器吸取鸡新城疫病毒液0. anl，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；④于39°C培养115小时；(3)收获鸡新城疫病毒①在无菌条件下对培养后的鸡胚进行消毒；②用无菌的大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取尿囊 液；③收获完的鸡新城疫病毒液收集到一个瓶子里，测效价，并用生理盐水调节血凝 效价为1 640，得到5000ml尿囊液；(4)加酶混合在无菌室内，将5mg的DNA酶和5mg的RNA酶加入上述步骤(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)纯化①将经过酶处理好的尿囊液拿进无菌室，在无菌条件下将尿囊液过滤除菌，进行 分装。
实施例5一种用于治疗癌症的药物组合物，主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA酶组成，其 中每10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶9mg和RNA酶9mg、鸡新城疫病毒的血凝效价 为1 640。具体制备方法如下(1)鸡胚选择选择受精鸡蛋于40°C孵化10天，检出死胚和寡蛋；(2)病毒接种①鸡新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；②次日在无菌条件下将鸡胚移入操作间，在接种部位打个小孔；③用Iml注射器吸取鸡新城疫病毒液0. :3ml，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；④于39°C培养100小时；(3)收获鸡新城疫病毒①在无菌条件下对培养后的鸡胚进行消毒；②用无菌的大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取尿囊 液；③收获完的鸡新城疫病毒液收集到一个瓶子里，测效价，并用生理盐水调节血凝 效价为1 640，得到10000ml尿囊液；(4)加酶混合在无菌室内，将9mg的DNA酶和9mg的RNA酶加入上述步骤(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)纯化①将经过酶处理好的尿囊液拿进无菌室，在无菌条件下将尿囊液过滤除菌，进行 分装。实施例6一种用于治疗癌症的药物组合物，主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA酶组成，其 中每8000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶IOmg和RNA酶10mg、鸡新城疫病毒的血凝效 价为1 640。具体制备方法如下(1)鸡胚选择选择受精鸡蛋于38°C孵化9天，检出死胚和寡蛋；(2)病毒接种①鸡新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；②次日在无菌条件下将鸡胚移入操作间，在接种部位打个小孔；③用Iml注射器吸取鸡新城疫病毒液O.aiil，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；④于37°C培养125小时；(3)收获鸡新城疫病毒①在无菌条件下对培养后的鸡胚进行消毒；②用无菌的大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取尿囊 液；③收获完的鸡新城疫病毒液收集到一个瓶子里，测效价，并用生理盐水调节血凝效价为1 640，得到8000ml尿囊液；(4)加酶混合在无菌室内，将IOmg的DNA酶和IOmg的RNA酶加入上述步骤(3)得到的尿囊液 中，混合均勻；(5)纯化①将经过酶处理好的尿囊液拿进无菌室，在无菌条件下将尿囊液过滤除菌，进行 分装。实施例7一种用于治疗癌症的药物组合物，主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA酶组成，其 中每5000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶ang、鸡新城疫病毒的血凝效价 为1 640。具体制备方法如下(1)鸡胚选择选择受精鸡蛋于38°C孵化9天，检出死胚和寡蛋；(2)病毒接种①鸡新城疫病毒接种的前一天画出气室和接种部位；②次日在无菌条件下将鸡胚移入操作间，在接种部位打个小孔；③用Iml注射器吸取鸡新城疫病毒液0. 1ml，注入鸡胚内，用石蜡封口 ；④于37°C培养96小时；(3)收获鸡新城疫病毒①在无菌条件下对培养后的鸡胚进行消毒；②用无菌的大镊子敲碎蛋壳，用无菌的小镊子扒开囊膜，用无菌吸管吸取尿囊 液；③收获完的鸡新城疫病毒液收集到一个瓶子里，测效价，并用生理盐水调节血凝 效价为1 640，得到5000ml尿囊液；(4)加酶混合在无菌室内，将2mg的DNA酶和2mg的RNA酶加入上述步骤(3)得到的尿囊液中， 混合均勻；(5)纯化将经过酶处理好的尿囊液拿进无菌室，在无菌条件下将尿囊液过滤除菌，进行分装。实施例8应用小白鼠做抗肿瘤实验，试验共分为4组，每组16只小鼠，小鼠腋下接种H22肝 癌细胞，制作肝癌模型。各试验药物均瘤内注射，每只0. 1毫升，每天一次，用药疗程为7天， 试验结果见表1。表1
组别药品小鼠(只)用药方案用药次数抑瘤率(％ )1生理盐水161次/天7次
权利要求
1.一种用于治疗癌症的药物组合物，其特征在于主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA 酶组成，其中每1000 10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶 1 10mg、鸡新城疫病毒的血凝效价为1 640。
2.根据权利要求1所述的用于治疗癌症的药物组合物，其特征在于是由下述方法得 到的(1)选用鸡新城疫病毒在9 13日龄鸡胚尿囊腔中于37 40°C培养96 130小 时，吸取含有鸡新城疫病毒的鸡胚新城疫病毒尿囊液，并用生理盐水调节病毒血凝效价至 1 640 ；(2)将步骤(1)收取的鸡胚新城疫病毒尿囊液，按每1000 10000ml鸡胚新城疫病毒 尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 IOmg进行混合；(3)将步骤O)中配好的混合物进行过滤除菌，即得。
3.根据权利要求1或2所述的用于治疗癌症的药物组合物，其特征在于其中每 10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶ang、鸡新城疫病毒的血凝效价为 1 640。
4.一种权利要求1或2所述的用于治疗癌症的药物组合物的制备方法，其特征在于 具体制备步骤如下(1)选用鸡新城疫病毒在9 13日龄鸡胚尿囊腔中于37 40°C培养96 130小 时，吸取含有鸡新城疫病毒的鸡胚新城疫病毒尿囊液，并用生理盐水调节病毒血凝效价至 1 640 ；(2)将步骤(1)收取的鸡胚新城疫病毒尿囊液，按每1000 10000ml鸡胚新城疫病毒 尿囊液中含有DNA酶1 IOmg和RNA酶1 IOmg进行混合；(3)将步骤O)中配好的混合物进行过滤除菌，即得。
5.根据权利要求4所述的用于治疗癌症的药物组合物的制备方法，其特征在于其中 步骤O)中按每10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中DNA酶2mg和RNA酶2mg进行混合。
全文摘要
本发明提供了一种用于治疗癌症的药物组合物及制备方法，所述组合物主要由鸡新城疫病毒、DNA酶和RNA酶组成，其中每1000～10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中含有DNA酶1～10mg和RNA酶1～10mg、鸡新城疫病毒的血凝效价为1∶640；制备方法为(1)选用鸡新城疫病毒在鸡胚尿囊腔中进行培养，吸取尿囊液并用生理盐水调节病毒血凝效价至1∶640；(2)按每1000～10000ml鸡胚新城疫病毒尿囊液中含有DNA酶1～10mg和RNA酶1～10mg进行混合；(3)将配好的混合物进行过滤除菌，即得；所述用于治疗癌症的药物组合物能有效抑制肿瘤，其制备方法简单，适合规模化工业生产的需要。
文档编号A61K38/46GK102139097SQ20111007462
公开日2011年8月3日 申请日期2011年3月25日 优先权日2011年3月25日
发明者古长庆, 王国新, 王智佳, 赵钢 申请人:天津济命生生物科技有限公司