专利名称：补骨脂提取物和淫羊藿提取物的组合物及其复方制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药提取物的组合物，特别涉及补骨脂黄酮提取物和淫羊藿提取物的组合物，还涉及补骨脂黄酮提取物和淫羊藿提取物的复方制剂及其制备方法。
背景技术：
某些动物的竞技比赛，如赛马等；某些家畜的体力劳动，如耕牛等；某些工作犬， 如搜救犬、搜爆犬、导盲犬、缉毒缉私犬等，在长时间工作劳动中，都需要消耗大量体力，而这些动物在运动性疲劳后没有得到及时恢复，使疲劳累积导致疲劳过度，或者当发生运动性疲劳时没有及时地进行调整，继续保持原有的运动，加深疲劳程度，导致力竭，这些都会使运动性疲劳变成一种病理现象，从而对动物健康造成不良影响。因此，能用于缓解动物的疲劳，提高动物的能量代谢的药物一直处在积极的探索中。补骨脂来源于豆科植物补骨脂(Psoralea corylifolia L.)果实，性温，味辛，具补肾助阳之功效。补骨脂含有多种有效活性成分，到目前为止国内外研究人员从中已分离出香豆素类、黄酮类、萜酚类等化合物四十余种。其中，补骨脂黄酮是补骨脂中最具医疗价值的活性成分。补骨脂黄酮具有雌激素样作用，包括抗肿瘤、抗氧化、保护心血管和改善骨质疏松等作用，同时，延缓疲劳、提高能量代谢；其在延缓疲劳、提高能量代谢方面发挥着重要作用。淫羊藿来源于小檗科植物淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim.)的干燥叶，性温，味辛、甘，具有补肾阳，强筋骨，祛风湿之功效。主要含黄酮类化合物、木脂素、生物碱、挥发油等化学成分，其中，淫羊藿的黄酮是淫羊藿最具有医疗价值的活性成分，例如增强下丘脑-垂体-性腺轴及肾上腺皮质轴、对免疫系统等作用、抗衰老。补骨脂黄酮和淫羊藿黄酮由于不易溶于水，生物利用度率低，因此，兽医临床上没有补骨脂黄酮和淫羊藿黄酮的单方或复方的制剂。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种含补骨脂提取物和淫羊藿提取物的组合物，能缓解动物的疲劳及提高动物的能量代谢。为达到上述目的，本发明采用如下技术方案
补骨脂提取物和淫羊藿提取物的组合物，它由下述重量份配比原料制成 补骨脂提取物3. 5-7. 5份，淫羊藿提取物3. 5-7. 5份；
所述的补骨脂提取物含有总黄酮的重量百分比不低于90% ；所述的淫羊藿提取物含有总黄酮的重量百分比不低于85%。进一步，补骨脂提取物和淫羊藿提取物的组合物由下述重量份配比原料制成 补骨脂提取物5份，淫羊藿提取物5份。本发明的目的之二在于提供一种含上述补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂，生物利用率高，方便对动物给药。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案
含补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂，它由下述重量份配比原料制成 补骨脂提取物3. 5-7. 5份、淫羊藿提取物3. 5-7. 5份、填充剂50-150份、粘合剂 50-150份、崩解剂50-70份。进一步，所述的填充剂为淀粉、糖粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、磷酸氢钙中一种或多种；所述的粘合剂为淀粉、纤维素中一种或两种；所述崩解剂为淀粉、纤维素、泡腾崩解剂中一种或多种。进一步，所述的复方制剂是片剂或颗粒剂。本发明目的之三在于提供所述的含补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂的制备方法，操作简便，产品稳定性好，适于工业化大规模生产。为达到上述目的，本发明采用如下技术方案
含补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂的制备方法，它包括下述步骤
1)将所述的粘合剂加水调成浆；
2)将所述的填充剂和崩解剂加入步骤1)所得的浆中，混合均勻，制粒，干燥，制得辅料颗粒；
3)将步骤2)所得辅料颗粒与补骨脂提取物、淫羊藿提取物混合均勻，制得混合颗粒。进一步，含补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂的制备方法，它还包括下述步骤
4)将步骤3)混合颗粒成型，包装，灭菌，即得制剂。本发明的有益效果在于补骨脂提取物和淫羊藿提取物的组合物对正常胎猫肾细胞和氧化损伤胎猫肾细胞增殖作用，增殖效果优于补骨脂提取物和淫羊藿提取物单独作用；补骨脂提取物和淫羊藿提取物的组合物与填充剂、粘合剂和崩解剂等三种辅料混合制成复方制剂，该辅料使两种提取物在固体介质中处于高度分散状态，增加两种提取物的生物利用率，同时，制成复方制剂便于对动物给药；由临床试验结果可知，该复方制剂提高了犬血清中SOD和肌酸激酶的活性，且显著高于模型组；而SOD和肌酸激酶的活性是疲劳状态和能量代谢的重要指标，故本发明能够缓解疲劳，提高能量代谢。本发明复方制剂作为缓解动物疲劳和提高能量代谢的药物，具有巨大的价值。
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述，其中
图1为芦丁标准曲线。
具体实施例方式实施例1 制备补骨脂提取物和淫羊藿提取物 1.补骨脂提物
称取IOOg补骨脂粉末，加入600ml苯，在45°C水浴条件下浸提3次，每次20分钟，抽滤，合并3次滤液，将滤液浓缩至600ml，再将苯浓缩液与1800ml重量百分比含量5%碳酸钠的水溶液(碱水)混合，振摇3次，使补骨脂黄酮成分的钠盐转溶于碱水，将该碱水浓缩至600ml，所得碱水浓缩液用盐酸酸化至pH值1-2，经氯仿萃取3次，每次用氯仿600ml，合并氯仿层，并减压回收氯仿，得到补骨脂提取物的浓缩物，真空干燥，即得补骨脂初提物(黄褐色固体)，避光保存备用。经高速逆流色谱(HSCCC)对补骨脂总黄酮的分离纯化，控制温度在 250C，转速为800r/min，流动相流速为2mL/min，在254nm处检测得到6个分离峰，收集各分离峰物质，真空干燥，得补骨脂总黄酮。2.淫羊藿提物
采取半仿生提取法，根据动物胃肠PH值，分别采用不同的PH值(3.5、7、8)、煎煮时间 (2hU. 5h,0. 5h)和溶剂量进行煎煮。首先将淫羊藿用剪刀夹成小块碎片，取100g，然后分别加入中药10倍量的水，浸泡12小时左右、调整PH值为3. 5，置于电炉上煮沸2小时、过滤； 再加6倍药品重量的水，调PH值为7，煮沸1. 5小时，过滤；最后加药品重量6倍量的水，调整PH为8，煮沸0. 5小时，过滤。将3次提取液混合后加入碳酸钠，使混合溶液含有5%碳酸钠(重量)，加热反复溶解多次，趁热过滤，滤液加盐酸调pH 2，放冷，滤取析出的沉淀，真空干燥，得淫羊藿初提物。将200mg的淫羊藿总黄酮样品经高速逆流色谱(HSCCC)分离后， 控制温度在25°C，转速为800r/min，流动相流速为2mL/min，在254nm处检测得到4个分离峰，收集各分离峰物质，真空干燥，得淫羊藿总黄酮。3.补骨脂提取物和淫羊藿提取物中总黄酮含量的测定。3. 1标准曲线的绘制
精密称取芦丁对照品，加60%乙醇(体积)制成0. 2mg/ml的对照品溶液。分别移取芦丁对照品溶液0、2、4、6、8、10ml置于50ml容量瓶中，加5%NaN02 2ml，摇勻，静置6分钟后，加 Λ 10%A1C13溶液2ml，摇勻，加入lmol/L NaOH 10ml，用60%乙醇(体积)稀释至刻度，摇勻， 静置15分钟后，用Icm比色皿，以空白试剂为参比，于510nm处测定吸收度，制得芦丁标准溶液曲线，测定结果用最小二乘法作线性回归。3.2补骨脂提取物中总黄酮含量测定
精密称取上述制得的补骨脂提取物lmg，置于IOml容量瓶中，用llmmol/L乙醇稀释至刻度，滤过，作为样品溶液。再精密吸取Iml的样品溶液，置于IOml容量瓶中，用llmmol/ L乙醇定容，精密量取样品溶液細1置于50ml容量瓶中，加5%NaN02 ^il，摇勻，静置6分钟后，加入10%A1C13溶液anl，摇勻，加入lmol/L NaOH 10ml，用llmmol/L乙醇稀释至刻度， 摇勻，静置15分钟后，用Icm比色皿，以空白试剂为参比，于510nm处测定吸收度，并用回归方程计算补骨脂提取物中总黄酮的含量。3.3淫羊藿提取物中总黄酮含量测定
精密称取上述制得的淫羊藿提取物lmg，置于IOml容量瓶中，用llmmol/L乙醇稀释至刻度，滤过，作为样品溶液。再精密吸取Iml的样品溶液，置于IOml容量瓶中，用llmmol/ L乙醇定容，精密量取样品溶液細1置于50ml容量瓶中，加5%NaN02 ^il，摇勻，静置6分钟后，加入10%A1C13溶液anl，摇勻，加入lmol/L NaOH 10ml，用llmmol/L乙醇稀释至刻度， 摇勻，静置15分钟后，用Icm比色皿，以空白试剂为参比，于510nm处测定吸收度，并用回归方程计算淫羊藿提取物中总黄酮的含量。3.4补骨脂提取物和淫羊藿提取物中总黄酮含量
如图1芦丁标准曲线所示，测定值经最小二乘法进行线性回归，分析得回归方程 y=12. 0888C +0. 01689，相关系数 R2=O. 9995。
从表1中数据可见，三次平行试验中，IOOg补骨脂粉末制成的补骨脂提取物中总黄酮重量占提取物重量的百分比均在90%以上，可判断补骨脂提取物为补骨脂黄酮；IOOg 淫羊藿粉末制成的补骨脂提取物中总黄酮重量占提取物重量的百分比均为85. 05%以上。 结果详见表1。表1总黄酮重量占提取物重量的百分比(％)
权利要求
1.补骨脂提取物和淫羊藿提取物的组合物，其特征在于它由下述重量份配比原料制成补骨脂提取物3. 5-7. 5份，淫羊藿提取物3. 5-7. 5份；所述的补骨脂提取物含有总黄酮的重量百分比不低于90% ；所述的淫羊藿提取物含有总黄酮的重量百分比不低于85%。
2.根据权利要求1所述的补骨脂提取物和淫羊藿提取物的组合物，其特征在于它由下述重量份配比原料制成补骨脂提取物5份，淫羊藿提取物5份。
3.含权利要求1所述的补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂，其特征在于它由下述重量份配比原料制成补骨脂提取物3. 5-7. 5份、淫羊藿提取物3. 5-7. 5份、填充剂50-150份、粘合剂 50-150份、崩解剂50-70份。
4.根据权利要求3所述的含补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂，其特征在于 所述的填充剂为淀粉、糖粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、磷酸氢钙中一种或多种；所述的粘合剂为淀粉、纤维素中一种或两种；所述崩解剂为淀粉、纤维素、泡腾崩解剂中一种或多种。
5.根据权利要求3所述的含补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂，其特征在于 所述的复方制剂是片剂或颗粒剂。
6.权利要求3所述的含补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂的制备方法，其特征在于它包括下述步骤1)将所述的粘合剂加水调成浆；2)将所述的填充剂和崩解剂加入步骤1)所得的浆中，混合均勻，制粒，干燥，制得辅料颗粒；3)将步骤2)所得辅料颗粒与补骨脂提取物、淫羊藿提取物混合均勻，制得混合颗粒。
7.根据权利要求6所述的含补骨脂提取物和淫羊藿提取物的复方制剂的制备方法，其特征在于它还包括下述步骤4)将步骤3)混合颗粒成型，包装，灭菌，即得制剂。
全文摘要
本发明涉及补骨脂提取物和淫羊藿提取物组合物及其复方制剂和该复方制剂的制备方法，所述组合物由下述重量份配比原料制成补骨脂提取物3.5-7.5份、淫羊藿提取物3.5-7.5份；所述的补骨脂提取物含有总黄酮的重量百分比不低于90%；所述的淫羊藿提取物含有总黄酮的重量百分比不低于85%；本发明复方制剂提高犬血清中SOD和肌酸激酶的活性，即能够缓解疲劳，提高能量代谢；本发明作为缓解动物疲劳及提高能量代谢的药物，具有巨大的价值。
文档编号A61P39/00GK102258565SQ20111024629
公开日2011年11月30日 申请日期2011年8月25日 优先权日2011年8月25日
发明者刘娟, 吕雪, 朱兆荣, 杨敏, 罗艺晨, 邱印利 申请人:西南大学