专利名称：一种治疗血小板减少症的中药组合物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物，具体说，是涉及一种治疗血小板减少症的中药组合物及其制备方法和应用，属于中药技术领域。
背景技术：
血小板减少症,是外周血中血小板减少(< 10万/ii I)而导致皮肤粘膜及内脏出血的疾病，主要表现为白发性皮肤瘀点和瘀斑，粘膜出血、鼻衄和牙龈出血、口腔黏膜及舌出现紫血泡等，是临床常见的以凝血功能障碍、出血为特点的一类疾病，重者可引起大出血，危及生命，临床约占出血性疾病的30%。血小板减少的原因可分为(I)血小板生成减少或无效死亡包括遗传性和获得性两种，获得性血小板生成减少是由于某些因素如药物、恶性肿瘤、感染、电离辐射等损伤造血干细胞或影响其在骨髓中增殖所致，可影响多个造血细胞系统，常伴有不同程度贫血、白细胞减少、骨髓巨核细胞明显减少；(2)血小板破坏过多包括先天性和获得性两种。获得性血小板破坏过多包括免疫性和非免疫性。免疫性血小板破坏过多常见的有特发性血小板减少性紫癜和药物血小板减少。非免疫性血小板减少破坏过多包括感染、弥漫性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等；(3)血小板在脾内滞留过多最常见于脾功能亢进。血 小板减少症的发病机制包括1)免疫性因素临床可见严重肝病、红斑狼疮、特发性血小板减少性紫癜等免疫性疾病引起血小板减少的情况，抗体破坏血小板；2)感染性因素引起血小板减少症的常见因素，细菌、病毒感染可直接损伤造血细胞，减少血小板生长，再生障碍性贫血、急性白血病等急性发作期常伴严重感染，有出血倾向，如皮肤上有瘀点、红斑或原因不明的鼻出血等表现；3)药物性因素因某些药物致使周围血液中血小板计数减少而导致的出血性疾病；4)血小板功能异常如血小板无力症、巨大血小板综合症
坐寸o血小板减少症在临床常见两大类免疫性血小板减少性紫癒(immunethrombocytopenic purpura, ITP)和血栓性血小板减少性紫癒(thromboticthrombocytopenic purpura, TTP)。其中，ITP是临床所见血小板减少最常见的原因。长期以来，ITP被认为是一种原因不明的血小板减少所致的出血性疾病，因而称之为原发性或特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenicpurpura)。后来发现ITP患者体内存在有识别自身血小板抗原的自身抗体，自身抗体与血小板抗原的结合导致血小板寿命缩短、破坏增加和血小板数量减少,说明本病是一种与免疫反应相关的出血性疾病。在临床中，免疫性血小板减少性紫癜(ITP)是一种较为常见的出血性疾病，估计人群中ITP的发病率为1/10000，可以发生在任何年龄阶段。一般儿童多为急性型，成人多为慢性型，多发生于儿童及青年，临床表现为皮肤出现瘀点及瘀斑，皮肤黏膜出血，重症患者伴关节疼痛或腹痛，便血、吐血、崩溃等，严重者可发展为紫癜性肾炎。原发性血小板减少性紫癜是一种免疫性综合病征，是常见的出血性疾病，特点是血循环中存在抗血小板抗体，使血小板破坏过多，引起紫癜；而骨髓中巨核细胞正常或增多,幼稚化。到目前为止，西医治疗血小板减少性紫癜以肾上腺皮质激素为首选，虽然激素能升高血小板，但是激素减量或停止后，血小板又会下降；经常使用激素，对人体副作用非常大,在治疗的同时还会引起如向心性肥胖、高血压、糖尿病等疾病。其他治疗方法如输注血小板、脾脏切除等方法治疗，有增加感染率，引起活动性消化性溃疡、出血、免疫功能下降、高血糖等以及停药后反而使症状加重且疗效不持久等特点；采用免疫抑制剂、脾切除等常规疗法，因激素的禁忌症和副作用而使很多患者形成激素撤减综合症而不能根治；而免疫抑制剂的毒副作用较大，停药后易复发，易导致骨髓抑制和诱发肿瘤的危险而不能广泛应用。近年来，大剂量丙球冲击，血浆置换等新疗法不断出现，但仍缺乏根本性的治疗措施。而中药用于治疗出血性疾病，历史由来已久，古书记载治疗出血性疾病的中药也有几十种之多。但是有些中药材治标不治本，可以在临床上对出血症状有所改善，但是并不能提高血小板数量和质量。
发明内容
针对现有技术所存在的上述问题和缺陷，本发明的目的是提供一种治疗血小板减少症的中药组合物及其制备方法和应用。为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下一种治疗血小板减少症的中药组合物，其特征在于，由中药材茜草与紫草按质量比为1: 3 3 :1制备而成。作为优选方案，所述的治疗血小板减少症的中药组合物，是由中药材茜草与紫草按质量比为1:1制备而成。上述中药组合物的制备方法包括如下步骤
a)茜草的提取精制取茜草药材，用乙醇水溶液回流提取2次，每次I 3小时；合并提取液，减压回收乙醇，得茜草浸膏；用适量水溶解所得浸膏，经大孔吸附树脂柱(非极性或弱极性树脂)吸附，吸附后先用去离子水洗脱杂质，再用体积分数为90%的乙醇水溶液洗脱，然后收集洗脱液，减压回收乙醇；干燥，即得茜草提取精制物，其中茜草醌类成分大于50% ；b)紫草的提取精制将紫草药材粉碎成粗粉，用乙醇水溶液于55 60°C浸提2次，每次I小时；合并提取液，减压回收乙醇，得紫草稠浸膏；加入质量浓度为I 2%的氢氧化钠水溶液，充分搅拌，使稠浸膏溶解，并使溶液颜色由紫红色变为蓝色；静置，抽滤，残渣用质量浓度为I 2%的氢氧化钠水溶液冲洗3次，滤除残渣；再向滤液中加入盐酸，调pH值至4. 0 5. 0 ;搅拌，析出红色固体，静置，用蒸馏水将沉淀洗至中性，再于50 60°C减压干燥，即得紫草提取精制物，其中羟基萘醌总色素的含量大于60% ；c)将步骤a)制得的茜草提取精制物与步骤b)制得的紫草提取精制物混匀，即得所述的中药组合物。所述的乙醇水溶液推荐为体积分数为75 95%的乙醇水溶液，优选体积分数为95%的乙醇水溶液。用乙醇水溶液回流提取茜草药材时，每次所用的乙醇水溶液的体积优选为茜草药材质量的8 10倍。
用乙醇水溶液浸提紫草药材时，每次所用的乙醇水溶液的体积优选为紫草药材质量的8 10倍。上述中药组合物或所述中药组合物与药学上可接受的药物载体可应用于制备治疗血小板减少症的药物制剂，尤其可应用于制备治疗免疫性血小板减少症的药物制剂。所述的药物制剂可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散齐U、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂；优选口服剂型，如胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等。所述的口服剂型可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色齐U、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。适宜的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂；适宜的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠；适宜的润滑剂包括，例如硬脂酸镁；适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。本发明的以中药茜草和紫草提取物制备的组合物，可治疗血小板减少症，具有改善出血症状快、稳定性好、无毒副作用等优点。药理药效学实验结果表明不同剂量组的本发明组合物均能极显著缩短小鼠出血及凝血时间(P < 0.01)，高、中剂量组可显著缩短慢性ITP模型大鼠的凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)及部分凝血活酶时间(APTT) (P
<0. 05)，且高、中剂量组有极显著升高大鼠血小板作用(P < 0. 01)。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不是用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求书所限定的范围。实施例1a)茜草的提取精制取茜草药材300kg，用药材质量10倍量的体积分数为95%的乙醇水溶液回流提取，每次1. 5小时，提取2次；合并提取液，减压回收乙醇，得茜草粗浸膏；用300L水溶解该浸膏，经大孔吸附树脂柱吸附，吸附完全后先用去离子水洗去水溶性杂质，再以8倍量体积的体积分数为90%的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇；干燥，即得茜草提取物
5.0kg，该茜草提取物为深褐色固体。参照2010版《中国药典》茜草项下鉴别薄层鉴别方法，制备该提取物的适当溶度的供试品溶液和对照药材溶液，并以大叶茜草素为对照品，配制对照品溶液。照薄层色谱法，吸取各样品适量，分别点样于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60 90°C )-丙酮(4 I)为展开剂，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在于对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。另以甲醇为溶剂配制该提取物至适当浓度，超声溶解，定容至棕色量瓶中，以紫外-分光光度法在250nm波长下检测，以大叶茜草素为对照品，测得该提取物中含茜草醌类成分为50. 11%。该提取物的水分含量为4. 78%。
b)紫草的提取精制将紫草药材300kg粉碎成粗粉，用药材质量10倍量的体积分数为95%的乙醇水溶液于55°C浸提，每次I小时，浸提2次；合并提取液，减压回收乙醇至稠浸膏；加质量浓度为2%的氢氧化钠水溶液约600ml，充分搅拌，使稠浸膏溶解，并使溶液由紫红色变为蓝色；静置，抽滤，残渣用质量浓度为2%的氢氧化钠水溶液冲洗3次，滤除残渣；再向滤液中加入浓盐酸，调PH值约至4.0;搅拌，析出红色固体，静置，抽滤，用蒸馏水将沉淀洗至中性，再将所得固体在50°C减压真空干燥，即得紫草提取物10. 0kg，该紫草提取物为红棕色固体。参照2010版《中国药典》紫草项下鉴别薄层鉴别方法，制备该提取物的适当浓度的供试品溶液和对照药材溶液，以环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5 5 0. 5 0.1)为展开剂，点样于同一硅胶G薄层板上，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；再喷以10%氢氧化钾甲醇溶液，斑点变为蓝色。另经紫外-分光光度发测定(入=516nm)，所得固体中羟基萘醌总色素的含量为74. 15%。该提取物的水分含量为4. 5%。实施例2取质量比为1:1的茜草、紫草为原料，按照本发明所述的提取精制工艺，制得茜草提取物50g、紫草提取物IOOg;将二者混匀，并加入淀粉80g、糊精120g、羧甲基淀粉钠20g,以体积分数为50%的乙醇水溶液作为粘合剂，制软材，过14目筛制颗粒，干燥，加入适量滑石粉压片，素片包薄膜衣，即得含本发明所述的中药组合物的包衣片。实施例3取质量比为1:1的茜草、紫草为原料，按照本发明所述的提取精制工艺，制得茜草提取物76. 7g、紫草提取物153. 3g ;将二者混匀，并加入加入乳糖480g，甘露醇100g，交联PVP100g，95%乙醇适量，硬脂 酸镁15g，压制成片，即得含本发明所述的中药组合物的固体分散片。实施例4取质量比为1: 3的茜草、紫草为原料，按照本发明所述的提取精制工艺，制得茜草提取物14. 3g、紫草提取物85. 7g;将二者混匀，并按质量比为1: 2比例加入聚乙二醇4000，混匀，加热熔融，密闭并保温在80°C，滴入0 10°C液体石蜡中，收集滴丸，浙尽并擦去冷却液，即得含本发明所述的中药组合物的滴丸剂。实施例5取质量比为1: 2的茜草、紫草为原料，按照本发明所述的提取精制工艺，制得茜草提取物100g、紫草提取物IOOg ;将二者混匀，并加入乳糖90g，硬脂酸镁1. 5g，混匀后压大片，将此预压片在摇摆式颗粒机中破碎，整粒，用铝塑复合膜分装，即得含本发明所述的中药组合物的颗粒剂。实施例6取质量比为2 I的茜草、紫草为原料，按照本发明所述的提取精制工艺，制得茜草提取物40g、紫草提取物160g ;将二者混匀，并加入淀粉150g，混匀，过七号筛，装胶囊，即得含本发明所述的中药组合物的胶囊剂。实施例7将20g蜂蜡、500g大豆油加热至约50°C，搅拌待其完全熔融，即制成蜂蜡油；再取质量比为2 I的茜草、紫草为原料，按照本发明所述的提取精制工艺，制得茜草提取物100g、紫草提取物400g ;将二者混匀，并加入蜂蜡油中，搅匀；用胶体磨湿法粉碎过筛，制成油混悬剂，备用；取30(^明胶加入适量水，使之吸水膨胀，将150g甘油加热后加入已膨胀的明胶中，搅拌加热至熔融；将外壳胶液过滤抽气，除去部分水分和泡沫，使用转模式软胶囊制造机，将调配好的内容物压入外壳胶片，包于其中形成软胶囊。洗去胶囊表面的油污，置于温度为25 30°C，相对湿度为20 25%的烘箱中干燥，即得含本发明所述的中药组合物的软胶囊剂。实施例8取质量比为3 I的茜草、紫草为原料，按照本发明所述的提取精制工艺，制得茜草提取物240g、紫草提取物160g ;将二者混匀，并以水为润湿剂制成丸，干燥，打光，即得含本发明所述的中药组合物的浓缩丸剂。实施例9 :药效学实验1.材料和方法1.1实验动物昆明种小鼠，雌雄各半，体重20±2. Og ;Wistar大鼠，体重200±20g，雌雄各半。实验动物由上海中医药大学实验动物中心提供，合格证号为SCXK(沪)2007-0005。1. 2试验药品由实施例1制得的茜草提取物和紫草提取物混匀制得的本发明所述的中药组合物。酚磺乙胺(止血 敏)芜湖康奇制药有限公司生产，批号20040216。生理盐水郑州市永和制药有限公司生产，批号04071005。1. 3药物的配制本发明中药组合物生理盐水配制，分别配制高、中、低浓度，浓度分别为0. 5g总生药/晕升、1. Og总生药/晕升、2. Og总生药/晕升；酚磺乙胺生理盐水配制，浓度为0. lmg/ml ；2.实验方法和结果2.1出血时间的测定设定生理盐水组(空白对照组)，止血敏组(阳性对照组)，给药组(高、中、低)，每个处理组选取小鼠50只，称重，随机分成5组，每组10只。连续给药3d，于末次给药后Ih后取滤纸卷成与小鼠身体直径相似的滤纸筒，一端封闭，让小鼠钻入；然后用剪刀剪小鼠尾尖约3mm，从出血开始按下秒表计时，每隔15s用滤纸轻点小鼠尾尖，直至无血迹或看不清血迹为止，所记时间即为出血时间，结果见表I所示。2. 2凝血时间的测定设定生理盐水组(空白对照组)，止血敏组(阳性对照组)，给药组(高、中、低)，每个处理组选取小鼠50只，称重，随机分成5组，每组10只。给药3d后，于末次给药Ih后，用一次性20 ii I采血管插入小鼠内眦球后静脉丛取血，取满20ii I血。每隔15s折断毛细血管一小段，检查有无血凝丝出现，记录从采血至出现纤维蛋白丝的时间(凝血时间)，结果见表I所示。表1.出血时间和凝血时间的测定结果
权利要求
1.一种治疗血小板减少症的中药组合物，其特征在于由中药材茜草与紫草按质量比为1: 3 3 :1制备而成。
2.根据权利要求1所述的治疗血小板减少症的中药组合物，其特征在于由中药材茜草 与紫草按质量比为1:1制备而成。
3.一种权利要求1所述的治疗血小板减少症的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤 a)茜草的提取精制取茜草药材，用乙醇水溶液回流提取2次，每次I 3小时；合并提取液，减压回收乙醇，得茜草浸膏；用适量水溶解所得浸膏，经大孔吸附树脂柱(非极性或弱极性树脂)吸附，吸附后先用去离子水洗脱杂质，再用体积分数为90%的乙醇水溶液洗脱，然后收集洗脱液，减压回收乙醇；干燥，即得茜草提取精制物，其中茜草醌类成分大于50% ； b)紫草的提取精制将紫草药材粉碎成粗粉，用乙醇水溶液于55 60°C浸提2次，每次I小时；合并提取液，减压回收乙醇，得紫草稠浸膏；加入质量浓度为I 2%的氢氧化钠水溶液，充分搅拌，使稠浸膏溶解，并使溶液颜色由紫红色变为蓝色；静置，抽滤，残渣用质量浓度为I 2%的氢氧化钠水溶液冲洗3次，滤除残渣；再向滤液中加入盐酸，调pH值至4. 0 5. 0 ;搅拌，析出红色固体，静置，用蒸馏水将沉淀洗至中性，再于50 60°C减压干燥，即得紫草提取精制物，其中羟基萘醌总色素的含量大于60% ； c)将步骤a)制得的茜草提取精制物与步骤b)制得的紫草提取精制物混匀，即得所述的中药组合物。
4.根据权利要求3所述的治疗血小板减少症的中药组合物的制备方法，其特征在于所述的乙醇水溶液为体积分数为75 95%的乙醇水溶液。
5.根据权利要求4所述的治疗血小板减少症的中药组合物的制备方法，其特征在于所述的乙醇水溶液为体积分数为95%的乙醇水溶液。
6.根据权利要求4所述的治疗血小板减少症的中药组合物的制备方法，其特征在于用乙醇水溶液回流提取茜草药材时,每次所用的乙醇水溶液的体积为茜草药材质量的8 10倍。
7.根据权利要求4所述的治疗血小板减少症的中药组合物的制备方法，其特征在于用乙醇水溶液浸提紫草药材时,每次所用的乙醇水溶液的体积为紫草药材质量的8 10倍。
8.权利要求1所述的治疗血小板减少症的中药组合物或所述的中药组合物与药学上可接受的药物载体在制备治疗血小板减少症的药物制剂中的应用。
9.权利要求1所述的治疗血小板减少症的中药组合物或所述的中药组合物与药学上可接受的药物载体在制备治疗免疫性血小板减少症的药物制剂中的应用。
10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于所述的药物制剂包括薄膜包衣片、固体分散片、颗粒剂、胶囊剂、软胶囊剂、浓缩丸剂和滴丸剂。
全文摘要
本发明公开了一种治疗血小板减少症的中药组合物及其制备方法和应用。所述的中药组合物是由中药材茜草与紫草按质量比为1∶3～3∶1制备而成。该组合物的制备，是首先制得茜草提取精制物和紫草提取精制物，然后将两者混匀。药理药效学实验结果表明不同剂量组的本发明组合物均能极显著缩短小鼠出血及凝血时间，高、中剂量组可显著缩短慢性ITP模型大鼠的凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)及部分凝血活酶时间(APTT)，且高、中剂量组有极显著升高大鼠血小板作用。因此，本发明的中药组合物可应用于制备治疗血小板减少症的药物制剂，尤其可应用于制备治疗免疫性血小板减少症的药物制剂。
文档编号A61K36/74GK103054976SQ20111032204
公开日2013年4月24日 申请日期2011年10月21日 优先权日2011年10月21日
发明者季光, 浦益琼, 张彤, 王冰, 李国文, 陶建生 申请人:上海中医药大学