专利名称：一种金针菇甾醇提取物脂质体制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于纳米医药领域，涉及从食用菌中提取的水不溶性有效部位及其有效成分加工的制剂，确切地说是一种金针菇留醇提取物脂质体制剂。
背景技术：
金针燕(Flammulina velutipes (ff. Curt. :Fr.) Singer)，又名金钱菌、朴蕈、冬燕、毛柄金钱菌，属真菌门(Eumycota),担子菌亚门(Basidiowyeotina),层菌纲(Hymenomycetes)，伞菌目(Agaricales), 口蘑科(Tricholomataceae),小火焰菌属(Flammulina)、或金钱菌属(Collybia),是古今中外著名的食用菌之一 {参％ .郭美英主编，《中国金针菇生产》，北京:中国农业出版社，2000·)。
金针菇富含糖类、蛋白质、膳食纤维和矿物质等营养物质。近些年来，学者们已从金针菇中分离得到许多种蛋白质和多糖类活性物质，这些物质具有抗肿瘤，抗病毒，抗虫，抗真菌，抗人的免疫缺陷病毒(HIV)，降低血清胆固醇，降低血压，提高机体免疫力，以及保护肝脏等广泛药理活性。已经报道的蛋白质类成分主要包括真菌免疫调节蛋白，金针菇毒素，火 素，火燕蛋白原，酶，凝集素，以及Flammulin、Velutin、Flammin和Velin等四种核糖体失活蛋白等。多糖类成分包括PA3DE、PA5DE, EA3> EA5, EAf^P EA7, SFAl, FVP2，胞外多糖，卢-葡聚糖，木甘露聚糖以及甘露岩藻半乳聚糖等(参见Yaqi Wang, Li Bao,Xiaoli Yang， e tc. Bioac ti ve sesqui terpenoids from the solid cul ture of theedible mushroom flammulina velutipes growing on cooked rice[J]. Food Chemistry,2012，132(3): 1346-1353· Hui-Hsin Chang, Kuang-Yang Hsieh，Chen-Hao Yeh，etc·Oral administration of an enoki mushroom protein fve activates innate andadaptive iwmuni ty and induces anti-tumor activity against murine hepatocellularcarcinoma [J]· International Inmunopharmacology, 2010, 10: 239-246· ) 0除此之外，留醇、脂肪酸、黄酮、萜类以及核苷等小分子物质也被从中发现。目前关于这些小分子物质的生物活性报道主要集中在抗菌、抗氧化方面(参见 '方玉梅，张春生，谭萍，etc·金针菇黄酮类化合物的抗氧化性作用[J].食品研究与开发，2012，33(3): 15-18 ； K K Tereshina, A S. Memorskaya. Adaptation of flammulinavelutipes to hypothermia in natural environments the role of lipids andcarbohydrates [J]. Microbiology，2005，74 (3): 279-283. ) 0留醇(Sterol)是一类重要的三胳类(Triterpenes)化合物，它们广泛存在于植物，动物和真菌当中。根据来源不同，留醇可分为动物留醇和植物留醇(Plant sterols,PS)。胆固醇是动物体内的主要留醇，其中游离胆固醇有稳定细胞膜的作用。植物留醇是植物细胞膜的重要组成部分，与胆固醇类似，自由植物留醇有助于稳定植物细胞膜中的磷脂双层，它们结构与胆固醇相似，但在C-24位有一个甲基或乙基基团。在高等植物中，最常见的PS是豆甾醇(Stigmasterol)、々-谷甾醇{β -sitosterol)和菜油留醇(Campesterol)，它们有一个共同特点是在留核的C_5，6位有一个双键，这种植物留醇称为Phytosterols。在十字花科植物中主要存在另外一种甾醇-菜籽甾醇(Brassicasterol)。饱和PS,也称为植物甾烧醇(Phytostanols),是在甾
核中没有双键的。在过去的15年里，植物留醇(PS)已经被证明具有降低血清总胆固醇和低密度脂蛋白(LDL)胆固醇浓度的功效，被纳入功能性食品的范畴。许多临床研究显示，Γ3克/天PS的剂量能够显著降低血浆LDL胆固醇的浓度。植物留醇还可用于辅助治疗，与他汀类药物联合使用的效果超过他汀类药物加倍剂量的效果。现在已经有40多个关于PS产品的专利，超过 15 个 PS 产品行销全世界(参见( . Garcia-Lla tas, Μ. T. Rodriguez-Estrada.Current and new insights on phytosterol oxides in plant sterol-enrichedfoodfjj. Chem Phys Lipids, 2011, 164(6): 607-624.) 0关于植物甾醇降低胆固醇作用的确切机制尚不清楚，目前认为存在以下几种可能(1)由于植物留醇比胆固醇具有更强的疏水性，因此植物留醇可以取代胆固醇进入混合微粒(Mixed micelles)中。这种取代作用使微粒中的胆固醇含量下降,从而减少胆固醇的吸收。(2)植物留醇可以减缓胆固醇在肠上皮细胞中的酯化速度。由于酯化后的固醇·易于进入乳糜微粒中，而未酯化的固醇则较难进入乳糜微粒，因此植物留醇可以减少乳糜微粒中胆固醇的总量。(3)植物甾醇可能通过ATP结合盒(ATP-binding cassette, ABC)转运体家族影响胆固醇的吸收。ABCG作为ABC的一个亚族，其中两个基因ABCG5和ABCG8与人体对留醇的选择性吸收有关，也与胆汁中固醇的分泌有关{参％·.周晓星，苏宜香.植物甾醇降胆固醇作用的研究现状[J].国外医学卫生学分册，2007，34(2): 101-105·)。目前已经从金针菇的子实体以及菌丝体中得到17种包括麦角留类和豆留类的甾醇化合物(2览，24/P) -ergosta-7, 22-diene_3卢，5 σ，6 σ，9 σ -tetrol (I)，(22Ε, 24/P)-ergosta-7, 22-diene_3β ,5 α ,ββ -triol (2), (245) -ergosta-7-ene-3β ,5a ,ββ -triol (3), 5 σ , 8 σ -epidioxy- (22/ , 2AR) -ergosta-6, 22-diene_3/ _ol (4) , 5 σ , 8 σ -epidioxy- (2451) -ergost-6-ene~3β _ol (5), (22/ , 24/P) -ergosta-5, 7, 9(11), 22-tetraene-3/ -oI (6), (2451) -ergosta-7-ene-3β ~o\ (7), ergosta-5, 8, 22-triene-3/ -ol (8)，ergosterol (9), ergosta-5, 7-diene-3/ -oI (10), ergosta-7, 22-diene-3/ -ol (11)，ergosta-30 -D-glucopyranoside (12), ergosta-7, 22-diene_5，6-epoxy-3_ol (13),5 a -stigmastan-3, 6-dione (14)，(24/P) -stigmast-4-ene-3_one (15)，ergosta-4, 6, 8 (I4), 22-tetraene-3-one (16), ergosta-8(14)-ene~3β -ol (17)。上述的化合物9 (ergosterol,麦角甾醇)是金针燕所含甾醇类物质的主要成分之一，在植物界也广泛存在，其抗肿瘤活性已经得到了多次实验的证实，作用机制亦部分被揭示。Takaku等从姬松鸾中分离出ergosterol,400和800 mg · kg4的剂量连续20 d 口服给予肉瘤180小鼠，可以显著抑制肿瘤的生长，而且还没有化疗药物通常所引起的如体重、附睾脂肪组织、胸腺、脾脏重量和白细胞数降低等副作用。进一步研究表明，ergosterol能够直接抑制基底膜诱导的新生血管形成，因此它是通过直接抑制实体瘤诱导的血管生成来发挥抑瘤活性的{参见..Takeshi Takaku, Yoshiyuki Kimura, HiromichiOkuda. Isolati on of an antitumor compound from agaricus blazei muri11 and itsmechanism of action [J]. Biochemical and Molecular Action of Nutrients, 2001,131 (5): 1409-1413.)。Yazawa等从Polyporus醇提物中分离出ergosterol,它对5%糖精钠(SodiumSaccharin)、0· 01%N_ 丁基-N-(4-轻基丁基)亚硝胺(BHBN)、3%DL_ 色氛酸(Trp)、2% 丁基化羟基苯甲醚(BHA)等诱导的Wistar大鼠膀胱癌，有很好的治疗作用{参UasuharuYazawa, Masami Yoko ta, Kiyoshi Sugiyama. An ti tumor promo ting effect of an activecomponent of polyporus, ergosterol and re la ted compounds on rat urinary bladdercarcinogenesis in a short-term test with concana valin A[J], Bi ol. Pharm. Bull.,2000, 23(11): 1298-1302.)。P21是细胞周期素依赖性激酶抑制因子(Cyclin-dependent kinase inhibitor,CDKI )的一种，属于细胞周期负性调节因子，它可通过抑制细胞周期素依赖性激酶(Cyclin-dependent kinase, CDK) CDK2、CDK4的活性，使细胞不能跨越G期检查点，从而阻滞细胞周期的进行，抑制细胞增殖，是肿瘤预防和治疗一个靶点。张娴等发现ergosterol在5(T200可以抑制!fepG2细胞增殖，机制可能与增高Ρ21 mRNA和蛋白表达相关。在 ergosterol 作用 48 h 和 72 h 后，100、200 μ g *mL 1 组 P21 mRNA 的表达明显增高。24h后P21蛋白已经有升高趋势,48 h、72 h后明显升高,提示P21可能是ergosterol的作用靶点。{参％ .张娴，黄羽’曾星·麦角留醇对肝癌细胞H印G2增殖及P21表达的影响 /77-中药药理与临床,2011，27(5): 26-29.)
高虹等人采用小鼠S180移植瘤实验研究了巴西燕子实体中ergosterol的体内抗肿瘤活性。结果表明，巴西燕子实体中提取的ergosterol在剂量10、50和100 mg · kg—1 · cf1时的瘤重抑制率分别为62. 75%,76. 61%和79. 18%，说明ergosterol有较强的抑瘤活性，并且认为其抑瘤活性不是通过细胞毒作用发挥，而是通过抑制肿瘤血管增生来扼杀肿瘤(参见·.高虹，史德芳，杨德，etc.巴西菇麦角留醇抗肿瘤活性及作用机理初探/77.中国食用菌，2011, 30(6): 35-39. ) 然而，室温条件下游离的植物留醇在水和油中的溶解度均很小，在人体内的吸收率亦很低，约为 2% 5% (参见-.I. Rudkowska. Plant sterols and stanols for heal thyageing [J]· Maturi tas, 2010，66(2): 75 -似.)。为了扩宽植物甾醇的应用范围，提高其溶解度是当务之急。目前主要有两种方法，其一是利用留核上重要的活性基团——C-3位羟基，可与脂肪酸化合形成留醇酯，植物留醇酯比游离植物留醇在油中的溶解度增加约10倍；其二是利用乳化剂的乳化增溶作用和高压均质技术，使植物留醇在水相中分散成纳米级的分散体，增加它的溶解度。脂质体(Liposome)是一种将药物包封于类脂质双分子层的超微型球状载体制齐U。它们由天然或合成的磷脂和胆固醇制成，与脂质单层结构不同，它们是双层结构，分为亲水性基团和疏水性基团。双层脂质的亲水性基团伸向水相(外部和内部)，疏水性基团则伸向另一端，形成一个薄膜状的内核。脂质体的这一特点使得亲水性和疏水性药物都能够被包封，亲水性药物包埋在内部水相中，水难溶性和油溶性药物驻留在脂双层中。脂质体的大小取决于材料组成和制备方法，直径从50 nm左右至超过I μπι。1971年,Rymen等人开始将脂质体用作药物载体，通过减低毒性提高药效以改善药物治疗指数。由于具有纳米粒径，良好的生物相容性，生物可降解性，疏水性和亲水性，低毒性和免疫原性等许多优点，在所有纳米药物平台中，脂质体是最早建立起来的平台之一。时至今日，脂质体对肿瘤治疗已经产生了重大影响，美国FDA已批准多个配方用于癌症治疗(参见A Yang, C. Jin,Y. Jiang，etc. Liposome based deli very systems in pancreatic cancer treatment:From bench to bedside [J], Cancer Treat Rev, 2011, 37(8): 633-642.)。经过四十多年的发展，脂质体的应用范围从肿瘤化疗和真菌感染延伸至疫苗和最近的基因治疗。尽管脂质体在基因治疗中还处于基础研究阶段，但它具有低毒，低免疫反应，低致癌性，携带基因大小类型不受限制，易于制备和质量控制等显著优势，在未来基因治疗中具有广阔的发展前景(参见-X Zheng, J. Lu, L. Deng, etc. Preparation and characterizationof magnetic cationic liposome in gene delivery [J]· Int J Pharm, 2009，366(1-2):211-217.)。尽管作为药物载体有上述优势，但由于在血液里面循环时间短，体内稳定性和靶向性差，是未经修饰脂质体的缺点(图1A)。为了增加脂质体在目标组织和细胞内的积累，在脂质体表面附加配体(抗体以及它们的片段，叶酸，肽类或转铁蛋白等基团)能够识别和绑定特定的细胞(图1B)。然而，大多数的免疫脂质体仍在肝脏等部位的网状内皮系统细胞中迅速被消除。聚乙二醇(Polyethylene glycol, PEG)常用于修饰纳米粒子以达到增加稳定性和延长循环时间。聚乙二醇化脂质体(又称为隐形脂质体)不仅可以减少巨噬细胞的吞噬，还可以稳定和延长体内循环时间，通过EPR效应选择性地积聚在肿瘤部位，来增强一些配方的治疗效果(图1C)。为制备长循环免疫脂质体，抗体可以被连接到脂质 体的表面，或接枝聚乙二醇链的远端。其中后者是更好的抗体目标耦合方法，因为没有PEG链带来的干扰(图1D)。除了包封药物，脂质体还可以装载带磁性纳米粒以增强磁靶向性，和(或)胶体金、银纳米粒或荧光分子用于诊断和微观分析(图1E)。磁性脂质体当进入体内后，在体外磁场的作用下引导药物在体内定位集中和定向移动，靶向给药效果更好。肿瘤部位的PH值，温度，血管内皮细胞通透性或间质压力均不同于正常组织，pH敏感脂质体和热敏脂质体能使药物大量聚集在目标组织，如图I所示(参见'Vladimir P. Torchilin.Recent advances with liposomes as pharmaceutical carriers [J]. Nature ReviewsDrug Discovery 2005，4: 145-160.)。金针菇留醇提取物是将金针菇子实体粉碎后用醇溶液提取，通过浓缩、萃取、皂化反应、结晶等步骤得到的不皂化物。研究证明，该提取物具有体外抑制人肝癌细胞(HepG2)、人胃腺癌细胞(SGC)、人胶质瘤细胞(U251)和人肺腺癌细胞(A549)等肿瘤细胞生长的活性，可用于制备抗肿瘤药物(参见·.金针菇中具有抗肿瘤作用的不皂化提取物及其制法和用途[P]，专利申请号:201110364098. 5)。它主要包含ergosterol,22, 23-dihydroergosterol, ergosta-5, 8, 22-triene~3-ol 和 ergost-8 (14) -ene-3β -οI等四种成分。它易溶于乙醚、氯仿以及热乙醇等有机溶剂，室温下极难溶于水和油，具备植物甾醇的一般性质。目前尚未有以金针菇留醇提取物为原料药，制备成脂质体制剂，以达到提高该提取物溶解度和生物利用度的研究报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种金针菇留醇提取物的脂质体制剂，将难溶于水的金针菇甾醇提取物制备成脂质体制剂，提高它的溶解度，改善它在体内的生物利用度极低的缺点。本发明的另一目的是提供这种金针菇留醇提取物脂质体制剂的制备方法。为实现上述目的，本发明采用的技术方案是
一种金针菇留醇提取物脂质体制剂，它是包含具有抗肿瘤作用的金针菇留醇提取物的脂质体，它主要由以下质量组分组成金针菇留醇提取物I份；磷脂1(Γ20份；胆固醇0. 5^2份；肉豆蘧酸异丙酯f 10份；胆酸钠f 10份。所述的金针菇留醇提取物是将金针菇子实体用醇溶液提取，通过浓缩、萃取、皂化反应、结晶等步骤得到(参见专利申请号CN 201110364098.5)。它主要包括ergosterol，22, 23-dihydroergosterol, ergosta-5, 8, 22-triene-3/ -οI 和 ergost-8 (14) -ene-3β -οI等四种成分，其中前面二种成分含量较高。所述的一种金针菇留醇提取物脂质体制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤
(1)在圆底烧瓶中按上述配方称取金针菇留醇提取物和磷脂，倒入无水乙醇，乙醇的用量为每克金针菇留醇提取物加无水乙醇2(Γ40毫升，在4(T60°C下超声促使金针菇甾醇提取物和磷脂溶解；
(2)将步骤(I)所得的混合物蒸发，使每克金针菇留醇提取物用量蒸发至:TlO毫升， 加入上述配方量的胆固醇、肉豆蘧酸异丙酯和胆酸钠，再加入无水乙醇，无水乙醇加入的量为每克金针菇留醇提取物用量加5(Γ100毫升，超声溶解后，旋转蒸发，使完全挥去乙醇，在圆底烧瓶壁上形成固态残留物；
(3)加入蒸馏水或磷酸盐缓冲液水合，加入的量为每克金针菇留醇提取物用量添加100^200毫升，直至圆底烧瓶壁上的固态残留物被洗脱，水合后即得金针菇留醇提取物脂质体制剂。一种上述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的前体，它是将上述脂质体溶液滴入支撑剂水溶液中，或将支撑剂加入所述脂质体中，通过冷冻干燥法、喷雾干燥法或烘干法制成前体脂质体。上述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的前体脂质体，将其加入水中，搅拌，即恢复得到金针菇留醇提取物脂质体制剂。上述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的前体脂质体，所述的支撑剂是甘露醇、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、葡萄糖或海藻糖，或者是它们的混合物。上述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的前体脂质体的制备方法，其进一步包括下述步骤将上述脂质体溶液滴入支撑剂水溶液中，或将支撑剂加入所述脂质体中，通过冷冻干燥法、喷雾干燥法或烘干法制成前体脂质体。上述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的前体脂质体的制备方法，其中所述支撑剂选自甘露醇、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、葡萄糖、海藻糖及其混合物。本发明的脂质体的外观呈浅黄色澄清透明状，平均粒径为108 nm，包封率为(71. 3土 O. 1)%。该脂质体制剂极大地提高了水难溶性药物金针菇留醇提取物的溶解度，有利于改善其在体内生物利用度极低的缺点，而且制备方法简单，易于工业化大生产。所述的金针菇留醇提取物脂质体还可以加入支撑剂干燥制成前体脂质体，制成各种剂型。有益效果
本发明具有以下的有益效果
1、本发明解决了金针菇留醇提取物溶解度低的问题，极大地增大药物的溶解度，提高了药物的生物利用度；
2、本发明采用的配方和方法简单可行，无需特殊设备，便于大规模工业化生产。
图I为脂质体的发展过程示意图。(A)早期传统的脂质体，溶于水的药物(a)包封在内部水相中，亲脂性药物(b)镶嵌在脂质双层膜当中；(B)抗体免疫脂质体，抗体共价偶联在膜的活性磷脂上(C)，或疏水基团经过初步修饰后固定在脂质膜上(d);(C)连接有保护性聚合物(如PEG)的长循环脂质体，可以阻断脂质体表面与吞噬蛋白(f)相互作用；(D)长循环免疫脂质体同时附有保护聚合物和抗体，它们可以连接到脂质体表面(g)，或更好的链接在接枝聚合物链的末端(h);(E)新一代脂质体，表面可以通过不同的方式被修改(分别或同时)。比如保护性聚合物(i)，保护性聚合物和靶向配体，如抗体(j)，附带诊断标记(k),纳入带正电荷脂质(I),与DNA络合产生Iipoplex结构(m),纳入对刺激敏感的脂质(η)，附带对刺激敏感的聚合物(O)，附加细胞穿透肽(P)，连上病毒成分(q)，除了药物，脂质体还可装载磁性微粒(r)以增强磁靶向性，和(或)胶体金、银纳米粒或荧光分子(S)用于微观分析。图2为实施例5制备的金针菇甾醇提取物脂质体制剂的透射电镜照片(X500 k)。图3为实施例5制备的金针菇留醇提取物脂质体制剂的粒径分布图。
图4为实施例5制备的金针菇甾醇提取物脂质体制剂平均血药浓度-时间曲线图(η=5) ο
具体实施例方式 以下所列实施例有助于本领域技术人员更好地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。实施例I金针菇留醇提取物脂质体制剂
在圆底烧瓶中按下表称取金针菇甾醇提取物、磷脂，溶于20 mL无水乙醇中，在40°C下超声促使金针菇留醇提取物和磷脂溶解；蒸去大部分乙醇至3毫升，加入胆固醇、肉豆蘧酸异丙酯和胆酸钠，再加入无水乙醇50 mL，超声溶解后，旋转蒸发，使完全挥去乙醇，在圆底烧瓶壁上形成固态残留物；加入蒸馏水水合，直至圆底烧瓶壁上的固态残留物被洗脱，水合后即完成。
组分I质量/体积
金针菇留醇提取物
磷脂_JLOg_
胆固醇_O- 5g
1 异丙酯 ig
胆酸纳_Ig_
蒸馏水IlOOmL实施例2金针菇留醇提取物脂质体制剂前体
在圆底烧瓶中按下表称取金针菇甾醇提取物、磷脂，溶于20 mL无水乙醇中，在40°C下超声促使金针菇留醇提取物和磷脂溶解；蒸去大部分乙醇至3毫升，加入胆固醇、肉豆蘧酸异丙酯和胆酸钠，再加入无水乙醇50 mL，超声溶解后，旋转蒸发，使完全挥去乙醇，在圆底烧瓶壁上形成固态残留物；加入蒸馏水水合，直至圆底烧瓶壁上的固态残留物被洗脱，即得到金针菇留醇提取物脂质体制剂。然后加入过100目筛的蔗糖粉末，置_20°C冰箱中放置2h后，冷冻干燥，粉碎，即得粉末状的金针菇留醇提取脂质体制剂前体。将金针菇留醇提取脂质体制剂前体加水搅拌，即恢复成金针菇留醇提取脂质体制剂。
组分I质量/体积
金针菇留醇提取物Ilg
权利要求
1.一种金针菇留醇提取物脂质体制剂，其特征是它是包含具有抗肿瘤作用的金针菇甾醇提取物的脂质体，它主要由以下质量组分组成金针菇留醇提取物I份；磷脂1(Γ20份；胆固醇O. 5^2份；肉豆蘧酸异丙酯f 10份；胆酸钠f 10份。
2.一种制备权利要求I所述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的方法，其特征是包括以下步骤 (1)在圆底烧瓶中按上述配方称取金针菇留醇提取物和磷脂，倒入无水乙醇，乙醇的用量为每克金针菇留醇提取物加无水乙醇2(Γ40毫升，在4(T60°C下超声促使金针菇甾醇提取物和磷脂溶解； (2)将步骤(I)所得的混合物蒸发，使每克金针菇留醇提取物用量蒸发至:TlO毫升，加入上述配方量的胆固醇、肉豆蘧酸异丙酯和胆酸钠，再加入无水乙醇，无水乙醇加入的量为每克金针菇留醇提取物用量加5(Γ100毫升，超声溶解后，旋转蒸发，使完全挥去乙醇，在圆底烧瓶壁上形成固态残留物； (3)加入蒸馏水或磷酸盐缓冲液水合，加入的量为每克金针菇留醇提取物用量添加100^200毫升，直至圆底烧瓶壁上的固态残留物被洗脱，水合后即完成。
3.—种权利要求I所述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的前体，其特征是它是将权利要求I所述脂质体溶液滴入支撑剂水溶液中，或将支撑剂加入所述脂质体中，通过冷冻干燥法、喷雾干燥法或烘干法制成前体脂质体。
4.根据权利要求3所述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的前体脂质体，所述的支撑剂是甘露醇、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、葡萄糖或海藻糖，或者是它们的混合物。
5.一种权利要求3所述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的前体的制备方法，其特征是将权利要求2制得的脂质体制剂滴入支撑剂水溶液中，或将支撑剂加入所述脂质体制剂中，通过冷冻干燥法、喷雾干燥法或烘干法制成前体脂质体。
6.根据权利要求5所述的金针菇留醇提取物脂质体制剂的前体脂质体的制备方法，其特征是所述的支撑剂选自甘露醇、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、葡萄糖或海藻糖，或者是它们的混合物。
全文摘要
一种金针菇甾醇提取物脂质体制剂，它是包含具有抗肿瘤作用的金针菇甾醇提取物的脂质体，主要由以下质量组分组成金针菇甾醇提取物1份；磷脂10~20份；胆固醇0.5~2份；肉豆蔻酸异丙酯1~10份；胆酸钠1~10份。本发明的脂质体的外观呈浅黄色澄清透明状，平均粒径为108nm，包封率为(71.3±0.1)%。该脂质体制剂极大地提高了水难溶性药物金针菇甾醇提取物的溶解度，有利于改善其在体内生物利用度极低的缺点，而且制备方法简单，易于工业化大生产。所述的金针菇甾醇提取物脂质体还可以加入支撑剂干燥制成前体脂质体，制成各种剂型。本发明公开了其制法。
文档编号A61K36/06GK102940606SQ20121038594
公开日2013年2月27日 申请日期2012年10月12日 优先权日2012年10月12日
发明者徐希明, 易承学, 余江南 申请人:江苏大学