黄芪甲苷的新用途
【专利摘要】本发明提供了一种黄芪甲苷的新用途，具体提供了黄芪甲苷在制备治疗脓毒症的药物中的应用。
【专利说明】黄芪甲苷的新用途
[0001]【技术领域】
[0002]本发明涉及黄芪甲苷的一种新用途，具体涉及黄芪甲苷在制备治疗脓毒症的药物中的应用。
【背景技术】
[0003]脓毒症(sepsis)，即脓毒血症。是一种由感染引起的临床综合征。化脓性病原菌侵入血流并在其中大量的繁殖，并随血流向全身扩散，在组织器官引起的新的多发性化脓性病灶。脓毒症常伴有下列征象:体温高于或低于正常，白细胞增多或减少、心动过速、呼吸急促或每分钟通气量异常升高，如临床上出现其中两项或两项以上症状，即可诊断脓毒血症；当伴发器官功能衰竭，即称为重症脓毒血症(severe sepsis)。美国每年有50万名脓毒血症患者,存活率仅55%~65%。脓毒症是严重创伤、烧伤、休克、大手术后常见的并发症，也是外科危重患者重要的死亡原因之一。
[0004]黄芪甲苷是从中药黄芪中提取获得的一种活性成分，文献报道黄芪甲苷对大鼠心肌缺血的保护作用与拮抗钙通道有关，同时黄芪甲苷对大鼠局部脑缺血损伤也有显著的保护作用。但连翘酯苷B治疗肾纤维化的药理作用未见报道，基于此，本发明人提供了黄芪甲苷治疗脓毒症的药物用途。
【发明内容】
[0005]本发明提供了黄芪甲苷在制备治疗脓毒症的药物中的应用。
[0006]本发明提供的药物在用于预防脓毒症时，其注射时使用剂量范围是25 mg~1000mg,优选 25 ~500 mg。
`[0007]本发明还提供了由黄芪甲苷和药学上可接受的载体或辅料组成的药物组合物，该组合物可以以药学常规方法制备成注射液、冻干粉针。
[0008]本发明提供的黄芪甲苷可以采用文献报道的方法制备，优选采用如下方法:取黄芪的干燥根粉碎，过筛，加水回流提取，提取液过滤，滤液加到已经前处理的DM-130大孔树脂上样，用0.1 % NaOH洗涤，然后用30%乙醇洗涤，80%乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，加水溶解，水饱和正丁醇萃取，合并萃取液，用2% NaOH溶液洗涤，回收正丁醇后干燥，得黄芪总皂苷。用2% NaOH水溶液溶解，经温度60°C水浴水解，冷却取沉淀加甲醇回流加热溶解，冷却，析出白色结晶，干燥，即得黄芪甲苷。
[0009]本发明人通过下列试验证实了黄芪甲苷在治疗脓毒症中的应用，但作用不限于此。
【具体实施方式】
[0010]实施例1黄芪甲苷的制备
取黄芪的干燥根50Kg粉碎，过20目筛，加10倍水回流提取3次，每次I小时，提取液过滤，滤液加到已经前处理的DM-130大孔树脂，上样完毕后，用蒸馏水洗至流出液无色，再用0.1 % NaOH洗涤5个柱体积，然后用30%乙醇洗涤8个柱体积，80%乙醇洗脱，收集洗脱液至流出液无色为止，回收乙醇后加水溶解，水溶液用水饱和正丁醇萃取3次，合并萃取液，用2% NaOH溶液洗涤2次，再用水洗涤2次，回收正丁醇后干燥，得黄芪总皂苷。将上述总阜苷用2% NaOH水溶液溶解,经温度60°C水浴水解3h,可见白色沉淀析出，自然冷却后过滤，取沉淀加30倍量甲醇回流加热溶解，趁热过滤，滤液自然冷却，析出白色结晶，干燥，测定其中黄芪甲苷含量为93%。
[0011]实施例2黄芪甲苷的制备
取黄芪的干燥根50Kg粉碎，过20目筛，加10倍水回流提取3次，每次I小时，提取液过滤，滤液加到已经前处理的DM-130大孔树脂，上样完毕后，用蒸馏水洗至流出液无色，再用
0.2% NaOH洗涤4个柱体积，然后用40 %乙醇洗涤8个柱体积，75%乙醇洗脱，收集洗脱液至流出液无色为止，回收乙醇后加水溶解，水溶液用水饱和正丁醇萃取3次，合并萃取液，用2% NaOH溶液洗涤2次，再用水洗涤2次，回收正丁醇后干燥，得黄芪总皂苷。将上述总阜苷用3% NaOH水溶液溶解,经温度70°C水浴水解2h,可见白色沉淀析出，自然冷却后过滤，取沉淀加30倍量甲醇回流加热溶解，趁热过滤，滤液自然冷却，析出白色结晶，干燥，测定其中黄芪甲苷含量为95%。
[0012]实施例3黄芪甲苷冻干粉针的制备
取黄芪甲苷10g，加IOg羟丙基β-环糊精，加注射用水2000 ml，加甘露醇10g，搅拌溶解，超滤，得到无热源的澄清液，灌入10 ml西林瓶中，2ml/只，按冻干粉针工艺冻干，制成每支含黄芪甲苷10 mg的冻干粉针。
[0013]实验I黄芪甲苷对盲肠结扎穿孔导致的脓毒症大鼠的影响 1.1药品与试剂·
黄芪甲苷按制备例I制备
鲎试剂试剂盒(福建省福州新北生化工业有限公司)
High-mobility group-box I protein (HMGBl), TNF- α , IL-6 ELISA 试剂盒(上海西唐生物技术公司)
髓样细胞触发受体(TREM-1) ELISA试剂盒(上海沪峰生物科技有限公司)
实验动物:SPF级Sprague Dawley大鼠，雄性，体重150 g-200 g。
[0014]1.2实验方法与结果
1.2.1盲肠结扎穿孔(CLP)大鼠的制备
手术当天清晨大鼠禁食，乙醚麻醉后取仰卧位，75%乙醇消毒腹部，沿腹白线中段作一长1.5 cm的切口，剪开皮肤和肌层，探查腹腔分离盲肠；I号丝线距盲端I cm处(回盲瓣远端)结扎，16号穿刺针在结扎处远端贯穿盲肠3次(呈三角形)，针孔间距约3 mm，并挤出少许内容物；盲肠回纳腹腔，逐层缝合关闭腹腔。
[0015]1.2.2分组给药
CLP大鼠60只，随机分为6组，即模型组、黄芪甲苷静脉注射2.5 mg/kg、5 mg/kg,25mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg,另外取10只正常大鼠作为对照组。CLP手术I小时各组给予相应药物。CLP手术20小时取血，测定血清HMGB 1、TNF-a、IL_6、内毒素。血清HMGB、TNF_a、IL-6测定使用ELISA试剂盒，血清内毒使用素鲎试剂试剂盒测定。
[0016]1.2.3实验结果黄苗甲苷静脉注射2.5 mg/kg、5 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg组明显降低脓毒症大鼠血清HMGB1、TNF-α、IL-6、内毒素、TREM-1水平(p〈0.05或p〈0.01)。黄芪甲苷静脉注射50 mg/kg组降低脓毒症大鼠血清HMGBl、TNF- α、IL-6、内毒素、TREM-1水平与黄芪甲苷静脉注射100 mg/kg组比较无显著性差异。
[0017]表1黄芪甲苷静脉注射对盲肠结扎穿孔导致的脓毒症大鼠的影响(n=10)
【权利要求】
1.黄芪甲苷在制备治疗脓毒症的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其注射时给药剂量范围为25-1000mg。
3.根据权利要求2所述的应用，其注射给药剂量范围为25-500mg。
4.一种以黄芪甲苷为·活性成分的用于治疗脓毒症的药物组合物。
【文档编号】A61P29/00GK103845353SQ201210494225
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2012年11月28日 优先权日:2012年11月28日
【发明者】毕玉轩 申请人:青岛百草汇中草药研究所