香蜂草苷在制备治疗或预防肝纤维化的药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及香蜂草苷在制备治疗或预防肝病的药物中的应用，具体地涉及香蜂草苷在制备治疗肝纤维化的药物中的应用。本发明提供的药物可以根据制剂需要，加入相应辅料，以注射剂、片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊、糖浆等形式存在，优选为冻干粉针和胶囊。本发明提供的各种剂型均可以采用药学常规方法制备而成。
【专利说明】香蜂草苷在制备治疗或预防肝纤维化的药物中的应用
[0001]摘要
本发明涉及香蜂草苷在制备治疗或预防肝病的药物中的应用，具体地涉及香蜂草苷在 制备治疗肝纤维化的药物中的应用。
【技术领域】
[0002]本发明涉及一种用于治疗肝病的药物，具体涉及香蜂草苷在治疗肝纤维化的药物中的应用。
【背景技术】
[0003]断血流是唇形科植物荫风轮或风轮菜的干燥地上部分，在民间广为用做止血药物其药理作用得到广泛证实【韩传环，周晓琳，叶寿山.断血流口服液的药效学研究.中药药理与临床.1998，14(3):27-28】，香蜂草苷是从断血流中提取的一个成分，化学名为5，7 —二羟基一 4 ’ 一甲氧基双氢黄酮一 7-0-a-L-吡喃鼠李糖基-(I — 6)-β-D-吡喃葡萄糖苷。
[0004]香蜂草苷
但香蜂草苷治疗肝纤维化的药理作用未见报道，基于此，本发明人通过大量的实验研究，发明了香蜂草苷治疗肝纤维化的药物中的应用。
【发明内容】
[0005]本发明提供了香蜂草苷在制备治疗肝纤维化的药物中的应用。
[0006]本发明提供的香蜂草苷在用于上述任一用途时，其注射使用剂量范围为10 mg~1000 mg,;其灌胃使用剂量范围为25 mg~2000 mg。
[0007]本发明提供的药物可以根据制剂需要，加入相应辅料，以注射剂、片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊、糖浆等形式存在，优选为冻干粉针和胶囊。本发明提供的各种剂型均可以采用药学常规方法制备而成。
[0008]本发明人通过下列实施方式得到了香蜂草苷在治疗肝纤维化药物并证实了该药物具有抗肝纤维化，下面的实施例用来更详细的说明本发明，但并不意味着本发明仅限于此。
[0009] 具体实施实例:
制备例1:香蜂草苷固体片剂
制法:按处方量取香蜂草苷25g，淀粉25 g，羧甲基淀粉钠50 g，微晶纤维素50g，硬脂酸镁5g，混和，加入50%乙醇适量制粒，干燥，整粒，压片，检查合格后，包装。
[0010]制备例2:香蜂草苷冻干粉针制备
取香蜂草苷10.0g,加注射用水2000 ml使其溶解，，加甘露醇8g，搅拌溶解，超滤，得到无热源的澄清液，灌入10 ml西林瓶中，2 ml/只，按冻干粉针工艺冻干，制成每支含香蜂草苷10.0 mg的冻干粉针。[0011]试验例1:香蜂草苷对肝纤维化的影响 4.1药品与试剂
文迪雅(马来酸罗格列酮片，Glaxo SmithKline公司)
HA (透明质酸)、LN (层粘连蛋白)及Pc III (III型胶原)放免试剂盒购买于上海海研医学中心；羟脯氨酸检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
[0012]实验动物普通级Wistar大鼠，雄性，体重150_200g，SD大鼠。
[0013]4.2实验方法: 大鼠130只，随机分为13组，即正常对照组、模型组、罗格列酮组灌胃8mg/kg组、香蜂草苷静脉注射I mg/kg组、香蜂草苷静脉注射2.5 mg/kg组、香蜂草苷静脉注射12.5 mg/kg组、香蜂草苷静脉注射50 mg/kg组、香蜂草苷静脉注射100 mg/kg组、香蜂草苷灌胃2.5mg/kg组、香蜂草苷灌胃10 mg/kg组、香蜂草苷灌胃50 mg/kg组、香蜂草苷灌胃100 mg/kg组、香蜂草苷灌胃200 mg/kg组，每组10只。大鼠肝纤维化模型复制及各组处置方法:参考吴孟超等复制大鼠肝纤维化模型的方法【吴孟超，杨广顺.大鼠肝硬变模型复制的研究.中华实验外科杂志，1984，I (4): 145 一 147】，除正常对照组外，各组每3d每100g体重皮下注射40 %四氯化碳油溶液0.3ml，首剂量加倍，正常对照组大鼠每3d皮下注射油溶液
0.3ml/100g体重，6周后，各组开始给药，连续给药4周，给药结束后用20%乌拉坦溶液腹腔注射麻醉，解剖，腹主动脉采血，留取肝组织，部分用I O %中性福尔马林溶液固定，24 —48h内制石蜡块。肝组织病理学检查采用HE染色，纤维增生程度分为0-4级【栗坤，赵玉珍，朱秋霜等.川芎嗪对老龄小鼠心、肝超氧化物歧化酶活力的影响.黑龙江医药科学，1998;21:4 - 5】，对血清中HA (透明质酸)、LN (层粘连蛋白)及Pc III (III型胶原)、及肝中HYP (轻脯氨酸)进行测定，HA、LN、Pc II1、HYP按检测试剂盒测定方法测定。
[0014]4.3实验结果
病理学检查:正常对照组大鼠肝脏结构正常；模型组大鼠肝脏12周均出现明显的纤维化；香蜂草苷各组中纤维化程度均较模型组轻。
[0015]光镜观察:HE常规染色和VG胶原染色肝组织切片显示，肝纤维化模型对照组大鼠肝组织中可见肝细胞脂肪变性，坏死，炎细胞浸润；汇管区内胶原纤维沉积，Henny管增生；纤维结缔组织增生明显，纤维间隔增粗，并有典型假小叶形成。香蜂草苷治疗组大鼠肝组织纤维结缔组织增生程度减轻，纤维间隔变细，假小叶形成不明显。对各组纤维增生程度分值进行秩和检验。结果见表1，香蜂草苷静脉注射I mg/kg组、香蜂草苷静脉注射2.5 mg/kg组、香蜂草苷静脉注射12.5 mg/kg组、香蜂草苷静脉注射50 mg/kg组、香蜂草苷静脉注射100 mg/kg组、香蜂草苷灌胃2.5 mg/kg组、香蜂草苷灌胃10 mg/kg组、香蜂草苷灌胃50mg/kg组、香蜂草苷灌胃100 mg/kg组、香蜂草苷灌胃200 mg/kg组明显降低纤维增生程度(与模型对照组比较，P〈0.05或0.01)。
[0016]电镜观察:正常对照组大鼠肝细胞间紧密相连，细胞内各种细胞器分布规整，结构典型。血窦排列整齐，Disse腔内可见肝贮脂细胞，细胞质内有脂滴。模型对照组大鼠肝组织中则出现典型的肝细胞损伤结构，相邻肝细胞间隙增宽，肝细胞变性坏死，核固缩，细胞质内出现大小不等、分布不规则的脂滴。肝组织中存在轻重不等的纤维化病变。肝窦毛细血管化，Disse间隙内可见较多成纤维细胞(活化的肝贮脂细胞)，且周围有大量胶原纤维沉积。汇管区内可出现大量的胶原纤维。香蜂草苷B治疗组中，肝细胞损伤有不同程度的减轻，肝细胞间隙较紧密，细胞质内脂肪小滴减少，细胞内结构趋向正常。肝纤维化病变不明显，肝血窦和Disse间隙内胶原纤维沉积及成纤维样细胞数量减少。
[0017]对各组撤、1^、卩(:111、册？进行1'检验。结果见表2，香蜂草苷静脉注射1 mg/kg组、香蜂草苷静脉注射2.5 mg/kg组、香蜂草苷静脉注射12.5 mg/kg组、香蜂草苷静脉注射50mg/kg组、香蜂草苷静脉注射100 mg/kg组、香蜂草苷灌胃2.5 mg/kg组、香蜂草苷灌胃10mg/kg组、香蜂草苷灌胃50 mg/kg组、香蜂草苷灌胃100 mg/kg组、香蜂草苷灌胃200 mg/kg组明显降低HA、LN、Pc II1、HYP水平(与模型对照组比较，p〈0.05或0.01)。香蜂草苷灌胃100 mg/kg组降低HA、LN、Pc II1、HYP水平与香蜂草苷灌胃200 mg/kg组比较，无显著性差异；香蜂草苷静脉注射50 mg/kg组降低HA、LN、Pc IILHYP水平与香蜂草苷静脉注射100mg/kg组比较,无显著性差异。
[0018]表1香蜂草苷对大鼠肝纤维化病理形态的影响
【权利要求】
1.香蜂草苷在制备·治疗肝纤维化的药物中的应用。
【文档编号】A61K31/7048GK103845351SQ201210494221
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2012年11月28日 优先权日:2012年11月28日
【发明者】毕玉轩 申请人:青岛百草汇中草药研究所