一种中药组合物及其制备方法和用途的制作方法

专利名称：一种中药组合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及ー种中药组合物及其制备方法和用途，具体涉及一种由制何首乌、葛根、緑茶、红花制成的中药组合物及其制备方法以及该中药组合物在制备具有增强免疫力和降血脂作用的保健产品中的应用。
背景技术：
西医认为，随着人们高脂、高 糖、高蛋白的饮食习惯的改变，加之工作、学习的忙碌和紧张、体育活动的減少、烟酒过度等原因，导致机体代谢功能紊乱，而致高血脂症、脂肪肝、代谢紊乱综合征、动脉粥样硬化症等相关疾病逐年升高。而血脂异常和动脉粥样硬化是多种心脑血管病发生和发展的重要危险因素。动脉粥样硬化稳定斑块向易损斑块的转变与心脑血管病事件的发生有密切关系。动脉粥样硬化的形成是ー个漫长而复杂的过程，血脂过高是引起动脉样硬化的主要因素，而炎性反应贯穿于易损斑块的形成及破裂的全过程。Ross教授曾明确提出“动脉粥样硬化是ー种炎症性疾病”。炎症參与动脉粥样硬化的发生发展，最終导致动脉粥样斑块破裂及血栓形成，乃至发生急性心肌梗死，急性脑卒中等。现代研究表明，免疫因素(细胞免疫、体液免疫、自身免疫、补体系统、细胞因子、粘咐因子及细胞凋亡等)介入了动脉粥样硬化的发生和发展。脑卒中吋，中枢神经系统受损势必影响到机体的免疫功能，而免疫系统亦可反馈影响和调节中枢神经系统。大量动物实验和临床观察证明脑血管病存在免疫功能异常，对疾病的发生、发展起到重要作用。具体有(I)T细胞免疫功能低下，国内外学者对脑血管病外周的免疫功能检测数结果表明，淋巴细胞转化率降低，总T细胞減少，CD4+/CD8+比值下降，且细胞免疫功能下降的程度与脑损伤部位及病情的严重程度有夫。(2)体液免疫反应亢进，脑血管疾病患者自身抗体的检出率及血清IgG明显高于正常人，且血液循环中有过量的免疫复合物(CIC)，CIC对血管壁的免疫损伤作被认为是动物粥样硬化发生或加重的重要因素。同时补体系统激活也參与了动脉粥样硬化的发生、发展以及血栓形成过程，在脑血管病的发病中起重要作用。(3)细胞因子參与炎症及脑损伤，患者外周血IL-2活性降低，而11-6、IL-8升高，TNF-a的表达增強。红细胞免疫功能降低，脑血管病患者红细胞免疫粘附功能降低，清除CIC的能力下降，使CIC沉积于血管内皮，造成损害，重型患者较为明显，提示临床上可将红细胞免疫功能的測定作为判定预后的參考指标。同样，各种细胞和分子介导的免疫机制也參于了冠心病动脉粥样硬化的发生，促进动脉粥样硬化的发展、恶化。鉴于心脑血管病在发病的过程中存在免疫功能平衡失调，好能尽早给予免疫疗法，提高机体免疫调节水平，对早期预防动脉粥样硬化，防治心脑血管病开辟一条新的途径。中医认为本证的发生与发展与年老体衰、膏梁厚味、七情内伤、外感六淫等病因有关。若病邪久羁，则损肝伤脾。损肝则气机不利，《素问 举痛论》云“百病生于气”，因气为血帅，气行则血行，气滞血瘀，血瘀则脉不通；伤肾则肾阴不足，阴虚生内热。瘀热互结，日久则化热生毒，瘀、热、毒互结，阻滞脉道，损伤脉络，侵犯五脏，终至脉道狭窄，甚至阻塞而致诸症丛生。
专利200910018352提供ー种具有增强免疫力和降脂作用的保健品及其制备方法，该保健品是由下述重量份配比的原料制成的制品制何首乌3 5、葛根2 4、緑茶2 4。该制品具有提高机体免疫力，调节血脂，抗凝，降粘，消除血栓，保护肝脏，改善心、脑血液循环，补益肝肾，活血化瘀，清热解毒等功能。但是该处方中制何首乌滋补肝肾，葛根升阳，绿茶清热解毒，没有活血化瘀的药物，活血化瘀效果不够好，因此对伴有瘀血的高脂血症及免疫カ低下效果不够好。

发明内容
为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种中药组合物及其制备方法，该中药组合物具有增强免疫力及降血脂的功效，使用方便，对伴有血瘀的高脂血症及免疫力低下具有良好的效果。
本发明是通过如下技术方案实现的ー种中药组合物，由如下重量份的中药原料药制成制何首乌400-500份、葛根280-360 份、绿茶 280-360 份、红花 140-220 份。优选的，上述中药组合物，由如下重量份的中药原料药制成制何首乌430-470份、葛根300-340份、绿茶300-340份、红花160-200份。优选的，上述的中药组合物，由如下重量份的中药原料药制成制何首乌450份、葛根320份、绿茶320份、红花180份。本发明的以上组成中，各味药的重量是以生药计算的，如果以克为单位，如制成制齐U，则因制剂的大小不同可制成100-1000剂。所述100-1000剂是指单位剂量的制剂形式，如片剂100-1000片，胶囊剂100-1000粒，颗粒剂IOO-1OOOg, ロ服液lOO-lOOOml，膏剂lOO-lOOOg，丸剂 100-1000 丸等。以上组成是按重量作为配比的，在生产时可按照相应比例増大或減少，如大規模生产可以以kg为单位，或以t (吨)为单位；小規模制剂也可以以g为单位。重量可以增大或者减小，但各组成之间的生药材重量配比的比例不变。以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，如重症或轻症，肥胖或瘦小的病人，可以相应调整组成的量的配比，増加或減少不超过100%，药效基本不变。本发明的中药组合物，可単独或根据需要可以加入一些药物可接受的载体，可以采用制剂学常规技术制备该药物制剂，如将药物活性物质与药物可接受的载体混合。在制成药物制剂时可以制成任何可药用的ロ服剂型，这些剂型选自片剂、胶囊剂、ロ服液、ロ含剂、颗粒剂、丸剂、散剂，优选的是胶囊剂。所述的载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剤、湿润剂、崩解齐U、吸收促进剂、表面活性剤、吸附载体、润滑剂等。所述药物可接受的的载体选自蜂蜜、炼蜜、甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基こ酸、蛋氨酸、维生素A、维生素C、维主素E、维生素D、氮酮、EDTA ニ钠、EDTA钙钠，ー价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚こ烯吡咯烷酮、甘油、丙ニ醇、こ醇、吐温60-80、司班-80、蜂蜡、羊毛脂、液体石蜡、十六醇、没食子酸酯类、琼、三こ醇胺、碱性氨基酸、尿素、尿囊素、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚こニ醇、环糊精、3 -环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。上述中药组合物的制备方法，包含如下步骤a、将绿茶加入8 12倍重量水，7(T80°C温浸3(T60min，得绿茶提取液，备用；b、取葛根总量的6(T80%粉碎成80目的葛根细粉，备用；C、将剩余的葛根和制何首乌、红花水煎煮2次，第I次加入8 12倍量水，煎煮f 2小时，第二次加入6 10倍量水，煎煮0. 5^1. 5小时，合并煎煮液，备用；d、将煎煮液和绿茶提取液在55 65°C、-0. 03 _0. 09Mpa条件下浓缩成相对密度为1.20 1. 25的清膏；e、将葛根细粉加入到清膏中，混匀，制粒，得本发明中药组合物的活性物质；f、该活性物质单独或与药物可接受的载体混合，按照制剂学常规方法制得。优选的，上述中药组合物的制备方法，包含如下步骤a、将绿茶加入8 12倍重量水，7(T80°C温浸45min，得绿茶提取液，备用；b、取葛根总量的70%粉碎成80目的葛根细粉，备用；C、将剩余的葛根和制何首乌、红花水煎煮2次，第I次加入10倍量水，煎煮1. 5小时,第二次加入8倍量水，煎煮I小时，合并煎煮液，备用；d、将煎煮液和绿茶提取液在60°C、-0. 06Mpa条件下浓缩成相对密度为1. 2(Tl. 25
的清膏； e、将葛根细粉加入到清膏中，混匀，制粒，得本发明中药组合物的活性物质；f、该活性物质单独或与药物可接受的载体混合，按照制剂学常规方法制得。本发明的中药制剂，在制成药剂时，単位剂量的药剂可含有本发明的药物活性物质0. flOOOmg，其余为药学上可接受的载体。药学上可接受的载体以重量计可以是制剂总重量的 0. 01-99. 9%o 上述中药组合物在制备具有增强免疫力作用的保健产品中的应用。上述中药组合物在制备具有降血脂作用的保健产品中的应用。本发明中药组合物适用于免疫力低下或高血脂的人群，尤其适用于伴有血瘀的老年免疫力低下或高血脂人群。本群不适用于少年儿童及孕产妇、乳母、月经过多者、慢性腹泻者。食用方法及食用量每日3次，每次2粒，ロ服。本发明的有益效果在于(I)本发明提供了一种新的具有增强免疫力和降血脂作用的药物组合物，满足了临床需要。(2)本发明中药组合物组方精当。中医认为免疫力低下和高血脂的发生与发展与年老体衰、膏梁厚味、七情内伤、夕卜感六淫等病因有夫。若病邪久羁，则损肝伤脾。损肝则气机不利，《素问 举痛论》云“百病生于气”，因气为血帅，气行则血行，气滞血瘀，血瘀则脉不通；伤肾则肾阴不足，阴虚生内热。瘀热互结，日久则化热生毒，瘀、热、毒互结，阻滞脉道，损伤脉络，侵犯五脏，终至脉道狭窄，甚至阻塞而致诸症丛生。本发明中药组合物中，制何首乌为君药，何首乌味苦、甘、涩，性温，归肝、心肾经。有补肝肾，益精血，乌须发，强筋骨之功，用于眩晕耳鸣，腰膝酸软，肢体麻木，须发早白，血虚萎黄，高血脂等症，故为君药。绿茶为臣药，绿茶，味苦、甘，性凉，归心、肺、胃经，有清头目，除烦渴，消食化痰，清热解毒，利尿，提神之功，用于头痛，目昏，多睡善寐，心烦ロ渴，食积痰滞等症，故为臣药。红花为佐药，红花味辛、性温，归心、肝经，具有活血通经，散淤止痛的功效，与何首乌配伍，能够增强君药的补益作用。葛根为使药，葛根味甘、辛，性凉，归脾、胃经。有解肌退热、生津透疹，升阳止泻之功，葛根因其气轻浮而因使诸药上行，直达心脑，又能解肌透表而因诸药直达脉络，故为使药。总之，该方依据中医理论，融汇临床经验，选药精当，配伍严谨，切中病机。君、臣、佐、使俱全，药物之间七情和合，共奏补益肝肾，活血化瘀，清热解毒；提高机体免疫力，调节血脂等。临床用于机体免疫力低下，高脂血症，高粘质血症，脂肪肝等出现肝肾亏虚、瘀热内阻证者。尤其适合于伴有瘀血的免疫力低下和高脂血症。( 3 )首次通过药效学实验研究证明本发明中药组合物低、中、高剂量组能増加小鼠的足跖肿胀度；中、高剂量组能提高小鼠的抗体生成细胞数中剂量组能提高腹腔巨噬细 胞吞噬鸡红细胞吞噬百分率。该样品对小鼠的脾脏/体重比值和I胸腺/体重比值、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬指数、小鼠碳廓清能力、小鼠的血清溶血素水平、小鼠的脾淋巴细胞转化能力和NK细胞活性无明显影响。根据《保健食品检验与评价技术规范》判定标准，本发明中药组合物有一定的增强免疫力作用。发明中药组合物三个剂量组和阳性药物组均能明显降低高血脂大鼠的胆固醇、甘油三酷、低密度脂蛋白的水平，此作用呈现一定的剂量相关性。(4)药理毒理学实验结果表明小鼠急性毒性试验的最大耐受量法试验结果显示，该受试物对两种性别小鼠的MTD均大于10. Og/kg. bw，根据急性毒性分级标准，该样品属实际无毒级物质。遗传毒性试验结果=Ames试验结果为阴性；小鼠骨髄嗜多染红细胞微核试验结果为阴性；大鼠精子畸形试验结果为阴性；大鼠30d喂养试验结果显示该样品30d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。(5)本发明中药组合物制剂稳定，做成制剂，服用和携帯方便，便于长期服用做保健之用。以下通过实验例来进ー步阐述本发明所述药物组合物的有益效果，这些实验例包括本发明药物组合物的药理毒理学试验及药效学试验。以下实验例中所用药物取自实施例1o实验例I本发明中药组合物的药理毒理学实验1.1样品人体推荐量为2. 4g/人/日。取本发明中药组合物的有效成分作为受试物供实验用，成人体重按60kg计。1. 2试验动物及饲养环境SPF级昆明种小鼠(小鼠急性毒性试验、骨髓微核试验和精子畸形试验用)和SPF级Wistar大鼠(大鼠30d喂养试验用)。1. 3小鼠急性毒性试验按照最大耐受量(MTD)法试验进行。选择雌雄各10只小鼠，体重为18. 5—21. 4g。实验前空腹16h备用(不限制饮水)。称取10. Og受试物，以蒸馏水配至30ml，终浓度为0. 333g/ml，分两次灌胃给予实验动物，每次间隔4h，灌胃量为0. 15ml/10g. bw,累计染毒剂量为10. Og/kg. bw.记录动物的中毒表现及死亡情况,连续观察14d。
1. 4遗传毒性试验1.4.1Ames试验试验菌株为经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102，体外活化系统为多氯联苯诱导的大鼠肝匀浆制备的S-9混合液。取受试物，分别以蒸馏水、ニ甲基亚砜、95%こ醇、丙酮作溶剂，经过比较，该受试物在蒸馏水中溶解效果最好，故试验中选取蒸馏水作溶剤。根据毒性測定結果，试验设立8、40、200、1000,5000 ug/M 5个剂量，同时设立自发回变组、溶剂对照组和阳性对照组。称取受试物5. OOg,置于容量瓶中，以蒸馏水作溶剤，定容至100ml，浓度为50000 u g/ml，用蒸汽消毒器0. 055Mpa，20min处理，冷却后取出放置40°C保存。取无菌蒸馏水依次进行1:4稀释，得出浓度分别为10000、2000、400、80ii g/ml。每皿加入0. 1ml，受试物浓度分别相当于5000、1000、200,40 y g/皿。试验按照平板掺入法在加S-9与不加S-9混合液的条件下进行，每个组别设3个平皿。若受试物的回变菌落数为自发回变菌落数的2倍以上，并具有剂量 反应关系则判定为阳性。整套试验在相同条件下重复做两次。
1. 4. 2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验选择体重25 30g小鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。3个实验组染毒剂量分别为2. 5,5. O、10. Og/kg. bw,另设蒸馏水明性对照组和环磷酰胺阳性对照组(40mg/kg. bw)。分别称取2. 5、5. O、10. Og受试物，分别以蒸馏水配至30ml，终浓度分别为0. 083,0. 167,0. 333g/ml，灌胃给予实验动物。灌胃量为0. 3ml/10g. bw，共两次，间隔24h，末次给予受试物后6h处死动物，常规制片。每只动物镜检1000个嗜多染红细胞(PcE)，记录微核细胞数，计算微核率(即微核细胞数/嗜多染红细胞数，以千分率表示)。同时观察200个PCE，计数观察到的正染红细胞(NCE)数目，并计算PCE/NCE比值。1. 4. 3小鼠精子畸形试验选择体重30 34g雄性小鼠25只，随机分为5组。每组5只。3个实验组染毒剂量分别为2. 5,5. O、10. Og/kg. bw,另设蒸馏水阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组(40mg/kg. bw)。分别称取2. 5、5. 0、10. Og受试物，以蒸懼水配至30ml,终浓度分别为0. 083,0. 167,0. 333g/ml，灌胃给予实验动物。灌胃量为0. 3ml/10g. bw，每天ー次，连续5d，首次灌胃后第35d处死动物，常规制片。每只动物计数1000个结构完整的精子，记录畸变类型和数量，计算精子畸形率(以百分率表示)。1. 5大鼠30d喂养试验1. 5.1试验方法选用体重70 90g断乳大鼠80只，随机分为4组，每组20只，雌雄各半。根据人体推荐量设立3个实验组。受试物剂量分别为1.0、2.0、4.0g/kg.bw(分别相当于人体推荐量的25、50、100倍)。将受试物按照1. 0,2. 0,4. 0% (质量分教)掺入基础饲料饲喂实验动物，对照组饲喂基础饲料。单笼喂养，自由饮食，连续观察30d。观察内容主要有动物的一般表现、行为、中毒体征等。每周称量体重I次，称量2次食物剰余量和撒食量，计算每周食物摄入量，每周及总食物利用率。第30d尾静脉取血，进行血常规測定。禁食16h后于第31d腹主动脉取血，进行血液学測定及血生化測定。然后处死并对大鼠进行解剖，进行脏器称量和组织病理学检查。2 结果2.1急性毒性试验灌胃给予受试物后，未见明显中毒症状。14d内动物无死亡。大耐受量试验结果显示，该受试物对两种性别小鼠的均大于10. Og/kg。根据急性毒性分级标准，该样品属实际无毒级物质。
2. 2遗传毒性试验2. 2.1Ames试验两次试验中受试物各剂量组回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍，亦无剂量-反应关系，说明在加与不加S-9时该样品对鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株试验菌株均未呈现遗传毒性。2. 2. 2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验受试物各剂量组微核率与阴性对照组比较无显著性差异(P>0. 05)，而环磷酰胺阳性对照组与阴性对照组比较有极显著性差异(P〈0. 01)，说明该样品无致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核作用。2. 2. 3小鼠精子畸形试验受试物各剂量组小鼠精子畸形率与阴性对照组比较无显著性差异(P>0. 05)，而环磷酰胺阳性对照组与阴性对照组比较有极显著性差异(P〈0. 01)，说明该样品无致小鼠精子畸形作用。
2. 3大鼠30d喂养试验结果在试验期内各实验组动物生长发育良好，体重增重、食物利用率、脏器重量和脏器系数等各项指标均在本实验室正常值范围内。实验组血常规及血生化各指标均在本实验室正常值范围内。病理组织学检查实验组被检脏器未见有意义的病理改变。实验例2本发明中药组合物增强免疫力功能实验1.材料与方法1.1样品人体推荐量为2. 4g/人/日。取本发明中药组合物的有效成分作为受试物供实验用，成人体重按60kg计。1. 2实验动物选用中国医学科学院实验动物研究所繁殖的SPF级健康心以雌性小鼠，体重18-22g，共192只，分为四组，免疫ー组进行脏器/体重比值、迟发型变态反应、抗体生成细胞检测及血清溶血素測定；免疫ニ组进行碳廓清实验；免疫三组进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验；免疫四组进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定实验。1. 3剂量选择本发明中药组合物人体推荐量为姆天2. 4g/60kg. bw,实验设三个剂量组，即0. 20kg. bw、0. 40kg. bw、l. 20kg. bw ;低、中、高三个组的剂量分别相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍、30倍。以蒸馏水为溶剂将本发明中药组合物的活性物质分别配至所需浓度，即称取0. 440g、0. 80g、2. 40g样品用蒸懼水分别配至40ml,同时设立溶剂对照组，按姆天0. 2ml/10g. bw 经ロ灌胃。1. 4仪器与试剂紫外-可见分光光度计、电子天平、数显游标卡尺(精密度0. 01mm)、微量注射器(50 ia)、co2培养箱、恒温水浴箱、离心机、连续光谱酶标仪、显微镜、玻片架、200目筛网、手术器械、秒表、一次性定量取血管、24孔和96孔细胞培养板。SRBC、补体(豚鼠血清)、Hanks液、SA缓冲液、琼脂糖、印度墨汁、Na2CO3溶液、都氏试剂、YAC-1 细胞、RPMI1640 完全培养液、乳酸锂、INT、PMS、NAD、0. 2moI/LTris-HcI 缓冲液、l%NP40、ConA、1%冰醋酸、MTT液、酸性异丙醇、lmol/LHCL溶液、PBS缓冲液、Giemsa染液等。1. 5实验方法1. 5.1迟发型变态反应(DTH)(足跖增厚法)
小鼠腹腔注射2%(V/V) SRBC,致敏后4天測量左后足跖厚度，然后在測量部位皮下注射20%(V/V)SRBC，每鼠注射20iU，注射后24小时测量左后足跖部厚度，同一部位测量三次，取均值。以攻击前后足跖厚度差值〈足跖肿胀度)来表示DTH的程度。1. 5. 2ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)无菌取脾，制备脾细胞悬液，用Hanks液洗2次，每次离心IOmin (1000r/min)，将细胞悬浮于ImlRPMI 1640完全培养液中，调整细胞浓度为3X 106个/mol将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔加入75 u I ConA液，另一孔作为对照，置5%C02、37°C培养箱中培养72小吋。培养结束前4小时，每孔吸取上清液0. 7ml，加入0. 7ml不含小牛血清的R. PMI1640完全培养液，同时加入MTT50iU，继续培养4小吋。培养结束后，每孔加入 Iml酸性异丙醇，吹打均匀使紫色结晶完全溶解，在570nm波长处測定OD值，以加ConA孔的OD值减去不加ConA孔的OD值表示淋巴细胞增殖能力。1. 5. 3小鼠脏器/体重比值及血清溶血素測定小鼠腹腔注射SRBC五天后，摘眼球取血，离心取血清稀释150倍，进行半数溶血值測定。然后处死动物，取胸腺、脾脏称重，计算脏器/体重比值。同时制备脾细胞悬液，进行抗体生成细胞測定。1. 5. 4抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)取脾，制成细胞悬液。将表层培养基加热溶解后与等量双倍Hanks液混合，分装小试管，每管0. 5ml，再向管内加50iill0%SRBC(V/V，用SA液配制)、25 脾细胞悬液，迅速混匀后，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在玻片架上，CO2培养箱温育1. 5h，然后用SA液稀释的补体(I 8)加入到玻片架凹槽内，继续温育1. 5h后，计数溶血空斑数。1.5. 5小鼠碳廓清试验小鼠尾静脉注射1:3稀释的印度墨汁，待墨汁注入立即计时，注入墨汁后2、lOmin，分别从内眦静脉丛取血20iU，并将其加到2ml Na2CO3溶液中，用紫外-可见分光光度计在600nm波长处以Na2CO3溶液作空白对照测光密度值(OD)。将小鼠处死，取肝和脾脏称重，计算吞噬指数。吞噬指数a=结束体重 X K173/ (肝重 + 脾重)K= (IogOD1-1ogOD2) / (Vt1)1. 5. 6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验小鼠腹腔注射20%鸡红细胞悬液1ml，间隔4小时处死，固定于鼠板上，剪开腹壁皮肤，注射生理盐水2ml，转动鼠板I分钟，吸出腹腔洗液1ml，分滴于2片玻片上，37 °C温育30分钟，用生理盐水漂洗，晾干，以1:1丙酮甲醇溶液固定，Giemsa染液染色10分钟，用蒸馏水漂洗晾干，用油镜镜检，计算吞噬率和吞噬指数。吞噬百分率(%)=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数+计数的巨噬细胞数X 100%吞噬指数=被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数1. 5. 7NK细胞活性测定实验前24小时将靶细胞传代培养，应用前以Hanks液洗3次，用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为4X IO5个/ml。小鼠颈椎脱臼处死，无菌取脾，制备脾细胞悬液，用Hanks液洗2次,姆次离心IOmin (1000r/min)。弃上清液将细胞衆弹起,加入0. 5ml灭菌水裂解红细胞，20秒后再加入0. 5ml2倍Hanks液及8ml Hanks液，离心IOmin (1000r/min),用Iml含10%小牛血清的RPMI1640完全培养液重悬，用1%冰醋酸稀释后计数，调整细胞浓度为2 X IO7个/mol将靶细胞加入96孔培养板，每孔100 yl，试验孔加入IOOiU脾细胞(效靶比50 :1)，自然释放孔加入100 ill培养液，最大释放孔加入100iill%NP40，370°C培养4小吋，离心，取上清液100 ill置96孔酶标板中，加入LDH基质液100 yl，反应3分钟，以lmol/L的HCI终上反应，在酶标仪490nm处测定OD值。NK细胞活性(%)=(反应孔OD-自然释放孔0D) + (最大释放孔OD-自然释放孔0D) X 100%1. 6试验数据用Excel软件建立数据库，用stata软件进行统计分析。2.结果2.1宏济堂牌宏济胶囊对小鼠迟发型变态反应(DTH))的影响表I本发明中药组合物对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响
权利要求
1.一种中药组合物，其特征在于，由如下重量份的中药原料药制成制何首乌400-500份、葛根280-360份、绿茶280-360份、红花140-220份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，由如下重量份的中药原料药制成 制何首乌430-470份、葛根300-340份、绿茶300-340份、红花160-200份。
3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，由如下重量份的中药原料药制成 制何首乌450份、葛根320份、绿茶320份、红花180份。
4.包含权利要求1所述的中药组合物单独或与药学上可接受的载体制成的口服剂型。
5.根据权利要求4所述的中药组合物，其特征在于，为胶囊剂。
6.根据权利要求1所述的中药组合物的制备方法，包含如下步骤a、将绿茶加入8 12倍重量水，7(T80°C温浸3(T60min，得绿茶提取液，备用；b、取葛根总量的6(Γ80%粉碎成80目的葛根细粉，备用；C、将剩余的葛根和制何首乌、红花水煎煮2次，第I次加入8 12倍量水，煎煮广2小时， 第二次加入6 10倍量水，煎煮O. 5^1. 5小时，合并煎煮液，备用；d、将煎煮液和绿茶提取液在55 65°C、-O.03^-0. 09Mpa条件下浓缩成相对密度为1.20 1· 25的清膏；e、将葛根细粉加入到清膏中，混匀，制粒，得本发明中药组合物的活性物质；f、该活性物质单独或与药物可接受的载体混合，按照制剂学常规方法制得。
7.根据权利要求6所述的中药组合物的制备方法，包含如下步骤a、将绿茶加入10倍重量水，7(T80°C温浸45min，得绿茶提取液，备用；b、取葛根总量的70%粉碎成80目的葛根细粉，备用；C、将剩余的葛根和制何首乌、红花水煎煮2次，第I次加入10倍量水，煎煮1. 5小时， 第二次加入8倍量水，煎煮I小时，合并煎煮液，备用；d、将煎煮液和绿茶提取液在60°C、_0.06Mpa条件下浓缩成相对密度为1. 2(Tl. 25的清膏；e、将葛根细粉加入到清膏中，混匀，制粒，得本发明中药组合物的活性物质；f、该活性物质单独或与药物可接受的载体混合，按照制剂学常规方法制得。
8.权利要求1所述的中药组合物在制备具有增强免疫力作用的保健产品中的应用。
9.权利要求1所述的中药组合物在制备具有降血脂作用的保健产品中的应用。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，涉及一种中药组合物及其制备方法和用途，具体涉及一种由制何首乌、葛根、绿茶、红花制成的中药组合物及其制备方法以及该中药组合物在制备具有增强免疫力和降血脂作用的保健产品中的应用。本发明中药组合物，由如下重量份的中药原料药制成制何首乌400-500份、葛根280-360份、绿茶280-360份、红花140-220份。该中药组合物具有补益肝肾，活血化瘀，清热解毒的功效，药理研究表明该中药组合物具有增强免疫力和降血脂的作用，临床用于辅助治疗免疫力低下和高脂血症，尤其适合于伴有瘀血的免疫力低下和高脂血症。
文档编号A61P3/06GK103006905SQ20131001120
公开日2013年4月3日 申请日期2013年1月11日 优先权日2013年1月11日
发明者李樱, 文哲亮, 李秀凤, 高钧 申请人:山东宏济堂制药集团有限公司