包含tlr4激动剂的改进佐剂制剂及其使用方法
【专利摘要】公开了用于诱导或增强免疫应答的制剂和方法，包括疫苗和药学组合物。所述制剂通常包含TLR4激动剂和浓度为约0.01％-1％v/v的可代谢油，其中所述乳剂的疏水:亲水平衡(HLB)大于约9。
【专利说明】包含TLR4激动剂的改进佐剂制剂及其使用方法
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求于2012年2月7日提交的第61/596, 066号美国临时申请的优先权， 该临时申请的内容以引用方式全部并入本文。
[0003] 发明背景
[0004] 发明领域
[0005] 本发明涉及药物和疫苗制剂领域。更具体地，本文描述的实施方案涉及药物和疫 苗制剂，特别是水包油乳剂，其中所述组合物包含诸如批喃葡萄糖脂佐剂（glucopyranosyl lipid adjuvant，GLA)的 TLR4 激动剂。
[0006] 相关抟术描沭
[0007] 高级生物体的免疫系统特征在于为区分外源物（或"非己"物）与亲近的或"自 身"组分，这使得外源物诱发免疫应答而"自身"组分被忽略或耐受。免疫应答传统上被表 征为体液应答或细胞介导的应答，其中在体液应答中由称为浆细胞的分化的B淋巴细胞产 生抗原特异性抗体，在细胞介导的应答中不同类型的T淋巴细胞通过多种机制作用于清除 抗原。例如，能识别特异性抗原的CD4+辅助T细胞可以通过释放诸如细胞因子的可溶性介 质来募集免疫系统的其他细胞从而作出应答以参与免疫应答。同样，也能识别特异性抗原 的CD8+细胞毒性T细胞可以通过结合到携带抗原的细胞或颗粒并破坏或损伤所述细胞或 颗粒来作出应答。通常为诱导宿主所需的免疫应答，提供根据多种不同制剂的某些疫苗，这 在免疫学领域是已知的。
[0008] 例如，已经描述了用于配制佐剂组合物的某些乳剂系统，包括单相或多相乳剂系 统。已建议水包油乳剂佐剂自身可用作佐剂组合物（EP 0399843 B)，水包油乳剂和其他活 性剂的组合也已经被描述为用于疫苗的佐剂（W0 95/17210 ;W0 98/56414 ;W0 99/12565; TO 99/11241)。已描述了其他油乳剂佐剂，诸如油包水乳剂（美国专利第5, 422, 109号；EP 0480982 B2)和水包油包水乳剂（美国专利第5. 424, 067号；EP 0480981 B)。
[0009] 尽管这些已知方法用于生产乳剂系统以制备佐剂组合物，但当前的乳剂佐剂组合 物仍存在诸多缺点。因此，需要其他改进的乳剂佐剂组合物，例如包含TLR4激动剂的水包 油乳剂制剂。如本文所述，本发明满足这些需求并提供了其他相关优点。
[0010] 发明简述
[0011] 根据一方面，本发明提供了包含TLR4激动剂和可代谢油的水包油乳剂，其中所述 可代谢油以约〇. 01% -1% v/v或优选约〇. 01% -〇. 5% v/v的浓度存在于所述水包油乳剂 中，其中所述水包油乳剂的疏水：亲水平衡（HLB)大于约9、或大于约10、或为约9-12。
[0012] 本文还提供了包含TLR4激动剂、可代谢油和表面活性剂的水包油乳剂，其中所述 可代谢油以约〇. 01% -1% v/v或优选约〇. 01% -〇. 5% v/v的浓度存在于所述水包油乳剂 中。在一些实施方案中，可代谢油浓度低于1%ν/ν。在一些实施方案中，水包油乳剂的疏 水：亲水平衡（HLB)大于约9、或大于约10、或为约9-12。
[0013] 用于本发明水包油乳剂的TLR4激动剂可以选自本领域已知且可得的TLR4激动 齐?。在某些具体实施方案中，TLR4激动剂选自MPU3D-MPL或合成GLA佐剂。
[0014] 在一些实施方案中，合成GLA佐剂具有以下结构或其药学可接受的盐：
[0015]
【权利要求】
1. 水包油乳剂，其包含TLR4激动剂和可代谢油，其中所述可代谢油以约0.01% -1% v/v的浓度存在于所述水包油乳剂中，并且其中所述水包油乳剂的疏水：亲水平衡（HLB)大 于约9。
2. 如权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述可代谢油以约0. 01% -0. 5% v/v的浓度 存在于所述水包油乳剂中。
3. 如权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述乳剂还包含1，2-二肉豆蘧酰-sn-甘 油-3-磷酸胆碱（DMPC)。
4. 如权利要求3所述的水包油乳剂，其中所述乳剂不包含抗氧化剂。
5. 如权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述乳剂的HLB大于约10。
6. 如权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述乳剂的HLB为约9-12。
7. 如权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述TLR4激动剂包括MPL、3D-MPL或合成GLA 佐剂。
8. 如权利要求7所述的水包油乳剂，其中所述合成GLA佐剂具有以下结构：
其中：R1、R3、R5和R6为Cn-C 2tl烷基；并且R2和R4为C12-C2tl烷基。
9. 如权利要求8所述的水包油乳剂，其中RH5和R6为C11烷基；并且R 2和R4为C13 烧基。
10. 如权利要求8所述的水包油乳剂，其中R1、R3、R5和R6为C ltl烷基；并且R2和R4为 C8烧基。
11. 如权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述乳剂还包含表面活性剂。
12. 如权利要求11所述的水包油乳剂，其中所述表面活性剂为普朗尼克F68。
13. 如权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述可代谢油为角鲨烯。
14. 如权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述乳剂还包含抗氧化剂。
15. 如权利要求14所述的水包油乳剂，其中所述抗氧化剂为维生素 E。
16. 如权利要求1所述的水包油乳剂，其中所述乳剂还包含至少一种抗原。
17. 水包油乳剂，其包含合成GLA佐剂、浓度为约0. 01 % -1 % v/v的可代谢油和浓度为 约0. 002% -2% DMPC的DMPC，其中所述乳剂的HLB大于约10。
18. 如权利要求17所述的水包油乳剂，其中所述合成GLA佐剂具有以下结构：
其中：R1、R3、R5和R6为Cn-C 2tl烷基；并且R2和R4为C12-C2tl烷基。
19. 如权利要求18所述的水包油乳剂，其中R1、!?3、!?5和R 6为C11烷基；并且R2和R4为 C13烧基。
20. 如权利要求17所述的水包油乳剂，其中所述合成GLA佐剂具有以下结构或其药学 可接受的盐：
其中： Lp L2、L3、L4、L5和L6相同或不同，并独立地为-〇-、-NH-或-(CH 2)-; L7、L8、L9和Lltl相同或不同，并独立地为不存在或为-C ( = 0)-; Y1是酸官能团； Y2和Y3相同或不同，并独立地为-OH、-SH或酸官能团； Y4 为-OH 或-SH ; Rp R3、R5和R6相同或不同，并独立地为C8_ 13烷基；以及 R2和R4相同或不同，并独立地为C6_n烷基。
21. 如权利要求20所述的水包油乳剂，其中R1、!?3、!?5和R 6为Cltl烷基；并且R2和R4为 C8烧基。
22. 用于刺激个体的免疫应答的方法，其包括向所述个体给予权利要求1至21中任一 项所述的水包油乳剂，由此刺激所述个体的免疫应答。
23. 如权利要求22所述的方法，其中所述免疫应答为非特异性免疫应答。
24. 如权利要求22所述的方法，其中所述免疫应答为抗原特异性免疫应答。
25. 如权利要求22所述的方法，其中真皮内给予所述水包油乳剂。
【文档编号】A61K9/107GK104363892SQ201380016135
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2013年2月7日 优先权日:2012年2月7日
【发明者】克里斯多佛·福克斯, 史蒂文·G·里德, 苏珊·鲍德温, 托马斯·温德维克 申请人:传染性疾病研究院