一种细菌源性吡咯烷类化合物在制备免疫抑制剂中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明属于生物医药领域，具体涉及一种细菌源性吡咯烷类化合物在制备免疫抑制剂中的应用。所述的细菌源性吡咯烷类化合物为anisomycin，其结构式如式1所示；所述的anisomycin能显著抑制淋巴结T细胞的活性及其生物学行为，抑制炎细胞分泌炎症因子，抑制组织移植排斥反应，作用优于临床常用的地塞米松和环磷酰胺。同时本发明还提供了一种细菌源性吡咯烷类化合物免疫抑制剂的制备方法，该方法制备的免疫抑制剂能大大提高药物的溶解度至20mg/mL，又能避免常规需要用乙醇(12mg/mL)或二甲基亚砜(20mg/mL)等溶剂溶解，毒副作用小，用药途径简单，易操作。
【专利说明】一种细菌源性吡咯烷类化合物在制备免疫抑制剂中的应用
【技术领域】
[0001]本发明属于生物医药领域，具体涉及一种细菌源性吡咯烷类化合物在制备免疫抑制剂中的应用。
【背景技术】
[0002]组织和器官移植手术后的排斥反应以及自身免疫性疾病的治疗，长久以来一直是医学界面临的难题。免疫抑制剂的应用在组织器官移植排斥反应和自身免疫性疾病的预防和治疗中有着极其重要的作用，但目前临床上使用的免疫抑制剂除了损伤造血、免疫系统及肝、肾和消化道功能，造成神经和内分泌功能紊乱等副作用外还面临着很多问题:1.缺乏选择性长期应用可降低机体的正常免疫应答，诱发感染。例如抗癌药物环磷酰胺、硫唑嘌呤等对所有增殖快的细胞均有杀伤作用，糖皮质激素抑制淋巴细胞增殖。2.抑制强度不足免疫抑制剂抑制初次免疫应答的强度一般较再次免疫应答为高，因为建立中的免疫应答较已经建立的免疫病变容易干预。3.诱导恶性肿瘤器官移植等病人长期应用免疫抑制剂，可使某些恶性肿瘤的发生率增加，其机制可能与某些免疫抑制剂引起染色体突变或激活内源性致癌病毒有关。4.作用时机差异动物实验证明，免疫抑制剂的作用与抗原刺激的间隔时间和给药先后次序有很大关系。例如环磷酰胺在抗原攻击前给药，抑制了快速分裂的短寿抑制性T细胞，反而表现为免疫增强作用。5.抗炎作用问题炎症本身就是一种免疫反应，免疫抑制剂多具有抗炎作用，而抗炎药物也可抑制免疫反应，如吲哚美辛可抑制前列腺素合成而影响免疫应答。理想的免疫抑制剂应该是选择性强、作用快速、效果明显、停药后作用可逆，不良反应少，不损伤机体正常免疫功能的药物。因此，人们在不懈地寻找高效、低毒、安全和有选择性的新的免疫抑制剂(Pflughoeft KJ etal.Modulat1n of the Bacillus anthracis secretome by the immune inhibitor Alprotease.J Bacter1l.2014, 196(2):424-35 ；Schmidt CQ et al.Rat1nal engineeringof a minimized immune inhibitor with unique triple-targeting properties.JImmunol.2013，190(11):5712-21)。
[0003]anisomycin是从链霉菌属Streptomyces的培养液中分离得到的细菌组份(分子式为C14H19NO4，分子量265.3)，能够通过与60S核糖体亚单位结合、阻断肽键形成从而阻止肽链延长和导致多核糖体降解，最终抑制蛋白质和DNA合成。anisomycin最初被视为抗真菌和抗阿米巴原虫的抗生素，之后发现anisomycin能够激活丝裂原活化蛋白激酶家族成员P38和c-Jun氨基末端激酶，因而常被作为丝裂原活化蛋白激酶信号通路的激活剂(Tang ZLj Xing FY et al.1n vivo toxicologicalevaluat1n of anisomycin.Toxicol Lett，2012，208 (I):1-11)?国外学者近来发现它与健忘症、创伤后记忆恢复及学习等关系密切，又被广泛用于中枢神经记忆系统中的石开究(Sharma AVj et al.Neurosilence:profound suppress1n of neuralactivity following intracerebral administrat1n of the protein synthesisinhibitor anisomycin.J Neuroscij 2012, 32(7):2377-87 ；Guo X et al.Epigeneticmechanisms of amyloid-βproduct1n in anisomycin-treated SH—SY5Y cells.Neuroscience.2011，194:272-81)。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于克服现有技术中免疫抑制用药剂量高、药效不理想、对移植组织和器官缺乏选择性，且对造血系统、消化系统、免疫系统、神经和内分泌系统的毒副作用大的缺点和不足，提供一种细菌源性吡咯烷类化合物在制备免疫抑制剂中的应用。
[0005]本发明的目的通过下述技术方案实现:
[0006]一种细菌源性吡咯烷类化合物在制备免疫抑制剂中的应用，所述的细菌源性吡咯烧类化合物为anisomycin,其结构式如式I所示:
[0007]
【权利要求】
1.一种细菌源性吡咯烷类化合物在制备免疫抑制剂中的应用，其特征在于:所述的细菌源性批咯烧类化合物为anisomycin,其结构式如式I所示:
式I。
2.一种免疫抑制剂，其特征在于:含有权利要求1所述的细菌源性吡咯烷类化合物。
3.权利要求2所述的免疫抑制剂的制备方法，其特征在于包含如下步骤: (1)将10~10mg细菌源性吡咯烷类化合物与0.5~3mL生理盐水或磷酸缓冲盐溶液混合； (2)在步骤(1)得到的溶液中缓慢滴加HCl溶液，并轻轻反复抽吸或搅拌直至细菌源性吡咯烷类化合物完全溶解时停止滴加HCl溶液； (3)在步骤(2)得到的溶液中滴加NaOH溶液，调整pH至7.0~7.2 ;再用生理盐水或磷酸缓冲盐溶液补足溶液总体积至I~5mL，得到浓度为10~20mg/mL的细菌源性吡咯烷类化合物免疫抑制剂； 步骤(1)中所述的细菌源性批咯烧类化合物为权利要求1所述的anisomycin。
4.根据权利要求3所述的免疫抑制剂的制备方法，其特征在于: 步骤⑵所述的HCl溶液的浓度为0.5~3.0moI/L0
5.根据权利要求4所述的免疫抑制剂的制备方法，其特征在于: 步骤⑵所述的HCl溶液的的浓度为lmol/L。
6.根据权利要求3所述的免疫抑制剂的制备方法，其特征在于: 步骤(3)中所述的的NaOH溶液的浓度为0.5~3.0moI/L0
7.根据权利要求6所述的免疫抑制剂的制备方法，其特征在于: 步骤(3)中所述的的NaOH溶液的浓度为lmol/L。
8.根据权利要求3所述的免疫抑制剂的制备方法，其特征在于: 步骤(1)、⑵中所述的磷酸盐缓冲盐溶液的pH为7.2，其组成如下:NaC18.0g，KCL0.20g, Na2HPO4.12Η203.484g, NaH2PO4.12Η200.20g，用三蒸水定容至 100mL0
9.根据权利要求3所述的免疫抑制剂的制备方法，其特征在于: 步骤(1)、(2)和(3)在无菌条件下操作。
10.根据权利要求3所述的免疫抑制剂的制备方法，其特征在于: 步骤(1)和(3)中所述的生理盐水和磷酸缓冲盐溶液经过无菌处理； 步骤(2)中所述的HCl溶液经过无菌处理； 步骤(3)中所述的NaOH溶液经过无菌处理。
【文档编号】A61K31/40GK104127408SQ201410352969
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月23日 优先权日:2014年7月23日
【发明者】邢飞跃, 于哲, 刘静, 郭中锋, 方志远 申请人:暨南大学