本发明涉及一种组合物及制备方法，具体地说是一种预防和治疗粘膜疾病的组合物及制备方法，特别是涉及一种预防和治疗致病菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的粘膜疾病的组合物及制备方法。
背景技术：
粘膜疾病是属于溃疡、炎症、创伤性损伤或者腐蚀性损伤类疾病或病症，包括口腔溃疡（口疮）、唇疱疹、放疗性皮肤溃疡、生殖道溃疡、胃粘膜溃疡、肠道粘膜溃疡、光线性角化病、白塞氏综合症、疣、口臭、牙龈肿痛等。
如口腔疾病是一种常见的多发病，而且发病率高，对人体健康危害性很大，但往往不被广大患者重视。口腔疾病其主要的发病原因是由于龈缘区牙菌斑的堆积而导致大量致病菌的繁殖，其释放出的细菌毒素及代谢物对牙周、牙龈损害所致。常见的口腔疾病有牙龈炎、口腔粘膜炎、咽炎等，口腔疾病在人群中的发病率非常高，几乎每个人都有口腔问题，60﹪左右的人群患有不同程度的口腔溃疡、口臭、咽炎，而顽固复发性口腔溃疡达到10﹪左右，特别是口腔、鼻咽及牙周手术后；放疗化疗、呼吸科、传染科病人及经口腔粘膜插管病。
口腔溃疡即复发性阿弗他溃疡（recurrent aphthous ulcer，RAU），又称复发性口疮、复发性口腔溃疡（recurrent oral ulceration，ROU）、复发性阿弗他口炎（recurrent aphthous stomaitis），是口腔粘膜疾病中发病率最高的一种疾病。其发病机制仍不明确，可能与消化系统功能紊乱、内分泌异常、精神状态、遗传因素等有关系。另外，癌症患者在进行放化疗治疗时，其诱发的毒性也是导致口腔溃疡的重要因素,据资料报告，头颈部放疗患者中口腔溃疡的发生率为85%-100%，化疗后出现口腔溃疡的发病率高达50%-90%。临床表现主要为口腔粘膜红斑、水肿、溃疡及坏死，能引起疼痛、感染，从而对患者的生活质量及治疗的依从性产生严重影响，甚至导致治疗计划的中断。
牙周病是发生在牙周组织的一种常见口腔疾病，是由牙周致病菌（如粘放线杆菌、牙龈卟啉单胞菌、变形链球菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等）、非致病菌以及创伤等引起，可出现牙菌斑、牙周脓肿、疼痛、出血、口臭及牙齿松动等症状，主要分为牙龈炎、牙周炎、牙周创伤以及牙周萎缩等。
目前，限制粘膜炎程度和控制症状的措施主要分为激光治疗、药物治疗和口腔护理，用于减轻症状、促进愈合。但仍没有公认的措施能彻底防治口腔溃疡。
国内相关粘膜给药制剂的研究，主要是针对消炎抗过敏药氨来咕诺进行设计的药物制剂，如文献1：申请号为200610044323.6，申请日为2006.05.29，发明名称为氨来呫诺口腔膜剂及其制备方法的专利公开了一种治疗口腔溃疡的包括氨来呫诺、聚乙烯醇、甘油、纯化水等组成的氨来呫诺口腔膜剂。
文献2：申请号为201110389370.5，申请日为2011.11.30，发明名称为一种消炎抗过敏治疗口腔溃疡药及其制备方法的专利公开了一种包括氨来呫诺、聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠、聚山梨酯80、甘油、对羟基苯甲酸乙酯制备的新型膜剂，用于治疗口腔溃疡。
在口腔含漱方面，主要是针对葡糖糖氯己定、中草药提取成分抗微生物剂进行设计的药物制剂，如文献3：申请号为201010239368.5，申请日为2010.07.28，发明名称为一种葡萄糖酸氯己定含漱液的专利公开了一种含有葡萄糖酸氯己定、丙二醇、甘油、聚氧乙烯40氢化蓖麻油的含漱液。
如文献4：申请号为201310426103.X，申请日为2013.09.18，发明名称为一种灰毡毛忍冬叶含漱液的制备方法的专利公开了一种采用灰毡毛忍冬叶制备含漱液的方法。
上述4篇文献存在两方面不足，一是不能有效杀灭病灶部位有害微生物；二是药物在病灶停留时间短，不能长时间发挥药效，且不能隔离微生物感染，不能防止其发生二次感染，从而达到加速创面愈合的作用。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种预防和治疗致病菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的粘膜疾病的组合物及制备方法。
本发明是采用如下技术方案实现其发明目的的，一种预防或治疗粘膜疾病的组合物，以质量计，所述组合物各组分包括：抗微生物剂组分含量为0.001﹪～35.0﹪；镇痛剂组分含量为 0﹪～10.0﹪；生物粘附剂组分含量为0.001﹪～20.0﹪；保湿剂组分含量为0﹪～30.0﹪；pH调节剂组分含量为0﹪～5.0﹪；矫味剂组分含量为0﹪～8.0﹪；乳化剂组分含量为0﹪～5.0﹪；辅助抗微生物剂组分含量为0﹪～8.0﹪；余为纯化水；各组份之和为100﹪；所述抗微生物剂为葡萄糖氯己定、醋酸氯己定、苯扎氯铵、苄索氯铵、西曲溴铵、聚六亚甲基胍盐、西吡氯铵、溴化十六烷基吡啶、对氯间二甲苯酚、2, 4,4’-三氯-2’- 羟基二苯醚、聚维酮碘、苯酚衍生物、葡萄糖氧化酶、溶菌酶、过氧化氢、过氧化脲和木糖醇中的一种或二种以上组合；所述镇痛剂为地布卡因、利多卡因、利多卡因、苯佐卡因、普鲁卡因、丁卡因、甲哌卡因、可卡因、达克罗宁、苯甲醇和苯甲酸中的一种或二种以上组合；所述生物粘附剂是卡波姆、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚丙酸钠、海藻酸钠、羧甲基壳聚糖、羟丙基壳聚糖、乳酸盐壳聚糖、褐藻糖、壳寡糖、透明质酸钠、芦荟胶、黄芪胶、黄原胶、卡拉胶和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或二种以上组合；所述保湿剂是甘油、聚乙二醇、丙二醇、赤藓糖醇、山梨糖醇、甘露醇、麦芽糖醇和胶原蛋白中的一种或二种以上组合；所述pH调节剂是酒石酸、苹果酸、枸橼酸、异柠檬酸、磷酸、乳酸、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙醇胺、二异丙醇胺、三异丙醇胺、氨丁三醇、精氨酸、氨基甲基丙醇和四羟基丙基乙二胺中的一种或二种以上组合；所述矫味剂是糖精钠、甜菊素、甜蜜素、蔗糖素、山梨醇、薄荷醇和木糖醇中的一种或二种以上组合；所述乳化剂是聚山梨酯、月桂硫酸钠、单硬脂酸甘油酯和聚氧乙烯基蓖麻油衍生物中的一种或二种以上组合；所述辅助抗微生物剂是咪唑烷基脲、已内酰脲、碘代丙炔基氨基甲酸丁脂、苯甲醇、苯甲酸、山梨酸钾、苯氧乙醇和尼泊金酯类中的一种或二种以上组合。
本发明的较优的方案为所述抗微生物剂组分含量为0.1﹪～5.0﹪；镇痛剂组分含量为0.1﹪～3.0﹪；生物粘附剂组分含量为0.1﹪～5.0﹪；保湿剂组分含量为0.5﹪～10.0﹪；pH调节剂组分含量为0.001﹪～5.0﹪；矫味剂组分含量为0.001﹪～5.0﹪；乳化剂组分含量为0﹪～5.0﹪；辅助抗微生物剂组分含量为0﹪～5.0﹪；余为纯化水；各组份之和为100﹪。
本发明所述抗微生物剂较优的组分含量为0.01﹪～10.0﹪。
本发明所述抗微生物剂优选组分含量为0.1﹪～5.0﹪。
本发明所述镇痛剂较优的组分含量为0.001﹪～5.0﹪。
本发明所述镇痛剂优选组分含量为0.1﹪～3.0﹪。
本发明所述生物粘附剂较优的组分含量为0.01﹪～10.0﹪。
本发明所述生物粘附剂优选组分含量为0.1﹪～5.0﹪。
本发明所述保湿剂较优的组分含量为0.1﹪～20.0﹪。
本发明所述保湿剂优选组分含量为0.5﹪～10.0﹪。
一种如上所述一种预防或治疗粘膜疾病的组合物的制备方法，它包括下列步骤：
⑴以质量计，按配比取各组分，首先，取生物粘附剂加适量水、加热至40℃～50℃，不断搅拌使其溶解，得溶液A；再取保湿剂、抗微生物剂、辅助抗微生物剂、乳化剂、镇痛剂，加适量水不断搅拌使其溶解，得溶液B；然后，取矫味剂，加适量水不断搅拌使其溶解，得溶液C；最后，取pH调节剂，加适量水不断搅拌使其溶解，得溶液D；
⑵调配：往溶液A中，加入溶液B，搅匀；再加入溶液C，搅匀；然后，加入溶液D，搅匀；最后，加入剩余纯化水定容制备得组合物。
由于采用上述技术方案，本发明较好的实现了发明目的，所述组合物各组分能很好的融和，兼具抗菌、隔离、镇痛、保湿的功能；用于预防和治疗粘膜疾病时，所述组合物驻留给药部位，释放出抗微生物剂能有效的杀灭有害微生物，同时，组合物具有生物粘附性，保持长时间停留在给药部位，隔离微生物感染，防止二次感染，加速创面愈合的作用；特别适用于口腔、鼻腔、胃肠道和呼吸道、阴道、膀胱、生殖器、表皮等部位粘膜疾病的预防和治疗。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：
一种预防或治疗粘膜疾病的组合物，以质量计，所述组合物各组分包括：抗微生物剂组分含量为0.001﹪～35.0﹪；镇痛剂组分含量为0﹪～10.0﹪；生物粘附剂组分含量为0.001﹪～20.0﹪；保湿剂组分含量为0﹪～30.0﹪；pH调节剂组分含量为0﹪～5.0﹪；矫味剂组分含量为0﹪～8.0﹪；乳化剂组分含量为0﹪～5.0﹪；辅助抗微生物剂组分含量为0﹪～8.0﹪；余为纯化水；各组份之和为100﹪；所述抗微生物剂为葡萄糖氯己定、醋酸氯己定、苯扎氯铵、苄索氯铵、西曲溴铵、聚六亚甲基胍盐、西吡氯铵、溴化十六烷基吡啶、对氯间二甲苯酚、2, 4,4’-三氯-2’- 羟基二苯醚、聚维酮碘、苯酚衍生物、葡萄糖氧化酶、溶菌酶、过氧化氢、过氧化脲和木糖醇中的一种或二种以上组合；所述镇痛剂为地布卡因、利多卡因、利多卡因、苯佐卡因、普鲁卡因、丁卡因、甲哌卡因、可卡因、达克罗宁、苯甲醇和苯甲酸中的一种或二种以上组合；所述生物粘附剂是卡波姆、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚丙酸钠、海藻酸钠、羧甲基壳聚糖、羟丙基壳聚糖、乳酸盐壳聚糖、褐藻糖、壳寡糖、透明质酸钠、芦荟胶、黄芪胶、黄原胶、卡拉胶和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或二种以上组合；所述保湿剂是甘油、聚乙二醇、丙二醇、赤藓糖醇、山梨糖醇、甘露醇、麦芽糖醇和胶原蛋白中的一种或二种以上组合；所述pH调节剂是酒石酸、苹果酸、枸橼酸、异柠檬酸、磷酸、乳酸、氢氧化钠、氢氧化钾、三乙醇胺、二异丙醇胺、三异丙醇胺、氨丁三醇、精氨酸、氨基甲基丙醇和四羟基丙基乙二胺中的一种或二种以上组合；所述矫味剂是糖精钠、甜菊素、甜蜜素、蔗糖素、山梨醇、薄荷醇和木糖醇中的一种或二种以上组合；所述乳化剂是聚山梨酯、月桂硫酸钠、单硬脂酸甘油酯和聚氧乙烯基蓖麻油衍生物中的一种或二种以上组合；所述辅助抗微生物剂是咪唑烷基脲、已内酰脲、碘代丙炔基氨基甲酸丁脂、苯甲醇、苯甲酸、山梨酸钾、苯氧乙醇和尼泊金酯类中的一种或二种以上组合。
本发明的较优的方案为所述抗微生物剂组分含量为0.1﹪～5.0﹪；镇痛剂组分含量为0.1﹪～3.0﹪；生物粘附剂组分含量为0.1﹪～5.0﹪；保湿剂组分含量为0.5﹪～10.0﹪；pH调节剂组分含量为0.001﹪～5.0﹪；矫味剂组分含量为0.001﹪～5.0﹪；乳化剂组分含量为0﹪～5.0﹪；辅助抗微生物剂组分含量为0﹪～5.0﹪；余为纯化水；各组份之和为100﹪。
本发明所述抗微生物剂较优的组分含量为0.01﹪～10.0﹪。
本发明所述抗微生物剂优选组分含量为0.1﹪～5.0﹪。
本发明所述镇痛剂较优的组分含量为0.001﹪～5.0﹪。
本发明所述镇痛剂优选组分含量为0.1﹪～3.0﹪。
本发明所述生物粘附剂较优的组分含量为0.01﹪～10.0﹪。
本发明所述生物粘附剂优选组分含量为0.1﹪～5.0﹪。
本发明所述保湿剂较优的组分含量为0.1﹪～20.0﹪。
本发明所述保湿剂优选组分含量为0.5﹪～10.0﹪。
本实施例选取西吡氯铵为抗微生物剂，组分含量为0.1﹪；苯甲醇为镇痛剂，组分含量为1.5﹪；羟乙纤维素为生物粘附剂，组分含量为0.8﹪；甘油为保湿剂，组分含量为5.0﹪；氢氧化钾为pH调节剂，组分含量为0.003﹪；甜菊素为矫味剂，组分含量为0.1﹪；乳化剂组分含量为0﹪；辅助抗微生物剂组分含量为0﹪；余为纯化水。
如上所述一种预防或治疗粘膜疾病的组合物的制备方法，它包括下列步骤：
⑴以质量计，按配比取各组分，首先，取生物粘附剂加适量水、加热至40℃～50℃，不断搅拌使其溶解，得溶液A；再取保湿剂、抗微生物剂、辅助抗微生物剂、乳化剂、镇痛剂，加适量水不断搅拌使其溶解，得溶液B；然后，取矫味剂，加适量水不断搅拌使其溶解，得溶液C；最后，取pH调节剂，加适量水不断搅拌使其溶解，得溶液D；
⑵调配：往溶液A中，加入溶液B，搅匀；再加入溶液C，搅匀；然后，加入溶液D，搅匀；最后，加入剩余纯化水定容制备得组合物。
本实施例首先按配比取羟乙纤维素加适量水、加热至40℃～50℃，不断搅拌使其溶解，得溶液A；再取甘油、西吡氯铵、苯甲醇，加适量水不断搅拌使其溶解，得溶液B；然后，取甜菊素加适量水不断搅拌使其溶解，得溶液C；最后，取氢氧化钾，加适量水不断搅拌使其溶解，得溶液D；先往溶液A中，加入溶液B，搅匀；再加入溶液C，搅匀；然后，加入溶液D，搅匀；最后，加入剩余纯化水定容制备得组合物。
体系稳定性：本实施例所制备的组合物为单一稳定的粘性液体，在温度37±2℃，相对湿度75±5﹪的条件下放置3个月供试品各项质量指标无明显变化。
杀灭微生物效果：本实施例按照《消毒技术规范》的检测方法，原液作用1min，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌以及白色念珠菌的杀灭率均大于99﹪，实验表明该组合物对粘膜疾病的主要致病菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌有良好的杀灭作用。
生物学评价：本实施例采用MTT法对本实施例制备的组合物进行细胞毒性试验，以细胞相对增殖度（RGR）来判断细胞毒性级别，结果其细胞毒性为1级，合格。
本实施例将制备的组合物的氯化钠浸提液注射于试验兔的皮内，注射后24h、48h和72h，肉眼观察试验兔都未见红斑、水肿及坏死现象，表明该组合物对动物机体无皮内刺激反应。
本实施例以白色豚鼠为受试动物，采用最大剂量试验(GPMT)，将制备的组合物的氯化钠浸提液注射于豚鼠皮内，进行皮内诱导后，在诱导阶段未试验部位局部贴敷进行激发，在不同时间分别观察豚鼠激发部位的皮肤情况，用Magnusson和Kligman分级标准对每一激发部位和每一观察时间的皮肤红斑和水肿反应进行分级。结果未出现红斑和水肿，致敏试验为阴性，表明该组合物对动物机体无致敏反应。
本实施例将制备的组合物的氯化钠浸提液及植物油浸提液作为试验组，与对照组分别注射于小白鼠体内，并于4h、24h、48h、72h观察和记录试验组和对照组的一般状态、毒性表现和死亡动物数。结果表明，即时反应、4h、24h、48h、72h观察都无毒性症状，体重也并未下降，表明该组合物无急性全身毒性反应。
本实施例采用不同组份含量的西吡氯铵所制备的组合物其杀灭微生物效果与生物学评价见下表：
从表中可知，抗微生物剂为西吡氯铵时，其组份含量为0.1﹪时较佳。
实施例2：
本实施例选取苄索氯铵和木糖醇为抗微生物剂，组分含量分别为0.075﹪、10.0﹪；镇痛剂组分含量为0﹪；透明质酸钠为生物粘附剂，组分含量为0.2﹪；甘油为保湿剂，组分含量为5.0﹪；氢氧化钾为pH调节剂，组分含量为0.003﹪，调节pH至6.0～8.0；矫味剂组分含量为0﹪；乳化剂组分含量为0﹪；辅助抗微生物剂组分含量为0﹪；余为纯化水。
杀灭微生物效果：本实施例按照《消毒技术规范》的检测方法，原液作用3min，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌杀灭率均大于90﹪，实验表明该组合物对粘膜疾病的主要致病菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌有较好的杀灭作用。
余同实施例1。
实施例3：
本实施例选取苯扎氯铵为抗微生物剂，组分含量分别为0.05﹪；镇痛剂组分含量为0﹪；羟丙基壳聚糖为生物粘附剂，组分含量为4﹪；甘油为保湿剂，组分含量为5.0﹪；氢氧化钾为pH调节剂，组分含量为0.003﹪，调节pH至6.0～8.0；糖精钠为矫味剂，组分含量为0.1﹪；乳化剂组分含量为0﹪；辅助抗微生物剂组分含量为0﹪；余为纯化水。
杀灭微生物效果：本实施例按照《消毒技术规范》的检测方法，原液作用1min，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌杀灭率均大于85﹪，实验表明该组合物对粘膜疾病的主要致病菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌有一定的杀灭作用。
余同实施例1。
实施例4：
本实施例选取葡萄糖氧化酶为抗微生物剂，组分含量分别为5.0﹪；镇痛剂组分含量为0﹪；卡波姆为生物粘附剂，组分含量为0.2﹪；甘油为保湿剂，组分含量为5.0﹪；氢氧化钾为pH调节剂，组分含量分别为0.2﹪，调节pH至6.0～8.0；矫味剂组分含量为0﹪；聚山梨酯为乳化剂，组分含量为1.0﹪；苯甲醇为辅助抗微生物剂，组分含量为1.5﹪；余为纯化水。
杀灭微生物效果：本实施例按照《消毒技术规范》的检测方法，原液作用1min，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌杀灭率均大于99﹪，实验表明该组合物对粘膜疾病的主要致病菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌有良好的杀灭作用。
余同实施例1。
实施例5：
本实施例选取木糖醇为抗微生物剂，组分含量分别为35.0﹪；苯甲醇为镇痛剂，组分含量为1.5﹪；卡波姆为生物粘附剂，组分含量为0.2﹪；甘油为保湿剂，组分含量为5.0﹪；氢氧化钾、异柠檬酸和磷酸为pH调节剂，组分含量分别为0.2﹪、0.5﹪和0.002﹪，调节pH至6.0～8.0；矫味剂组分含量为0﹪；聚山梨酯为乳化剂，组分含量为1.0﹪；辅助抗微生物剂组分含量为0﹪；余为纯化水。
杀灭微生物效果：
本实施例按照《消毒技术规范》的检测方法，原液作用2min，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑制率＞50﹪；原液作用1min，对白色念珠菌的抑制率＞50﹪，实验表明该药物组合物对粘膜疾病的主要致病菌金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌有一定的抑制作用。
余同实施例1。