专利名称：预防和治疗癌性疾病的药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及预防和治疗癌性疾病的药物组合物及其制备方法。
在癌症治疗中最常用的方法是外科手术、照射疗法和化学疗法[The Pharmacological Basis of Therapeutics，PergamonPress，Inc.，New York，pp.1202-1263(1990)；Harrison’sPrinciples of Internal Medicine，12th ed.，InternationalEdition，McGraw-Hill，Inc.，New York，Vol.2，pp.1587-1599(1991)；Scientific American Medicine，ScientificAmerican，Inc.，New York，Vol.2，12(V)，pp.1-14(1984)]。在照射疗法中，除了广泛使用离子疗法外，光线疗法和局部高温疗法与照射疗法和化学疗法结合用于一些特殊情况例如皮肤癌。在化学疗法的用药中，按其作用、来源和结构分类，也可以使用烷基化剂，植物生物碱、抗菌素、抗代谢物，其它药物(如天冬酰胺酶)以及常用的各种激素。在化学疗法中最新应用的对策如下结合化学疗法；为减少毒性长期少剂量静脉或动脉输注化学疗法的药物；为克服药物抗性的高剂量化学疗法以及这种疗法与自身骨髓移植结合；化学疗法药物与生物应答调节剂结合；大量使用佐剂和新佐剂的化学疗法。最常用的生物应答调节剂是干扰素、肿瘤坏死因子、淋巴因子如白细胞介素-2以及单克隆抗体。各种饮食疗法，稍经处理的血清制剂和运用心理作用的Simonton方法也是目前用于治疗肿瘤疾病的方法，但其效果没有证实。
在上面参考文献中详述的目前所用的方法的最显著缺点是毒性、显著的副作用、低的肿瘤特异性、产生抗药性和局限的有效范围。用于癌症治疗的大多数细胞毒性药物不能区别形成肿瘤的细胞和正常的增生细胞；因此，为了避免对重要的宿主组织(例如骨髓、肠)的任何不可逆损伤，药物必须以通常证明不足以杀死所有存在的形成肿瘤的细胞的剂量给药[Pharmac Ther.，49，43-54(1991)]。照射疗法可引起放射损伤而且同时对缺氧细胞和某些类型的肿瘤无效。在化学疗法中所用的药物也具有各种毒副作用。它们可损害中枢神经系统、造血器官、胃和肠的粘膜以及所有的增生细胞。另外它们还可损害肝、肾、肺和心肌。几乎所有有效的抗肿瘤剂都是免疫抑制剂[Proc.Roy.Soc.Med.，63，1063-1066(1970)]。它们中的大多数具有致畸或致癌作用，有时它们可能引起不育症或增加肿瘤复发的频率。通过化学疗法对60-70％肿瘤产生影响是非常困难的或者是不可能的，而且在治疗中还会产生抗药性或交叉抗药性。
令人遗憾地，利用生物体的自身防御机制使用生物应答调节剂治疗具有同样的缺点，因为现已发现它们仅对一些类型的肿瘤有效并且也具有毒副作用[Harrison’s Principles of InternalMedicine，12th ed.，International Edition，McGraw-Hill，Inc.，New York，Vol.2，pp.1587-1599(1991)]。干扰素也有许多严重的副作用，其中包括例如心脏中毒[Chest，99，557-561(1991)]。同样使用单克隆抗体的希望也没有实现[Eur.J.Cancer，27，936-939(1991)]。尽管自1980年以来已完成了四百多登记的免疫疗法的临床试验，但至今还没有一种方法被引入治疗任何一种类型的癌症[J.R.Soc.Med.，84,321(1991)]。
PCT公开号WO86/025555涉及用于治疗癌性疾病的药物，它包括L-半胱氨酸、L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-苯丙氨酸、L-赖氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-苏氨酸、L-苹果酸和L-抗坏血酸。L-苹果酸和L-抗坏血酸作为活化剂缓冲并稳定氨基酸的酸形式，因此它们在低于6.8的酸度范围内使血液的pH值发生变化。在此公开文献中，没有证明恶性肿瘤生长停止或甚至被抑制的数据。
公开的日本专利申请号62-135421涉及含有除L-异亮氨酸之外的特定氨基酸的氨基酸输液，它表现出能抑制肿瘤繁殖的作用。该制剂的可能的但未被证实的作用是建立在一种氨基酸如异亮氨酸的缺乏之上。
本发明的目的是制备含有天然物质的药物组合物，它消除了用于肿瘤治疗的已知组合物和方法的缺点如毒性、低特异性和局限的有效范围。
本发明是建立在对不同生物体中肿瘤细胞的被动防御系统[下文称为被动抗肿瘤防御系统(PADS)]的认识上。该系统能破坏产生的和已经存在的肿瘤细胞。参与PADS的物质是存在于循环系统中的内源的和外源的天然物质，即氨基酸、维生素、核碱、糖类以及细胞代谢产物。已经认识到一起使用这些物质中的至少三种(这些物质是循环系统中的成份并且因此可达到和进入所有细胞)能协同增加彼此的作用，因此能够破坏肿瘤细胞。
本发明进一步建立在对由于协同作用而使正常细胞和肿瘤细胞参与PADS行为具有显著的不同性质从而这两种细胞能区分开来的认识上。尽管因为肿瘤细胞与正常细胞外部不同，经典的免疫系统能识别并选择性地破坏肿瘤细胞，但由于其内部不同，新识别的被动抗肿瘤防御机理同样能做到。
本发明进一步建立在对由于循环系统中其成份浓度增加到对肿瘤细胞供应过度的程度，上述成份选择性地引起癌细胞中致命的代谢压力的认识上。
本发明最后是建立在根据所用剂量和施用途径对不同肿瘤细胞可达到的预防或抗肿瘤作用的认识上。对于以不同程度不同于正常细胞的各种类型的肿瘤，最有效的混合物的成份的性质和用量可以用协同作用作为标准来确定。
基于上述认识，本发明涉及预防和治疗癌性疾病的药物组合物，所述药物组合物包括至少三种存在于循环系统中的活性化合物至少一种氨基酸，至少一种维生素以及至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-甘露糖、D-葡糖胺、苹果酸、草乙酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物，其条件是如果组合物除含有氨基酸外仅含苹果酸和一种维生素，那么维生素不是抗坏血酸。该组合物还包括药学中常用的载体、稀释剂和/或其它助剂。
本发明的组合物可包括L-甲硫氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、N-苯甲酰甘氨酸和/或其盐作为氨基酸和d-生物素、吡哆素、核黄素、核黄素-5＇-磷酸、L-抗坏血酸、硫辛酸、乳清酸和/或其盐作为维生素。
本发明的优选组合物包括L-色氨酸、L-抗坏血酸，至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-葡糖胺和/或其可药用盐的化合物。
本发明的另一优选组合物包括L-精氨酸、核黄素-5＇-磷酸、至少一种选自D-甘露糖、苹果酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物。
本发明的另一优选组合物包括30-44％(质量)的L-精氨酸、27-35％(质量)的核黄素-5＇-磷酸、38-62％(质量)的苹果酸和/或其可药用盐。
本发明的另一优选组合物包括0.002-70％(质量)的至少一种选自L-甲硫氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、N-苯甲酰甘氨酸和/或其盐的化合物作为氨基酸，0.0004-80％(质量)的至少一种选自d-生物素、吡哆素、核黄素、核黄素-5＇-磷酸、L-抗坏血酸、硫辛酸、乳清酸和/或其盐的化合物作为维生素以及0.003-80％(质量)的至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-甘露糖、D-葡糖胺、苹果酸、草乙酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物。
本发明的另一优选组合物包括0.9-25％(质量)的L-甲硫氨酸、0.8-19％(质量)的L-色氨酸、1.1-48％(质量)的L-精氨酸、0.9-46％(质量)的d-生物素、1.2-16％(质量)的吡哆素、0.03-42％(质量)的核黄素-5＇-磷酸、0.05-18％(质量)的D-葡糖胺、0.5-60％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.7-68％(质量)的苹果酸、0.6-40％(质量)的D-甘露糖和/或其可药用盐。
本发明的一种非常有效的组合物包括0.005-34％(质量)的L-甲硫氨酸、0.002-25％(质量)的L-色氨酸、0.02-23％(质量)的L-酪氨酸、0.04-30％(质量)的L-苯丙氨酸、0.04-50％(质量)的L-精氨酸、0.03-34％(质量)的L-组氨酸、0.05-22％(质量)的N-苯甲酰甘氨酸、0.01-60％(质量)的d-生物素、0.01-20％(质量)的吡哆素、0.0004-45％(质量)的核黄素、0.0005-45％(质量)的核黄素-5＇-磷酸、0.003-70％(质量)的L-抗坏血酸、0.004-15％(质量)的硫辛酸、0.01-17％(质量)的乳清酸、0.001-10％(质量)的腺嘌呤、0.01-63％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.08-42％(质量)的D-甘露糖、0.05-20％(质量)的D-葡糖胺、0.01-80％(质量)的苹果酸、0.02-60％(质量)的草乙酸、0.001-10％(质量)的三磷酸腺苷和/或其可药用盐。
本发明的另一目的是制备上述组合物的方法，该方法包括使存在于循环系统中的活性化合物中的至少一种氨基酸，至少一种维生素以及至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-甘露糖、D-葡糖胺、苹果酸、草乙酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物混合制成药物组合物。药学上常用的载体、稀释剂和/或其他助剂也可以以补充组合物的质量至100％所必需的量与活性组合物混合。
本发明方法的优选实施方案包括将L-色氨酸、L-抗坏血酸、至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-葡糖胺和/或其可药用盐的化合物混合制成药物组合物。
本发明方法的另一优选实施方案包括将L-精氨酸、核黄素-5＇-磷酸、至少一种选自D-甘露糖、苹果酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物混合制成药物组合物。
本发明方法的另一优选实施方案包括将30-44％(质量)的L-精氨酸、27-35％(质量)的核黄素-5＇-磷酸、38-62％(质量)的苹果酸和/或其可药用盐混合制成药物组合物。
本发明方法的另一优选实施方案包括将0.002-70％(质量)的至少一种选自L-甲硫氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、N-苯甲酰甘氨酸和/或其盐的化合物作为氨基酸，0.0004-80％(质量)的至少一种选自d-生物素、吡哆素、核黄素、核黄素-5＇-磷酸、L-抗坏血酸、硫辛酸、乳清酸和/或其盐的化合物作为维生素和0.003-80％(质量)的至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-甘露糖、D-葡糖胺、苹果酸、草乙酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物混合制成药物组合物。
本发明方法的另一优选实施方案包括将0.9-25％(质量)的L-甲硫氨酸、0.8-19％(质量)的L-色氨酸、1.1-48％(质量)的L-精氨酸、0.9-46％(质量)的d-生物素、1.2-16％(质量)的吡哆素、0.03-42％(质量)的核黄素-5＇-磷酸、0.05-18％(质量)的D-葡糖胺、0.5-60％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.7-68％(质量)的苹果酸、0.6-40％(质量)的D-甘露糖和/或其可药用盐混合制成药物组合物。
本发明方法的高度优选的实施方案包括将0.005-34％(质量)的L-甲硫氨酸、0.002-25％(质量)的L-色氨酸、0.02-23％(质量)的L-酪氨酸、0.04-30％(质量)的L-苯丙氨酸、0.04-50％(质量)的L-精氨酸、0.03-34％(质量)的L-组氨酸、0.05-22％(质量)的N-苯甲酰甘氨酸、0.01-60％(质量)的d-生物素、0.01-20％(质量)的吡哆素、0.0004-45％(质量)的核黄素、0.0005-45％(质量)的核黄素-5＇-磷酸、0.003-70％(质量)的L-抗坏血酸、0.004-15％(质量)的硫辛酸、0.01-17％(质量)的乳清酸、0.001-10％(质量)的腺嘌呤、0.01-63％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.08-42％(质量)的D-甘露糖、0.05-20％(质量)的D-葡糖胺、0.01-80％(质量)的苹果酸、0.02-60％(质量)的草乙酸、0.001-10％(质量)的三磷酸腺苷和/或其可药用盐混合制成药物组合物。
为治疗使用，本发明的组合物可按下述方法适宜地配制成药物组合物，即为了经肠或肠胃外给药将它们与无毒惰性的固体或液体载体、稀释剂、粘合剂和/或在药物工业中常用的其它添加剂混合后，将它们转化为一种常用的药物制剂。适合于上述要求的载体、稀释剂和粘合剂是例如水、明胶、乳糖、蔗糖、淀粉、果胶、硬脂酸、硬脂酸镁、滑石、各种植物油以及二元醇类如丙二醇或聚乙二醇。药物添加剂和助剂是例如防腐剂如4-羟基苯甲酸甲酯、各种天然或合成的乳化剂、分散剂、湿润剂、着色剂、调味剂、缓冲剂以及促进崩解或溶解的试剂、以及提高所需作用的其他物质。
常用的药物制剂是用上述药物添加剂制备的口服组合物，这些组合物可以是固体形式如片剂、胶囊剂、粉剂、糖锭剂、丸剂或颗粒剂，或液体形式如糖浆剂、溶液、乳液或悬浮液；另外常用的药物制剂为直肠给药组合物如栓剂以及肠胃外给药组合物如注射液或输注液。
本发明的组合物的优选日剂量取决于几种因素，如所治疗的疾病的性质、病人的状况、治疗的方法等。优选的日剂量为30-3000mg/kg体重。因此，合适每日给药1-4个各含有0.2-3g活性组合物的片剂、胶囊或糖锭剂，或0.5-3L含有10-200g/L活性组合物的输注液。
本发明另外涉及预防和治疗癌性疾病的方法，该方法包括给需要治疗的患者施用治疗有效量的本发明组合物。
用下列表、图和实施例更详细地说明本发明。在下列试验中使用的细胞得自“American Type Culture Collection”(Rockville，MD，USA)。
表1表示分别含有4种和5种活性成份的实施例1-20的组合物的成份对Sp2/0-Ag14骨髓瘤细胞(ATCC CRL 1581)的杀死肿瘤细胞作用和协同作用。
表2表示当加入另外成份时含有5种活性成份的实施例21-37组合物对Sp2/0-Ag14细胞作用的增加。
图1表示分别含有4种和5种活性成份的实施例1-20组合物的成份的作用和协同作用。
图2表示含有5种活性成份的实施例102-106组合物和含有21种活性成份的实施例107-111组合物对Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞的体外作用与相应的对比混合物比较。
图3表示含有21种活性成份的实施例107组合物对Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞的作用(为时间的函数)并与未处理的细胞和合适的对比混合物比较。
图4表示含有21种活性成份的实施例107-111组合物对K-562人红白血病细胞(ATCC CCL 243)的体外作用与相应的对比混合物比较。
图5表示含有21种活性成份的实施例107-111组合物对HeLa人上皮样癌子宫颈细胞(ATCC CCL 2)的体外作用与相应的对比混合物比较。
图6表示含有21种活性成份的实施例107-111组合物对HEp-2人表皮样癌喉细胞(ATCC CCL 23)的体外作用与相应的对比混合物比较。
图7表示含有21种活性成份的实施例107-111组合物对正常的Vero African绿猴(green monkey)肾细胞(ATCC CCL 81)的体外作用与相应的对比混合物比较。
图8表示含有21种活性成份的实施例112组合物对BALB/c小鼠通过腹膜内注射Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞产生的肿瘤的体内作用与相应的对比组比较。
图9表示含有21种活性成份的实施例112组合物对BALB/c(nu/nu)小鼠皮下注射HeLa人上皮样癌子宫颈细胞在皮下产生的固体肿瘤的体内作用与相应的对比组比较。
为了试验使用下列介质对于Sp2/0-Ag14和K-562细胞使用RPMI 1640介质(Sigma Chemie GmbH，D-8024 Deisenhofen，Germany，产品号R6504)，对于HEp-2、HeLa和Vero细胞使用MEM介质(Sigma Chemie GmbH，产品号M4655)。
实施例1-37向装有搅拌器的装置中称量加入表1和2中所示的给定量的活性试剂，然后向所得粉状混合物中加入表1和2给定量的、为中和酸类成份所必需的碳酸氢钠。在继续搅拌下向混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用可参见表1和2以及图1。
实施例38-67按实施例1-37的方法，不同的是用适量的碳酸氢钾代替碳酸氢钠中和酸类成份。按此方法制备的溶液的作用与表1和2以及图1分别所示的实施例1-37的溶液的作用没有明显的不同。
实施例68-97按实施例1-37的方法，不同的是用适量的碳酸钙代替碳酸氢钠中和酸类成份。按此方法制备的溶液的作用与表1和2以及图1分别所示的实施例1-37的溶液的作用没有明显的不同。
实施例98-101按实施例23、24、27和28的方法，不同的是用0.053％(质量)的L-精氨酸盐酸盐、0.052％(质量)的L-组氨酸盐酸盐、0.009％(质量)的L-甲硫氨酸盐酸盐和0.025％(质量)的L-酪氨酸盐酸盐分别代替实施例23、24、27和28中分别所用的L-精氨酸、L-组氨酸、L-甲硫氨酸和L-酪氨酸。在每种情况下相应的碳酸氢钠用量为0.054％(质量)。按此方法制备的溶液的作用与表2中所示的实施例23、24、27和28的溶液的作用没有明显的不同。
实施例102向装有搅拌器的装置中称量加入0.01％(质量)的L-色氨酸、0.034％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.003％(质量)的腺嘌呤、0.065％(质量)的苹果酸、0.007％(质量)的L-抗坏血酸和0.091％(质量)的碳酸氢钠。然后在继续搅拌下向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2中100％组合物所示。
实施例103按实施例102的方法，不同的是每种成份仅称量加入80％量。然后向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2中80％组合物所示。
实施例104按实施例102的方法，不同的是每种成份仅称量加入60％量。然后向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2中60％组合物所示。
实施例105按实施例102的方法，不同的是每种成份仅称量加入40％量。然后向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2中40％组合物所示。
实施例106按实施例102的方法，不同的是每种成份仅称量加入20％量。然后向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2中20％组合物所示。
实施例107向装有搅拌器的装置中称量加入0.011％(质量)的L-甲硫氨酸、0.01％(质量)的L-色氨酸、0.036％(质量)的L-酪氨酸、0.041％(质量)的L-苯丙氨酸、0.044％(质量)的L-精氨酸、0.039％(质量)的L-组氨酸、0.089％(质量)的N-苯甲酰甘氨酸、0.007％(质量)的L-抗坏血酸、0.012％(质量)的d-生物素、0.010％(质量)的吡哆素、0.0004％(质量)的核黄素、0.0006％(质量)的核黄素-5＇-磷酸、0.0006％(质量)的硫辛酸、0.017％(质量)的乳清酸、0.003％(质量)的腺嘌呤、0.034％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.090％(质量)的D-甘露糖、0.053％(质量)的D-葡糖胺、0.065％(质量)的苹果酸、0.040％(质量)的草乙酸、0.0015％(质量)的三磷酸腺苷以及0.087％(质量)的碳酸氢钠。然后在继续搅拌下向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2、3、4、5、6和7中100％组合物所示。
实施例108按实施例107的方法，不同的是每种成份仅称量加入80％量。然后向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2、3、4、5、6和7中80％组合物所示。
实施例109按实施例107的方法，不同的是每种成份仅称量加入60％量。然后向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2、3、4、5、6和7中60％组合物所示。
实施例110按实施例107的方法，不同的是每种成份仅称量加入40％量。然后向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2、3、4、5、6和7中40％组合物所示。
实施例111按实施例107的方法，不同的是每种成份仅称量加入20％量。然后向该混合物中加入合适的介质以便补充组合物的质量至100％。按此方法制备的溶液的作用如图2、3、4、5、6和7中20％组合物所示。
实施例112向装有搅拌器的装置中称量加入1.47％(质量)的L-甲硫氨酸、1.01％(质量)的L-色氨酸、0.036％(质量)的L-酪氨酸、1.63％(质量)的L-苯丙氨酸、1.71％(质量)的L-精氨酸、1.53％(质量)的L-组氨酸、0.18％(质量)的N-苯甲酰甘氨酸、1.94％(质量)的L-抗坏血酸、1.21％(质量)的d-生物素、2.02％(质量)的吡哆素、0.038％(质量)的核黄素、0.05％(质量)的核黄素-5＇-磷酸、0.02％(质量)的硫辛酸、0.09％(质量)的乳清酸、0.068％(质量)的腺嘌呤、1.32％(质量)的2-脱氧-D-核糖、1.8％(质量)的D-甘露糖、1.1％(质量)的D-葡糖胺、1.32％(质量)的苹果酸、0.040％(质量)的草乙酸、0.11％(质量)的三磷酸腺苷、1.34％(质量)的碳酸氢钠和0.04％(质量)的碳酸氢钾。在继续搅拌下，向该混合物中加入含有0.02％(质量)的KH2PO4和0.3％(质量)的Na2HPO4的83.168％(质量)的缓冲液。按此方法制备的溶液并用于治疗动物的效果如图8和9所示。
实施例113向混合器中称量加入20％(质量)的L-色氨酸、62％(质量)的L-抗坏血酸和18％(质量)的D-葡糖胺。充分混合后，所得粉状混合物用于颈防试验。
实施例114按实施例113的方法，不同的是使用32％(质量)的L-精氨酸、28％(质量)的核黄素-5＇-磷酸和40％(质量)的苹果酸。
实施例115按实施例113的方法，不同的是使用23％(质量)的L-色氨酸、0.2％(质量)的吡哆素、17.8％(质量)的N-苯甲酰甘氨酸和59％(质量)的草乙酸。
实施例116按实施例113的方法，不同的是使用19％(质量)的L-酪氨酸、61％(质量)的L-抗坏血酸、0.2％(质量)的腺嘌呤和19.8％(质量)的L-组氨酸。
实施例117按实施例113的方法，不同的是使用31％(质量)的L-甲硫氨酸、53％(质量)的d-生物素、0.2％(质量)的腺嘌呤和15.8％(质量)的乳清酸。
实施例118按实施例113的方法，不同的是使用27％(质量)的L-苯丙氨酸、33％(质量)的核黄素、0.2％(质量)的三磷酸腺苷和39.8％(质量)的D-甘露糖。
实施例119按实施例113的方法，不同的是使用32％(质量)的L-组氨酸、9％(质量)的硫辛酸和59％(质量)的2-脱氧-D-核糖。
实施例120按实施例113的方法，不同的是使用12％(质量)的L-精氨酸、11％(质量)的吡哆素和77％(质量)的苹果酸。
实施例121向混合器中称量加入10％(质量)的L-甲硫氨酸、3％(质量)的L-色氨酸、0.2％(质量)的L-酪氨酸、10.9％(质量)的L-苯丙氨酸、22.7％(质量)的L-精氨酸、10％(质量)的L-组氨酸、1.1％(质量)的N-苯甲酰甘氨酸、11.9％(质量)的L-抗坏血酸、0.1％(质量)的d-生物素、0.2％(质量)的吡哆素、0.05％(质量)的核黄素、0.35％(质量)的核黄素-5＇-磷酸、0.1％(质量)的硫辛酸、0.6％(质量)的乳清酸、0.3％(质量)的腺嘌呤、0.9％(质量)的2-脱氧-D-核糖、11.5％(质量)的D-甘露糖、7％(质量)的D-葡糖胺、8％(质量)的苹果酸、0.4％(质量)的草乙酸和0.7％(质量)的三磷酸腺苷。充分混合后，将所得的粉状混合物用于预防试验。
用Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞试验实施例1-37组合物的作用和活性成份的协同作用(与单一成份的作用比较)。
在试验中，使用科学文献提供的最新方法。对于Sp2/0-Ag14和K562系，从介质中收集呈对数增长的细胞并再悬浮于用于细胞培养的96孔板中，最终浓度分别为每孔250μl合适的介质中有4×104个Sp2/0-Ag14细胞和2×104个K562细胞且每孔中含有预定浓度的试验物质。对于HeLa、HEp-2和Vero细胞，从含有0.2％胰蛋白酶的75％融合组织培养物烧瓶中收集培养的细胞，并以密度为105个细胞/ml再悬浮于合适的介质中。将等份试样(100μl)加至96孔微板中并培养24小时。然后除去介质并用含有预定浓度的试验化合物的250μl新介质来代替。使各种细胞增生48小时。然后用锥虫蓝染料排除法用显微镜数活的Sp2/0-Ag14和K562细胞的数量。HeLa、HEp-2和Vero细胞的存活率通过评定细胞的内源性碱性磷酸酯酶活性来计量。用Student＇s t-试验评估结果。在表中的平均值后面的数据和图中的标志含义为“平均值的标准偏差”(SEM)。
表1的第1栏表示实施例编号、第2栏表示对比试验的编号、其他6栏表示在试验中所用成份的量，并用％(质量)表示。对比混合物由相同量的化学上类似但没有药理学作用的作为活性成份的物质(0.026％(质量)的L-丝氨酸、0.033％(质量)的L-天冬酰胺、0.029％(质量)的L-缬氨酸、0.018％(质量)的L-丙氨酸、0.006％(质量)的甘氨酸、0.059％(质量)的甜菜碱(trimethylglicine)和0.006％(质量)的L-脯氨酸作为氨基酸；0.017％(质量)的盐酸硫胺素、0.006％(质量)的烟酸、0.019％(质量)的叶酸钠、0.001％(质量)的D-泛酸半钙、0.012％(质量)的尿嘧啶和0.0008％(质量)的辛酸作为维生素；0.003％(质量)的次黄嘌呤、0.038％(质量)的D(-)核糖、0.090％(质量)的葡萄糖、0.055％(质量)的N-乙酰基葡糖胺、0.081％(质量)的琥珀酸二钠、0.080％(质量)的富马酸二钠和0.0015％(质量)的鸟苷三磷酸三钠盐)组成。最后两栏分别表示含有4种和5种活性成份的组合物的作用和成份本身的作用(对比试验)，即培养48小时后细胞的数目和以未处理细胞的量的百分比表示的细胞的量(未处理细胞的量为100％)。对于L-色氨酸例如第2-4对比试验表示分别单用0.002、0.006和0.01％(质量)的L-色氨酸对细胞数目的作用。实施例2-4表示使用相同量的L-色氨酸但与其他4种活性成份一起使用时的作用。
从表1的最后两栏的数据可以看出，在单独使用上述物质时，它们均不表现出杀肿瘤细胞的作用，事实上，使用给定量的L-色氨酸时，细胞增生只有稍微增长。同时从这些栏中的数据还可以看出每种物质以协同作用方式与其用量成比例地增加了另外四种活性成份的作用。例如0.01％(质量)的L-色氨酸将四种其它活性成份的作用由73.1％增加至92.3％。相同量(0.01％(质量))的L-色氨酸本身在无其它四种成份时仅稍微增加了细胞的增生，这清楚地证明了协同作用。
在此使用最大量时(例如对于L-色氨酸为0.01％(质量)时)含有4种活性成份的组合物(实施例1、5、9、13和17)的作用与含有5种活性成份的组合物(实施例4、8、12、16和20)的作用在所有情况下均明显不同(P＜0.01)，因此所有物质均明显地增加了其它4种成份的作用。
表1本发明组合物和单-活性成份对Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞的作用
含有5种活性成份的实施例1-20的组合物的协同作用如图1所示。其中用未处理细胞量的百分数(未处理细胞量为100％)表示的Sp2/0-Ag14细胞的量在纵轴上表示，横轴为用％(质量)表示的L-色氨酸、2-脱氧-D-核糖、腺嘌呤、苹果酸和L-抗坏血酸的量。白框表示单独用上述物质培养48小时后用未处理的细胞的量的百分数表示的细胞的量，黑框表示当它们与其它4种活性成份一起使用时所得的结果。增加单一物质的用量时白框和黑框发生不同程度的变化(对于L-色氨酸甚至是以反方向变化)证明了协同作用。黑框表明组合物有较强的杀肿瘤细胞作用。
基于实施例21-37，表2表示当加入另外的成份时，含有5种活性成份的组合物对Sp2/0-Ag14细胞的作用是怎样增加的，表2中用％(质量)并乘以1000表示物质的量，因此表中的数字应读成×10-3，例如在实施例21中，对于L-色氨酸，数字6表示6×10-3，即0.006％(质量)。试验条件同前。
与表1相同，从表2中的最后两栏数据(用细胞数目和％表示)可以看出单独使用上述物质时没有一种具有减少细胞增生的作用，而通过L-苯丙氨酸(对比例22)、L-精氨酸(对比例23)、L-组氨酸(对比例24)和核黄素(对比例29)的作用，细胞的数目与未处理细胞的数目(对比例21)相比甚至稍有增加。也可以看出当使用同样量时相同的物质协同地增加了实施例21的组合物的作用。没有潜在的物质时，含有5种活性成份的实施例21组合物的作用在所有情况下均明显低于与其它化合物一起使用时的作用。
含有21种活性成份的实施例107-111组合物的作用与含有5种活性成份且具有的相同量的常用活性成份的实施例102-106组合物的作用也进行了比较。为了与以前的结果比较，也使用了Sp2/0-Ag14细胞，并且试验条件同前。结果如图2所示。纵轴表示用未处理细胞的量的百分数表示的细胞的量的变化，横轴表示用％表示的组合物量的变化(活性成份量的变化)。含有5种活性成份的实施例102组合物被看作为100％，因此，实施例103的80％组合物含有80％量的各成份，对于含有21种活性成份组合物，实施例107组合物被看作为100％。
表2本发明组合物和单一活性成份对Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞的作用
<p>表2(续)本发明组合物和单一活性成份对Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞的作用
为了排除所测的作用是渗透作用或营养素的非特异过载或氨基酸不平衡的结果的可能性，也制备了对比混合物。这些对比混合物含有在以前试验中被证实对PADS无效的物质。对比混合物的组合物如表1所示用实施例102-106和107-111的组合物和用对比混合物试验所得的结果如图2所示，其中有空心园符号的曲线表示对比混合物培养48小时后细胞数量的变化，有实心园符号的曲线表示对于含有5种活性成份的实施例102-106组合物时细胞数量的变化，而有空心三角符号的曲线表示对于含有21种活性成份的实施例107-111组合物时细胞数量的变化。在用实施例102和107的100％组合物进行的试验中，如图2所示，单个活性成份的使用量要使得对细胞数量基本没有影响(这可从表1和2所示的以前的试验结果看出)。从图2可以看出，当一起使用时这些成份具有显著的抗肿瘤作用。此事实再一次证明了活性成份的协同作用。从图2也可看出，对比混合物对细胞的数目不会产生任何大的作用。因此，基于这些试验可以排除所测的作用是渗透作用或营养素的非特异过载或氨基酸不平衡的结果。
为了弄清楚抗衡离子是否对组合物的作用有影响，用K+(实施例38-67)或Ca++(实施例68-97)离子代替Na+离子进行试验。使用不同抗衡离子时组合物的作用没有明显不同，事实上，结果完全一致。
研究作为时间函数的实施例107的100％组合物对Sp2/0-Ag14细胞的作用并与100％对比混合物和未处理的细胞比较。试验条件与以前的试验相同，只是在此情况下，细胞不仅在48小时后计数而且在6、12、24和36小时后也计数。这些动力学试验结果如图3所示。纵轴表示细胞数目/ml，横轴表示时间，单位为小时。有空心园符号的曲线表示未处理细胞的细胞数目的变化，有实心园符号的曲线表示用对比混合物时细胞数目的变化，有实心三角符号的曲线表示用含有21种活性成份的实施例107组合物时细胞数量的变化。所述变化为时间的函数。从图3可以看出，对比混合物对细胞数目没有任何显著的作用，因为细胞数量随时间指数地增加，曲线的形状与未处理细胞增生所示的曲线的形状一致。本发明的组合物对肿瘤有毒，并随着时间的推移使肿瘤细胞数目减少。因此本发明组合物不仅能抑制细胞增生而且具有细胞毒性作用。选择含有21种物质的上述组合物中的活性成份的量，以使当它们分别使用时对肿瘤细胞没有任何显著作用(当然，这对于其中活性剂的量为20％、40％等或更低的80％、60％等组合物来说更为正确)，因为将同样的组合物用于所有体外试验时其结果证实在所有情况下均是活性成份的协同作用。
上述结果证实了按照构成本发明基础的认识选择的物质的协同作用所产生的作用。另外这些结果也证实了这些认识是正确的，因为各种癌细胞以不同程度不同于正常细胞，对癌细胞最有效的本发明组合物彼此也不同。这意味着对于每种肿瘤应使用杀肿瘤细胞的协同作用作为标准选择最合适的组合物，然而为了预防或当肿瘤类型不能确定时或为治疗已用了许多时间时，优选使用含有21种活性成份的一般组合物，因此在下一个试验中将研究这些组合物作用的一般性和其功效怎样。
研究含有21种活性成份的实施例107-111组合物对K-562人红白血病细胞的作用并与上述对比混合物的作用比较。试验结果如图4所示。与图2相同，纵轴表示以未处理细胞量的百分数表示的细胞量的变化，横轴表示以％表示的组合物量的变化(活性成份量的变化)。有空心园符号的曲线表示对比混合物的作用，而有实心园符号的曲线表示含有21种活性成份的组合物的作用。从图4可以看出，本发明的组合物对K-562人红白血病细胞也具有显著的杀肿瘤细胞作用。
下面将研究含有21种活性成份的实施例107-111组合物对HeLa人上皮样癌子宫颈细胞和HEp-2人表皮样癌喉细胞的作用并与对比混合物的作用比较。为了证明以前的结果是一般性的并且与所用介质、悬浮方法、计数和测定方法的干扰作用无关必须进行该试验。通过评定细胞的内源性碱性磷酸酯酶活性来测量HeLa、HEp-2和Vero细胞的存活率。简言之，在培养后，通过洗涤除去未粘连(假定被损伤的)细胞。然后向各孔中加入溶解在150μl新鲜的10％二乙醇胺缓冲液(pH9.8)中的150μg碱性磷酸酯酶底物(磷酸4-硝基苯基酯，Sigma片剂，第111-112号)。将平板在30℃下培养直到未处理细胞的吸收度达到大约1的值。通过向各孔中加入50μl 3M NaOH使反应停止。借助Dynatech ELISA读数器在405nm处测量吸收度。从各次读数中减去本底(backround)值。结果如图5(用HeLa细胞时)和图6(用HEp-2细胞时)所示。与图2和4相同，在此两图中纵轴表示以未处理细胞的量的百分数表示的细胞的量的变化。在这些情况下细胞数目的变化是通过测量灭活来测定的。横轴表示以％表示的组合物量的变化(活性成份量的变化)。在图5和6中，有空心园符号的曲线表示对比混合物的作用，而有实心园符号的曲线表示含有21种活性成份的实施例107-111组合物的作用。从这些图可以看出，这些组合物对两种细胞系都有效。如果考虑到HEp-2被称为抗御环境作用的硬(hardy)细胞系”，则这些结果更有价值[(American Type Culture Collection Catalogue of CellLines and Hybridomas，5th ed.，pp.15-16(1985)]。
按照本发明的理论基础，本发明组合物仅选择性地对癌细胞产生作用。为了进一步证实此论述，也研究了含有21种活性成份的实施例107-111组合物和对比混合物对正常的细胞系Vero African绿猴(green monkey)肾细胞的作用。试验结果如图7所示。纵轴表示以未处理细胞的细胞量的百分数表示的细胞的量的变化，横轴表示以％表示的组合物量的变化(活性成份量的变化)。有空心园符号的曲线表示对比混合物的作用，而有实心园符号的曲线表示含有21种活性成份的实施例107-111组合物的作用。从图7可以看出本发明的组合物对正常的Vero细胞系不产生细胞毒性作用，因为实施例107的100％组合物对增生的作用当对时间作曲线时，类似于图3所示的对比混合物的作用。Vero属于快速增生细胞系[(American TypeCulture Collection Catalogue of Cell Lines andHybridomas，5th ed.，pp.45-46(1985)]，因此该试验证实与细胞生长抑制剂相反，本发明组合物对所有快速增生细胞无毒，但它选择性地仅对肿瘤细胞产生作用。基于上述结果，本发明组合物被认为是抗肿瘤药，而不是细胞毒性制剂。
为了证明本发明组合物的体内效果，亦进行药理学试验。在这些试验中，总是使用科学文献中所提供的方法和条件。用Sp2/0-Ag14细胞进行这些试验。为了试验，使用5-6周龄雌性BALB/c小鼠。用两组每组各包括10只小鼠进行试验。给小鼠腹膜内注射悬浮在200μl不完全的RPMI 1640介质中的5×104Sp2/0-Ag14细胞。注射当天作为试验0天。通过致瘤试验确定试验所必需的细胞数目。注射细胞后24小时(即为试验的第一天)开始处理动物并持续10天。在每次处理时用200μl PBS(磷酸盐缓冲盐水)腹膜内注射对比组，而处理组腹膜内注射同样体积的含有21种活性成份的实施例112组合物。
处理的最有效的方法是将组合物成份的浓度保持于相当高的水平的持续输注。由于实际操作上的困难，而使用大致持续的周期性的处理，即每天处理动物6次。试验结果如图8所示。横轴表示从试验开始经过的天数，纵轴表示存活率％的值，即在给定的那天存活的小鼠的数目。因此，10只小鼠意味着100％，8只小鼠意味着80％。白框表示处理过的小鼠的存活率，黑框表示未处理的小鼠的存活率。从图8可以看出，例如在第16天时没有一只未处理的小鼠存活，而所有处理过的小鼠均存活。在第16天时所有未处理的小鼠均死亡，而处理过的小鼠在第25天死亡。可以看出由于处理，寿命显著地增长了。对于处理组，半数(median)存活时间为21天，而对于未处理组为14天。由这些半数存活时间计算的T/C％值(150％)远高于作为有效标准的125％。按照文献所述，基于这些数值，本发明组合物可作为对给定细胞系具有有效抗肿瘤作用的制剂。
为了证明存活时间的增长是实施例112组合物对肿瘤细胞的毒性作用的结果而不是强促茁(roborating)作用的结果，进行另一试验。按同样的方式处理10-10只小鼠。处理10天后，从两组小鼠的腹腔中取出细胞然后计数。两组鼠的平均细胞数目(分别为5.55×105和5.95×107)之差很明显(P＜0.001)，由此证明了本发明组合物的体内效果。
为了进一步证明本发明组合物的效果并排除这些结果仅是局部作用(细胞位于腹腔中并通过腹膜内处理)的结果的可能性，用人固体肿瘤皮下(s.c.)注射的先天性免疫缺损(胸腺缺损)(裸体)的小鼠进行另一试验。为了试验，使用HeLa细胞和6-8周龄雌性BALB/c(nu/nu)小鼠，在鼠的下肢皮下注射5×106个细胞。当肿瘤的大小达到50mm3的平均体积时开始用实施例112组合物处理。处理的时间表、处理的时间和用于处理的溶液(实施例112)与以前的药理学试验相同。用数字测径器(callipers)(Mitutoyo，Inc.，Tokyo，Japan)每周两次测量肿瘤的大小[长(L)，宽(W)，高(H)]。计算肿瘤的体积(用公式LWH/2计算)以及相对肿瘤体积Vt/Vo[Eur.J.Cancer.Clin.Oncol.，21，1253-1260(1988)]，其中Vt是实际肿瘤体积，而Vo是开始处理时的肿瘤体积。结果总结于图9中，纵轴表示Vt/Vo值的平均值，横轴表示开始处理后的天数。有空心园符号的曲线表示开始处理对比小鼠后相对肿瘤体积的增加，而有实心园符号的曲线表示开始处理处理动物后相对肿瘤体积的增加值，从图9中可以看出处理能极大地减慢了肿瘤增长。例如对于对比小鼠，肿瘤体积在16.5天内增加至9倍数值，而对于处理小鼠，同样9倍的生长则需要33天。由处理组和对比组的Vt/Vo值计算T/C％。在所有情况下的T/C％值均低于42％(即可接受作为有效标准之值)[Europ.J.Cancer，17,129-142(1981)]。此试验再一次表明本发明组合物具有显著的抗肿瘤作用。考虑到由于技术问题，我们远非采用了最佳处理方法和最大的耐受剂量，而且同样的处理在临床条件下进行将更为有效(更长的处理时间、永久性作用，例如通过输注等)，这些结果特别有可能成功。
在处理过程中体重的变化是一种良好的通用的表示处理的毒性的特征的指标，因此在上述试验中测量了动物的体重。按照文献，当平均体重降低10-15％时，制剂被认为是有毒的[Eur.J.Cancer.Clin.Oncol.，21,1253-1260(1988)]。在本发明人的试验中，对于对比组，平均体重变化为-5.9±4.1％，而对于处理组为-6.6±3.9％。因此，在两组间没有明显的差别，这意味着本发明组合物没有毒副作用。
为了证明本发明组合物的预防有用性，按下述方法处理2-2组BALB/c小鼠(每组10只小鼠)使处理动物的食物按1∶1比例与实施例113-121组合物混合，并使动物任意进食。开始处理后5天向两组动物腹膜内预防注射1×104Sp2/0-Ag14细胞。继续处理100天。在注射细胞后100天杀死鼠时，进食过1-1的实施例113-121组合物与常规食物的混合物的小鼠没有显示出腹膜内的肿瘤增长迹象。而同时在注射了Sp2/0-Ag14细胞后在不同试验组中的对比动物的存活时间为21至26天。
根据剂量和处理方法的不同，本发明组合物可用于预防癌性疾病、抑制AIDS和器官移植中肿瘤的生长、阻止转移瘤的形成以及辅助、结合和直接治疗肿瘤患者。
本发明组合物的主要优点如下a)使用适当的剂量，本发明组合物可用于预防癌性疾病、抑制AIDS和移植中的肿瘤形成、阻止转移瘤形成以及直接、辅助或结合治疗和治愈癌性疾病。
b)本发明组合物无毒。基于测量动物体重降低的毒性试验证明了本发明组合物无毒。根据文献数据，所述组合物的单一成份的毒性非常低，当这些物质一起使用时，甚至这种低毒性进一步降低。另外，灵长目动物耐受这些物质胜于用于测定毒性值的小动物。考虑到所有这些事实，表明本发明组合物应被认为是无毒的。
c)本发明组合物没有或仅有可被忽略的副作用。由于几乎所有的成份(除2-脱氧-D-核糖之外)已用于某种治疗(仅有抗坏血酸用于抗癌治疗中)中或作为食品添加剂，故已收集了各成份副作用的大量观察数据。根据这些申请中收集的试验数据，很明显本发明组合物实际上没有副作用。
d)本发明组合物具有选择性。该选择性被我们自己的试验所证实，试验表明对各种癌细胞有毒的本发明组合物分别对正常的Vero细胞、试验动物或其正常的细胞无毒。由于正常细胞多于癌细胞并且癌细胞累积了组合物的成份，而对于正常细胞其摄取被控制，因此提高了选择性。
e)本发明组合物可广泛使用，它们的作用是一般性的。已经研究了本发明组合物对小鼠骨髓瘤(Sp2/0-Ag14)、人红白血病(K-562)、人上皮样癌子宫颈(HeLa)和人表皮样癌喉(HEp-2)细胞系的作用。这些细胞代表了广谱性，因为它们包括人和动物肿瘤，甚至于人肿瘤有白血病和两种极不相同的固体肿瘤为代表。用这些细胞系进行的试验所得的结果支持上述论述，即本发明组合物具有一般性作用，并可广泛使用。
f)本发明组合物在制备上无任何困难，组合物成份是低分子量的物质并且容易得到，所以本发明组合物容易制备。
g)本发明组合物可溶于水中，因此容易服用。
权利要求
1.用于预防和治疗癌性疾病的药物组合物，它包括至少三种存在于循环系统中的活性化合物至少一种氨基酸、至少一种维生素以及至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-甘露糖、D-葡糖胺、苹果酸、草乙酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物，其条件是如果组合物除含有氨基酸外仅含苹果酸和一种维生素，那么维生素不是抗坏血酸。
2.根据权利要求1的组合物，该组合物除含有活性化合物外还包括药学中常用的载体、稀释剂和/或其它助剂。
3.根据权利要求1的组合物，其中所述氨基酸为L-甲硫氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、N-苯甲酰甘氨酸和/或其盐。
4.根据权利要求1的组合物，其中所述维生素是d-生物素、吡哆素、核黄素、核黄素-5’-磷酸、L-抗坏血酸、硫辛酸、乳清酸和/或其盐。
5.根据权利要求1的组合物，它包括L-色氨酸、L-抗坏血酸和至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-葡糖胺和/或其可药用盐的化合物。
6.根据权利要求1的组合物，它包括L-精氨酸、核黄素-5’-磷酸和至少一种选自D-甘露糖、苹果酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物。
7.根据权利要求1的组合物，它包括0.002-70％(质量)的至少一种选自L-甲硫氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、N-苯甲酰甘氨酸和/或其盐的化合物作为氨基酸，0.0004-80％(质量)的至少一种选自d-生物素、吡哆素、核黄素、核黄素-5’-磷酸、L-抗坏血酸、硫辛酸乳清酸和/或其盐的化合物作为维生素以及0.003-80％(质量)的至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-甘露糖、D-葡糖胺、苹果酸、草乙酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物。
8.根据权利要求1的组合物，它包括0.9-25％(质量)的L-甲硫氨酸、0.8-19％(质量)的L-色氨酸、1.1-48％(质量)的L-精氨酸、0.9-46％(质量)的d-生物素、1.2-16％(质量)的吡哆素、0.03-42％(质量)的核黄素-5’-磷酸、0.05-18％(质量)的D-葡糖胺、0.5-60％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.7-68％(质量)的苹果酸、0.6-40％(质量)的D-甘露糖和/或其可药用盐。
9.根据权利要求1的组合物，它包括0.005-34％(质量)的L-甲硫氨酸、0.002-25％(质量)的L-色氨酸、0.02-23％(质量)的L-酪氨酸、0.04-30％(质量)的L-苯丙氨酸、0.04-50％(质量)的L-精氨酸、0.03-34％(质量)的L-组氨酸、0.05-22％(质量)的N-苯甲酰甘氨酸、0.01-60％(质量)的d-生物素、0.01-20％(质量)的吡哆素、0.0004-45％(质量)的核黄素、0.0005-45％(质量)的核黄素-5’-磷酸、0.003-70％(质量)的L-抗坏血酸、0.004-15％(质量)的硫辛酸、0.01-17％(质量)的乳清酸、0.001-10％(质量)的腺嘌呤、0.01-63％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.08-42％(质量)的D-甘露糖、0.05-20％(质量)的D-葡糖胺、0.01-80％(质量)的苹果酸、0.02-60％(质量)的草乙酸、0.001-10％(质量)的三磷酸腺苷和/或其可药用盐。
10.一种预防和治疗癌性疾病的方法，它包括给待治疗的患者施用治疗有效量的权利要求1的组合物。
11.根据权利要求1的组合物，它包括30-44％(质量)的L-精氨酸、27-35％(质量)的核黄素-5’-磷酸、38-62％(质量)的苹果酸和/或其可药用盐。
12.制备权利要求1组合物的方法，该方法包括使存在于循环系统中的活性化合物中的至少一种氨基酸、至少一种维生素以及至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-甘露糖、D-葡糖胺、苹果酸、草乙酸、三磷酸腺苷的化合物，以及，如果需要的话还有药学上常用的载体、稀释剂和/或其他助剂进行混合制成药物组合物。
13.根据权利要求12的方法，它包括将L-色氨酸、L-抗坏血酸、至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-葡糖胺和/或其可药用盐的化合物混合制成药物组合物。
14.根据权利要求12的方法，它包括将L-精氨酸、核黄素-5’-磷酸、至少一种选自D-甘露糖、苹果酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物混合制成药物组合物。
15.根据权利要求12的方法，该方法包括将30-44％(质量)的L-精氨酸、27-35％(质量)的核黄素-5’-磷酸、38-62％(质量)的苹果酸和/或其可药用盐混合制成药物组合物。
16.根据权利要求12的方法，该方法包括将0.002-70％(质量)的至少一种选自L-甲硫氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、N-苯甲酰甘氨酸和/或其盐的化合物作为氨基酸，0.0004-80％(质量)的至少一种选自d-生物素、吡哆素、核黄素、核黄素-5’-磷酸、L-抗坏血酸、硫辛酸、乳清酸和/或其盐的化合物作为维生素和0.003-80％(质量)的至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-甘露糖、D-葡糖胺、苹果酸、草乙酸、三磷酸腺苷和/或其可药用盐的化合物混合制成药物组合物。
17.根据权利要求12的方法，该方法包括将0.9-25％质量)的L-甲硫氨酸、0.8-19％(质量)的L-色氨酸、1.1-48％(质量)的L-精氨酸、0.9-46％(质量)的d-生物素、1.2-16％(质量)的吡哆素、0.03-42％(质量)的核黄素-5’-磷酸、0.05-18％(质量)的D-葡糖胺、0.5-60％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.7-68％(质量)的苹果酸、0.6-40％(质量)的D-甘露糖和/或其可药用盐混合制成药物组合物。
18.根据权利要求12的方法，该方法包括将0.005-34％(质量)的L-甲硫氨酸、0.002-25％(质量)的L-色氨酸、0.02-23％(质量)的L-酪氨酸、0.04-30％(质量)的L-苯丙氨酸、0.04-50％(质量)的L-精氨酸、0.03-34％(质量)的L-组氨酸、0.05-22％(质量)的N-苯甲酰甘氨酸、0.01-60％(质量)的d-生物素、0.01-20％(质量)的吡哆素、0.0004-45％(质量)的核黄素、0.0005-45％(质量)的核黄素-5’-磷酸、0.003-70％(质量)的L-抗坏血酸、0.004-15％(质量)的硫辛酸、0.01-17％(质量)的乳清酸、0.001-10％(质量)的腺嘌呤、0.01-63％(质量)的2-脱氧-D-核糖、0.08-42％(质量)的D-甘露糖、0.05-20％(质量)的D-葡糖胺、0.01-80％(质量)的苹果酸、0.02-60％(质量)的草乙酸、0.001-10％(质量)的三磷酸腺苷和/或其可药用盐混合制成药物组合物。
19.用作药物的权利要求1的组合物。
20.用于治疗癌症的权利要求19的组合物。
21.用作药物的权利要求1的组合物和药物载体和/或助剂。
22.用作抗肿瘤药剂的权利要求21的组合物。
23.用作治疗癌症的佐药的权利要求1的组合物。
24.以片剂、糖锭剂、栓剂、胶囊剂或输注液形式用于治疗癌症的权利要求1的组合物。
25.根据权利要求23的组合物，该组合物包括治疗活性量的权利要求1的产物。
26.根据权利要求25的组合物，该组合物包括0.2-420g权利要求1的产物。
27.权利要求1的组合物用于制备治疗癌症的药物的用途。
28.权利要求1的组合物用于制备以片剂或胶囊剂形式口服给药治疗癌症的药物的用途。
29.权利要求1的组合物用于制备以输注液形式肠胃外给药治疗癌症的药物的用途。
30.权利要求1的组合物用于制备以片剂或胶囊剂形式口服给药预防癌症的药物的用途。
全文摘要
本发明涉及预防和治疗癌性疾病的药物组合物及其制备方法。这些组合物包括至少三种存在于循环系统中的化合物至少一种氨基酸、至少一种维生素以及至少一种选自腺嘌呤、2-脱氧-D-核糖、D-甘露糖、D-葡糖胺、苹果酸、草乙酸、三磷酸腺苷的化合物。本发明组合物可无毒作用地用于预防癌性疾病、抑制AIDS和移植时肿瘤的形成，阻止转移瘤的形成以及直接、辅助或结合治疗和治愈癌性疾病。
文档编号A61K31/385GK1116406SQ9419090
公开日1996年2月7日 申请日期1994年11月8日 优先权日1993年11月9日
发明者G·库尔卡萨 申请人:伊梅穆尔有限协会