蛇床子素作为α36雌激素受体激活剂的用途的制作方法

本发明涉及蛇床子素的新用途。

背景技术：

雌激素受体在体内多种细胞中表达，分布在子宫、阴道、乳房、盆腔(韧带与结蹄组织)以及皮肤、膀胱、尿道、骨骼和大脑等组织中。因此雌激素降低会导致雌激素受体不能正常激活，发挥生物学效应，从而引起一系列疾病，包括骨质疏松症、卵巢早衰、更年期综合症、月经不调、不孕症、椎间盘退变性疾病、骨关节炎症性与免疫性疾病、心血管疾病、老年性痴呆、肿瘤骨转移等，临床上有雌激素替代疗法，但副作用显著。因此需要开发能与雌激素受体结合，发挥生物学效应，且结合力温和的药物或保健食品。

技术实现要素：

针对现有技术的上述不足，根据本发明的实施例，希望提供一种对雌激素受体具有竞争性激活作用的α36雌激素受体激活剂，并提供其医药用途。

根据实施例，本发明技术方案的提出是基于蛇床子素作为α36雌激素受体激活剂，对雌激素受体具有竞争性激活作用。

根据一个实施例，本发明技术方案的提出是基于发现蛇床子素在患处体液中的有效作用浓度为0.01-10μM。

根据一个实施例，本发明技术方案中，所述蛇床子素与药物学上可接受的药物辅料混合形成各种形式的散剂、膏剂、粉剂、针剂、水剂、注射剂或纳米材料等。

根据实施例，本发明通过蛇床子素作为α36雌激素受体激活剂，以蛇床子素为主要有效成分制备的各种形式的药物或保健食品，可以用于预防和治疗上述雌激素减少性疾病，包括骨质疏松症、卵巢早衰、更年期综合症、月经不调、不孕症、椎间盘退变性疾病、骨关节炎症性与免疫性疾病、心血管疾病、老年性痴呆、肿瘤骨转移等。在使用时可以采取皮下、静脉注射或肛肠给药；注射液的使用可以任意选用生理盐水、葡萄糖、稳定剂、防腐剂、悬浮剂或乳化剂等。

相对于现有技术，蛇床子素是从中药蛇床子中提取的有效组分，是一种新型的α36雌激素受体激活剂，它可以竞争性与雌激素受体亚型α36结合，从而发挥生物学效应，并且作用温和，可以避免雌激素治疗带来的诸多副作用。因此，以蛇床子素为主要有效成分制备的各种形式的药物或保健食品，可以用于预防和治疗上述雌激素减少性疾病。

附图说明

图1为蛇床子素的结构简式。

图2为不同浓度的蛇床子素对细胞进行干预，细胞裂解后，α36雌激素受体被同位素标记配体结合率变化柱状图。

图3为α36雌激素受体的表达细胞种类示意图。

图4为蛇床子素通过激活α36雌激素受体，抑制破骨细胞形成的柱状图。

图5为蛇床子素通过激活α36雌激素受体，抑制破骨细胞骨吸收功能的柱状图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修改同样落入本发明权利要求所限定的范围。

本发明以下实施例中，蛇床子素采用市售品或按照中药领域常用提取方法从温肾阳中药蛇床子中提取。M为摩尔浓度，即mol/L；μM为微摩尔每升。

本发明以下实施例中，未特别标示的实验方法，譬如同位素标记配体受体结合实验、Western Blot、破骨细胞分化系统、骨吸收实验，均采用本领域通用的实验方法。

实施例1

蛇床子素是一种新型的α36雌激素受体激活剂，对雌激素受体具有竞争性激活作用：蛇床子素(图1)是从温肾阳中药蛇床子中提取的天然产物。研究中，首先使用人子宫内膜癌细胞系(Ishikawa细胞株)，敲除雌激素受体β后，该细胞仅表达α36雌激素受体。用不同浓度的蛇床子素对细胞进行干预，细胞裂解后，通过对同位素标记配体与受体的结合进行检测。发现蛇床子素可以剂量依赖性的竞争性结合α36雌激素受体，表现为同位素标记的配体与α36雌激素受体结合率随着蛇床子素浓度增大而逐渐降低，1-10μM时接近于100％抑制率。即0.01μM蛇床子素干预细胞时，有接近70％的α36雌激素受体仍被同位素标记配体结合，0.1μM蛇床子素干预细胞时，仅有不到20％的α36雌激素受体仍被同位素标记配体结合，而在1μM蛇床子素干预细胞时,极低量的α36雌激素受体被同位素标记配体结合，10μM蛇床子素干预细胞时，基本上没有α36雌激素受体仍被同位素标记配体结合，即1-10μM的蛇床子素可以完全竞争性地结合α36雌激素受体(图2)。根据结果，蛇床子素100％抑制率的浓度范围在0.01-10μM，作用效果较为温和。

实施例2

首先通过Western Blot证明，破骨细胞中主要高表达α36雌激素受体(图3)。在体外采用了破骨细胞分化系统，验证了蛇床子素竞争性结合α36雌激素受体后的生物学效应。即分离和培养原代单核-巨噬细胞，通过RANKL+MCSF诱导破骨细胞形成，并给予梯度蛇床子素体外培养，发现大 蛇床子素对破骨细胞的抑制作用随着浓度增大而增强，0.01μM蛇床子素对破骨细胞形成具有轻微的抑制作用，至0.5μM蛇床子素时，可以抑制50％破骨细胞形成，5-10μM蛇床子素可以完全抑制破骨细胞的形成。因此证明蛇床子素与结合α36雌激素受体竞争性结合后，的确可以发挥生物学效应，抑制破骨细胞形成(图4)。骨吸收实验也证明，10μM蛇床子素可以完全抑制破骨细胞的骨吸收能力(图5)，从而可以用于雌激素降低性骨质疏松症的预防和治疗。通过该实验，在骨组织细胞中证明，蛇床子素竞争性结合α36雌激素受体后的确可以引起生物学效应。

因此，蛇床子素可以通过激活α36雌激素受体，预防和治疗雌激素降低引起的骨质疏松症、卵巢早衰、更年期综合症、月经不调、不孕症、椎间盘退变性疾病、骨关节炎症性与免疫性疾病、心血管疾病、老年性痴呆、肿瘤骨转移。可以用于制成防治上述疾病的药物或保健食品中。