本发明主要涉及制药
技术领域：
，具体涉及一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂及其制备方法。
背景技术：
：左旋奥拉西坦化学名称为：s-(-)-4-羟基-2-氧代吡咯烷-n-乙酰胺，为白色微晶状粉末，熔点135～136℃，旋光度-36°(c＝1.00inwater)，左旋奥拉西坦的溶解性明显优于消旋体。化学结构式如下所示：该药于1987年在意大利上市，上市的剂型为片剂，800mg；胶囊，800mg；注射液，1g/5ml。目前国内只有奥拉西坦胶囊和注射液上市，且所用主要活性成分均为外消旋体。叶雷等在公开号为cn103735545a专利中提到左旋奥拉西坦对酒精中毒所致昏迷的促醒作用明显，而右旋奥拉西坦基本没有作用，左旋奥拉西坦的上述促醒效果为消旋奥拉西坦的2倍；左旋奥拉西坦对外伤、麻醉所致昏迷的促醒作用均显著。张峰等在公开号为cn103599101a的专利中披露左旋奥拉西坦对液压及自由落体所致创伤性脑损伤大鼠学习记忆认知功能障碍均有明显的改善作用，其药效远高于右旋奥拉西坦。且200mg/kg左旋奥拉西坦与400mg/kg奥拉西坦的作用相当。药代动力学研究结果显示：左旋奥拉西坦和右旋奥拉西坦在比格犬体内无明显手性转化。比格犬单次静脉注射给予左旋和2倍剂量的消旋奥拉西坦后血浆中左旋奥拉西坦的主要药动学参数均无明显差异。安全药理、急毒、长毒等试验结果表明，在同等剂量水平下，左旋奥拉西坦与奥拉西坦对受试动物或细胞的毒性无明显差异。上述临床前的研究结果表明，左旋奥拉西坦是奥拉西坦体内发挥药效的主要活性成分，单独使用本品可降低临床使用剂量，降低潜在的毒副反应。现有注射用(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末其主要存在制备过程杂质增加明显、产品无固定形状、不易形成骨架、易出现干缩和鼓泡现象，成品稳定性差，货架期短，均一性不好，上下层性状不一致，并且产品注射过程疼痛明显，患者顺应性差等问题。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种具有固定形态、稳定性好、产品均一性好的(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂。本发明的另一目的在于提供上述(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂的制备方法。本发明的目的是通过如下技术措施实现的：一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂，其特征在于，它是以(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺为原料，再加入一定量的附加剂制得；其中所述附加剂为蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麦芽糖、葡聚糖、白蛋白、聚乙二醇、甘油、l-丝氨酸、维生素c、硫代硫酸钠，甲硫氨酸、谷氨酸钠、丙氨酸、甘氨酸、肌氨酸、磷酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、苯甲醇中的一种或多种。发明人在研究过程中发现，选择特定的附加剂种类，配合附加剂特定用量配比、再配合特定的冷冻干燥技术，可使得上述(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂在制备过程杂质增加较小、其具有固定形状、易形成骨架、产品均一性好、上下层性状一致，并且产品注射过程疼痛感有所减轻，；上述(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂，其特征在于，它是以(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺、l-丝氨酸、甘露醇、聚乙二醇2000、甲硫氨酸、苯甲醇为原辅料，通过浓配、稀配、冷冻干燥以及轧盖步骤制得；其中原辅料用量分别为重量百分比的(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺58％～65％、l-丝氨酸15％～23％、甘露醇10％～16％、聚乙二醇20002％～8％、甲硫氨酸3％～8％、苯甲醇1％～2％；所述冷冻干燥步骤为快速将导热油温度冷冻至-40℃，保持恒温60分钟，以5℃/小时升温至-10℃，保持恒温80分钟，在快速冷却至-40℃，恒温冷冻120分钟，然后抽真空干燥，以10℃/小时升温至，-10℃恒温150分钟；以4℃/小时升温至0℃，0℃恒温300分钟；以5℃/小时升温至10℃，10℃恒温240分钟，以10℃/小时升温至30℃，30℃恒温60分钟，同时前箱真空降达到10pa/10分时，冻干结束。进一步的上述(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂，其特征在于，它是由下列重量百分比的原辅料制得：(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺60％～63％、l-丝氨酸17％～20％、甘露醇11％～13％、聚乙二醇20003％～5％、甲硫氨酸4％～7％、苯甲醇1％～2％；将处方量的原辅料置于容器中，加入(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺5倍重量份的灭菌注射用水搅拌，溶解后，加入质量分数0.5％的针用活性炭，搅拌30min，随后用0.45微米微孔滤膜滤过，收集滤液，备用；向滤液中加入灭菌注射用水至滤液体积的1000倍，用盐酸或氢氧化钠调节ph至7.0，随后用0.22微米的微孔滤膜除菌过滤，取滤液合格后灌装分装于无菌玻璃瓶中，备用；快速将导热油温度冷冻至-40℃，保持恒温60分钟，以5℃/小时升温至-10℃，保持恒温80分钟，在快速冷却至-40℃，恒温冷冻120分钟，然后抽真空干燥，以10℃/小时升温至，-10℃恒温150分钟；以4℃/小时升温至0℃，0℃恒温300分钟；以5℃/小时升温至10℃，10℃恒温240分钟，以10℃/小时升温至30℃，30℃恒温60分钟，同时前箱真空降达到10pa/10分时，冻干结束。上述所需原辅料，均为本领域技术人员公知的，市场上均可购买到。一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺冻干粉针的制备方法，其特征在于，它是按如下步骤制得的：1.浓配：将处方量的原辅料置于容器中，加入(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺5倍重量份的灭菌注射用水搅拌，溶解后，加入质量分数0.5％的针用活性炭，搅拌30min，随后用0.45微米微孔滤膜滤过，收集滤液，备用；2.稀配：向滤液中加入灭菌注射用水至滤液体积的1000倍，用盐酸或氢氧化钠调节ph至7.0，随后用0.22微米的微孔滤膜除菌过滤，取滤液合格后灌装分装于无菌玻璃瓶中，备用；3.冷冻干燥：快速将导热油温度冷冻至-40℃，保持恒温60分钟，以5℃/小时升温至-10℃，保持恒温80分钟，在快速冷却至-40℃，恒温冷冻120分钟，然后抽真空干燥，以10℃/小时升温至，-10℃恒温150分钟；以4℃/小时升温至0℃，0℃恒温300分钟；以5℃/小时升温至10℃，10℃恒温240分钟，以10℃/小时升温至30℃，30℃恒温60分钟，同时前箱真空降达到10pa/10分时，冻干结束；4.轧盖：铝塑组合盖需经清洗后灭菌、干燥，然后进行轧盖，即得。本发明具有如下的有益效果：本发明(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂在制备过程中杂质增加较少，其整个制备过程杂质增加量仅为0.04％，产品具有固定形状、在冻干制备过程中无干缩和鼓泡的现象，成品均一性好，上下层性状一致，稳定性好，杂质少，货架期内总杂质低于0.28％，货架期长达24月，患者注射过程中疼痛感较轻，患者顺应性好。具体实施方式下面通过实施例对本发明进行具体的描述，有必要在此指出的是以下实施例只用于对本发明进行进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。实施例1一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂，按以下步骤制得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺60％l-丝氨酸18％甘露醇11％聚乙二醇20005％甲硫氨酸5％苯甲醇1％制成1000瓶制剂工艺：1.浓配：将处方量的原辅料置于容器中，加入(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺5倍重量份的灭菌注射用水搅拌，溶解后，加入质量分数0.5％的针用活性炭，搅拌30min，随后用0.45微米微孔滤膜滤过，收集滤液，备用；2.稀配：向滤液中加入灭菌注射用水至滤液体积的1000倍，用盐酸或氢氧化钠调节ph至7.0，随后用0.22微米的微孔滤膜除菌过滤，取滤液合格后灌装分装于无菌玻璃瓶中，备用；3.冷冻干燥：快速将导热油温度冷冻至-40℃，保持恒温60分钟，以5℃/小时升温至-10℃，保持恒温80分钟，在快速冷却至-40℃，恒温冷冻120分钟，然后抽真空干燥，以10℃/小时升温至，-10℃恒温150分钟；以4℃/小时升温至0℃，0℃恒温300分钟；以5℃/小时升温至10℃，10℃恒温240分钟，以10℃/小时升温至30℃，30℃恒温60分钟，同时前箱真空降达到10pa/10分时，冻干结束；4.轧盖：铝塑组合盖需经清洗后灭菌、干燥，然后进行轧盖，即得。为了更好的理解本发明，以下通过本发明稳定性试验来进一步阐述发明药物的有益效果，而非对本发明的限制。实验一：本发明一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂稳定性实验实验材料：(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂样品：为实施例1制得加速实验方法：将实施例1制得的(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂按上市包装，置加速实验箱中，一定时间取样，对考察项目进行检验。加速实验温度：40±2℃湿度：rh75％±5％考察时间：0、1、2、3、6月考察指标：性状、可见异物、ph、有关物质、含量、无菌检查加速试验稳定性记录：加速实验结果表明：加速6月样品与0月样品各项检测指标质量相当，表明本品加速实验6月，质量保持稳定，本品稳定性较好。长期实验方法：将实施例1制得的(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂按上市包装，置长期留样箱中，一定时间取样，对考察项目进行检验。加速实验温度：25±2℃湿度：rh60％±10％考察时间：0、3、6、9、12、18、24月考察指标：性状、可见异物、ph、有关物质、含量、无菌检查长期试验稳定性记录：长期试验表明：本品长期试验24个月性状、可见异物、ph值、有关物质、含量以及无菌检查各项指标均无显著变化，均符合生产用质量标准草案的各项相关规定。本品长期试验24个月质量稳定，故本品货架期最少24个月，长期试验仍在继续考察过程中。实验二：本发明一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂制备过程对杂质增加的影响1.实验材料：(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂样品：按实施例1制备。(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂对照样品：为缺少甲硫氨酸的样品，其制备工艺同实施例1。2.实验方法：实施例1制备过程中，分别在制备前后取样，检测其有关物质，考察制备过程对有关物质的影响。同时，取缺少甲硫氨酸的处方作为对照处方，按实施例1的制备方法制备，同样在制备前后取样检测其有关物质，考察制备过程对有关物质的影响。3.实验结果见下表：供试品制各前有关物质％制备后有关物质％制备过程有关物质增加量％实施例10.15％0.19％0.04％对照样品10.15％0.35％0.20％4.实验结论：实施例1的处方，制备过程有关物质增加仅为0.03％，明显优于对照样品。实验三：小鼠扭体法观察注射过程中的疼痛感试验试验样品：按实施例1制得的一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂作为供试品，未加苯甲醇的处方按实施例1制得的(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂作为对照样品；目的：比较两种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂注射过程中的疼痛程度方法：取实验用小白鼠，皮下注射(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末(生理盐水溶解稀释至10ml)，观察小白鼠是否会发生扭体反应，根据小鼠发生扭体反应的几率来判断注射过程中疼痛感的强弱，供试品与对照样品各重复30次试验；试验结果：试验结果见下表：产品名称实验样本(小鼠)发生扭体反应个体数扭体反应发生率％供试品30只2只6.7％对照样品30只23只76.7％结论：由上表可知，本发明一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂注射过程中疼痛感明显弱于对照样品。实施例2一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂，按以下步骤制得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺63％l-丝氨酸17％甘露醇11％聚乙二醇20003％甲硫氨酸5％苯甲醇1％制成1000瓶制剂工艺：照实施例1的制备工艺制得。按实施例1的试验方法，实施例2样品稳定性试验结果表明加速6月样品质量稳定，长期24个月质量稳定，故本品有效期最少24个月。实施例2制备过程对杂质增加的影响实验结果表明本品在制备过程中产品杂质增加量较小，满足产品要求。小鼠扭体法观察注射过程中的疼痛感试验结果表明，实施例2样品注射过程中疼痛感明显弱于对照样品。实施例3一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂，按以下步骤制得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺61％l-丝氨酸19％甘露醇12％聚乙二醇20003％甲硫氨酸3％苯甲醇2％制成1000瓶制剂工艺：照实施例1的制备工艺制得。按实施例1的试验方法，实施例3样品稳定性试验结果表明加速6月样品质量稳定，长期24个月质量稳定，故本品有效期最少24个月。实施例3制备过程对杂质增加的影响实验结果表明本品在制备过程中产品杂质增加量较小，满足产品要求。小鼠扭体法观察注射过程中的疼痛感试验结果表明，实施例3样品注射过程中疼痛感明显弱于对照样品。实施例4-6：一种(s)-4-羟基-2氧代-1-吡咯烷乙酰胺无菌粉末注射剂，按以下重量的原辅料制备而得，制备方法同实施例1：制剂工艺：照实施例1的制备工艺制得。按实施例1的试验方法，实施例4、5、6样品稳定性试验结果表明加速6月样品质量稳定，长期24个月质量稳定，故本品有效期最少24个月。实施例4、5、6制备过程对杂质增加的影响实验结果表明本品在制备过程中产品杂质增加量均较小，满足产品要求。小鼠扭体法观察注射过程中的疼痛感试验结果表明，实施例4、5、6样品注射过程中疼痛感明显弱于对照样品。当前第1页12