本发明涉及医药卫生和化学领域的药物化合物，具体涉及7-O-β-D-糖基-香豆素类化合物及其可药用盐、酯及其溶剂化物用于治疗焦虑症的用途。
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：：焦虑症(Anxietyneurosis)是情感性精神障碍(Mooddisorders)的主要类型，是一种以广泛和持续的焦虑感和反复发作的惊恐不安为主要特征的综合征，临床表现为多虑、急切、烦躁、过分的紧张不安，常伴有植物性神经功能紊乱和睡眠紊乱等症状。目前已经有确切的证据表明，下丘脑、边缘叶在焦虑症中发挥重要作用；焦虑症患者存在神经递质和神经内分泌功能的紊乱，这种改变与中枢神经去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)功能障碍相关。参考文献见袁勇贵,吴爱勤,张心保.焦虑和抑郁合病的生物学研究进展[J].国外医学精神病学分册.2000,27(3):143-148.、王筱兰,袁勇贵,张心保.焦虑症患者的血浆单胺类神经递质及相关因素研究[J].中国民康医学.2006,18(9):742-748。目前抗焦虑药已由原有的苯二氮(BDZ)类和丁螺环酮类药物发展到各类作用于广泛靶点的治疗药物。目前针对性的临床药物主要用三环苯二氮类抗焦虑药(BZDs；常见安定类、阿普唑仑)、巴比妥类镇静催眠药、芳香族哌嗪类(常见丁螺环酮Buspirone坦度螺酮(希德))抗焦虑药等。参考文献见李乐华,陈晋东,赵靖平等.氯氟乙酯和地西泮治疗焦虑障碍的对比研究[J].中国临床康复.2004,8(27):5756。但由于这些药物使用过程中会影响患者的运动和认知功能，具有一定的成瘾性等缺陷，对患者产生了较大的身体负担。而其他抗焦虑药如二苯甲烷衍生物(安他乐，Hydroxyzine)哌嗪羧化物、噻嗪和噻唑衍生物、氨基甲酸酯类丙二醇、选择性5-羟色胺重摄取抑制剂(SSRI)等等，目前效果仍不理想。参考文献见刘靖,查道建编译,王林校.抗癫痫药在治疗焦虑障碍中的应用[J].国外医学药学分册.2005,32(3):165-166。而临床运用中医药单味(天麻/茯苓/酸枣仁/柴胡/白芍/当归/远志等)和复方(常见六味地黄丸/逍遥散/归脾丸/安神定志丸/疏肝散等)治疗焦虑症也取得了一定的进展，参考文献见祝家胜,段武钢,孙全新.中西医结合治疗广泛性焦虑症的对照研究[J].中华实用中西医杂志.2004,4(17):2930.也有中药有效成分(人参皂甙、延胡索乙素、琥珀酸、厚朴酚、沉香呋喃)有效对抗焦虑症的报道。目前，对类似物天麻素和豆腐果苷的中枢药理活性研究主要集中在镇静、抗抑郁和镇痛方面，但对于其抗焦虑作用的研究仍少见报道。总的说来，目前临床应用的药物，在药效、副反应、成瘾性等方面仍不尽如人意，需要进行更深入的研究和广泛的筛选。虽然在临床上，焦虑和抑郁症常伴随发生，某些治疗抑郁的5-羟色胺重摄取抑制剂也被尝试用于抗焦虑，如SSIRS、MAOS、TCAS等均具有一定程度的抗焦虑效果，相应的，某些抗焦虑剂也有抗抑郁作用。但焦虑和抑郁仍属于不同病症，其作用机理、作用靶点、临床表现、应用药物和动物模型均有显著不同。参考文献见王建平,傅宏译.焦虑障碍与治疗(第二版)[M].北京：中国人民大学出版社.2012.。技术实现要素：本发明提出一种7-O-β-D-糖基-香豆素在治疗焦虑症的药物中的用途，所涉及的化合物是以小分子酚型糖苷天麻素和豆腐果苷为母体衍生而得的结构类似物。所说的7-O-β-D-糖基-香豆素包括其可药用盐、酯或溶剂化物，它们在制备用于治疗焦虑的药物中的用途。其中，糖基部分为任意吡喃糖或者呋喃糖，代表化合物为7-O-β-D-木糖-香豆素，自编号为XH006，化学结构式如下：该化合物为乳白色粉末，无特殊气味；乙醇和二甲亚砜中完全溶解，甲醇和水中部分溶解，乙醚中不溶。天麻素(gastrodin，对羟基苯-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)和豆腐果苷(heliceid，对甲醛基苯-O-β-D-阿洛吡喃糖苷)结构相似，都为β型吡喃糖苷，区别仅在于糖基部分和官能团的不同。天麻素和豆腐果苷化学结构见下图：关于天麻素的神经药理活性研究表明，研究结果表明，天麻具有保护心脑血管、保护神经细胞、镇静、抗癫痫、抗惊厥、镇痛等作用；2007年，JungJW等报道了天麻根茎水提取物中所含的酚性化合物在小鼠高架十字迷宫模型中体现的抗焦虑活性，其抗焦虑成分主要是天麻素的苷元部分--4-羟基苄醇和4-羟基苯甲醛，并确定这些有效成分是通过5-HT1A和GABAA发挥作用，参考文献见李树蕾译.天麻及其酚类化合物对小鼠的抗焦虑作用[J].BiolPharmBull.2006,29(2):261～265.国外医药·植物药分册.2007,22(1):35。本发明以天麻素和豆腐果苷作为母体化合物，对其化学结构进行修饰，并对该类类似物的神经药理活性进行筛选，得到了抗焦虑活性更强、同时副作用更小的结构类似物XH006。本发明提供了经过结构优化的小分子酚型糖苷化合物7-O-β-D-糖基-香豆素用于制备治疗焦虑症疾病的药物的用途。本发明所属化合物用于治疗焦虑症，代表化合物7-O-β-D-木糖基-香豆素(XH006)在焦虑症三个行为模型、一个药理模型上，KM种小鼠单次灌胃给药均能体现出切实的抗焦虑效果，其抗焦虑效果高于等量豆腐果苷。在两个行为模型上的测定也表明，该有效剂量点没有体现出干扰受试动物自发活动和肌力的不良反应。综上所述，XH006可能成为有效的抗焦虑前药。本发明的化合物按照本领域常规技术制备成用于治疗焦虑症的各种口服剂型，有效剂量为45-100毫克/千克。目前，没有查到该化合物应用于抗焦虑治疗研究的报导。本发明的研究过程受省科技厅基金《2013FZ102--天麻素与豆腐果苷类似物的中枢神经药理活性研究》及国家自然科学基金《21362018--高等真菌活性成分Pulverolide及其类似物的合成和构效关系研究》支持。附图说明图1是本发明中小鼠明暗穿箱实验能体现抗焦虑活性的实验结果曲线。图2是本发明中小鼠爬梯实验能体现抗焦虑活性的实验结果曲线。图3是本发明中小鼠倾板实验能体现抗焦虑活性的实验结果曲线。具体实施方式具体药理实验如下：1.受试药物名称：7-O-β-D-木糖基-香豆素(XH006)受试化合物由本研究自行合成提供，于受试前以混悬剂研磨混悬。2.模型及对照药物地西泮(Diazapam,DA)：C16H13ClN2O，分子量：284.74。白色片剂，2.5mg/片。上海医药(集团)有限公司信谊制药总厂，批号：H31021151；豆腐果苷(Helicid,HEL)，云南玉溪万方天然药物有限公司产品，批号：040701助溶物：tween-80，分子式C64H124O6，分子量：1308，黄色特殊气味粘稠液体。化学纯，洛阳市化学试剂厂，批号：020404；混悬剂：TWEEN-80的纯净水溶液，浓度：1％；实验器具清洁剂：分析纯醋酸的1‰水溶液，临用现配；3.实验动物KM(昆明)种小鼠，普通级，♂，6-7周龄。体重18～22g，由昆明医学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK(滇)2012-2014。小鼠分笼饲养，每笼10只，除实验造模特殊要求外均自由饮水、进食，饲养室温22±2℃，相对湿度45±10％，保持12h/12h昼夜节律。每次实验前均适应实验环境7天；实验前禁食不禁水18h后随机分为空白对照组、阳性对照组和待测组，每组至少10只动物。开始观察前1h，各组分别灌胃相应浓度的受试药或混悬剂；阳性对照药DA为同时单次腹腔注射给药，母体对照药物豆腐果苷和待测糖苷均为灌胃给药，给药浓度为1.5mg/kg。给药体积均为20mL/kgBW。4.数据统计处理采用SPSS22.0统计软件包作为统计工具，全部数据采用单因素方差分析(One-wayANOVA)，其中方差齐性者采用Dunnett法，方差不齐者采用Dannett’sT3法检验组间差异的显著性。数据结果以平均值±标准差表示，以P<0.05为有显著意义，记为*，P<0.01为有极显著性差异，记为**。5.药物评价模型共采用五个动物模型对化合物XH006的抗焦虑活性和可能出现的副作用进行测试，实验在早8点半至中午2点间进行，每只动物只用一次。具体操作方式见下：(1)化合物抗焦虑活性测试采用三个行为模型(小鼠爬梯实验、小鼠明暗穿箱实验和开野实验)和一个药理学模型(期待性焦虑实验)对化合物XH006的抗焦虑效果进行验证。A.期待性焦虑模型(Testofanticipatoryanxiety,TAA)参考文献见徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,第二版.2002:817。将每组前3只小鼠(随机抽取)取出，用数字体温计探头插入肛门2厘米，测定直肠温度作为基础体温T0。每只小鼠测量3次，以平均值计数。而后每隔2分钟将每组平行号码小鼠顺次取出放入另一框内。至原笼内剩余3只小鼠为止。按照顺序逐一取出后三只小鼠，测定肛温作为应激体温值，每只小鼠测量3次，取平均值记为Tt。(每只小鼠只使用一次。)研究表明，BDZ类、丁螺环酮类抗焦虑药物、乙醇可抑制SIH；各种抗抑郁药物、抗精神病药物，β-肾上腺素受体阻断剂、中枢兴奋剂和阿片受体拮抗剂均无效。利血平虽然也能降低体温但同时表现镇静等行为症状。B.小鼠明暗穿箱实验(Light-darktransitiontest，LDT)参考文献见黄继中,王祖承.焦虑动物模型的实验方法和药理学评价[J].上海精神医学.2003,15(2):106。实验时将小鼠放入明暗箱的明箱一侧中央区，背向暗箱。为消除放置时间不同带来的误差，各组放置先后随机选择。放入小鼠后，实验观察6min，当小鼠四肢全部进入某箱内记为进入某箱，仅部分肢体进入时忽略不计。记录并比较给药组和对照组小鼠在后5min内在明箱停留的累积时间(timespentinlightarea，LT)和进入明箱的次数(thenumberoftransitions，NS)。抗焦虑药物可解除环境变化对小鼠探究活动的抑制，增加实验中小鼠在明暗两箱往返的次数和在明箱部分探寻行为的时间；同时，也可以降低小鼠的立起次数。C.小鼠爬梯实验(Thestaircasetest，ST)参考文献见Crawley,J.N.,Goodwin,F.K.,1982.Preliminaryreportofasimplemodelforthebehaviourfortheanxiolytieeffectsofbenzodiazepines[J].Pharmacol.Biochem.Behav.13,167-170。实验时，将小鼠置于爬梯最下一格，背对爬梯。观察小鼠6min，记录后4min内的小鼠爬梯次数(thenumberofmoves,NM；指小鼠爬梯行为开始的总次数)，总爬梯数(Thenumberofsteps,NS；指小鼠在指定时间内向上爬越的梯级总数)，立起次数(thenumberofrears,NR；指小鼠双前肢离地1厘米以上的探究行为动作)。抗焦虑剂在小鼠爬梯数没有显著性增加的情况下，能显著降低小鼠站立数，使两指标分离，体现抗焦虑作用。D.开野模型(OpenFieldTest)Qing-QiuMao,Siu-PoIp,Kam-MingKo,etal.Pwonyglycosidesproduceantidepressant-likeactioninmiceexposedtochronicunpredictablemildstress:Effectsonhypothalamic-pituitary-adrenalfunctionandbrain-derivedneutropathicfactor[J].ProgressinNeuro-Psychopharmacology&BiologicalPsychiatry.2009,33:1211-1216。将单只小鼠放入自主活动测量箱，适应1min后，记录5分钟内小鼠进入中央5格次数(numberofenteringperipHeralarea,NEPA)、中央5格停留时间(restingdurationinperipHeralarea,RDPA)与立起次数(numberofrearing，NR)(双前肢离地1厘米以上)作为小鼠焦虑情绪和不良反应的指标。每只小鼠实验完毕后，都迅速清除排泄物，并用分析纯醋酸的1‰水溶液和纯水擦拭开野框底面，以免嗅迹对下一只小鼠的行为产生干扰。(2)化合物不良反应测试采用两个动物行为学模型(开野实验和倾板实验)对化合物XH006的不良反应进行测试。A.开野实验方法同(1)D，主要使用5min内小鼠由底面中心开始在方格中的穿越格数(locomotions,LOCO)考察待测药物对小鼠的中枢兴奋状态的干扰。中枢兴奋作用会使小鼠穿越格数增加，而中枢抑制剂会使小鼠穿越格数减少。B.倾板实验(Theinclinedplanetest，IPT)参考文献见黄继中,王祖承.焦虑动物模型的实验方法和药理学评价[J].上海精神医学,2003,15(2):106。实验时，使用40×20厘米亚克力平板，将小鼠放置于倾板中央位置，头部朝向抬起方，匀速缓慢抬起平板一头，密切观察小鼠，当小鼠无法抓住平板滑下的瞬间，停止抬板；记录该时间平板与水平面的成角为倾角(IA，单位°)。每只小鼠测定2次，异常小鼠测定3次，取平均值记录。如果受试药物对小鼠运动神经协调能力产生干扰，小鼠与空白组相比，在坡度比较平缓的倾斜板上即不能停留。实验结果1.期待性焦虑模型表1.XH002、XH006对小鼠期待性焦虑实验的影响研究结果表明(见表1)，在期待性焦虑模型中，HEL、XH006等2个处理组小鼠与空白对照组小鼠的体温变化显著(P<0.05)，不同程度的体现了对抗应激性体温升高的作用。这表明，该2个化合物可能是潜在的抗焦虑药物。2.小鼠明暗穿箱实验空白组小鼠暗箱停留时间和明箱立起次数(NRL)明显高于其他组，表明小鼠出现焦虑现象；和空白组相比，阳性药物(DA)组NT和LT出现了明显分离，而且NRL数也明显降低，说明模型成功。对于KM种小鼠，HEL组各项指标都明显减少，体现类镇静作用。给药组(XH006)小鼠较空白对照组小鼠物使小鼠NT和LT明显分离，且NRL数值显著降低，说明该三个糖苷类似物存在潜在的抗焦虑活性。KM种小鼠的实验结果见附图1。3.小鼠爬梯实验与空白对照组小鼠相比，阳性药物(DA)组在此次试验中NS、NR得到了分离，体现了抗焦虑作用，说明模型成功。HEL则使所有指标都下降，体现了类镇静作用。对于KM种小鼠，糖苷类似物XH006使NS、NR明显分离，且其分离程度远大于阳性药物DA处理组。这说明XH006糖苷类似物是可能的抗焦虑药物。KM种小鼠的实验结果见附图2。4.开野实验对XH006进行了KM种小鼠的开野实验研究，以确定该化合物是否具有抗焦虑活性和不良中枢神经反应。与空白对照组小鼠相比，地西泮(阳性药物)组小鼠穿越中心次数和中心停留时间增加，穿格数降低，三者均出现显著性差异，说明模型成功。XH006在不改变小鼠穿越格数的同时，增加了小鼠在中央区域活性的倾向，体现了明确的抗焦虑作用。在开野实验中，XH006穿越格数和空白组没有出现显著差异，说明XH006在该模型上没有体现出中枢兴奋或抑制效果，可以排除实验结果的假阳性可能。KM种小鼠的实验结果见表2：表2化合物XH006对小鼠自发活动的影响5.倾板实验在所给剂量上，地西泮体现了明确的肌肉松弛效果，说明模型成功。而豆腐果苷和XH006在本次实验中，倾板角度与空白组没有显著性差异(P＞0.05)，说明小分子酚型糖苷类似物没有出现类肌松现象，其影响协调能力的不良反应较阳性对照药物(DA)小。倾板实验结果见图3。七.结论1.7-O-β-D-木糖基-香豆素(XH006)在KM种小鼠单次灌胃给药情况下，在期待性焦虑明暗穿箱、爬梯实验和开野实验四个动物模型中均体现出较好的抗焦虑活性，抗焦虑效果优于母体药物豆腐果苷。2.对该化合物的不良反应进行了倾板实验和开野实验验证，其结果表明，XH006没有体现出中枢兴奋或中枢抑制的副作用，远低于阳性药物，低于母体药物天麻素和豆腐果苷。由此说明，该化合物能制备成用于治疗焦虑症的各种剂型的药物。以上仅是本发明的具体应用范例，对本发明的保护范围不构成任何限制。凡采用等同变换或者等效替换而形成的技术方案，均落在本发明权利保护范围之内。当前第1页1 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