一种含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统及其制备方法与应用与流程

本发明属于药物制剂技术领域，特别涉及一种含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统及其制备方法与应用。

背景技术：

透皮给药系统是指在皮肤表面给药，使药物以恒定速率或接近恒定速率通过皮肤进入体循环，产生全身或局部给药治疗的新剂型。其优点体现在：与口服药系统相比，避免药物的异味，降低新陈代谢和肝脏的首过效应，药物吸收不受消化道内ph、食物、时间等因素的影响；与皮下注射药相比克服因吸收过快产生血液浓度过高而引起的不良反应，可自我管理、持续控制给药速度、灵活给药，同时改善病人对药的依赖性和提高药物的生物利用率。因此透皮给药系统是目前药物制剂技术领域研究的热点。

脂质体同时具有亲水性和疏水性，醇质体是一种新型的具有囊泡结构的经皮给药载体，由磷脂、胆固醇、乙醇、水组成，即在普通脂质体的配方中添加高浓度醇，其透皮机制也不同于普通脂质体。它不仅有高效包封和良好的透皮性能，而且能有效的携带药物分子穿透角质层甚至到达皮肤更深层，是一种高效的透皮载体。透明质酸是人体表皮层及真皮层的主要基质之一，具有良好的生物相容性，改善皮肤营养代谢，理想的保湿因子，在保湿的同时又是良好的透皮吸收促进剂；能够促进纤维细胞的增殖，促进皮肤伤口的修复、减少疤痕，增强免疫力等。

目前，中国公开文本cn105078928a公开了尼索地平醇质体控释贴剂及其制备方法，所述的醇质体是在脂质体的基础上添加高浓度的醇，而高浓度的醇有脱脂作用，可致局部皮肤干燥，同时药物在皮内储留时间短，难以持续发挥疗效。中国公开文本cn102085198a公开了通过皮肤施用舒芬太尼的透皮给药系统；中国公开文本cn105168187a公开了一种透皮给药系统，是将药液和药物细粉混合，涂布到水凝胶贴上，形成透皮给药系统；中国公开文本cn105816443a公开了一种治疗糖尿病的glp-1缓控释驻极体透皮给药系统，驻极体层、背衬层、含药压敏胶层和控释膜层形成一贮存库贴剂。这些公开提供的均为透皮给药系统，在很大程度上避免了首过效应、消化道反应不良等弊端，同时提高了生物利用度。

迄今为止，含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统的制备方法及其作为药物转运载体在局部皮肤外用给药中的应用尚未见报道。

技术实现要素：

为了克服上述现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统的制备方法。该方法以醇脂质体为透皮给药的载体，在合成过程中添加透明质酸，能显著提高药物的经皮渗透性，使药物在长时间内维持高血药浓度，保证药效的持续发挥，可减少副反应、给药次数，方便患者的自我管理。

本发明另一目的在于提供上述方法制备的含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统。

本发明再一目的在于提供上述含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药载体在外用制剂、化妆品等领域中的应用，特别是作为药物转运载体在局部皮肤外用给药中的应用。

本发明的目的通过下述方案实现：

一种含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)按质量百分比称取原料：大豆卵磷脂1％～5％、胆固醇0.1％～1％、透明质酸0.5％～1.5％、无水乙醇20％～50％、透皮药物0.1％～1.5％、水余量；

(2)将大豆卵磷脂、胆固醇、透明质酸、透皮药物溶解于无水乙醇中，加热至30～37℃使其溶解得混合溶液；

(3)将步骤(2)中得到的混合溶液在搅拌条件下加入蒸馏水，加入完毕后继续搅拌0.5～1.5h，然后冷却至室温即得含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统。

步骤(1)所述的按质量比称取原料优选为：大豆卵磷脂2.0％、胆固醇0.5％、透明质酸1.0％、无水乙醇30％、透皮药物1.0％、水余量；

步骤(1)中所述的透明质酸为分子量范围400000～1800000的小分子透明质酸；

步骤(1)中所述的透皮药物为盐酸阿霉素、米诺地尔等；

步骤(3)中所述的搅拌是指搅拌速度为200～500r/min；

一种由上述方法制备得到的含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统。

上述的含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统，由于体系稳定、透皮效率高，有利于携带药物进入皮肤深层并促进药物经皮吸收，在外用制剂、化妆品等领域中具有很广泛的应用。

本发明的机理为：

本发明在醇脂质体的基础上添加透明质酸，通过穿透细胞进入、经细胞间隙穿透、经皮肤附件管道开口处进入毛囊，提高其靶向性和促进皮肤透皮吸收；以醇脂质体为透皮给药的载体，将需透皮的药物包封于醇脂质体中，提高药物的经皮渗透性，有利于药物吸收进入体循环，从而发挥局部治疗或全身治疗作用，且具有靶向毛囊的优势。与现有技术相比较，功效成分的皮肤通过率倍量增加，药物用量极大的减少，充分发挥了药物各组分的药效作用，方便了医者对患者的便捷治疗，具有广阔的临床应用前景。

本发明相对于现有技术，具有如下的优点及有益效果：

(1)透明质酸是人体表皮层及真皮层的主要基质之一，具有良好的生物相容性，改善皮肤营养代谢，理想的保湿因子，在保湿的同时又是良好的透皮吸收促进剂；

(2)透明质酸能够促进纤维细胞的增殖，促进皮肤伤口的修复、减少疤痕，增强免疫力等；

(3)醇脂质体为透皮给药的载体可避免肝首过效应明显、生物利用度低等弊端；

(4)醇脂质体透皮给药系统可有效避免肠胃炎、腹泻、胃肠道出血等消化道不良反应；

(5)给药次数少、给药剂量可自我管理；

(6)含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统能显著提高药物的经皮渗透速率，使血液中的药物浓度达到治疗浓度，从而快速发挥药效；

(7)本发明透皮给药系统物理以及化学稳定性良好，制备的条件容易满足，使用方便，满足临床用药要求，具有很好的实用价值。

附图说明

图1为实施例1制备得到的样品采用franz透皮扩散仪测得的不同时间下通过鼠皮的累积透药量。

图2为实施例2制备得到的醇脂质体-透明质酸-盐酸阿霉素的粒径大小与分布。

图3为实施例1制备得到的样品对小鼠胚胎成纤维细胞(3t3细胞)的细胞毒性。

图4为实施例1制备得到的样品对小鼠b16黑色素瘤细胞的抗肿瘤效果图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

下列实施例中所用材料均可从商业渠道获得。为了更好的说明本发明的透皮给药系统透皮效果，实施例中用盐酸阿霉素、米诺地尔等药。

实施例1：含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统的制备

(1)按质量百分比称取原料：大豆卵磷脂2.0％、胆固醇0.5％、透明质酸(分子量400000～1800000)1％、30％无水乙醇、水相余量、盐酸阿霉素1％。

(2)将大豆卵磷脂、胆固醇、透明质酸、盐酸阿霉素溶解于无水乙醇中，30℃水浴锅加热使其完全溶解。

(3)随后置于磁力搅拌器上，在30℃、300r·min^-1的密闭条件下搅拌，将蒸馏水注入步骤(2)所得溶液中，注完后继续搅拌1.0h，冷却至室温，即得含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统。

实施例2：含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统的制备

(1)按质量百分比称取原料：大豆卵磷脂5.0％、胆固醇1.0％、透明质酸1.5％、无水乙醇30％、水相余量、盐酸阿霉素1.5％。

(2)将大豆卵磷脂、胆固醇、透明质酸、盐酸阿霉素溶解于无水乙醇中，30℃水浴锅加热使其完全溶解。

(3)随后置于磁力搅拌器上，在30℃、300r·min^-1的密闭条件下搅拌，将蒸馏水注入醇溶液中，注完后继续搅拌1.0h，冷却至室温，即得含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统。

实施例3：含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统的制备

(1)按质量百分比称取原料：大豆卵磷脂3.0％、胆固醇0.8％、透明质酸1％、无水乙醇30％、水相余量、盐酸阿霉素1.0％。

(2)将大豆卵磷脂、胆固醇、透明质酸、盐酸阿霉素、溶解于无水乙醇中，30℃水浴锅加热使其完全溶解。

(3)随后置于磁力搅拌器上，在30℃、300r·min^-1的密闭条件下搅拌，将蒸馏水注入醇溶液中，注完后继续搅拌1.0h，冷却至室温，即得含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统。

实施例4：含有透明质酸的醇脂质体的透皮给药系统的体外皮肤渗透性测试

对实施例1制备得到的样品采用franz透皮扩散仪进行体外皮肤渗透性试验，结果见图1所示，具体操作如下：小鼠一只，戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔注射麻醉后，放血处死小鼠，并用电剃刀除去腹部鼠毛，取下已去毛的鼠皮。用沾有生理盐水的脱脂棉除去皮下脂肪，备用。取已经备好的小鼠皮肤固定在franz扩散池中，透皮扩散有效面积约为2.92cm²，接收池体积约为12ml，使液面与皮肤内层紧密接触，接受液为pbs(ph7.4)，体积12ml。整个实验过程恒温(37+0.2)℃，300r/min搅拌。

用移液枪取实施例1制备好的样品3ml加于上层供应室中，并用保鲜膜密封，同时覆盖一层锡箔纸避光。在规定时间(0.5、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0、16.0、18.0、24.0h)抽取接受液2.0ml，并立即补充同温接受液2.0ml，得到透有药物的接受液，4℃冰箱保存。透有样品的接受液经过滤纸过滤和pbs液稀释后，用uv-2550紫外分光光度计测定染料的吸收值，通过计算(计算方法是本领域公知)得样品随时间变化透过皮肤的累积量，以及透过皮肤的最大值。结果如图1所示，含有透明质酸的醇脂质体载盐酸阿霉素可透过皮肤，与醇脂质体载盐酸阿霉素、无水乙醇载盐酸阿霉素、水载盐酸阿霉素相比较，透皮效率高且透过皮肤的药物累积量最大。同时从2h开始，鼠皮内侧颜色有由无色变为为红色化，接受液pbs的颜色也会由无色变为微红色，与盐酸阿霉素的颜色保持了一致，说明了含有透明质酸的醇脂质体载盐酸阿霉素能够透过皮肤，同时与其他组相比较，该试验组透皮效率高、透过皮肤的药物累积量最大。

实施例5：含有透明质酸的醇脂质体的粒径大小与分布

对实施例2制备得到的样品，利用激光粒度仪测定粒度大小和分布，结果显示醇脂质体、醇脂质体-盐酸阿霉素-透明质酸、醇脂质体-透明质酸平均粒径为1000nm。如图2所示，平均粒径较小，容易穿透皮肤屏障，携带药物进入皮肤深层并促进药物经皮吸收。

实施例6：含有透明质酸的醇脂质体的细胞毒性和抗肿瘤效果测定

对实施例1制备得到的样品进行细胞毒性和抗肿瘤效果测定，结果分别如图3、图4所示。具体操作如下：将实施例1制备得到的样品配置成不同浓度1:30、1:20、1:10、1:3、1:2，利用小鼠胚胎成纤维细胞(3t3细胞)进行细胞毒性测定，结果如图3显示，根据实施例1制备得到的样品对正常细胞毒性很低；利用b16黑色素瘤细胞进行抗肿瘤效果测定，结果如图4显示，根据实施例1制备得到的样品对肿瘤细胞具有很好的抗肿瘤效果，可见醇脂质体携药已进入皮肤深层并促进药物的经皮吸收。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。