本发明属于药物领域，具体地，涉及一种预防和治疗心肌缺血的药物组合物及其制备方法和用途。
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：现代社会由于生活节奏的加快、过量饮酒、营养摄入过剩、缺乏必要的运动及环境污染等，导致了心脑血管疾病成为威胁人类健康的常见病之一，具有高患病率、高致残率和高死亡率的特点，据统计，目前心脑血管疾病已成为全世界人类死亡的首要原因。心肌缺血为心脑血管疾病的常见疾病之一，一般是指由于心脏的血液灌注的减少，导致了心脏的供氧减少，心肌能量代谢失常，从而不能支持心脏正常工作的病理状态，临床症状主要包括劳累或精神紧张时出现胸闷、心悸、气短等，有发生心绞痛、心肌梗塞和猝死的风险。由于生活水平的提高，心肌缺血已经不再仅是老年人身体健康的威胁，开始呈现出年轻化的趋势，在30岁以下的人群中也已开始出现心肌缺血的相关症状，从而严重威胁着人类的身体健康。心肌缺血是由于心脏的血液灌注的减少所诱发，因此，目前，针对于心肌缺血的治疗主要集中于药物治疗及外科手术治疗，其中药物治疗集中于使用硝酸酯类药物等扩张冠状动脉，增加心肌供血供氧；使用β受体阻断剂减慢心率或使用钙离子拮抗剂抑制心肌的收缩等，从而减少心肌的耗氧量；使用抗血小板药物、他汀类药物、溶栓药物等，预防或溶解血栓等。上述药物治疗往往仅能起到缓解症状的效果，并且副作用较大，甚至还会加剧相应症状，因此，治疗效果并不理想。1-磷酸鞘氨醇(Sphingosine-1-phosphate，简称S1P)是鞘磷脂代谢的中间产物之一，具有重要的生理功能，其受体广泛表达于内皮细胞、血管平滑肌细胞及心肌细胞等，因此，S1P可广泛发挥血管内皮保护、心肌缺血/再灌注的保护等作用，还可以降低心室肌动作电位幅值、延长动作电位时程、增加心肌收缩力，从而可以在发挥心肌缺血/再灌注保护作用的同时，有利于纠正心肌缺血时心肌的非正常工作状态。本发明即是针对1-磷酸鞘氨醇进行研究，致力于开发出一种心肌缺血预防和治疗效果更好的药物组合物。技术实现要素：本发明的一个目的是提供一种包含1-磷酸鞘氨醇的预防和治疗心肌缺血的药物组合物，所述药物组合物以1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝药为活性成分。其中所述药物组合物中1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝药的质量比为5-10∶5-10∶1-5，优选为6-8∶6-8∶2-4，更优选的为6∶6∶2、7∶7∶2、8∶8∶2、6∶6∶3、7∶7∶3、8：8∶3、6∶6∶4、7∶7∶4、8∶8∶4。所述抗凝药选自：肝素、华法令、双香豆素等。优选的所述抗凝药为双香豆素。本发明预防和治疗心肌缺血的药物组合物可以添加药学上可接受的辅料制备成便于临床使用的药物剂型，所述药物剂型包括口服药物组合物或胃肠道药物组合物，所述口服药物组合物优选为片剂或胶囊剂，所述胃肠道外药物组合物优选为注射剂或冻干粉针剂。在制备的本发明所述药物组合物中，作为药物活性成分的1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝药的含量为药物组合物总重量的0.1-10％(重量)。在进一步优选的技术方案中，本发明预防和治疗心肌缺血的药物组合物为胶囊剂，所述胶囊剂包括：1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝药和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括：填充剂、润滑剂和明胶胶囊壳，所述填充剂选自淀粉、糊精、乳糖或微晶纤维素，所述润滑剂选自：滑石粉、硬脂酸镁或微粉硅胶。在更优选的技术方案中，本发明预防和治疗心肌缺血的胶囊剂具有以下组成：1-磷酸鞘氨醇4份；萘普生4份；双香豆素2份；微晶纤维素89份；硬脂酸镁1份。本发明的另一目的在于提供一种预防和治疗心肌缺血的胶囊的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：a)按配比称取润滑剂、明胶胶囊壳以外的1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝药和填充剂混合均匀后粉碎，过50-100目筛，得混合粉，备用；b)在步骤a中制备的混合粉中添加润滑剂后搅拌均匀得填充粉，备用；c)将步骤b制得的填充粉填充与明胶胶囊壳，即得。本发明的再一个目的是提供1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝药在制备预防和治疗心肌缺血的药物组合物中的用途，所述心肌缺血选自心绞痛、心肌梗死或缺血性心肌病。萘普生：又称甲氧萘普酸，Naproxen，具有解热、镇痛、抗炎的效果，用于类风湿性关节炎、强直性脊椎炎、痛经等的治疗，镇痛效果持续时间长、安全性高。抗凝药：是指具有阻止凝血过程效果的药物，可用于预防或治疗血栓，预防中风或其他血栓相关疾病，包括：肝素、香豆素类抗凝药、抗血小板药等。有益效果本发明预防和治疗心肌缺血的药物组合物中活性成分1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝药协同作用，多通路的发挥预防和治疗心肌缺血的作用，治疗效果明确，且安全性高。本发明首次将具有解热、镇痛、抗炎作用的萘普生用于心肌缺血的预防和治疗，萘普生与1-磷酸鞘氨醇和抗凝药，如双香豆素组合后多通路发挥心肌缺血的预防和治疗作用，并协同增效，心肌缺血的预防和治疗效果明确，且安全性高，可广泛用于各类心肌缺血及其相关疾病的预防与治疗。具体实施方式在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。应当理解的是，在说明书和权利要求书中使用的术语或词语不应当理解为具有在字典中限定的含义，而应理解为在以下原则的基础上具有与其在本发明上下文中的含义一致的含义：术语的概念可以适当地由发明人为了对本发明的最佳说明而限定。效果例1：本发明药物组合物对大鼠的影响(1)大鼠心肌细胞原代培养方法：取出生24h内的SD乳鼠25只，心脏全部取出后，剔除心脏周边的血凝及纤维组织，消化液(0.125％胰酶+0.05％II型胶原酶)消化，收集细胞，过滤除去未消化组织，接种于培养瓶中，置细胞培养箱(37℃，95％O2+5％CO2)中培养，用差速贴壁法去除纤维细胞，纯化心肌细胞。2h后，吸出尚未贴壁的细胞悬液吹匀，调整密度至1×10-6植入24孔板中(每孔500μl)，使细胞均匀分布，加入Brdu至0.1mmol/L，24h换液一次，以后每3-4d换液一次。定期在倒置显微镜下观察细胞生长的情况，培养48h后，随机分组进行实验。将细胞以1×106个/ml的密度接种于24孔板中，每孔500μl。37℃、5％CO2饱和湿度条件下培养。原代心肌细胞培养72h后，正常对照组和模型组以500μlDMEM培养液正常培养，各给药组加入含10％药液的DMEM培养液，孵育6h后，用冰冷PBS冲洗2遍，模型组及给药组每孔加入500μl经95％N2-5％O2饱和的Tyrode液，然后将培养板放入一密闭容器内，持续通以混合气体(95％N2-5％O2)30min后密闭容器，放入孵箱缺氧12h，模拟在体缺血模型。正常组洗净旧培养基后加入含10g/L葡萄糖的Tyrode液500μl，CO2培养箱中培养12h。每孔加入终浓度为0.5mg/mlMTT无血清DMEM培养液500μl培养4h，然后倾去上清液，加入500μl的DMSO，振摇10min，用全自动酶标仪测定570nm处的吸光度值(OD570nm)，用于定量细胞存活率。将处理后的培养板每孔吸取200μl培养上清液，根据LDH检测试剂盒说明，检测LDH活性。(2)具体结果如下：各单味药对缺氧缺糖的大鼠心肌细胞的影响，将丹参提取物为将丹参醇提和水提浸膏混合即得，刺五加和三七分别提取即得两味药的提取物，各提取物的制备方法同实施例1.细胞存活率(MTT)及LDH活性结果如下：分组LDH(U/L)细胞活性(％)对照组16.3±3.7100模型组136.8±11.9##50.6±2.7##给药组183.6±8.4**66.9±3.6**给药组297.5±7.3**61.3±3.4**给药组3112.1±10.652.2±2.9给药组491.5±9.4**64.7±4.1**给药组5104.7±8.8*58.1±3.7*给药组657.4±6.3**$$84.6±3.9**$$给药组773.6±6.9**73.7±4.3**给药组868.7±5.8**75.2±3.8**给药组988.4±6.1**65.8±3.3**给药组1093.8±7.4**61.2±3.7**＊＊表示经Oneway-ANOVA检验与模型组相比，P＜0.01；$$表示经Oneway-ANOVA检验与其他给药组相比，P＜0.01。各给药组组成为：效果例2：本发明药物组合物对垂体后叶素致急性心肌缺血大鼠心电图的影响1.1实验药物(1)本发明药物组合物：按照8∶8∶4的比例称取1-磷酸鞘氨醇、萘普生和双香豆素，混合后添加纯净水配制成含量为20％、10％、5％的高剂量、中剂量和低剂量组混悬液；(2)1-磷酸鞘氨醇组：称取1-磷酸鞘氨醇后添加纯净水配制成含量为20％的混悬液；(3)萘普生组：称取萘普生后添加纯净水配制成含量为20％的混悬液；(4)双香豆素组：称取双香豆素后添加纯净水配制成含量为20％的混悬液。1.2实验方法筛选心电图正常的SD大鼠70只，雌雄各半，随机分为7组，每组10只，具体为：空白组、本发明高剂量组、本发明中剂量组、本发明低剂量组、1-磷酸鞘氨醇组、萘普生组和双香豆素组，每组每天给药一次，灌胃相应药物3mL，其中空白组灌胃等体积纯净水。灌胃给药10天，末次给药1小时后舌下静脉注射垂体后叶素1U/Kg，记录大鼠心电图，测量注射垂体后叶素30秒内大鼠ST段、T波变化，计算ST段变化抑制率与T波变化抑制率，采用玻片法测量凝血时间，计算凝血抑制率，具体实验结果见表1、表2。其中ST段变化抑制率＝(空白组-实验组)/空白组；T波变化抑制率＝(空白组-实验组)/空白组；凝血抑制率＝(实验组-空白组)/空白组。1.3试验结果表1实验结果显示了空白组大鼠在注射垂体后叶素后ST段、T波均被明显抬高，从而表明本实验模型构建成功。各给药组的实验结果则显示了单独给予1-磷酸鞘氨醇、萘普生与双香豆素后，仅1-磷酸鞘氨醇显示出了改善垂体后叶素致心电图变化的效果，注射萘普生与双香豆素后均未显示出改善垂体后叶素致心电图变化的效果，从而表明了单独使用萘普生与双香豆素时其并不具有改善急性心肌缺血性心电图变化的作用。而本发明的药物组合物高、中、低剂量组则均显示出显著的改善急性心肌缺血性心电图变化的作用，其中低剂量组的相应效果与1-磷酸鞘氨醇组大致相当，而本发明药物组合物低剂量组的给药量仅为与1-磷酸鞘氨醇组的1/4，从而表明了本发明药物组合物改善急性心肌缺血性心电图的变化的效果并非仅依赖于1-磷酸鞘氨醇，而与1-磷酸鞘氨醇组给药剂量相同的本发明药物高剂量组的ST段变化抑制率、T波变化抑制率均为1-磷酸鞘氨醇组的两倍，该实验结果更加充分的显示了本发明药物组合物中1-磷酸鞘氨醇、萘普生与双香豆素组合后协同发挥了改善急性心肌缺血性大鼠心电图变化的作用。实验药物对垂体后叶素致急性心肌缺血大鼠心电图的影响注：与空白组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。实验药物对大鼠凝血时间的影响注：与空白组比较：*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。表2实验结果显示了双香豆素具有抗凝血作用，而1-磷酸鞘氨醇与萘普生均未显示出抗凝血效果，但本发明包含1-磷酸鞘氨醇、萘普生与双香豆素的药物组合物则显示出明显更强的抗凝血作用，其中本发明药物组合物低剂量组具有与双香豆素类似的抗凝血作用，但其给药剂量仅为双香豆素组的1/4，本发明药物组合物高剂量组的凝血抑制率明显高于双香豆素组，从而表也明了本发明药物组合物还具有协同抗凝血的效果。实施例1、预防和治疗心肌缺血的胶囊剂所述胶囊剂具有以下组成：1-磷酸鞘氨醇4份；萘普生4份；双香豆素2份；微晶纤维素89份；硬脂酸镁1份。按照如下步骤制备：a)按配比称取润滑剂、明胶胶囊壳以外的1-磷酸鞘氨醇、萘普生和抗凝药和填充剂混合均匀后粉碎，过100目筛，得混合粉，备用；b)在步骤a中制备的混合粉中添加润滑剂后搅拌均匀得填充粉，备用；c)将步骤b制得的填充粉填充与明胶胶囊壳，即得。当前第1页1 2 3