本发明涉及医药技术领域，具体涉及鲜人参活性提取物在制备治疗口腔及消化道溃疡药物中的应用。
背景技术：
复发性口腔溃疡是口腔黏膜疾病中发病率最高的一种疾病，普通感冒、消化不良、精神紧张、郁闷不乐等情况均能偶然引起该病的发生，好发于唇、颊、舌缘等，在黏膜的任何部位均能出现。
现代医学认为，复发性口腔溃疡首先与免疫有着很密切的关系。有的患者表现为免疫缺陷，有的患者则表现为自身免疫反应；其次是与遗传有关系，在临床中，复发性口腔溃疡的发病，有明显的家族遗传倾向，父母一方或多方若患有复发性阿弗他溃疡，他们的子女就比一般人更容易患病；另外，复发性口腔溃疡的发作，还与一些疾病或症状有关，比如消化系统疾病：胃溃疡、十二指肠溃疡、慢性或迁延性肝炎、结肠炎等，另外偏食、消化不良、发热、睡眠不足、过度疲劳、工作压力大、月经周期的改变等等。随着一种或多种因素的活跃、交替出现机体免疫力下降，致使复发性口腔溃疡的频繁发作。
复发性口腔溃疡的治疗包括局部治疗和全身治疗，由于局部治疗毒副作用低，得到人们的认可。近年来出现的口腔局部用药，如意可贴、华素片、西瓜霜含片等服用方便，但在止痛、杀菌、愈合溃疡等方面存在不尽如意的地方，市场对治疗口腔溃疡的天然药物需求迫切。
目前消化道溃疡的主要病因包括幽门螺杆菌感染、胃酸和胃蛋白酶的作用、非甾体抗炎药、遗传因素、胃和十二指肠动力异常和精神因素等。通常认为消化性溃疡的发生是由于损害因素(即病因)与防御因素黏液碳酸氢盐屏障、黏膜血流、前列腺素和表皮生长因子等之间的平衡失调所致当损害因素大于防御因素时就有可能发生溃疡。
目前消化性溃疡的治疗方法主要包括抑制胃酸、保护胃黏膜及根除幽门螺杆菌。临床上通常使用雷尼替丁、奥美拉唑、果胶铋等西药治疗，但存在疗程长，服药后有不适感和毒副作用，市场对高效、低毒的新型抗溃疡药物需求迫切，具有生物活性的天然药物越来越受到人们的重视。
技术实现要素：
针对现有技术中的缺陷，本发明提供鲜人参活性提取物在制备治疗口腔及消化道溃疡药物中的应用。
本发明涉及鲜人参活性提取物在制备治疗口腔及消化道溃疡药物中的应用。
更具体的说，鲜人参活性提取物采用如下方法制备：
取鲜人参，以蒸馏水清洗干净，粉碎成60-100目的颗粒，25-35℃条件下，使用连续逆流超声波提取设备进行提取，以水为提取溶剂，提取液经离心分离后，经反渗透浓缩器浓缩，得浓缩液和反渗透水；浓缩液经过冷冻干燥，得到鲜人参活性提取物。
本发明中，活性提取物重量可达到鲜参干重的30-40％。人参活性提取物中人参皂苷rg1含量可达3％以上，人参皂苷re含量可达2％以上，人参皂苷rb1含量可达2.5％以上，人参皂苷提取率大于98％。
更详细的说，鲜人参可以为鲜野山参、鲜林下山参、鲜园参、鲜高丽参、鲜日本人参、鲜西洋参等。
本发明中，药物剂型可以为口崩片、片剂、胶囊剂或散剂。
更详细的说，所述口崩片的组分包括鲜人参活性提取物及填充剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂，所述鲜人参活性提取物的重量百分比为41-60wt％。
其中，填充剂占21-40wt％，填充剂为以下物质一定比例的混合物：微晶纤维素(mcc)、甘露醇以质量比:5:1-1：5混合；
崩解剂占8-15wt％，崩解剂为交联羧甲基魔芋淀粉钠、交联聚维酮(pvpp)中的一种或两种，交联羧甲基魔芋淀粉钠、交联聚维酮(pvpp)的质量比为0:5-5：0；
润滑剂占0.5-2wt％，润滑剂为硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶中的一种；
粘合剂占1-2wt％，粘合剂为无水乙醇或无水乙醇/甘油混合物。
制备步骤为：取上述鲜人参活性提取物、填充剂、崩解剂在三维混合机中充分混合均匀，得到混合物，用粘合剂将混合物制软材，以15-30目筛挤压制粒，30-45℃下恒温干燥8-12小时，15-30目筛整粒，加入润滑剂，混匀，压制成人参活性提取物口崩片。
其中，交联羧甲基魔芋淀粉钠为自制新型崩解剂，制备方法如下：将2500g魔芋淀粉加于5000ml体积分数为95％的乙醇中充分搅拌均匀分散成淀粉乳液，加入1200gnaoh固体碱化，同时加人淀粉质量0.12％的交联剂环氧氯丙烷，置于10l三角瓶中，装上回流冷凝管。在35℃下预处理约20min，然后投入1200g氯乙酸进行羧甲基化，在55℃下反应2.5h结束，经中和、趁热过滤，所得滤饼用体积分数为95％的乙醇洗涤，然后在50℃下真空干燥后得到交联羧甲基魔芋淀粉钠。
鲜人参活性提取物口崩片崩解时限测定
参照中国药典2010年版崩解时限测定方法，取人参活性提取物口崩片6片，以水为介质，温度为(37.0±1)℃.每次测定l片，从药片接触水面开始计时，直到颗粒全部通过筛网的时间就为崩解时间。共测定6次.计算平均崩解时间。鲜人参活性提取物口崩片平均崩解时间为15秒-60秒。
更详细的说，本发明所述片剂的包括以下重量份的原料制备而成：
制备步骤为：将鲜人参活性提取物和淀粉混合均匀后，制成颗粒，加入硬脂酸镁和滑石粉混合均匀后压制成片剂。每粒片剂中含鲜人参活性提取物0.1克。
更详细的说，本发明所述胶囊剂包括以下重量份的原料制备而成：
鲜人参活性提取物1000份；
淀粉0-800份。
制备步骤为：将鲜人参活性提取物和淀粉混合均匀后，装胶囊制成胶囊剂。每粒胶囊剂中含鲜人参活性提取物0.2克。
更详细的说，本发明所述散剂包括以下重量份的原料制备而成：
鲜人参活性提取物1000份；
微晶纤维素0-800份。
将鲜人参活性提取物和微晶纤维素混合均匀后制成散剂，装管制西林瓶制成散剂。每瓶散剂中含鲜人参活性提取物0.5克。
以上药剂在治疗口腔溃疡时，研磨成粉，覆盖溃疡面积；治疗胃溃疡时，温水送服。
还可以将鲜人参活性提取物制备成丸剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、乳剂、注射剂、喷雾剂、凝胶剂、霜剂、酊剂、巴布剂或贴膏等形式。
本发明提供的药物，直接服用，用量根据溃疡的实际情况选择。
1、鲜人参活性提取物抗口腔溃疡实验研究
(1)实验目的：用苯酚制造的口腔溃疡模型，每天给予口腔溃疡模型大鼠一定次数的鲜人参活性提取物，观察鲜人参活性提取物是否有减轻溃疡的作用。
(2)受试药物及试剂
华素片(北京四环医药科技股份有限公司)；苯酚
动物：wistar大鼠，雄性，体重230-280克，第二军医大学实验动物中心提供。
(3)实验方法
取实验大鼠50只，10％水合氯醛麻醉，剂量：0.35ml/100克，麻醉后将含有90％苯酚棉球的塑料滴管(内径3mm)下端平置于大鼠左侧口角约1mm处的颊膜上，灼烧30分钟，可见该处形成3mm直径的白色损伤。24小时后随机分组，每组10只，5组，即模型组(辅料4次/日，不含药物)；鲜人参活性提取物高剂量组(4次/日，5mg/次)；鲜人参活性提取物中剂量组(4次/日，1mg/次)；鲜人参活性提取物低剂量组(4次/日，0.2mg/次)；阳性对照组：华素片组(4次/日，5mg/次)，鲜人参活性提取物与华素片在使用前研成粉末，给药以覆盖创面为度，连续给药5天，给药前及每次给药后次日观察溃疡面积大小(以溃疡的直径计)积溃疡愈合情况(无肉眼可见的溃疡为痊愈)，首次给药至末次给药分别记录为1、2、3、4、5、6天。溃疡面积大小用t检验，溃疡愈合率用x2检验。
(4)实验结果
溃疡面积比较(表1)：鲜人参活性提取物高剂量组与模型组比较，从给药第3天起到试验结束，对应每天比较有显著差异；华素片组与模型组比较，从给药第3天起到试验结束，对应每天比较有显著差异；鲜人参活性提取物中剂量组与模型组比较，从给药第3天起到试验结束，对应每天比较有显著差异；鲜人参活性提取物低剂量组与模型组比较，从给药第5天起到试验结束，对应每天比较有显著差异。
表1鲜人参活性提取物对大鼠溃疡面积的影响
注：与模型组比较，*p<0.05,
愈合率比较(表2)：模型组及鲜人参活性提取物低剂量组从给药第一天起到试验结束，溃疡都没有愈合；鲜人参活性提取物高剂量组从给药第3天起就有溃疡愈合，到试验结束，愈合率达95％，华素片组从给药第4天起，有溃疡愈合，到试验结束，愈合率达58％；鲜人参活性提取物中剂量组从给药第4天起，有溃疡愈合，到试验结束，愈合率达60％.
表2鲜人参活性提取物对大鼠溃疡愈合时间的影响
注：与模型组比较，*p<0.05
2.鲜人参活性提取物抗胃溃疡实验研究
(1)实验目的：采用大鼠乙酸致胃溃疡模型，每天给予胃溃疡模型大鼠一定量的鲜人参活性提取物，观察鲜人参活性提取物减轻溃疡的作用。
(2)材料
sd大鼠，雌雄各半，体重200g±20g，由第二军医大学实验动物中心提供。
雷尼替丁(阿特维斯(佛山)制药有限公司)
(3)方法
sd大鼠30只，禁食12h后，按okabe法(okabes.chronieityofaceticandunclearintheratstomach[j].amjdigdis，1972，17：619.)改良进行造模。大鼠腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉后，用酒精棉球消毒皮肤，打开腹腔，在腺胃部前壁窦体交界处浆膜面贴上浸透冰醋酸的圆形滤纸(直径5mm)30秒，重复3次，关腹缝合创口。术后常规喂养，第2天将动物随机分组，每组6只，分别为空白组、雷尼替丁组、鲜人参活性提取物各剂量组(300mg/kg、100mg/kg、50mg/kg)。于分组当天开始给药，给药1次/d，连续5d。末次给药后12h后脱颈椎处死动物，剖腹取胃，沿胃大弯剪开，用生理盐水洗涤胃内容物，将胃固定于10％甲醛中，15min后将胃平展于玻璃表面皿上，在放大镜下用电子数显卡尺精确量取溃疡面的长径和短径，并计算溃疡面积(王北婴，李仪奎.中药新药研制开发技术与方法[m].上海科学技术出版社，2001：506，515，505.)。
数据处理结果以
(4)结果
对大鼠乙酸型胃溃疡的影响:鲜人参活性提取物高、中剂量组可明显降低大鼠胃溃疡指数(p<0.05)，促进溃疡的愈合。结果见表3。
表3鲜人参活性提取物对乙酸致大鼠胃溃疡的治疗作用
注：与空白组比较，*p<0.05
实验结果显示鲜人参活性提取物对醋酸型胃溃疡疗效显著，能够明显促进溃疡面的愈合，减少胃穿孔的出现，并且减少了胃黏膜出血面积，其效果优于雷尼替丁。提示鲜人参活性提取物能促进受损胃黏膜愈合的作用，对慢性胃溃疡具有较好的治疗效果。
由上述技术方案可知，本发明具有以下有益效果。
本发明发掘了鲜人参活性提取物的新用途，开拓了一个新的应用领域，可用于药品、及保健食品的开发。
本发明提供了鲜人参活性提取物的制备方法，该制备方法简单，能耗低，溶剂可以循环利用，生产过程无废液排放，活性成分被完整保存。
本发明提供的鲜人参活性提取物可以制备成制成片剂、胶囊剂、口崩片、散剂等多种形式，而且本发明针对鲜人参活性提取物的特点，筛选了制备以上剂型的组分，使得整个鲜人参活性提取物的功效发挥更加完善。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明技术方案的实施例进行详细的描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，因此只作为示例，而不能以此来限制本发明的保护范围。
实施例1鲜人参活性提取物制备
取鲜野山参10公斤，以蒸馏水清洗干净，粉碎成60目的颗粒，25℃条件下，使用连续逆流超声波提取设备进行提取，以水为提取溶剂，提取液经离心分离后，经反渗透浓缩器(合肥智轩膜分离技有限公司)浓缩，得浓缩液和反渗透水。反渗透水作为提取溶剂循环利用，实现绿色化生产。浓缩液经过冷冻干燥，得到鲜人参活性提取物，经过冷冻干燥，得到鲜人参活性提取物，活性提取物重量1.02公斤。
人参活性提取物中人参皂苷rg1含量为3.14％，人参皂苷re含量为2.1％，人参皂苷rb1含量为2.7％。人参皂苷提取率为99.1％。
实施例2鲜人参活性提取物制备
取鲜林下山参10公斤，以蒸馏水清洗干净，粉碎成100目的颗粒，35℃条件下，使用连续逆流超声波提取设备进行提取，以水为提取溶剂，提取液经离心分离后，经反渗透浓缩器(合肥智轩膜分离技有限公司)浓缩，得浓缩液和反渗透水。反渗透水作为提取溶剂循环利用，实现绿色化生产。浓缩液经过冷冻干燥，得到鲜人参活性提取物，经过冷冻干燥，得到鲜人参活性提取物，活性提取物重量1.05公斤。
人参活性提取物中人参皂苷rg1含量为3.17％，人参皂苷re含量为2.3％，人参皂苷rb1含量为2.9％。人参皂苷提取率为99.3％。
实施例3鲜人参活性提取物制备
取鲜林下山参10公斤，以蒸馏水清洗干净，粉碎成80目的颗粒，30℃条件下，使用连续逆流超声波提取设备进行提取，以水为提取溶剂，提取液经离心分离后，经反渗透浓缩器(合肥智轩膜分离技有限公司)浓缩，得浓缩液和反渗透水。反渗透水作为提取溶剂循环利用，实现绿色化生产。浓缩液经过冷冻干燥，得到鲜人参活性提取物，经过冷冻干燥，得到鲜人参活性提取物，活性提取物重量1.02公斤。
人参活性提取物中人参皂苷rg1含量为3.15％，人参皂苷re含量为2.2％，人参皂苷rb1含量为2.7％。人参皂苷提取率为99.0％。
以上鲜人参活性提取物中人参皂苷rg1、re、rb1的含量的测定方法：
(1)仪器agilent1260高效液相色谱仪。
(2)试药人参皂苷rg1、re、rb1对照品(中国生物制品检定所)，甲醇、乙腈、磷酸均为色谱纯试剂。
(3)色谱条件色谱柱为c18(250mm×4.6mm，5um)；流动相为乙腈：1％磷酸溶液(20：80)；流速为1.0ml/min；检测波长为203nm，柱温30℃；进样量loul。
在本色谱条件下，色谱柱理论塔板数按人参皂苷rg1、re、rb1计>4000。
实施例4鲜人参活性提取物口崩片的制备
取鲜人参活性提取物60g、填充剂21g、崩解剂15g、润滑剂2g、粘合剂2g，其中，填充剂为微晶纤维素(mcc)、甘露醇以质量比5:1混合，崩解剂为交联羧甲基魔芋淀粉钠，润滑剂为硬脂酸镁，粘合剂为无水乙醇。
制备步骤为：取上述鲜人参活性提取物、填充剂、崩解剂在三维混合机中充分混合均匀，得到混合物，用粘合剂将混合物制软材，以15目筛挤压制粒，30℃下恒温干燥8小时，15目筛整粒，加入润滑剂，混匀，压制成人参活性提取物口崩片。
实施例5鲜人参活性提取物口崩片的制备
取鲜人参活性提取物粉末200克，微晶纤维素(mcc)100克，甘露醇20克，交联羧甲基魔芋淀粉钠25克，将上述物料在三维混合机中充分混合均匀，得到混合物，混合物中加入无水乙醇6ml制软材，以20目筛挤压制粒，30℃下恒温干燥8小时，20目筛整粒，加入5克硬脂酸镁，混匀，压制成每片重为500mg的人参活性提取物口崩片。
实施例6鲜人参活性提取物口崩片的制备
取鲜人参活性提取物60g、填充剂29.5g、崩解剂8g、润滑剂1.5g、粘合剂1g，其中，填充剂为微晶纤维素(mcc)、甘露醇以质量比1：5混合，崩解剂为交联羧甲基魔芋淀粉钠、交联聚维酮(pvpp)以质量比1：1的混合物，润滑剂为微粉硅胶，粘合剂为无水乙醇/甘油的混合物。
制备步骤为：取上述鲜人参活性提取物、填充剂、崩解剂在三维混合机中充分混合均匀，得到混合物，用粘合剂将混合物制软材，以30目筛挤压制粒，45℃下恒温干燥12小时，30目筛整粒，加入润滑剂，混匀，压制成人参活性提取物口崩片。
鲜人参活性提取物口崩片崩解时限测定
参照中国药典2010年版崩解时限测定方法，取人参活性提取物口崩片6片，以水为介质，温度为(37.0±1)℃.每次测定l片，从药片接触水面开始计时，直到颗粒全部通过筛网的时间为崩解时间。共测定6次.计算平均崩解时间。鲜人参活性提取物口崩片崩解时间为26秒。
实施例7鲜人参活性提取物片剂
片剂的包括以下重量份的原料制备而成：
制备步骤为：将鲜人参活性提取物和淀粉混合均匀后，制成颗粒，加入硬脂酸镁和滑石粉混合均匀后压制成片剂。每粒片剂中含鲜人参活性提取物0.1克。
实施例8鲜人参活性提取物片剂
按照如下配比制备鲜人参活性提取物片剂：
将鲜人参活性提取物和淀粉混合均匀后，制成颗粒，加入硬脂酸镁和滑石粉混合均匀后压制成10000片。
实施例9鲜人参活性提取物片剂
片剂的包括以下重量份的原料制备而成：
制备步骤为：将鲜人参活性提取物和淀粉混合均匀后，制成颗粒，加入硬脂酸镁和滑石粉混合均匀后压制成片剂。每粒片剂中含鲜人参活性提取物0.1克。
实施例10鲜人参活性提取物胶囊剂
所述胶囊剂包括以下重量份的原料制备而成：
鲜人参活性提取物1000克；
淀粉100克。
制备步骤为：将鲜人参活性提取物和淀粉混合均匀后，装胶囊制成胶囊剂。每粒胶囊剂中含鲜人参活性提取物0.2克。
实施例11鲜人参活性提取物胶囊剂
按照如下配比制备鲜人参活性提取物胶囊剂：
鲜人参活性提取物1000克；
淀粉800克。
将鲜人参活性提取物和淀粉混合均匀后，装胶囊制成5000粒。
实施例12鲜人参活性提取物胶囊剂
本发明所述胶囊剂包括以下重量份的原料制备而成：
鲜人参活性提取物1000克；
淀粉500克。
制备步骤为：将鲜人参活性提取物和淀粉混合均匀后，装胶囊制成胶囊剂。每粒胶囊剂中含鲜人参活性提取物0.2克。
实施例13.鲜人参活性提取物散剂
所述散剂包括以下重量份的原料制备而成：
鲜人参活性提取物1000克；
微晶纤维素100克。
将鲜人参活性提取物和微晶纤维素混合均匀后制成散剂，装管制西林瓶制成散剂。每瓶散剂中含鲜人参活性提取物0.5克。
实施例14.鲜人参活性提取物散剂
按照如下配比制备鲜人参活性提取物散剂：
鲜人参活性提取物1000克；
微晶纤维素300克。
将鲜人参活性提取物和微晶纤维素混合均匀后制成散剂，装管制西林瓶制成2000瓶。
实施例15.鲜人参活性提取物散剂
所述散剂包括以下重量份的原料制备而成：
鲜人参活性提取物1000克；
微晶纤维素800克。
将鲜人参活性提取物和微晶纤维素混合均匀后制成散剂，装管制西林瓶制成散剂。每瓶散剂中含鲜人参活性提取物0.5克。
使用实施例1
临床资料：选择口腔溃疡患者60例，临床符合口腔溃疡的诊断标准，年龄15-70岁，平均35岁，病程1天-10天。
2.治疗方法：患者治疗前均采用生理盐水清洁口腔，再采用无菌干棉球将创面吸干。用本发明的粉剂，上于溃疡面上，完全覆盖溃疡面，3～5次/d。用药后30min内切勿饮水或进食。持续治疗，3天为一个疗程。
疗效标准
(1)治愈:1个疗程后口腔溃疡痊愈，追踪观察3个月以上无复发。
(2)显效:口腔溃疡的复发周期显著延长，由连续不断延至1个月以上复发一次，复发后症状减轻，自愈时间缩短至3-5天。
(3)无效:1个疗程后症状无明显改善。
治疗效果：使用本发明的粉剂治疗口腔溃疡患者60例，结果治愈55例，治愈率91.7％；显效4例，显效率6.7％；无效1例，无效率1.6％；治疗时间最短为1天，最长为15天。
结论：使用本发明的鲜人参活性提取物治疗口腔溃疡具有见效快，治愈率高，用药方便，无毒副作用。
使用实施例2
随机选取70例胃溃疡患者，并随机分成2组，a组服用鲜人参活性提取物、b组服用等量的水。
用药一周后，a组31名胃溃疡患者病况好转，有效率为88％，b组仅有3名胃溃疡患者病况好转。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围，其均应涵盖在本发明的权利要求和说明书的范围当中。