本发明涉及一种具有改善性功能障碍作用的玛咖提取物，具体地说涉及从玛咖中提取的活性成分明确的玛咖提取物，其制备方法和应用，属于医药技术领域。
背景技术：
玛咖(lepidiummeyeniiwalp.)为十字花科(cruciferae)独荇菜属(lepidium)一年生草本植物。原产南美洲海拔3500～4500m的安第斯山脉，有“秘鲁国宝”或“秘鲁人参”的美誉。在近10多年来，逐渐成为全球药食两用植物开发的热点之一，各国针对它开展的科研及其应用也在不断深入。玛咖之所以从南美众多药草中脱颖而出，除了其温和的滋补作用外，其宣称的具有增强性功能的作用，也是非常重要的一个因素。现代科研揭示的玛咖功效价值得到国际医药公司和营养保健品公司的广泛关注，越来越多的玛咖产品如macapure、vimaca、imperialgold
目前有关玛咖的专利很多，但现有技术多是对玛咖原粉的利用或对玛咖提取物制备方法的简单研究，存在制备工艺复杂或设备要求较高；对玛咖有效部位提取物进行系统研究的鲜少，其也存在功效不明或有效成分含量不高等情况。如公开号为cn1357370a和cn102895281a的中国专利申请，均提供了一种玛咖有效成分提取方法，但其功效不明。公开号为cn104513173a的中国专利申请提供的玛咖提取物的制备方法，先用溶剂提取得到玛咖粗提物，然后有机溶剂萃取得到一次提取物，作为纯化原料继续进行纯化得到玛咖酰胺含量较高的玛咖提取物，其方法需要提取、萃取、过层析柱，工艺流程复杂；此外该专利中并未提供玛咖提取物质量控制方法，也未进行过其安全性研究。
本发明与现有技术相比具有如下有益效果：
本发明提供的玛咖提取物安全无毒，对改善性功能障碍、提高生育能力及抗疲劳具有明显的作用，其效果明显优于单纯的玛咖原料药，预示着很好的应用前景。
本发明提供的玛咖提取物活性成分明确、活性成分含量高，以hplc定性、定量分析，建立了严格的质量控制标准。
本发明提供的玛咖提取物制备方法简单易操作，无需过层析柱或逆流色谱，流程短，设备投入成本低、物料损失少，易实现工业化生产。
技术实现要素：
本发明目的在于提供一种活性成分明确、安全的玛咖提取物，并提供该提取物在改善性功能障碍、提高生育能力及抗疲劳方面的应用。
本发明目的是通过如下技术方案实现的：
一种改善性功能障碍的玛咖提取物，该提取物是从玛咖中提取的有效部位，玛咖酰胺含量在30％～100％，其中玛咖酰胺主要为n-苄基亚麻酰胺、n-苄基亚油酰胺和n-苄基十六碳酰胺等。其中它们的结构式如下。
所述的一种改善性功能障碍的玛咖提取物，其特征在于，按以下方法制备：用玛咖的干根，粉碎，加入有机溶剂浸泡或渗滤或在一定温度条件下回流提取，过滤，滤液除去溶剂得到玛咖提取物。
所述的制备方法，其特征在于，所述提取的有机溶剂为石油醚、乙醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、正己烷、四氯化碳中的任意1种或至少2种的组合。
所述的制备方法，其特征在于，所述提取过程中固液比为1:2～1:50(w/v)，优选1:5～1:15；
所述提取的温度为10～100℃，优选20～80℃；
所述提取过程中，持续进行机械搅拌，或辅助超声或微波；
所述提取重复1～5次，优选重复3次。
所述的玛咖提取物，其特征在于，该提取物具有改善性功能障碍、提高生育能力及抗疲劳的作用。
所述的玛咖提取物，其特征在于，加入适当药用辅料制备成片剂、丸剂、滴丸、胶囊剂、软胶囊或颗粒剂等口服剂。
本发明同时提供了玛咖提取物中活性成分的hplc含量测定方法如下：
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长为203nm，流速为1.0ml/min，柱温为25℃，流动相见表1。
表1玛咖提取物指纹图谱hplc测定流动相条件
对照品溶液的制备：取n-苄基亚麻酰胺、n-苄基亚油酰胺和n-苄基十六碳酰胺对照品适量，精密称定，加石油醚(60～90℃)制成每1ml各含n-苄基亚麻酰胺、n-苄基亚油酰胺和n-苄基十六碳酰胺0.1mg的对照品混合溶液。
供试品溶液的制备：取本品20mg，精密称定，置10ml容量瓶中，用石油醚(60～90℃)溶解，稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法：分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按干燥品计算，总玛咖酰胺含量＝n-苄基亚麻酰胺含量+n-苄基亚油酰胺含量+n-苄基十六碳酰胺含量，总玛咖酰胺含量不得少于30％。玛咖提取物中玛咖酰胺成分hplc分析见图1。
附图说明
附图是用来提供对本发明实施例的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明实施例，但并不构成对本发明实施例的限制。在附图中：
图1为玛咖提取物中n-苄基亚麻酰胺、n-苄基亚油酰胺和n-苄基十六碳酰胺的hplc分析图；图中1表示：n-苄基亚麻酰胺；图中2表示：n-苄基亚油酰胺；图中3表示：n-苄基十六碳酰胺。
具体实施方式
下面将结合本发明的实施实例来进一步说明本发明的实质内容，但本发明的内容并不局限于此。
实施例1：
取玛咖干根100kg，粉碎，过筛(40目)，药粉用石油醚(60～90℃)在80℃温度回流提取三次，每次加入石油醚(60～90℃)的量分别为原料重量的5倍、4倍、4倍，第一次回流3h，第二、三次各回流2h，滤过，合并滤液，减压浓缩回收溶剂，干燥得玛咖提取物，得量为1.34kg，得率为1.34％。该提取物主要含有玛咖酰胺类活性成分：n-苄基亚麻酰胺、n-苄基亚油酰胺和n-苄基十六碳酰胺，经hplc检测此提取物中总玛咖酰胺含量达70％。
实施例2：
取玛咖干根100kg，粉碎，过筛(20目)，药粉加入原料15倍重量乙酸乙酯在室温(20～30℃)下渗漉提取，滤过，合并滤液，减压浓缩回收溶剂，干燥得玛咖提取物；该提取物主要含有玛咖酰胺类活性成分：n-苄基亚麻酰胺、n-苄基亚油酰胺和n-苄基十六碳酰胺，经hplc检测此提取物中总玛咖酰胺含量达99％。
实施例3：
取玛咖干根100kg，粉碎，过筛(20目)，药粉加入原料5倍重量的丙酮在40℃温度下超声提取1h，滤过，合并滤液，减压浓缩回收溶剂，干燥得玛咖提取物；该提取物主要含有玛咖酰胺类活性成分：n-苄基亚麻酰胺、n-苄基亚油酰胺和n-苄基十六碳酰胺，经hplc检测此提取物中总玛咖酰胺含量达30％。
实施例4：玛咖提取物小鼠灌胃给药急性毒性试验
动物分组：将km小鼠按性别和体重分群，淘汰体重偏差较大的动物，再随机分为2组，即溶媒对照组和实施例1玛咖提取物60g/kg剂量组，每组20只，雌雄各半。
供试品配制方法：称取实施例1玛咖提取物35.00g，置于研钵中，用研钵棒充分研细后，加入少量纯水研磨混匀，将混匀溶液移入量筒中，在研钵中再加入少量纯水反复研磨清洗几次后移入量筒中，充分混匀为棕黄色混悬液，最终玛咖提取物体积为70ml，浓度为0.50g/ml。现配现用。
给药方法及检测方法：按40ml/kg的给药容积在24h内灌胃给予实施例1玛咖提取物3次，间隔4h。小鼠灌胃给予实施例1玛咖提取物后连续观察4h，以后每天至少观察一次，共14天。主要观察动物饮食、外观、行为活动、分泌物、排泄物等是否异常，死亡情况，中毒反应症状及其起始时间、严重程度、持续时间、是否可逆及恢复时间等。
试验结果与分析：在本实验条件下，实施例1玛咖提取物小鼠灌胃急性毒性试验的最大给药量为60.00g/kg(相当于生药量4477.61g/kg)，动物给药后均未出现死亡。给药后各剂量组动物体重均持续增长，与溶媒对照组比较均无显著性差异(p>0.05)。结果表明，实施例1玛咖提取物的安全系数较高，使用安全。
实施例5：玛咖提取物对小鼠性能力的影响
阳性对照药：丙酸睾酮注射液，25mg/支，天津金耀氨基酸有限公司生产，批号：1202061。人用丙酸睾酮注射液的给药剂量为50mg/次，每周2～3次，经剂量换算得到小鼠的给药剂量约为10mg/kg，给药时按0.4ml/kg体重给药体积，肌肉注射给药，每3天给药1次。
实验方法：选择96只雄性性成熟km小鼠，随机分为溶媒对照组(纯水)、丙酸睾丸酮组(10mg/kg，0.4ml/kg)、玛咖原料药低(2.2g/kg)、中(4.4g/kg)、高剂量组(8.8g/kg)和实施例1提取物低(0.03g/kg)、中(0.06g/kg)、高剂量组(0.12g/kg)，每组12只。丙酸睾丸酮组每3天肌肉注射1次，其余各组均连续灌胃给药35d，灌胃容积均为0.2ml/10g。观察交配前24h雌鼠皮下注射苯甲酸雌二醇0.04mg/只，交配前4h雌鼠皮下注射黄体酮注射液0.2mg/只，使雌鼠动情期相同，试验于晚上7：00～11：00进行，将雄性小鼠单独放入笼中5min，使其适应环境，然后每笼放入1只雌鼠，观察记录捕捉潜伏期(自雌鼠投入至雄鼠第1次捕捉雌鼠的时间)、20min内雄鼠捕捉雌鼠的次数、交配潜伏期(自雌鼠投入至雄鼠第1次与雌鼠交配的时间)、20min内交配次数。
结果计算及统计分析：结果用
表2玛咖原料药、玛咖提取物对小鼠性能力的影响
注：与溶媒对照组比较：*p<0.05，**p<0.01
雄鼠性能力观察结果表明，与溶媒对照组比较，玛咖提取物0.06g/kg剂量连续给药20天可显著增加雄鼠捕捉和交配次数(p<0.01)；与溶媒对照组比较，玛咖提取物0.03g/kg剂量连续给药20天可显著增加雄鼠捕捉和交配次数(p<0.05)，结果表明，玛咖提取物对小鼠性能力具有明显的提升作用。与溶媒对照组比较，玛咖原料药组雄鼠捕捉和交配次数无明显变化，经统计学分析，无显著性差异(p>0.05)，结果显示：玛咖提取物的活性高于玛咖原料药。
实施例6：玛咖提取物抗疲劳作用
对小鼠负重游泳时间的影响：取spf级km小鼠84只，随机分为7组，即溶媒对照组(纯水)、玛咖原料药低(2.2g/kg)、中(4.4g/kg)、高剂量组(8.8g/kg)和实施例1提取物低(0.03g/kg)、中(0.06g/kg)、高剂量组(0.12g/kg)，每组12只，雌雄各半。各组均以0.2ml/10g灌胃给药，1次/d，连续30d。末次给予受试样品30min后，将尾根部负荷5％体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。水深不少于30cm，水温25℃±1℃，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，即小鼠负重游泳时间。若试验组负重游泳时间明显高于溶媒对照组，且有显著性差异，可判定该实验结果阳性。
结果计算及统计分析：实验数据以
表3玛咖原料药、玛咖提取物对小鼠负重游泳时间的影响
注：与溶媒对照组比较：*p<0.05，**p<0.01
试验结果显示：与溶媒对照组比较，玛咖提取物0.03g/kg和0.06g/kg剂量连续给药30d可显著增加小鼠负重游泳时间(p<0.05)；与溶媒对照组比较，玛咖提取物0.12g/kg剂量连续给药30d可显著增加小鼠负重游泳时间(p<0.01)；玛咖原料药8.8g/kg剂量连续给药30d可显著增加小鼠负重游泳时间(p<0.05)。结果表明，玛咖提取物对小鼠负重游泳时间具有明显的提升作用，具备明显的抗疲劳作用，其活性高于玛咖原料药。
综合实施例4、5和6可见，本发明玛咖提取物安全、有效，对改善性功能障碍及抗疲劳作用显示出良好的效果，达到了本发明的目的。
实施例7：玛咖提取物软胶囊的制备
内容物的制备：将实施例1玛咖提取物加入药用辅料大豆油适量，备用。
化胶：将明胶、甘油、水按1:0.4:1的比例放入化胶桶中，水浴夹套加热，使其溶化，加入0.2％乙酯和0.02％丁酯，1％氧化铁棕色素，搅拌溶解，60℃保温1小时，-0.06mpa下真空脱出气泡，保温过滤，成为均质胶液备用。
压制成丸：将胶液用压缩空气，保温输送入压丸机左右胶液盒中，启动自动旋转扎囊机，以2转/分钟控制系统速度，采用了10滴量的椭圆形模具，装入内容物，压制胶丸。
定形干燥：胶丸在转笼中冷却定形4小时，然后再用乙醇洗涤去油，干燥即得。
上述方法制备得的软胶囊是新一代的玛咖制剂。