一种含苯基哌嗪的染料木素衍生物治疗口腔溃疡的方法与流程

本发明公开一种染料木素衍生物在治疗口腔溃疡方面的应用，属于药品等相关产品领域。

背景技术：

口腔溃疡是口腔常见疾病之一，人群发病率为10%~17%，具有周期性且复发率高的特点。现有研究仍不能完全解释口腔溃疡的发病机制，诱发口腔溃疡的因素包括增强的氧化应激反应、局部创伤、精神压力与内分泌紊乱、遗传、病毒或细菌感染、食物过敏、维生素或微量元素缺乏等。目前，口腔溃疡的治疗包括全身治疗和局部治疗，由于全身治疗如中药方剂，用药繁琐、副反应较多、药效缓慢，故对于口腔溃疡的治疗更多数研究更倾向于外部局部治疗。

染料木素（genistein）是自然界中最常见的一种黄酮类化合物，化学命名称为5,7,4’-三羟基异黄酮，主要存在于豆科之中，在槐角、山豆根中的含量较大，具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤作用、对血管的防护作用、提高免疫力和抗菌消炎作用等。蔡佳利等在《含哌嗪类抗微生物药物研究进展》中指出哌嗪也具有抗氧化、消炎的作用，且哌嗪基团是增效

技术实现要素：
基团，本研究将染料木素与哌嗪进行化学接枝，得到衍生物，由于孪团效应使得衍生物的消炎作用增强”。

染料木素衍生物的分子式：c28h28n2o5；分子量：472.52；命名为：8-(（4-（2,4-二甲氧基苯基）哌嗪-1-基）甲基）-5,7-二羟基-3-（4-羟基苯基）-4h-苯并吡喃-4-酮；以下称染料木素苯基哌嗪衍生物（gpd），结构式如附图14。

经检索未见该染料木素衍生物在治疗口腔溃疡方面的应用报道。本研究表明gpd具有抗炎、抗氧化作用，其具体机制如下：通过抑制促炎因子tnf-α，抑制可引发口腔溃疡的炎症反应；通过抑制转录因子nf-κb活化，进而调节复杂的促炎细胞因子网络，减轻口腔溃疡的发病程度以及黏膜损伤；通过促进treg细胞分泌il-10，il-10的负反馈作用起到抑制炎症的作用；通过抑制no作为气体信号分子对炎症反应的调节作用，减弱细胞毒性，有助于口腔细胞的恢复；通过促进细胞内ampk的生成，显著降低机体mtor的含量，抑制了炎症细胞的生长与繁殖和炎症信息的传递，从而抑制口腔溃疡的发作；超氧化物歧化酶(sod)是一种抗氧化活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，同时能够提高机体的免疫力，使机体不受炎症、肿瘤的干扰，通过提高sod的含量，增强机体清除ros等有害物质的能力，抑制了脂质的氧化，使得脂质不能生成mda，从而减轻溃疡的损伤程度。此外，还可以是上面提到的机制一个或几个的综合作用，如协同、增效、拮抗等。

1.一种染料木素衍生物在治疗口腔溃疡方面的应用，其特征在于：

（1）豚鼠用乙醚麻醉，将棉球置于直径为5mm的玻璃管一端（使之与管口平齐），蘸取90%苯酚溶液，灼烧豚鼠左侧面颊60s。24h后观察，豚鼠口腔黏膜上出现直径约5mm的溃疡，口腔溃疡建模成功。

（2）用消毒药棉吸附相应染料木素衍生物（gpd）液0.5ml，敷在豚鼠口腔溃疡处3min，然后以温生理盐水清洗用药局部。每天用药1次，连续用药5天。

（3）心脏取血法取豚鼠血液，加抗凝剂edta，4℃下，3000r，10min，取血浆备用。测定相关炎症因子、抗炎因子、信号通路因子、信号通路及氧化应激标记等指标。

（4）如权利要求1所述的一种染料木素衍生物在治疗口腔溃疡方面的应用，gpd的化学名字叫染料木素衍生物8-(（4-（2,4-二甲氧基苯基）哌嗪-1-基）甲基）-5,7-二羟基-3-（4-羟基苯基）-4h-苯并吡喃-4-酮，其结构式见附图14。

（5）如权利要求2所述的一种染料木素衍生物在治疗口腔溃疡方面的应用，上述染料木素苯基哌嗪衍生物为染料木素与1-（2,4-二甲氧基苯基）哌嗪的化学合成物。

（6）如权利要求1所述的一种染料木素衍生物在治疗口腔溃疡方面的应用，gpd治疗口腔溃疡的机制是：通过抑制促炎因子tnf-α，从而抑制可引发口腔溃疡的炎症反应；通过抑制转录因子nf-κb活化，进而调节复杂的促炎细胞因子网络，减轻口腔溃疡的发病程度以及黏膜损伤；通过促进treg细胞分泌il-10，il-10的负反馈作用起到抑制炎症的作用；通过抑制no作为气体信号分子对炎症反应的调节作用，减弱细胞毒性，有助于口腔细胞的恢复；通过促进细胞内ampk的生成，显著降低机体mtor的含量，抑制了炎症细胞的生长与繁殖和炎症信息的传递，从而抑制口腔溃疡的发作；超氧化物歧化酶(sod)是一种抗氧化活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，抑制炎症，通过提高sod的含量，增强机体清除ros等有害物质的能力，抑制了脂质的氧化，使得脂质不能生成mda，从而减轻溃疡的损伤程度。

（7）如权利要求1所述的一种染料木素衍生物在治疗口腔溃疡方面的应用，gpd治疗口腔溃疡的机制可以是权利要求4中提到机制一个或几个的综合作用。

（8）如权利要求1所述的一种染料木素衍生物在治疗口腔溃疡方面的应用，gpd用量为0.45~45mg/kg。

附图说明

图1～3分别为1d、2d、3d时间下染料木素衍生物对豚鼠口腔溃疡治愈效果。

图4～5分别为染料木素衍生物治疗后豚鼠血浆中炎症因子tnf-α、nf-κb的浓度。

图6为染料木素衍生物治疗后豚鼠抗炎因子il-10的浓度。

图7为染料木素衍生物治疗后豚鼠调节因子和生长因子peg-2的浓度。

图8为染料木素衍生物治疗后豚鼠信号通路因子no的浓度。

图9、10为染料木素衍生物治疗后豚鼠ampk-mtor信号通路的浓度。

图11为染料木素衍生物治疗后豚鼠氧化应激标记ros的浓度。

图12为染料木素衍生物治疗后豚鼠氧化应激标记sod的浓度。

图13为染料木素衍生物治疗后豚鼠氧化应激标记mda的浓度。

图14为染料木素苯基哌嗪衍生物结构图。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明进一步说明，但这些实施例并不用于限制本发明的保护范围和适用范围。

实施例1

1材料与方法

1.1实验试剂和原料

豚鼠tnf-α、mtor、pge-2、ros、nf-κb、ampk、no、il-10、mda、sod试剂盒等均购自上海岚派生物科技有限公司。染料木素苯基哌嗪衍生物（gpd），99%，实验室自制；乙醇等，分析纯，烟台市双双化工有限公司；西瓜霜(mp)，桂林三金药业股份有限公司。

1.2实验仪器

数字熔点仪wrs-1b，上海科学仪器有限公司；磁力搅拌器8s-1，江苏省金坛市金城国盛实验仪器厂；三用紫外仪zf-2，上海市安亭电子仪器厂；精密分析天平alc210.3，上海高致精密仪器有限公司；电热恒温鼓风干燥箱dhg9070，上海精宏实验设备有限公司。

1.3苯酚诱导的豚鼠口腔溃疡

选取60只健康豚鼠(250-270g)，济南金丰实验动物有限公司，生产许可证：scxk（鲁）2014006）雌雄各半，随机分为5组：正常组、模型组、dmso组、mp组（45mg/kg）、gpd组（0.45mg/kg）。除正常组外，其余组豚鼠用乙醚麻醉，将棉球置于直径为5mm的玻璃管一端（使之与管口平齐），蘸取90%苯酚溶液，灼烧豚鼠左侧面颊60s。24h后观察，豚鼠口腔黏膜上出现直径约5mm的溃疡，口腔溃疡建模成功，然后随机分组，每组12只。各给药组分别用消毒药棉吸附相应药液0.5ml（模型组吸附0.5ml0.9%氯化钠溶液），敷在豚鼠口腔溃疡处3min，然后以温生理盐水清洗用药局部。每天用药1次，连续用药5天。空白组不予处理。于用药后的第1、3、5天用数码照像头摄下豚鼠口腔溃疡情况。

1.4口腔溃疡程度分析

溃疡程度评判分为5个等级标准：“0”表示无溃疡，口腔黏膜正常；“ⅰ”表示有溃疡，溃疡表面无明显假膜；“ⅱ”表示溃疡表面有一层黄白色假膜，周围无水肿；“ⅲ”表示溃疡表面假膜较厚，且周围伴有炎性水肿；“ⅳ”表示溃疡表面假膜厚，周围伴有明显炎性水肿。表中数字表示每个不同程度的只数。

1.5具体指标的测量

心脏取血法取豚鼠血液，加抗凝剂edta，4℃下，3000r，10min，取血浆备用。用豚鼠pge-2、ros、il-10、mda、sod试剂盒测量。

2结果与分析

2.1gpd对豚鼠口腔溃疡治愈的影响

gpd对豚鼠口腔溃疡程度的影响由图1～3可知，等级数据经ridit检验。空白组无溃疡出现，与空白组比较，在1～5d内，模型组溃疡局部充血水肿显著(p<0.01)，说明口腔溃疡建模成功。与模型组相比较，在第1d，各给药组溃疡程度无明显差异；第3d时，mp极显著降低口腔溃疡程度（p<0.01），gpd可显著降低口腔溃疡程度(p<0.05)；第5d时，经mp和gpd治疗的豚鼠，其口腔溃疡程度均显著减轻(p<0.01，p<0.05)。由此可知，gpd可以降低口腔溃疡程度，促进口腔溃疡处皮肤的愈合、恢复，具有显著治疗口腔溃疡的作用。gpd治疗效果具有时效性，3d内就可以发生显著治疗作用，5d痊愈率就可达16.7%，口腔溃疡程度100%达到3级以下。

2.2gpd对抗炎因子的影响

白介素10(il-10)主要由treg细胞分泌，是一种抗炎因子，可调节免疫细胞的生长和分化，在免疫反应中主要发挥负调控作用。前列腺素e2(pge-2)，是细胞体内一种重要的调节因子和生长因子，具有免疫抑制和抗炎作用。

数据统计分析表明dmso对抗炎因子的作用无影响，因此dmso对口腔溃疡治疗无作用，不影响本实验对gpd的客观评价。与正常组相比，模型组抗炎因子il-10、peg-2含量显著降低，gpd治疗后提高了抗炎因子il-10、peg-2的水平，il-10提高了62%，peg-2提高了0.03%。

本研究中，经mp和gpd治疗后，il-10表达水平显著高于模型组，表明，mp和gpd通过促进treg细胞分泌il-10，il-10的负反馈作用起到抑制炎症的作用。另外，mp和gpd能够促进peg-2的生成，促进口腔黏膜的血液流动，抑制炎症的产生，有助于口腔黏膜的修复。

综上所述，经gpd治疗后，豚鼠血浆中il-10、pge-2指标的含量相比于模型组有较为显著地提升，表明gpd能够对口腔溃疡起到较为显著地的抑制作用。

2.3gpd对氧化应激标记的影响

图10~12表明，模型组与溶剂组相比，ros、sod、mda含量差别不显著，可排除dmso对实验结果的影响。正常情况下豚鼠血浆中ros、mda的含量较低，sod的含量较高，患有口腔溃疡的豚鼠血浆中ros、mda的含量显著升高，sod含量显著降低。与模型组相比gpd组mda含量降低了12%，sod含量提高了4%。

本研究中，苯酚灼烧导致机体内产生过量的ros，ros氧化脂质使其转化为mda，导致口腔黏膜出现溃疡。gpd能够通过提高sod的含量，增强机体清除ros等有害物质的能力，抑制了脂质的氧化，使得脂质不能生成mda，从而减轻溃疡的损伤程度。

本研究通过苯酚诱导建立豚鼠口腔溃疡模型，从炎症因子、氧化应激两个方面研究了gpd对溃疡的抑制作用。研究发现经gpd治疗后，豚鼠血浆中sod、il-10、pge-2指标的含量相比于模型组有较为显著地提升，而mda指标的含量显著下降，表明gpd能够对口腔溃疡起到显著地的抑制作用。其效果优于市场现有的能够治疗口腔溃疡的药物（例如西瓜霜）。

实施例2

1材料与方法

1.1实验试剂和原料

同实施例1。

1.2实验仪器

同实施例1。

1.3苯酚诱导的豚鼠口腔溃疡

选取60只健康豚鼠(250-270g)，济南金丰实验动物有限公司，生产许可证：scxk（鲁）2014006）雌雄各半，随机分为5组：正常组、模型组、dmso组、mp组（45mg/kg）、gpd组（4.5mg/kg）。除正常组外，其余组豚鼠用乙醚麻醉，将棉球置于直径为5mm的玻璃管一端（使之与管口平齐），蘸取90%苯酚溶液，灼烧豚鼠左侧面颊60s。24h后观察，豚鼠口腔黏膜上出现直径约5mm的溃疡，口腔溃疡建模成功，然后随机分组，每组12只。各给药组分别用消毒药棉吸附相应药液0.5ml（模型组吸附0.5ml0.9%氯化钠溶液），敷在豚鼠口腔溃疡处3min，然后以温生理盐水清洗用药局部。每天用药1次，连续用药5天。空白组不予处理。于用药后的第1、3、5天用数码照像头摄下豚鼠口腔溃疡情况。

1.4口腔溃疡程度分析

同实施例1。

1.5具体指标的测量

同实施例1。

2结果与分析

2.1gpd对豚鼠口腔溃疡治愈的影响

gpd对豚鼠口腔溃疡程度的影响由图1～3可知，等级数据经ridit检验。空白组无溃疡出现，与空白组比较，在1～5d内，模型组溃疡局部充血水肿显著(p<0.01)，说明口腔溃疡建模成功。与模型组相比较，在第1d，各给药组溃疡程度无明显差异；第3d时，mp极显著降低口腔溃疡程度（p<0.01），gpd可显著降低口腔溃疡程度(p<0.05)；第5d时，经mp和gpd治疗的豚鼠其口腔溃疡程度均显著减轻(p<0.01，p<0.05)。由此可知，gpd可以降低口腔溃疡程度，促进口腔溃，疡处皮肤的愈合、恢复，具有显著治疗口腔溃疡的作用。gpd治疗效果具有时效性，3d内就可以发生显著治疗作用，5d痊愈率就可达16.7%，口腔溃疡程度100%达到3级以下。

2.2gpd对炎症反应的影响

2.2.1gpd对炎症因子的影响

数据统计分析表明dmso对炎症因子的作用无影响，因此dmso对口腔溃疡治疗无作用，不影响本实验对gpd的客观评价。从图2可知，与正常组相比，模型组显著增加了豚鼠血清中炎症因子tnf-α、nf-κb的水平。与模型组相比，gpd治疗后tnf-α含量降低了3%，但对nf-κb没有显著影响。

本研究中，gpd一方面抑制了促炎因子tnf-α，从而抑制了可以引发口腔溃疡的炎症反应，另一方面gpd能够抑制nf-κb活化，进而调节复杂的促炎细胞因子网络，减轻口腔溃疡的发病程度以及黏膜损伤。

2.2.2gpd对抗炎因子的影响

白介素10(il-10)主要由treg细胞分泌，是一种抗炎因子，可调节免疫细胞的生长和分化，在免疫反应中主要发挥负调控作用。前列腺素e2(pge-2)，是细胞体内一种重要的调节因子和生长因子，具有免疫抑制和抗炎作用。

数据统计分析表明dmso对抗炎因子的作用无影响，因此dmso对口腔溃疡治疗无作用，不影响本实验对gpd的客观评价。与正常组相比，模型组抗炎因子il-10、peg-2含量显著降低，gpd治疗后显著提高了抗炎因子il-10、peg-2的水平，gpd组提高了110%和2%。

本研究中，经mp和gpd治疗后，il-10表达水平显著高于模型组，表明，mp和gpd通过促进treg细胞分泌il-10，il-10的负反馈作用起到抑制炎症的作用。另外，mp和gpd能够促进peg-2的生成，促进口腔黏膜的血液流动，抑制炎症的产生，有助于口腔黏膜的修复。

2.3gpd对ampk-mtor信号通路的影响

ampk是“能量的感受器”，体内能量的变化，即atp/amp的数值发生变化，能够激活细胞内的ampk。mtor信号通路，能够调节细胞生长与繁殖，与炎症的发作密切相关，能够传递炎症信息，而ampk能够抑制mtor信号通路。

经数据分析可知模型组与溶剂组的ampk和mtor含量差别不显，因此可以排除dmso对实验结果的影响。图9表明，模型组中mtor的水平显著高于正常组，经gpd连续治疗5天后，可显著抑制mtor的过量表达，gpd组降低了54%。图10中，模型组与正常组相比，ampk的水平显著降低，但gpd组ampk水平显著提高，提高了52%。

研究表明，gpd通过促进细胞内ampk的生成，显著降低机体mtor的含量，抑制了炎症细胞的生长与繁殖和炎症信息的传递，从而抑制口腔溃疡的发作。

2.4gpd对氧化应激标记的影响

ros指需氧细胞在代谢过程中产生一系列的活性氧，具有强氧化性，过高的活性氧水平会对细胞和基因结构造成损坏。丙二醛(mda)是膜脂过氧化重要产物之一，它的产生能引起膜的损伤，其含量可判定膜脂过氧化程度，可间接测定膜系统受损程度。超氧化物歧化酶(sod)是一种抗氧化活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，不断地补充sod可增强机体抗衰老的能力。

图11~13表明，模型组与溶剂组相比，ros、sod、mda含量差别不显著，可排除dmso对实验结果的影响。正常情况下豚鼠血浆中ros、mda的含量较低，sod的含量较高，患有口腔溃疡的豚鼠血浆中ros、mda的含量显著升高，sod含量显著降低。gpd组ros和mda含量分别降低了11%和34%，sod含量提高了10%。

本研究中，苯酚灼烧导致机体内产生过量的ros，ros氧化脂质使其转化为mda，导致口腔黏膜出现溃疡。gpd能够通过提高sod的含量，增强机体清除ros等有害物质的能力，抑制了脂质的氧化，使得脂质不能生成mda，从而减轻溃疡的损伤程度。

本研究通过苯酚诱导建立豚鼠口腔溃疡模型，从炎症因子、氧化应激、信号通路三个方面研究了gpd对溃疡的抑制作用。研究发现经gpd治疗后，豚鼠血浆中sod、il-10、pge-2、ampk指标的含量相比于模型组有较为显著地提升，而tnf-α、mda、mtor、ros等指标的含量显著下降，表明gpd能够对口腔溃疡起到显著地的抑制作用。其效果优于市场现有的能够治疗口腔溃疡的药物（例如西瓜霜）。

实施例3

1材料与方法

1.1实验试剂和原料

同实施例1。

1.2实验仪器

同实施例1。

1.3苯酚诱导的豚鼠口腔溃疡

选取60只健康豚鼠(250-270g)，济南金丰实验动物有限公司，生产许可证：scxk（鲁）2014006）雌雄各半，随机分为5组：正常组、模型组、dmso组、mp组（45mg/kg）、gpd组（gpd,45mg/kg）。除正常组外，其余组豚鼠用乙醚麻醉，将棉球置于直径为5mm的玻璃管一端（使之与管口平齐），蘸取90%苯酚溶液，灼烧豚鼠左侧面颊60s。24h后观察，豚鼠口腔黏膜上出现直径约5mm的溃疡，口腔溃疡建模成功，然后随机分组，每组12只。各给药组分别用消毒药棉吸附相应药液0.5ml（模型组吸附0.5ml0.9%氯化钠溶液），敷在豚鼠口腔溃疡处3min，然后以温生理盐水清洗用药局部。每天用药1次，连续用药5天。空白组不予处理。于用药后的第1、3、5天用数码照像头摄下豚鼠口腔溃疡情况。

1.4口腔溃疡程度分析

同实施例1。

1.5具体指标的测量

同实施例1。

2结果与分析

2.1gpd对豚鼠口腔溃疡治愈的影响

gpd对豚鼠口腔溃疡程度的影响由图1～3可知，等级数据经ridit检验。空白组无溃疡出现，与空白组比较，在1～5d内，模型组溃疡局部充血水肿显著(p<0.01)，说明口腔溃疡建模成功。与模型组相比较，在第1d，各给药组溃疡程度无明显差异；第3d时，mp极显著降低口腔溃疡程度（p<0.01），gpd可显著降低口腔溃疡程度(p<0.05)；第5d时，经mp和gpd治疗的豚鼠，其口腔溃疡程度均显著减轻(p<0.01，p<0.05)。由此可知，gpd可以降低口腔溃疡程度，促进口腔溃疡处皮肤的愈合、恢复，具有显著治疗口腔溃疡的作用。gpd治疗效果具有时效性，3d内就可以发生显著治疗作用，5d痊愈率就可达16.7%，口腔溃疡程度100%达到3级以下。

2.2gpd对炎症反应的影响

2.2.1gpd对炎症因子的影响

数据统计分析表明dmso对炎症因子的作用无影响，因此dmso对口腔溃疡治疗无作用，不影响本实验对gpd的客观评价。从图4～5可知，与正常组相比，模型组显著增加了豚鼠血清中炎症因子tnf-α、nf-κb的水平。与模型组相比，gpd显著降低炎症因子tnf-α和nf-κb的含量，抑制率分别为33%和8%，与mp组相比，经gpd治疗过后，豚鼠血浆中炎症因子nf-κb的水平低于mp组。

本研究中，gpd一方面抑制了促炎因子tnf-α，从而抑制了可以引发口腔溃疡的炎症反应，另一方面gpd能够抑制nf-κb活化，进而调节复杂的促炎细胞因子网络，减轻口腔溃疡的发病程度以及黏膜损伤。

2.2.2gpd对抗炎因子的影响

白介素10(il-10)主要由treg细胞分泌，是一种抗炎因子，可调节免疫细胞的生长和分化，在免疫反应中主要发挥负调控作用。前列腺素e2(pge-2)，是细胞体内一种重要的调节因子和生长因子，具有免疫抑制和抗炎作用。

数据统计分析表明dmso对抗炎因子的作用无影响，因此dmso对口腔溃疡治疗无作用，不影响本实验对gpd的客观评价。与正常组相比，模型组抗炎因子il-10、peg-2含量显著降低，gpd治疗后显著提高了抗炎因子il-10、peg-2的水平，il-10和peg-2含量分别提高了132%和12%。与mp组相比，gpd组抗炎因子il-10、peg-2的水平高于mp组，且il-10的含量极显著高于mp组，基本可以说明gpd对豚鼠口腔溃疡的抑制作用优于mp。

本研究中，经mp和gpd治疗后，il-10表达水平显著高于模型组，表明，mp和gpd通过促进treg细胞分泌il-10，il-10的负反馈作用起到抑制炎症的作用。另外，mp和gpd能够促进peg-2的生成，促进口腔黏膜的血液流动，抑制炎症的产生，有助于口腔黏膜的修复。

2.3gpd对信号通路因子的影响

2.3.1gpd对no信号通路的影响

no是参与体内信号转导的气体信号分子，在神经系统、免疫系统、心血管系统等都发挥着重要作用，具有细胞毒性，高浓度no参与感染、炎症反应和自身免疫反应，对机体产生不利影响。

经数据分析可知模型组与溶剂组的no含量差别不显，因此可以排除dmso对实验结果的影响。图8表明，模型组中no的水平显著高于正常组，经gpd连续治疗5天后，可显著抑制no的过量表达，no的含量降低了20%。gpd组与mp组相比，可知gpd组no含量显著低于mp组。

本研究中，gpd能够显著减少no的含量，因而可以抑制no作为气体信号分子对炎症反应的调节作用，减弱细胞毒性，有助于口腔细胞的恢复。

2.3.2gpd对ampk-mtor信号通路的影响

ampk是“能量的感受器”，体内能量的变化，即atp/amp的数值发生变化，能够激活细胞内的ampk。mtor信号通路，能够调节细胞生长与繁殖，与炎症的发作密切相关，能够传递炎症信息，而ampk能够抑制mtor信号通路。

经数据分析可知模型组与溶剂组的ampk和mtor含量差别不显，因此可以排除dmso对实验结果的影响。图9表明，模型组中mtor的水平显著高于正常组，经gpd连续治疗5天后，可显著抑制mtor的过量表达，mtor的含量降低了62%。图10中，模型组与正常组相比，ampk的水平显著降低，但gpd组ampk水平显著提高，提高了84%，gpd组与mp组相比，可发现gpd的效果优于mp。

研究表明，gpd通过促进细胞内ampk的生成，显著降低机体mtor的含量，抑制了炎症细胞的生长与繁殖和炎症信息的传递，从而抑制口腔溃疡的发作。

2.4gpd对氧化应激标记的影响

ros指需氧细胞在代谢过程中产生一系列的活性氧，具有强氧化性，过高的活性氧水平会对细胞和基因结构造成损坏。丙二醛(mda)是膜脂过氧化重要产物之一，它的产生能引起膜的损伤，其含量可判定膜脂过氧化程度，可间接测定膜系统受损程度。超氧化物歧化酶(sod)是一种抗氧化活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质，不断地补充sod可增强机体抗衰老的能力。

图11~13表明，模型组与溶剂组相比，ros、sod、mda含量差别不显著，可排除dmso对实验结果的影响。正常情况下豚鼠血浆中ros、mda的含量较低，sod的含量较高，患有口腔溃疡的豚鼠血浆中ros、mda的含量显著升高，sod含量显著降低。与模型组相比gpd组ros、mda过量、sod被抑制的情况得到显著改善，经gpd治疗后豚鼠血浆中ros和mda的含量分别降低了36%和40%，而sod的含量提高了47%。gpd组ros、mda含量显著低于药物组，sod含量高于药物组，证明gpd对豚鼠口腔溃疡的抑制作用优于西瓜霜。

本研究中，苯酚灼烧导致机体内产生过量的ros，ros氧化脂质使其转化为mda，导致口腔黏膜出现溃疡。gpd能够通过提高sod的含量，增强机体清除ros等有害物质的能力，抑制了脂质的氧化，使得脂质不能生成mda，从而减轻溃疡的损伤程度。

本研究通过苯酚诱导建立豚鼠口腔溃疡模型，从氧化应激的方面研究了gpd对溃疡的抑制作用。研究发现经gpd治疗后，豚鼠血浆中sod、il-10、pge-2、ampk指标的含量相比于模型组有较为显著地提升，而tnf-α、nf-κb、no、mda、mtor、ros等指标的含量显著下降，表明gpd能够对口腔溃疡起到显著地抑制作用，其效果优于市场现有的能够治疗口腔溃疡的药物（例如西瓜霜）。