本申请主张2016年1月15日申请的美国临时专利申请案第62/279,368号及2016年4月19日申请的中国专利申请案第201610243279.5号的优先权，以上申请案的全部内容以全文引用的方式并入本文中。
本发明涉及一种含有青蒿琥酯的药物组合物，制备该组合物的方法，以及该组合物作为药物的用途。
技术背景
青蒿素是1972年从青蒿(artemisiaannua)中分离出的活性抗疟成分，青蒿素的衍生物青蒿琥酯是在碱性介质中通过二氢青蒿素与琥珀酸酐反应而制得(cn85100781)。青蒿琥酯广泛用于治疗疟疾，特别是有效治疗重症疟疾和多种耐药性疟疾。更重要的是，青蒿琥酯是唯一可以静脉注射的青蒿素类药物，世界卫生组织(who)指南推荐静脉注射青蒿琥酯作为重症疟疾的一线治疗药物(worldhealthorganization,guidelinesforthetreatmentofmalaria；secondedition2010)。此外，最近的研究表明，青蒿琥酯具有广泛的抗疟之外的生物活性，从抗癌，抗病毒，治疗炎症和免疫疾病以及其他寄生虫相关的感染(例如日本血吸虫和弓形虫)到抗真菌(ho等人，pharmacolther，2014，142(1)：126-139)。
刘描述了用青蒿琥酯治疗疟疾(青蒿琥酯的研究与开发，丽江出版社，2010年7月1日，3-20)。efferth等人报告了青蒿琥酯对美国国立卫生研究院的部门治疗方案的55种癌细胞株及耐受多柔比星，长春新碱，甲氨蝶呤和羟基脲的癌细胞株的抗癌活性(intjoncol，2001，18，767-773)。ho等人发表了青蒿素类药物用于疟疾之外疾病治疗的综合评价，包括癌症，病毒，真菌感染，其他寄生虫感染和炎症疾病(pharmacolther，2014,142，(1)：126-39)。yu等人描述了用青蒿琥酯治疗红斑狼疮(chinesejderm，1997，30，61-53)。
sun等人报告了青蒿素对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的治疗作用(zhongguozhongyaozazhi，2007，32，115：1547-51)。zhang等人描述了青蒿琥酯联合长春瑞滨和顺铂化疗方案用于治疗患者晚期非小细胞肺癌(jchinintegrmed，2008，6(2)：134)。li等人报告了青蒿琥酯对热灭活大肠杆菌诱导的小鼠模型脓毒症的治疗(intimmnopharmacol，2008，8，379-389)。liu等人报告了青蒿琥酯用于治疗重症疟疾及重症疟疾感染引起的脓毒症或器官损伤(jtropmed，2009，7，655-656)。wo2012168450描述了青蒿琥酯及其类似物对创伤性出血、脑卒和烧伤引起的器官损伤的保护作用；及青蒿琥酯降低心肌梗塞中的梗死面积或降低梗塞发生后的损伤程度。wo2014090306描述了青蒿琥酯用于治疗急性、慢性肾损伤，尿毒症，及用于会导致缺血/再灌注的手术(肾移植，肾和胰腺移植，冠状动脉搭桥术)。
reid等人描述了青蒿琥酯能阻断遭受主动脉弓缩窄的成年小鼠的左心室肥大及改善心脏功能(jmolcellcardiol，2016,97：106-13)。li等人描述了青蒿素及其类似物能增强gaba信号，将ɑ胰腺细胞转化为β样细胞，恢复产生胰岛素能力(cell，2017，168，86-100)。
wo2010/0137246描述了青蒿琥酯在治疗哮喘和呼吸窘迫综合征中的用途。cn20151513816描述了青蒿琥酯用于治疗特发性肺纤维化。lai等人描述了使用青蒿琥酯以减轻多种致病因子诱导的肝纤维化(eurjpharmacol，2015，765，234-241)。本文所述的所有参考文献通过引用并入本文中。
青蒿琥酯可溶于有机溶剂，如丙酮和甲醇，微溶于水。青蒿琥酯可用5％碳酸氢钠溶液溶解，配制成水溶液，该配方是青蒿琥酯唯一的注射用剂型，并且已在临床上使用了30多年。许多研究发现青蒿琥酯在碱性和酸性条件下不稳定。水分和热也可使青蒿琥酯降解(agnihotri等人，jpharmacyres，2013，6：117-122)。因此，青蒿琥酯注射剂必须在使用前临时制备。按照制造商(桂林药厂，广西，中国)的指导，青蒿琥酯碳酸氢钠注射剂的制备包括两个步骤。单位剂量为60mg，第一步是向青蒿琥酯粉中加入0.6ml或1ml的5％碳酸氢钠水溶液(分别为青蒿琥酯的2.3当量或3.8当量)，需要剧烈振摇数分钟溶解青蒿琥酯以得到澄清溶液，第二步是用5.4ml或5ml的5％葡萄糖水或生理盐水稀释至浓度为60mg/6ml。在加入5％碳酸氢钠溶液时，产生明显的二氧化碳气泡，从而减少了药物粉末与溶解介质的接触，延长了完全溶解所需的时间。此外，由于二氧化碳气泡引起的混浊，使确定青蒿琥酯是否完全溶解变得非常困难。这种方法溶解慢而且复杂。在该溶液中，青蒿琥酯在10分钟内开始降解，并在2-3小时内发生沉淀(cn104414977)。因此，需要一种新的青蒿琥酯注射液制剂，用以改进青蒿琥酯在水溶液中的溶解特性，并提高青蒿琥酯在注射液中的稳定性。
发明概述
在第一方面，组合物包含青蒿琥酯和一种有机碱。
在第二方面，组合物包含青蒿琥酯和一种有机碱，其中有机碱是5-8元环化合物，其中每个环的成员独立地选自碳，氮，氧，硫，并且至少一个环的成员是氮；
其中所述环包含零个，一个，两个或三个双键；以及
其中所述环被k个独立地选自r1a的取代基所取代，k分别为0，1，2，3，4，5，6，7或8，并且两个或更多个r1a取代基是彼此独立地选择的；
其中，r1a选自氢，卤素，氰基，叠氮基，硝基，scn，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烯基，未取代或取代的炔基，未取代或取代的碳环基，未取代或取代的c6-12芳基，未取代的或取代的3-12元杂环基，和未取代或取代的5-12元杂芳基；或r1a可以与一个或多个原子连接形成未取代或取代的c3-12环烷基，未取代或取代的3至12元杂环基，未取代或取代的c6-12芳基，或未取代或取代的5至12元杂芳基。
在第三方面，制备组合物的方法包括：提供青蒿琥酯；提供含一个有机碱的溶液；将该溶液加入青蒿琥酯以提供组合物。
在第四方面，本公开提供了一种治疗方法。
发明详述
定义
除非特别定义，本申请中的任何术语将具有本领域普通技术人员所理解的普通含义。
如本文所使用的单数形式“a”(一)，“an”(一)和“the”(该)包括复数参考，除非上下文另有明确规定。
除非另有说明，本公开的所有芳基，环烷基，杂芳基和杂环基可以如其各自定义中所描述的那样被替代。例如，芳基烷基的芳基部分，如苄基，可以被定义中所述的“芳基”术语替代。
本文所用的术语“烷氧基”是指通过氧原子与母体分子部分连接的c1-c12，优选c1-c6烷基。烷氧基的代表性实例包括但不限于甲氧基(ch3o)，乙氧基(ch3ch2o)和叔丁氧基[(ch3)3co]。
本文所用的术语“烷基”是指通过从其中一个饱和碳上除去氢而衍生自直链或支链饱和烃的基团。烷基优选含有1至10个碳原子，更优选1至6个碳原子。烷基的代表性实例包括但不限于甲基，乙基，异丙基和叔丁基。
本文所用的术语“芳基”是指通过从芳环除去氢原子而衍生自c6-c12，优选c6-c10芳族碳环的基团。芳基可以是单环，双环或多环。芳基的优选实例包括苯基和萘基。
本文所用的术语“氰基”是指cn。
本文所用的术语“环烷基”是指通过从饱和碳环中除去氢原子而衍生自单环饱和碳环的基团，优选具有3至8个，更优选3至6个碳原子。环烷基的代表性实例包括但不限于环丙基，环戊基和环己基。当环烷基在环中含有一个或多个双键但不是芳族时，它形成“环烯基”基团。
本文所用的术语“卤原子”和“卤素”是指f，cl，br或i.
本文所用的术語“卤代烷基”是指被至少一个卤素素原子取代的c1-c10，优选c1-c6，更优选c1-c4烷基。卤代烷基可以是其全部氢原子被卤素取代的烷基。卤代烷基的代表性实例包括但不限于三氟甲基(cf3)，1-氯乙基(clch2ch2)和2,2,2-三氟乙基(cf3ch2)。
本文所用的术语“羟基烷基”是指被至少有一个羟基取代的如上定义的烷基。
本文所用的术语“杂芳基”是指芳基上有一个或多个、优选芳基上有一至三个独立地选自氮，氧和硫杂原子的5至10元单环或双环芳族环基。如本领域技术人员所熟知的，杂芳环具有比其全碳对应物更少的芳族特性。因此，为了本发明的目的，杂芳基只需具有某种程度的芳香性质。杂芳基的说明性实例包括但不限于吡啶基，哒嗪基，嘧啶基，吡嗪基，三嗪基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，嘧啶基，呋喃基，噻吩基，异噁唑基，噻唑基，异噁唑基，噁唑基，吲哚基，喹啉基，异喹啉基，苯并异噁唑基，苯并喹唑基和苯并喹吩基。
本文所用的术语“杂环基”是指非芳族环基上有一个或多个独立地选自氮，氧和硫的杂原子，优选一至三个杂原子的3至10元单环或双环非芳族环。本公开的杂环基可以通过基团中的碳原子或氮原子连接到母体分子部分。杂环基可以是饱和的或不饱和的，例如在环中含有一个或多个双键。杂环基的实例包括但不限于吗啉基，噁唑烷基，哌嗪基，哌啶基，吡咯烷基，四氢呋喃基，硫代吗啉基和二氢吲哚基等。
本文所用的术语“氢氧”或“羟基”是指oh。
本文所用的术语“硝基”是指no2。
本文所用的术语“取代的”是指用取代基独立地取代一个，两个或三个或更多个氢原子，所述取代基包括但不限于-f，-cl，-br，-i，-oh，被保护的羟基，-no2，-cn，-nh2，n3，被保护的氨基，烷氧基，硫代烷氧基，氧代，烷基，-卤代-c2-c12-烯基，-卤代-c2-c12-炔基，-卤代-c3-c12-环烷基，-nh-烷基，-nh-烯基，-nh-炔基，-nh-环烷基，-nh-芳基，-nh-杂芳基，-nh-杂环烷基，-二烷基氨基，-二芳基氨基，-二杂芳基氨基，-o-烷基，-o-烯基，-o-炔基，-o-环烷基，-o-芳基，-o-杂芳基，-o-杂环烷基，-c(o)-烷基，-c(o)-烯基，-c(o)-炔基，-c(o)-环烷基，-c(o)-芳基，-c(o)-杂芳基，-c(o)-杂环烷基，-conh2，-conh-烷基，-conh-烯基，-conh-炔基，-conh-环烷基，-conh-芳基，-conh-杂芳基，-conh-杂环烷基，-oco2烷基，-oco2-烯基，-oco2-炔基，-oco2-环烷基，-oco2-芳基，-oco2-杂芳基，-oco2-杂环烷基，-oconh2，-oconh-烷基，-oconh-烯基，-oconh-炔基，-oconh-环烷基，-oconh-芳基，-oconh-杂芳基，-oconh-杂环烷基，-nhc(o)-烷基，-nhc(o)-烯基，-nhc(o)-炔基，-nhc(o)-环烷基，-nhc(o)-芳基，-nhc(o)-杂芳基，-nhc(o)-杂环烷基，-nhco2-烷基，-nhco2-烯基，-nhco2-炔基，-nhco2-环烷基，-nhco2-芳基，-nhco2-杂芳基，-nhco2-杂环烷基，-nhc(o)nh2，-nhc(o)nh-烷基，-nhc(o)nh-烯基，-nhc(o)nh-炔基，-nhc(o)nh-芳基，-nhc(o)nh-杂芳基，-nhc(o)nh-杂环烷基，-nhc(s)nh2，-nhc(s)nh-烷基，-nhc(s)nh-烯基，-nhc(s)nh-炔基，-nhc(s)nh-环烷基，-nhc(s)nh-芳基，-nhc(s)nh-杂芳基，-nhc(s)nh-杂环烷基，-nhc(nh)nh2，-nhc(nh)nh-烷基，-nhc(nh)nh-烯基，-nhc(nh)nh-炔基，-nhc(nh)nh-芳基，-nhc(nh)nh-杂芳基，-nhc(nh)nh-杂环烷基，-nhc(nh)-烷基，-nhc(nh)-烯基，-nhc(nh)-炔基，-nhc(nh)-环烷基，-nhc(nh)-芳基，-nhc(nh)-杂芳基，-nhc(nh)-杂环烷基，-c(nh)nh-烷基，-c(nh)nh-烯基，-c(nh)nh-炔基，-c(nh)nh-环烷基，-c(nh)nh-芳基，-c(nh)nh-杂芳基，-c(nh)nh-杂环烷基，-s(o)-烷基，-s(o)-烯基，-s(o)-炔基，-s(o)-环烷基，-s(o)-芳基，-s(o)-杂芳基，-s(o)-杂环烷基，-so2nh2，-so2nh-烷基，-so2nh-烯基，-so2nh-炔基，-so2nh-环烷基，-so2nh-芳基，-so2nh-杂芳基，-so2nh-杂环烷基，-nhso2-烷基，-nhso2-烯基，-nhso2-炔基，-nhso2-环烷基，-nhso2-芳基，-nhso2-杂芳基，-nhso2-杂环烷基，-ch2nh2，-ch2so2ch3，-芳基，-芳基烷基，-杂芳基，-杂芳基烷基，-杂环烷基，-环烷基，聚烷氧基烷基，聚烷氧基，-甲氧基甲氧基，-甲氧基乙氧基，-sh，-s-烷基，-s-烯基，-s-炔基，-s-环烷基，-s-芳基，-s-杂芳基，-s-杂环烷基，甲硫基甲基或-l'-r'，其中l'是c1-c6亚烷基，c2-c6亚烷基或c2-c6亚炔基，r'是芳基，杂芳基，杂环，c3-c12环烷基或c3-c12环烯基。应当理解，芳基，杂芳基，烷基等可进一步被取代。在一些情况下，取代部分中的每个取代基另外任选被一个或多个基团取代，每个基团独立地选自-f，-cl，-br，-i，-oh，-no2，-cn或-nh2。
当任何基团，例如烷基，烯基，“环烷基”，“芳基”，“杂环基”或“杂芳基”被认为是“任选取代的”，除非特别定义，这意味著基团是或不是被一个至五个取代基所取代，优选一个至三个取代基，取代基独立地选自卤素，烷基，烷氧基，卤代烷基，卤代烷氧基，羟基，氧代，酰基，氰基，硝基和氨基，取代不违反本领域普通技术人员已知的常规键连接原理。当在组列表之前使用短语“可选择地被取代”时，这意味著所列出的每个组可以被任选地取代。
在本说明书中使用的术语“青蒿琥酯”包括青蒿琥酯的任何单独的对映异构体；该术语可以仅指对映异构体的单一对映体或外消旋或非外消旋混合物，术语“青蒿琥酯”还包括青蒿琥酯的多晶型物和水合物，术语“青蒿琥酯”还包括青蒿琥酯的盐和酯，盐的一个实例是钠盐，术语“青蒿琥酯”还包括青蒿琥酯的前药和所述前药的对映体，外消旋混合物，非外消旋混合物，多晶型物，水合物，盐和酯。
本文所用的术语“治疗有效量”是指足以显示有意义的益于患者的每种活性成分的总量，例如病毒载量的持续降低。当用于单个的活性成分，单独用药时，该术语是指该单个成分。当用于联合活性成分时，该术语是指引起治疗效果的活性成分的合并的量，无论合并施用是连续用的还是同时用的。
本文所用术语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断的范围内适合与患者的组织接触的那些化合物，材料，组合物和/或剂型，而没有过度的毒性，刺激性，过敏反应，或其他问题或并发症，与合理的效益/风险比相称，并且有预期用途的效益。
本文所用的术语“缓冲剂”表示药学上可接受的赋形剂，用于稳定药物制剂的ph。合适的缓冲剂是本领域公知的，并且可以在文献中找到。优选的药学上可接受的缓冲剂包括但不限于组氨酸缓冲液，甘氨酸缓冲液，柠檬酸盐缓冲液，琥珀酸盐缓冲液，醋酸盐缓冲液，氨缓冲液，三(羟甲基)-氨基甲烷缓冲液(tris)和磷酸盐缓冲液。优选的缓冲液包括醋酸，琥珀酸(20-50mm)和磷酸(20-50mm)。最优选的缓冲液包括柠檬酸盐，磷酸盐，l-组氨酸或l-组氨酸和l-组氨酸盐酸盐的混合物。其他优选的缓冲剂是醋酸盐缓冲液，l-精氨酸缓冲液，l-赖氨酸缓冲液和l-甘氨酸缓冲液。独立于使用的缓冲液，可以用本领域已知的酸或碱调节ph，例如，盐酸，醋酸，磷酸，硫酸和柠檬酸，氢氧化钠，碳酸氢钠，氢氧化钾和碳酸氢钾。
术语“受试者”包括人和其他哺乳动物。
术语“治疗”是指：(i)防止可能易患疾病，病症和/或症状但尚未被诊断为患有疾病，病症或症状的患者发生疾病，病症或症状；(ii)抑制疾病，病症或症状，阻止其发展；和(iii)减轻疾病，病症或症状，使疾病，病症和/或症状消退。
组合物
组合物i
在一个实施方案中，一个组合物包含青蒿琥酯(结构式1)和一个有机碱。
在一些实施方案中，组合物包含青蒿琥酯和一个通式(i)的有机碱：
r1，r2和r3独立地选自不存在，氢，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烯基，未取代或取代的炔基，未取代或取代的碳环，未取代或取代的c6-12芳基，未取代或取代的3-12元杂环基，未取代或取代的5-12元杂芳基；或r2和r3可以与一个或多个原子连接形成未取代或取代的c3-12环烷基，未取代或取代的3至12元杂环，未取代或取代的c6-12芳基，或未取代或取代的5至12元杂芳基。
在一些实施方案中，r1是氢。在一些实施方案中，r1和r2是氢。
在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少一个是有取代基的烷基，取代基选自羟基，硫醇，羧基，羧酸酯，氨基甲酰基，酯和氨基。
在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少一个是有羟基取代的烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3中的两个是有羟基取代的烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3是有羟基取代的烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少一个是羟烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3中的至少两个是羟烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少一个是c1-6羟烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少两个为c1-6羟基烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3为c1-6羟基烷基。在一些实施方案中，r2和r3是-(ch2)qoh，q是1至6的整數。在一些实施方案中，q是2。在一些实施方案中，q是3。在一些实施方案中，r1，r2和r3是–ch2)qoh。在一些实施方案中，q为2。在一些实施方案中，q为3。
在一些实施方案中，r1，r2和r3中的至少一个是被羧基取代的烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3中的两个是被羧基取代的烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3是被羧基取代的烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3中的至少一个是被羧酸酯基取代的烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3的两个是被羧酸酯基取代的烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3是被羧酸酯基取代的烷基。在一些实施方案中，r1，r2和r3独立地为–(ch2)ncoom。n是1至6的整数。在一些实施方案中，n是1，m是阳离子。在一些实施方案中，m是碱金属，碱土金属或銨。在一些实施方案中，m是鈉。在一些实施方案中，m是鉀。在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少一个为–(ch2)ncoona。在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少一个是-ch2coona。
在一些实施方案中，r1，r2和r3独立地选自氢，三(羟烷基)甲基和–(ch2)ncooh。
在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少一个为三(羟基烷基)烷基，三(羟基c1-6烷基)c1-6烷基。在一些实施方案中，r3是三(羟烷基)烷基。在一些实施方案中，r3是三(羟基c1-6烷基)c1-6烷基。r1和r2是氢。在一些实施案中，r3是三(羟基c1-2烷基)c1-2烷基。在一些实施方案中，r3是三(羟甲基)甲基。r1和r2是氢。
在一些实施方案中，r1，r2和r3中只有一个为三(羟基烷基)甲基。在一些实施方案中，r1和r2是氢。在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少一个为三(羟基c1-6烷基)甲基。在一些实施方案中，r1，r2和r3中至少一个为三(羟基c1-2烷基)甲基。
在一些实施方案中，r3是三(羟基c1-6烷基)甲基，且r1和r2是羟基烷基。在一些实施方案中，r3是三(羟基c1-6烷基)甲基，並且r1和r2是羟基烷基。在一些实施方案中，r3是三(羟甲基)甲基。r1和r2是羟基乙基。
在一些实施方案中，有机碱选自二乙醇胺，三乙醇胺，三(羟甲基)-氨基甲烷(tris)，甘氨酸钠，咪唑，1-甲基咪唑，2-甲基咪唑，4(5)-甲基咪唑和1,2-二氨基乙烷。在一些实施方案中，有机碱是三(羟甲基)-氨基甲烷衍生物。
在一些实施方案中，有机碱选自双(2-羟乙基)氨基-三(羟甲基)甲烷(bis-tris)，甘氨酸钠，赖氨酸钠，组氨酸钠和精氨酸钠。
在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:0.25至约1:15的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:0.5至约1:15的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:1至约1:15的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:1.5至约1:11的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:4至约1:6的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:1至约1:2的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比为约1:5。在一些实施方案中，有机碱是咪唑或其衍生物，且青蒿琥酯与咪唑或其衍生物的摩尔比为约1:1.5至约1:2。在一些实施方案中，有机碱是三(羟甲基)-氨基甲烷(tris)或其衍生物，并且青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷或其衍生物的摩尔比为约1:1.5至约1:2。在一些实施方案中，有机碱是三乙醇胺或其衍生物，并且青蒿琥酯与三乙醇胺或其衍生物的摩尔比为约1:4至约1:6。
在一些实施方案中，组合物由青蒿琥酯，一个有机碱和一个水溶液组成。有机碱起缓冲剂的作用。在一些实施方案中，青蒿琥酯的含量为约0.01％至约20％(重量/体积)。在一些实施方案中，水溶液是氯化钠溶液。在一些实施方案中，水溶液是生理盐水。在一些实施方案中，氯化钠溶液为约0.9％(重量/体积)。在一些实施方案中，组合物还包含约5％的葡萄糖溶液。在一些实施方案中，有机碱的浓度在约0.1至约0.8m，优选约0.2至约0.4m，更优选约0.3至约0.35m范围内。所述有机碱溶液的ph在约7.5至约9.0，优选约8.0至约8.6，更优选约8.0±0.2。
在一些实施方案中，组合物由青蒿琥酯，一个有机碱和葡萄糖溶液组成。在一些实施方案中，葡萄糖溶液约为5％(重量/体积)。
在一些实施方案中，组合物的组成是青蒿琥酯和三(羟甲基)-氨基甲烷的水溶液。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度在约0.1至约0.8m的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷的摩尔比在约1:2至约1:15的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷的摩尔比在约1:2至约1:12的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯的浓度为约10mg/ml至约20mg/l。
在一些实施方案中，组合物由青蒿琥酯和三(羟甲基)-氨基甲烷的0.9％氯化钠溶液组成。在一些实施方案中，青蒿琥酯的浓度为约10mg/ml至约20mg/l。
在一些实施方案中，组合物由青蒿琥酯，三(羟甲基)-氨基甲烷和磷酸水溶液组成。在一些实施方案中，组合物包含青蒿琥酯，三(羟甲基)-氨基甲烷和醋酸的水溶液。在一些实施方案中，青蒿琥酯的浓度为约10mg/ml至约20mg/l。在一些实施方案中，组合物的ph在约7.2至约8.0±0.2的范围内。
在一些实施方案中，组合物包含缓冲剂。在一些实施方案中，缓冲剂选自三(羟甲基)-氨基甲烷，銨，组氨酸，柠檬酸盐，琥珀酸盐，乙酸盐，磷酸盐，甘氨酸，精氨酸和赖氨酸。
在一些实施方案中，组合物还包含磷酸。在一些实施方案中，组合物的ph为约7.2至约8。在一些实施方案中，组合物的ph为约7.2至约7.8。
在一些实施方案中，组合物由作为第一治疗剂的青蒿琥酯，一个有机碱和第二治疗剂组成。第二治疗剂可以是任何合适的治疗剂。在一些实施方案中，第二治疗剂是其他抗疟剂，例如咯萘啶、甲氟喹，喹哌，伯氨喹，阿莫地喹，磺胺多辛-乙胺嘧啶和本芴醇。在一些实施方案中，第二种治疗剂是抗癌剂。任何适于治疗癌症的抗癌剂。
组合物ii
本公开提供了包含青蒿琥酯和一个有机碱的组合物。有机碱是5-8元环化合物，每个环成员独立地选自碳，氮，氧，硫，并且至少一个环成员是氮。环包含零，一个，两个或三个双键。该环被k个独立地选自r1a的取代基取代，k分别为0，1，2，3，4，5，6，7或8；并且两个或更多个r1a取代基是彼此独立地选择的。
r1a选自氢，卤素，氰基，叠氮基，硝基，scn，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烯基，未取代或取代的炔基，未取代或取代的碳环基，未取代或取代的c6-12芳基，未取代或取代的3-12元杂环基，以及未取代或取代的5-12元杂芳基；或r1a可以与一个或多个原子连接形成未取代或取代的c3-12环烷基，未取代或取代的3至12元杂环基，未取代或取代的c6-12芳基，或未取代或取代的5-至12-元杂芳基。
本公开提供了包含青蒿琥酯和一个通式(ii)的有机碱的组合物：
x1，x2，x3和x4独立地选自碳，氮，氧和硫。环包含零个，一个或两个双键。未取代或取代的烯基，未取代或取代的炔基，未取代或取代的碳环，未取代或取代的c6-12芳基，未取代或取代的3-12元杂环，和未取代或取代的5-12元杂芳基。r4，r5，r6和r7独立地选自不存在，氢，卤素，氰基，叠氮基，硝基，scn，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烯基，未取代或取代的炔基，未取代或取代的碳环，未取代或取代的c6-12芳基，未取代或取代的3-12元杂环，以及未取代或取代的5-12元杂芳基。
r1和r4，r4和r5，r5和r6，r6和r7或r1和r7可以独立地与一个或多个原子连接形成未取代或取代的c3-12环烷基，未取代或取代的3-至12元杂环，未取代或取代的c6-12芳基，或未取代或取代的5至12元杂芳基。
在一些实施方案中，环包含两个双键。在一些实施方案中，x1，x2，x3和x4中至少3个为碳。
在一些实施方案中，r1是氢。在一些实施方案中，r1不存在。
在一些实施方案中，r4，r5，r6和r7中至少一个是c1-6烷基。在一些实施方案中，r4，r5，r6和r7中至少一个为甲基。
在一些实施方案中，有机碱为通式(iii)：
r1选自氢，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烯基，未取代或取代的炔基，未取代或取代的碳环，未取代或取代的c6-12芳基，未取代或取代的3-12元杂环，未取代或取代的5-12元杂芳基。r4，r5和r7独立地选自不存在，氢，卤素，氰基，叠氮基，硝基，scn，未取代或取代的烷基，未取代或取代的烯基，未取代或取代的炔基，未取代或取代的碳环，未取代或取代的c6-12芳基，未取代或取代的3-12元杂环，及未取代或取代的5-12元杂芳基。
r1和r4，r4和r5，或r1和r7可以独立地与一个或多个原子连接形成未取代或取代的c3-12环烷基，未取代或取代的3至12元杂环基，未被取代的或取代的c6-12芳基，或未取代或取代的5至12元杂芳基。
在一些实施方案中，r1是氢。
在一些实施方案中，r4，r5和r7中至少一个是含有一个取代基的烷基，取代基选自羟基，硫醇，羧基，氨基甲酰基，酯，胺，卤素，硝基和氰基。在一些实施方案中，r4，r5和r7中的至少一个是未有取代或有取代的c1-20烷基。在一些实施方案中，r4，r5和r7中的至少一个选自甲基，乙基，丙基，环丙基，丁基，环丁基，戊基，环戊基，己基和环己基。在一些实施方案中，r4，r5和r7中至少一个为甲基。
在一些实施方案中，有机碱选自咪唑，1-甲基咪唑，2-甲基咪唑和4(5)-甲基咪唑。
在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:0.25至约1:15的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:1至约1:15的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的比例在约1:1.5至约1:11的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:2至约1:6的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯和有机碱的摩尔比在约1:1至约1:3的范围内。在一些实施方案中，碱是咪唑或其衍生物，并且青蒿琥酯与咪唑或其衍生物的摩尔比在约1:1.5至约1:2的范围内。
在一些实施方案中，组合物包含青蒿琥酯，一个通式(ii)或通式(iii)中的有机碱和水溶液。有机碱起缓冲剂的作用。在一些实施方案中，青蒿琥酯的含量为约0.01％至约20％(重量/体积)。在一些实施方案中，水溶液是氯化钠溶液。在一些实施方案中，水溶液是生理盐水。在一些实施方案中，氯化钠溶液约为0.9％(重量/体积)。
在一些实施方案中，组合物包含青蒿琥酯，一个通式(ii)或通式(iii)中的有机碱和葡萄糖溶液。在一些实施方案中，葡萄糖溶液为约5％(重量/体积)。
在一些实施方案中，组合物还包含磷酸。在一些实施方案中，组合物还包含醋酸。在一些实施方案中，组合物的ph为约7.2至约7.8范围内，例如7.8±0.2。
在一些实施方案中，有机碱的浓度在约0.1至约0.8m，优选为约0.2至约0.4m，更优选为约0.3至约0.35m的范围内。所述有机碱溶液的ph在约7.5至约9.0的范围内，优选约8.0至约8.6，更优选约8.0±0.2。
在一些实施方案中，组合物由作为第一治疗剂的青蒿琥酯，一个有机碱和第二治疗剂组成。第二治疗剂可以是任何合适的治疗剂。在一些实施方案中，第二治疗剂是其他抗疟剂，例如咯萘啶、甲氟喹，喹哌，伯氨喹，阿莫地喹，磺胺多辛-乙胺嘧啶和本芴醇。在一些实施方案中，第二种治疗剂是抗癌剂。任何适于治疗癌症的抗癌剂。
制剂
本公开提供了用于注射的青蒿琥酯的制剂。制剂由青蒿琥酯、有机碱和溶解(溶出)介质组成。该制剂适用的给药途径包括静脉给药、肌肉给药、鞘内注射、直肠给药、腹腔注射给药、口服给药或外用给药。
溶解介质可以是任何适合注射的介质。在一些实施方案中，溶解介质是水溶液。在一些实施方案中，溶解介质是磷酸钠缓冲溶液。在一些实施方案中，溶解介质是含有氯化钠，磷酸盐和葡萄糖的缓冲溶液。在一些实施方案中，溶解介质含有约0.9％氯化钠(重量/体积)，约5％葡萄糖(重量/体积)和磷酸钠。在一些实施方案中，制剂还含有糊精，卵磷脂，甘露醇，木糖醇，山梨醇，磷酸或乙酸。
在一些实施方案中，制剂的ph在约7.2至约8的范围内。在一些实施方案中，制剂的ph在约7.2至约7.8的范围内。所公开的制剂适用于注射用，例如肌肉注射或静脉注射。
在一些实施方案中，有机碱为通式(i)，(ii)或(iii)。
本公开制剂中的碱的实例包括：二乙醇胺，三乙醇胺，1,2-二氨基乙烷，三(羟甲基)-氨基甲烷，双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷(bis-tris),甘氨酸，赖氨酸，组胺，精氨酸，咪唑，1-甲基咪唑，2-甲基咪唑和4(5)-甲基咪唑。
在一些实施方案中，制剂包含青蒿琥酯、有机碱和水溶液。在一些实施方案中，水溶液是氯化钠溶液。在一些实施方案中，氯化钠为约0.9％(重量/体积)。在一些实施方案中，制剂还包含约5％的葡萄糖溶液。在一些实施方案中，有机碱的浓度在约0.1至约0.5m的范围内。在一些实施方案中，有机碱的浓度为约0.2至约0.4m。在一些实施方案中，有机碱为约0.3至约0.35m。所述有机碱水溶液的ph为约7.5至约9.0，优选约8.0至约8.6，更优选约8.0±0.2。
在一些实施方案中，制剂包含青蒿琥酯、有机碱和葡萄糖溶液。在一些实施方案中，葡萄糖溶液为约5％(重量/体积)。在一些实施方案中，组合物还包含磷酸。在一些实施方案中，制剂组合物的ph在约7.2至约8.2的范围内。在一些实施方案中，组合物的ph在约7.2至约7.8的范围内。
在一些实施方案中，制剂包含青蒿琥酯和三(羟甲基)-氨基甲烷的水溶液。在一些实施方案中，组合物包含青蒿琥酯和三(羟甲基)-氨基甲烷的0.9％氯化钠溶液。
在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度在约0.1至约0.5m的范围内。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度为约0.2至约0.4m。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度为约0.3至约0.35m。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度为约0.03mol/l，约0.039mol/l或约0.078mol/l。
在一些实施方案中，青蒿琥酯的浓度为0.01％至20％(重量/体积)。在一个实例中，青蒿琥酯的浓度在约0.1％至约2％(重量/体积)的范围内。在另一个实例中，青蒿琥酯的浓度在约1％至约10％(重量/体积)的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯的浓度为约10mg/ml。在一些实施方案中，青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷的摩尔比在约1:2至约1:15的范围内。在一些实施方案中，青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷的摩尔比在约1:2至约1:12的范围内。
在一些实施方案中，制剂包含青蒿琥酯和三(羟甲基)-氨基甲烷的缓冲溶液。缓冲溶液包含缓冲剂。在一些实施方案中，缓冲剂选自氨，组氨酸，柠檬酸盐，琥珀酸盐，乙酸盐，磷酸盐，甘氨酸，精氨酸和赖氨酸。本文所述缓冲溶液的ph在约7.5至约9.0，优选约8.0至约8.6，更优选约8.0±0.2的范围内。
在一些实施方案中，制剂包含青蒿琥酯、三(羟甲基)-氨基甲烷和磷酸水溶液。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度在约0.1至约0.8m的范围内。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度在约0.1至约0.5m的范围内。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度为约0.2至约0.4m。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度为约0.3至约0.35m。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷为约0.039mol/l。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度为约0.078mol/l。
在一些实施方案中，制剂包含青蒿琥酯、三(羟甲基)-氨基甲烷和醋酸的水溶液。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度在约0.1至约0.8m的范围内。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度在约0.1至约0.5m的范围内。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度为约0.2至约0.4m。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度为约0.3至约0.35m。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷为约0.039mol/l。在一些实施方案中，三(羟甲基)-氨基甲烷的浓度为约0.078mol/l。
在一些实施方案中，制剂包含约10mg/ml的青蒿琥酯和含有0.039mol/l三(羟甲基)-氨基甲烷的磷酸溶液。在一些实施方案中，制剂包含约10mg/ml的青蒿琥酯和含有约0.078mol/l的三(羟甲基)-氨基甲烷的磷酸溶液。在一些实施方案中，制剂包含10mg/ml的青蒿琥酯和含有0.3mol/l的三(羟甲基)-氨基甲烷的磷酸溶液。
在一些实施方案中，制剂包含作为第一治疗剂的青蒿琥酯、有机碱和第二治疗剂的水溶液。第二治疗剂可以是任何合适的治疗剂。在一些实施方案中，第二治疗剂是其他抗疟剂，例如咯萘啶、甲氟喹，喹哌，伯氨喹，阿莫地喹，磺胺多辛-乙胺嘧啶和本芴醇。在一些实施方案中，第二种治疗剂是抗癌剂。任何适于治疗癌症的抗癌剂。
制剂在使用时由以下物质制备：提供青蒿琥酯；提供含有有机碱的溶液；将有机碱溶液加入青蒿琥酯以制得制剂。例如，本公开的青蒿琥酯注射制剂是通过将青蒿琥酯与含有本公开所述的碱的水溶液混合制备的。不希望被理论束缚，青蒿琥酯可通过形成负电荷而溶于水中。本公开制剂在使用前新鲜制备，以尽量减少青蒿琥酯的不稳定性。在一些实施方案中，通过将本公开的碱的溶液加入到青蒿琥酯粉末中制备可注射用青蒿琥酯制剂。溶液为约5％葡萄糖，生理盐水或约5％葡萄糖的生理盐水溶液。然后将混合物轻轻振摇得到澄清的注射用溶液。
本公开的方法能够快速且完全地溶解青蒿琥酯，得到用于注射给药的澄清溶液。本制剂方法提供了青蒿琥酯注射液，适用于治疗疟疾及治疗其他疾病。
和目前临床使用的两步青蒿琥酯/碳酸氢钠制剂方法相比较，本公开的制剂具有许多优点。本公开的碱是有机化合物，溶解青蒿琥酯在水相中不产生二氧化碳气泡，不同于使用5％碳酸氢钠的情况。此外，青蒿琥酯/碳酸氢钠方法需要两个步骤制备，溶解和稀释，而本公开的制剂是一步制备，既将碱水溶液加入到青蒿琥酯粉末中并轻轻振摇便得到所需的注射溶液，本公开的制剂制备非常方便。所得到的澄清注射溶液没有在碳酸氢钠制剂中观察到的发气泡和持续的浑浊。在一个比较实验中，本发明人观察到，将10毫克青蒿琥酯溶解在1毫升咪唑盐水溶液(0.039m)中所需时间为2至3分钟，而用5％碳酸氢钠溶液需要5至7分钟。
此外，与青蒿琥酯/碳酸氢钠方法相比，在本公开的制剂中青蒿琥酯的稳定性得到了提高。在室温下，本公开的青蒿琥酯制剂五至七小后开始变浑浊，出来沉淀。而在青蒿琥酯/碳酸氢钠的制剂中，浑浊和沉淀发生在2-3小时内。浑浊或沉淀已用作临床上的观察标准，以丢弃注射溶液。制剂中的沉淀物已被鉴定为主要是活性抗疟药二氢青蒿素。提高青蒿琥酯制剂的稳定性可以延长注射剂的使用时间。这意味著青蒿琥酯可以通过静脉输液给予病人，用以克服注射用青蒿琥酯血浆中半衰期短的缺点(约20分钟，zaloumis等人，cptpharmacometrics&systpharmacol，2014，5；3：e145)，增强青蒿琥酯的治疗功效。此外，当将本公开的制剂从10mg/ml稀释至1mg/ml或0.1mg/ml时，在12小时内未观察到沉淀，表明本制剂可适合静脉滴注数小时以保持血浆中青蒿琥酯的稳定浓度。此外，本公开的制剂方法可以制得不含钠盐的青蒿琥酯注射剂，有利于需要避免钠盐的患者。在一些实施方案中，本制剂可以使用市售的tham溶液(三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲液，0.3m)溶解青蒿琥酯粉末，用于患有酸中毒病症的患者(例如急性肺损伤)。
本公开的另一个特征是制剂的ph(7.2-7.6)对于肌肉或静脉注射是理想的。相比之下，青蒿琥酯/碳酸氢钠制剂的ph约为7.9-8.0。例如，青蒿琥酯在咪唑生理盐水中(10mg/ml)的ph为7.4±0.2(摩尔比1:1.5/青蒿琥酯：咪唑)。
本公开优选的有机碱是药学上可接受的并且已经用于注射制剂中。例如，咪唑已经用于selezen(咪唑水杨酸盐)的注射剂中，三(羟甲基)-氨基甲烷已用于zybrestat(fosbretabulin三(羟甲基)-氨基甲烷)进行静脉注射及hemabate(卡前列素三(羟甲基)-氨基甲烷)进行注射给药。
本公开的青蒿琥酯制剂可以通过肌肉或静脉注射，也可通过口服或局部施用。制剂中青蒿琥酯的浓度可以在约0.01至约20％(重量/体积)的范围内。在一个实例中，青蒿琥酯的浓度在约0.1至约2％(重量/体积)的范围内。在另一个实例中，浓度在约1至约10％(重量/体积)的范围内。需要的使用浓度可以由本领域技术人员来确定。有效剂量可能受年龄，体重或待治疗的疾病的影响，可以由本领域技术人员选择制定。例如，在治疗疟疾时，常用制造的单位剂量(规格)为60mg或110mg，典型成人注射剂量为2.4mg/kg体重，注射剂浓度为10mg/ml，每日一次，静脉注射5-7天为一个疗程，第一次给药的剂量为两倍，总剂量为360-480mg(信息来自桂林制药厂，广西，中国)。
治疗方法
用于治疗与寄生虫感染相关的疾病或病症的方法包括向受试者施用有效药用剂量的本公开的组合物或制剂。在有些情况下，寄生虫感染选自疟疾、日本血吸虫(schistosomajaponicum)和弓形虫感染(toxoplasma)。在一些例子中，疟疾感染是由严重的恶性疟原虫(plasmodiumfalciparum)引起的。
此外，本公开的青蒿琥酯的制剂可用于治疗除疟疾之外的许多其它疾病，包括预防和治疗日本血吸虫病，抗弓形虫，抗癌和抗病毒，抗炎和治疗免疫功能障碍(例如类风湿性关节炎，肾病综合症和狼疮性肾炎)，胰腺炎和避孕。
本公开的青蒿琥酯制剂可以与其它治疗剂联合应用以提高治疗功效。例如，本发明的制剂可以与其他抗疟药物联合应用治疗疟疾(例如，联合应用咯萘啶，阿莫地喹或磺胺多辛-乙胺嘧啶，bukirwa等，cochranedatabasesystrev，2014，mar4；angusb，expertrevclinpharmacol，2014，7(3)：299-316)，或与抗癌剂联合应用治疗癌症(例如，联合应用长春瑞滨和顺铂，zhang等人，jchinintegrmed，2008，6：134)。
在一些实施方案中，青蒿琥酯用于患者的有效药用剂量为约0.2-10mg/kg体重，每天一次或两次,约2至30天。
在一些实施方案中，所公开的组合物或制剂用于治疗癌症，器官损伤，炎症疾病，心脏病，脓毒症，中风，烧伤，病毒感染，糖尿病，肝脏疾病和肺部疾病。在一些实施方案中，癌症选自白血病，结肠直肠癌，脑/cns癌症，膀胱癌，乳腺癌，卵巢癌，肺癌，黑色素瘤，口腔和口咽癌，胰腺癌和骨癌。在一些实施方案中，心脏病选自心肌肥大，心力衰竭，心肌梗死和冠心病。在一些实施方案中，器官损伤由疟疾，烧伤，脓毒症和红斑狼疮引起。在一些实施方案中，器官损伤选自肾损伤，肺损伤，肝损伤，头部损伤和肠损伤。在一些实施方案中，肾脏疾病选自急性肾脏，慢性肾脏，肾衰竭和尿毒症。在一些实施方案中，炎症疾病选自类风湿性关节炎，肾病综合症和狼疮性肾炎。
在一些实施方案中，器官损伤是由出血引起的。器官损伤选自创伤性损伤，胰腺炎损伤，肠损伤，脑和头部损伤，肺损伤，脊髓损伤和呼吸窘迫综合症。
在一些实施方案中，糖尿病是i型糖尿病。
在一些实施方案中，肝脏疾病是肝纤维化。
在一些实施方案中，肺部疾病选自哮喘，呼吸窘迫综合症或特发性肺纤维化。
在一些实施方案中，治疗手术中的缺血再灌注，包括向受试者施用有效药用剂量的本公开组合物或制剂。在一些实施方案中，手术选自肾移植，肾脏和胰腺移植及冠状动脉搭桥术。
试剂盒
本公开提供了制备青蒿琥酯注射剂的单剂量试剂盒。该试剂盒包括：
1.含有青蒿琥酯有效药用剂量的a瓶；和
2.含有药学上可注射用的有机碱溶液的b瓶。
在注射使用之前，将b瓶中的溶液加入a瓶中，混合振摇使青蒿琥酯完全溶解。使用医疗用注射器将b瓶的溶液加入a瓶。然后，使用相同的注射器取出配制的青蒿琥酯溶液用于注射。
或者，b瓶可以含有纯固体或液体形式的有机碱。在加入青蒿琥酯粉末之前，将有机碱溶解在合适的溶解介质中。
青蒿琥酯为粉末形式。a瓶中的青蒿琥酯粉末和b瓶中的碱溶液是药用制造的，是无菌的并包装供临床应用。
a瓶中青蒿琥酯的单位剂量可以为约60mg至约110mg，或由治疗所需的剂量确定。在一些实例中，a瓶含有60mg青蒿琥酯粉末，b瓶含有6ml有机碱的5％葡萄糖溶液，生理盐水或任何其他合适的缓冲溶液。
已经发现使用青蒿琥酯干粉可以减少青蒿琥酯降解，本公开的注射制剂可在注射之前方便地制得。
以下实施例是对本公开的方法和组成的说明，是非限制性的。
具体实施方式
实施例1：三乙醇胺生理盐水溶液(0.13m)的制备。
向生理盐水(0.9％nacl)中搅拌加入三乙醇胺(1.94g，13mmol)，将最终体积调节至100ml，得到0.13m的三乙醇胺生理盐水溶液。
实施例2：咪唑生理盐水溶液(0.039m)的制备。
向生理盐水(约0.9％nacl)中搅拌加入咪唑(0.265g，3.9mmol)，将最终体积调至100ml，得到0.039m的咪唑生理盐水溶液，ph8.0±0.2。
实施例3：2-甲基咪唑生理盐水溶液(0.039m)的制备。
向生理盐水(0.9％nacl)中搅拌加入2-甲基咪唑(0.32g，3.9mmol)，最终体积调节至100ml，得到0.039m的2-甲基咪唑生理盐水溶液。
实施例4：咪唑生理盐水溶液(0.052m)的制备。
向生理盐水(0.9％nacl)中搅拌下加入咪唑(0.354g，5.2mmol)，最终体积调节至100ml，得到0.052m的咪唑生理盐水溶液。
实施例5：青蒿琥酯与三乙醇胺生理盐水的制剂(10mg/ml)。
向青蒿琥酯粉末(60mg，0.156mmol)中加入实施例1的0.13m三乙醇胺生理盐水溶液(6ml，0.78mmol)，将混合物温和振摇2-3分钟，得到三乙醇胺青蒿琥酯澄清制剂溶液。1hnmr(d2o，360mhz)δ5.66-5.69(10-h)，5.59(12ɑ-h)，3.65(t，三乙醇胺，ch2ch2oh，2h)，2.80(t，三乙醇胺，ch2ch2oh，2h)，2.38-2.42(15-h)，2.17-2.24(14-h)，1.31(3-ch3)，0.84-0.86(6-ch3)，0.77-0.79(9-ch3)。
实施例6：青蒿琥酯与咪唑生理盐水的制剂(10mg/ml)。
向青蒿琥酯粉末(60mg，0.156mmol)中加入实施例2的0.039m咪唑生理盐水溶液(6ml，0.234mmol)，将混合物温和振摇2-3分钟，得到咪唑青蒿琥酯的生理盐水澄清制剂溶液。1hnmr(d2o，360mhz)δ7.27(s，咪唑，2h)，5.65-5.68(10h)，5.58(12ɑ-h)，2.40-2.42(15-h)，2.17-2.24(14-h)，1.30(3-ch3)，0.83-0.85(6-ch3)，0.76-0.78(9-ch3)，ph7.4±0.2。
实施例7：青蒿琥酯与咪唑生理盐水的制剂(10mg/ml)。
向青蒿琥酯粉末(60mg，0.156mmol)中加入实施例4的0.052m咪唑生理盐水溶液(6ml，0.312mmol)，将混合物温和振摇2-3分钟，得到澄清的咪唑青蒿琥酯生理盐水制剂溶液，ph7.4±0.2。
实施例8：青蒿琥酯与二甲基咪唑生理盐水的制剂(10mg/ml)。
向青蒿琥酯粉末(60mg，0.156mmol)中加入实施例3的0.039m2-甲基咪唑生理盐水溶液(6ml，0.234mmol)，将混合物温和振摇2-3分钟，得到澄清的2-甲基咪唑青蒿琥酯生理盐水制剂溶液。1hnmr(d2o，360mhz)δ7.08(s，2-甲基咪唑，2h)，5.65-5.68(10-h)，5.58(12ɑ-h)，2.41(s，2-甲基咪唑，ch3)，2.38-2.42(15-h)，2.16-2.23(14-h)，1.30(3-ch3)，0.83-0.85(6-ch3)，0.76-0.78(9-ch3)，ph7.4±0.2。
实施例9：三(羟甲基)-氨基甲烷生理盐水溶液的制备(0.039m)。
在搅拌下向生理盐水(0.9％nacl)中加入三(羟甲基)-氨基甲烷(0.47g，3.9mmol)，最终体积调至100ml，得到0.039m的三(羟甲基)-氨基甲烷生理盐水溶液，ph8.0±0.2。
实施例10：青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷生理盐水的制剂(10mg/ml)。
向青蒿琥酯粉末(60mg，0.156mmol)中加入实施例9的0.039m三(羟甲基)-氨基甲烷生理盐水溶液(6ml，0.234mmol)，将混合物温和振摇2-3分钟，得到澄清的三(羟甲基)-氨基甲烷青蒿琥酯生理盐水制剂溶液，ph7.4±0.2。1hnmr(d2o，360mhz)δ5.66-5.69(10-h)，5.59(12a-h)，3.57(s，三(羟甲基)-氨基甲烷)，2.38-2.42(15-h)，2.17-2.24(14-h)，1.30(3-ch3)，0.84-0.86(6-ch3)，0.77-0.79(9-ch3)。
实施例11：三(羟甲基)-氨基甲烷生理盐水溶液(0.078m)的制备。
在生理盐水(0.9％nacl)中搅拌加入三(羟甲基)-氨基甲烷(0.94g，7.9mmol)，最终体积调至100ml，得到0.078m三(羟甲基)-氨基甲烷生理盐水溶液。
实施例12：青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷生理盐水的制剂(10mg/ml)。
向青蒿琥酯粉末(60mg，0.156mmol)中加入6ml实施例11的0.078m三(羟甲基)-氨基甲烷溶液(6ml，0.468mmol)，将混合物温和振摇2-3分钟，得到澄清的三(羟甲基)-氨基甲烷青蒿琥酯生理盐水制剂溶液，ph7.4±0.2。
实施例13：三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲溶液(0.3m)的制备。
向去离子水中加入三(羟甲基)-氨基甲烷(3.6g，30mmol)，用醋酸将溶液调至ph8，最终体积100ml，得到0.3m的三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲溶液。
实施例14：青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲溶液的制剂(10mg/ml)。
向青蒿琥酯粉末(60mg，0.156mmol)中加入6ml实施例13的三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲溶液(0.3m，1.8mmol)，将混合物温和振摇2-3分钟，得到澄清的青蒿琥酯在三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲液中的制剂溶液，ph7.4±0.2。
实施例15：三(羟甲基)-氨基甲烷磷酸盐缓冲溶液(0.3m)的制备。
向去离子水中加入三(羟甲基)-氨基甲烷(1.82g，15mmol)，用5％磷酸将溶液调至ph8，最终体积调至50ml，得到0.3m的三(羟甲基)-氨基甲烷磷酸缓冲溶液。
实施例16：青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷磷酸盐缓冲溶液的制剂(10mg/ml)。
向青蒿琥酯粉末(60mg，0.156mmol)中加入6ml实施例15的三(羟甲基)-氨基甲烷磷酸缓冲溶液(0.3m，1.8mmol)，将混合物温和振摇2至3分钟，得到澄清的青蒿琥酯在三(羟甲基)-氨基甲烷磷酸缓冲液中的制剂溶液，ph7.4±0.2。
实施例17：三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲溶液的制备(0.3m)。
向去离子水中加入三(羟甲基)-氨基甲烷(3.6g，30mmol)，用醋酸将溶液调至ph8.6(8.4-8.7)，用去离子水调至100ml，得到0.3m三(羟甲基)-氨基甲烷乙酸缓冲溶液。
实施例18：青蒿琥酯与三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲溶液的制剂(10mg/ml)。向青蒿琥酯粉末(60mg，0.156mmol)中加入6ml实施例17的三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲溶液(0.3m，1.8mmol)，将混合物温和振摇1-2分钟，ph7.9±0.2，得到澄清的青蒿琥酯在三(羟甲基)-氨基甲烷醋酸盐缓冲液中的制剂溶液。