专利名称：眼科用阿尔加托品烷制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及的是阿尔加托品烷(アルガトロバン)在眼科领域中的新用途。更详细地说，本发明涉及的是关于阿尔加托品烷防止前房内血纤维蛋白形成的作用的利用。
所谓的阿尔加托品烷是如下通式〔化学式3〕
所示的(2R，4R)-4-甲基-1-〔N2-((RS)-3-甲基-1，2，3，4-四羟基-8-哇啉磺酰基)-L-精氨酰基〕-2-哌啶羧酸。水和物的俗称，该化合物属于N2-芳基磺酰基-L-精氨酸酰胺类。
阿尔加托品烷如在特愿昭54-88786号中所记载，是一种具有过去药物中，从来没有的全新作用机制的选择性的抗凝血酶性物质，即，在阿尔加托品烷的作用机制中，由于阿尔加托品烷的三条足构造而与凝血酶的活性部位成立体的结合，所以含有选择性地阻止凝血酯的作用。正因如此，阿尔加托品烷能够强有力地阻止凝血酶的如下三个主要作用(1)血纤维蛋白的生成作用，(2)由于第ⅥⅡ因子的活化血纤维蛋白的稳定化作用，(3)血小板凝集作用。其结果可知，阿尔加托品烷，在临床上可用于改善因慢性动脉堵塞而引起的四肢溃疡、安静时疼痛和冷感。
本发明者们，着眼于阿尔加托品烷的上述独特的作用机制，对于有关阿尔加托品烷的慢性动脉堵塞症之外的用途，进行深刻研究的结果，成功地完成了下面详细描述的发明。
在视网膜和玻璃体的手术，白内障手术和青光眼手术等的眼内手术之后，术后前房内血纤维蛋白形成现象屡屡可见，而且这是进行良好的术后管理上面应当避免的极端重要的问题。例如，在眼内晶状体插入的手术之后发生血纤维蛋白形成时，不仅仅是视力恢复趋于恶化，而且还会有向并发青光眼之类严重的病态发展的危险性。另外，玻璃体手术后的血纤维蛋白形成使术后的眼底检查难于进行，因此妨碍对于眼底疾病的妥当处置或治疗，而且血纤维蛋白形成，也可能成为前部网膜玻璃体增殖之类难治性病态的原因。
由此背景看来，防止术后的血纤维蛋白形成的事宜是极端重要的认识，但是恰当地进行这种事宜的手段过去从来没有报导过。
到目前为止，阿尔加托品烷是在预防血管内产生凝血块的血栓形成之目的上给药的。
在此，本发明者们，对于阿尔加托品烷是否能在血中以外的活体内发挥其本来的作用进行了研究，从实践中发现，它可以防止眼内手术后的血纤维形成，从而完成了本发明。确认阿尔加托品烷在血中以外的活体中是否显示那样的作用的尝试还从未报导过，而在眼科领域里适用阿尔加托品烷的事实更无存在过。
作为可防止眼内手术后的血纤维蛋白形成的阿尔加托品烷的适用方法可列举的有前房内直接给药、点眼给药、静脉内给药、或者含在眼内灌流液的方法等。最好是通过打点滴来进行静脉内给药。另外，在网膜下面注射阿尔加托品烷的方法也是可以的。而且，阿尔加托品烷的给药时间可以在手术前、中、后的各个时间进行。
所用的阿尔加托品烷的适用的给药剂是，非经口服给药用液剂、例如眼灌流液剂、点眼剂、点滴用剂等。
本发明的眼灌流液剂，可以通过将阿尔加托品烷溶于灭菌精制水等中而进行配制，这时，可以根据需要加入近似于房水组成的等张化剂、缓冲剂等药学上允许的添加剂。具体讲，可以加入葡萄糖、氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、碳酸氢钠等。
所说的本发明的点眼剂有水溶性点眼剂、非水溶性点眼剂、悬浊性点眼剂、乳浊性点眼剂。本发明的点眼剂的配制，是通过使用作为水溶性溶剂的灭菌精制水，生理食盐水等，或者使用作为非水溶性溶剂的棉籽油、大豆油、芝麻油、花生油等的植物油，然后将阿尔加托品烷溶于或悬浮于这些溶剂之中而进行的。这时，可以根据需要加入等张化剂、pH调节剂、粘稠剂、悬浊化剂、乳化剂以及保存剂等药学上允许的添加剂。作为具体的等张化剂可列举的有氯化钠、硼酸、硝酸钠、硝酸钾、D-甘露糖醇、葡萄糖等。作为pH调节剂可列举的有硼酸、无水亚硫酸钠、盐酸、柠檬酸、柠檬酸钠、醋酸、醋酸钾、碳酸钠、硼砂等。作为粘稠剂可列举的有甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯醇、硫酸软骨素钠、聚乙烯基吡咯烷酮等。作为悬浊剂可列举的有聚山梨醇酯80、聚氧乙烯硬化蓖麻油60、聚氧化硬化蓖麻油等。作为乳浊剂有卵磷脂、聚山梨醇酯80等，作为保存剂可列举的有氯化新洁尔灭、氯化苄甲乙氧铵、氯丁醇、苯乙醇、对羟基苯甲酸酯等。
所说的本发明的点滴用剂，是水溶性注射液，乳浊性注射液。本发明点滴用剂的配制，是通过使用注射用蒸馏水、生理食盐液、林格氏液等作为溶剂，或者使用含有少量的水溶性有机溶媒，例如乙醇、甘油的上述那些溶剂、并将阿尔加托品烷溶于这些溶剂中而进行的。这时，可以根据需要，加入等张化剂、pH调节剂、乳化剂和保存剂等药学上允许的添加剂。作为具体的等张化剂可列举的有氯化钠、葡萄糖、D-山梨糖醇、D-甘露糖醇等。作为pH调节剂可列举的有无水亚硫酸钠、盐酸、柠檬酸、柠檬酸钠等。作为乳化剂有卵磷酯、聚山梨醇酯80等，而作为保存剂可列举的有氯化新洁尔灭、氯化苄甲乙氧铵、对羟基苯甲酸酯类等。
以下用实施例说明之，将阿尔加托品烷与自家血浆同时给药于前房内时，可阻止血纤维蛋白的形成。其结果示出，如阿尔加托品烷迁移到前房，就可以防止前房内的血纤维蛋白形成。由这样的结果可以支撑的事实是，阿尔加托品烷可适用于由前房内直接给药，另外认为，通过在眼内灌流液中添加的方式也可以阻止眼内手术后的血纤维蛋白形成。还有，在本发明者们用家兔的实验中，按阿尔加托品烷10μg/kg/分、40μg/kg/分、400μg/kg/分的静脉内给药中发现，在给药后1小时，前房内的浓度分别为5.7±0.7、41.0±4.2、881±110ng/ml。另外，用阿尔加托品烷2mg/ml食盐水点眼的过程中，也得到了23.7±19.1ng/ml的前房内浓度。这些结果表明，无论是通过静脉内给药还是点眼，阿尔加托品烷都可以迁移到前房内，由此可以防止前房内的血纤维蛋白形成。
对于人的最合适的给药量可以根据给药方法，给药时期、患者的年龄、症状等进行变化。通常，在静脉给药中是1～50mg/kg/日，在点眼给药中，可以使用浓度为阿尔加托品烷1mg/ml～6mg/ml的点眼剂。在灌流液中添加的场合，其灌流液中阿尔加托品烷浓度可为0.1μg/ml～0.6mg/ml。
以下，通过实施例详细地说明阿尔加托品烷的前房内血纤维蛋白形成阻止作用。据此，本技术领域的人就会懂得，本发明的新型治疗方法可以减少白内障手术或玻璃体手术，青光眼手术之后的血纤维蛋白形成，从而可带来更好的视力恢复。
实施例1用激光照射的前房内血纤维蛋白形成实验样品在本实施例中，作为调查阿尔加托品烷的作用的方法，是使用通过家兔的激光照射的前房内血纤维蛋白形成样品。该样品被利用作为眼的炎症样品。若是使用该样品，则根据与激光照射的总能量所成的比例来判断炎症的严重程度或血纤维蛋白量。因此可以通过改变激光照射的总能量来调节所需要的血纤维蛋白量。现在，使用照射能量小的条件(条件A)和大的条件(条件B)的两种条件，而且可以看到，在照射总能量大的眼中有更强的血纤维蛋白形成。
材料和方法使用氩激光(アルゴンレ-ザ-)装置(ニテツク社制造)，当于成熟有色家兔(体重2kg的荷兰跑兔)的虹彩中进行激光照射时，对于右眼所用条件(条件A)为凝固尺寸50μm、输出功率1.0瓦特、照射时间0.1秒，并按等间距在轮状内照射8处。另外，对于左眼所用条件(条件B)为凝固尺寸200μm、输出功率1.0瓦特、照射时间0.2秒，并与右眼一样照射8处。从照射前30分钟到照射后30分钟，从耳静脉以0.1mg/kg/分的剂量将阿尔加托品烷进行静脉内给药。在对照例中只进行激光照射。另外，作为阳性调节(ポジティブコントロ一ル)是在激光照射前30分钟静脉注射肝素1000U/kg。用细缝灯显微镜通过拍照记录下来血纤维蛋白形成状态。
另外，通过上述条件B进行激光照射之后，在经过30分钟、60分钟的时间里，用闪光电池仪(フレア一セルメ一タ)进行前房闪光值的测定。
结果在对照样品中，不管是照射条件A还是B，从30分钟以后都能观察到血纤维蛋白的形成。对于条件A和条件B由细缝灯显微镜得到的结果分别示于附
图1和附图2中。在阳性调节群(肝素给与群)中，在从照射后30分钟到3小时的观察期间内没有见到血纤维蛋白的形成(结果没有示出)。在阿尔加托品烷0.1mg/kg/分给药中，在照射后30分钟里与给与肝素群的情况相同，不论是照射条件A还是照射条件B都完全看不到血纤维蛋白的形成。对于条件A和条件B所得到结果分别示于附图3和附图4中。
将闪光电池仪测得的结果示于下列表1中。闪光电池仪是以前房内的浊度作为光量计数而计量的。下面的表1表明阿尔加托品烷在30分钟和60分钟以后明显地阻止血纤维蛋白形成的结果。因此，在该实验结果中也支持了阿尔加托品烷的前房内阻止血纤维蛋白形成表1对于在有色家兔中照射氩激光后的前房内闪光增大的阿尔加托品烷的作用光亮计数(/毫秒)药物激光照射30分钟激光照射60分钟对照877.0±333.61002.9±137.0(n=4)(n=4)阿尔加托417.7±159.3356.9±168.3品烷静注(n=4)(n=4)阿尔加托287.7±99.2341.2±86.5品烷点眼(n=4)(n=4)注n＝个体数阿尔加托品烷静注＝按0.1mg/kg/分静注阿尔加托品烷点眼液＝是使用5mg/ml的浓度的制剂实施例2采用自家血浆的前房内给药的血纤维蛋白形成实验样品采取成熟白色家兔(体重2kg)的血液，(并进行血浆分离。从同一只家兔身上通过前房穿刺采取前房水200μl，接着将得到的血浆150μl和阿尔加托品烷(10mg/ml)50μl合计为200μl，从穿刺的同一位置给药于前房内。对照例是将150μl血浆和50μl的生理食盐水同样地给于前房内。给药24小时之后观察记录下前房内的血纤维蛋白的形成。
结果对于前房内给予阿尔加托品烷的眼睛观察到的结果是，在给药后24小时中看不得血纤维蛋白形成。而对其对照例的眼睛则观察到很强的前房内血纤维蛋白形成。将所得到的结果分别示于附图5和附图6中。
就像上述实施例1和实施例2所表明的那样，通过阿尔加托品烷的静脉内给药，无论是对于激光照射样品还是对于自家血浆注入样品，都能够完全地阻止在前房内的血纤维蛋白形成。这一点被认为是由于在从血纤维蛋白转变为血纤维蛋白过程中，阿尔加托品烷抵抗了凝血酶的作用所致。
由于阿尔加托品烷对于凝血酶的直接作用而防止血栓或血纤维蛋白的形成，但是对于其它的血凝系统则不起作用。因此，它与肝素等其它的抗凝血剂相比，眼内手术后出现出血倾向的危险性小，另外，当中止阿尔加托品烷的给药时，生体的凝固机能又会迅速地恢复正非。综上所述，阿尔加托品烷被认为是一种可应用于眼科临床的极有效又安全的药物。
下面表2中列出了阿尔加托品烷的毒性数据。
表2阿尔加托品烷的LD50值(mg/kg)
动物性别静脉内腹腔内皮下经口服小鼠雄性>814753750>15000雌性>816403900>15000大鼠雄性>81320700>15000雌性>81409620>15000狗雄性>200---雌性>200---〔图1〕，是一张代替表示通过条件A的激光照射而形成血纤维蛋白的前房内的生物形态图的照片。
〔图2〕，是一张代替显示通过条件B的激光照射而形成血纤维蛋白的前房内的生物形态图的照片。
〔图3〕，是一张代替表示由于阿尔加托品烷阻止的，因条件A的激光照射而引起的前房内血纤维蛋白形成的前房内的生物的形态图的照片。
〔图4〕，是一张代替表示由于阿尔加托品烷阻止的，因条件B的激光照射而引起的前房内血纤维蛋白形成的前房内的生物形态图的照片。
〔5〕，，是一张代替表示由于阿尔加托品烷阻止的，通过自家血浆的前房内给药的血纤维蛋白形成的前房内的生物的形态图的照片。
〔图6〕，是一张代替表示通过自家血浆的前房内给药而形成血纤维蛋白的前房内的生物形态图的照片。
权利要求
1.一种以由式[化学式1]
表示的阿尔加托品烷作为必要成分的前房内血纤维蛋白形成阻止剂。
2.按照权利要求1中记载的阻止剂，是眼灌流液剂。
3.按照权利要求1中记载的阻止剂，是点眼剂
4.按照权利要求1中记载的阻止剂，是点滴用剂。
5.使用由式〔化学式2〕
所示的阿尔加托品烷，为防止前房内的血纤维蛋白形成的方法。
6.按照权利要求5中记载的方法，是将阿尔加托品烷直接给药于前房内。
7.按照权利要求5中记载的方法，对于阿尔加托品烷的向前房内的给药是采用灌流液剂而进行的。
8.按照权利要求5中记载的方法，对阿尔加托品烷的向前房内的给药是通过点眼剂而进行的。
9.按照权利要求5中记载的方法，对阿尔加托品烷的向前房内的给药是通过静脉内给药而进行的。
10.按照权利要求9中记载的方法，对阿尔加托品烷的向前房内的给药是通过点滴用剂而进行的。
全文摘要
本发明的目的在于防止在网膜和玻璃体的手术、白内障手术和青光眼手术等的眼内手术后的前房内血纤维蛋白形成。
文档编号A61K31/47GK1080850SQ9310384
公开日1994年1月19日 申请日期1993年3月18日 优先权日1992年3月18日
发明者真野富也, 盐村仁 申请人:三菱化成株式会社