专利名称：：含有阿帕芬作活性成分的眼用水溶液的制作方法
技术领域：
：本发明涉及含有阿帕芬(apafant)作活性成分的眼用水溶液，以及通过降低基于溶液中所含添加剂的离子强度(0.05或0.05以下)使阿帕芬在该眼用水溶液中稳定化的方法。
背景技术：
：阿帕芬是化学名称为4-(2-氯苯基)-9-甲-2-[3-(4-吗啉基)-3-丙酰-1-基]-6H-噻吩并[3，2-f][1，2，4]-三唑并[4，3-a][1，4]二氮杂的化合物(见以下结构式[1])，已知它对三唑并二氮杂草血小板活化因子(下文中称之为PAF)具有高拮抗活性(日本公开特许公报176591/1986)。PAF是炎症化学介质，它具有很高的生理活性，并证明其与炎症(例如哮喘病、肾炎)、弥散性血管内凝血综合症和休克有关。已知对PAF具有强拮抗作用的阿帕芬具有多种医药用途。例如WO93/07129公开了阿帕芬适于用作骨质疏松的治疗剂，因其对骨吸收具有抑制作用。日本公开特许公报106826/1991公开了阿帕芬适用于治疗心脏病如心力衰竭，因为发现其可抑制脊骨断裂的小鼠心脏内β-肾上腺素能受体介导的收缩力下降。WO90/01927公开了阿帕芬可用于自身免疫疾病，因为发现其能使患有特发性血小板减少性紫癜的患者体内的血小板增加。还报道了阿帕芬可浓度依赖性地提高过敏性休克患者的存活率(J.Pharmacol.Exp.Ther.，260,748-755(1992))，并且对内毒素或PAF引起的高血压具有拮抗作用(Eur.J.Pharmacol.，135,117-122(1987))。另外，还报道了阿帕芬在临床药理学双盲试验中能完全防止因采用PAF吸入剂产生的气道内耐药性的增加，并能抑制心血管病的发展和PAF引起的副反应(Clin.Pharmacol.Ther.，47,456-462(1990))。眼用方面，WO91/18608公开了阿帕芬还能用作止痒剂局部涂敷在眼部等部位，因其能抑制PAF活性引起的瘙痒。但并未公开过含有阿帕芬作为活性成分的眼用水溶液。因此，为改进含有用作药物活性成分的阿帕芬的眼用水溶液，研究了阿帕芬在眼用水溶液中的稳定性。但问题在于采用常规技术进行配制无法得到稳定的含阿帕芬的眼用水溶液。因此，为改进含有阿帕芬作活性成分的眼用水溶液，必须解决阿帕芬在眼用水溶液中的不稳定的问题。本发明人为提供含阿帕芬作活性成分并具有极好的稳定性的眼用水溶液而作了大量研究。结果，本发明人发现可通过将眼用溶液的离子强度调节至0.05或0.05以下而制备出具有极好稳定性的眼用水溶液。本发明公开本发明涉及含有阿帕芬和添加剂的眼用水溶液，其中通过将离子强度降至0.05或0.05以下以使阿帕芬稳定，还涉及使阿帕芬稳定化的方法(下文中的溶液均指本发明的眼用溶液)。本发明的眼用溶液中的添加剂是眼用制剂中常用的试剂，如pH调节剂(例如，盐酸、氢氧化钠)；具有调节渗透压比的作用的等渗剂，如非电解质(例如甘油、丙二醇、甘露醇、葡萄糖)和电解质(例如，氯化钠、氯化钾)；缓冲剂(例如磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、乙酸钠)；稳定剂(例如柠檬酸钠、乙二胺四乙酸钠)；以及防腐剂(例如氯苄烷铵，对羟苯甲酸甲酯)。适于采用选自上述添加剂的一种或多种。离子强度由本发明眼用溶液的添加剂所得的电解质中各种离子(i)的离子强度来表示，并且是由以下公式计算出的数值。添加剂的总离子强度Ci离子的摩尔浓度Zi离子值可选用的本发明眼用溶液的离子强度是0.05或0.05以下。特别优选离子强度为0.005或0.005以下，并可以是无限近似0的数值。在本发明眼用溶液中用作活性成分的阿帕芬的浓度可依据症状而定，其浓度优选为0.01-1％(重量/体积)，更优选0.1-1％(重量/体积)。在制备眼用溶液时，一般优选将pH和渗透压比调节到眼用制剂适用的的范围内。采用pH调节剂如盐酸或氢氧化钠，或磷酸盐缓冲剂来调节pH。一般采用电解等渗剂如氢氧化钠调节渗透压比。但也可采用不含等渗剂的溶液用作眼用溶液。为调节本发明眼用溶液的渗透压比，优选加入非电解质等渗剂，如甘油、丙二醇、甘露醇或葡萄糖，它们与离子强度无关。在非电解质等渗剂中，特别优选的等渗剂是甘油(例如在日本药典中定义的甘油或浓缩甘油)。眼用溶液中甘油的含量优选是1.2-3.0％(重量/体积)。可将渗透压比调节至眼用制剂适用的范围内，并且优选是0.5-2.0。根据报道，PAF拮抗剂阿帕芬适用于骨质疏松(WO93/07129)，心脏病如心力衰竭(日本公开特许公报106826/1991)，以及自身免疫疾病(WO90/01927)，提高过敏性休克患者的存活率(J.Pharmacol.Exp.Ther.，260，748-755(1992))，对内毒素或PAF引起的高血压具有拮抗作用(Eur.J.Pharmacol.，135，117-122(1987))，能防止因采用PAF吸入剂产生的气道内耐药性的增加，并能抑制心血管病的发展和PAF引起的副反应(Clin.Pharmacol.Ther.，47，456-462(1990))等。眼用方面，公开了阿帕芬用作止痒剂用于眼部的用途(WO91/18608)。但问题在于眼用制剂在稳定性方面存在缺点。本发明人为提供含阿帕芬的具有极好稳定性的眼用水溶液作了大量研究。由于阿帕芬是难溶于水的物质，不经特殊设计很难将其配制成眼用水溶液。(1)首先，本发明人注意到阿帕芬是碱性物质，并对按照多数常规方法将其溶于酸然后用碱调节pH的方法进行了研究。首次尝试中，将阿帕芬溶于盐酸，然后用氢氧化钠调节pH，并加入用作电解质等渗剂的氯化钠调节渗透压。但发现阿帕芬分解，并且在制剂中无法达到令人满意的稳定性。因此，研究了采用非电解质等渗剂甘油时阿帕芬的稳定性，未发现阿帕芬分解。(2)经进一步广泛研究，发现阿帕芬可溶于热水，即使将所得的溶液冷却至室温也不会出现结晶沉淀，阿帕芬在溶液中稳定。基于以上发现研制出眼用水溶液。发现可通过将阿帕芬溶于热水，将所得的溶液冷却至室温，并加入所需量的pH调节剂(缓冲剂)和等渗剂，从而得到稳定眼用水溶液。对(1)和(2)的发现进行综合分析，发现含阿帕芬作为活性成分的眼用水溶液的离子强度会极大地影响阿帕芬的稳定性，并且可通过降低离子强度获得稳定的眼用水溶液。另外，发现眼用水溶液的离子强度应为0.05或0.05以下。特别优选0.005或0.005以下。本发明主要基于上述(1)和(2)的理论。首先，根据上述理论(1)，通过将阿帕芬溶于酸、并用碱中和所得溶液的方法制备水溶液。在这种情况下，其中的中和步骤中，离子强度接近允许范围的上限。但可通过加入甘油、丙二醇、甘露醇、葡萄糖等非电解质等渗剂得到所需的稳定眼用水溶液。然后根据理论(2)，通过将阿帕芬溶于热水中，并在所得溶液中加入pH调节剂和等渗剂的方法制备水溶液。在这种情况下，其中阿帕芬的溶解步骤中不会产生离子强度，并且随后的操作具有相当的自由度。因此，不仅可以采用甘油、丙二醇、甘露醇、葡萄糖等非电解质等渗剂，还可采用氯化钠、氯化钾等电解质等渗剂。如需要，在上述制备方法中阿帕芬溶解后，还可以加入所需量的缓冲剂如磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠或乙酸钠，稳定剂如柠檬酸钠或乙二胺四乙酸钠，防腐剂如氯苄烷铵或对羟苯甲酸酯等。加入这些成分后所得眼用溶液的离子强度应为0.05或0.05以下。另外，本眼用溶液的pH应在眼用制剂适用的范围内，并优选4-8。实施本发明的最佳方式以下所示的是本发明眼用溶液的配制实施例，它们仅用于更好地理解本发明，但对本发明的范围不构成任何限制。实施例1将阿帕芬(1g)搅拌加入0.1N盐酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氢氧化钠(45毫升)，搅拌该混合物。在其中加入微量盐酸或氢氧化钠，将pH调节至7.4，然后加入无菌纯水使总体积达100毫升。最后将所得的无色透明水溶液过滤灭菌，制备出1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液(离子强度μ＝0.045计算值)。实施例2在实施例1中制得的眼用溶液中加入1.8g甘油(日本药典中的浓缩甘油)用以调节渗透压比，得到眼用水溶液(离子强度μ＝0.045计算值)。实施例3将阿帕芬(1g)搅拌加入0.1N盐酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氢氧化钠(45毫升)，甘油(日本药典中的浓缩甘油)(1.8g)和氯苄烷铵(5mg)，搅拌该混合物。在其中加入微量盐酸或氢氧化钠，将pH调节至7.4，然后加入无菌纯水使总体积达100毫升。最后将所得的无色透明水溶液过滤灭菌，制备出1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液(离子强度μ＝0.045计算值)。实施例4按与实施例3类似的方法制备0.1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液(离子强度μ＝0.045计算值)。实施例570-80℃下，将阿帕芬(1g)搅拌加入无菌纯水(70毫升)中，至完全溶解。将所得的水溶液在室温下冷却。在其中加入微量盐酸或氢氧化钠，将pH调节至7.4，然后加入无菌纯水使总体积达100毫升。最后将所得的无色透明水溶液过滤灭菌，制备出1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液(离子强度μ＝0计算值)。实施例6向实施例5中制得的眼用溶液中加入2.6g甘油(日本药典中的浓缩甘油)用以调节渗透压比，得到眼用水溶液(离子强度μ＝0计算会值)。实施例770-80℃下，将阿帕芬(1g)搅拌加入无菌纯水(70毫升)中，至完全溶解。将所得的水溶液在室温下冷却。在其中加入甘油(日本药典中的浓缩甘油)(2.5g)，二水合磷酸二氢钠(50mg)和氯苄烷铵(5mg)，使它们均溶解。在其中加入微量盐酸或氢氧化钠，将pH调节至6.0，然后加入无菌纯水使总体积达100毫升。最后将所得的无色透明水溶液过滤灭菌，制备出1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液(离子强度μ＝0.003计算值)。实施例8按与实施例7类似的方法制备0.1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液(离子强度μ＝0.003计算值)。表1中各实施例的组分由重量％(重量/体积)，体积％(体积/体积)或摩尔浓度(M)来表示。表1</tables>(a)盐酸(b)氢氧化钠(c)日本药典中的浓缩甘油(d)二水合磷酸二氢钠对照实施例1将阿帕芬(1g)搅拌加入0.1N盐酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氢氧化钠(45毫升)和氯化钠(153mg)，搅拌该混合物。在其中加入微量盐酸或氢氧化钠，将pH调节至7.4，然后加入无菌纯水使总体积达100毫升。最后将所得的无色透明水溶液过滤灭菌，制备出1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液(离子强度μ＝0.071计算值)。对照实施例2将阿帕芬(1g)搅拌加入0.1N盐酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氢氧化钠(45毫升)和十二水合磷酸氢二钠(358mg)，搅拌该混合物。在其中加入微量盐酸或氢氧化钠，将pH调节至7.4，然后加入无菌纯水使总体积达100毫升。最后将所得的无色透明水溶液过滤灭菌，制备出1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液(离子强度μ＝0.075计算值)。对照实施例3将阿帕芬(1g)搅拌加入0.1N盐酸(45毫升)中，至完全溶解。在溶液中加入0.1N氢氧化钠(45毫升)和十二水合磷酸氢二钠(3.58g)，搅拌该混合物。在其中加入微量盐酸或氢氧化钠，将pH调节至7.4，然后加入无菌纯水使总体积达100毫升。最后将所得的无色透明水溶液过滤灭菌，制备出1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液(离子强度μ＝0.345计算值)。表2中各对照实施例的组分由重量％(重量/体积)，体积％(体积/体积)或摩尔浓度(M)来表示。表2(a)盐酸(b)氢氧化钠(c)十二水合磷酸氢二钠制剂性质试验稳定性试验(离子强度对阿帕芬剩余百分比的影响)采用以下方法研究活性成分阿帕芬的剩余百分比，用以研究本发明眼用溶液的稳定性。实验方法在玻璃容器中装入被测制剂，在80℃下保存3天、6天和14天，采用高效液相色谱法测定制剂中阿帕芬的含量。实验结果表3所示的是具有不同的离子强度的1％(重量/体积)含阿帕芬的眼用水溶液中阿帕芬的剩余百分比，作为某些实施例的实验结果。表3</tables>-未实施如表3所示，阿帕芬的分解随离子强度增加而增进。但即使将制剂在上述强化的条件下保存14天，在离子强度为0.045或0.045以下的制剂中，阿帕芬的剩余百分比仍为93％或更高。特别是，制剂经14天保存后，在离子强度为0.003或0.003以下的制剂中，阿帕芬的剩余百分比为97％或更高，这时，没有离子强度对阿帕芬的剩余百分比的影响。由上述结果可知，本发明的眼用溶液具有极好的稳定性，并且适于用作含阿帕芬作为活性成分的眼用水溶液。工业实用性本发明涉及含有阿帕芬作活性成分的眼用水溶液，以及通过降低基于溶液中所含的添加剂的离子强度(0.05或0.05以下)使阿帕芬在该眼用水溶液中稳定化的方法。权利要求1.一种稳定的眼用水溶液，其中含有阿帕芬和添加剂，该溶液的离子强度为0.05或0.05以下。2.权利要求1的眼用水溶液，其中的离子强度为0.005或0.005以下。3.权利要求1或2的眼用水溶液，其中阿帕芬的浓度为0.01-1％(重量/体积)。4.权利要求1或2的眼用水溶液，其中阿帕芬的浓度为0.1-1％(重量/体积)。5.权利要求1-4中任一权利要求中的眼用水溶液，其中的添加剂是非电解质等渗剂。6.权利要求5的眼用水溶液，其中非电解质等渗剂是甘油、丙二醇、甘露醇或甘油。7.权利要求5的眼用水溶液，其中非电解质等渗剂是甘油。8.权利要求7的眼用水溶液，其中甘油的浓度为1.2-3.0％(重量/体积)。9.使含有阿帕芬和添加剂的眼用水溶液中的阿帕芬稳定化的方法，其特征在于将离子强度调节至0.05或0.05以下。10.权利要求9的使阿帕芬稳定化的方法，其中将离子强度调节至0.005或0.005以下。11.权利要求9或10的使阿帕芬稳定化的方法，该方法使溶液中所含的阿帕芬的浓度为0.01-1％(重量/体积)。12.权利要求9或10的使阿帕芬稳定化的方法，该方法使溶液中所含的阿帕芬的浓度为0.1-1％(重量/体积)。13.权利要求9至12的使阿帕芬稳定化的方法，其中加入作为添加剂非电解质等渗剂。14.权利要求13的使阿帕芬稳定化的方法，其中的非电解质等渗剂是甘油、丙二醇、甘露醇或葡萄糖。15.权利要求13的使阿帕芬稳定化的方法，其中的非电解质等渗剂是甘油。16.权利要求15的使阿帕芬稳定化的方法，其中甘油的浓度是1.2-3.0％(重量/体积)。全文摘要本发明涉及含有阿帕芬和添加剂的眼用水溶液,其中通过将离子强度降至0.05或0.05以下使阿帕芬稳定化,还涉及使阿帕芬在该眼用水溶液中稳定化的方法。文档编号A61K31/5517GK1199339SQ96197526公开日1998年11月18日申请日期1996年10月9日优先权日1995年10月9日发明者宫城章吾,桑野光明,久纳纪之申请人:参天制药株式会社