选择性调节细胞内信号发出的短肽的制作方法

专利名称：：选择性调节细胞内信号发出的短肽的制作方法相关申请本申请是1997年5月21日提交的美国专利序列号No.08/861,153的部分继续申请，其全部内容通过在此引述而合并于本文。本发明的技术背景蛋白质酪氨酸激酶是真核蛋白质激酶大家族中的成员。这一类的酶特异磷酸化细胞内蛋白质的酪氨酸残基，对于调节多细胞有机体中的信号传导是很重要的。蛋白质酪氨酸激酶是以膜结合受体存在的，参与细胞内的信号传导，包括向核子的信号传导。这样，酪氨酸激酶对酪氨酸的磷酸化作用，对于随环境变化而调节细胞内事件方面是一项重要的机理。许多细胞事件是由酪氨酸激酶调节的，包括细胞因子反应，抗原相关免疫反应，RNA病毒引起的细胞变异，瘤形成，细胞周期的调节，细胞形态和显型的改性。加强蛋白质酪氨酸激酶活性可导致分泌生长因子的持久刺激作用，这样可导致扩增性疾病如癌症，非恶性扩增性疾病如动脉硬化，牛皮癣，和炎症反应如脓毒性休克。减弱功能也可导致疾病，如，减弱胰岛素受体酪氨酸激酶活性是多种类型糖尿病的病因，严重减少B细胞的祖细胞激酶会导致人类X-连锁血中丙球蛋白贫乏。这样，就需要可调节蛋白质酪氨酸激酶表达的化合物。这样的化合物可应用在治疗由于蛋白质酪氨酸激酶过度活性和活性不足引起的疾病中。这样的化合物也可应用在对蛋白质酪氨酸激酶的活动模式，以及这些蛋白质如何调节细胞功能和活性的研究中。本发明的概述目前已发现从多种不同的蛋白质酪氨酸激酶的HJ环衍生的短肽，可显著地影响表达蛋白质酪氨酸激酶细胞的活性(“HJ环”本文下面定义)。一些实例如下列出c-Src，Csk，c-Abl和c-Met的HJ环的肽衍生物已发现可抑制多种不同内皮细胞类型的扩增(实例2和4)。其他c-Src，Lck，内皮细胞酪氨酸激酶受体(Endoth)的HJ环的肽衍生物已发现可刺激牛毛细血管内皮细胞的体外扩增(实例2)。Lyn/Hck的HJ环的肽衍生物已发现可引起血管平滑肌细胞体外形态的改变(实例5)。具体地，与Ac-IVTYGKI-NH2(SEQIDNO.1)和Ac-IVTYGRI-NH2(SEQIDNO.2)，即分别为HJ24和HJ32，一起温育的细胞，变长并呈现纺锤形结构。c-Src的HJ环的肽衍生物已发现可保护神经元细胞在体外不受血清剥夺的影响(实例3)。依据前面提及的发现，本文公开的新的肽是蛋白质酪氨酸激酶的HJ环的肽衍生物。同时公开的还有，确定调节所说的蛋白质酪氨酸激酶活性的蛋白质酪氨酸激酶HJ环的肽衍生物的方法。在受试者中调节蛋白质酪氨酸激酶活性的方法也公开了。本发明的一个具体实施是一种新的肽，是蛋白质酪氨酸激酶HJ环的肽衍生物。这种肽包括约五个到约二十个之间的氨基酸残基或氨基酸残基类似物，并调节蛋白质酪氨酸激酶的活性。肽的N-端和/或C-端可以是取代或未取代的。肽可以是线性的或环状的。本发明的另一个具体实施是在受试者中调节蛋白质酪氨酸激酶活性的方法。方法包括服用治疗上有效量的肽，肽是一种所说的蛋白质酪氨酸激酶HJ环的衍生物，如上所述。本发明的另一个具体实施是确定调节蛋白质酪氨酸激酶活性的肽的方法。该方法包括提供一种“测试肽”，其含有约五个到二十个氨基酸或氨基酸类似物，是一种从所说的蛋白质酪氨酸激酶衍生的肽。在所说的蛋白质酪氨酸激酶的控制下，在适合测定蛋白质酪氨酸激酶活性的条件下，将测试肽与有细胞活性或功能的细胞一起温育。测定蛋白质酪氨酸激酶活性，并与在相同条件但没有测试肽存在的情况下生长的相同细胞类型的细胞比较。与在没有测试肽存在的情况下生长的细胞相比，大些或小些的活性表明测试肽调节蛋白质酪氨酸激酶的活性。本发明的肽可用在治疗多种由蛋白质酪氨酸激酶活性过度及活性不足引起的疾病。实例包括但不限于，癌症，平滑肌扩增引起的疾病(restinosis和动脉硬化)，牛皮癣，炎症病变，糖尿病，免疫病变及骨质疏松症。本发明的肽也可在体外应用，例如，产生抗体，而该抗体特异性地结合蛋白质酪氨酸激酶，而该酪氨酸激酶的HJ环具有与肽相应的序列或亚序列。这些抗体可用来确定表达蛋白质酪氨酸激酶的细胞，以研究蛋白质酪氨酸激酶的细胞内分布。此外，本发明的肽可用来确定和定量与衍生肽的蛋白质酪氨酸激酶HJ环结合的配体。附图的简要说明图1给出了在蛋白质酪氨酸激酶家族中发现的HJ环的共有序列。图2的列表给出了下列蛋白质酪氨酸激酶的HJ环的氨基酸序列c-Src(SEQIDNO.3)，Lck(SEQIDNO.4)，Csk(SEQIDNO.5)，c-Abl(SEQIDNO.6)，c-Met(SEQIDNO.7)，FAK(SEQIDNO.8)，Lyn/Hck(SEQIDNO.9)，Endoth(SEQIDNO.10)，Trk-神经生长因子(Trk-NGFR)(SEQIDNO.11)和EGFR(SEQIDNO.12)。也给出了在这些氨基酸序列中的保守取代基的实例。“*”表示氨基酸侧链上的羧基酸基团被保护为脂族、取代的脂族、苄基、取代的苄基、芳族或取代的芳族酯。图3的列表给出了肽HJ4(SEQIDNO.13)，HJ4.2(SEQIDNO.14)，HJ4Nitro(SEQIDNO.15)，HJ6(SEQIDNO.16)，HJ7(SEQIDNO.17)，HJ7.1(SEQIDNO.18)，HJ8(SEQIDNO.19)，HJ9(SEQIDNO.20)，HJ10(SEQIDNO.21)，HJ11(SEQIDNO.22)，HJ11.1(SEQIDNO.23)，HJ11Met(SEQIDNO.24)，HJ12(SEQIDNO.25)，HJ13(SEQIDNO.26)，HJ14(SEQIDNO.27)，HJ15(SEQIDNO.28)，HJ18(SEQIDNO.29)，HJ20(SEQIDNO.30)，HJ20.1(SEQIDNO.31)，HJ21.1(SEQIDNO.32)，HJ22(SEQIDNO.33)，HJ23.1(SEQIDNO.34)，HJ24(SEQIDNO.1)，HJ25(SEQIDNO.35)，HJ27(SEQIDNO.36)，HJ28(SEQIDNO.37)，HJ30(SEQIDNO.38)，HJ31(SEQIDNO.39)，HJ32(SEQIDNO.2)，HJ33(SEQIDNO.40)，HJ34(SEQIDNO.41)，Lena1(SEQIDNO.42)，Lena2(SEQIDNO.43)，J49(SEQIDNO.44)的序列。图3还给出了衍生每种肽的蛋白质酪氨酸激酶和与每种肽的序列对应的HJ环部分。图4给出了在增加K105H101(SEQIDNO.53)浓度(μm)的情况下，与对照物细胞相比，牛大动脉内皮细胞A19扩增的抑制百分比。K105H101是酪氨酸激酶DDR2的HJ环的肽衍生物。图5给出了在增加K055H101(SEQIDNO.72)浓度(μm)的情况下，与对照物细胞相比，前列腺癌细胞DU145扩增的抑制百分比。K055H101是酪氨酸激酶Lyn的HJ环的肽衍生物。图6给出了在增加K055H101(SEQIDNO.72)浓度(μm)的情况下，与对照物细胞相比，前列腺癌细胞PC3扩增的抑制百分比。K055H101是酪氨酸激酶Lyn的HJ环的肽衍生物。图7给出了本发明的示例肽衍生物的序列，和从它们的HJ环衍生示例肽衍生物的酪氨酸激酶。图7中所示的肽衍生物有K061H101(SEQIDNO.49)；K058H101(SEQIDNO.50)；K104H001(SEQIDNO.51)；K104H101(SEQIDNO.52)；K105H101(SEQIDNO.53)；K105H102(SEQIDNO.54)；K105H103(SEQIDNO.55)；K105H104(SEQIDNO.56)；K105H105(SEQIDNO.57)；K105H106(SEQIDNO.58)；K077H101(SEQIDNO.59)；K078H101(SEQIDNO.60)；K078H102(SEQIDNO.61)；K066H101(SEQIDNO.62)；K060H101(SEQIDNO.63)；K073H101(SEQIDNO.64)；K074H101(SEQIDNO.65)；K075H101(SEQIDNO.66)；K094H101(SEQIDNO.67)；K094H102(SEQIDNO.68)；K057H101(SEQIDNO.69)；K056H101(SEQIDNO.70)；K055H101(SEQIDNO.71)；K055H104(SEQIDNO.72)；K055H111(SEQIDNO.73)；K055H112(SEQIDNO.74)；K055H115(SEQIDNO.75)；K055H116(SEQIDNO.76)；K055H117(SEQIDNO.77)；K055H118(SEQIDNO.78)；K055H119(SEQIDNO.79)；K055H120(SEQIDNO.80)；K055H901(SEQIDNO.81)；K055H902(SEQIDNO.82)；K055H903(SEQIDNO.83)；K055H904(SEQIDNO.84)；K109H101(SEQIDNO.85)；K080H001(SEQIDNO.86)；K080H002(SEQIDNO.87)；K080H101(SEQIDNO.88)；K051H102(SEQIDNO.89)；K051H103(SEQIDNO.90)；K082H001(SEQIDNO.91)；K083H101(SEQIDNO.92)；K083H102(SEQIDNO.93)；K081H101(SEQIDNO.94)；K081H102(SEQIDNO.95)；K084H101(SEQIDNO.96)；K084H102(SEQIDNO.97)；K085H101(SEQIDNO.98)；K086H101(SEQIDNO.99)；K086H102(SEQIDNO.100)；K108H101(SEQIDNO.101)。本发明的详细描述蛋白质酪氨酸激酶(本文后面称“PTK”)是一种细胞内或膜结合蛋白质，它使用ATP或GTP的γ-磷酸盐，在酪氨酸残基的酚基基团上生成磷酸单酯。PTK含有同源的实施磷酸化作用的“激酶域”或“催化域”。根据对大量蛋白质激酶比较，目前已了解蛋白质激酶的激酶域，包括PTK，可被分成十二个亚域，这些区域通常不被大型氨基酸插入打断，并且含有保守残基的特性模式，参见Hanks和Hunter所著“真核性蛋白质激酶超级家族”一文，Hardie及Hanks编辑，蛋白质激酶实事手册，卷I，学院出版社，第二章，1995年(HanksandHunter，“TheEukaryoticProteinKinaseSuperfamily”，inHardieandHanks(ed.)，TheProteinKinaseFactsBook，VolumeI，AcademicPress，Chapter2，1995)。这些亚域指亚域I到亚域XII。本文所指的“HJ环”是在PTK的激酶域内的亚域IX中间至亚域X中间之间的区域发现的。因为在不同的蛋白质激酶的亚域中发现高度的同源性，包括PTK，所以不同PTK的域的氨基酸序列可以对比。这样，PTK的HJ环可通过参考标准型蛋白质激酶的氨基酸序列确定，如PKA-Cα，可以说是与在PKA-Cα的约氨基酸229-248之间发现的约二十个氨基酸残基的邻接序列相对应。对PTK的HJ环的第二个定义，是对在前面段落中提供的定义的补充，可通过参考PTK的激酶域的三维结构得出。PTK的激酶域已发现含有至少九个α-螺旋，被称为螺旋A到螺旋I，参见Tabor等人，《研究学报》[Phil.Trans.R.Soc.Lond.B340315(1993)]，Mohammadi等人，《细胞》[Cell，86577(1996)]；Hubbard等人，《自然》[Nature，372746(1994)])。HJ环是约二十个氨基酸的邻接序列，开始于F螺旋内从F螺旋N-端的约五个氨基酸，延伸约五个氨基酸残到G螺旋中。本发明的肽的C-端或N-端，或它们两者，可分别地被羧酸保护基或胺保护基取代或不取代。适合的保护基在Green和Wuts的“有机合成中的保护基团”中，JohnWiley和Sons，第五和第七章，1991年[＂ProtectingGroupsinOrganicSynthesis＂，JohnWileyandSons，Chapters5and7，1991]公开了，其内容通过在此引述而全部合并于本篇。较好的保护基是那些了促使肽运送入细胞的基团，如，通过减小肽的亲水性并增加亲油性。N-端保护基的实例包括酰基基团(-CO-R1)和烷氧基羰基或芳氧基羰基(-CO-O-R1)，其中R1是脂族、取代的脂族、苄基、取代的苄基、芳族或取代的芳族的基团。酰基基团的具体实例包括乙酰基，(乙基)-CO-，n-丙基-CO-，异-丙基-CO-，n-丁基-CO-，仲-丁基-CO-，叔-丁基-CO-，苯基-CO-，取代的苯基-CO-，苄基-CO-，(取代的苄基)-CO-。烷氧基羰基和芳氧基羰基的实例包括CH3-O-CO-，(乙基)-O-CO-，n-丙基-O-CO-，异-丙基-O-CO-，n-丁基-O-CO-，仲-丁基-O-CO-，叔-丁基-O-CO-，苯基-O-CO-，取代的苯基-O-CO-，苄基-O-CO-，(取代的苄基)-O-CO-。在C-端的羰基基团可被保护起来，为酰胺(如，在C-端的羟基基团被-NH2-、-NHR2或-NR2R3取代)或酯(在C-端的羟基基团被-OR2取代)。R2和R3可分别独立地是脂族、取代的脂族、苄基、取代的苄基、酰基或取代酰基等基团。此外，与氮原子一起，R2和R3可形成带有约0-2个杂原子如氮、氧或硫的C4到C8的杂环。适合的杂环实例包括哌啶烷基，吡咯烷基，吗啉代，硫吗啉代，哌嗪烷基。C-端保护基实例包括-NH2，-NHCH3，-NH(CH3)2，-N(乙基)，-N(乙基)2，-N(甲基)(乙基)，-NH(苄基)，-N(C1-C4烷基)(苄基)，-NH(苯基)，-N(C1-C4烷基)(苯基)，-OCH3，-O-(乙基)，-O-(n-丙基)，-O-(n-丁基)，-O-(异-丙基)，-O-(仲-丁基)，-O-(叔-丁基)，-O-苄基，-O-苯基。“HJ环的肽衍生物”包括含有HJ环的氨基酸序列的肽。“HJ环的肽衍生物”还包括如，PTK的HJ环的亚序列。亚序列是在较大序列内发现的从约五个到约二十个氨基酸或氨基酸残基的邻接序列。这样，HJ环的亚序列是在HJ环内发现的从约五个到二十个氨基酸或氨基酸残基的邻接序列。HJ环的亚序列也可指HJ环的“片段”。“肽衍生物”也包括含有“改性序列”的肽，其中在原始序列或亚序列中的一个或多个氨基酸已被天然产生的氨基酸或氨基酸类似物取代(也称为“改性氨基酸”)。在本发明的一个方面，肽衍生物含有与PTK的HJ环的亚序列相对应的序列，附带条件是在肽衍生物中的任何一个氨基酸残基可与亚序列中的相对应的氨基酸残基不同。如，如果亚序列是[AA1]-[AA2]-[AA3]-[AA4]-[AA5]-，那么肽衍生物可以是[AA1’]-[AA2]-[AA3]-[AA4]-[AA5]-，[AA1]-[AA2’]-[AA3]-[AA4]-[AA5]-，[AA1]-[AA2]-[AA3’]-[AA4]-[AA5]-，[AA1]-[AA2]-[AA3]-[AA4’]-[AA5]-，或[AA1]-[AA2]-[AA3]-[AA4]-[AA5’]-，其中[AA’]是与[AA]不同的天然产生的或改性的氨基酸。在本发明的另一方面，肽衍生物含有与PTK的HJ环的亚序列相对应的序列，附带条件是在肽衍生物中任何两个氨基酸残基可与亚序列中相对应的氨基酸残基不同。“氨基酸残基”是在肽内发现的组成，由-NH-CHR-CO-表示，其中R是天然产生的氨基酸的侧链。当指在肽内发现的组成时，在本申请中“氨基酸残基”和“氨基酸”可互换使用。“氨基酸残基类似物”包括含有下列式子的D或L残基-NH-CHR-CO-，其中R是脂族基团、取代的脂族基团、苄基基团、取代的苄基基团、芳族基团或取代的芳族基团，其中R不与天然产生的氨基酸的侧链相对应。当指在肽内发现的组成时，在本申请中“氨基酸残基类似物”和“氨基酸类似物”可互换使用。用在本文中，脂族基团包括直链、支链或环状的C1-C6完全饱和的烃，其含有一个或两个杂原子如氮、氧或硫和/或含有一个或多个不饱和单元。芳族基团包括碳环芳族基团如苯基和萘基，和杂环芳组基团如咪唑基、吲哚基、噻嗯基、呋喃基、吡啶基、吡喃基、呃唑基、苯噻嗯基、苯呋喃基、喹啉基、异喹啉基、吖啶基。脂族基团、芳族基团或苄基基团上适合的取代基包括，如-OH、卤代基(-Br、-Cl、-I和-F)、-O(脂族基团、取代的脂族基团、苄基、取代的苄基、酰基或取代的酰基)，-CN、-NO2、-COOH、-NH2、-NH(脂族基团、取代的脂族基团、苄基、取代的苄基、酰基或取代的酰基)、-N(脂族基团、取代的脂族基团、苄基、取代的苄基、酰基或取代的酰基)2、-COO(脂族基团、取代的脂族基团、苄基、取代的苄基、酰基或取代的酰基)、-CONH2、-CONH(脂族基团、取代的脂族基团、苄基、取代的苄基、酰基或取代的酰基)、-SH、-S(脂族基团、取代的脂族基团、苄基、取代的苄基、芳族基团或取代的芳族基团)和-NH-C(＝NH)-NH2。取代的苄基或芳族基团也可含有脂族基团或取代的脂族基团作为取代基。取代的脂族基团也可含有苄基、取代的苄基、酰基或取代的酰基作为取代基。取代的脂族基团、取代的芳族基团或取代的苄基可含有一个或多个取代基。在HJ环序列或HJ环亚序列中的氨基酸残基的适合的取代基包括，产生调节PTK活性的肽衍生物的保守取代基。“保守取代”是指这样的取代，即其中的取代氨基酸(天然产生或改性的氨基酸)含有与被取代的氨基酸大约相同的尺寸和电子属性。这样，取代氨基酸在侧链上就会有与原始氨基酸相同或相似的官能团。“保守取代”也指使用除了在侧链中的官能团用适当的保护基功能化之外都与被取代的氨基酸相同的氨基酸进行的取代。适当的保护基在Green和Wuts的“有机合成中的保护基团”一文，JohnWiley和Sons，第5和第7章，1991年[“ProtectingGroupsinOrganicSynthesis”，JohnWileyandSons，Chapters5and7，1991]中公开了，其内容通过在此引述而合并于本文。对于N-端和C-端保护基，较好的保护基是那些促使肽运送到细胞内的基团，如，通过减小肽的亲水性及增加肽的亲油性，并可在细胞内通过水解或酶解裂开，参见Ditter等人在“药物科学杂志”、King等人在“生化”、Lindberg等人在“药物代谢和特性”、Tunek等人在“生化药物”、Alderson等人在“生化和生物物理”、Singhal等人在FASEB上发表的文献[Ditteretal.，J.Pharm，Sci.57783(1968)；Ditteretal.，J.Pharm，Sci.57828(1968)；Ditteretal.，J.Pharm，Sci.57557(1968)；Kingetal.，Biochemistry262294(1987)；Lindbergetal.，DrugMetabolismandDisposition17311(1989)；andTuneketal.，Biochem.Pharm.373867(1988)；Aldersonetal.，Arch.Biochem.，Biophys.，239538(1985)andSinghaletal.，FASEBJ.1220(1987)]。适当的羟基保护基包括酯、碳酸盐和氨基甲酸盐保护基。适当的胺保护基包括酰基和烷氧基或芳氧基，如上所述的对N-端的保护基。适当的羧酸保护基包括脂族、苄基和酰基酯的酯，如上所述的对C-端的保护基。在一个具体实施中，在本发明的肽中的一个或多个谷氨酸或天冬氨酸残基的侧链上的羧酸基团被保护起来，较好的是用如甲基、乙基、苄基或取代的苄基酯，更好的是苄基酯保护起来。下面提供的天然产生和改性的氨基酸组，组中的每一种氨基酸具有相似的电子和空间属性。这样，保守取代可对一种氨基酸用同组的另一种氨基酸进行取代来完成。应该理解的是，这些组是没有限制的，即在每一组中可以包含有其他的改性氨基酸。组I包括亮氨酸，异亮氨酸，缬氨酸，蛋氨酸，丝氨酸，半胱氨酸，苏氨酸和含有下列侧链的改性氨基酸乙基、n-丁基、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH2CHOHCH3和-CH2SCH3。较好地，组I包括亮氨酸，异亮氨酸，缬氨酸，蛋氨酸。组II包括甘氨酸，丙氨酸，缬氨酸，丝氨酸，半胱氨酸，苏氨酸和含有乙基侧链的改性氨基酸。较好地，组II包括甘氨酸，丙氨酸。组III包括苯基丙氨酸，苯基甘氨酸，酪氨酸，色氨酸，环己基甲基，和含有取代的苄基或苯基侧链的改性氨基酸残基。较好的取代基包括下列中的一个或多个卤代基、甲基、乙基、硝基、甲氧基、乙氧基和-CN。较好地，组III包括苯基丙氨酸，酪氨酸和色氨酸。组IV包括谷氨酸，天冬氨酸，谷氨酸或天冬氨酸的取代或未取代的脂族、芳族或苄基的酯(如被甲基、乙基、n-丙基、异-丙基、环己基、苄基或取代的苄基所取代的酯)，谷氨酰胺，天冬酰胺，CO-NH-烷基化谷氨酰胺或天冬酰胺(如被甲基、乙基、n-丙基、异-丙基取代的)和含有侧链-(CH2)3-COOH的改性氨基酸，它们的酯(取代或未取代所脂族、芳族或苄基的酯)，它们的酰胺，和它们的取代或未取代的N-烷基化酰胺。较好地，组IV包括谷氨酸，天冬氨酸，甲基天冬氨酸，乙基天冬氨酸，苄基天冬氨酸，甲基谷氨酸，乙基谷氨酸，和苄基谷氨酸。组V包括组氨酸，赖氨酸，精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，赖氨酸同系物，精氨酸同系物，鸟氨酸同系物。较好地，组V包括组氨酸，赖氨酸，精氨酸，鸟氨酸。氨基酸的同系物包括在侧链上从1到约3个另外的亚甲基单元。组VI包括丝氨酸，苏氨酸，半胱氨酸和含有被-OH或-SH取代的C1-C5直链或支链烷基侧链的改性氨基酸。较好地，组VI包括丝氨酸，半胱氨酸或苏氨酸。在另一方面，在HJ环序列或HJ环亚序列中的氨基酸残基的适合的取代还包括“重度”取代，其产生调节PTK活性的肽衍生物。产生调节PTK活性的肽衍生物的重度取代，与高度保守的位置相比，更可能处于整个蛋白质酪氨酸激酶家族中不是高度保守性的位置上。图1显示了HJ环的约二十个氨基酸的共有序列。在PTK家族中的高度保守位置，和在那些位置上通常可发现的保守氨基酸已作指示。在蛋白质PTK家族中不是高度保守的位置已留出空格。“重度取代”是这样的一种取代，其中取代氨基酸(天然产生或改性的)与被取代的氨基酸相比，尺寸和/或电子属性显著不同。这样，取代氨基酸的侧链可以比被取代的氨基酸的侧链显著地大(或小)，和/或可以含有与被取代的氨基酸电子属性显著不同的官能团。这种类型的重度取代实例包括，用苯基丙氨酸或环己基甲基甘氨酸取代丙氨酸，异亮氨酸取代甘氨酸，D氨基酸取代相应的L氨基酸，或-NH-CH[(-CH2)3-COOH]-CO-取代天冬氨酸。另外，官能团也可加在侧链上，从侧链上删除或与其他官能团交换。这种类型的重度取代的实例包括，在缬氨酸、亮氨酸或异亮氨酸的脂族侧链上加上胺或羟基、羧酸，在天冬氨酸或谷氨酸的侧链上用胺替换羧酸，或在赖氨酸或鸟氨酸的侧链上删除胺。在另一个可选择的方式中，取代氨基酸的侧链可以具有与被取代的氨基酸的官能团显著不同的空间和电子属性。这样的改性实例包括色氨酸取代甘氨酸，赖氨酸取代天冬氨酸，和-CH(-CH2)4-COOH取代丝氨酸的侧链。这些实例不意味有限制性。适当的重度取代的另一个实例是用D-构型氨基酸或其类似物，其在与甘氨酸氢侧链相同的位置上含有氢原子，替代保守甘氨酸残基(如在图1中位置7和位置13)。J49是带有这样的重度取代的肽实例(D-赖氨酸替代保守甘氨酸)。其活性可被肽及肽衍生物调节的PTK实例，如本文所述，包括但不限于，属于下列PTK家族的PTKSrc、EGF-R、FGF-R、VEGF-R、HGF-R、PDGF-R、胰岛素受体家族和神经营养蛋白受体家族。适合的Src家族组成包括但不限于，c-Src、c-Yes、FYN、FGR、HCK、LYN、LCK和BLK。适合的EGF-R家族成员包括但不限于，EGFR、ErbB2、ErbB3、和ErbB4。适合的FGF-R家族成员包括但不限于，FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4。适合的VEGF-R家族成员包括但不限于，Flt1、Flt4和Flk1。适合的胰岛素受体家族包括但不限于，INS-R、IRR和IGF1-R。其他适合的PTK包括但不限于，RET、CSK、c-Met、c-Abl和FAK。本发明包括含有与在PTK的HJ环中发现的序列、其亚序列或其改性亚序列相对应的氨基酸序列的肽。适合的亚序列包括但不限于，与PTK的JH环的[AA]1到[AA]20，[AA]3到[AA]10，[AA]7到[AA]14，[AA]11到[AA]18，[AA]3到[AA]14，[AA]7到[AA]18，和[AA]3到[AA]18或其亚序列相对应的序列。图2显示了下列PTK的HJ环的序列c-Src、Lck、Csk、c-Met、FAK、Lyn/Hck、Endoth和Trk-NGFR。图2也提供了HJ环中氨基酸序列的号码图表。HJ环N-端的氨基酸在位置1上，可称为“[AA]1”。序列中的下一个氨基酸称为“[AA]2”，在位置2上，接着氨基酸[AA]3到[AA]20，在位置3-20上。这样，带有氨基酸序列[AA]1到[AA]20的肽20-mer包括在HJ环中的二十个氨基酸。带有氨基酸序列[AA]3到[AA]10的HJ环的肽衍生物，如在前面段落中所述的，在所说的HJ环中包括第三个氨基酸到第十个氨基酸。本发明还包括含有与调节PTK的活性的PTK的HJ环的改性序列或亚序列相对应的氨基酸序列的肽。一方面，序列或亚序列中的一个、两个或多个氨基酸用保守取代改性；取代可在共有位置上，也可在非共有位置上，或在两种位置上都有。图2中提供了c-Src、Lyn/Hck、Lck、Csk、c-Abl、c-Met、FAK、Endoth和神经生长因子(Trk-NGFR)的HJ环的适当的氨基酸保守取代的实例。另一方面，序列或亚序列中的一个、两个或多个氨基酸用重度取代改性；较好的取代是在非共有位置上。本发明肽衍生物的具体实例包括在图3中所示的肽。如上所述的这些肽的N-端和/或C-端可被改性。如图3中所示，这些肽的N-端被乙酰化了，C-端被酰胺化了。如上所述，酰胺和羧酸的其他保护基也可使用。一个或两个保护基可被省去或不省去。肽可以是线性的或环状的。还包括如图3中所示的肽，附带条件是在肽中的任何一个氨基残基可以变化，为任何天然产生氨基酸或其类似物。本发明也包括如图3中所示的肽，附带条件是在肽中的任何两个氨基残基可以变化，为任何天然产生氨基酸或其类似物的序列的肽。包括在本发明内的其他具体实例为含有序列Leu-Val-Thr-Xaa-Gly-Arg-Val(SEQIDNO.45)或Gly-Arg-Val-Pro-Yaa-Pro-Zaa(SEQIDNO.46)的肽。N-端和/或C-端可被或不被保护，例如，可发生或不发生N-端乙酰化和/或C-端酰胺化。Xaa是从包括L-赖氨酸、D-赖氨酸、组氨酸、酪氨酸、苯基丙氨酸和精氨酸的组中选取；Yaa是从包括酪氨酸、苯基丙氨酸和色氨酸的组中选取；Zaa是从包括甘氨酸、丙氨酸和精氨酸的组中选取。本发明还包括环状肽，其含有与调节PTK活性的PTK的HJ环的改性序列或亚序列相对应的氨基酸序列。“环状肽”指如肽或肽衍生物，在其内通过N-端的氮原子和C-端的羰基碳的肽键形成环。“环化”也是指，通过化合物的N-端的氮和肽中的适当氨基酸的侧链之间的共价键形成环，较好地是C-端的氨基酸。如，可在N-端的氮原子和天冬氨酸或谷氨酸的侧链的羰基碳之间形成酰胺。另外，肽或肽衍生物可通过在化合物C-端羰基和肽中适当氨基酸的侧链之间形成共价键进行环化，较好地是N-端氨基酸。如，在C-端羰基碳和赖氨酸或鸟氨酸的侧链上的氨基氮原子之间形成酰胺；在C-端羰基碳和丝氨酸或苏氨酸的侧链上的羟基氧原子之间形成酯。“环化”也指，通过肽中适当的两个氨基酸的侧链之间的共价键形成环，较好地是终端氨基酸。如，在两个半胱氨酸的侧链上的硫原子之间可形成二硫化物。或者，可在如谷氨酸或天冬氨酸的侧链上的羰基碳，和如丝氨酸或苏氨酸侧链上的氧原子之间形成酯。在如谷氨酸或天冬氨酸的侧链上的羰基碳，和如赖氨酸或鸟氨酸的侧链上的氨基氮之间形成酰胺。此外，肽和肽衍生物可通过在两个端点之间，在一个端点和肽或肽衍生物中氨基酸侧链之间，或在肽或肽衍生物中两个氨基酸的侧链之间的连接基团进行环化。适当的连接基团在Lobl等人的WO92/00995和Chiang等人的WO94/15958中已经公开，其内容通过在此引述而合并于本文。在原始氨基酸序列或亚序列中适当的取代是，那些如上所述可产生调节PTK活性的肽衍生物的取代。当PTK的活性被增加了或被降低了，即PTK的活性是“被调节了”。PTK活性的增加或降低可通过PTK控制的细胞活性或功能的相应调节(增加或降低)来测定。这些细胞功能的实例包括细胞扩增、细胞分化、细胞形态、基因表达等。通过获取含有一种或多种细胞活性受PTK控制的细胞，可容易地确定是否肽或肽衍生物调节PTK活性。在适合测试蛋白质酪氨酸激酶活性的条件下，用肽或肽衍生物温育细胞制备测试混合物。测定PTK活性并与适当的对照物相比，如与在相同的条件下，没有肽或肽衍生物存在下温育的相同的细胞活性相比。与对照物相比，在测试混合物中PTK活性的大些或小些，表示测试肽或肽衍生物调节所说的PTK活性。适用测试的细胞包括表达膜结合或细胞内PTK的正常细胞，转化细胞、或已被遗传重组以表达PTK的细胞。其他适用的细胞包括癌细胞，可用来测定扩增和分化；如Src、Csk和Fak涉及恶性细胞的整个谱系。此外，带有相应有关PTK的具体肿瘤可以使用，包括乳腺和卵巢癌细胞(EGFR)、前列腺癌细胞(FGF)、白血病细胞(Abl)、肝肿瘤细胞(Met)。血管平滑肌细胞可用来测定扩增和移动(FGFR和PDGFR)。免疫系统细胞可用来测定细胞因子的产生，如IL-2、TNF和INF(Lyn、Hck、Blk和Lck)。破骨细胞可用来测定骨的再吸收(Src和Csk)。神经元细胞可用来测定分化(Trks)。上皮组织如表皮，肠上皮细胞和乳房可用来测定扩增、分化和再生(EGFR)。肝细胞可用来测定扩增分化和再生(c-Met)。内皮细胞可用来测定扩增和移动(VEGFR、FGFR和c-Met)。测定PTK活性的适当条件包括适合测试受PTK控制的细胞活性或功能的条件。通常，当细胞暴露在适合细胞生长的条件下时，包括适合的温度(如在约30℃到42℃之间)和介质中适当浓度的营养物的(如氨基酸，维生素，生长因子)存在，可测定细胞的活性。当测试细胞活性或功能如，细胞扩增，分化，细胞形态，基因表达，细胞存活，细胞对外界刺激的反应和细胞显型时，使用适合细胞生长的条件。另一方面，通过在剥夺血清的情况下生长细胞，可估定某些PTK的活性。细胞通常在存在血清的培养物中生长，如牛血清，马血清或牛胎血清。许多细胞，如神经细胞如PC-12细胞，在血清不充分时通常不能存活。使用不充分血清培养细胞即是指“剥夺血清的情况”，包括如含约0％到4％的血清。通过肽或肽衍生物在血清剥夺的状况中对细胞，如神经元细胞的保护程度确定PTK的活性。具体条件在实例3中提供。一般，通过定量测定PTK控制的细胞活性，来测定测试混合物中PTK的活性。如，如果所用细胞其中由PTK控制细胞扩增(如在基础纤维原细胞生长因子中的牛内皮毛细血管细胞)，那么通过测量细胞扩增，如通过比较给定一段时间后的细胞存在数目和细胞原始存在数目，可测定PTK活性。如果使用的细胞其中PTK控制细胞的分化[如用c-Src转染的PC-12细胞-参阅Alema等人在《(自然》上发表的文章，[Alemaetal.，Nature316557(1985)]，那么通过测量分化程度可测定活性(如，神经突的延伸程度和神经元分化的标记在用c-Src转染的PC-12细胞中的表达程度，参阅Alema等人的文献，和在发育Xwnopus胚胎细胞中的中胚层形成诱导程度，参阅Burgess等人在“生化年报”[BurgessandMaciag，Ann.Rev.Biochem.，58575(1989)]的文献和Dionne等人的WO92/00999。活性也可通过基因表达，细胞形态或细胞显型的改变程度来测定，如通过测定细胞形状改变程度，细胞呈现纺锤形结构的程度，基因表达的改变程度，或对外界刺激发应的改变程度(参阅实例5适合测定细胞形状改变的条件)。如果使用血清剥夺条件，则活性可通过细胞存活的程度来测定。与对照物相比，在测试混合物中较多细胞的存活说明肽或肽衍生物可预防凋亡(编程性细胞死亡)。通过测定细胞扩增确定PTK活性的适当条件的具体实例在实例2和4中提供。通过测定细胞存活确定PTK活性的适当血清剥夺条件的具体实例在实例3中提供。应该理解的是，本文上述的确定肽或肽衍生物是否调节由PTK控制的细胞活性或功能的试验，可用本文所具体描述的细胞以外的细胞实施。对于尚未发现的PTK或其功能尚未了解的PTK，一旦确定了其所控制的细胞功能或活性，也可采用这种试验。这些PTK也在本发明的范围内。本发明也涉及在受试者中调节蛋白质酪氨酸激酶活性的方法。“受试者”较好的是人，但也可是需治疗的动物，如兽医动物(如狗、猫，等等)，畜牧动物(如牛、猪、马等等)和实验室动物(如大鼠、小鼠、豚鼠等等)。为治疗某些疾病，如扩增疾病如癌症，非恶性扩增疾病如动脉硬化，牛皮癣和炎症反应如脓毒性休克，可调节受试者中的PTK活性。如癌症可通过抗-血管产生治疗法治疗。对纤维原细胞生长因子(FGF)，或血管内皮生长因子(VEGF)反应的c-Met或酪氨酸激酶受体的抑制作用减少了血管产生。这样，可服用治疗上有效量的，产生减小的对FGF或VEGF反应的，c-Met或酪氨酸激酶受体活性的肽或肽衍生物治疗癌症。此外，RET涉及某些甲状腺癌；调节RET活性的治疗上有效量的肽或肽衍生物，可用来治疗这些甲状腺癌。由气囊导管插入造成的血管损伤而产生的血管平滑肌扩增引起再狭窄。血管平滑肌扩增也是动脉硬化的病因。血管平滑肌扩增是由于如Csk的抑制作用和/或对FGF或血小板衍生生长因子(PDGF)反应的酪氨酸激酶受体的刺激作用。这样，狭窄和动脉硬化可通过服用抑制对FGF或PDGF反应的酪氨酸激酶受体的或激活Csk的治疗上有效量的肽或肽衍生物来治疗。FGF也与牛皮癣、关节炎、良性前列腺肥大有关，参见Dionne等人的WO92/00999。这些病况可用对FGF反应的PTK的HJ肽治疗。Src活性至少部分地与骨吸收有关。这样，骨质疏松症可用治疗上有效量的抑制Src活性的或激活Csk的肽或肽衍生物来治疗。在作为过敏反应的结果而患有关节炎的个体中的非特异免疫反应期间，Lyn和Hck是活性的。在患有脓毒性休克的个体中Lyn也是活性的。这样，这些病况可用抑制这些PTK活性的治疗上有效量的肽或肽衍生物治疗。Lck在T细胞中表达，在T细胞免疫反应期间是活性的。同样地，Lyn在B细胞中表达，在B细胞免疫反应期间是活性的。这样，由T细胞或B细胞活性过度引起的病况可通过服用治疗上有效量的分别抑制Lck或Lyn的肽或肽衍生物来治疗。由T细胞或B细胞活性不足引起的病况可通过服用治疗上有效量的分别刺激Lck或Lyn的肽或肽衍生物来治疗。此外，严重缺少B细胞的祖细胞激酶导致的人类X-连锁血中丙球蛋白缺乏，可通过服用治疗上有效量的刺激B细胞的祖细胞激酶的肽或肽衍生物治疗。其他PTK的功能减弱也会导致疾病。如胰岛素受体酪氨酸激酶(RTK)的活性减弱导致多种类型的糖尿病。这些类型的糖尿病可通过服用治疗上有效量的增加胰岛素RTK活性的肽或肽衍生物来治疗。依据本文所公开的方法，肽和肽衍生物可设计用来调节HJ环已排序和细胞功能已知的PTK的活性。这样，肽和肽衍生物可设计用来影响(增加或减少)那些细胞功能。进一步的研究可能会揭示出，目前不了解病因的某些疾病状况是由PTK控制细胞功能的过度活性或活性不足引起的。这些疾病可通过服用活性过度的或活性不足的PTKs的HJ环的肽衍生物来治疗。适当的肽和肽衍生物可用本文所公开的方法确定。这些治疗方法、肽和肽衍生物等都包括在本发明的范围内。“治疗上有效量”是指这样的化合物量，即与在没有治疗的情况下典型临床结果相比产生了改善的临床结果的量。“改善的临床结果”是指，作为治疗结果延长了生命期望，减少了并发症，减轻了症状，减少了身体的不舒适和/或减少住院治疗等。对于癌症，“改善的临床结果”包括延长生命期望。还可能包括减缓或制止肿瘤生长的速度，致使肿瘤尺寸缩小，降低转移速度和/或改善生命质量(如减少身体不舒适或增加灵活性等)。对于再狭窄和动脉硬化，“改善的临床结果”是指延长生命期望或减小动脉阻塞速度。它还包括改善生命质量(如减少身体不舒适，增加灵活性或减少住院治疗频率和时间等)。对于骨质疏松症，“改善的临床结果”包括如，减小骨坏死的速度，增加骨形成的速度和/或改善生命质量(如减少身体不舒适，增加灵活性或减少住院治疗频率和时间等)。对于调节免疫系统，如果个体有与免疫抑制有关的疾病，那么“改善的临床结果”是指在个体中增加免疫反应的量。如个体患有X-连锁血中丙球蛋白缺乏，改善的临床结果包括增加免疫球蛋白的量。对患有免疫系统抑制的个体，“改善的临床结果”也可指减小传染疾病的易感染性。对于与免疫系统活性过度有关的疾病，“改善的临床结果”是指减小免疫反应的量。对于这两种病况，“改善的临床结果”也包括改善生命质量，如上所述。对于糖尿病，改善的临床结果是指延长生命期望，减少疾病的并发症(如神经病，视网膜病，肾病和血管衰退)和改善生命质量等，如上所述。给个体服用的肽或肽衍生物的量取决于疾病的种类和严重性，及个体的特征，如通常的健康状况，年龄，性别，体重和对药物的容忍量。本领域的技术人员可依据这些和其他因素确定适当的剂量，一般地，对于成人而言，肽或肽衍生物的治疗有效量的范围是从每天约1mg到每天约1000mg。较好的剂量范围是从每天约1mg到每天约100mg。非肠道用药可包括，如系统用药，如通过肌肉注射，静脉注射，皮下注射，腹腔注射。抗蛋白水解作用的肽或肽衍生物可口服用药，如用胶囊，栓剂，悬浮剂或片剂的形式。肽或肽衍生物可与药用可接受的作为治疗癌症、动脉硬化、骨质疏松症或其他上述疾病的药用组合物一部分的载体一起给个体服用。适合的药用载体可含有不与肽或肽衍生物作用的惰性成分。可实施的标准药用配方技术如在Remington的“药物科学”，Mack出版公司[Remington’sPharmaceuticalSciences，MackPublishingCompany，Easton，PA]中所述的那些技术。非肠道用药适合的药用载体包括如，无菌水，生理盐水，细菌抑制盐水(盐水含有约0.9％mg/ml苄基乙醇)，磷酸缓冲盐水，Hank’s溶液，Ringer’s-乳酸盐等等。制备胶囊组合物(如包裹着硬凝胶或环糊精)的方法在此领域是已知的，参见Baker等人的“生物活性剂的控制释放”，1986年(Baker，etal.，ControlledReleaseofBiologicalActiveAgents，JohnWileyandSons，1986)。本发明的HJ环肽是从在天然蛋白质中线性的排列中衍生而来的。因此，它们可用来制备PTK的特异抗体。并且，因为对于每个PTK的亚家族，HJ-环序列是独特的，所以抗HJ-环抗体可特别地用来分离PTK不同的亚家族。通过与适当的载体共轭结合，如与匙孔戚血蓝蛋白或血清蛋白的共轭结合，可制备抗HJ环肽的适当抗体；多克隆和单克隆抗体的制备可采用适当的技术实施。Kohler等人在“自然”杂志、Milstein等人在“自然”杂志、Koprowski等人的美国专利第4,172,124号、Harlow等人的《抗体实验室手册》，寒春码头实验室，“分子生物学通用方案”，卷2，增补27，1994年夏，和《当前分子生物学指导》，第11章[Kohleretal.，Nature，256495-497(1975)；Eur.J.Immunol.6511-519(1976)；Milsteinetal.，Nature266550-552(1977)；Koprowskietal.，U.S.PatentNo.4,172,124；Harlow，E.AndD.Lane，1988，AntibodiesALaboratoryManual，(ColdSpringHarborLaboratoryColdSpringHarbor，NY)；CurrentProtocolsInMolecularBiology，Vol.2(Supplement27，Summer1994)，Ausubel，F.M.etal.，Eds.，(JohnWiley&amp;SonsNewYork，NY)，Chapter11，(1991)]中已描述多种方法。通常，细胞杂交可通过融合适当的不死细胞系(如骨髓瘤细胞系如SP2/0)和抗体产生细胞来制备。抗体产生细胞，较好的是脾或淋巴节产生的细胞，可用从有关抗原免疫的动物中获取。融合的细胞(杂交细胞)可采用选择性培养条件分离，并用限制稀释液克隆。产生有所需特异性的抗体的细胞可用适当的试验方法选取(如ELISA)。抗HJ环肽的抗体，包括单克隆抗体有很多用途。如，那些抗从HJ环肽衍生来的蛋白质的抗体，或与从HJ环肽衍生来的蛋白质反应的抗体，较好的是与所说的蛋白质特异结合的抗体，可用来确定和/或分类在细胞表面上表现那种蛋白质的细胞(如通过荧光活性细胞分类或组织学分析的方式)。对蛋白质特异的单克隆抗体也可用来检测和/或定量在细胞表面表达的或在样品中存在的蛋白质(如在ELISA中)。另外，抗体也可用来确定在细胞的细胞质中是否存在细胞内PTK。生成澄清的细胞溶胞体[如用氢氧化钠(0.2N)和十二烷基硫酸钠(1％)处理细胞，离心并将沉淀与上层清液分离)，并用对PTK为特异的抗-HJ环抗体处理。然后，分析澄清溶胞体，如通过对PTK和抗体之间的Western印迹分析或免疫沉淀分析。接受刺激后，一些PTK变成膜结合的或细胞骨架缔合的。抗-HJ环抗体也可用来在多种生理条件下，通过采用传统免疫细胞化学技术如免疫荧光技术，免疫过氧化酶技术，和免疫电子显微镜法，连同特异抗-HJ-环抗体，来研究PTK多种亚家族的细胞内分布(区室化)。与免疫原作用的抗体也很有用。如它们可用来检测和/或定量样品中的免疫原，或提纯免疫原(如免疫亲和提纯法)。PTK内的HJ环在调节PTK活性中起重要的作用，如本发明的肽和肽衍生物在PTK活性方面具有显著影响的事实所证实的。本发明的HJ环肽也可用来确定与特定PTK的HJ环相互作用并调节PTK活性的配体。如可制备直接地或通过连接物与特定HJ环共价结合的亲和柱。这种柱接着可用来分离和确定结合HJ肽的特异配体，并也可能结合衍生出HJ环肽的PTK的特异配体。然后配体可从柱中洗脱，鉴定并测试其调节PTK活性和PTK控制的细胞功能的能力。丝氨酸/苏氨酸激酶是另一种蛋白质激酶。它们作为细胞内蛋白质，如G-蛋白质偶联受体激酶，或膜激活蛋白质出现参与细胞信号传导。丝氨酸/苏氨酸激酶结合配体产生向细胞内的信号传导，通过激酶对细胞内丝氨酸或苏氨酸残基的磷酸化作用启动。如同PTK，丝氨酸/苏氨酸激酶也用这种磷酸化作用机制控制细胞功能，参见Hardie的“蛋白质激酶的细胞功能”，Hardie和Hanks编辑，《蛋白质激酶实事手册》，学院出版社，1995[Hardie，“CellularFunctionsofProteinKinases”，inHardieandHanks(ed.)TheProteinKinasesFactsBook，AcademicPress1995]。丝氨酸/苏氨酸激酶与PTK具有高度的同源性，包括HJ环。这样，丝氨酸/苏氨酸激酶活性和它们控制的细胞功能可用肽(它们HJ环的肽衍生物)调节，如同上面对PTK的描述一样。丝氨酸/苏氨酸激酶HJ环的肽和肽衍生物，和使用它们的方法，在题目为“选择性调节丝氨酸/苏氨酸激酶活性的短肽”的共悬未决的申请(1997年5月21日提交，律师案卷号，No.CMCC-547)中公开，其内容通过在此引述而合并于本文。本发明化合物中的肽序列的合成可采用固相肽合成法(如，BOC或FMOC)，溶液相合成法，或其他适合的技术包括前述方法的综合。BOC和FMOC法已被建立并被广泛应用，Merrifield的，美国化学学报(J.Am.Chem.Soc.882149(1963))；Meienhofer的，激素性蛋白质和肽(HormonalProteinsandPeptides)，C.H.Li，编辑，学院出版社[HormonalProteinsandPeptides，C.H.Li，Ed.，AcademicPress，1983，pp.48-267]；Barany和Merrifield，在《肽类》杂志[ThePeptides)，E.Gross和J.Meienhofer，编辑，学院出版社，纽约，1980[AcademicPress，NewYork，1980，pp，3-285]中作了有关描述。固相肽合成法则由Merrifield在《科学》、Carpino等人在《有机化学杂志》、以及Gauspohl等人在《合成》[Merrifield，R.B.，Science，232341(1986)]；Carpino，L.A.AndHan，G.Y，J.Org.Chem.，373404(1972)；及Gauspohl，H.etal.，Synthesis，5315(1992)]中作了描述。这些文献的内容通过在此引述而合并于本文。含有肽序列的化合物的环化方法在如Lobl等人的WO92/00995中作了描述，其内容通过在此引述而合并于本文。环化的化合物可通过，用当其他侧链保护基保持完整时可选择性移去的基团，保护要用在环闭合的两个氨基酸的侧链来制备。选择性去保护作用，通过使用直交侧链保护基如烯丙基(OAI)(如对谷氨酸或天冬氨酸侧链的羰基基团)，烯丙氧基羰基(Aloc)(如对赖氨酸或鸟氨酸侧链的氮)或乙酰氨基甲基(Acm)(如对半胱氨酸的巯基)的保护基，可很好地实施。OAI和Aloc可用Pd°容易地移去，Acm可用碘处理容易地移去。本发明用下面的实施例给予说明，这些实施例不在任何方面对本发明有所限制。实施例1-HJ肽的制备本发明的新化合物可采用AppliedBiosystems的430A肽合成器，使用F-Moc技术依据制造商方案合成。制备肽的其他适用方法对本领域的技术人员是已知的。参阅如Merrifield在《科学》杂志、Carpino等人在《有机化学杂志》、Gauspohl等人在《合成》中的描述[Merrifield，P.B.，Science，232341(1986)；Carpino，L.A.，Han，G.Y.，J.Org.Chem.，373404(1972)；Gauspohl，H.，etal.，Synthesis，5315(1992)]，这些文献的内容通过在此引述而合并于本文。使用Rink酰胺树脂[4(2’，4’二甲氧基苯基-FMOC氨基甲基)苯氧基树脂]合成C-酰胺化的肽。用FMOC基团保护氨基酸的α-氨基基团，用弱碱，N-甲基吡咯烷酮的20％哌啶(NMP)在每个环的开始处移去FMOC基团。去除保护基后，将树脂用NMP冲洗移去哌啶。使用溶解在HOBt(1-羟基苯并三唑)和DMF(二甲基甲酰胺)中的HBTU(2(1-苯并三唑基-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲阳离子)，用“FASTMOC化学法”(FASTMOCChemistry)实施氨基酸衍生物的原位激活。加入NMP将氨基酸溶解在这种溶液中。加入DIEA(二异丙基乙基胺)启动激活作用。另外，采用DCC(二环己基碳化二亚胺)和HOBt的激活法以形成HOBt活性酯。在NMP中实施偶联。接着使用0.75g晶体苯酚；0.25mlEDT(1，2-乙二硫醇)；0.5ml(苯硫基甲烷)；0.5ml的去离子水；10mlTFA，进行N-端(选择地)乙酰基化作用，肽从树脂中的TFA(三氟乙酸)解离过程，和加侧链保护基。实施例2-HJ肽影响牛毛细血管内皮细胞体外扩增将96孔平底组织培养微滴盘，在平铺细胞之前，很快预铺上凝胶(Difco)，在玻片双蒸馏水(DDW)中加入0.100ml/孔新鲜过滤的1％凝胶。在37℃将孔温育约1小时，然后用吸气移去多余的溶液。培养介质由DMEM，青霉素-100U/ml；链霉素-100μg/ml；谷酰胺-2mM和10％不含内毒素的牛胎血清和1ng/ml基础纤维原细胞(任何商业来源)制备。牛毛细血管内皮细胞(BCE)25×103个细胞/ml的悬浮液，在上述培养介质中制备，并以0.160ml/孔分布(约4000个内皮细胞/孔)。BCE细胞是用Folkman等人在美国“国家科学院年报”[Folkmanetal.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA765217(1979)]中公开的工艺获取的。用含有0.1％BSA的磷酸缓冲盐水(PBS)，在100％DMSO中稀释10mM的HJ肽溶液制备一组HJ肽原种溶液。将每个原种溶液中HJ肽的浓度调节到测试混合物中所需的HJ肽浓度的九倍。BCE平铺约2小时后，在将0.020ml的每种HJ肽原种溶液加入到相应的孔中，每种浓度六个重复。此外，没有加入HJ肽的BSA溶液用作对照物。在10％CO2湿润温育箱内37℃温育72-80小时。将板标记，弃除介质。然后每块板用PBS(0.200ml/孔)冲洗一次。将孔用100％乙醇冲洗(0.200ml/孔5分钟)进行固定。将乙醇移去，完全干燥培养皿。另外，各孔用4％甲醛PBS(来自费舍尔学报[FisherScientific；CatalogNo.HC200-1]的PBS缓冲的10％福尔马林液)(0.12ml/孔)处理至少30分钟。甲醛固定增强了与乙醇相比的O.D.。用硼酸盐缓冲液(0.1M，pH8.5)冲洗各孔。在各孔中加入新鲜过滤的1％亚甲基蓝溶液(0.600ml/孔)，并在室温温育10分钟。将各孔用自来水冲洗五次，之后将各孔彻底干燥。加入0.1N的HCl(0.200ml/孔)析去颜色。析去处理过夜后，在630nm读取O.D.值，确定每孔的细胞数量。计数细胞的方法在Oliver等人于《细胞科学》[Oliveretal.，J.ofCellSci.，(1989)]发表的文献中非常详细的描述了，其内容通过在此引述而合并于本文。一些不同种HJ肽的结果在表1中列出。在表1中还列出了测试的每种HJ肽的序列，和衍生每种肽的HJ环的亚序列[Src(SEQIDNO.3)，Endos(SEQIDNO.47)和NGF-R(SEQIDNO.48)的HJ环的亚序列]。HJ4(SEQIDNO.13)，HJ12(SEQIDNO.25)，和HJ13(SEQIDNO.26)是Src的HJ环相同亚序列的各种肽衍生物。HJ4抑制BCE细胞扩增；HJ12和HJ13刺激BCE细胞扩增。这种结果说明PTK控制下的细胞活性可被刺激或抑制，取决于所用肽衍生物的序列。HJ11(SEQIDNO.22)也抑制BCE细胞扩增。HJ11是Src的HJ环的与HJ4，HJ12和HJ13不同的部分的亚序列。这个结果说明HJ环的不同部分的肽衍生物可用来刺激或抑制细胞活性。HJ7(SEQIDNO.17)是Endos的HJ环的肽衍生物。这种HJ肽也抑制BCE细胞扩增。这个结果说明细胞活性可被多种不同的PTK控制，用控制细胞活性的一种PTK的HJ环的肽衍生物影响细胞活性是可能的。表1对于HJ肽的BCE反应的归纳</tables>*K＝D-Lys；所有肽的N-端乙酰化了，C-端酰胺化了。实施例3-c-Src的HJ肽衍生物保护PC-12细胞不受血清剥夺的影响依据实施例2中所述的方法在HJ4和HJ8中测试细胞扩增，除了1〕培养介质含2％或4％的马血清；2〕不加纤维原细胞生长因子；3〕细胞温育11天。依据实施例2中的方法计数细胞。特别地，将细胞固定并用甲基蓝染色，之后确定结合甲基蓝的量。在600nM的吸光度测量结合甲基蓝的量表示在各孔中细胞存在的数量。结果在表2中列出表2600nm的O.D.(表示相对的细胞数量)可以看出，HJ4和HJ8都加强了神经元细胞的存活。实施例4-蛋白质酪氨酸激酶的HJ肽衍生物调节体外内皮细胞扩增用Gospodorowicz等人在“美国国家科学院年报”[Gospodorowiczetal.，Proc.Narl.Acad.Sci.734120(1976)]中公开的工艺获取牛动脉内皮细胞(本文称为“A19细胞”)。用Arbiser等人在“美国国家科学院年报”[Arbiseretal.，Proc.Narl.Acad.Sci.94861(1997)]中公开的工艺获取鼠MS1和SVR细胞。这些文献的内容通过在此引述而合并于本文。依据实施例2中所述的方法测试HJ肽对细胞扩增的影响，除了不加纤维原细胞生长因子。依据实施例2中的方法计数细胞。特别地，将细胞固定并用甲基蓝染色，之后确定结合甲基蓝的量。在600nM的吸光度测量结合甲基蓝的量表示在各孔中细胞存在的数量。结果在表3中列出表3</tables>*观察到的显著抑制细胞扩增的浓度。c-SRC、Lyn/Hck、c-Abl、Csk、c-Met和FAK的HJ肽衍生物，在浓度低为10μM时，对抑制内皮细胞扩增是有效的。实施例5-Lyn/Hck的HJ肽衍生物使血管平滑肌细胞形状发生改变用Castellot等人在《细胞生物学杂志》[Castellotetal.，J.Cell.Biol.1021979(1986)]中公开的方法获取的牛血管平滑肌细胞(VSMC)，在培养物中生长，与HJ24和HJ32一起温育，如实施例4中所述。48小时后，这些肽衍生物表现出显著的诱导VSMC细胞形状改变的能力。细胞变长并呈现纺锤型结构。对于产生这些形态改变，HJ32在10和40μM是有效的，HJ24在40μM是有效的。实施例6-K105H101(SEQIDNO.53)，DDR2的HJ肽衍生物抑制内皮细胞体外扩增依据实施例4中公开的方法测试K105H101(SEQIDNO.53)对牛内皮细胞(本文的“A19细胞”)的抑制作用。可以看出，相对对照物细胞，K105H101(SEQIDNO.53)在浓度大于约2.0μM抑制A19细胞的扩增。实施例7-K055H101(SEQIDNO.72)，Lyn的HJ肽衍生物抑制前列腺癌细胞体外扩增K055H101抑制从前列腺癌细胞组PC3和DU145中获取的细胞扩增的能力，可用实施例4中所述方法实施，除了测试细胞是人类前列腺癌细胞组PC3和DU145，及DU145细胞在RPMI1640介质中生长。两组细胞都从美国典型物培养中心[AmericanTypeCultureCollection(ATCCNo.1435-CRL和81-HTB)中获取]。并且，板不用预先涂抹凝胶。结果在图5和图6中列出。可以看出，相对对照物细胞，K055H101在浓度大于约0.3μM时抑制DU145细胞的扩增，在浓度大于约0.16μM抑制PC3细胞的扩增。等同物本此领域的技术人员采用不超过常规的试验，可以确定出，本文所述发明的具体实施的等同物。这样的等同物都包含在下面的权利要求书的范围内。权利要求1.一种肽，其含有蛋白质酪氨酸激酶HJ环的肽衍生物，其中(a)所说的肽有约五个到约二十个之间的氨基酸或氨基酸类似物；以及(b)所说的肽调节蛋白质酪氨酸激酶的活性。2.根据权利要求1所述的肽，其中所述的肽是环状的。3.权利要求1所述的肽，其中所述的肽是线性的。4.根据权利要求3所述的肽，其中肽的N-端和C-端是未取代的。5.根据权利要求3所述的的肽，其中N-端或C-端中的至少一个是被取代的。6.根据权利要求5的肽，其中N-端是酰胺化的，C-端是酰化的。7.根据权利要求1所述的肽，其中肽衍生物含有与所说的蛋白质酪氨酸激酶的所说的HJ环的氨基酸序列的任何亚序列相对应的氨基酸序列，附带条件是肽衍生物序列中的任何一个氨基酸可变化，为任何氨基酸或其类似物。8.根据权利要求7所述的肽，其中蛋白质酪氨酸激酶是从下列家族组中选取的蛋白质酪氨酸激酶家族的成员Src，EGF-R、FGF-R、VEGF-R、HGF-R、胰岛素受体家族、和神经营养蛋白受体家族。9.根据权利要求8所述的肽，其中蛋白质酪氨酸激酶是从下列蛋白质酪氨酸激酶Src家族基团中选取的c-Src、c-Yes、FYN、FGR、HCK、LYN、LCY和BLK。10.根据权利要求7所述的肽，其中蛋白质酪氨酸激酶是从含有下列蛋白质酪氨酸激酶的组中选取的RET、CSK、c-Met、c-Abl、和FAK。11.根据权利要求6所述的肽，其中肽是庚肽。12.根据权利要求11所述的肽，其中肽含有Leu-Val-Thr-Xaa-Gly-Arg-Val(SEQIDNO.45)，其中Xaa是从含有L-赖氨酸，D-赖氨酸，组氨酸，酪氨酸，苯基丙氨酸和精氨酸的组中选取的。13.根据权利要求11所述的肽，其中肽含有Gly-Arg-Pro-Yaa-Pro-Zaa(SEQIDNO.46)，其中(a)Yaa是从含有酪氨酸、苯基丙氨酸和色氨酸的组中选取的；(b)Zaa是从含有甘氨酸、丙氨酸和精氨酸的组中选取的。14.根据权利要求8所述的肽，其中蛋白质酪氨酸激酶是从下列蛋白质酪氨酸激酶EGF-R家族组中选取的EGFR、ErbB2、ErbB3和ErbB4。15.根据权利要求8所述的肽，其中蛋白质酪氨酸激酶是从下列蛋白质酪氨酸激酶FGF-R家族组中选取的FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4。16.根据权利要求8所述的肽，其中蛋白质酪氨酸激酶是从下列蛋白质酪氨酸激酶VEGF-R家族组中选取的:Flt1、Flt4和Flk1。17.根据权利要求8所述的肽，其中蛋白质酪氨酸激酶是从下列蛋白质酪氨酸激酶胰岛素受体家族组中选取的INS-R，IRR和IGF1-R。18.根据权利要求8所述的肽，其中蛋白质酪氨酸激酶是从下列蛋白质酪氨酸激酶神经营养蛋白受体家族组中选取的TrkA、TrkB和TrkC19.根据权利要求1所述的肽，其中肽衍生物含有与所说的HJ环的氨基酸序列的任何亚序列相对应的氨基酸序列20.根据权利要求6所述的肽，其中所述的肽含有的氨基酸序列是肽HJ4(SEQIDNO.13)，HJ4.2(SEQIDNO.14)，HJ4Nitro(SEQIDNO.15)，HJ6(SEQIDNO.16)，HJ7(SEQIDNO.17)，HJ7.1(SEQIDNO.18)，HJ8(SEQIDNO.19)，HJ9(SEQIDNO.20)，HJ10(SEQIDNO.21)，HJ11(SEQIDNO.22)，HJ11.1(SEQIDNO.23)，HJ11Met(SEQIDNO.24)，HJ12(SEQIDNO.25)，HJ13(SEQIDNO.26)，HJ14(SEQIDNO.27)，HJ15(SEQIDNO.28)，HJ18(SEQIDNO.29)，HJ20(SEQIDNO.30)，HJ20.1(SEQIDNO.31)，HJ21.1(SEQIDNO.32)，HJ22(SEQIDNO.33)，HJ23.1(SEQIDNO.34)，HJ24(SEQIDNO.1)，HJ25(SEQIDNO.35)，HJ27(SEQIDNO.36)，HJ28(SEQIDNO.37)，HJ30(SEQIDNO.38)，HJ31(SEQIDNO.39)，HJ32(SEQIDNO.2)，HJ33(SEQIDNO.40)，HJ34(SEQIDNO.41)，Lena1(SEQIDNO.42)，Lena2(SEQIDNO.43)，或J29(SEQIDNO.44)的序列21.一种肽，其包括的序列是肽HJ4(SEQIDNO.13)，HJ4.2(SEQIDNO.14)，HJ4Nitro(SEQIDNO.15)，HJ6(SEQIDNO.16)，HJ7(SEQIDNO.17)，HJ7.1(SEQIDNO.18)，HJ8(SEQIDNO.19)，HJ9(SEQIDNO.20)，HJ10(SEQIDNO.21)，HJ11(SEQIDNO.22)，HJ11.1(SEQIDNO.23)，HJ11Met(SEQIDNO.24)，HJ12(SEQIDNO.25)，HJ13(SEQIDNO.26)，HJ14(SEQIDNO.27)，HJ15(SEQIDNO.28)，HJ18(SEQIDNO.29)，HJ20(SEQIDNO.30)，HJ20.1(SEQIDNO.31)，HJ21.1(SEQIDNO.32)，HJ22(SEQIDNO.33)，HJ23.1(SEQIDNO.34)，HJ24(SEQIDNO.35)，HJ27(SEQIDNO.36)，HJ28(SEQIDNO.37)，HJ30(SEQIDNO.38)，HJ31(SEQIDNO.39)，HJ32(SEQIDNO.2)，HJ33(SEQIDNO.40)，HJ34(SEQIDNO.41)，Lena1(SEQIDNO.42)，Lena2(SEQIDNO.43)，J29(SEQIDNO.44)的序列，附带条件是肽中的任何一个氨基酸残基可变化，为任何天然产生氨基酸或其类似物22.一种肽，其包括AA1到AA20的氨基酸序列，或含有至少五个氨基酸的其亚序列，其中AA1是苏氨酸，或色氨酸；AA2是从含有谷氨酸，天冬氨酸，谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA3是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA4是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸，丝氨酸，苏氨酸的组中选取的；AA5是丝氨酸，苏氨酸；AA6是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸，2-氨基-4-胍基丁酸和赖氨酸的组中选取的；AA7是甘氨酸或丙氨酸；AA8是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸，2-氨基-4-胍基丁酸和赖氨酸的基团中选取的；AA9是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA10是脯氨酸；AA11是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸，和色氨酸的组中选取的；AA12是脯氨酸；AA13是甘氨酸或丙氨酸；AA14是从含有蛋氨酸，精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸的组中选取的；AA15是从含有缬氨酸，天冬酰胺，苏氨酸，丝氨酸的组中选取的；AA16是天冬酰胺或赖氨酸；AA17是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，丙氨酸，脯氨酸的组中选取的；AA18是从含有谷氨酰胺，天冬酰胺，谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA19是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，和缬氨酸的组中选取的；AA20是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，和缬氨酸的组中选取的。23.根据权利要求22所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应c-SRC或Lck的HJ环的序列或其亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的两个氨基酸可变化。24.根据权利要求22所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应c-SRC的HJ环的序列或亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的任何一个氨基酸可变化。25.根据权利要求23或24所述的肽，其中肽含有序列AA1到AA20的一个八个氨基酸的亚序列，其中亚序列从含有AA3到AA10，AA7到AA14，AA11到AA18的组中选取。26.一种肽，其包括AA1到AA20的氨基酸序列，或含有至少五个氨基酸的其亚序列，其中AA1是色氨酸；AA2是从含有谷氨酸，天冬氨酸，谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA3是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA4是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸或色氨酸的组中选取的；AA5是苏氨酸或丝氨酸；AA6是酪氨酸，苯基丙氨酸和色氨酸；AA7是甘氨酸或丙氨酸；AA8是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，鸟氨酸，赖氨酸的组中选取的；AA9是缬氨酸或丙氨酸；AA10是脯氨酸；AA11是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸，和色氨酸的基团中选取的；AA12是脯氨酸；AA13是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，赖氨酸，鸟氨酸的组中选取的；AA14是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸，的组中选取的；AA15是从含有脯氨酸，苏氨酸，丝氨酸的组中选取的；AA16是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸，的组中选取的；AA17是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，鸟氨酸，赖氨酸的组中选取的；AA18是从含有谷氨酰胺，天冬酰胺，谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA19是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，和缬氨酸的组中选取的；AA20是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，和缬氨酸的组中选取的。27.根据权利要求26所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应Csk的HJ环的序列或其亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的两个氨基酸可变化。28.根据权利要求26所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应CskHJ环的序列或亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的任何一个氨基酸可变化。29.根据权利要求27或28所述的肽，其中肽包括序列AA1到AA20的一个八个氨基酸的亚序列，其中亚序列从含有AA3到AA10，AA7到AA14，AA11到AA18的组中选取。30.一种肽，其包括AA1到AA20的氨基酸序列，或含有至少五个氨基酸的其亚序列，其中AA1是色氨酸；AA2是谷氨酸，或谷氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯；AA3是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA4是从含有丙氨酸，甘氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA5是苏氨酸或丝氨酸；AA6是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸或色氨酸的组中选取的；AA7是甘氨酸或丙氨酸；AA8是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA9是苏氨酸或丝氨酸；AA10是脯氨酸；AA11是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸，和色氨酸的组中选取的；AA12是脯氨酸；AA13是甘氨酸或丙氨酸；AA14是从含有蛋氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，缬氨酸的基团中选取的；AA15是从含有谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA16是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，亮氨酸，异亮氨酸，脯氨酸，赖氨酸，鸟氨酸的组中选取的；AA17是丝氨酸或苏氨酸；AA18是从含有谷氨酰胺，天冬酰胺，谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA19是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，和缬氨酸的组中选取的；AA20是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸和色氨酸的组中选取的。31.根据权利要求30所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应c-Abl的HJ环的序列或其亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的两个氨基酸可变化。32.根据权利要求30所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应c-Abl的HJ环的序列或亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的任何一个氨基酸可变化。33.根据权利要求31或32所述的肽，其中肽包括序列AA1到AA20的一个八个氨基酸的亚序列，其中亚序列从含有AA3到AA10，AA7到AA14，AA11到AA18的组中选取。34.一种肽，其包括含有AA1到AA20的氨基酸序列，或含有至少五个氨基酸的其亚序列，其中AA1是色氨酸；AA2是从含有谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA3是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA4是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA5是苏氨酸或丝氨酸；AA6是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，酪氨酸，赖氨酸，鸟氨酸的组中选取的；AA7是甘氨酸或丙氨酸；AA8是甘氨酸或丙氨酸；AA9是从含有脯氨酸，丝氨酸和苏氨酸的组中选取的；AA10是脯氨酸；AA11是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸，和色氨酸的组中选取的；AA12是组氨酸；AA13是从含有谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA14是亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA15是从含有谷氨酰胺，天冬酰胺，谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA16是苏氨酸或脯氨酸；AA17是从含有苯基丙氨酸，酪氨酸和色氨酸的组中选取的；AA18是从含有谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA19是从含有缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸和蛋氨酸的组中选取的；AA20是从含有苏氨酸，丝氨酸和它们的C-搅拌衍生物的组中选取的。35.根据权利要求34所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应c-Met的HJ环的序列或其亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的两个氨基酸可变化。36.根据权利要求34所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应c-Met的HJ环的序列或亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的任何一个氨基酸可变化。37.根据权利要求35或36所述的肽，其中肽含有序列AA1到AA20的一个八个氨基酸的亚序列，其中亚序列从含有AA3到AA10，AA7到AA14，AA11到AA18的组中选取。38.一种肽，其含有AA1到AA20的氨基酸序列，或含有至少五个氨基酸的其亚序列，其中AA1是色氨酸；AA2是从含有谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA3是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA4是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA5是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA6是从含有组氨酸，赖氨酸和鸟氨酸的组中选取的；AA7是甘氨酸或丙氨酸；AA8是从含有缬氨酸，丙氨酸，鸟氨酸的组中选取的；AA9是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，赖氨酸，鸟氨酸的组中选的；AA10是脯氨酸；AA11是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸，和色氨酸的组中选取的；AA12是谷氨酰胺或脯氨酸；AA13是甘氨酸或丙氨酸；AA14是从含有缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸和丙氨酸的组中选取的；AA15是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，赖氨酸，鸟氨酸的组中选取的；AA16是从含有谷氨酰胺，天冬酰胺，谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA17是从含有谷氨酰胺，天冬酰胺，谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA18是从含有谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA19是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，和缬氨酸的组中选取的；AA20是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，和缬氨酸和它们所的C-搅拌衍生物的组中选取的。39.根据权利要求38所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应FAK的HJ环的序列或其亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的两个氨基酸可变化。40.根据权利要求38所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应FAK的HJ环的序列或亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的任何一个氨基酸可变化。41.根据权利要求39或40所述的肽，其中肽含有序列AA1到AA20的一个八个氨基酸的亚序列，其中亚序列从含有AA3到AA10，AA7到AA14，AA11到AA18的组中选取。42.一种肽，其含有AA1到AA20的氨基酸序列，或含有至少五个氨基酸的其亚序列，其中AA1是色氨酸或蛋氨酸；AA2是从含有谷氨酸，天冬氨酸和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA3是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA4是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA5是苏氨酸或丝氨酸；AA6是从含有苯基丙氨酸，酪氨酸，色氨酸的组中选取的；AA7是甘氨酸或丙氨酸；AA8是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸，赖氨酸和鸟氨酸的组中选取的；AA9是从含有缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸和蛋氨酸的组中选取的；AA10是脯氨酸；AA11是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸，和色氨酸的组中选取的；AA12是脯氨酸；AA13是甘氨酸或丙氨酸；AA14是从含有精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸和蛋氨酸的组中选取的；AA15是苏氨酸或丝氨酸；AA16是天冬酰胺或谷氨酰胺；AA17是从含有丙氨酸，甘氨酸和鸟氨酸的组中选取的；AA18是从含有谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA19是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，和缬氨酸组中选取的；AA20是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，和缬氨酸的组中选取的。43.根据权利要求42所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应Lyn或Hck的HJ环的序列或其亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的两个氨基酸可变化。44.根据权利要求42所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应Lyn或Hck的HJ环的序列或亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的任何一个氨基酸可变化。45.根据权利要求43或44所述的肽，其中肽含有序列AA1到AA20的一个八个氨基酸的亚序列，其中亚序列从含有AA3到AA10，AA7到AA14，AA11到AA18的组中选取。46.一种肽，其包括AA1到AA20的氨基酸序列，或至少五个氨基酸的其亚序列，其中AA1是色氨酸AA2是从含有谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA3是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA4是从含有苯基丙氨酸，酪氨酸，色氨酸的组中选取的；AA5是苏氨酸或丝氨酸；AA6是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，缬氨酸的组中选取的；AA7是谷氨酸或丙氨酸；AA8是谷氨酸或丙氨酸；AA9是苏氨酸或丝氨酸；AA10是脯氨酸；AA11是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸和色氨酸的组中选取的；AA12是从含有脯氨酸，半胱氨酸，丝氨酸和丙氨酸的组中选取的；AA13是甘氨酸或丙氨酸；AA14是从含有蛋氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸的组中选取的；AA15是从含有丝氨酸，苏氨酸，蛋氨酸，脯氨酸，赖氨酸，鸟氨酸，谷氨酰胺，天冬酰胺的组中选取的；AA16是从含有半胱氨酸，丝氨酸，蛋氨酸，缬氨酸，亮氨酸和异亮氨酸的组中选取的；AA17是从含有丙氨酸，天冬酰胺，天冬氨酸，和天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA18是从苏氨酸，丝氨酸，谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA19是从含有苏氨酸，亮氨酸，谷氨酰胺，天冬酰胺，谷氨酸，天冬氨酸，和谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA20是从含有酪氨酸，苯基丙氨酸和色氨酸的组中选取的。47.根据权利要求46所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应Endoth的HJ环的序列或其亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的两个氨基酸可变化。48.根据权利要求46所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应Endoth的HJ环的序列或亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的任何一个氨基酸可变化。49.根据权利要求47或48所述的肽，其中肽含有序列AA1到AA20的一个八个氨基酸的亚序列，其中亚序列从含有AA3到AA10，AA7到AA14，AA11到AA18的组中选取。50.一种肽，其包括AA1到AA20的氨基酸序列，或含有至少五个氨基酸的其亚序列，其中AA1是色氨酸；AA2是从含有谷氨酸，天冬氨酸，或谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA3是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，或缬氨酸的组中选取的；AA4是从含有苯基丙氨酸，酪氨酸和色氨酸的组中选取的；AA5是苏氨酸或丝氨酸；AA6是从含有苯基丙氨酸，酪氨酸和色氨酸的组中选取的；AA7是甘氨酸或丙氨酸；AA8是赖氨酸或鸟氨酸；AA9是谷氨酰胺或天冬酰胺；AA10是脯氨酸；AA11是从含有苯基丙氨酸，酪氨酸和色氨酸的组中选取的；AA12是从含有苯基丙氨酸，酪氨酸和色氨酸的组中选取的；AA13是谷氨酰胺酸或天冬酰胺；A14是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸和缬氨酸的组中选取的；AA15是丝氨酸或苏氨酸；AA16是谷氨酰胺酸或天冬酰胺；AA17是苏氨酸或天冬酰胺；AA18是从含有谷氨酸，天冬氨酸，或谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯的组中选取的；AA19是从含有甘氨酸，丙氨酸和缬氨酸的组中选取的；AA20是从含有亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，或缬氨酸的组中选取的。51.根据权利要求50所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应Trk-NGFR的HJ环的序列或其亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的两个氨基酸可变化。52.根据权利要求50所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应Trk-NGFR的HJ环的序列或亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的任何一个氨基酸可变化。53.根据权利要求51或52所述的肽，其中肽含有序列AA1到AA20的一个八个氨基酸的亚序列，其中亚序列从含有AA3到AA10，AA7到AA14，AA11到AA18的组中选取。54.一种肽，其包括AA1到AA20的氨基酸序列，或含有至少五个氨基酸的其亚序列，其中AA1是谷氨酸，天冬氨酸，或谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯；AA2是亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，或缬氨酸；AA3是丝氨酸，苏氨酸或脯氨酸；AA4是苯基丙氨酸，酪氨酸或色氨酸；AA5是谷氨酸，天冬氨酸，或谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯；AA6是亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，或缬氨酸；AA7是亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸，或缬氨酸；AA8是苏氨酸或丝氨酸；AA9是苯基丙氨酸，酪氨酸或色氨酸；AA10是谷氨酸或丙氨酸；AA11是丝氨酸，丙氨酸，苏氨酸或甘氨酸；AA12是赖氨酸，鸟氨酸，精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸的组中选取的；AA13是脯氨酸；A14是酪氨酸，苯基丙氨酸，色氨酸；AA15是谷氨酸，天冬氨酸，或谷氨酸或天冬氨酸的脂族，取代的脂族，苄基，取代的苄基，芳族或取代的芳族的酯；AA16是甘氨酸或丙氨酸；AA17是亮氨酸，异亮氨酸，蛋氨酸或缬氨酸；AA18是脯氨酸；AA19是甘氨酸，丙氨酸，丝氨酸或苏氨酸；AA20是丝氨酸，精氨酸，N-硝基精氨酸，β-环精氨酸，γ-羟基精氨酸，N-脒基瓜氨酸和2-氨基-4-胍基丁酸。55.根据权利要求54所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应EGFR的HJ环的序列或其亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的两个氨基酸可变化。56.根据权利要求54所述的肽，其中序列AA1到AA20或其亚序列对应EGFR的HJ环的序列或亚序列，附带条件是序列AA1到AA20或其亚序列中的任何一个氨基酸可变化57.根据权利要求55或56所述的肽，其中肽含有序列AA1到AA20的一个八个氨基酸的亚序列，其中亚序列从含有AA3到AA10，AA7到AA14，AA11到AA18的组中选取；58.一种确定调节蛋白质酪氨酸激酶活性的肽的方法，该方法包括步骤(a)提供肽，指“测试肽”，其包括所说的蛋白质酪氨酸激酶的HJ环的肽衍生物，并含有从约五个到约二十个氨基酸或其类似物；(b)在适合测试蛋白质酪氨酸激酶活性的条件下，将测试肽与具有由蛋白质酪氨酸激酶控制的一个或多个细胞活性的细胞一起温育；(c)测定蛋白质酪氨酸激酶活性，其中和没有与测试肽一起温育的生长细胞相比，大些或小些的活性表示，肽调节蛋白质酪氨酸激酶的活性。59.根据权利要求58所述的方法，其中蛋白质酪氨酸激酶活性是通过测量组织培养物中所说的细胞的存活率或扩增状况测定的。60.一种调节蛋白质酪氨酸激酶活性的肽，其中肽用权利要求58的方法确定。61.一种在受试者中调节蛋白质酪氨酸激酶活性的方法，包括服用治疗上有效量的含有蛋白质酪氨酸激酶HJ环的肽衍生物的肽，其中(a)所说的肽有约五个到约二十个氨基酸或其类似物；(b)所说的肽调节蛋白质酪氨酸激酶活性；(c)所说的肽的N-端是未取代的或酰化的；(d)所说的肽的C-酸是未取代的或酰胺化的。全文摘要公开的肽是蛋白质酪氨酸激酶HJ环的肽衍生物。这种肽可调节蛋白质酪氨酸激酶活性。还公开了通过服用本发明一种肽,调节受试者蛋白质酪氨酸激酶活性的方法。文档编号A61P17/06GK1257539SQ98805329公开日2000年6月21日申请日期1998年5月20日优先权日1997年5月21日发明者施姆尔·A·本－赛森申请人:儿童医疗中心有限公司