专利名称：脂基免疫调节剂组合物的制作方法
技术领域：
及背景本发明涉及用于激活免疫系统的组合物和方法。本发明的组合物特别用于在免疫系统活性降低的应激反应(stress)情况下激活免疫系统。应激反应引起的免疫系统活性降低的一个具体例子是在戒烟的情况下。
有许多免疫系统活性降低的临床疾病，因而使个体更加易于罹患条件致病性感染。已知由损伤、康复及对于毒品、酒精或吸烟成瘾造成的应激反应可在数分钟内降低免疫系统活性。例如，已经有严重损伤后发生急剧感染的记载。
本发明的目的在于，提供特别用于在存在应激反应的个体中以提高免疫系统活性使免疫系统更有活力的组合物。
发明概述依本发明，令人惊奇地发现富含磷脂酸(PA)的天然脂制剂能激活免疫系统。在经历戒烟治疗的个体中试验了过去认为与免疫系统活性减低相关的富含PA的脂制剂的活性。
如下说明书所述，描述了本发明的多种形式及其方法。
富含PA的脂制剂(PA-E-LP)是指一种包含占组合物总脂类含量至少10％(w/w)的PA，优选20％-75％范围内的PA的脂制剂。(如上及以下所示的“％”浓度是指每100重量单位的全部组合物中组成成分的重量单位数(w/w))。
天然PA-E-LP是指来自天然脂制剂如来源于植物、动物组织或其任意组合的磷脂制剂。这类天然磷脂制剂一般来源于大豆、卵黄或动物血清。一般通过酶学方法从天然磷脂制剂中制备天然PA-E-LP。天然PA-E-LP中，脂类的残余物主要由磷脂组成，尽管在制剂中也包括少量如0.1-10％的其他亲脂性物质，如胆固醇、脂肪酸等。
存在应激反应的个体是指处于如下状况或条件的个体会导致出现应激反应焦虑、生理性损伤、使用毒品、酒精及吸烟等的戒断。
本发明的一方面，通过用于激活免疫系统的药物组合物提供了天然来源的脂制剂，所述脂制剂经加富包含至少约10％的PA，优选至少约20％的PA，最优选高于50％的PA。一般地，PA的浓度相对于总脂质成分不超过75％。
本发明的组合物特别用于在应激反应相关的条件下，包括免疫系统活性降低的条件下激活免疫系统。所述应激反应条件的例子有各种损伤、使用毒品、酒精及吸烟等的戒断。
本发明还提供一种用于在需要的个体中激活免疫系统的方法，包括向所述个体施用有效量的PA-E-LP，特别是天然PA-E-LP。
本发明还提供所述PA-E-LP，特别是天然PA-E-LP用于制备激活免疫系统的药物组合物中的用途。
术语“有效量”应理解为足以产生期望治疗效果的药物成分的量。例如，向个体施用有效量的本发明的药物组合物可导致免疫系统活化水平的提高。活化水平可通过例如，γ干扰素(γ-IFN)的血浆水平测定，因此γ干扰素(γ-IFN)的血浆水平可用作测定有效量的标准。术语“免疫系统的激活”或类似术语应理解为指在遭遇病原体或病理过程时增加免疫细胞的活性水平，增加各种细胞因子的产生或分泌水平，籍此提高免疫细胞的活性等。
本发明的药物组合物一般可口服施用，虽然也可经配制以用于局部外用或非肠道施用。用于口服施用的组合物可包含各种调味剂、食用色素等。此外，口服使用的组合物也可被包裹于例如一种肠包层明胶胶囊中。基于组合物所选的预计施用模式，组合物中也可含有各种药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
对于非肠道施用，组合物一般经静脉内(I.V.)注射。这类非肠道施用的组合物可包含例如，大豆多重甘油三酯、卵磷脂、依本发明制备的PA、甘油和蒸馏水。
局部外用组合物可为凝胶体或药膏形式，因而可包含各种周知的添加剂以使组合物获得所述物理形式(如凝胶剂)。
天然PA-E-LP优选获自天然磷脂制剂，方法是使用包含磷脂酶-D的合成或天然来源的物质进行酶法处理。天然磷脂制剂可为植物来源的、动物来源的或其组合。用于制备本发明天然PA-E-LP的制剂的一般例子有大豆卵磷脂、卵黄和来源于动物血清的磷脂。磷脂酶-D来源物的例子有花生，一般为经研磨的花生或由其衍生的磷脂酶-D级分。以足够的量加入磷脂酶-D或磷脂酶-D来源物且处理足够的时间以水解至少约10％的磷脂、优选为约25％的、最优选为约50％的磷脂，产生PA-E-LP。
下面，本发明以下列非限制性实施例并适时参照附图加以叙述。
附图简述
图1.本发明PA加富混合物制备的示意图。由图知，起始物料(花生、大豆卵磷脂和水)的比例分别为1∶1∶7.5。
图2.通过图1所述反应制备的PA混合物之液相分离的示意图。
图3.以适于填充容器的适当形式如图1和图2所述制备PA混合物的示意图。
图4.由如图1和图2所述制备的PA混合物制备片剂的示意图。
图5.显示了大豆磷脂酶法水解过程中PA的形成曲线(结果以全部组合物的百分比表示)。
实施例1PA混合物的制备(a)反应产物的制备图1描述了按照本发明制备PA混合物的方法。如所示，起始物质如下1)150克经研磨的新鲜花生作为磷脂酶-D的来源。
2)150克颗粒化大豆卵磷脂作为大豆磷脂的来源。
3)待加入的水1000毫升。
于一绞肉机中混合上述起始物质至匀浆化，然后加入乳酸钙、山梨酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸、柠檬酸和抗氧化剂(每种的量依图中所述)将混合物的pH值调至pH为5.3-5.4。将混合物在36-38℃于连续搅拌条件下反应4小时，再通过依图中所示的量加入柠檬酸和糖将pH再次调至pH为3.9。于4℃将混合物放置过夜。
(b)脂质级分的制备由上述步骤获得的反应混合物再通过图2中所示的步骤进一步分离。如图示，将反应产物经过三次主要分离步骤(图中表示为分离步骤I、II和III)，其中，一般在每一次分离中将混合物的水相从底部去除，直到最后，合并分离的脂质相，冰冻储存(-18℃)。
(c)用于注入容器的脂质成分的制备经过上述分离的脂质混合物经过数个额外步骤后，制备成用于注入容器的形式。如图3示，由上述分离方法获得的脂质混合物首先经融化，然后经如图3所述的加热、冷却、匀浆和混合处理，形成适于注入容器的成分。一般容器的体积为半升，将容器储存于4℃。
(d)含PA的片剂的制备由上述实施例2(a)-(c)所述及图1-3所示的方法获得的PA混合物也可被制成片剂。用于制备含有PA混合物的片剂的方法示于图4。由图知，一般地，用上述方法获得的磷脂膏首先经过解冻，然后被加热并将混合物的pH调至约为9的高pH。随后向混合物加入醋酸锌，出现大量沉淀，经过洗涤及干燥后制成片剂。
(e)PA的形成曲线PA的形成曲线见图5。由图可见，在约24小时后，80％以上的大豆磷脂被水解形成富含PA的制剂。实施例2 PA-E-LP组合物在经历戒烟治疗的个体中增加γ干扰素水平的作用(a)研究设计每日吸20-40只香烟且志愿参与本研究的35名吸烟者被随机分配成两组一组由16人组成，每日口服按照实施例1制备的12克PA-E-LP组合物(含PA50％)；另一组作为对照，接受安慰剂治疗。研究过程中两组中的个体均停止吸烟。
在戒烟之前和之后测定两组中个体的血浆γ-IFN浓度。利用QUANPIKINETM(R&D System Inc.美国)试剂盒测量γ-IFN水平。
(b)在治疗之前和治疗之后两组中的γ干扰素浓度示于表1。
表1 γ-干扰素血浆浓度
由上述结果可知，在接受PA-E-LP的试验组中血浆γ干扰素浓度升高，而对照组中血浆γ干扰素浓度低于其治疗前的浓度。
应当指出，血浆γ干扰素水平是免疫系统活化状态的一个指征。
权利要求
1.一种用于激活免疫系统的药物组合物，包含来自天然来源的经过加富含有至少约10％的PA的脂制剂。
2.根据权利要求1的药物组合物，包含至少约20％的PA。
3.根据权利要求1的药物组合物，包含至少约50％的PA。
4.根据权利要求1-3中任一项的药物组合物，其中脂制剂衍生自天然脂质来源。
5.根据权利要求1-4中任一项的药物组合物，其用于在存在应激反应的个体中激活免疫系统。
6.根据权利要求5的药物组合物，其用于存在由于戒断毒品、酒精或吸烟引起的应激反应的个体中激活免疫系统。
7.根据权利要求1-6中任一项的药物组合物，其用于在存在应激反应的个体中激活免疫系统，其中所述激活导致接受治疗的个体血浆中γ干扰素水平的增加。
8.根据权利要求1-7中任一项的药物组合物，其经配制用于口服施用。
9.一种在个体中激活免疫系统的方法，包括向个体施用有效量的富含PA的脂制剂。
10.根据权利要求9的方法，其中脂制剂衍生自天然脂制剂。
11.根据权利要求8和9的方法，其中所述制剂经口服施用。
12.来自天然来源的经加富含有至少约10％的PA的脂制剂的用途。
13.根据权利要求12的用途，其中脂制剂含有至少约20％的PA。
14.根据权利要求13的用途，其中脂制剂含有至少约50％的PA。
15.根据权利要求12-14中任一项的用途，其中脂制剂来源于天然脂质来源。
16.根据权利要求12-15中任一项的用途，用于制备在存在应激反应的个体中激活免疫系统的药物组合物。
17.根据权利要求16的用途，其中个体由于戒烟治疗导致应激反应。
全文摘要
一种用于激活免疫系统的药物组合物,其包含来自天然来源经加富含有至少约10%磷脂酸的脂制剂。
文档编号A61P25/34GK1264304SQ98807285
公开日2000年8月23日 申请日期1998年5月14日 优先权日1997年7月16日
发明者M·史尼兹基, A·申费尔德 申请人:穆德斯生物膜有限公司