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【主权项】
1. 包含至少一个多不饱和脂肪酸残基和与其共价结合的至少一个核巧组分的缀合物， 其中所述核巧组分选自核酸、核巧和核巧酸。
2. 权利要求1的缀合物，其具有通式（la)或（lb) F。一 (Lm_N)r (la) Fn -（Lm-N) r- Lm-Fn (Ib) 其中 F是多不饱和脂肪酸残基， L是连接体， N是选自核酸、核巧和核巧酸的核巧组分， n是1-10,优选地1-5,更优选地1的整数， m是0或1， r是1-25,优选地2-20和更优选地2-8的整数。
3. 权利要求1的缀合物，其包含其他配体，所述配体共价结合至至少一个核巧组分。
4. 权利要求3的缀合物，其具有通式（II) Fn- (Lm-脚 r- Lm- Zs (II) 其中 F是多不饱和脂肪酸残基， L是连接体， n是1-10,优选地1-5,更优选地1的整数， m是0或1， N是选自核酸、核巧和核巧酸的核巧组分， r是1-25,优选地2-20和更优选地2-8的整数 Z是其他受体配体，和 S是1-10,优选地1-5,更优选地1的整数。
5. 权利要求1-4中任一项的缀合物，其中所述多不饱和脂肪酸残基是具有3、4、5或6 个并且优选地4个C = C键的多不饱和Cie-C24脂肪酸的残基，其中优选地至少1-5,更优选 地4个C = C键是W Z构型，优选地选自顺-5, 8, 11，14-二十碳四締酸（花生四締酸）残 基，顺-5, 8, 11, 14, 17-二十碳五締酸巧PA)残基，顺-4, 7, 10, 13, 16, 19-二十二碳六締酸 值HA)残基、顺-6, 9, 12-十八碳S締酸佑LA)残基和顺-8, 11，14-二十碳S締酸值GLA)残 基。
6. 权利要求5的缀合物，其中所述多不饱和脂肪酸残基是花生四締酸残基。
7. 权利要求1-6中任一项的缀合物，其中所述脂肪酸残基选自游离脂肪酸残基，脂肪 酸醋或脂肪酸酷胺，脂肪酸横酸醋，脂肪酸硫酸醋、脂肪酸麟酸醋或脂肪酸磯酸醋的残基。
8. 权利要求1-7中任一项的缀合物，其中所述多不饱和脂肪酸残基通过连接体共价结 合至至少一个核巧组分。
9. 权利要求8的缀合物，其中所述连接体包含通过Click反应形成的环基团，特别是 1，2, 3-=氮挫基团，通过C1 ick反应在诀姪和叠氮化物之间形成，或者通过C1 ick反应在降 冰片締和膳亚胺之间形成的基团，氧化膳或四嗦。
10. 权利要求1-9中任一项的缀合物，其中所述核巧组分是核酸分子，特别是单链或双 链RNA分子，任选地具有至少一个3' -突出，更特别地是siRNA分子。
11. 权利要求1-10中任一项的缀合物，其中所述核巧组分是包含至少一个经修饰的构 建区块的核酸分子。
12. 权利要求1-11中任一项的缀合物，其中所述核巧组分通过核碱基、糖或磯酸基团， 特别是存在于核酸分子中的构建区块，特别是通过存在于核酸分子中的末端构建区块连接 至脂肪酸残基。
13. 权利要求1-12中任一项的缀合物，用于体外转染细胞，特别是用于体外转染哺乳 动物细胞包括人细胞的用途。
14. 权利要求1-12中任一项的缀合物，用于根据权利要求13的用途，其中所述细胞是 表达大麻素受体的细胞，特别是免疫细胞、神经元细胞和星形胶质细胞。
15. 权利要求1-12中任一项的缀合物，用于医学的用途，特别是人类医学的用途。
16. 权利要求1-12中任一项的缀合物，用于根据权利要求13、14或15的用途，其中用 于下调基因，例如病毒基因或细胞疾病相关基因，例如原癌基因或自免疫疾病相关基因。
17. 用于制备具有通式（V)的RNA-配体缀合物的试剂： F。一（L'）m-做l)r (V) 其中 F、n、m和r是如权利要求1-5中任一项所定义的， L'是连接体，和 RG1是反应基团，特别是C1 ick反应基团，例如叠氮化物基团。
18. 用于制备具有通式（VI)的核酸缀合物的试剂： BB-(L)m-F (VU 其中 F、L、n和m是如权利要求1-5中任一项所定义的，和 BB是用于合成核酸分子的构建区块如核巧S磯酸，或适用于固相合成的构建区块如亚 磯酷胺。
19. 用于制备权利要求1-12中任一项的缀合物的方法，包括 (i) 权利要求18的试剂与至少一个经修饰的RNA分子（VII)进行缀合 (N)r -（L")m-RG2 (VII) 其中 N、r和n是如权利要求1-5中任一项所定义的， L"是连接体， m是0或1，和 RG2是该样的反应基团，能够与RG1，特别是Click反应基团如诀姪基团反应，从而形成 缀合物，或者 (ii) 权利要求17的试剂与至少一个经修饰的核酸构建区块（VIII)进行缀合 BB-(L")m-RG2 (VIII) 其中 BB是用于合成核酸分子的构建区块 L"是连接体， m是0或1，和 RG2是该样的反应基团，其能够与RG1，特别是Click反应基团如诀姪基团反应， 并且将具有与其缀合的试剂的构建区块并入核酸分子，从而形成缀合物。
20. 包含至少一个C = C不饱和化合物和与其共价结合的至少一个核巧组分的缀合物， 所述核巧组分选自核酸、核巧和核巧酸，其中所述C = C不饱和化合物通过连接体结合至核 巧组分，所述连接体包含通过Click反应形成的基团。
21. 权利要求20的缀合物，其中所述C = C不饱和化合物是祗、单不饱和脂肪酸或多不 饱和脂肪酸。
22. 权利要求20或21的缀合物，其中所述C = C不饱和化合物是莱莉酬酸醋。
23. 权利要求21、22或23的缀合物，具有如权利要求2-12中任一项定义的结构，条件 是F(如权利要求2和4所定义的）是任意C = C不饱和化合物。
24. 权利要求20-23任一项的缀合物用于如权利要求13-16任一项定义的用途。
【专利摘要】本发明涉及包含至少一个多不饱和脂肪酸残基，特别是花生四烯酸残基，更特别是大麻素(花生四烯酸乙醇胺)残基，以及与其共价结合的至少一个核苷组分，所述核苷组分选自核酸、核苷和核苷酸。该缀合物适合于高效率的细胞转染，所述细胞例如哺乳动物细胞包括人细胞。因此，提供了用于治疗性分子包括反义分子、siRNA分子、miRNA分子、拮抗剂或者这些分子的前体、以及治疗性核苷或核苷酸的新递送媒介物。
【IPC分类】A61K47-48
【公开号】CN104540525
【申请号】CN201380036587
【发明人】T·卡莱尔
【申请人】贝瑟克里科有限公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2013年7月10日
【公告号】CA2877985A1, EP2872180A1, US20150209441, WO2014009429A1