一种半枝莲提取物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药材提取技术领域，更具体地，涉及一种半枝莲提取物及其制备方 法和应用。
【背景技术】
[0002] 人类疱疹病毒根据其生物学特征可分为α、β和Y三种亚型，其中EB病毒 (Epstein-Barr virus)属于γ亚型，也称为4型人类疱疹病毒（HHV-4)。EB病毒是1964 年Epstein和Barr最先从非洲儿童恶性淋巴瘤（Burkitt lymphoma)体外培养的淋巴瘤细 胞系中，用电镜发现的一种新的疱疹病毒，并命名为EB病毒。EBV的基因组为线性双链DNA， 长度172kb，编码约100个基因。与人类疱疹病毒一样，EBV有两种生活周期，潜伏期和裂解 期。在潜伏期EBV只表达少量的基因以逃逸宿主的杀伤；而在裂解期EBV表达几乎全部的 基因，病毒进行大量复制以维持其生命活动并使疾病进展。EBV编码的早期基因 ZTA和RTA 表达可以启动下游大量基因表达，使EBV由潜伏期进入裂解期。EBV可以感染人类的B淋 巴细胞、上皮细胞和NK/T细胞等。与EBV相关的人类疾病有传染性单核细胞增多症、慢性 活动性EBV感染、EBV相关嗜血淋巴组织细胞增生症、Burkitt' s淋巴瘤、何杰金病、鼻咽癌 等。虽然已经证实EBV感染可以引起上述疾病，但目前还没有一种针对于γ疱疹病毒的特 效药。目前医药界迫切需要针对EBV感染疾病的特效药，从而改善γ型人类疱疹病毒相关 恶性疾病的治疗效果。从中草药中发现天然抗疱疹病毒活性化合物或先导物是目前国内外 研究的重要的方面和非常活跃的领域。至今发现的一些天然化合物具有抗EBV活性，分属 于倍半萜、三萜、黄酮、木质素类等。目前约有近百个品种正在进行临床前研究和临床实验。 中草药半枝莲为唇形科黄芩属植物半枝莲的干燥全草，在我国分布广泛，资源丰富。该植物 具有突出的抗菌、消炎、抗病毒及抗肿瘤等功能，现多单用或者与其他药组成复方，治疗肝 癌、肺癌、乳腺癌、肝硬化等疾病。目前从半枝莲全草中发现的化合物主要是黄酮化合物和 一系列具有细胞毒性的新克罗烷型二萜类化合物。但现有技术中未见有半枝莲提取物及其 新克罗烷型二萜成分的抗EBV病毒裂解复制活性的报道。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供半枝莲提取物在制备防治EB病毒感染的药物中的应用。
[0004] 本发明的另一个目的在于提供一种新的来源于半枝莲新克罗烷型二萜类化合物。
[0005] 本发明的另一目的在于提供所述的半枝莲提取物的制备方法。
[0006] 本发明通过研究发现，半枝莲提取物对EB病毒复制有良好的抑制作用，因此，本 发明要求保护半枝莲提取物在制备防治EB病毒感染药物中的应用。
[0007] 所述半枝莲提取物的制备方法为，将半枝莲（Scutellaria barbata)全草，晒干， 粉碎，用95%乙醇室温浸提三次，每次24小时，合并浓缩液，分别用石油醚、乙酸乙酯和正 丁醇萃取，减压浓缩回收溶剂，得到乙酸乙酯部分，乙酸乙酯部分先过大孔树脂（DlOl)，以 乙醇/水梯度洗脱，得到6个馏分。各馏分再分别过硅胶柱，反相C 18柱和半制备液相色谱 柱，反复分离得到。
[0008] 其中，所述的乙醇/水体系中乙醇和水的体积比为：0:100、10:90、20:80、30:70、 40:60、50:50、60:40、70:30、80:20:、95:5、100:0。
[0009] 本发明从半枝莲提取物中分离得到3种新结构的化合物和4种已知结构的化合 物，这七种化合物对EB病毒复制有良好的抑制作用，这七种化合物的结构分别如下：
【主权项】
1. 半枝莲提取物在制备防治EB病毒感染药物中的应用。
2. 权利要求1所述半枝莲提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，将半枝莲全 草，晒干后粉碎，用95%乙醇室温浸提三次，每次24小时，合并浓缩液，分别用石油醚、乙酸 乙酯和正丁醇萃取，得到乙酸乙酯部分，乙酸乙酯部分过大孔树脂，以乙醇/水过柱，馏分 再经反复分离得到。
3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的乙醇/水体系中乙醇和水的体 积比为：0:100、10:90、20:80、30:70、40:60、50:50、60:40、70:30、80:20:、95:5、100:0。
4. 一种从半枝莲提取物中分离的新克罗烷型二萜类化合物，其特征在于，具有式（I ) 所示结构： 式（I )。
5. 从半枝莲提取物中分离的结构式如式（II)所示的化合物在制备防治EB病毒感染药 物中的应用， 式（II)。
6. 防治EB病毒感染的药物，其特征在于，含有有效量权利要求1所述的半枝莲提取物 和/或药学上可接受的载体。
7. 防治EB病毒感染的药物，其特征在于，含有有效量式（II)所示化合物中的一种或多 种和/或药学上可接受的载体。
【专利摘要】本发明属于中药材提取技术领域，具体公开了一种半枝莲提取物及其制备方法和应用。本发明从半枝莲提取物中分离得到3种新结构的化合物和4种已知结构的化合物，这7种化合物对EB病毒复制有良好的抑制作用，且毒副作用低，因此，这7种化合物在制备防治EB病毒感染的药物中具有很大的应用前景。
【IPC分类】A61P31-22, A61K31-365, C07D307-58, A61K36-539
【公开号】CN104644744
【申请号】CN201410566949
【发明人】顾琼, 吴泰宗, 徐峻, 袁岩, 王倩, 王彦
【申请人】中山大学
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2014年10月21日