过其Fc区域结合。优选地，所述治疗性抗体是人IgGl或 IgG3Fc片段，特别是单克隆抗体或其片段，更优选人抗体，人源化抗体或嵌合抗体，或其片 段，例如利妥昔单抗。
[0041] 定义
[0042] 在本文中，除非另有说明下面的术语具有其界定的含义。
[0043] 本文中，"NK"细胞是指与非常规性免疫相关的淋巴细胞亚群。NK细胞可以通过一 定的特征和生物性能来加以识别：如特异性表面抗原（包括CD16、CD56和/或CD57)的表 达，在细胞表面上α/β或γ/STCR复合物的缺乏，联接到不表达"自体" MHC/HLA抗原的 细胞并通过激活特异性的细胞溶解酶杀死细胞的能力，杀死用于表达NK活化受体的配体 的肿瘤细胞或其它病态细胞的能力，以及释放被称作细胞因子的蛋白分子以刺激或抑制免 疫应答的能力。利用本领域熟知的方法，任何这些特征和活性都可以用于识别NK细胞。 [0044] 本文中使用的术语"抗体"是指多克隆或单克隆抗体。依赖于重链上恒定区的类 型，抗体可分为5个主要类别：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。这些类别中的一些可以进一步划 分为亚类或同种型，如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4等等。一种典型的免疫球蛋白（抗体）结构 单元包括一个四聚物（四聚体）。每个四聚物由两对同样的多肽链对构成，每对（多肽链） 具有一个"轻"链（约25kDa)和一个"重"链（约50-70kDa)。每个链的N末端定义一个约 100-110或更多氨基酸的可变区，该可变区主要负责抗原识别。可变轻链（')和可变重链 (V h)两术语分别是指这些轻链和重链。相应于不同种类的免疫球蛋白的重链恒定区分别称 作" α、" " δ、" " ε、"" γ、"和" μ "。不同类别的免疫球蛋白的亚单位（亚基）结构和 三维构象已为所公知。IgG和/或IgM是本发明中优选的抗体类别，特别优选为IgG，由于 它们是在生理条件下是最常见的抗体，由于它们在实验室条件下最容易制备，并且由于IgG 可以被Fcy受体特异性识别。优选地，本发明的抗体是单克隆抗体。特别优选的是人源化 抗体、嵌合抗体、人抗体、或其它的-人-适宜的抗体。
[0045] 在本发明的上下文中，术语"治疗性的一个抗体或多个抗体"特别是指具有能够消 除（凋亡）患者体内靶细胞功能的任何抗体。尤其是，治疗性抗体特异性结合到存在于靶细 胞表面的抗原上，如肿瘤特异性抗原主要或唯一出现在肿瘤细胞上。优选地，治疗性抗体包 括人Fc部分或能够与人Fc受体相互作用。治疗性抗体可以通过如ADCC或其它各种方法 (手段）对准靶细胞，并且可以是"裸露的"，即不带有连接部分（conjuigated moieties)， 或与诸如放射性标记物或毒素这些化合物结合。
[0046] 术语"特异性结合到"是指抗体在竞争性结合测试中优选可以结合到结合伴侣 (binding partner)上，例如当用蛋白或其抗原决定部位的重组形式、或分离的NK或相关 靶细胞的表面上存在的天然蛋白进行测试时的活性NK受体如NKp30、NKp44或NKp46,或人 Fcy受体。竞争性结合测试及用于测定特异性结合的其它方法在下文中会进一步描述，同 时也是本领域所公知的。
[0047] "适用于人的"抗体是指可以安全用于人，例如本文中所描述的治疗方法中的任何 抗体、衍生抗体、或抗体片段。适用于人的抗体包括所有类型的人源化抗体、嵌合抗体、或完 全的人抗体，或任何至少抗体的一部分来源于人的抗体或者是经过修饰后的抗体从而避免 当使用天然的非-人抗体时诱发免疫应答。
[0048] "免疫原性片段"在本文中是指能够激发免疫应答的任意多肽或肽片段，如⑴抗 体结合所述片段和/或结合含有所述片段的任何形式的分子（包括膜联受体及由其衍生的 突变体）的产生，（ii)涉及T-细胞与包括任何MHC分子及由所述片段衍生的肽的双分子复 合物反应的T-细胞应答的刺激，（iii)转染的载体（如表达编码哺乳动物免疫球蛋白基因 的噬菌体或细菌）的结合。可选替代的，免疫原性片段也可以指能够激发免疫应答如上文 所述的任何结构，如通过共价连接子（共价连接物）结合到载体蛋白上的肽片段，在氨基酸 序列中包括所述肽片段的嵌合重组体多肽结构，以及尤其包括用cDNA转染的细胞，该cDNA 的序列中包括所述片段的编码。
[0049] 对于本发明的目的，"人源化"抗体是指这样的一个抗体，其中由一种或多种人免 疫球蛋白的恒定结构区和可变结构区通过如CDR这样的结合区与一种动物免疫球蛋白融 合在一起。设计这样的人源化抗体是为了保持非人抗体的结合特异性，从中导出各个结合 区，但要避免对于非人抗体的免疫反应。
[0050] "嵌合抗体"是指一种抗体分子，其中（a)恒定区或其一部分已经被改变、替代或交 换使得抗原结合位点（可变区）是与一个不同的或改变后的类、效应物功能和/或种、或者 一个完全不同的分子的恒定区相连，这些分子可以为嵌合抗体如酶、毒素、激素、生长因子、 药物等赋予全新的性能；或（b)可变区或其一部分被改变、替代或与一种具有不同的或经 改变的抗原特异性的可变区进行交换。在本发明的优选实施例中，嵌合抗体仍保存免疫球 蛋白的Fc区域，优选为人Fc区域，从而可以与靶细胞表面上的人Fc受体相互作用。
[0051] 在本发明的上下文中，"增强、" "活性、"或"活化的"NK细胞是指生物活性的NK细 胞，更特殊的是指具有溶解靶细胞能力的NK细胞。例如一种"活性" NK细胞能够杀死表达 NK活化受体-配体，并且不表达"自身"MHC/HLA抗原（KIR不相容细胞）的细胞。用于重 新导向杀伤实验的适宜的靶细胞的实例有P815细胞和K562细胞，但是很多细胞类型也可 以使用并且是本领域所公知的（参见，如Sivori et al. (1997) J. Exp. Med. 186:1129-1136; Vitale et al. (1998)J. Exp. Med. 187:2065-2072 ；Pessino et al. (1998)J.Exp. Med. 188:953-960 ;Neri et al. (2001)Clin.Diag. Lab. Immun. 8:1131-1135)。"增强、""活 性、"或"活化的"细胞也可以通过任何与NK活性相关的其它性能或本领域公知的活性来识 另IJ，如细胞因子（例如IFN-Y和TNF-α)产生的细胞内游离钙含量的增加。针对本发明的 目的，"增强、" "活性、"或"活化的"NK细胞尤其是指体内的没有通过刺激抑制性受体而被 抑制的NK细胞、或在该细胞中例如通过刺激活化受体来克服这样的抑制作用的NK细胞。
[0052] 如本文中所使用的，术语"活性NK受体"是指NK细胞表面上的任意分子，当受刺激 时，其引起与NK活性相关的、本领域所公知的性能或活性的可测量的增加，如细胞因子（如 IFN-γ和TNF-α)的产生、细胞内游离钙含量的增加、在本说明书中的其它处描述的在重 新导向杀伤实验中导向靶细胞的能力、或刺激NK细胞增殖的能力。术语"活性KIR受体"包 括但不局限于：NKp30、NKp44、NKp46、NKG2D、IL-12R、IL-15R、IL-18R 和 IR-21R。如在本文 中所使用的，术语"活性NK受体"不包括IL-2受体（IL-2R)。确定NK细胞是否有活性或增 殖与否的方法在下文中将详细描述，并且对本领域技术人员是公知的。
[0053] 如在本文中所使用的，术语"抑制"或"抑制性"NK受体是指NK细胞表面上的任意 分子，当受刺激时，其引起与NK活性相关的、领域所公知的特性或活性的可测量的减少，如 细胞因子（如IFN-Y和TNF-a)的产生、细胞内游离钙含量的增加、或在本说明书中的其 它处描述的在重新导向杀伤实验中溶解靶细胞的能力。这样的受体的实例包括：KIR2DL1、 KIR2DL2/3、KIR2DL4、KIR2DL5A、KIR2DL5B、KIR3DL1、KIR3DL2、KIR3DL3、LILRBl、NKG2A、 NKG2C、NKG2E和LILRB5。确定NK细胞是否有活性的方法在下文中将加以详细描述，并且对 本领域技术人员是公知的。
[0054] 在本发明中，术语"阻断NK细胞的抑制性受体或刺激其活化受体"是指某些化 合物（优选为抗体、其片段或衍生物）的能力，优选是指直接与至少一种如KIR、NKG2A/C、 NKp30、NKp44、NKp46或其它本文中所列的抑制性或活性NK细胞受体的相互作用、或者中和 来自受体的抑制性信号（在抑制性受体的情况下）或来自受体的刺激信号（在活化受体的 情况下）。对于抑制性受体，优选的化合物为能够阻断HLA和受体之间的相互作用的化合 物，优选为抗体或其片段。当该化合物是抗体时，该抗体可以是多克隆抗体、或优选为单克 隆抗体。它们可以通过杂交瘤或通过基因工程化的用以表达所需的可变区和恒定区的重组 (体）细胞来产生。该抗体可