c)，提高了免疫细胞中的 谷胱甘肽浓度、PHA刺激的淋巴细胞增殖和NK细胞的细胞毒性活性。
[0068] 在本发明中，谷胱甘肽可以原样给药，但是作为各种不同类型的制剂给药通常是 优选的。所述制剂包含谷胱甘肽或其盐作为活性成分，并且还可以包含任何其他活性成分。 所述制剂按照制药学技术领域中公知的任何方法，通过将活性成分与一种或多种可药用载 体进行混合来生产。
[0069] 将制剂通过对于增强免疫功能来说最为有效的途径给药，是理想的。适合的给药 途径包括口服给药和肠胃外给药例如静脉内给药、腹膜内给药或皮下给药。优选的是口服 给药。
[0070] 制剂可以以口服制剂（例如片剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、悬液、乳液、浸剂/汤剂、胶 囊、糖浆、液体、酏剂、提取物、酊剂和流体提取物）或肠胃外制剂（例如注射剂、滴剂、霜剂 和栓剂）的形式给药。优选的是口服制剂。
[0071] 适用于口服给药的液体制剂例如糖浆，可以通过加入水、糖类（例如蔗糖、山梨糖 醇和果糖）、二醇类（例如聚乙二醇和丙二醇）、油类（例如芝麻油、橄榄油和大豆油）、杀菌 剂（例如对羟基苯甲酸酯）、防腐剂（例如对羟基苯甲酸衍生物如对羟基苯甲酸甲酯和苯甲 酸钠）、调味剂（例如草莓调味剂和胡椒薄荷）等来制备。
[0072] 适用于口服给药的片剂、粉剂、颗粒剂等，可以通过加入赋形剂例如糖类（例如乳 糖、白糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨糖醇）、淀粉（例如马铃薯淀粉、小麦淀粉和玉米淀 粉）、无机物质（例如碳酸钙、硫酸钙、碳酸氢钠和氯化钠）、结晶纤维素和植物粉（例如甘 草粉和龙胆草粉），崩解剂例如淀粉、琼脂、明胶粉、结晶纤维素、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤 维素钙、碳酸钙、碳酸氢钠和藻酸钠，润滑剂例如硬脂酸镁、滑石粉、氢化植物油、聚乙二醇 和硅油，粘合剂例如聚乙烯醇、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素、明 胶和淀粉糊，表面活性剂例如脂肪酸酯，增塑剂例如甘油等，来制备。
[0073] 适用于口服给药的制剂还可以包含在食品和饮料中常用的添加剂例如甜味剂、着 色剂、防腐剂、增稠稳定剂、抗氧化剂、显色剂、漂白剂、杀真菌剂、胶基、苦味剂、酶、上光剂、 酸味剂、调味剂、营养增补剂、生产助剂、香料和香料提取物。
[0074] 用于口服给药的制剂可以用作用于增强免疫功能的食品和饮料，例如健康食品、 功能食品、食品增补剂和用于特殊健康用途的食品，并且可以原样或采取任何形式例如粉 状食品、薄片状食品、瓶装食品、???头食品、蒸煮袋装食品、胶囊食品、片剂食品、液体食品和 健康饮料。
[0075] 选自上述用于口服制剂的杀菌剂、防腐剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、表面 活性剂、增塑剂等的一种或多种辅助成分，也可以使用在这些肠胃外制剂中。
[0076] 本发明的用于增强免疫功能的谷胱甘肽或其盐的浓度，根据制剂的种类、通过制 剂的给药预期达到的效果等适合地确定。谷胱甘肽或其盐通常以〇. 1至100重量％、优选 地1至100重量％、特别优选地25至100重量％的量被包含。
[0077]当按照本发明给药谷胱甘肽或其盐时，剂量和给药日程安排随着给药途径、受试 者的年龄和体重等而变。当受试者是人时，谷胱甘肽可以以对于谷胱甘肽或其盐来说50mg 至5000mg、优选地250mg至1000 mg的每日剂量给药。
[0078] 对于给药的时间长度没有特别限制，但是给药可以进行1日至1年、优选地1周至 6个月、最优选地3个月的时间。在另一种实施方式中，给药可以进行1日或更长时间，优选 地1周或更长时间，更优选地3个月或更长时间。
[0079] 本发明的药剂不仅可用于人类，而且可用于人类之外的动物（在后文中简称为非 人类动物）。
[0080] 非人类动物包括人类之外的动物例如哺乳动物、鸟类、爬行类、两栖类和鱼类。
[0081] 在给药到非人类动物的情形中，剂量随着动物的年龄和种类以及症状的本质或严 重程度而变。通常，药剂每日给药一次到几次，其量可以提供对于鸟氨酸或其盐和谷胱甘肽 或其盐来说每kg体重Img至600mg、优选地2mg至200mg、更优选地4mg至60mg的每日剂 量。
[0082] 对于给药的时间长度没有特别限制，但是它通常为1日至1年，优选为1周至3个 月。在另一种实施方式中，给药时间长度可以为1日或更长时间，优选为1周或更长时间， 更优选为3个月或更长时间。
[0083] 此外，本发明包括用于增强免疫功能的口服药剂、用于提高NK细胞的细胞毒性的 口服药剂和用于提高淋巴细胞增殖的口服药剂，所述药剂被制备成将谷胱甘肽或其盐以50 至5000mg/日、优选地250至1000 mg/日的剂量向人类给药1日或更长时间，优选地1周或 更长时间，更优选地3个月或更长时间。 实施例
[0084] 下面通过实施例对本发明进行描述；然而，本发明不限于下面的实施例。
[0085] 1.研宄设计和方法
[0086] 设计包括征召健康受试者（28-79岁，平均值=46. 6岁）并随机分成3组（1000 mg/ 日的GSH、250mg/日的GSH和安慰剂）。48位受试者，每组16位的征召目标，是基于效能 计算和以前使用硒的临床试验的结果（El_Bayoumy，K.等，Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2002. 11 (11) :p. 1459-65)。在基线时从所有受试者获得血样。受试者按照下列安排 开始增补：谷胱甘肽胶囊由赞助商Kyowa Hakko USA提供。配制胶囊，并且受试者按照如下 的安排开始增补：
[0087] ?组A，GSH :500mg/胶囊，纤维素：15mg/胶囊（每日2颗）；
[0088] ?组B，GSH :125mg/胶囊，纤维素：360mg/胶囊（每日2颗）；
[0089] ?组C (安慰剂），纤维素：470mg/胶囊（每日2颗）。
[0090] 将合格的参加者随机指派到安慰剂（组C)或高（组A)或低（组B)剂量谷胱甘肽 组。增补持续6个月，并在基线后1、3和6个月时收集生物样品。在6个月时，中止增补。 在1个月的清除期后进行生物样品的最终收集。
[0091] 从肘前静脉收集血样到3个含有肝素钠作为抗凝剂的管中，并立即置于冰上。血 样在9:00am至1:00pm之间收集，并且受试者在收集之前不禁食。通过轻摇将管混合，并 取出1份2. 5ml的全血等分试样用于嗜中性粒细胞吞噬作用和呼吸爆发的分析（参见下 文）。取出两份〇. 5ml的全血等分试样并储存在-80°C，以用于将来的分析。将剩余的血 液以1300x g离心10分钟，以获得血浆、血块黄层和红细胞级份。将多份0. 5ml的血浆 等分试样置于1.5ml冷冻管中，并立即在-80°C下冷冻。将压紧的红细胞在盐水中清洗3 次，等分（每份0. 5ml)在多个冷冻管中并在-80°C下冷冻。将血块黄层级份合并，并通过 Ficoll-Hypaque密度梯度离心分离淋巴细胞。简单来说，在加入3ml Ficoll后，将血块黄 层在19°C下以400g离心30分钟。取出淋巴细胞层并在PBS中清洗两次，然后以250g离 心10分钟。在最后清洗后，将淋巴细胞重悬浮在5ml PBS中。在向10 μ 1细胞悬液加入 40 μ 1台盼蓝后，使用血细胞计数器评估细胞数目。将细胞以2. 5x IO6个细胞/ml的浓度 重悬浮在95% FBS、5% DMSO中并储存在液氮中，用于淋巴细胞增殖或NK细胞的细胞毒性 分析（参见下文）。将细胞保持在冰上直至如下所述的酸提取。
[0092] 谷胱甘肽-测量来自于4个时间点（1、3、6和7个月）的每个时间点的淋巴细胞 的偏磷酸（MPA)提取物中的谷胱甘肽。对于淋巴细胞来说，向含有5x IO6个细胞的压紧 的淋巴细胞等分试样加入400 μ 15% MPA。在剧烈混合并在室温温育15分钟后，将样品以 14, OOOg离心2分钟。将上清液和沉淀在-80°C分开储存，直至分别进行游离和GSH分析。 GSH以250mg/日或1000 mg/日给药，并测量从给药开始1、3、6和7个月后从受试者提取的 淋巴细胞中的谷胱甘肽浓度。结果示出在图1中。
[0093] 淋巴细胞增殖-将来自于5个时间点（0、1、3、6和7个月）的每个时间点的淋巴 细胞样品解冻，清洗3次并计数，以确定细胞存活性。将细胞以每个孔IxlO 5和5x10 4个细 胞两种浓度，在存在和不存在T细胞有丝分裂原植物血细胞凝集素（PHA)的情况下铺板，一 式三份。细胞增殖通过3H-胸腺嘧啶掺入来监测。细胞内放射活性通过液闪计数来测量， 并将结果表示成cpm。在3个月时间点时（安慰剂、250mg/