一种人骨替代材料及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及骨外科领域，具体涉及一种人骨替代材料及其制备方法。
【背景技术】
[0002]目前，国内外已有文献已经对人骨替代材料有所研宄，目前关于人骨替代材料有:羟基磷灰石、磷酸三钙、活性玻璃陶瓷、重组合异种骨和其他脱钙骨基质材料，以上人骨替代材料虽然已经有投入市场使用，但是随着使用的进行，也发现了各种问题:1、人体对异种骨的免疫原性过高；2、诱导成骨能力差；3、与人体结合后排异反应明显，手术成功率低。故急需要一种解决人体对异种骨的免疫原性过高，保持其诱导成骨能力的人骨替代材料，来满足广大市场的需求。
【发明内容】
[0003]本发明的主要目的之一在于解决人体对异种骨的免疫原性过高，无法保持其诱导成骨能力的问题，特提供一种人骨替代材料及其制备方法。本发明以猪骨为原料，通过生物化学技术进行反应加工，使得该材料具有能促进骨折愈合又能替代自身植骨的优点，进行植骨时，明显降低了植骨手术风险和人体的排异反应，可以在市场上推广使用。
[0004]具体的技术方案为:
[0005]一种人骨替代材料及其制备方法，以猪骨为原料，通过生物化学反应抽提猪骨内非胶原蛋白质；再用尿素提取骨内的成骨性蛋白质，将非胶原蛋白质与成骨性蛋白质制成混合剂，最终复合制得人骨替代材料，具体步骤为:
[0006]步骤一:取原料猪骨，将骨骺与骨干分离，去除软组织和骨髓后，作为Al ;
[0007]步骤二:对所述步骤一制备出的Al进行所述脱脂、脱钙反应，用模具成型，并再次进行所述脱脂反应得到A2 ;
[0008]步骤三:对所述步骤二制备出的A2依次用CaCl2、EDTA-NajP LiCl抽提骨内非胶原蛋白质，进行冷冻干燥，制成条状和粒状，得到BI ;
[0009]步骤四:取所述步骤二制备出的A2，用尿素抽提成骨性蛋白质，得到抽提液，取所述抽提液进行水透析，取沉淀，进行冷冻干燥，得到Cl;
[0010]步骤五:将所述步骤三制备出的BI与所述步骤四制备出的Cl复合并消毒，得到所述人骨替代材料。
[0011]进一步的，所述步骤一的实施方法为:取新鲜猪长骨，充分去除软组织、软骨和骨髓，用水清理干净，将所述骨干和所述骨骺分离，同时将所述骨干截成小段，每段3cm，所述骨骺制成大块，即得到加工后的原料Al。
[0012]进一步的，所述步骤二的实施方法为:将上述步骤二制备出的Al用氯仿和甲醇进行脱脂反应，然后充分水洗，洗去残余的所述氯仿和甲醇，并挥发静置8h ;用HCl脱钙，间隔24h换一次所述HCl，换液3次后进行水洗，洗去残余所述HCl，除去水分，用模具使所述骨干部分定型为IXlX 30mm3，所述骨骺部分用模具成型为2 X 2 X 2mm3，再次用所述氯仿和甲醇进行所述脱脂反应，并进行水洗除去残余的所述氯仿和甲醇液，挥发静置8h，再次用水反复水洗，彻底除去残余氯仿和甲醇液，再次挥发静置8h得到A2。
[0013]进一步的，所述步骤三的实施方法为:取上述步骤二制备出的A2用CaCl2搅拌抽提所述骨内非胶原蛋白质，抽提完毕后，去除所述CaCl2液体，充分用水洗去除残余所述CaCl2静置；再次用EDTA-Na 2搅拌抽提，并用水洗去除所述EDTA-Na 2静置；最后用LiCl液体搅拌抽提，用水充分水洗除去残余液体，并挥发静置8h，重复上述步骤，挤干水分，进行冷冻干燥，制成条状和粒状，即得到BI。
[0014]进一步的，所述步骤四的实施方法为:取上述步骤二制备出的A2，以每100gA2加入6mol尿素的浓度，在室温下搅拌24?48h，抽提所述成骨性蛋白质过滤除去残渣后，取滤液在10000r、4°C的条件下，离心30min，将上清液装入透析袋内，用蒸饱水透析8?1h直至产生沉淀；然后在10000r、4°C条件下离心30min，弃去上清液，取沉淀，用水洗2?3次，待完全除去水分后，得到Cl。
[0015]进一步的，所述步骤五的实施方法为:取生理盐水、上述步骤三制备出的BI和上述步骤四制备出的Cl以1:1:1的比例混合，制成混合液，冷冻干燥，制成颗粒状和条状的产物分别包装，用环氧乙烷消毒得到最终产物。
[0016]进一步的，以上所用的水均为无菌水。
[0017]本发明的有益效果为:本发明的人骨替代材料具有促进骨生长的效果，并且能够在体内能较快的吸收并转化为自身的骨组织，生物相容性很好，人体排异反应小，同时材料来源广泛，价格低廉，解决人骨替代材料稀少的问题，能够有效的在市场上推广使用。
【具体实施方式】
[0018]下文将结合实施例详细描述本
【发明内容】
。应当注意的是，下述实施例中描述的技术特征或者技术特征的组合不应当被认为是孤立的，它们可以被相互组合从而达到更好的技术效果。
[0019]实施例:
[0020]一种人骨替代材料及其制备方法，以猪骨为原料，通过生物化学反应抽提猪骨内非胶原蛋白质；再用尿素提取骨内的成骨性蛋白质，将非胶原蛋白质与成骨性蛋白质制成混合剂，最终复合制得人骨替代材料，具体步骤为:
[0021]步骤一:取原料猪骨，将骨骺与骨干分离，去除软组织和骨髓后，作为Al ;
[0022]步骤二:对所述步骤一制备出的Al进行所述脱脂、脱钙反应，用模具成型，并再次进行所述脱脂反应得到A2 ;
[0023]步骤三:对所述步骤二制备出的A2依次用CaCl2、EDTA-NajP LiCl抽提骨内非胶原蛋白质，进行冷冻干燥，制成条状和粒状，得到BI ;
[0024]步骤四:取所述步骤二制备出的A2，用尿素抽提成骨性蛋白质，得到抽提液，取所述抽提液进行水透析，取沉淀，进行冷冻干燥，得到Cl;
[0025]步骤五:将所述步骤三制备出的BI与所述步骤四制备出的Cl复合并消毒，得到所述人骨替代材料。
[0026]进一步的，所述步骤一的实施方法为:取新鲜猪长骨，充分去除软组织、软骨和骨髓，用水清理干净，将所述骨干和所述骨骺分离，同时将所述骨干截成小段，每段3cm，所述骨骺制成大块，即得到加工后的原料Al。
[0027]进一步的，所述步骤二的实施方法为:将上述步骤二制备出的Al用氯仿和甲醇进行脱脂反应，然后充分水洗，洗去残余的所述氯仿和甲醇，并挥发