Sak蛋白在制备降血脂药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及SAK蛋白在制备降血脂药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 葡激酶（staphylokinase SAK)是由金黄色葡萄球菌分泌的一种含有136个氨基 酸残基的胞外蛋白质。葡激酶在本世纪四十年代末被发现，并在五十年代至六十年代发现 其具有纤溶作用。
[0003] 中国专利文献（CN101314769A)中公开了一种葡激酶（其氨基酸序列在文献中的 序列表为SEQ ID NO: 1)及其基因（其核酸序列在文献中的序列表为SEQ ID NO :2)。上述 公开的葡激酶为重组蛋白，具有较高的溶栓活性。
[0004] 目前降脂类药物主要包括HMG-CoA还原酶抑制剂，胆酸螯合剂，纤维酸类，烟酸及 其衍生物，中药成分如枸杞多糖、茶叶多糖、黄连素等。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供SAK蛋白在制备降血脂药物中的应用。
[0006] 上述SAK蛋白，其氨基酸序列为中国专利文献（CN101314769A)中序列表中的SEQ ID NO :1 所示。
[0007] 本发明的目的还在于提供一种降血脂组合物，包含上述SAK蛋白。
[0008] 所述SAK蛋白的制备方法为：培养含有SAK基因序列重组表达载体的工程菌，通过 破碎菌体分离上清经过纯化后获得SAK蛋白液，将纯化的SAK蛋白中加入赋形剂，4°C保存； 再加入冻干保护剂，冷冻干燥。
[0009] 检测冻干样品的活性和成型的变化，经过37°C加速实验后，检测其活性和成型状 况的改变，确定SAK蛋白粉剂制备的主要成分。
[0010] 所述赋形剂为海藻糖。
[0011] 所述保护剂为甘露醇、右旋糖酐、蔗糖、乳糖、氯化钠、甘氨酸中的一种以上。
[0012] 上述降血脂药物，可通过静脉、皮下或口服给药。
[0013] 将上述降血脂组合物使用缓冲液复溶后，使用生理盐水稀释至0. 01~0. 5mg/ml 静脉注射，每天注射一次，连续注射，注射周期为14天，所述SAK蛋白用量为0. 01mg/kg~ 5mg/kg〇
[0014] 本发明的有益效果：通过本发明人的研宄显示SAK蛋白可能通过stat3信号通路 调控脂肪代谢相关基因表达。本发明中的SAK蛋白对高脂血症动物模型给药在14天内即可 显示出显著的降脂效果，可以显著降低血浆总胆固醇（TG)，甘油三酯（TC)，低密度脂蛋白 (LDL-c)水平，延长给药周期后降脂效果更好，这种作用显著优于目前常用的他汀类降脂药 物。本发明的SAK蛋白经过筛选获得的冻干粉制剂，在2-8°C存放36个月，成品的外观、pH 值、溶解度及溶栓活性没有明显的改变。
【附图说明】
[0015] 图1为添加不同成分的SAK蛋白粉剂外观。
[0016] 图2为SAK蛋白粉剂溶栓活性检测结果。
[0017] 图3为高脂喂养鹌鹑血脂检测结果，* :与对照组相比P〈0. 05 :与模型组相比 P〈0.05。
【具体实施方式】
[0018] 以下实施例并不限定本发明，实施例中未详细说明的操作步骤请参照《分子克隆 实验指南》第三版 [2]相应部分（J.萨姆布鲁克E.F.弗里奇等，科学出版社（J. Sambrook， David W. Russell，Molecular Cloning:A Laboratory Manual, 3rd ed·，2001(1)·))或参 阅所用试剂盒的说明书。
[0019] 实施例1 SAK蛋白冻干粉的制备
[0020] 溶液配制及配方组成：配制1 %~5%的海藻糖溶液，20%~50%蔗糖溶液、 0· 5~lmol/L甘氨酸溶液、1%~50%右旋糖酐溶液、0· 5mol/lNaCl溶液，将以上成分组成 不同的冻干保护剂配方，如下表所示。分装于西林瓶中。
【主权项】
1. SAK蛋白在制备降血脂药物中的应用。
2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述SAK蛋白，其氨基酸序列为中国专利 文献（CN101314769A)中序列表中的SEQ ID NO :1所示。
3. -种降血脂组合物，其特征在于，包含权利要求1或2中所述的SAK蛋白。
4. 根据权利要求3所述的一种降血脂组合物，其特征在于，所述SAK蛋白的制备方法 为：培养含有SAK基因序列重组表达载体的工程菌，通过破碎菌体分离上清经过纯化后获 得SAK蛋白液，将纯化的SAK蛋白中加入赋形剂，4°C保存；再加入冻干保护剂，冷冻干燥后， 制的SAK蛋白粉剂。
5. 根据权利要求3或4所述的一种降血脂组合物，其特征在于，所述赋形剂为海藻糖。
6. 根据权利要求3或4所述的一种降血脂组合物，其特征在于，所述保护剂为甘露醇、 右旋糖酐、蔗糖、乳糖、氯化钠、甘氨酸中的一种以上。
【专利摘要】本发明公开了属于生物医药领域的一种SAK蛋白在制备降血脂药物中的应用。所述SAK蛋白，其氨基酸序列为中国专利文献(CN101314769A)中序列表中的SEQ ID NO：1所示。上述SAK蛋白对高脂血症动物模型给药在14天内即可显示出显著的降脂效果，可以显著降低血浆总胆固醇(TG)，甘油三酯(TC)，低密度脂蛋白(LDL-c)水平，延长给药周期后降脂效果更好，这种作用显著优于目前常用的他汀类降脂药物。
【IPC分类】A61K38-48, A61P3-06, C12N9-48
【公开号】CN104721814
【申请号】CN201510131347
【发明人】徐东刚, 王旻, 付文亮, 王园园, 邹民吉, 夏文戎, 毛金武
【申请人】中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年3月24日