；放置12小时后在干燥箱中进行干 燥，干燥后的颗粒采用快速整理剂进行整粒，经整粒后与2. 5g二氧化硅、5g硬脂酸镁混合 后，采用压片机进行压片制得改善睡眠的片剂。
[0136] 实施例16改善睡眠片剂的制备
[0137] 用纯化水将17g聚维酮K30配制成质量分数为10%的水溶液，作为粘合剂；4°C条 件下，325g将实施例7提供的改善睡眠的组合物、68g微晶纤维素、68g预胶化淀粉、20g交 联羧甲基纤维素钠混合，加入所述粘合剂制软材后制粒；放置12小时后在干燥箱中进行干 燥，干燥后的颗粒采用快速整理剂进行整粒，经整粒后与3g二氧化硅、6. 7g硬脂酸镁混合 后，采用压片机进行压片制得改善睡眠的片剂。
[0138] 实施例17改善睡眠片剂的制备
[0139] 用纯化水将14g聚维酮K30配制成质量分数为10%的水溶液，作为粘合剂；4°C条 件下，340g将实施例8提供的改善睡眠的组合物、105g微晶纤维素、84g预胶化淀粉、31g交 联羧甲基纤维素钠混合，加入所述粘合剂制软材后制粒；放置12小时后在干燥箱中进行干 燥，干燥后的颗粒采用快速整理剂进行整粒，经整粒后与3. 5g二氧化硅、7g硬脂酸镁混合 后，采用压片机进行压片制得改善睡眠的片剂。
[0140] 实施例18改善睡眠片剂的制备
[0141] 用纯化水将23g聚维酮K30配制成质量分数为10%的水溶液，作为粘合剂；4°C条 件下，375g将实施例9提供的改善睡眠的组合物、140g微晶纤维素、109g预胶化淀粉、39g 交联羧甲基纤维素钠混合，加入所述粘合剂制软材后制粒；放置12小时后在干燥箱中进行 干燥，干燥后的颗粒采用快速整理剂进行整粒，经整粒后与3. 9g二氧化硅、7.Sg硬脂酸镁 混合后，采用压片机进行压片制得改善睡眠的片剂。
[0142] 实施例19改善睡眠片剂的制备
[0143] 用纯化水将10. 5g聚维酮K30配制成质量分数为10%的水溶液，作为粘合剂；4°C条件下，252g将实施例10提供的改善睡眠的组合物、58g微晶纤维素、58g预胶化淀粉、21g 交联羧甲基纤维素钠混合，加入所述粘合剂制软材后制粒；放置12小时后在干燥箱中进行 干燥，干燥后的颗粒采用快速整理剂进行整粒，经整粒后与2. 6g二氧化硅、5. 3g硬脂酸镁 混合后，采用压片机进行压片制得改善睡眠的片剂。
[0144] 对比例1对照品1的制备
[0145] 用纯化水将10. 5g聚维酮K30配制成质量分数为10%的水溶液，作为粘合剂；4°C条件下，252g苹果干细胞冻干粉、58g微晶纤维素、58g预胶化淀粉、21g交联羧甲基纤维素 钠混合，加入所述粘合剂制软材后制粒；放置12小时后在干燥箱中进行干燥，干燥后的颗 粒采用快速整理剂进行整粒，经整粒后与2. 6g二氧化硅、5. 3g硬脂酸镁混合后，采用压片 机进行压片制得改善睡眠的片剂。
[0146] 对比例2对照品2的制备
[0147] 用纯化水将10. 5g聚维酮K30配制成质量分数为10%的水溶液，作为粘合剂；4°C条件下，168g酸枣仁提取物、84gy-氨基丁酸、58g微晶纤维素、58g预胶化淀粉、21g交联羧 甲基纤维素钠混合，加入所述粘合剂制软材后制粒；放置12小时后在干燥箱中进行干燥， 干燥后的颗粒采用快速整理剂进行整粒，经整粒后与2. 6g二氧化硅、5. 3g硬脂酸镁混合 后，采用压片机进行压片制得改善睡眠的片剂。
[0148] 实施例20改善睡眠片剂的小鼠急性毒性试验
[0149] 试验参照《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）。
[0150] 取体重为18-22g的小鼠，共设5组，每组10只，雌雄各半，分别按照4. 64g/kg、 10g/kg、21. 5g/kg、46. 4g/kg灌胃给予本发明实施例19提供的片剂，另设空白对照组，对照 组灌胃蒸馏水，按照小鼠20ml/kgBW的量，在12小时内灌胃给药，小鼠给药前禁食15小时， 不禁水，给药后3小时复食。给药停止后连续观察14天，每天观察小鼠精神、食欲、饮水、活 动及中毒情况，并记录小鼠的中毒情况、死亡时间和死亡数目。结果如表1 :
[0151] 表1小鼠急性毒性试验结果
[0152]
【主权项】
1. 一种改善睡眠的组合物，其特征在于，包括苹果干细胞冻干粉、酸枣仁提取物和 Y-氨基丁酸。
2. 根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述苹果干细胞冻干粉、酸枣仁提取物 和T-氨基丁酸的质量比为（20~30) : (20~30) : (8~15)。
3. 根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述苹果干细胞冻干粉、酸枣仁提取物 和Y-氨基丁酸的质量比为25:25:13。
4. 根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，其中苹果干细胞冻干粉的制备方法包 括以下步骤： 步骤1 :苹果新生枝条杀菌、去除木质部和髓后，接种于诱导培养基，诱导培养获得形 成层细胞； 步骤2 :所述形成层细胞经继代培养，接入增殖培养基，摇床培养获得单细胞； 步骤3 :将所述单细胞接种于增殖培养基经扩大培养，获得苹果干细胞； 步骤4 :将所述苹果干细胞反复冻融后冻干、粉碎，获得苹果干细胞冻干粉； 所述诱导培养基为含有NAA、BA和水解酪蛋白的MS固体培养基； 所述增殖培养基为含有2, 4-D、BA、水解酪蛋白和活性炭的MS液体培养基。
5. 如权利要求1~4任一项所述的改善睡眠组合物的制备方法，其特征在于，将苹果干 细胞冻干粉、酸枣仁提取物和Y-氨基丁酸混合，制得改善睡眠组合物。
6. -种改善睡眠的保健品，其特征在于，包括权利要求1~4任一项所述的组合物。
7. -种改善睡眠的片剂，其特征在于，包括权利要求1~4任一项所述的组合物、崩解 剂、稀释剂、粘合剂、增稠剂和润滑剂。
8. 根据权利要求7所述的改善睡眠的片剂，其特征在于，包括权利要求1~4任一项所 述的组合物、微晶纤维素、预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素纳、聚维酮K30、二氧化硅和硬脂 酸镁。
9. 根据权利要求8所述的改善睡眠的片剂，其特征在于，所述权利要求1~4任一项所 述的组合物、微晶纤维素、预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素纳、聚维酮K30、二氧化硅和硬脂 酸镁的质量比为（48 ~75) : (10 ~20) : (10 ~15) : (3 ~6) : (2 ~3) :0? 5 :1。
10. 如权利要求7~9任一项所述的改善睡眠的片剂的制备方法，其特征在于，将权利 要求1~4任一项所述的组合物、崩解剂和稀释剂混合后，加入粘合剂的水溶液制软材，经 制粒、干燥后与增稠剂、润滑剂混合，压片制得改善睡眠的片剂。
【专利摘要】本发明涉及保健品技术领域，尤其涉及一种改善睡眠的组合物及其制备方法。本发明将苹果干细胞冻干粉、酸枣仁提取物和γ-氨基丁酸进行复配后能够具有显著的改善睡眠的功能，且无毒副作用。实验表明，本发明提供的组合物的改善睡眠的效果显著优于单独使用各组分的作用，经小鼠急性毒性试验结果显示小鼠没有发现异常，没有发生中毒或死亡现象。且本发明提供的组合物在0.5g/kg的剂量下能够有效提高戊巴比妥钠阈下剂量小鼠入睡发生率。
【IPC分类】A61K31-197, A61P25-20, A61K36-73
【公开号】CN104758397
【申请号】CN201510172798
【发明人】陈海佳, 王一飞, 葛啸虎, 黎娟妹, 戴国胜, 舒辉萍
【申请人】广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2015年4月13日