。 此外，抑制APC抗原提呈后的免疫应答，下调APC致炎细胞因子的表达也是治疗MS/EAE的 有效备选方案之一。
[0006] 本发明人通过总结前期部分理论成果提出如下假设：抗原提呈细胞（APC)对抗原 识别、处理加工、提呈和自身活化是慢性EAE的早期免疫事件和发病的前提条件。固有免 疫期抗原不能被有效清除或APC对这类抗原反应过于强烈，适应性免疫应答才随之发生。 APC对淋巴细胞持续抗原提呈和自身活化最终引起细胞免疫应答在中枢神经系统的发生和 放大而损伤髓鞘。APC通过主要组织相容性复合物（MHC)分子和共刺激信号分子共同作用 激活自身反应性T、B淋巴细胞是致病的中心环节和重要驱动因素，在EAE致病过程中可能 起决定性作用。外周自身免疫耐受机制终止、免疫反应的负反馈调节作用减弱或障碍，ThO 细胞选择性向Thl细胞的优势分化等多种因素共同作用，最终使中枢神经系统产生脱髓鞘 病变。APC除了抗原提呈作用外，活化后产生的多种促炎性细胞因子对EAE发生也起到一 定作用。增强免疫抑制性调节机制发挥，阻断APC的抗原摄取、加工、提呈，抑制自身反应性 T、B淋巴细胞活化，减少APC促炎细胞因子分泌，促进ThO细胞向Th2细胞而非Thl细胞分 化等都是潜在的有效治疗靶点。
[0007] 融合免疫球蛋白（mGE)(专利号：CN200410006498. 9)，其组成成份全部来源于人 源性免疫球蛋白，该蛋白作为一种药物进入人体，没有任何异体蛋白的免疫源性。mGE是一 种具有剂量依赖效应，无明显不良反应的融合免疫球蛋白。mGE为约140KD的二聚体，将IgG 的Fc段与IgE的Fc段用15个氨基酸融合而成，可与抗ε -及γ-链特异性抗体相互作用。 mGE的C区（Hinge)灵活，可转动，可将Fc γ RII (IgG受体）及Fc ε RI (亲和性IgE受体） 结合，从而诱发细胞内的抑制信号，阻止细胞释放各种生物活性物质。Fc ε RI通过IgE与多 价抗原结合后使相邻两个Fc ε RI受体发生桥联，激活免疫受体酪氨酸活化基序（ITAM)，进 而启动下游信号通路并最终引起细胞的活化效应。Fc ε RI信号通路受IgG的抑制性受体 FcyRIIb负反馈调节，Fe YRIIb是唯一胞内段含有免疫受体酪氨酸抑制基序（Ι??Μ)的Fc 受体，可以招募下游信号转导分子去磷酸化而抑制信号转导。Fc γ RIIb在生理条件下可与 Fe ε RI发生聚合，并且磷酸化的Fe γ RIIb需要与Fe ε RI共聚集，通过SH2结构域的5-磷 酸肌醇（SHIP)则可诱导产生抑制信号。该融合免疫球蛋白能够使Fey RIIb和Fe ε RI发 生聚集，激活Fe ε RI相关酪氨酸激酶（Lyn)的抑制信号，从而导致Fe γ RIIb的Ι??Μ的酪 氨酸迅速磷酸化而抑制肥大细胞和嗜碱性粒细胞的脱颗粒反应（Degranulation)及B细胞 分泌抗体向IgE的类别转换，其中，其作用原理见图17所示。
[0008] APC是调节免疫反应方向和产生免疫耐受所必需的调节器，在维持免疫耐受中起 到关键作用。APC提呈抗原并激活T淋巴细胞时需要双信号刺激：Τ淋巴细胞表面抗原受体 (TCR)与MHC-抗原肽复合物结合提供第一信号，APC表达的共刺激分子Β7-1/Β7-2与T细 胞相应受体CD80/CD86/等结合提供活化的第二信号。共刺激分子不仅只提供T细胞增殖 的第二信号，同时也调控免疫反应强度，防止T进入无反应状态或细胞过度激活。树突状细 胞（DC)作为起主要作用的APC，有研宄者将其根据功能不同分为DCl和DC2两种类型，其中 DCl可产生大量IL-12、TNF-a和少量IL-6,诱导ThO细胞向Thl细胞优势分化；而DC2可 分泌大量IL-6和少量IL-12,诱导ThO细胞向Th2细胞优势分化。DC2可通过诱导Th2型 反应而抑制Thl型应答的产生和强度，Th2型反应产生的IL-IO能影响DC的成熟，减少其 MHCII类分子、共刺激分子和粘附分子等的表达，并能诱导Treg细胞分化，增强机体的免疫 耐受。研宄还发现，EAE动物中枢神经系统中小胶质细胞表达MHCII类分子，且应用INF-γ 诱导MHCII类分子表达能加重EAE病情，而应用IL-4、IL-10及TGF- β可抑制MHCII类分 子表达并有助于EAE恢复，这与本实验前期所得出的APC抗原提呈及炎性细胞因子分泌是 参与EAE的重要机制这个结论一致。基于对MS/EAE发病机制多样化观点的认同，即多种类 型免疫应答、多种免疫细胞参与和不同作用机制共同导致疾病发生，因此我们把治疗的靶 点设为免疫细胞的Fe γ RIIb，通过增强其表达或功能而缓解MS/EAE的损伤症状。本发明的 目的是提供融合免疫球蛋白在制备治疗多发性硬化症药物中的应用，证实通过这一途径， 融合免疫球蛋白具有明确的缓解慢性EAE小鼠临床功能损害的作用，治疗过程中不会出现 激素样停药反弹现象。
【发明内容】
[0009] 本发明公开了融合免疫球蛋白在制备治疗多发性硬化症药物中的应用，以充分的 药理实验证明该融合免疫球蛋白可用于制备治疗多发性硬化症药物，且治疗过程中不会出 现停药反弹现象。
[0010] 具体的说，该融合免疫球蛋白可以通过抑制APC的MHC分子表达，抑制其致炎细胞 因子释放而缓解慢性EAE的神经功能损伤症状。主要表现在以下几个方面：
[0011] (1)融合免疫球蛋白可以降低慢性EAE小鼠脑内补体C3和C5a、MHCI、MHCII类分 子、B7-l、Fas、IL-12、IL-27 和脾脏 INF-γ 的表达；
[0012] (2)融合免疫球蛋白可以增加 Fe γ RIIb的表达；表现出对APC活化的多重阻遏作 用。
[0013] 根据本发明，所述融合免疫球蛋白是具有序列表中SEQ IDN2 :2氨基酸残基序列 的蛋白质，或者是将SEQ IDN2 :2氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失 或添加具有与SEQ ID Ne : 2氨基酸残基序列相同活性的由SEQ ID Ne : 2衍生的蛋白质。
[0014] 根据本发明，所述融合免疫球蛋白是序列表中的SEQ IDN2 :2。序列表中序列2的 氨基酸残基序列由554个氨基酸残基组成的蛋白质。
[0015] 根据本发明，所述融合免疫球蛋白编码基因，是下列核苷酸序列之一：
[0016] 1)序列表中SEQ ID Ns : 1的DNA序列；
[0017] 2)编码序列表中SEQ IDNe :2蛋白质序列的多核苷酸；
[0018] 3)与序列表中SEQ IDN2 :1限定的DNA序列具有95%以上同源性，且编码相同功 能蛋白质的DNA序列。
[0019] 根据本发明，所述融合免疫球蛋白编码基因是序列表中的SEQ IDN2 :1。序列1中 的DNA序列由1665个碱基组成。
【附图说明】
[0020] 图1为干预时间与分组因素交互效应图。
[0021] 图2为实验小鼠脑HE染色（X 200)。
[0022] 图3为实验小鼠脑LFB染色（X 200)。
[0023] 图4为实验小鼠脾脏IFN- γ免疫荧光组化（X 200)。
[0024] 图5为实验小鼠脑Fas免疫荧光（X 400)。
[0025] 图6为实验小鼠脑IL-12免疫荧光组化（Χ400)。
[0026] 图7为实验小鼠脑Ki-67、MBP双标免疫荧光组化（X 400)。
[0027] 图8为实验小鼠脑Ki-67、Ibal双标免疫荧光组化（X 200)。
[0028] 图9为各组脑内EB含量的变化。
[0029] 图10(1)、10⑵为各组不同时期脑内Fe YRIIb (CD32)的表达情况。
[0030] 图11 (1)和11 (2)为EAE组小鼠在不同时期补体C3mRNA的变化。
[0031] 图12 (1)和12⑵为EAE组小鼠不同时期脑内MHCI类分子mRNA的表达。
[0032] 图13⑴和13⑵为EAE组小鼠在不同阶段脑内MHCII类分子mRNA的表达。
[0033] 图14⑴和14⑵为EAE组小鼠在不同时期脑内IL-12的含量变化。
[0034] 图15为各组小鼠脑内TGF-β、Fas和C5a在不同时期的表达。
[0035] 图16为各组小鼠脑内FoxP3、IL-27和B7分子在不同时期的表达。 图17为现有技术中融合蛋白作用示意图。
【具体实施方式】
[0036] 下面结合具体实施