一种山莓提取物，该提取物的制备方法及医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药领域，具体涉及一种山莓提取物，该提取物的制备方法及医药用 途。
【背景技术】
[0002] 药材山莓为蔷薇科悬钩子属植物山莓的果实，又名悬钩子（《本草纲目拾遗》）、沿 钩子（《日用本草》）、山泡子（《天目山药用植物志》）。
[0003] 原植物山莓（学名：Rubus corchorifolius L. f.)，又名树莓、山抛子、牛奶泡、撒 秧泡，三月泡、四月泡、龙船泡，大麦泡、泡儿刺，刺萌芦、馒头菠、高脚波，直立灌木，高1-3 米；枝具皮刺，幼时为柔毛。单叶，卵形至卵状披针形，多生在向阳山坡、山谷、荒地、溪边和 疏密灌丛中潮湿处，目前尚未由人工引种栽培。花期2-3月，果期4-6月。具有涩精益肾 助阳明目、醒酒止渴、化痰解毒之功效，主治肾虚、遗精、醉酒、丹毒等症。叶性微苦，解毒、消 月中、敛疮等、咽喉肿痛、多发性脓肿、乳腺炎等症。除东北、甘肃、青海、新疆、西藏外，中国其 余省份、朝鲜、日本、緬甸、越南均有分布。
[0004] 原植物山莓为直立灌木，高1-3米；枝具皮刺，幼时被柔毛。单叶，卵形至卵状披 针形，长5-12厘米，宽2. 5-5厘米，顶端渐尖，基部微心形，有时近截形或近圆形，上面色较 浅，沿叶脉有细柔毛，下面色稍深，幼时密被细柔毛，逐渐脱落至老时近无毛，沿中脉疏生小 皮刺，边缘不分裂或3裂，通常不育枝上的叶3裂，有不规则锐锯齿或重锯齿，基部具3脉。 叶柄长1-2厘米，疏生小皮刺，幼时密生细柔毛；托叶线状披针形，具柔毛。花单生或少数生 于短枝上；花梗长0. 6-2厘米，具细柔毛；花直径可达3厘米；花萼外密被细柔毛，无刺；萼 片卵形或三角状卵形，长5-8毫米，顶端急尖至短渐尖；花瓣长圆形或椭圆形，白色，顶端圆 钝，长9-12毫米，宽6-8毫米，长于萼片；雄蕊多数，花丝宽扁；雌蕊多数，子房有柔毛。果实 由很多小核果组成，近球形或卵球形，直径1-1. 2厘米，红色，密被细柔毛；核具皱纹。花期 2-3月，果期4-6月。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种山莓提取物，该提取物的制备方法和液相分析方法， 含有该提取物的药物制剂及利用该提取物制备抗甲1型流感病毒药物的用途。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] -种山莓提取物，该提取物由以下方法制备：
[0008] (a)以重量计，每100份药材包含干燥的山莓80~90份和干燥的党参10~20 份，混合粉碎；(b)用65~75 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液； (c)对步骤（b)浓缩液依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（d)正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用20~30% 乙醇冲洗7~9个柱体积除去多糖，再用55~65%乙醇洗脱9~11个柱体积，收集55~ 65%乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0009] 进一步地，步骤（d)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。
[0010] 进一步地，步骤（b)中所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为70%。
[0011] 进一步地，步骤（d)为用正丁醇萃取物用大孔树脂富集，先用25%乙醇冲洗8个 柱体积除去多糖，再用60 %乙醇洗脱10个柱体积，收集60 %乙醇洗脱液，减压浓缩，喷雾干 燥。
[0012] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同产地、批次药材制备的山莓提 取物批间差异，所述提取物的液相分析方法为：
[0013] 色谱柱：Agilent Zorbax SB C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 y m);
[0014] 流动相：A为甲醇，B为0. 1 %磷酸水溶液；
[0015]梯度洗脱程序：0?01 ~15min，A 25%~35% ;15 ~25min，A 35%~50% ;25 ~ 32min，A 50% ;32 ~35min，A 50%~25% ;35 ~40min，A 25%;
[0016] 流动相流速：1. OmL ? min S
[0017] 检测波长：255nm;
[0018] 柱温：30°C ;
[0019] 进样量：10yL。
[0020] 药物制剂，含有治疗有效量的所述山莓提取物和药学上可接受的载体。
[0021] 所述的山莓提取物在制备治疗甲1型流感病毒的药物中的应用。
[0022] 所述的药物制剂在制备治疗甲1型流感病毒的药物中的应用。
[0023] 本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。
[0024] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明山莓提取物，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0025] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0026] 本发明的优点：本发明通过对山莓药材进行提取、除杂、富集处理，能得到治疗甲 1型流感病毒的提取物；本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹图谱， 用于控制不同产地、批次药材制备的提取物的批间差异。
【附图说明】
[0027] 图1为山莓提取物HPLC液相图谱。
【具体实施方式】
[0028] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0029] 实施例1 :山莓提取物制备
[0030] 药材来源：山莓和党参购自安徽亳州中药材市场。
[0031] 主要试剂：食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；医药级AB-8大孔树脂购 自天津波鸿树脂有限公司；甲醇为HPLC级，购于TEDIA;85%磷酸为HPLC级，购于TEDIA; 色谱用纯净水为哇哈哈纯净水。
[0032] 将8. 5kg干燥的山莓和1.5kg干燥党参混合粉碎，用70 %乙醇热回流提取 (25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚（6LX3 次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、 乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大孔树脂 (2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱10个柱 体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得山莓提取物浸膏粉约155g。
[0033] 实施例2:山莓提取物②制备（80份山莓，20份党参）
[0034] 制备方法：将8. 0kg干燥的山莓和2. 0kg干燥党参混合粉碎，用70%乙醇热回流 提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得山莓提取物浸膏粉约155g。
[0035] 实施例3:山莓提取物③制备（90份山莓，10份党参）
[0036] 制备方法：将9. 0kg干燥的山莓和1. 0kg干燥党参混合粉碎，用70%乙醇热回流 提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水饱和的正丁醇（6LX3次）萃取，分别得到石油醚萃 取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物285g，正丁醇萃取物用5L蒸馏水溶解后用AB-8大 孔树脂（2kg，柱体积1. 5L)富集，先用25%乙醇冲洗8个柱体积（12L)，再用60%乙醇洗脱 10个柱体积（15L)，收集60%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥得山莓提取物浸膏粉约155g。
[0037] 实施例4:山莓提取物④制备（75份山莓，25份党参）
[0038] 制备方法：将7. 5kg干燥的山莓和2. 5kg干燥党参混合粉碎，用70%乙醇热回流 提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到浓缩液（6L);对浓缩液依次用石油醚 (6