含抗微生物金属的二氟泼尼酯乳液组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种包含抗微生物金属的二氟泼尼酯乳液组合物。更特别地，本发明 涉及一种含二氟泼尼酯的乳液组合物，其由于含抗微生物金属而显示出防腐功效的即时效 果。
[0002] 发明背景
[0003] 由于滴眼液、滴鼻液和滴耳液是反复使用的制剂，而非单次使用的配制剂，因此即 使在开盖之前将其灭菌，开盖药物溶液被微生物如细菌等污染的风险仍极高。因此，为了防 止该二次污染，通常对含水制剂添加防腐剂，如苯扎氯铵、葡萄糖酸氯己定、对羟基苯甲酸 酯等。然而，与含水液体相比，难以赋予乳液以防腐功效，已报告了使用山梨酸、硼酸和乙二 胺四乙酸钠作为适于乳液的防腐剂（美国专利6379688)。本发明人研究了即使在乳液被微 生物等二次污染时，也能在比常规乳液更短的时间内根除微生物的防腐剂。特别地，在6小 时和24小时内降低活细胞计数，即在短时间内根除侵入的微生物在欧洲药典的防腐功效 测试中被认为是重要的。
[0004] 二氟泼尼酯是强留体消炎药，且在美国作为乳液滴眼液销售。该含二氟泼尼酯的 乳液滴眼液包含0. 1 (W/V) %山梨酸作为防腐剂。
[0005] 另一方面，已报告了包含抗微生物金属作为防腐剂的组合物。例如， TO2004/091567描述了用于局部施用的包含颜料的配制剂，其可通过搅拌包含一种或多种 有机颜料和氧化银的悬浮液而获得，并且描述也可以以乳液形式使用。W02007/012977描述 了一种可起泡的组合物，其包含留族化合物、治疗活性油、表面活性剂和聚合物添加剂，并 且描述可添加银作为额外的治疗剂。
[0006]EP0028110B描述了一种可热灭菌的眼科乳液组合物，其包含用三烯丙基蔗糖交联 的聚丙烯酸的可药用盐的水溶液，并且描述了磺胺嘧啶银作为可用的药剂。
[0007]发明简述
[0008] 本发明的目的是提供一种包含二氟泼尼酯的稳定乳液组合物，其显示出防腐功效 的即时效果。
[0009] 本发明人发现具有防腐功效的即时效果且包含二氟泼尼酯的乳液组合可通过添 加抗微生物金属而制备。
[0010] 因此，本发明提供了如下：
[0011] [1] -种乳液组合物，其包含二氟泼尼酯和抗微生物金属（除锌之外）。
[0012] [2]根据上述[1]的乳液组合物，其中抗微生物金属（除锌之外）为抗微生物金属 (除锌之外）的盐或配合物。
[0013] [3]根据上述[2]的乳液组合物，其中抗微生物金属（除锌之外）的盐或配合物为 至少一种选自银和铜的抗微生物金属的盐或配合物。
[0014] [4]根据上述[3]的乳液组合物，其中抗微生物金属（除锌之外）的盐或配合物为 银盐或银配合物。
[0015] [5]根据上述[4]的乳液组合物，其中银盐或银配合物为选自硝酸银、蛋白银和植 酸银配合物中的至少一种。
[0016] [6]根据上述[4]或[5]的乳液组合物，其中银盐或银配合物具有不小于 0. 00005 (w/v) %且不大于0. 6 (w/v) %的银离子浓度。
[0017] [7]根据上述[4]或[5]的乳液组合物，其中银盐或银配合物具有不小于 0. 0005 (w/v) %且不大于0. 01 (w/v) %的银离子浓度。
[0018] [8]根据上述[3]的乳液组合物，其中抗微生物金属（除锌之外）的盐或配合物为 铜盐或铜配合物。
[0019] [9]根据上述[8]的乳液组合物，其中铜盐或铜配合物为硫酸铜。
[0020] [10]根据上述[8]或[9]的乳液组合物，其中铜盐或铜配合物具有大于 0. 0001 (w/v) %且不大于0. 5 (w/v) %的铜离子浓度。
[0021] [11]根据上述[8]或[9]的乳液组合物，其中铜盐或铜配合物具有不小于 0. 0005 (w/v) %且不大于0. 01 (w/v) %的铜离子浓度。
[0022] [12]根据上述[1]_[11]中任一项的乳液组合物，其为眼科组合物。
[0023] [13] -种赋予包含二氟泼尼酯的乳液组合物以防腐功效的即时效果的方法，所述 方法包括制备包含二氟泼尼酯和抗微生物金属（除锌之外）的乳液组合物。
[0024] [14]根据上述[13]的方法，其中防腐功效的即时效果为在接种后24小时内活细 胞计数降低31og或更大。
[0025] [15]根据上述[13]的方法，其中防腐功效的即时效果为在接种后24小时内活细 胞计数降低31og或更大且在接种后6小时内活细胞计数降低21og或更大。
[0026] [16]根据上述[13]_[15]中任一项的方法，其中抗微生物金属（除锌之外）为抗 微生物金属（除锌之外）的盐或配合物。
[0027] [17]根据上述[16]的方法，其中抗微生物金属（除锌之外）的盐或配合物为至少 一种选自银和铜的抗微生物金属的盐或配合物。
[0028] [18]根据上述[17]的方法，其中抗微生物金属（除锌之外）的盐或配合物为银盐 或银配合物。
[0029] [19]根据上述[18]的方法，其中银盐或银配合物为选自硝酸银、蛋白银和植酸银 配合物中的至少一种。
[0030] [20]根据上述[18]或[19]的方法，其中银盐或银配合物具有不小于0. 00005 (w/ v) %且不大于0. 6 (w/v) %的银离子浓度。
[0031] [21]根据上述[18]或[19]的方法，其中银盐或银配合物具有不小于0. 0005 (w/ v) %且不大于0. 01 (w/v) %的银离子浓度。
[0032] [22]根据上述[17]的方法，其中抗微生物金属（除锌之外）的盐或配合物为铜盐 或铜配合物。
[0033] [23]根据上述[22]的方法，其中铜盐或铜配合物为硫酸铜。
[0034] [24]根据上述[22]或[23]的方法，其中铜盐或铜配合物具有大于0.0001 (w/ v) %且不大于0. 5 (w/v) %的铜离子浓度。
[0035] [25]根据上述[22]或[23]的方法，其中铜盐或铜配合物具有不小于0. 0005 (w/ v) %且不大于0. 01 (w/v) %的铜离子浓度。
[0036] [26]根据上述[13]_[25]中任一项的方法，其中所述乳液组合物为眼科组合物。
[0037] [27] -种赋予包含二氟泼尼酯的乳液组合物以防腐功效的即时效果的方法，包括 向包含二氟泼尼酯的乳液组合物中添加抗微生物金属（除锌之外）。
[0038] [28]根据上述[27]的方法，其中防腐功效的即时效果为在接种后24小时内活细 胞计数降低31og或更大。
[0039] [29]根据上述[27]的方法，其中防腐功效的即时效果为在接种后24小时内活细 胞计数降低31og或更大且在接种后6小时内活细胞计数降低21og或更大。
[0040] 发明详述
[0041] 本发明提供了一种包含二氟泼尼酯和抗微生物金属（除锌之外）的乳液组合物。 更特别地，本发明提供了一种水包油乳液组合物，其包含二氟泼尼酯、油、水、乳化剂和抗微 生物金属（除锌之外），其显示出防腐功效的即时效果（在下文中称为本发明的组合物）。 [0042] 在本说明书中，除非另有说明，具有防腐功效的即时效果意指细菌的活细胞 计数在短时间内在例如防腐功效测试中降低。例如，其意指细菌（金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、大肠杆菌（Escherichiacoli)和铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa))的活细胞计数在接种后24小时内降低31og或更大。此外，其意指细菌的活 细胞计数在接种后24小时内降低31og或更大，且在接种后6小时内降低21og或更大。上 述标准为在实施欧洲药典7. 0中所述的防腐功效测试（欧洲药典7. 0,抗微生物防腐功效） 时的标准之一。
[0043] 欧洲药典7. 0中所述的防腐功效测试的操作方法包括使用细菌（金黄色葡萄球 菌和铜绿假单胞菌）和真菌（白色念珠菌（Candidaalbicans)和黑曲霉菌（Aspergillus brasiliensis(niger)))作为测试微生物，和下述操作（i)-(iv)。需要的话，可在测试微生 物中增加微生物如大肠杆菌等。
[0044] (i)将上述用于测试的5种微生物品种接种于斜琼脂媒介上并预培养。作为用于 预培养的琼脂媒介，对细菌使用大豆酪蛋白消化琼脂媒介，对真菌使用萨布罗葡萄糖琼脂 媒介。将细菌在30-35°C下预培养18-24小时，将白色念珠菌在20-25°C下预培养40-48小 时，将黑曲霉菌在20-25°C下预培养1周或者直至获得良好的孢子形成。
[0045] (ii)使用待测试的含水液体组合物作为样品，将该样品分配至5个灭菌的有塞试 管，每个10mL。将（i)的测试微生物以105-106细胞/mL接种，从而制得混合样品，并将该 样品在20-25°C下在防光下保存。将测试微生物单独接种至样品而不混合。
[0046] (iii)在从开始保存起保存24小时后，提取lmL各混合样品，用盐水将所述溶液稀 释（9mL)。实施类似的稀释2-3次，每次将稀释的溶液（lmL)