专利名称：天然生育酚提取新工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及化学提取方法，更具体地说涉及从大豆油脱臭馏出物中提取生育酚的方法。
生育酚又名维生素E，有很强的生理作用和抗氧化作用，用途很广。
大豆油脱臭馏出物中的生育酚含量一般在1％至15％左右。我国的脱臭馏出物含量丰富，价格低廉。而且从脱臭馏出物中提取的生育酚，其生理作用比合成的生育酚强，又因为它是天然产品，和全世界正在提倡的绿色产业和回归自然是极相符的。所以从大豆油脱臭馏出物中提取生育酚有很强的开发利用价值。
从大豆油脱臭馏出物中提取生育酚的方法很多，有皂化—萃取法、酯化—萃取法、脲包法、超临界CO2浓缩法、直接溶剂浸出法、直接蒸馏法、吸附剂和离子交换树脂的色谱法等。
在各种方法中，酯化—蒸馏法是提取脱臭馏出物中生育酚和甾醇用得较多的方法，它们的工艺也较完善，无疑它是提取生育酚和甾醇的有效方法，但它们涉及了热处理、氧化剂、矿物酸等，这些对生育酚是不利的；超临界CO2浓缩法对设备要求较高，花费也较大；直接溶剂萃取法消耗溶剂量比较大，提取物的生育酚含量也不高；吸附剂和离子交换树脂的色谱法分离比较有效，不过化学工业的大量处理问题较难解决；直接蒸馏法提取比较困难，提取的纯度不高；脲包法提取脱臭馏出物中生育酚和甾醇操作简单，对设备要求不高，反应成本低，对生育酚破坏小。由于甾醇在醇中溶解度小，反应还能除去大部分甾醇，提取的生育酚可作为药用原料，脂肪酸仍可在工业上应用，其缺点为尿素不易包合甘油酯，对脂肪酸的包合也不一定完全，所以，脲包法对生育酚的提取得到的生育酚浓缩物中生育酚的含量一般不高，并且受原料的影响很大[U.S.Pat.No.5078920]；皂化法除脂肪酸和甘油酯较彻底，其缺点为皂化萃取法消耗溶剂较多，反应成本较高，并且由于加入较多的碱，对生育酚的破坏较大，而且用皂化萃取法不易除甾醇[U.S.Pat.No.5371245]。
由以上比较得知，各种提取生育酚的方法虽有其优点，也各有其不尽人意之处。
本发明的目的是寻找一种能克服现有对生育酚提取方法的缺点，保持其优点的新方法。
本发明采用皂化—脲包法提取生育酚，此方法不仅结合了脲包反应和皂化反应的优点，而且克服了各自的缺点。在此方法中，脲包反应对生育酚的低破坏和去甾醇的作用得到了发挥，而脲包反应提取的生育酚的浓度不高的缺点由于下一步的皂化反应得到克服；皂化反应对生育酚的破坏的问题由于先用脲包反应除去大部分脂肪酸，使皂化反应加碱量的减少而得到缓解，而且由于先进行皂化反应除去了的部分脂肪酸，使皂化反应的处理量大大降低，皂化反应消耗溶剂量大的缺点也得到了部分克服。
本发明是这样实现的溶解适量尿素(农用级)于工业乙醇中，加入已熔化的脱臭馏出物搅拌加热，使其回流。搅拌均匀后停止加热，待冷到室温，0℃下放置24小时，溶液中有针状结晶产生，溶液过滤，溶液加入NaOH以除去未被除去的脂肪酸，再加入维生素C，在78±1℃下水浴反应30分钟，待冷加入适量水，并用石油醚提取三次，合并石油醚，用水洗涤至酚酞不变色，减压除去石油醚，得富含生育酚的浓缩物。
反应原料的比例NaOH∶脱臭馏出物∶尿素＝0.8-1.5∶8-12∶15-25(质量比)溶剂为工业乙醇，工业乙醇∶脱臭馏出物＝3-5∶0.8-2.6g/ml)。
甾醇的含量测定如下(1)称5/S克的样品(S为估计的甾醇百分数/m/m)，加3/S毫升的KOH水溶液(400克KOH/l升水)。加7/S毫升乙醇。
(2)在水浴锅中连冷凝管回流，使皂化完全，既反应体系匀质后继续加热15-20分钟。
(3)加60毫升蒸馏水，180毫升乙醇，调温到50℃。
(4)加25-30毫升的毛地黄皂甙(10克毛地黄皂甙/升乙醇)，冷却几小时，最好过夜。
(5)在真空下过滤，用蒸馏水洗一次，用乙醇洗几次，最后用几毫升乙醚洗一次。
(6)沉淀物在103±2℃烘箱烘至恒重，甾醇的百分量＝25a/m。
其中a为沉淀物的重量m为所加的样品量生育酚浓缩物中生育酚的含量测定a、皂化和提取(1)称取含生育酚的量不少于50微升的试样于50ml的烧瓶中，加4ml抗坏血酸(Vc)乙醇溶液，1ml 60％的KOH水溶液，回流煮沸3分钟。
(2)冷却，加25ml蒸馏水，转移至250ml分液漏斗。用40ml乙醚提取一次，水层再分别用25ml乙醚提取两次。和并三次乙醚提取液，用蒸馏水洗到洗出的水遇酚酞不变色。
(3)把乙醚层转到100ml烧瓶中，用水浴把乙醚蒸干。加1ml乙醇，4ml苯在通N2下再次蒸干。准确加1ml-10ml环己烷。
b、薄层分离(暗室下操作)(1)用微量注射器向TCL板准确加样，每个样范围在5-50μl之间。同时加以标准生育酚样。
(2)在盛有正己烷和乙醚(7∶3)的罐内将色谱板展开。在室温下冷却。
(3)在紫外灯下观察色谱(也可用显色剂确定位置)，比较标准生育酚的位置，标明样品的α-生育酚带、β+γ生育酚带、δ-生育酚带位置。
(4)刮取色谱带，分别置于盛有10ml环己烷、乙醇(2∶1)的试管中摇晃试管，静置半小时。
(5)刮取和提取生育酚谱带同等面积的色谱板硅胶作板空白。
(6)将试管离心10分钟，把上清液转移到梨型瓶，蒸干溶液。
c、分光光度测定(暗室操作)(1)在每个梨型瓶中加3.6ml乙醇、0.2ml 2，2-联呲啶乙醇溶液(1mg/ml)，0.2ml三氯化铁乙醇溶液(1mg/ml)轻摇使之混合均匀，静置10分钟。
(2)用分光光度计在520nm下测吸收率。
生育酚含量(mg/100g)＝(A-A0)×F×V×100/(v×m)其中A为试样的吸收率A0为空白的吸收率V为a(3)溶解不皂化物的环己烷ul数V为b(1)注样的ul数m为试样的量(g)F为分光光度系数，对于α生育酚为98、β和γ生育酚为90、δ生育酚为75。
本发明优点1、得到的产品的生育酚含量高达49％。
2、产品的抗氧化活性较强。
3、溶剂消耗比单纯用皂化反应小。
4、反应成本较低(采用了农用尿素和工业乙醇)。
5、反应条件简单。
6、由于先采用脲包反应除去大部分脂肪酸，使皂化反应的处理较为简单、处理量减少。
实施例1溶解1Kg农用尿素于2升工业乙醇中，加入0.5Kg熔化的脱臭馏出物，回流搅拌混合均匀，即停止加热，在0℃下放置24小时，溶液中形成针状晶体。
溶液经布氏漏斗过滤，取滤液加入52g NaOH、20gVc，在78±1℃下水浴反应30分钟。冷却，加入1升水，并分三次分别加入0.5升、0.3升、0.3升石油醚萃取，合并石油醚层，重复水洗至洗出的水遇酚酞不变色。在75℃，100-200毫米汞柱压力下蒸馏回收石油醚，得到82g富含生育的浓缩物，经分析生育酚的含量为48.8％，回收率为88％。
实施例2溶解0.8Kg农用尿素于3.2升工业乙醇中，加入0.8Kg熔化的脱臭馏出物，回流搅拌混合均匀，即停止加热，在0℃下放置24小时，溶液中形成针状晶体。
溶液经布氏漏斗过滤，取滤液加入64g NaOH、24.6gVc，在78±1℃下水浴反应30分钟。冷却，加入1.2升水，分别用0.8升、0.4升、0.4升石油醚萃取，合并石油醚层，重复水洗至洗出的水遇酚酞不变色。在75℃，100-200毫米汞柱压力下蒸馏回收石油醚，得到富含生育的浓缩物，经分析生育酚的含量为48.8％，回收率为88％。
权利要求
1.一种提取生育酚的方法，其特征在于一定比例的尿素、乙醇及脱臭馏出物，加热搅拌均匀混和除去脂肪酸及甾醇，滤液加入一不定期比例NaOH、Vc皂化反应，加石油醚提取，得生育酚浓缩物。
2.根据权利要求1所述提取生育酚的方法，其特下在于反应物的质量比为NaOH∶脱臭馏出物∶尿素＝0.8-1.5∶8-1215-25。
3.根据权利要求1所述提取生育酚的方法，其特征在于乙醇∶脱臭馏出物之比为3-5∶0.8-2.6。
4.根据权利要求1所述提取生育酚的方法，其特征在于提取生育酚的溶剂为石油醚、乙醚、氯仿、二氯甲烷的非质子溶剂。
全文摘要
本发明提供了一种将脲包法与皂化方法相结合的提取天然生育酚新工艺,先除去甾醇与脂肪酸再NaOH皂化,采用本法可减少操作步骤,产品纯度高、成本降低。
文档编号C07D311/72GK1382689SQ01112719
公开日2002年12月4日 申请日期2001年4月26日 优先权日2001年4月26日
发明者翁新楚, 吴侯, 邱祺宏 申请人:上海大学