专利名称：作为肾素抑制剂的新型3－位具有杂原子的9－氮杂双环壬烯衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及通式I的新化合物。本发明还涉及这些化合物的制备方法、包含一种或多种式I化合物的药物组合物以及特别是它们在心血管疾病和肾机能不全中作为肾素抑制剂的用途。此外，这些化合物可以被认为是其它天冬氨酰蛋白酶的抑制剂，并由此可用作治疗疟疾的plasmepsins抑制剂以及作为白色念珠菌分泌的天冬氨酰基蛋白酶的抑制剂从而治疗真菌感染。
在肾素-血管紧张素系统(RAS)中，生物活性的血管紧张素II(Ang II)是通过一种两步机制产生的。高度特异性的肾素酶断裂血管紧张肽原成为血管紧张素I(Ang I)，其然后通过较低特异性血管紧张素-转化酶(ACE)形成AngI。已知AngII作用于至少两个被称为AT1和AT2的受体亚型。其中AT1似乎传送Ang II大部分的已知功能，而AT2的作用仍然未知。
RAS的调节代表了心血管疾病治疗中的主要进步。ACE抑制剂和AT1阻滞剂已被用于治疗高血压(Waeber B.等“The renin-angiotensin systemrole inexperimental and human hypertension”，in Berkenhager W.H.，Reid J.L.(eds)Hypertension，Amsterdam，Elsevier Science Publishing Co，1996，489-519；Weber M.A.，Am.J.Hypertens.，1992，5，247S)。此外，ACE抑制剂用于保护肾(Rosenberg M.E.等，Kidney International，1994，45，403；Breyer J.A.等，Kidney International，1994，45，S156)，用于预防充血性心力衰竭(Vaughan D.E.等，Cardiovasc.Res.，1994，28，159；Fouad-Tarazi F.等，Am.J.Med.，1988，84(Suppl.3A)，83)和心肌梗塞(Pfeffer M.A.et al.，N.Engl.J.Med.，1992，327，669)。
开发肾素抑制剂的原理在于肾素的特异性(Kleinert H.D.，Cardiovasc.Drugs，1995，9，645)。肾素唯一已知的底物是血管紧张素原，其仅受到肾素作用(在生理条件下)。相反，ACE除了可以断裂Ang I外，还可断裂缓激肽且与胃促胰酶(一种丝氨酸蛋白酶)功能相交叉(Husain A.，J.Hypertens.，1993，11，1155)。在患者中，ACE的抑制会导致引起咳嗽的缓激肽积累(5～20％)以及潜在性的危急生命的急性自发水肿(0.1～0.2％)(Israili Z.H.et al.，Annalsof Internal Medicine，1992，117，234)。凝乳酶并非是通过ACE抑制剂来抑制的。因此，在接受ACE抑制剂治疗的患者中，仍可能形成Ang II。另一方面，AT1受体的阻断(例如通过洛沙坦)将其他的AT-受体亚型过度暴露于Ang II，Ang II的浓度通过AT1受体的阻断而被显著地提高。这可以在AT1受体拮抗体的安全与效能特征方面产生严重的问题。总之，不仅希望肾素抑制剂在安全性不同于ACE抑制剂和AT1阻滞剂，但更重要的是，还希望在它们阻挡RAS的效力方面也不同于ACE抑制剂和AT1阻滞剂。
由于肾素抑制剂具有拟肽特征(Kleinert H.D.，Cardiovasc.Drugs，1995，9，645)而导致口腔活度不足，因而仅仅对肾素抑制剂进行了有限的临床实践(Azizi M.et al.，J.Hypertens.，1994，12，419；Neutel J.M.et al.，Am.Heart，1991，122，1094)。已经有数种化合物的临床研发由于它们存在成本高的问题而被终止了。仅仅有一个具有4个手性中心的化合物进入了临床试验(Rahuel J.et al.，Chem.Biol.，2000，7，493；Mealy N.E.，Drugs of theFuture，2001，26，1139)。因此，期待并在寻找一种可大规模制备的代谢稳定、可经口生物利用并充分可溶的肾素抑制剂。最近，公开了首个显示出较高体外活性的非肽肾素抑制剂(Oefner C.et al.，Chem.Biol.，1999，6，127；专利申请WO97/09311；Mrki H.P.et al.，Il Farmaco，2001，56，21)。然而，这些化合物的研发状态仍是未知的。
本发明涉及一种非肽性的和低分子量的血管紧张肽原酶抑制剂的发现。并描述了长效作用的口腔活性的血管紧张肽原酶抑制剂在血压调节之外的指示中是有作用的，在这种血压调节指示中，可以将组织的血管紧张肽原酶-凝乳酶系统活化，从而导致病理生理学改变的局部功能，例如肾、心脏和血管改型、动脉粥样硬化、和可能的再狭窄。
本发明描述了非肽类肾素抑制剂。
特别地，本发明涉及通式I的新型化合物，
通式I其中X代表-O-、-S-、-SO-、-SO2-；W是六元的、非苯并稠合的、苯环或杂芳环、在间位或对位被V取代；V代表键、-(CH2)r-、-A-(CH2)s-、-CH2-A-(CH2)t-、-(CH2)s-A-、-(CH2)2-A-(CH2)u-、-A-(CH2)v-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-A-CH2-CH2-B-、-O-CH2-CH(OCH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CF3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-O-、-O-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-O-、-O-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH2CH2)-O-或-O-C(CH2CH2)-CH2-O-；A和B独立代表-O-、-S-、-SO-、-SO2-；U代表芳基、杂芳基；T代表-CONR1-、-(CH2)pOCO-、-(CH2)pN(R1)CO-、-(CH2)pN(R1)SO2-或-COO-；Q代表低级亚烷基、低级亚烯基；M代表氢、环烷基、芳基、杂环基、杂芳基；R1代表氢、低级烷基、低级链烯基、低级炔基、环烷基、芳基、环烷基-低级烷基；p为整数1、2、3或4；r为整数3、4、5或6；s为整数2、3、4或5；t为整数1、2、3或4；u为整数1、2或3；
v为整数2、3或4；以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
在通式I的定义中——除非有另外的说明——术语“低级烷基”，单独或与其它基团结合时，是指含有1～7个、优选1～4个可被卤素任选取代的碳原子饱和的、直链或支链基团。低级烷基的实例为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基和庚基。优选为甲基、乙基和异丙基。
术语“低级烷氧基”是R-O-基团，其中R为低级烷基。低级烷氧基的实例为甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。
术语“低级链烯基”，单独或与其它基团结合时，是指包含2～7个、优选2～4个可被卤素任选取代的碳原子以及一个烯键的直链或支链基团。低级烯基的实例为乙烯基、丙烯基或丁烯基。
术语“低级炔基”，单独或与其它基团结合时，是指包含2～7个、优选2～4个可被卤素任选取代的碳原子以及一个三键的直链或支链基团。低级炔基的实例为乙炔基、丙炔基或丁炔基。
术语“低级亚烷基”，单独或其它基团结合时，是指包含1～7个、优选1～4个可被卤素任选取代的碳原子直链或支链二价链基团。低级亚烷基的实例为亚乙基、亚丙基或亚丁基。
术语“低级亚烯基”，单独或其它基团结合时，是指包含2～7个、优选2～4个可被卤素任选取代的碳原子以及一个烯键的直链或支链二价链基团。低级亚烯基的实例为亚乙烯基、亚丙烯基和亚丁烯基。
术语“低级亚烷基二氧基”是指在各个末端被一个氧原子取代的低级亚烷基。低级亚烷基二氧基的实例优选为亚甲二氧基和亚乙二氧基。
术语“低级亚烷基氧基”是指在一个末端被氧原子取代的低级亚烷基。低级亚烷基氧基的实例优选为亚甲氧基、亚乙氧基和亚丙氧基。
术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘，优选氟、氯和溴。
术语“环烷基”单独或结合使用时，是指含有3～7个碳原子的饱和烃环系统，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基，并且可任选地被下述基团独立地单取代或多取代低级烷基、低级烯基、低级亚烯基、低级烷氧基、低级亚烷基氧基、低级亚烷基二氧基、羟基、卤素、-CF3、-NR1R1’、-NR1C(O)R1’、-NR1S(O)2R1’、-C(O)NR1R1’、低级烷基羰基、-COOR1、-SR1、-SOR1、-SO2R1、-SO2NR1R1’，其中R1’代表氢、低级烷基、低级烯基、低级炔基、环烷基、芳基、环烷基-低级烷基。优选的基团为环丙基。
术语“芳基”，单独或结合使用时，是指苯基、萘基或茚满基，优选苯基，并且优选被下述基团独立地单取代或多取代低级烷基、低级烯基、低级炔基、低级亚烯基或低级亚烷基从而与芳环形成五员或六元环、低级烷氧基、低级亚烷基二氧基、低级亚烷基氧基、羟基、羟基-低级烷基、卤素、氰基、-CF3、-OCF3、-NR1R1’、-NR1R1’-低级烷基、-NR1C(O)R1’、-NR1S(O)2R1’、-C(O)NR1R1’、-NO2、低级烷基羰基、-COOR1、-SR1、-SOR1、-SO2R1、-SO2NR1R1’、苯甲氧基，其中R1’定义如上。优选的取代基为卤素、低级烷氧基、低级烷基、-CF3、-OCF3。
术语“芳氧基”是指Ar-O-基团，其中Ar为芳基。芳氧基的实例为苯氧基。
术语“杂环基”，单独或结合使用时，是指包含一个或两个可相同或不同的氮、氧或硫原子的饱和或不饱和(但非芳香性的)五-、六-或七-元环，并且该环任选可被低级烷基、羟基、低级烷氧基和卤素任选取代。氮原子，如果存在，可以被COOR2取代。这种环的实例为哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、1，4-二氧六环基、吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢吡咯基、咪唑烷基、二氢吡唑基、吡唑烷基、二氢喹啉基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基。
术语“杂芳基”，单独或结合使用时，是指包含1～4个氮原子的六员芳环；包含1～3个氮原子的苯并六员芳环；包含1个氧原子、1个氮原子或1个硫原子的五员芳环；包含1个氧原子、1个氮原子或1个硫原子的苯并五员芳环；包含1个氧原子和1个氮原子的五员芳环及其苯并衍生物；包含1个硫原子和1个氮原子或1个氧原子的五员芳环及其苯并衍生物；包含2个氮原子的五员芳环及其苯并衍生物；包含3个氮原子的五员芳环及其苯并衍生物，或四唑环。这种环系统的实例为呋喃基、苯硫基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、茚满基、喹啉基、异喹啉基、咪唑啉基、三嗪基、噻嗪基、噻唑基、异噻唑基、哒嗪基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、香豆素基、苯并苯硫基、喹唑啉基、喹喔啉基。这类环可被下述取代基所充分取代低级烷基、低级烯基、低级炔基、低级亚烷基、低级亚烯基、低级亚烷基二氧基、低级亚烷氧基、羟基-低级烷基、低级烷氧基、羟基、卤素、氰基、-CF3、-OCF3、-NR1R1’、-NR1R1’-低级烷基、-N(R1)COR1，-N(R1)SO2R1、-CONR1R1’、-NO2、低级烷基羰基、-COOR1、-SR1、-SOR1、-SO2R1、-SO2NR1R1’、另一个芳基、另一个杂芳基或另一个杂环基等，其中R1’定义如上。优选的杂芳基是吡啶基、嘧啶基(pirimidinyl)、吡嗪基(pirazinyl)。
术语“杂芳芳基”是指Het-O基团，其中Het为杂芳基。
术语“药学上可接受的盐”包括与无机酸或有机酸诸如盐酸或氢溴酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、乙酸、马来酸、酒石酸、苯甲酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等所形成的对生物活体无毒性的盐，并且当式I的化合物为酸性的化合物时与无机碱比如碱金属或碱土金属例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙等所形成的盐。
本发明的化合物还包括在一个或多个位点例如氧(羟基缩合)、硫(巯基缩合)和/或氮被亚硝基化的通式I的亚硝基化化合物。可以使用本领域已知的常规方法制备本发明的亚硝基化化合物。例如将化合物亚硝基化的方法如美国专利的US5,380,758和US5,703,073、WO 97/27749、WO 98/19672、WO 98/21193、WO99/00361以及Oae等，Org.Prep.Proc.Int.，15(3)165-198(1983)所述，这些文献所公开的内容在此全文引为参考。
通式I的化合物还可以包含两个或多个不对称碳原子，并且可以制备成光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映的消旋物的混合物、和内消旋形式及其药学上可接受的盐。
本发明包含全部这些形式。可以通过本身已知的方式，例如柱色谱法、薄层色谱法、HPLC或结晶法对混合物进行分离。
一组优选的通式I的化合物为其中X、W、V和U定义如通式I的化合物，其中T为-CONR1-；Q为亚甲基；M为芳基或杂芳基。
另一组更优选的通式I的化合物为其中X、W、T、Q和M如上通式I定义，且V是-CH2CH2O-、-CH2CH2CH2O-、-OCH2CH2O-。
另一组更优选的通式I化合物为其中V、U、T、Q和M如上通式I定义的化合物，且W代表1，4-二取代的苯基。
另一组更优选的通式I化合物为其中X、W、V、U、T、Q和M如上通式I定义的化合物，且U是单-、二-或三取代的苯基或杂芳基、其中取代基为卤素、低级烷基、低级烷氧基、CF3。
特别优选的通式I化合物选自(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(3-甲氧基-2-甲基-苄基)酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(2，3-二氯苄基)酰胺，(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(3-甲氧基-2-甲基苄基)酰胺，(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基-丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，以及(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺。
通式I的化合物及其药学上可接受的盐例如可以以药物组合物的形式用作治疗药剂。这些包含至少一种通式I的化合物和常见的载体材料和辅助剂的药物组合物可特别用于预防和治疗与肾素血管紧张素系统(RAS)的调节障碍相关的病症，包括心血管疾病和肾病。这种疾病的实例为高血压、冠状动脉疾病、心功能不全、肾机能不全、肾或心肌缺血和肾衰竭。它们还可用于预防气囊或支架血管成形术之后的再狭窄，用于治疗勃起功能障碍、血管球性肾炎、肾绞痛和青光眼。此外，它们还可被用于治疗和预防糖尿病并发症、血管或心脏术或器官移植后并发症、环孢子菌素治疗的并发症，以及目前已知的其它与RAS相关疾病。
在另一个具体实例中，本发明涉及一种用于与RAS相关疾病预防和/或治疗的方法，RAS相关疾病例如高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、心功能不全、肾功能不全、肾或心肌缺血、动脉粥样硬化、肾衰竭、勃起功能障碍、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼、糖尿病性并发症、血管或心脏术后并发症、再狭窄、器官移植后使用免疫抑制剂治疗引起的并发症、以及其它目前已知的与RAS相关疾病，该方法包括给人或动物服用一种式I化合物。
在另一个具体实例中，本发明涉及通式I的化合物用于治疗和/或预防与RAS相关疾病的用途，RAS相关疾病例如高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、心功能不全、肾功能不全、肾或心肌缺血、动脉粥样硬化、肾衰竭、勃起功能障碍、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼、糖尿病性并发症、血管或心脏术后并发症、再狭窄、器官移植后使用免疫抑制剂治疗引起的并发症、以及其它目前已知的与RAS相关疾病。
式I化合物还可被用于与一种或多种其它的药理学活性物质联合使用，例如与其它肾素抑制剂、ACE-抑制剂、血管紧张素II受体拮抗体、内皮素受体拮抗体、血管扩张剂、钙拮抗剂、钾活化剂、利尿剂、交感神经阻滞剂、β-肾上腺素能拮抗剂、以及中性肽链内切酶抑制剂、d-肾上腺素能拮抗剂联合使用，以治疗上述疾病。
所有形式的导致一个包含在通式I中的活性组分的前药也包括在本发明中。
可以通过下述实施例中所给出的方法或类似方法制造通式I的化合物。
化学部分A型双环体系(流程1；Jerchel，D；等；Justus Liebigs Ann.Chem.，1957，607，126；Zirkle，C.L.；et al.；J.Org.Chem.，1961，26，395)可用作起始原料。经立体选择的或消旋的烷基化(Majewski，M；等；J.Org.Chem.，1995，60，5825)可得到B型双环化合物。Rc通常可以是甲基、乙基或苄基取代基。然后可将这些化合物转化为相应的三氟甲磺酸乙烯酯(vinyl triflates)C，然后经碳-碳偶合，通常经Pd-复合物催化，可生成D型衍生物。Ra任选代表任何如通式I所定义的U-V化学前体。经保护基团处理可生成E型双环体系，并经标准处理比如脱保护以及Mitsunobu偶合，可生成F型双环化合物。水解该酯可形成G型化合物，然后例如经酰胺偶合生成H型化合物。如果X1是硫原子，其在该过程的几乎任何时候被氧化为亚砜或砜。然后脱保护可生成终产物。还可使用较早的专利申请中描述的化学方法，例如WO 03/093267或WO 04/002957中的方法。
流程1 式I化合物及其药学上可接受的酸加成盐可用作药物，例如为肠内给药、胃肠外给药、或局部给药的药物制剂形式。这些药物可以口服(例如为片剂、包衣片、锭剂、硬胶囊或软胶囊、溶液、乳液或悬浮液的形式)、直肠给药(例如栓剂形式)、胃肠外给药(例如为注射液或灌注液形式)、或局部给药(例如为软膏、乳剂或油类形式)。
可以以本领域熟练技术人员熟知的方式来制造药物制剂，即，通过一种已知方法方式，将所述的式I化合物及其药学上可接受的酸加成盐，任选地与其它有治疗价值的物质混合，与适当的、非毒性、惰性、治疗上相容的固体或液体载体材料，以及如果需要，常见的药品辅助剂，制成一种盖仑给药形式。
适当的载体材料不仅可以是无机载体材料，也可以是有机载体材料。因此，例如乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其盐等可被用作例如片剂、包衣片剂、锭剂、和硬胶囊的载体材料。用于软胶囊的适当的载体材料为例如植物油、蜡、脂肪以及半固体和液体多元醇(取决于活性成分的性质，然而，在软胶囊中并不需要载体)。用于该制造的溶液和糖浆适当的载体材料为例如水、多元醇、蔗糖、转化糖等等。用于注射液的适当的载体材料为例如水、醇、多元醇、甘油和植物油。用于栓剂的适当的载体材料为例如天然或硬化油类、蜡、脂肪和半-液体或液体多元醇。用于局部给药的制剂适当的载体材料为甘油酯、半-合成和合成物甘油酯、氢化油、液体蜡、液体石蜡、液体脂肪醇、甾醇、聚乙二醇和纤维素衍生物。
可以考虑将常见的稳定剂、防腐剂、湿润剂和乳化剂、稠度改善剂、气味改善剂、用于改变渗透压力的盐、缓冲剂、增溶剂、着色剂和掩蔽剂以及抗氧化剂作为药品辅助剂。
式I化合物的剂量可以在很大范围内变化并取决于所控制的疾病、患者的年龄和个体情况以及给药模式，并且在各个具体情形中应适应于个体的要求。对于成年患者而言，可接受的日剂量为约1mg～约1000mg，特别优选为约50mg～约500mg。对于儿童而言，应当根据体重和年龄调整剂量。
药品制剂适合包含大约1～500mg，优选5～200mg的式I化合物。
下述实施例用于更具体地说明本发明。但是，这些实施例并非是对本发明的范围的任何限制。
实施例缩写ACE 血管紧张素转化酶Ang 血管紧张素aq. 水溶液Boc 叔-丁氧基羰基BSA 牛血清白蛋白BuLi 正丁基锂DIPEA 二异丙基乙基胺DMAP4-N，N-二甲基氨基吡啶DMSO甲基亚砜EDCHCl 乙基-N，N-二甲基氨基丙基碳二亚胺盐酸盐EIA 酶免疫测定Et 乙基EtOAc 乙酸乙酯FC 快速层析HOBt羟基苯并三唑基LDA 二异丙基胺锂MCPBA 间-氯过苯甲酸MeOH 甲醇org.有机的PG 保护基Ph 苯基RAS 肾素血管紧张素系统RP18反相柱，填充了C18烃rt 室温sol.溶液TBDMS 叔-丁基二甲硅烷基Tf 三氟甲磺酰基
THF四氢呋喃环丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)胺的制备a)2-氯-3，N-二甲基-N-苯基异烟碱于-78℃，在2h内向2-氯-N-苯基异烟碱(Epsztajn，J.；Bieniek，A.；Plotka，M.W.；Suwald，K.，Tetrahedron，1989，45，7469，139.8g，601mmol)的THF(1L)溶液中加入BuLi(1.6M的己烷溶液，826mL，1321mmol)，同时保持反应混合物温度低于-65℃。然后于此温度搅拌该混合物30min。加入碘甲烷(123mL，1.98mol)并于-78℃搅拌该混合物1h。允许该混合物缓慢升至33℃并于此温度搅拌30min。逐滴加入水(300mL)，然后加入10％NH4OH水溶液(300mL)，该混合物经乙醚(3×300mL)萃取。合并有机相并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。经FC纯化得到淡黄色无定形物质(124.92g，80％)。
b)2-氯-3-甲基吡啶-4-醛(carbaldehyde)于-78℃，在1h内向2-氯-3，N-二甲基-N-苯基异烟碱(124.9g，479mmol)的CH2Cl2(1300mL)溶液中加入DIBAL(1M的THF溶液，719mL，719mmol)，并于此温度搅拌该混合物2h。再次加入DIBAL(1M的THF溶液，281mL，281mmol)，并于-60℃搅拌反应混合物30min。在30min内加入柠檬酸钠钾饱和水溶液(500mL)，除去冷浴，并于室温搅拌该混合物过夜。加入水(100mL)，分离有机相，水相经CH2Cl2(2×100mL)萃取。合并有机相并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。经FC纯化得到淡黄色结晶产物(58.35g，78％)。
c)(2-氯-3-甲基吡啶-4-基甲基)环丙基胺于室温下搅拌2-氯-3-甲基吡啶-4-醛(58.35g，375mmol)和环丙基胺(52.6mL，750mmol)在MeOH(800mL)中的混合物过夜。该混合物冷至0℃并逐份加入NaBH4(18.4g，488mmol)。室温搅拌该混合物过夜。加入1M NaOH(250mL)水溶液并减压除去部分溶剂。水相经EtOAc(3x)萃取。合并有机相并经饱和水溶液洗涤，MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。经FC纯化得到该化合物(54.56g，74％)，为淡黄色液体。
d)环丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)胺将(2-氯-3-甲基吡啶-4-基甲基)环丙基胺(10.0g，50.8mmol)和甲醇钠(13.73g，254mmol)在二氧六环(40mL)中的混合物加热回流48h通过硅藻土(Celite)过滤反应混合物，残留的固体经乙醚(2x)洗涤。减压除去溶剂。经FC纯化得到标题化合物(8.8g，90％)，为淡黄色液体。
{2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}环丙基胺的制备于0℃，向NaH(55％，4.97g，114mmol)的甲苯溶液中逐滴加入3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙-1-醇(20.1g，42.6mmol)。该混合物于室温搅拌1h并加入(2-氯-3-甲基吡啶-4-基甲基)-环丙基胺(16.0g，81.3mmol)。该混合物加热回流过夜并允许冷至室温。减压除去溶剂。残留物经Et2O洗涤，并经水(2x)洗涤。合并含水萃取物并重新使用Et2O(2x)萃取。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。经FC纯化得到标题化合物(7.56g，26％)，为淡黄色液体。
前体(消旋)-(1R*，5S*)-9-甲基-7-氧基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-6-羧酸甲酯(B1)氮气中，将NaH(0.91g，60％于油中，21mmol)和碳酸二甲基酯(2.18g，24mmol)在环己烷(16mL)中的混合物加热至60℃。加入9-甲基-7-氧基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷A1(1.55g，10.0mmol)，混合物搅拌回流2h。该混合物允许冷至室温并加入冰和水。分离各相，有机相经水(1x)洗涤。合并含水萃取物并用NH4Cl饱和，使用CHCl3重新萃取。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。经FC纯化得到标题化合物(1.02g，48％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-9-甲基-7-氧基-3-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-6-羧酸甲酯(B2)由二异丙胺(5.8mL，41.2mmol)、BuLi(1.6M的己烷溶液，26.2mL，42.0mmol)和THF(60mL)制备LDA。该溶液冷却至-78℃并在3分钟内逐滴加入9-甲基-3-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-7-酮A2(6.42g，37.5mmol)的THF(70mL)溶液。该反应混合物于-78℃搅拌3h，然后加入氰甲酸甲酯(3.87mL，48.9mmol)。该反应混合物于-78℃搅拌1h，加入AgNO3(9.12g，53.7mmol)的H2O/THF(1∶1，70mL)溶液。10min后，加入H2O(35mL)和AcOH(35mL)并允许该反应混合物升至室温。加入氨(25％的水溶液，120mL)。该反应混合物经CH2Cl2(2x)萃取。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，减压除去溶剂。经FC纯化得到标题化合物(7.59g，88％)。
(消旋)-(1R*，5S)-9-甲基-7-三氟甲磺酰氧基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(C1)将二环壬酮B1(4.67g，21.9mmol)的THF(100mL)溶液冷却至0℃并加入NaH(约60％在矿油中，1.13g，约26mmol)。20min后，加入Tf2NPh(10.0g，28mmol)。10min后，除去冰浴。搅拌该溶液过夜，经EtOAc稀释并经盐水洗涤(1x)。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。经FC纯化得到油状标题化合物(6.11g，81％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-9-甲基-7-三氟甲磺酰氧基-3-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(C2)将二环壬酮B2(550mg，2.40mmol)的THF(10mL)溶液冷却至0℃并加入NaN(约60％在矿油中，144mg，约3.60mmol)。观察到气体冒出。20min后，加入Tf2NPh(1.11g，3.12mmol)。10min后，除去冰浴。搅拌该溶液过夜，经EtOAc稀释并经盐水洗涤(1x)。合并有机萃取物并经MgSO4于燥，过滤，减压除去溶剂。经FC纯化得到油状标题化合物(667，77％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙基]苯基}-9-甲基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(D1)将[3-(4-溴苯基)丙氧基]-叔-丁基二甲基硅烷(Kiesewetter D.O.，Tetrahedron Asymmetry，1993，4，2183，9.88g，30.0mmol)的THF(200mL)溶液冷却至-78℃。加入BuLi(1.6M的己烷溶液，18.7mL，30.0mmol)。30min后，加入ZnCl2(1M的THF溶液，30mL，30mmol，根据于150℃干燥过夜的ZnCl2和THF制备)。允许该混合物升至室温。加入三氟甲酸乙烯酯(Vinyl triflate)C1(5.87g，17.0mmol)的THF(30mL)溶液然后加入Pd(PPh3)4(390mg，0.34mmol)。该混合物加热至40℃维持30min，加入1M HCl(1mL)水溶液。该混合物经EtOAc稀释并经1M NaOH洗涤(1x)。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(5.87g，77％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙基]苯基}-9-甲基-3-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(D2)将[3-(4-溴苯基)丙氧基]-叔-丁基二甲基硅烷(Kiesewetter D.O.，Tetrahedron Asymmetry，1993，4，2183，1.52g，4.61mmol)的THF(20mL)溶液冷却至-78℃。加入BuLi(1.6M的己烷溶液，2.88mL，4.61mmol)。30min后，加入ZnCl2(1M的THF溶液，5.00mL，5.00mmol，根据于150℃干燥过夜的ZnCl2和THF制备)。允许该混合物升至室温。加入三氟甲酸乙烯酯C2(667mg，1.85mmol)的THF(20mL)溶液然后加入Pd(PPh3)4(107mg，0.093mmol)。该混合物加热至50℃维持30min，加入1M HCl(1mL)水溶液。该混合物经EtOAc稀释并经1M NaOH洗涤(1x)。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(818mg，96％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-[4-(3-羟丙基)苯基]-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]-壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(E1)将氯甲酸1-氯乙酯(5.90g，41mmol)加至二环壬烯D1(5.72g，12.8mmol)的1，2-二氯乙烷(75mL)溶液中。该溶液加热至回流。4h后，允许反应混合物冷至室温，并减压除去溶剂。残留物经MeOH(50mL)稀释，混合物于室温搅拌20min，然后于80℃搅拌45min。减压除去溶剂，残留物经CHCl3稀释。该混合物经1MNaOH(1x)水溶液和盐水(1x)洗涤。合并含水萃取物并重新使用CHCl3(2x)萃取。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物溶解于CH2Cl2(60mL)中，加入DIPEA(3.18g，24.6mmol)，并将该混合物冷却至0℃。加入Boc2O(3.14g，14.4mmol)并于0℃搅拌该混合物1h，然后于室温搅拌2h。该混合物经1M HCl(1x)水溶液和饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(4.17g，78％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-[4-(3-羟丙基)苯基]-3-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]-壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(E2)
将氯甲酸1-氯乙酯(1.93mL，17.7mmol)加至二环壬烯D2(818mg，1.77mmol)和NaHCO3(1.49g，17.7mmol)的1，2-二氯乙烷(20mL)溶液中。该溶液加热至回流。3h后，允许反应混合物冷至室温，过滤，并减压彻底除去溶剂。加入甲醇(20mL)并于60℃搅拌该混合物20min。允许该混合物冷至室温并减压除去溶剂。残留物溶解于CH2Cl2(20mL)中，加入DIPEA(1.82mL，10.6mmo])并将该混合物冷至0℃。加入Boc2O(1.16g，5.31mmol)并于0℃搅拌该混合物30min，然后于室温搅拌30min。该混合物经1M HCl(1x)水溶液和饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(586mg，76％)。
(消旋)-(1R，5S*)-7-[4-(2-羟乙基)苯基]-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(E3)将化合物E2(586mg，1.35mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液冷却至0℃并再次加入3-氯过苯甲酸(70％，359mg，2.97mmol)。再次搅拌该混合物2h并使用较多的CH2Cl2稀释。该混合物经饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(578mg，92％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-[4-(2-羟乙基)苯基]-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(E4)将化合物E2(0.82g，1.89mmol)的CH2Cl2(21mL)溶液冷却至0℃并加入MCPBA(70％，233mg，0.945mmol)。该混合物于0℃搅拌15min。再次加入MCPBA(197mg，0.880mmol)。该混合物于室温搅拌15并使用较多的CH2Cl2稀释。该混合物经饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(1.51g，，89％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(F1)将三丁基膦(7.05g，30.0mmol)加至二环壬烯E2(4.04g，9.7mmol)、2-氯-3，6-二氟苯酚(2.89g，17.5mmol)和偶氮二羧基二哌啶(azodicarboxylicdipiperidide)(7.05g，30.0mmol)的甲苯(80mL)溶液中。该混合物加热回流2h并允许冷却至室温。减压除去溶剂。经FC纯化得到标题化合物(4.60g，84％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(F2)将三丁基膦(85％，1.08mL，3.72mmol)加至二环壬烯E3(578mg，1.24mmol)、2-氯-3，6-二氟苯酚(407mg，2.48mmol)和氮杂二羧基二哌啶(626mg，2.48mmol)的甲苯(10mL)溶液中。该混合物加热回流2h并允许冷却至室温。减压除去溶剂。经FC纯化得到标题化合物(668mg，88％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(F3)将三丁基膦(85％，3.30mL，11.3mmol)加至二环壬烯E4(1.70mg，3.78mmol)、2-氯-3，6-二氟苯酚(930mg，5.67mmo)和氮杂二羧基二哌啶(1.90g，7.26mmol)的甲苯(45mL)溶液中。该混合物加热回流1h并允许冷却至室温。减压除去溶剂。经FC纯化得到标题化合物(1.94g，86％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯(G1)将双环壬烯F1(4.60g，25mmol)溶解于中EtOH(200mL)。加入1M NaOH(200mL)水溶液并将该混合物加热至80℃。于80℃搅拌该溶液5h，然后允许冷却至室温。使用1M HCl水溶液酸化至pH＝1-2后，该混合物经EtOAc(3x)萃取。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(4.50g，定量的)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-叔丁酯(G2)将双环壬烯F2(668mg，1.09mmol)溶解于中EtOH(7mL)。加入1M NaOH(3mL)水溶液并将该混合物加热至80℃。于80℃搅拌该溶液5h，然后允许冷却至室温。使用1M HCl水溶液酸化至pH＝1-2后，该混合物经EtOAc(3x)萃取。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物无需进一步纯化而使用(624mg，96％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸9-叔-丁酯(G3)将双环壬烯F3(1.94g，3.25mmol)溶解于中EtOH(24mL)。加入1M NaOH(10mL)水溶液并将该混合物加热至80℃。于80℃搅拌该溶液1h，然后允许冷却至室温。使用1M HCl水溶液酸化至pH＝1-2后，该混合物经EtOAc(3x)萃取。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物无需进一步纯化而使用(1.86g，98％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-6-[环丙基-(3-甲氧基-2-甲基苄基)氨基甲酰基]-3-氧杂-9-氮杂双环-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H1)室温搅拌双环壬烯G1(360mg，2.0mmol)、环丙基-(3-甲氧基-2-甲基苄基)胺(根据3-甲氧基-2-甲基苯甲醛，Comins，D.L.；Brown，J.D.，J.Org.Chem.，1989，54，3730，和环丙基胺还原胺化制备；1.05g，6.00mmol)、DIPEA(1.37mL，8.00mmol)、DMAP(61mg，0.50mmol)、HOBt(149mg，1.10mmol)和EDC·HCl(1.19g，6.00mmol)在CH2Cl2(10mL)中的混合物3天。该混合物经较多的CH2Cl2稀释并经1M HCl(3x)水溶液和饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(260mg，55％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-6-[环丙基-(2，3-二氯苄基)氨基甲酰基]-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(H2)室温搅拌双环壬烯G2(624mg，1.04mmol)、环丙基-(2，3-二氯-苄基)胺(676mg，3.13mmol)、DIPEA(0.712mL，4.16mmol)、DMAP(32mg，0.25mmol)、HOBt(169mg，1.25mmol)和EDC·HCl(498mg，2.60mmol)在CH2Cl2(10mL)中的混合物过夜。该混合物经较多的CH2Cl2稀释并经1M HCl(3x)水溶液和饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-6-[环丙基-(3-甲氧基-2-甲基苄基)氨基甲酰基]-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H3)室温搅拌双环壬烯G3(150mg，0.257mmol)，环丙基-(3-甲氧基-2-甲基苄基)胺(根据3-甲氧基-2-甲基苯甲醛，Comins，D.L.；Brown，J.D.，J.Org.Chem.，1989，54，3730，和环丙基胺还原胺化制备；148mg，0.771mmol)、DIPEA(0.180mL，1.02mmol)、DMAP(8mg，0.06mmol)、HOBt(52mg，0.38mmol)和EDC·HCl(123mg，0.642mmol)中CH2Cl2(10mL)的混合物2天。该混合物经较多的CH2Cl2稀释并经1M HCl(3x)水溶液和饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(183mg，94％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-6-[环丙基-(3-甲氧基-2-甲基吡啶-4-基甲基)氨基甲酰基]-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H4)室温搅拌双环壬烯G3(150mg，0.257mmol)、环丙基-(3-甲氧基-2-甲基吡啶-4-基甲基)胺(149mg，0.773mmol)、DIPEA(0.180mL，1.02mmol)、DMAP(8mg，0.06mmol)、HOBt(52mg，0.38mmol)和EDC·HCl(123mg，0.642mmol)在CH2Cl2(10mL)中的混合物2天。该混合物经较多的CH2Cl2稀释并经1M HCl(3x)水溶液和饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(180mg，93％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-6-({2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基吡啶-4-基甲基}环丙基氨基甲酰基)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂双环-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H5)
室温搅拌双环壬烯G1(2.05g，3.72mmol)、{2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)内氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}环丙基-胺(1.96，5.59mmol)、DIPEA(2.55mL，14.9mmo])、DMAP(114mg，0.93mmol)、HOBt(757mg，5.59mmol)和EDC·HCl(2.51g，13mmol)在CH2Cl2(50mL)中的混合物过夜。该混合物经较多的CH2Cl2稀释并经1M HCl(3x)水溶液和饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(3.00g，91％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-6-({2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基吡啶-4-基甲基}环丙基氨基甲酰基)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H6)室温搅拌双环壬烯G2(2.23g，3.72mmol)、2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}环丙基-胺(1.96，5.59mmol)、DIPEA(2.55mL，14.9mmol)、DMAP(114mg，0.93mmol)、HOBt(757mg，5.59mmol)和EDC·HCl(2.51g，13mmol)在CH2Cl2(50mL)中的混合物过夜。该混合物经较多的CH2Cl2稀释并经1M HCl(3x)水溶液和饱和NaHCO3(1x)水溶液洗涤。合并有机萃取物并经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物(2.16g，62％)。
实施例实施例1(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(3-甲氧基-2-甲基苄基)酰胺双环壬烯H1经CH2Cl2(10mL)稀释并将该混合物冷却至0℃。加入HCl(4M的二氧六环溶液，10mL)并于0℃搅拌该混合物1h，然后室温搅拌1h。减压除去溶剂并在高度真空下干燥残留物。该残留物经CH2Cl2稀释并经1M NaOH水溶液洗涤直至有机相pH＞9。有机萃取物经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物。
实施例2(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(2，3-二氯苄基)酰胺双环壬烯H2经CH2Cl2(10mL)稀释并将该混合物冷却至0℃。加入HCl(4M的二氧六环溶液，10mL)并于0℃搅拌该混合物1h，然后室温搅拌1h。减压除去溶剂并在高度真空下干燥残留物。该残留物经CH2Cl2稀释并经1M NaOH水溶液洗涤直至有机相pH＞9。有机萃取物经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物。
实施例3(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(3-甲氧基-2-甲基苄基)酰胺双环壬烯H3经CH2Cl2(10mL)稀释并将该混合物冷却至0℃。加入HCl(4M的二氧六环溶液，10mL)并于0℃搅拌该混合物1h，然后室温搅拌1h。减压除去溶剂并在高度真空下干燥残留物。该残留物经CH2Cl2稀释并经1M NaOH水溶液洗涤直至有机相pH＞9。有机萃取物经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物。
实施例4(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)酰胺双环壬烯H4经CH2Cl2(10mL)稀释并将该混合物冷却至0℃。加入HCl(4M的二氧六环溶液，10mL)并于0℃搅拌该混合物1h，然后室温搅拌1h。减压除去溶剂并在高度真空下干燥残留物。该残留物经CH2Cl2稀释并经1M NaOH水溶液洗涤直至有机相pH＞9。有机萃取物经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物。
实施例5(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺双环壬烯H5(2.16g，2.32mmol)经CH2Cl2(10mL)稀释并将该混合物冷却至0℃。加入HCl(4M的二氧六环溶液，10mL)并于0℃搅拌该混合物1h，然后室温搅拌1h。减压除去溶剂并在高度真空下干燥残留物。该残留物经CH2Cl2稀释并经1M NaOH水溶液洗涤直至有机相pH＞9。有机萃取物经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物。
实施例6(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-36-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺双环壬烯H6(2.16g，2.22mmol)经CH2Cl2(10mL)稀释并将该混合物冷却至0℃。加入HCl(4M的二氧六环溶液，10mL)并于0℃搅拌该混合物1h，然后室温搅拌1h。减压除去溶剂并在高度真空下干燥残留物。该残留物经CH2Cl2稀释并经1M NaOH水溶液洗涤直至有机相pH＞9。有机萃取物经MgSO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残留物经FC纯化得到标题化合物。
本发明化合物对于人重组肾素的抑制在384-孔聚丙烯板(Nunc)中进行体外酶促测定。测定缓冲液由包含1mM EDTA和0.1％BSA的10mM PBS(Gibco BRL)组成。孵化物由50μL每孔的酶混合物和2.5μL肾素抑制剂的DMSO溶液组成。该酶混合物于4℃预混合并由下面成分组成·人重组肾素(0.16ng/mL)·合成的人血管紧张素(1-14)(0.5μM)·羟基喹啉硫酸盐(1mM)然后于37℃孵化该混合物3h。
为了测定酶促活性及其抑制作用，在384-孔板(Nunc)中通过酶免疫测定(EIA)检测累积的Ang I。将5μL孵化物或标准品转移到免疫板中，该板上预先涂布有Ang I和牛血清清蛋白的共价配合物(Ang I-BSA)。加入包含0.01％ Tween 20的75μL Ang I-抗体的上述试验缓冲液，并且在4℃下培育初步孵化一整夜。使用包含0.01％ Tween 20的PBS洗涤免疫板3次，然后使用抗兔-过氧化物酶偶联抗体(WA 934，Amersham)在室温下孵化2小时。水洗3次后，加入过氧化物酶底物ABTS(2.2’-连氮基-二-(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸酯)，并在室温下孵化该板60分钟。使用pH为4.3的0.1M柠檬酸终止反应后，在微板读数器中于405nm处评价该板。计算各浓度点的抑制百分比并且测定在酶活性被抑制50％(IC50)时的肾素抑制浓度。所测定的所有化合物的IC50-值都低于100nM。所选择的混合物显示出非常良好的生物利用度并且比现有技术的化合物在代谢上更稳定。
权利要求
1.通式I化合物 通式I其中X代表-O-；-S-；-SO-；-SO2-；W是六元的、非苯并稠合的、苯环或杂芳环、在间位或对位被V取代；V代表键、-(CH2)r-、-A-(CH2)s-、-CH2-A-(CH2)t-、-(CH2)s-A-、-(CH2)2-A-(CH2)u-、-A-(CH2)v-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-A-CH2-CH2-B-、-O-CH2-CH(OCH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CF3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-O-、-O-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-O-、-O-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH2CH2)-O-、或-O-C(CH2CH2)-CH2-O-；A和B独立代表-O-、-S-、-SO-、-SO2-；U代表芳基、杂芳基；T代表-CONR1-、-(CH2)pOCO-、-(CH2)pN(R1)CO-、-(CH2)pN(R1)SO2-或-COO-；Q代表低级亚烷基、低级亚烯基；M代表氢、环烷基、芳基、杂环基、杂芳基；R1代表氢、低级烷基、低级链烯基、低级炔基、环烷基、芳基、环烷基-低级烷基；p为整数1、2、3或4；r为整数3、4、5或6；s为整数2、3、4或5；t为整数1、2、3或4；u为整数1、2或3；v为整数2、3或4；以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
2.根据权利要求1的化合物，其中X、W、V和U如通式I定义，且T代表-CONR1-；Q代表亚甲基；M代表芳基、杂芳基；以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
3.根据权利要求1的化合物，其中X、W、U、T、Q和M如通式I定义，且V代表-CH2CH2O-、-CH2CH2CH2O-、-OCH2CH2O-；以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
4.根据权利要求1的化合物，其中X、V、U、T、Q和M如通式I定义，且W代表1，4-二取代的苯基；以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
5.根据权利要求1的化合物，其中X、W、V、Q、T和M如通式I定义，且U是单-、二-和三取代的苯基或杂芳基，其中取代基为卤素、低级烷基、低级烷氧基、CF3以及光学纯的对映体、对映体的混合物例如消旋物、非对映体、非对映体的混合物、非对映的消旋物、非对映消旋物的混合物、和该内消旋型、和药学上可接受的盐、溶剂配合物和晶体形式。
6.根据权利要求1至5任一项的化合物，选自下述化合物(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(3-甲氧基-2-甲基-苄基)酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(2，3-二氯苄基)酰胺，(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(3-甲氧基-2-甲基苄基)酰胺，(消旋)-(1R* ，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基-丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，和(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸环丙基-[2-(3-羟基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺。
7.一种药物组合物，其包含至少一种如权利要求1至6任一项所述化合物以及常见的载体材料和辅助剂，并用于治疗或预防与肾素-血管紧张素系统(RAS)的调节障碍相关的紊乱，所述的紊乱包括心血管疾病和肾病、高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、心功能不全、肾功能不全、肾或心肌缺血、动脉粥样硬化、肾衰竭、勃起功能障碍、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼、糖尿病性并发症、血管或心脏术后并发症、再狭窄、器官移植后使用免疫抑制剂治疗引起的并发症、以及其它目前已知的与RAS相关疾病。
8.一种用于预防或治疗与RAS相关疾病的方法，其中所述疾病包括高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、心功能不全、肾功能不全、肾或心肌缺血、动脉粥样硬化、肾衰竭、勃起功能障碍、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼、糖尿病性并发症、血管或心脏术后并发症、再狭窄、器官移植后使用免疫抑制剂治疗引起的并发症、以及其它目前已知的与RAS相关疾病，该方法包括给人或动物服用一种权利要求1至6任一项所述的化合物。
9.权利要求1至6任一项所述的化合物用于治疗或预防与RAS相关疾病的用途，所述疾病包括高血压、充血性心力衰竭、肺性高血压症、心功能不全、肾功能不全、肾或心肌缺血、动脉粥样硬化、肾衰竭、勃起功能障碍、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼、糖尿病性并发症、血管或心脏术后并发症、再狭窄、器官移植后使用免疫抑制剂治疗引起的并发症、以及其它目前已知的与RAS相关疾病。
10.如权利要求1至6任一项所述化合物与一种或多种其它药理学活性物质相联合以治疗如权利要求7至9所述疾病的用途，所述药理学活性物质包括ACE-抑制剂、血管紧张素II受体拮抗体、内皮素受体拮抗体、血管扩张剂、钙拮抗剂、钾活化剂、利尿剂、交感神经阻滞剂、β-肾上腺素能拮抗剂、α-肾上腺素能拮抗剂、以及中性肽链内切酶抑制剂。
全文摘要
本发明涉及新型9－氮杂双环[3.3.1]壬烯衍生物及其相关化合物以及它们作为活性成分在制备药物组合物中的用途。本发明还涉及这些化合物制备方法、包含一种或多种所述化合物的药物组合物，并特别涉及它们作为肾素抑制剂的用途。
文档编号C07D513/08GK1780663SQ200480011637
公开日2006年5月31日 申请日期2004年4月26日 优先权日2003年4月30日
发明者奥利维尔·贝曾康, 丹尼尔·比尔, 瓦尔特·菲施利, 尤博斯·雷门, 西尔维娅·理查德-比洛斯泰恩, 托马斯·韦勒, 蒂埃里·西费朗 申请人:埃科特莱茵药品有限公司