具有血管生成抑制活性的取代的吡啶和哒嗪的制作方法

专利名称：具有血管生成抑制活性的取代的吡啶和哒嗪的制作方法
技术领域：
本申请涉及小分子杂环药物，更具体来说，涉及具有血管生成抑制活性的取代的吡啶和哒嗪。
背景技术：
血管发生涉及由内皮细胞前体或成血管细胞重新形成血管。胚胎中的第一个血管结构是通过血管发生形成的。血管生成涉及从现存的血管发展毛细血管，并且是器官例如脑和肾形成血管的主要机制。虽然血管发生局限于胚胎发育，但是血管生成可在成人中发生，例如在妊娠、女性周期、或伤口愈合期间发生。
在胚胎发育和某些血管生成依赖性疾病中，血管生成和血管发生的主要调质是血管内皮生长因子(VEGF；还称为血管渗透因子，VPF)。VEGF代表一族由可变RNA剪接产生、并以同源二聚体形式存在的促细胞分裂原同种型。VEGF KDR受体对于血管内皮细胞有高度特异性(关于综述参见Farrara等人.Endocr.Rev.1992，13，18；Neufield等人.FASEB J.1999，13，9)。
VEGF表达是由低氧(Shweiki等人.Nature 1992，359，843)以及多种不同的细胞因子和生长因子例如白介素-1、白介素-6、表皮生长因子和转化生长因子-α与-β诱导的。
迄今为止，已有报道，VEGF和VEGF族成员能结合三种跨膜受体酪氨酸激酶中的一种或多种(Mustonen等人.J.Cell.Biol.，1995，129，895)、VEGF受体-1(还称为flt-1(fms-样酪氨酸激酶-1))；VEGFR-2(还称为含有激酶插入结构域的受体(KDR)，称为胎肝激酶-1(flk-1)的KDR的鼠类似物)；和VEGFR-3(还称为flt-4)。据表明KDR和flt-1具有不同的信号传导特征(Waltenberger等人.J.Biol.Chem.1994，269，26988；Park等人.Oncogene 1995，10，135)。因此，在完整细胞中KDR经受强的配体依赖性酪氨酸磷酸化，而flt-1表现出弱的反应。因此，对于诱导完全范围的VEGF-介导的生物反应来说，与KDR结合是必须的。
在体内，VEGF在血管发生中起着关键作用，并诱导血管生成和血管渗透。失控的VEGF表达将导致特征是异常血管生成和/或高渗透过程的多种疾病。因此，控制VEGF-介导的信号传导级联将提供有用的控制异常血管生成和/或高渗透过程的方法。
血管生成被认为是超过约1-2mm的肿瘤生长的绝对必备条件。在小于该限度的肿瘤中，氧和营养物可通过扩散供给细胞。然而，当达到一定尺寸时，每个肿瘤为了继续生长都要依赖血管生成。在低氧区域内的肿瘤发生细胞通过刺激VEGF生成而起反应，这引发静息内皮细胞的激活来刺激新的血管形成(Shweiki等人.Proc.Nat’l.Acad.Sci.，1995，92，768)。此外，在没有任何血管生成的肿瘤区域中的VEGF生成可通过ras信号传导途径来进行(Grugel等人.J.Biol.Chem.，1995，270，25915；Rak等人.Cancer Res.1995，55，4575)。原位杂交实验已证实了在多种人肿瘤中VEGF mRNA被严重地上调，这些肿瘤包括肺癌(Mattern等人.Br.J.Cancer 1996，73，931)、甲状腺癌(Viglietto等人.Oncogene 1995，11，1569)、乳腺癌(Brown等人.Human Pathol.1995，26，86)、胃肠道癌(Brown等人.Cancer Res.1993，53，4727；Suzuki等人.Cancer Res.1996，56，3004)、肾和膀胱癌(Brown等人.Am.J.Pathol.1993，1431，1255)、卵巢癌(Olson等人.Cancer Res.1994，54，1255)、和子宫颈癌(Guidi等人.J.Nat’l Cancer Inst.1995，87，12137)，以及血管肉瘤(Hashimoto等人.Lab.Invest.1995，73，859)和几种颅内肿瘤(Plate等人.Nature 1992，359，845；Philllips等人.Int.J.Oncol.1993，2，913；Berkman等人.J.Clin.Invest.，1993，91，153)。据表明，中和KDR的单克隆抗体能有效地阻断肿瘤血管生成(Kim等人.Nature 1993，362，841；Rockwell等人.Mol.Cell.Differ.1995，3，315)。
过度表达VEGF，例如在极度低氧条件下过度表达VEGF可导致眼睛内血管生成，导致血管过度增殖，最终导致失明。已经在多种视网膜病中观察到了一系列这样的事件，包括糖尿病性视网膜病、缺血性视网膜-静脉堵塞、早熟性视网膜病(Aiello等人.New Engl.J.Med.1994，331，1480；Peer等人.Lab.Invest.1995，72，638)、和老年黄斑变性(AMD；参见Lopez等人.Invest.Opththalmol.vis.Sci.1996，37，855)。
在类风湿性关节炎(RA)中，血管翳的生长可通过产生血管生成因子来介导。在RA患者的滑液中，免疫反应性VEGF的水平很高，而在患有其它形式的伴有退化性关节病的关节炎的患者的滑液中，VEGF水平很低(Koch等人.J.Immunol.1994，152，4149)。据表明，在大鼠胶原关节炎模型中，血管生成抑制剂AGM-170能预防关节的新血管形成(Peacock等人.J.Exper.Med.1992，175，1135)。
在患牛皮癣的皮肤，以及与表皮下水疱形成有关的大疱性疾病例如大疱性类天疱疮、多形性红斑、疱疹样皮炎中也发现了VEGF表达增加(Brown等人.J.Invest.Dermatol.1995，104，744)。
因为抑制KDR信号传导将导致抑制VEGF-介导的血管生成和渗透性，KDR抑制剂可用于治疗特征是异常血管生成和/或高渗透过程的疾病，包括上述疾病。
在结构上类似于本申请化合物的酞嗪和其它稠合哒嗪的实例公开在下列专利或专利申请中WO 9835958(Novartis)、US 5849741、US 3753988、US 3478028和JP 03106875。涉及酞嗪的其它文献有El-Feky，S.A.，Bayoumy，B.E.，和Abd El-Sami，Z.K.，Egypt.J.Chem.(1991)，Volume Data 1990，33(2)，189-197；Duhault，J.，Gonnard，P.，和Fenard，S.，Bull.Soc.Chim.Biol.，(1967)，49(2)，177-190；和Holava，H.M.和Jr，Partyka，R.A.，J.Med.Chem.，(1969)，12，555-556。本发明化合物与在上述各篇文献中描述的化合物不同，并且只有Novartis出版物描述了用作血管生成抑制剂的这样的化合物。
如上所述，抑制血管生成的化合物在多种不同病症的治疗中有应用价值，并因此是可取的。这样的物质是本发明主题。

发明内容
在其最广的方面，本发明涉及三组化合物、或其可药用盐或前药，其中每组化合物与其它组化合物在范围上有重叠。在每组化合物中，化合物的通式是相同的，但是应当注意，在每组中构成一般结构的几个基团的定义多少有些不同。因此，确定的各组化合物彼此不同，但是在其范围上有重叠。
第一组化合物具有如下所示的通式
其中R1和R2一起形成含有两个T2和一个T3的桥基，所述桥基与其所连接的环一起形成下列结构所示的二环 或 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG1；T3代表S、O、CR4G1、C(R4)2、或NR3。
在上述结构中，G1是独立地选自下列的取代基-N(R6)2；-NR3COR6；卤素；烷基；环烷基；低级链烯基；低级环烯基；卤素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低级烷基氨基取代的烷基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基；羟基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基；卤素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基氨基；羟基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；卤代低级烷氧基；卤代低级烷硫基；卤代低级烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的饱和杂环基；任选取代的饱和杂环基烷基；任选取代的部分不饱和杂环基；任选取代的部分不饱和杂环基烷基；-OCO2R3；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；和-NR3CON(R6)2。
基团R3是H或低级烷基。R6独立地选自H；烷基；环烷基；任选取代的芳基；任选取代的芳基低级烷基；低级烷基-N(R3)2；和低级烷基-OH。
在通式(I)中，R4是H、卤素、或低级烷基。下标p是0、1、或2；且X选自O、S、和NR3。
连接基团Y选自低级亚烷基；-CH2-O-；-CH2-S-；-CH2-NH-；-O-；-S-；-NH-；-O-CH2-；-S(O)-；-S(O)2-；-SCH2-；-S(O)CH2-；-S(O)2CH2-；-CH2S(O)-；-CH2S(O)2-；-(CR42)n-S(O)p-(5-元杂芳基)-(CR42)s-；和-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-。在后两个连接基团Y中，n和s分别独立地为0或1-2的整数。取代基G2选自-CN、-CO2R3、-CON(R6)2、和-CH2N(R6)2。
Z代表CR4或N。
对于含有A、B、D、E、和L的环，环上可能的取代基G3的数目由下标q指示，q是0、1或2。
取代基G3是选自下列的单价或二价基团低级烷基；-NR3COR6；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CH2OR3；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；-NO2；-CN；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的饱和杂环基；任选取代的部分不饱和杂环基；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和结构T2＝T2-T3二价桥基。在该二价桥基中，每个T2独立地代表N、CH、或CG3′；且T3代表S、O、CR4G3′、C(R4)2、或NR3。G3′代表任意上述定义的单价G3；且桥基的末端T2与L连接，T3与D连接，由此形成5-元稠合环。
在通式(I)中左侧所示的环中，A和D独立地代表N或CH；B和E独立地代表N或CH；且L代表N或CH；条件是a)在含有A、B、D、E、和L的环中，N原子的总数目是0、1、2或3；b)当L代表CH，且q＝0或任何G3是单价取代基时，A和D当中至少有一个是N原子；和c)当L代表CH，且G3是结构T2＝T2-T3二价桥基时，则A、B、D和E也是CH。
J是选自芳基；吡啶基；和环烷基的环。下标q′代表环J上的取代基G4的数目，并且是0、1、2、3、4、或5。
环J上的可能的取代基G4是选自下列的单价或二价基团-N(R6)2；-NR3COR6；卤素；烷基；环烷基；低级链烯基；低级环烯基；卤素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低级烷基氨基取代的烷基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基；羟基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基；卤素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基氨基；羟基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；卤代低级烷氧基；卤代低级烷硫基；卤代低级烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的饱和杂环基；任选取代的部分不饱和杂环基；-OCO2R3，任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和连接于并连接环J相邻位置的形成稠合环的二价桥基，所述桥基具有下列结构 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG4′；T3代表S、O、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定义的单价G4；并且是经由末端原子T2和T3与环J连接；
其中每个T2独立地代表N、CH、或CG4′；G4′代表任意上述定义的单价G4；条件是最多有两个桥原子T2可以是N；并且是经由末端原子T2与环J连接；和 或 其中每个T4、T5、和T6独立地代表O、S、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定义的单价G4；并且是经由末端原子T4或T5与环J连接；条件是i)当一个T4是O、S、或NR3时，另一个T4是CR4G4′或C(R4)2；ii)包含T5和T6原子的桥基团最多可含有两个杂原子O、S、或N；和iii)在包含T5和T6原子的桥基团中，当一个T5和一个T6是O原子，或者两个T6是O原子时，所述O原子被至少一个碳原子分隔。
当G4是位于环J上与连接基团-(CR42)p-相邻的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基时，则G4和X上的烷基取代基R3可以连接形成结构-(CH2)p′-桥基，其中p′是2、3、或4，条件是p和p′之和是2、3、或4，从而形成5、6、或7元含氮环。
另外的条件是1)在G1、G2、G3、和G4中，当两个基团R3或R6分别是烷基，并且位于相同N原子上时，它们可通过一个键、O、S、或NR3连接以形成具有5-7个环原子的含氮杂环；和2)当芳基、杂芳基、或杂环基环任选被取代时，该环可携带最高达5个独立地选自下列的取代基氨基、一低级烷基取代的氨基、二低级烷基取代的氨基、低级链烷酰基氨基、卤素、低级烷基、卤代低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基、卤代低级烷氧基、卤代低级烷硫基、低级链烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巯基、磺基、和氰基；和3)当任何烷基连接到O、S、或N上，并携带羟基取代基时，则所述羟基取代基与烷基所连接的O、S、或N被至少两个碳原子分隔开。
第二组化合物具有如下所示的通式
其中R1和R2i)独立地代表H或低级烷基；ii)一起形成下述结构所示的桥基 其中连接是经由末端碳原子实现的；iii)一起形成下述结构所示的桥基 其中连接是经由末端碳原子实现的；iv)一起形成下述结构所示的桥基 其中一个或两个环单元T1是N，并且其它环单元是CH或CG1，且连接是经由末端原子实现的；或v)一起形成含有两个T2和一个T3的桥基，所述桥基与其所连接的环一起形成下列结构所示的二环
或 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG1；T3代表S、O、CR4G1、C(R4)2、或NR3。
在上述桥结构中，下标m是0或1-4的整数；这意味着所形成的稠合环可任选携带最高达4个取代基G1。
G1是独立地选自下列的取代基-N(R6)2；-NR3COR6；卤素；烷基；环烷基；低级链烯基；低级环烯基；卤素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低级烷基氨基取代的烷基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基；羟基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基；卤素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基氨基；羟基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；卤代低级烷氧基；卤代低级烷硫基；卤代低级烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的饱和杂环基；任选取代的饱和杂环基烷基；任选取代的部分不饱和杂环基；任选取代的部分不饱和杂环基烷基；-OCO2R3；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；和-NR3CON(R6)2。
基团R3是H或低级烷基。R6独立地选自H；烷基；环烷基；任选取代的芳基；任选取代的芳基低级烷基；低级烷基-N(R3)2；和低级烷基-OH。
在通式(I)中，R4是H、卤素、或低级烷基；下标p是0、1、或2；且X选自O、S、和NR3。
连接基团Y选自低级亚烷基；-CH2-O-；-CH2-S-；-CH2-NH-；-O-；-S-；-NH-；-O-CH2-；-S(O)-；-S(O)2-；-SCH2-；-S(O)CH2-；-S(O)2CH2-；-CH2S(O)-；-CH2S(O)2-；-(CR42)n-S(O)p-(5-元杂芳基)-(CR42)s-；和-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-。在后两个连接基团Y中，n和s分别独立地为O或1-2的整数。G2选自-CN、-CO2R3、-CON(R6)2、和-CH2N(R6)2。
Z代表N或CR4。
对于含有A、B、D、E、和L的环，环上可能的取代基G3的数目由下标q指示，q是1或2。
取代基G3是选自下列的单价或二价基团低级烷基；-NR3COR6；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CH2OR3；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；-NO2；-CN；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的饱和杂环基；任选取代的部分不饱和杂环基；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和结构T2＝T2-T3二价桥基。在该二价桥基中，每个T2独立地代表N、CH、或CG3′；且T3代表S、O、CR4G3′、C(R4)2、或NR3。G3′代表任意上述定义的单价G3；且桥基的末端T2与L连接，T3与D连接，由此形成5-元稠合环。
在通式(I)中左侧所示的环中，A和D独立地代表CH；B和E独立地代表CH；且L是CH；条件是形成的苯环携带所述结构T2＝T2-T3二价桥基作为G3取代基。
J是选自芳基；吡啶基；和环烷基的环。下标q′代表环J上的取代基G4的数目，并且是0、1、2、3、4、或5。
G4是选自下列的单价或二价基团-N(R6)2；-NR3COR6；卤素；烷基；环烷基；低级链烯基；低级环烯基；卤素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低级烷基氨基取代的烷基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基；羟基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基；卤素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基氨基；羟基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；卤代低级烷氧基；卤代低级烷硫基；卤代低级烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的饱和杂环基；任选取代的部分不饱和杂环基；-OCO2R3；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和连接于并连接环J相邻位置的形成稠合环的二价桥基，所述桥基具有下列结构 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG4′；T3代表S、O、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定义的单价G4；并且是经由末端原子T2和T3与环J连接； 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG4′；G4′代表任意上述定义的单价G4；条件是最多有两个桥原子T2可以是N；并且是经由末端原子T2与环J连接；和 或 其中每个T4、T5、和T6独立地代表O、S、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定义的单价G4；并且是经由末端原子T4或T5与环J连接；
条件是i)当一个T4是O、S、或NR3时，另一个T4是CR4G4′或C(R4)2；ii)包含T5和T6原子的桥基团可含有最多两个杂原子O、S、或N；和iii)在包含T5和T6原子的桥基团中，当一个T5和一个T6是O原子，或者两个T6是O原子时，所述O原子被至少一个碳原子分隔。
当G4是位于环J上与连接基团-(CR42)p-相邻的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基时，则G4和X上的烷基取代基R3可以连接形成结构-(CH2)p′-桥基，其中p′是2、3、或4，条件是p和p′之和是2、3、或4，从而形成5、6、或7元含氮环。
另外的条件是1)在G1、G2、G3、和G4中，当两个基团R3或R6分别是烷基，并且位于相同N原子上时，它们可通过一个键、O、S、或NR3连接以形成具有5-7个环原子的含氮杂环；和2)当芳基、杂芳基、或杂环基环任选被取代时，该环可携带最高达5个独立地选自下列的取代基氨基、一低级烷基取代的氨基、二低级烷基取代的氨基、低级链烷酰基氨基、卤素、低级烷基、卤代低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基、卤代低级烷氧基、卤代低级烷硫基、低级链烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巯基、磺基、和氰基；和3)当任何烷基连接到O、S、或N上，并携带羟基取代基时，则所述羟基取代基与烷基所连接的O、S、或N被至少两个碳原子分隔开。
第三组化合物具有如下所示的通式 其中R1和R2i)独立地代表H或低级烷基；ii)一起形成下述结构所示的桥基
其中连接是经由末端碳原子实现的；iii)一起形成下述结构所示的桥基 其中连接是经由末端碳原子实现的；iv)一起形成下述结构所示的桥基 其中一个或两个环单元T1是N，并且其它环单元是CH或CG1，且连接是经由末端原子实现的；或v)一起形成含有两个T2和一个T3的桥基，所述桥基与其所连接的环一起形成下列结构所示的二环 或 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG1；T3代表S、O、CR4G1、C(R4)2、或NR3。
在上述桥结构中，下标m是0或1-4的整数；这意味着所形成的稠合环可任选携带最高达4个取代基G1。
G1是独立地选自下列的取代基-N(R6)2；-NR3COR6；卤素；烷基；环烷基；低级链烯基；低级环烯基；卤素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低级烷基氨基取代的烷基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基；N-低级键烷酰基氨基取代的烷基；羟基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基；卤素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基氨基；羟基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；卤代低级烷氧基；卤代低级烷硫基；卤代低级烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的饱和杂环基；任选取代的饱和杂环基烷基；任选取代的部分不饱和杂环基；任选取代的部分不饱和杂环基烷基；-OCO2R3；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；和-NR3CON(R6)2。
基团R3是H或低级烷基。R6独立地选自H；烷基；环烷基；任选取代的芳基；任选取代的芳基低级烷基；低级烷基-N(R3)2；和低级烷基-OH。
在通式(I)中，R4是H、卤素、或低级烷基；下标p是0、1、或2；且X选自O、S、和NR3。
连接基团Y选自低级亚烷基；-CH2-O-；-CH2-S-；-CH2-NH-；-O-；-S-；-NH-；-O-CH2-；-S(O)-；-S(O)2-；-SCH2-；-S(O)CH2-；-S(O)2CH2-；-CH2S(O)-；-CH2S(O)2-；-(CR42)n-S(O)p-(5-元杂芳基)-(CR42)s-；和-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-。在后两个连接基团Y中，n和s分别独立地为0或1-2的整数。G2选自-CN、-CO2R3、-CON(R6)2、和-CH2N(R6)2。
Z代表CR4。
对于含有A、B、D、E、和L的环，环上可能的取代基G3的数目由下标q指示，q是1或2。
取代基G3是选自下列的单价或二价基团-NR3COR6；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CH2OR3；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；-NO2；-CN；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的饱和杂环基；任选取代的部分不饱和杂环基；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和结构T2＝T2-T3二价桥基。在该二价桥基中，每个T2独立地代表N、CH、或CG3′；且T3代表S、O、CR4G3′、C(R4)2、或NR3。G3′代表任意上述定义的单价G3；且桥基的末端T2与L连接，T3与D连接，由此形成5-元稠合环。
在通式(I)中左侧所示的环中，A和D独立地代表N或CH；B和E独立地代表N或CH；且L代表N或CH；条件是a)在含有A、B、D、E、和L的环中，N原子的总数目是0、1、2或3；b)当L代表CH，且任何G3是单价取代基时，A和D当中至少有一个是N原子；和c)当L代表CH，且G3是结构T2＝T2-T3二价桥基时，则A、B、D和E也是CH。
J是选自芳基；吡啶基；和环烷基的环。下标q′代表环J上的取代基G4的数目，并且是0、1、2、3、4、或5。
G4是选自下列的单价或二价基团-N(R6)2；-NR3COR6；卤素；烷基；环烷基；低级链烯基；低级环烯基；卤素取代的烷基；氨基取代的烷基；N-低级烷基氨基取代的烷基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基；羟基取代的烷基；氰基取代的烷基；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基；卤素取代的烷基氨基；氨基取代的烷基氨基；N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基氨基；羟基取代的烷基氨基；氰基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；卤代低级烷氧基；卤代低级烷硫基；卤代低级烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；脒基；胍基；磺基；-B(OH)2；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的饱和杂环基；任选取代的部分不饱和杂环基；-OCO2R3；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；-CHO；-OCON(R6)2；-NR3CO2R6；-NR3CON(R6)2；和连接于并连接环J相邻位置的形成稠合环的二价桥基，所述桥基具有下列结构
其中每个T2独立地代表N、CH、或CG4′；T3代表S、O、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定义的单价G4；并且是经由末端原子T2和T3与环J连接； 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG4′；G4′代表任意上述定义的单价G4；条件是最多有两个桥原子T2可以是N；并且是经由末端原子T2与环J连接；和 或 其中每个T4、T5、和T6独立地代表O、S、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；G4′代表任意上述定义的单价G4；并且是经由末端原子T4或T5与环J连接；条件是i)当一个T4是O、S、或NR3时，另一个T4是CR4G4′或C(R4)2；ii)包含T5和T6原子的桥基团可含有最多两个杂原子O、S、或N；和iii)在包含T5和T6原子的桥基团中，当一个T5和一个T6是O原子，或者两个T6是O原子时，所述O原子被至少一个碳原子分隔；当G4是位于环J上与连接基团-(CR42)p-相邻的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基时，则G4和X上的烷基取代基R3可以连接形成结构-(CH2)p′-桥基，其中p′是2、3、或4，条件是p和p′之和是2、3、或4，从而形成5、6、或7元含氮环。
另外的条件是1)在G1、G2、G3、和G4中，当两个基团R3或R6分别是烷基，并且位于相同N/原子上时，它们可通过一个键、O、S、或NR3连接以形成具有5-7个环原子的含氮杂环；和2)当芳基、杂芳基、或杂环基环任选被取代时，该环可携带最高达5个独立地选自下列的取代基氨基、一低级烷基取代的氨基、二低级烷基取代的氨基、低级链烷酰基氨基、卤素、低级烷基、卤代低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基、卤代低级烷氧基、卤代低级烷硫基、低级链烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巯基、磺基、和氰基；和3)当任何烷基连接到O、S、或N上，并携带羟基取代基时，则所述羟基取代基与烷基所连接的O、S、或N被至少两个碳原子分隔开。
这些化合物的可药用盐以及这些化合物的常用前药例如含有羟基的本发明化合物的O-酰基衍生物也在本发明范围内。
本发明还涉及在可药用载体中含有一种或多种本发明化合物或其盐或前药的药物组合物。
本发明还涉及使用这些化合物来治疗患有特征是异常血管生成或高渗透过程的病症的哺乳动物的方法，包括给哺乳动物施用能有效治疗所述病症的量的本发明化合物或其盐或前药。
定义前缀“低级”是指具有最高达并包括最多7个原子、尤其是具有最高达并包括最多5个碳原子的基团，基团呈直链或具有一个或多个分支的支链。
“烷基”是指具有最高达12个碳原子的烃基，其可以呈直链或具有一个或多个分支的支链。烷基尤其是低级烷基。
当化合物、盐等采用复数形式时，这也包括单数形式的化合物、盐等。
任何不对称碳原子可以以(R)-、(S)-或(R，S)构型存在，优选以(R)-或(S)-构型存在。在双键或环上的取代基可以以顺式-(＝Z-)或反式-(＝E-)形式存在。因此，化合物可以作为异构体混合物或纯异构体存在，优选作为纯的对映体、非对映体和具有纯的顺式或反式双键的异构体存在。
低级亚烷基Y可以呈支链或直链，优选呈直链，尤其是亚甲基(-CH2)、亚乙基(-CH2-CH2)、1，3-亚丙基(-CH2-CH2-CH2)或1，4-亚丁基(-CH2CH2CH2CH2)。当Y是低级亚烷基时，其最优选为亚甲基。
“芳基”是指具有6-14个碳原子的芳族基团，例如苯基、萘基、芴基或菲基。
“卤素”是指氟、氯、溴、或碘，但尤其是氟、氯、或溴。
“吡啶基”是指1-吡啶基、2-吡啶基、或3-吡啶基，但尤其是2-吡啶基或3-吡啶基。
“环烷基”是含有3-12个碳原子、但优选3-8个碳原子的饱和碳环。
“环烯基”是指含有3-12个碳原子、但优选3-8个碳原子和最高达3个双键的非反应性、非芳族不饱和碳环。本领域技术人员众所周知，与芳基的不同之处在于仅少一个双键的环烯基例如环己二烯由于不具有足够的非反应性而不是适当的药物，因此其作为取代基的应用不在本发明范围内。
环烷基和环烯基可含有支化点，这样它们可以被烷基或链烯基取代。这样的支链环状基团的实例有3，4-二甲基环戊基、4-烯丙基环己基或3-乙基环戊-3-烯基。
盐尤其是式I化合物的可药用盐，例如酸加成盐，优选具有碱性氮原子的式I化合物与有机或无机酸形成的盐。合适的无机酸有例如氢卤酸例如盐酸，硫酸，或磷酸。合适的有机酸是例如羧酸、膦酸、磺酸、或氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、月桂酸、乙醇酸、乳酸、羟基丁酸、葡萄糖酸、葡萄糖一羧酸、富马酸、琥珀酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、葡萄糖二酸、半乳糖二酸、氨基酸例如谷氨酸、天冬氨酸、N-甲基甘氨酸、乙酰基氨基乙酸、N-乙酰基天冬酰胺或N-乙酰基半胱氨酸、丙酮酸、乙酰乙酸、磷酸丝氨酸、2-甘油磷酸或3-甘油磷酸。
在Y的定义中，二基“-(5元杂芳基)-”是指含有1-3个选自O、S、和N的杂原子的5-元芳杂环，其中N原子的数目是0-3，O和S原子的数目各是0-1，并且该芳杂环经由碳与硫连接，经由C或N原子与-(CR42)s-连接。这样的二基的实例包括
在G1、G2、G3、和G4的定义中，声明—当两个基团R3或R6位于一个N上时，它们可连接形成具有5-7个原子的杂环。包含它们所连接的N的这样的杂环的实例有 “杂环基”或“杂环”是指具有1-3个选自氮、氧、和硫的杂原子的5-7元杂环系，该杂环系可以是不饱和或全饱和或部分饱和的，并且未取代或者被取代，尤其是被低级烷基例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、或叔丁基取代。
当指明芳基、杂芳基、或杂环基可任选被取代时，该环可携带最高达5个独立地选自下列的取代基氨基、一低级烷基取代的氨基、二低级烷基取代的氨基、低级链烷酰基氨基、卤素、低级烷基、卤代低级烷基例如三氟甲基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基、卤代低级烷氧基例如三氟甲氧基、卤代低级烷硫基例如三氟甲硫基、低级链烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巯基、磺基、和氰基。
在与Y连接的环中，环单元A、B、D、E、和L可以是N或CH，应当理解，任选的取代基G3必须连接在碳上而不是氮上，并且当给定的碳原子携带取代基G3时，该G3是代替了不存在G3时碳携带的H原子。可以一起形成第二个稠合环的环J与两个相邻G的实例有 “杂芳基”是指总共具有5-10个原子，其中有1-4个选自氮、氧、和硫的杂原子，且余下的原子是碳的单环或稠合二环芳系。杂芳基优选为总共具有5或6个原子，其中有1-3个是杂原子的单环系。
“链烯基”是指具有最高达12个碳原子，可以呈直链或具有一个或多个分支的支链，并含有最高达3个双键的不饱和基团。链烯基尤其是具有最高达2个双键的低级链烯基。
“链烷酰基”是指烷基羰基，尤其是低级烷基羰基。
卤代低级烷基、卤代低级烷氧基和卤代低级烷硫基是指其中烷基部分或完全被卤素取代，优选被氯和/或氟取代，最优选被氟取代的取代基。这样的取代基的实例有三氟甲基、三氟甲氧基、三氟甲硫基、1，1，2，2-四氟乙氧基、二氯甲基、氟甲基和二氟甲基。
当取代基以一串基团例如“苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基”命名时，应当理解，连接点在这串基团的最后部分(对于上述实例是氨基)上，并且这串基团的其它基团是以它们在基团串中列出的顺序彼此连接。因此，实例“苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基”是
当取代基以在起点有一个键(一般写作破折号)的一串基团例如“-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)”命名时，应当理解，连接点在该串基团的第一个原子(对于上述实例是S或硫)上，并且这串基团的其它基团是以它们在基团串中列出的顺序彼此连接。因此，实例“-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)”是 应当理解，连接基团Y的各变量的最左侧部分与含有A、B、D、E、和L的环连接，并且连接基团的最右侧部分与通式的哒嗪部分连接。因此，使用连接基团“-CH2-O-”或连接基团“-O-CH2-”的实例代表下列本发明化合物 在通式(I)中，优选的和最优选的基团如下。
R1和R2优选i)一起形成下述结构所示的桥基
其中连接是经由末端碳原子实现的；ii)一起形成下述结构所示的桥基 其中一个或两个环单元T1是N，并且其它环单元是CH，且连接是经由末端原子实现的；或iii)一起形成含有两个T2和一个T3的桥基，所述桥基与其所连接的环一起形成下列结构所示的二环 或 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG1；T3代表S、O、CH2、或NR3；且条件是当T3是O或S时，至少一个T2是CH或CG1。
最优选地，任何G1位于桥基的非末端原子上。最优选地，在iii)的桥基中，末端T2是N或CH，非末端T2是CH或CG1，且T3是S或O。
下标m优选为0或1-2的整数，且取代基G1优选选自-N(R6)2；-NR3COR6；卤素；低级烷基；羟基取代的烷基；氨基取代的烷基氨基；N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；羟基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；卤代低级烷氧基；卤代低级烷硫基；卤代低级烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-NO2；-CN；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；任选取代的杂芳基烷氧基；和-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)。最优选地，m是0，且G1是独立地选自下列的取代基-N(R6)2；-NR3COR6；卤素；-OR6，其中R6代表低级烷基；-NO2；任选取代的杂芳氧基；和任选取代的杂芳基烷氧基。
当R6是烷基时，其优选为低级烷基。基团R4优选为H；p优选为0或1；且X优选为NR3。
在连接基团Y中，下标n和s优选为0或1，最优选为0。Y优选选自低级亚烷基；-CH2-O-；-CH2-S-；-CH2-NH-；-S-；-NH-；-(CR42)n-S(O)p-(5-元杂芳基)-(CR42)s-；-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-；和-O-CH2-。Y最优选选自-CH2-O-；-CH2-NH-；-S-；-NH-；-(CR42)n- S(O)p-(5-元杂芳基)-(CR42)s-；和-O-CH2-。
在结构(I)左侧的环中，A、D、B、和E优选为CH，且L是N或CH，条件是当L是N时，任何取代基G3优选为单价基团，当L是CH时，任何取代基G3优选为二价基团。
取代基G3优选选自单价低级烷基；-NR3CORU6；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；-CO2R6；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；-CN；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；和结构T2＝T2-T3的二价桥基，其中T2代表N或CH。T3优选为S、O、CR42、或NR3。
G3最优选选自单价低级烷基；-NR3COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-S(O)2N(R6)2；和结构T2＝T2-T3的二价桥基，其中T2代表N或CH。T3最优选为S、O、CH2、或NR3。
代表取代基G3数目的下标q最优选为1。
环J优选为苯基环，代表苯基环上取代基G4数目的下标q′优选为0、1、2、或3。下标q′最优选为1、或2。
G4优选选自-N(R6)2；-NR3COR6；卤素；烷基；卤素取代的烷基；羟基取代的烷基；羧基取代的烷基；低级烷氧基羰基取代的烷基；氨基取代的烷基氨基；N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；N-低级链烷酰基氨基取代的烷基氨基；羟基取代的烷基氨基；羧基取代的烷基氨基；低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；-OR6；-SR6；-S(O)R6；-S(O)2R6；卤代低级烷氧基；卤代低级烷硫基；卤代低级烷基磺酰基；-OCOR6；-COR6；-CO2R6；-CON(R6)2；-CH2OR3；-NO2；-CN；任选取代的杂芳基烷基；任选取代的杂芳氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基)；任选取代的杂芳基烷氧基；-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；和连接于并连接苯基环相邻位置的形成稠合环的桥基，所述桥基具有下列结构 其中每个T2独立地代表N、或CH；T3代表S、或O；并且是经由末端原子T2和T3与苯基环连接； 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG4′；条件是最多有两个桥原子T2可以是N；并且是经由末端原子T2与苯基环连接；和 其中每个T5、和T6独立地代表O、S、或CH2；并且是经由末端原子T5与苯基环连接；条件是i)包含T5和T6原子的桥基团可含有最多两个杂原子O、S、或N；和ii)在包含T5和T6原子的桥基团中，当一个T5和一个T6是O原子，或者两个T6是O原子时，所述O原子被至少一个碳原子分隔。
构成G4全部或一部分的烷基优选为低级烷基。
当G4是位于环J上与连接基团-(CR42)p-相邻的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基时，则G4和X上的烷基取代基R3可以连接形成结构-(CH2)p′-桥基，其中p′优选为2或3，条件是p和p′之和是2或3，从而形成含氮5或6元环。最优选地，p和p′总和为2，从而形成5元环。
最优选地，在G1、G2、G3、和G4中，当两个基团R6分别是烷基，并且位于相同N原子上时，它们可通过一个键、O、S、或NR3连接以形成具有5-6个环原子的含氮杂环。
优选地，当芳基、杂芳基、或杂环基环任选被取代时，该环可携带最高达2个独立地选自下列的取代基氨基、一低级烷基取代的氨基、二低级烷基取代的氨基、低级链烷酰基氨基、卤素、低级烷基、卤代低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基、卤代低级烷氧基、卤代低级烷硫基、-CH2OR3、硝基、和氰基。
本发明方法可用于在人和其它哺乳动物中治疗VEGF-介导的病症。
化合物可以剂量单位制剂口服施用、经皮施用、非胃肠道施用、通过注射施用、通过吸入或喷雾施用、或舌下施用、直肠施用或阴道施用。术语“通过注射施用”包括静脉内、关节内、肌内、皮下和非胃肠道注射，以及使用输注技术。经皮施用可包括局部施用或透皮施用。一种或多种化合物可以与一种或多种无毒可药用载体、以及如果需要的话其它活性组分一起存在。
口服施用的组合物可通过本领域已知的制备药物组合物的任意适当方法制得。这样的组合物可含有一种或多种选自稀释剂、甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的物质以提供适口制剂。
片剂含有活性组分，以及与其混合的适于制备片剂的无毒可药用赋形剂。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉、或藻酸；和粘合剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可以未包衣，或者可通过已知技术包衣来延迟崩解和在胃肠道中吸附，并由此实现在较长时间内的持续作用。例如，可采用延时材料例如甘油一硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。还可以将这些化合物制成固体、速释形式。
口服施用的制剂还可以制成硬明胶胶囊，其中活性组分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高龄土混合；或制成软明胶胶囊，其中活性组分与水或油介质例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。
还可以使用含有与适于制备水悬浮液的赋形剂混合的活性组分的水悬浮液。这样的赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯胶；分散剂或润湿剂可以是天然磷脂例如卵磷脂，或氧化乙烯与脂肪酸的缩合产物例如聚氧化乙烯硬脂酸酯，或氧化乙烯与长链脂族醇的缩合产物例如十七氧化乙烯鲸蜡醇，或氧化乙烯与衍生自脂肪酸和己糖醇的部分酯的缩合产物例如聚氧乙烯山梨醇一油酸酯，或氧化乙烯与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的部分酯的缩合产物例如聚乙烯脱水山梨醇一油酸酯。水悬浮液还可以含有一种或多种防腐剂例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种矫味剂，和一种或多种甜味剂例如蔗糖或糖精。
通过加入水，适于制备水悬浮液的分散粉末和颗粒可提供活性组分与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂的混合物。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂是上文列举的那些。也可以含有其它赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。
化合物还可以呈非水液体制剂的形式，例如可通过将活性组分悬浮在植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或花生油中，或悬浮在矿物油例如液体石蜡中而配制的油悬浮液。油悬浮液可含有增稠剂例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入甜味剂例如上述甜味剂和矫味剂来提供适口的口服制剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸来防腐。
本发明药物组合物还可以呈水包油乳剂的形式。油相可以是植物油例如橄榄油或花生油，或矿物油例如液体石蜡，或它们的混合物。合适的乳化剂可以是天然树胶，例如阿拉伯胶或西黄蓍胶，天然磷脂例如大豆、卵磷脂，和衍生自脂肪酸与己糖醇酐的酯或部分酯，例如脱水山梨醇一油酸酯，和所述部分酯与氧化乙烯的缩合产物例如聚氧乙烯脱水山梨醇一油酸酯。乳剂还可以含有甜味剂和矫味剂。
还可以用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖配制糖浆剂和酏剂。这样的制剂还可以含有缓和剂、防腐剂和矫味剂以及着色剂。
本发明化合物还可以以直肠或阴道给药用栓剂的形式施用。这些组合物可通过将药物与在常温下是固体、但是在直肠或阴道温度下是液体、并由此将在直肠或阴道内熔化以释放药物的合适的非刺激性赋形剂混合来制得。这样的物质包括椰子油和聚乙二醇。
本发明化合物还可以使用本领域技术人员已知的方法透皮施用(参见例如Chien；“Transdermal Controlled SystemicMedications”；Marcel Dekker.Inc.；1987.Lipp等人WO 94/04157，3Mar94)。例如，可将式I化合物在任选含有渗透促进剂的适当挥发性溶剂中的溶液或悬浮液与本领域技术人员已知的其它添加剂例如基质材料和杀菌剂混合。灭菌后，可按照已知方法将所得混合物配制成剂型。此外，通过用乳化剂和水处理，可将式I化合物的溶液或悬浮液配制成洗剂或软膏剂。
制备透皮给药系统的合适的溶剂是本领域技术人员已知的，并包括低级醇例如乙醇或异丙醇，低级酮例如丙酮，低级羧酸酯例如乙酸乙酯，极性醚例如四氢呋喃，低级烃例如己烷、环己烷或苯，或卤代烃例如二氯甲烷、氯仿、三氯三氟乙烷、或三氯氟乙烷。合适的溶剂还可以包括一种或多种选自下列的物质的混合物低级醇、低级酮、低级羧酸酯、极性醚、低级烃、卤代烃。
适用于透皮给药系统的渗透促进剂是本领域技术人员已知的，并包括例如一元或多元醇例如乙醇、丙二醇或苯甲醇，饱和或不饱和C8-C18脂肪醇例如月桂醇或鲸蜡醇，饱和或不饱和C8-C18脂肪酸例如硬脂酸，具有最高达24个碳原子的饱和或不饱和脂肪酯，例如下列酸的甲酯、乙酯、丙酯、异丙酯、正丁酯、仲丁酯、异丁酯、叔丁酯或甘油单酯乙酸、己酸、月桂酸、豆蔻酸、硬脂酸、或棕榈酸，或总共具有最高达24个碳原子的饱和或不饱和二元羧酸的二酯，例如己二酸二异丙酯、己二酸二异丁酯、癸二酸二异丙酯、马来酸二异丙酯、或富马酸二异丙酯。其它渗透促进物质包括磷脂酰基衍生物例如卵磷脂或脑磷脂，萜烯、酰胺、酮、脲和它们的衍生物，以及醚例如二甲基异山梨醇醚和二甘醇一乙醚。合适的渗透促进制剂还可以包括一种或多种下列物质的混合物一元或多元醇、饱和或不饱和C8-C18脂肪醇、饱和或不饱和C8-C18脂肪酸、具有最高达24个碳原子的饱和或不饱和脂肪酯、总共具有最高达24个碳原子的饱和或不饱和二元羧酸的二酯、磷脂酰基衍生物、萜烯、酰胺、酮、脲和它们的衍生物、以及醚。
适用于透皮给药系统的粘合物质是本领域技术人员已知的，并包括聚丙烯酸酯、硅氧烷、聚氨酯、嵌段聚合物、苯乙烯-丁二烯共聚物、以及天然和合成橡胶。纤维素醚、衍生化的聚乙烯、以及硅酸盐也可用作基质组分。可加入其它添加剂例如粘性树脂或油来提高基质的粘性。
对于本文所公开的关于式I化合物的所有给药方案，日口服剂量优选为0.01-200mg/kg总体重。对于注射给药，包括静脉内、肌内、皮下和非胃肠道注射、以及使用输注技术，日剂量优选为0.01-200mg/kg总体重。对于直肠给药，日剂量优选为0.01-200mg/kg总体重。对于阴道给药，日剂量优选为0.01-200mg/kg总体重。对于局部给药，日剂量优选为0.1-200mg，每天给药1-4次。透皮浓度优选为保持0.01-200mg/kg的日剂量所需的浓度。对于吸入给药，日剂量优选为0.01-10mg/kg总体重。
本领域技术人员应当理解，特定的给药方法将取决于多种不同因素，当给药治疗时所有这些因素都要常规考虑。然而，还应当理解，对于任何给定患者，具体剂量水平将取决于多种不同因素，包括但不限于所用的特定化合物的活性、患者年龄、患者体重、患者的一般健康、患者性别、患者饮食、给药时间、给药途径、分泌速度、药物联合、进行治疗的病症的严重程度。本领域技术人员应当理解，最佳治疗过程，即治疗方式和在确定治疗天数内式I化合物或其可药用盐的日给药次数可由本领域技术人员使用常规治疗试验来确定。
一般制备方法本发明化合物可通过使用已知的化学反应和方法来制得。然而，通过下述一般制备方法来帮助阅读者合成KDR抑制剂，并且在描述工作实施例的实验部分中提供更详细的特定实施例。
在下文中如果没有具体定义，这些方法中的所有可变基团都如一般描述中所述。应当理解，在给定结构中，当具有给定符号的可变基团或取代基(即R3、R4、R6、G1、G2、G3、或G4)使用一次以上时，每个这些基团或取代基都在该符号的定义范围内独立地变化。如上所定义，本发明化合物含有环单元，每个环单元可独立地携带0-5个未定义为H的取代基G1、G3、或G4。相反，应当指出，在下述一般方法反应方案中，使用的G1、G3、或G4取代基的定义包括H，以表明G1、G3、或G4取代基在结构中的位置，并易于画得精确。然而，该非标准用法并不是打算改变G1、G3、或G4的定义。因此，只是为了下述一般方法反应方案，G1、G3、或G4才除了是G1、G3、或G4的定义中列出的基团以外还可以是H。最终的化合物含有0-5个非氢基团G1、G3、或G4。
在这些一般方法中，变量M等于如下所示的基团
其中每个可变基团或取代基在上文该符号的定义限度内独立地改变。
在这些一般方法中，变量Q1等于如下所示的基团 其中L是N并且每个可变基团或取代基在上文该符号的定义限度内独立地改变。
在这些一般方法中，变量Q2等于如下所示的基团 其中每个可变基团或取代基在上文该符号的定义限度内独立地改变。
应当认识到，具有每个要求保护的任选官能团的本发明化合物不能用每种下列方法制得。在每种方法的范围内，使用在反应条件下稳定的任选取代基，或者可能参与反应的官能团按照需要以保护形式存在，并且在适当步骤通过本领域技术人员众所周知的方法除去这样的保护基。
一般方法A其中X、M、和Q2如上所定义，Y是-CH2-O-、-CH2-S-、-CH2-NH-、-O-、-S-、或-NH-，R1和R2与它们所连接的碳一起形成稠合的5-元芳杂环，hal是卤素(Cl、Br、F、或I，但是优选为Cl、Br或F)的式I-A化合物是按照方法A中所示的反应方案方便地制得的。因此，其中R是低级烷基的式II杂环可由本领域技术人员依据在参考表中的相应的出版的方法制得。对于噻吩-2，3-二甲酸(表项目1)和吡唑-3，4-二甲酸(表项目10)，可通过在回流条件下用相应的醇和催化无机酸(一般是硫酸)处理来将羧酸转化成甲酯或乙酯。用肼水合物处理式II二酯，以获得中间体III(关于具体反应条件参见Robba，M.；Le Guen，Y.Bull.Soc.Chem.Fr.，1970 12 4317)。用卤化剂例如三氯氧化磷、三溴氧化磷、五溴化磷、或五氯化磷处理化合物III，以生成二卤代中间体IV。可通过与氟化氢反应将二氯或二溴中间体转化成二氟中间体(在需要时)。通过在随后的步骤中使用碘试剂例如碘化钾或四丁基碘化铵，在反应混合物中形成了碘中间体，不用分离成纯物质。在回流的醇或其它适当溶剂例如四氢呋喃(THF)、二甲氧基乙烷(DME)、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)等中用式V亲核试剂处理二卤代中间体IV，以获得式VI中间体。这样的缩合还可以不使用溶剂在熔化状态下进行，并且可用酸例如HCl或碱例如三乙胺或1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)催化。将式VI化合物与式VII化合物在下述条件下反应在合适的非质子传递溶剂例如DMSO、DMF中，或者不使用溶剂，通常使用碱性催化剂例如DBU或CsCO4、或冠醚例如18-冠-6，通常在室温至回流温度下进行反应，以生成本发明式I-A化合物。应当理解，本领域技术人员将根据原料的性质来选择合适的溶剂、催化剂(如果使用的话)和温度。式V和VII中间体一般是市售的，或者可通过本领域技术人员众所周知的方法方便地制得。例如，关于其中Y是-CH2-O-，且Q2是被2-氨基羰基(2-CONH2)取代的4-吡啶基的VII的制备，参见Martin，I.，等人Acta.Chem.Scand.，199549 230。
方法A
关于制备原料II的参考表 一般方法B其中X、M、和Q2如上所定义，Y是-CH2-O-、-CH2-S-、-CH2-NH-、-O-、-S-、或-NH-的式I-B化合物是按照方法B制得的。依据文献中描述的方法(Tomisawa和Wang，Chem.Pharm.Bull.，21，1973，2607，2612)，将异喹诺酮VIII与PBr5在熔化状态下反应以生成1，4-二溴异喹啉IX。在回流的醇中用式V亲核试剂处理中间体IX，以生成式X中间体。这样的缩合还可以不使用溶剂在熔化状态下进行，并且可用酸例如HCl或碱例如三乙胺或1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)催化。将式X化合物与式VII化合物在下述条件下反应在合适的非质子传递溶剂例如DMSO、DMF中，或者不使用溶剂，通常使用碱性催化剂例如DBU或CsCO4，在高温下进行反应，以生成本发明式I-B化合物。当Y是-CH2-S-或-S-时，该方法是最有用的。
方法B 一般方法C其中M、X、R1、R2、m和Q2如上所定义的式I-C化合物可依据方法C中所示的反应方案方便地制得。在该方法中，m优选为0，R1和R2与它们所连接的碳一起形成稠合苯或稠合的5-元芳杂环。原料XI是市售的，或者可按照在下述参考表中列出的方法由本领域技术人员制得。将原料XI与脲或氨反应，通常在高温和高压(对于氨)下反应，以生成酰亚胺XII。在回流下将酰亚胺与醛XIII在乙酸和哌啶中反应以形成中间体XIV。按照I.W.Elliott和Y.Takekoshi(J.Heterocyclic Chem.197613，597)描述的一般方法，将XIV与硼氢化钠在甲醇或其它合适的溶剂中反应，以生成中间体XV。用合适的卤化剂例如POCl3、POBr3、PCl5、PBr5或亚硫酰氯处理XV，以生成卤代中间体XVI，将其与式V亲核试剂在回流的醇中反应，以获得式I-C本发明化合物。这样的缩合还可以不使用溶剂在熔化状态下进行，并且可用酸例如HCl或碱例如三乙胺或1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)催化。或者，试剂V与中间体XV的缩合可通过将这两种组分与P2O5在熔化状态下加热来进行，以生成本发明结构I-C化合物。当X是胺连接基团时，后一种方法特别有效。
方法C 制备原料的参考表
一般方法D其中R1、R2、R6、M、X、Y、G3和Z如上所定义，q是0或1的式I-D-1化合物可通过方法D中所示的反应方案制得。因此，按照文献中描述的方法(Minisci等人，Tetrahedron，1985，41，4157)，在过氧化氢和铁盐存在下，通过使用甲酰胺(XVII)，将吡啶取代的哒嗪或吡啶(I-D-1)官能化成式(I-D-2)取代的2-氨基羰基吡啶。当R1和R2一起形成稠合芳杂环或稠合芳碳环时，该方法最佳。当Z是CH，R1和R2不形成稠合芳环时，可形成其中Z是CCONHR6的异构副产物，如果形成的话，通过色谱法将其从所需产物中分离出去。
方法D 一般方法E其中R1、R2、R6、M、X、Y、G3和Z如上所定义，q是0或1，且R3是低级烷基的式I-E-1和I-E-2化合物可通过方法E中所示的反应方案制得。因此，按照文献中描述的方法(Coppa，F.等人，Tetrahedron Letters，1992，33(21)，3057)，在S2O8-2、酸和催化量的AgNO3存在下，通过使用草酸一烷基酯(XVIII)，将吡啶取代的哒嗪或吡啶(I-D-1)官能化成式(I-E-1)的取代的2-烷氧基羰基吡啶。然后通过用碱例如氢氧化钠在甲醇/水中将酯水解来形成其中R3是H的式I-E-1化合物。其中R6独立地如上所定义的式I-E-2化合物，尤其包括其中两个R6都不是H的化合物，可通过在偶联剂例如DCC(二环己基碳二亚胺)存在下用胺XIX处理而由酸(I-E-1，R3＝H)方便地制得。当R1和R2一起形成稠合芳杂环或稠合芳碳环时，该方法最佳。当Z是CH，R1和R2不形成稠合芳环时，在第一步中可形成其中Z是CCO2R3的异构副产物，如果形成的话，通过色谱法将其从所需产物中分离出去。
方法E 一般方法F其中M、Q2和X如上所定义，m是1-5的整数，且R1和R2与它们所连接的碳一起形成稠合的5-元芳杂环的式I-F化合物可通过方法F中所示的反应方案制得。将易于获得的杂环基羧酸原料XX与丁基锂反应，然后与二甲基甲酰胺反应，以生成结构XXI醛。将XXI与肼反应以生成哒嗪酮XXII。用合适的卤化剂例如POCl3、POBr3、PCl5、PBr5或亚硫酰氯处理XXII，以生成卤代中间体，将其与式V亲核试剂在回流的醇中反应，以获得式XXIII中间体化合物。这样的缩合还可以不使用溶剂在熔化状态下进行，并且可用酸例如HCl或碱例如三乙胺或1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)催化。或者，试剂V与中间体XXII的缩合可通过将这两种组分与P2O5在熔化状态下加热来进行，以生成XXII。当X是胺连接基团时，后一种方法特别有效。按照F.D.Popp，Heterocycles，1980，14，1033的一般方法，形成并用卤化物XXIV将Reissert化合物XXIII烷基化，以生成结构XXV中间体。然后用碱处理，以生成本发明化合物I-F。
方法F 一般方法G其中M、Q2和X如上所定义，m是1-4的整数，且R1和R2与它们所连接的碳一起形成稠合的5-元芳杂环的式I-G化合物可通过方法G中所示的反应方案制得。可用硼氢化钠将得自方法F的醛XXI还原，以生成羟基酸，可用本领域技术人员众所周知的方法例如使用甲苯磺酰氯将该羟基酸内酯化，以生成内酯XXVI。在碱例如甲醇钠存在下，通常在溶剂例如甲醇中，在回流状态下将中间体XXVI与醛XIII缩合，以生成结构XXVII中间体。将XXVII与肼或优选与肼水合物在100-150℃温度下反应，以生成结构XXVIII中间体。按照方法C中描述的方法，使用XXVIII而不是XV将中间体XXVIII转化成结构I-G本发明化合物。
方法G
一般方法H其中R1、R2、M、X、R6、q和G3如上所定义的式I-H化合物可通过方法H中所示的反应方案方便地制得。因此，使用在Martin，I；Anvelt，J.；Vares，L.；Xuehn，I.；Claesson，A.ActaChem.Scand.1995，49，230-232中描述的方法，或者上述方法D或E、但是用易于获得的吡啶-4-甲酸酯XXX代替I-D-1来将XXX转化成XXXI。然后按照上文中Martin等人描述的方法，用温和的还原剂例如NaBH4将酯还原以使酰胺取代基保持不变，获得醇XXXII。然后将该醇与碱例如DBU或CsCO4以及得自方法A的卤代哒嗪vI在无水条件下加热，以生成本发明式I-H化合物。
方法H
一般方法I其中R1、R2、M、X、R6、q和G3如上所定义，且W是一个键或-CH2-的式I-I化合物可通过方法I中所示的反应方案方便地制得。当q是1，且XXXIII是4-氯吡啶时，该方法尤其有用。或者，在该方法中可使用其它4-卤代吡啶例如4-氟吡啶或4-溴吡啶。使用上述方法D或E的一般步骤，通过用4-卤代吡啶代替I-D-1，将易于获得的4-卤代吡啶XXXIII转化成式XXXIV中间体。将XXXIV与硫氢化钾或硫氢化钠反应，以生成式XXXV硫醇。或者，通过与甲磺酰氯和适当的碱例如三乙胺在低温条件下反应(这样可将聚合物形成降至最小)将得自方法H的中间体XXXII的醇官能团转化成离去基团，并将所得中间体与硫氢化钾或硫氢化钠反应，以生成式XXXVI硫醇。将式XXXV或式XXXVI硫醇与得自方法A的中间体VI和适当的碱例如二异丙基乙基胺或CsCO4在DMF或其它适当无水溶剂中或者不存在溶剂条件下反应，以生成I-D-9。
方法I
一般方法J其中R1、R2、M、X、W、和G3如上所定义，并且结构内具有亚砜或砜的式I-J-1或I-J-2化合物可通过方法J中所示的反应方案方便地制得。通过用一当量间氯过苯甲酸在二氯甲烷或氯仿中处理(MCPBA，Synth.Commun.，26，10，1913-1920，1996)或通过用高碘酸钠在甲醇/水中于0℃-室温处理(J.Org.Chem.，58，25，6996-7000，1993)，将含有硫醚作为取代基G1、G3、或G4一部分或者作为如在得自方法I的代表性结构I-I中所示的Y的一部分的本发明化合物转化成具有亚砜基团的本发明化合物例如I-J-1。由各种N-氧化物和砜I-J-2组成的预计的副产物可通过色谱法除去。砜I-J-2是通过使用另外一当量MCPBA或优选使用高锰酸钾在乙酸/水中(Eur.J.Med.Chem.Ther.，21，1，5-8，1986)或在乙酸中使用过氧化氢(Chem.Heterocycl.Compd.，15，1085-1088，1979)而获得的。当不需要的N-氧化物变成主要产物时，可通过在乙醇/乙酸中用披钯炭催化剂氢化(Yakugaku Zasshi，69，545-548，1949，Chem.Abstr.1950，4474)将它们转回成所需的亚砜或砜。
一般方法K其中R1、R2、M、X、和Q1如上所定义的本发明式I-K化合物可通过方法K中所示的反应方案方便地制得。本领域技术人员可通过文献中的已知方法制备结构XXXVII原料。例如，其中R1和R2与它们所连接的碳一起形成2，3-取代的噻吩、呋喃、吡咯、环戊二烯、噁唑或噻唑的XXXVII可用在J.Org.Chem.，1981，46，211中描述的方法制得，并用三氟乙酸将最初形成的叔丁酯水解。吡唑原料可通过将2-氧代-3-戊炔-1，5-二酸(J.Chem.Phys.1974，60，1597)与重氮甲烷反应而制得。其中R1和R2与它们所连接的碳一起形成苯基的原料可通过Cymerman-Craig等人，Aust.J.Chem.1956，9，222，225的方法制得。其中R1和R2是低级烷基的式XXXVII化合物可按照在专利CH 482415(Chem.Abstr.120261u，1970)中描述的方法方便地制得。然后用肼处理式XXXVII二酸粗产物，以生成哒嗪酮XXXVIII(关于具体反应条件参见Vaughn，W.R.；Baird，S.L.J.Am.Chem.Soc.1946 68 1314)。用卤化剂例如三氯氧化磷处理哒嗪酮XXXVIII，获得了二氯中间体，通过水性处理将其水解，获得了氯哒嗪XXXIX。在碱例如氢化钠存在下在溶剂例如DMF中或者不存在溶剂下用式V亲核试剂处理含氯酸XXXIX。按照Tilley，J.W.；Coffen D.L.Schaer，B.H.；Lind，J.J.Org.Chem.1987 52 2469的方法，用还原剂例如BH3·THF将所得酸XXXX还原。将产物醇XXXXI与碱和任选取代的4-卤代吡啶基、任选取代的4-卤代嘧啶基或任选取代的4-卤代哒嗪基(XXXXII)反应，以获得本发明式I-K化合物(关于具体反应条件参见Barlow，J.J；Block，M.H；Hudson，J.A.；Leach，A.；Longridge，J.L.；Main，B.g.；Nicholson，S.J.Org.Chem.1992 57 5158)。
方法K
一般方法L其中R1、R2、M、X、和Q1如上所定义的本发明式I-L化合物可通过方法L中所示的反应方案方便地制得。在合适的碱存在下将得自方法K的式XXXXI醇与甲磺酰氯反应，然后与硫氢化钾或硫氢化钠反应，以生成硫醇XXXXIII。然后将该硫醇与得自方法K的4-卤代吡啶XXXXII在合适的碱例如三乙胺存在下反应，以生成本发明化合物I-K。或者，通过本领域技术人员众所周知的方法将XXXXI转化成式XXXXIV卤代中间体，并将该卤化物与硫醇XXXXV反应以生成I-K。还可以通过用KHS或NaHS处理将中间体XXXXIV转化成中间体XXXXIII。试剂XXXXV可商购获得例如4-巯基吡啶，或者可由本领域技术人员通过上述方法I制得。
方法L
具体实施方式
实验实施例1制备1-(4-氯苯基氨基)-4-(4-吡啶基硫基)异喹啉 步骤1制备中间体A将2.90g，19.07mMol异喹诺酮和14.40g，33.68mMol五溴化磷在140℃熔化在一起。该熔化物转化成红色液体，并且约10分钟后该反应混合物固化，并将其冷却。将该反应混合物压碎，并倾倒入冰水中。将所得固体过滤并风干。wt.5.50g，产率为96％，mp.＝94-96℃。Rf＝0.66，在40％乙酸乙酯在己烷中的混合物中。
步骤2将1.00g，3.49mMol得自步骤1的1，4-二溴异喹啉(中间体A)和4-氯苯胺的混合物在140℃熔化在一起。该反应混合物变成深红色液体，并且约10分钟后固化，并将其冷却。将该反应混合物压碎，并用50/50甲醇/THF混合物研制，然后过滤并风干，不用进一步纯化。wt.0.75g，64.4％，mp.＝260-263℃。Rf＝0.58，在40％乙酸乙酯在己烷中的混合物中。
步骤3将0.05g，0.1498mMol 1-(4-氯苯胺)-4-溴异喹啉和0.02g，0.18mMol 4-巯基吡啶混合，并在140℃熔化约10分钟。将所得反应混合物在1000微米制备板上纯化，使用5％甲醇在己烷中的混合物作为溶剂。wt.0.0103g，产率为19％，mp.＝192-195℃。Rf＝0.50，在40％乙酸乙酯在己烷中的混合物中。
实施例2制备1-(二氢茚-5-基氨基)-4-(4-吡啶基硫基)异喹啉 使用制备实施例1所用的方法，在步骤2中用5-氨基二氢茚代替4-氯苯胺来制备本标题化合物。熔点100-103℃，TLC Rf0.40(40％乙酸乙酯在己烷中的混合物)。
实施例3制备1-(苯并噻唑-6-基氨基)-4-(4-吡啶基硫基)异喹啉
使用制备实施例1所用的方法，在步骤2中用6-氨基苯并噻唑代替4-氯苯胺来制备本标题化合物。
TLC Rf0.36(5％甲醇/二氯甲烷)；MS＝387实施例4制备1-(4-氯苯基氨基)-4-(4-吡啶基甲基)异喹啉 步骤1将高邻苯二甲酰亚胺(770mg，4.78mmol)、4-吡啶甲醛(0.469mL，4.78mmol)和哌啶(0.5mL)在乙酸(25mL)中的混合物加热回流1小时。将所得溶液冷却至室温。通过过滤除去固体产物，用水(4×10mL)洗涤，并真空干燥，获得了920mg(3.67mmol，产率为77％)上述化合物的Z和E异构体的混合物。1H-NMR(DMSO-d6)由于既存在E异构体，也存在Z异构体，在芳族区域中显示了复杂的质子信号。MS ES 251(M+H)+，252(M+2H)+。
步骤2在0℃，向原料(1.70g，6.8mmol)在甲醇(250mL)内的悬浮液中缓慢地加入硼氢化钠(3.0g，79mmol)。将该混合物温热至室温，并继续搅拌1小时。用水(10mL)中止该反应，并搅拌10分钟。将所得混合物浓缩以除去溶剂。向残余物中加入冰水(100mL)，并用2N盐酸调节至pH＝2。搅拌10分钟，加入2N NaOH直至溶液的pH约为11。用二氯甲烷(4×100mL)萃取所得溶液。收集合并的有机层，用硫酸镁干燥并浓缩。通过柱色谱(1∶10v/v甲醇-二氯甲烷)纯化残余物，获得了400mg本标题化合物，为固体(1.70mmol，产率为25％)。
1H-NMR(MeOH-d4)8.33 to 8.39(m，4H)，7.50-7.68(m，3H)，7.30-7.31(m，2H)，7.14(s，1H)，4.15(s，2H)；MS ES 237(M+H)+，238(M+2H)；TLC(1∶10v/v甲醇-二氯甲烷)Rf＝0.40。
步骤3将4-氯苯胺(178mg，1.40mmol)、五氧化二磷(396mg，1.40mmol)和三乙胺盐酸盐(193mg，1.40mmol)在氩气氛下于200℃加热搅拌1.5小时或者直至形成均匀的熔化物。向该熔化物中加入原料(82mg，0.35mmol)。将该反应混合物在200℃搅拌2小时。将所得固体黑色物质冷却至100℃。加入甲醇(5mL)和水(10mL)，并将该反应混合物超声处理直至黑色物质溶解。加入二氯甲烷(40mL)，并加入浓氨水(～2mL)以将该混合物调节至pH＝10。分离出有机层，用二氯甲烷(3×20mL)萃取水层。用硫酸镁将合并的有机层干燥，过滤，并浓缩。通过制备TLC板(1∶10v/v甲醇-二氯甲烷)纯化，获得了26mg(0.08mmol，产率为22％)本标题化合物，为黄色固体。
1H-NMR(MeOH-d4)8.37(d，J＝7.8Hz，3H)，7.86(s，1H)，7.55-7.77(m，5H)，7.27-7.33(m，4H)，4.31(s，2H)；MS ES 346(M+H)+；TLC(1∶10v/v甲醇-二氯甲烷)Rf＝0.45。
实施例5制备1-(苯并噻唑-6-基氨基)-4-(4-吡啶基甲基)异喹啉
使用实施例4制备所用的方法，在步骤3中用6-氨基苯并噻唑代替4-氯苯胺来制备本标题化合物。
1H-NMR(MeOH-d4)9.08(s，1H)，8.37-8.59(m，4H)，7.79-8.01(m，2H)，7.60-7.78(m，4H)，7.30(d，2H)，4.34(s，2H)；MS ES 369(M+H)+；TLC(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.20。
实施例6制备1-(二氢茚-5-基氨基)-4-(4-吡啶基甲基)异喹啉 使用实施例4制备所用的方法，在步骤3中用5-氨基二氢茚代替4-氯苯胺来制备本标题化合物。
1H-NMR(MeOH-d4)8.35(m，3H)，7.46-7.77(m，5H)，7.15-7.27(m，4H)，4.26(s，2H)，2.87-2.90(m，4H)，2.05-2.10(m，2H)；MS ES 352(M+H)+；TLC(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.25。
实施例7制备1-(3-氟-4-甲基苯基氨基)-4-(4-吡啶基甲基)异喹啉
使用实施例4制备所用的方法，在步骤3中用3-氟-4-甲基苯胺代替4-氯苯胺来制备本标题化合物。
1H-NMR(MeOH-d4)8.34(d，3H)，7.87(s，1H)，7.54-7.69(m，4H)，7.10-7.31(m，4H)，2.22(s，3H)；MS ES 344(M+2H)+；TLC(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.20。
实施例8制备4-(4-氯苯基氨基)-7-(4-吡啶基甲氧基)噻吩并[2，3-d]哒嗪 步骤1给干燥的2L三颈园底烧瓶装配上机械搅拌器和加液漏斗。在氩气氛下向该烧瓶中加入在无水THF(500mL)中的2-噻吩甲酸(25g，195mmol)。用干冰-异丙醇浴将该混合物冷却至-78℃，并搅拌30分钟。用30分钟滴加正丁基锂的己烷溶液(2.5M，1.72mL)。在搅拌下将该反应在-78℃保持1小时，然后置于干燥二氧化碳气氛下。随着二氧化碳的加入，该反应物变稠。将该反应在-78℃保持1小时，然后温热至-10℃。用2N HCl(213mL)中止该反应，并让其达到室温。分离各层，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取水层。将有机层合并，干燥(硫酸钠)并通过旋转蒸发浓缩。将该棕色固体从热的异丙醇中结晶，并真空干燥过夜。获得了所需的噻吩-2，3-二甲酸(27.3g，159mmol；产率为82％)；1H NMR(DMSO-d6)7.69(d，J＝1.5，1)，7.38(d，J＝4.8，1)；ES MS(M+H)+＝173；TLC(氯仿-MeOH-水，6∶4∶1)；Rf＝0.74。
步骤1A或者，在步骤1中使用3-噻吩甲酸而不是2-噻吩甲酸，获得了相同产物。
步骤2给1L园底烧瓶装配上搅拌棒和回流冷凝器。向烧瓶中加入在含有催化量硫酸(～5mL)的甲醇(500mL)中的步骤1产物(62g，360mmol)。将该反应加热至回流，并搅拌24小时。将该反应冷却至室温，并通过旋转蒸发浓缩。通过硅胶色谱(己烷-乙酸乙酯80∶20-60∶40梯度)纯化该棕色混合物。获得了所需的噻吩-2，3-二甲酸二甲酯(21.2g，106mmol；产率为31％)；1H NMR(DMSO-d6)7.93(d，J＝4.8，1)，7.35(d，J＝4.8，1)，3.8(d，J＝1，6)；ES MS(M+H)+＝201；TLC(己烷-乙酸乙酯，70∶30)；Rf＝0.48。
步骤3给250mL园底烧瓶装配上搅拌棒和回流冷凝器。向该烧瓶中加入步骤2产物(16g，80mmol)、肼水合物(6.6mL，213mmol)、和乙醇(77mL)，并回流2.5小时。将该反应冷却至室温，并通过旋转蒸发浓缩。加入水(50mL)，并将滤液与不溶固体分离开。通过旋转蒸发将水层浓缩，获得了浅黄色固体。将该固体在真空烘箱中于50℃干燥过夜。获得了所需的噻吩并[2，3-d]哒嗪-4，7-二酮(12g，71mmol；产率为89％)；1H NMR(DMSO-d6)7.85(d，J＝5.1，1)，7.42(d，J＝5.1，1)；ES MS(M+H)+＝169；TLC(二氯甲烷-甲醇，60∶40)；Rf＝0.58。
步骤4制备中间体B给250mL园底烧瓶装配上搅拌棒和回流冷凝器。向该烧瓶中加入步骤3产物(2.5g，14.8mmol)、三氯氧化磷(45mL，481mmol)、和吡啶(4.57mL，55mmol)，并回流2.5小时。将该反应冷却至室温，并倒入冰上。将该混合物分离，并用氯仿(4×75mL)萃取水层。合并有机层，干燥(硫酸钠)，并通过旋转蒸发浓缩，获得了深黄色固体。所需的4，7-二氯噻吩并[2，3-d]哒嗪(中间体B；1.5g，7.3mmol；产率为49％)；熔点＝260-263℃；1H NMR(DMSO-d6)8.55(d，J＝5.7，1)，7.80(d，J＝5.7，1)；ES MS(M+H)+＝206；TLC(己烷-乙酸乙酯，70∶30)；Rf＝0.56。还参见Robba，M.；Bull.Soc.Chim.Fr.；1967，4220-4235。
步骤5给250mL园底烧瓶装配上搅拌棒和回流冷凝器。向该烧瓶中加入步骤4产物(7.65g，37.3mmol)、在乙醇(75mL)中的4-氯苯胺(4.76g，37.3mmol)。将该混合物回流3小时。3小时后橙色固体从反应中沉淀出来。将该反应冷却至室温，通过过滤收集固体，并用己烷洗涤。获得了所需的7-氯-4-(4-氯苯基氨基)噻吩并[2，3-d]哒嗪(6.5g，21.9mmol；产率为60％)；熔点＝139-142℃；ES MS(M+H)+＝297；TLC(己烷-乙酸乙酯，60∶40)；Rf＝0.48。
步骤6给150mL园底烧瓶装配上搅拌棒和回流冷凝器。向该烧瓶中加入步骤5产物(0.33g，1.1mmol)、在DBU(2.5mL，16.7mmol)中的4-吡啶基甲醇(1.2g，11.2mmol)，并将该混合物在125℃加热24小时。将乙酸乙酯(10mL)加到仍然热的该反应中，然后将该反应倒入水(10mL)中。分离各层，用乙酸乙酯(3×10mL)萃取水层。合并有机相，干燥(硫酸镁)，并通过旋转蒸发浓缩。通过硅胶色谱(二氯甲烷-甲醇-丙酮，90∶5∶5)纯化所得混合物，获得了浅黄色固体。获得了所需的本标题化合物(0.03g，0.08mmol；产率为7.3％)；熔点＝203-205℃(分解)；ES MS(M+H)+＝369；TLC(二氯甲烷-甲醇-丙酮，95∶2.5∶2.5)；Rf＝0.56。
实施例9制备4-(4-氯苯基氨基)-7-(4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪 步骤1向装配有加液漏斗、氩气入口、和机械搅拌器的干燥的3L三颈烧瓶中加入正丁基锂(2.5M己烷溶液，196mL，491mmol)。用无水THF(500mL)将该混合物稀释，并冷却至-78℃。滴加3-呋喃甲酸(25g，223mmol)在THF(500mL)中的溶液。将该混合物搅拌1.5小时，向该反应混合物中通入1小时的无水二氧化碳。逐渐温热至-10℃后，用盐酸(2N，446mL)处理所得浓稠的白色浆状液。分离两层，用乙酸乙酯(3×300mL)萃取水层。将合并的有机层干燥(硫酸钠)，过滤，并浓缩，获得了呋喃-2，3-二甲酸粗产物，为橙色固体(44g)，不用进一步纯化直接使用。
1H NMR(300MHz，d6-丙酮)δ7.06(d，J＝1.7，1)，7.97(d，J＝1.7，1)，10.7(bs，2H)；TLC(CHCl3/MeOH/H2O 6∶4∶1)Rf＝0.56.
步骤2给干燥的500mL园底烧瓶装配上搅拌棒和氩气入口。向该烧瓶中加入溶解在甲醇(250mL)中的在步骤1中制备的二酸粗产物(44g)。向该反应混合物中分批加入氯三甲基硅烷(80mL，630mmol)。在室温搅拌15.5小时后，将该溶液浓缩至油状物，并加入二氧化硅(5g)。将该混合物悬浮在甲醇(100mL)中，除去挥发性物质。将悬浮在甲醇(100mL)中并除去挥发性物质的操作再重复2次。将残余物直接施加到快速色谱柱的顶部，用己烷/乙酸乙酯60∶40洗脱，获得了呋喃-2，3-二甲酸二甲酯，为橙色油状物(38g，对于联合起来的步骤1和步骤2，产率为93％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.81(s，3)，3.86(s，3)，6.71(d，J＝2.8，1)，7.46(d，J＝2.8，1)；TLC(己烷/EtOAc 60∶40)Rf＝0.46.
步骤3向装配有氩气入口、回流冷凝器、和搅拌棒的500mL园底烧瓶中加入溶解在乙醇(250mL)中的呋喃-2，3-二甲酸二甲酯(44g，236mmol)。向该溶液中加入肼水合物(55％N2H4，40mL，3.0mmol)，并将该反应混合物加热至回流。经过5.5小时缓慢地沉淀出了黄色固体，将该混合物冷却至室温。减压除去挥发性物质，获得了黄色糊状物，将其悬浮在水中并过滤。用水洗涤该黄色固体，并转移到装配有氩气入口、回流冷凝器、和搅拌棒的500mL园底烧瓶中。将该固体悬浮在盐酸(2N，200mL)中，并将该混合物加热至回流。加热4小时后，将该橙色浆状液冷却至室温并过滤。用水将该固体充分洗涤，真空干燥，获得了4，7-二氧代[2，3-d]呋喃并哒嗪，为橙色固体(21.5g，60％)。
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.00(d，J＝2.1，1)，8.19(d，J＝2.1，1H)，11.7(bs，2H).
步骤4制备中间体C给1L园底烧瓶装配上回流冷凝器、搅拌棒、和氩气入口。将步骤3的呋喃(15.5g，102mmol)加到三氯氧化磷(300mL)和吡啶(30mL)的混合物中，并将所得橙色悬浮液加热至回流。将该反应混合物加热4小时后，通过旋转蒸发除去挥发性物质。将残余物倒入冰上，用氯仿(4×250mL)萃取含水混合物。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，并浓缩，获得了4，7-二氯[2，3-d]呋喃并哒嗪(中间体C，11.3g，59％)，为橙红色固体，不用进一步纯化直接使用。TLC(己烷/乙酸乙酯)Rf＝0.352；1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ7.40(d，J＝2.0，1)，8.63(d，J＝2.0，1).
步骤5向装配有搅拌棒、氩气入口、和回流冷凝器的100mL园底烧瓶中加入溶解在乙醇(40mL)中的步骤4产物(1.50g，7.98mmol)。向该混合物中加入氯苯胺(1.02g，7.98mmol)，并将所得悬浮液加热至回流。加热4小时后，通过旋转蒸发将该混合物浓缩。将橙色固体粗产物施加到快速柱的顶端，用二氯甲烷/甲醇97∶3洗脱，获得了4-氯-7-[N-(4-氯苯基)氨基][2，3-d]呋喃并哒嗪和7-氯-4-[N-(4-氯苯基)氨基][2，3-d]呋喃并哒嗪的混合物，为黄色粉末(1.2g，55％)。
TLC(CH2Cl2/MeOH 97∶3)；Rf＝0.7；1H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ主要异构体(A)7.40(d，J＝8.9，2)，7.45(d，J＝2.0，1)，7.87(d，J＝9.2，2)，8.34(d，J＝2.0，1)9.62(s，1)；次要异构体(B)7.28(d，J＝2.0，1)，7.40(d，J＝8.9，2)，7.87(d，J＝9.2，2)，8.48(d，J＝2.1，1)，9.88(s，1).
步骤6给25mL园底烧瓶装配上氩气入口、搅拌棒、和回流冷凝器。将步骤5产物(400mg，1.4mmol)与4-吡啶基甲醇(782mg，7.17mmol)以及1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(2.5mL，16.7mmo1)混合，并将该浆状液加热至125℃。搅拌24小时后，将该反应冷却，直接施加到快速柱的顶端，并用二氯甲烷/甲醇95∶5洗脱。在相同条件下通过色谱法再纯化所得黄色油状物，获得了作为三组分混合物一部分的本标题化合物。HPLC分离(C18柱，CH3CN/H2O 10∶90-100∶0梯度)，获得了本标题化合物，为灰白色固体(13.7mg，3％)。
TLC(CH2C12/MeOH 95∶5)＝0.19；MP 198℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.60(s，2)，6.6(d，J＝2.1，1)，7.18-7.20(m，2)，7.35-7.43(m，6)，7.66(d，J＝2.1，1)8.54(d，J＝5.6，2).
步骤5A和6A或者，按照步骤5的方法，但是用二溴中间体代替二氯中间体，即使用4，7-二溴[2，3-d]呋喃并哒嗪(下文中的中间体G)来制备本标题化合物。通过在CsCO4而不是1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯存在下将两种组分熔化来进行步骤6A。如上所述纯化粗产物。
中间体D-G制备其它二环4，5-稠合-3，6-二卤代哒嗪
采用实施例9、步骤2-4的一般方法，用适当的杂环二羧酸代替呋喃-2，3-二甲酸以制得如下表所示的取代的二氯哒嗪D-G。使用实施例9步骤2-3的方法制备二溴呋喃并哒嗪G，然后如下所述进行步骤4’向0.50g(3.287mmol)步骤3产物中加入2.83g(6.57mmol)五溴化磷。将该混合物加热至125℃。在约115℃该反应混合物熔化，然后在到达125℃之前再次固化。将该反应混合物冷却，将固体残余物压碎，倾倒入冰水中。然后过滤出所得固体并真空干燥。wt.＝0.75g(产率为82％)。如给定的参考文献所示，在几种情况下二氯哒嗪是已知物质。所有这些二卤代杂环都可用于制备本发明化合物。
中间体H制备(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基)甲醇
步骤1用冰浴将异烟酸乙酯(250mL，1.64mol)和浓硫酸(92mL，1.64mol)在N-甲基甲酰胺(2.0L)中的搅拌溶液冷却至6℃。加入硫酸铁(II)七水合物(22.8g，0.0812mol，用研钵和研棒研磨过的)，然后滴加30％过氧化氢水溶液(56mL，0.492mol)。将加入硫酸铁(II)和过氧化氢的操作再重复4次，同时将反应温度保持在22℃以下。将该反应混合物搅拌30分钟后，加入柠檬酸钠溶液(2L，1M)(所得混合物的pH约为5)。用二氯甲烷(1L，2×500mL)萃取该混合物。将合并的有机萃取液用水(2×500mL)、5％碳酸氢钠水溶液(3×100mL)、和盐水(500mL)洗涤。然后用硫酸钠将所得有机溶液干燥，过滤并真空浓缩，获得了固体。用己烷研制固体粗产物，过滤，并用己烷洗涤，并真空干燥，获得了270.35g(79.2％)粉黄色固体。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ8.9(d，1H)，8.3(m，1H)，8.0(dd，1H)，4.4(q，2H)，2.8(d，3H)，1.3(t，3H).
步骤2向机械搅拌的步骤1产物(51.60g，0.248mol)在乙醇(1.3L)内的浆状液中加入硼氢化钠(18.7g，0.495mol)。将该反应混合物在室温搅拌18小时。用饱和氯化氢铵水溶液(2L)小心地骤冷所得水溶液。骤冷期间，观察到了气体放出。用浓的氢氧化铵溶液(200ml)将所得混合物碱化至pH＝9。然后用乙酸乙酯(8×400mL)萃取。将合并的有机层干燥(硫酸镁)，过滤，并真空浓缩，获得了中间体H，为澄清的浅黄色油状物(36.6g，产率为89％)。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ8.74(q，1H)，8.53(dd，1H)，7.99(m，1H)，7.48(m，1H)，5.53(t，1H)，4.60(d，2H)，2.81(d，3H)；MS m/z 167[M+H]+.
中间体I-N制备[2-(N-取代的)氨基羰基-4-吡啶基]甲醇中间体的一般方法 在0℃向胺2(3当量)在苯中的溶液中加入三甲基铝(3当量)。观察到释放出气体，然后温热至室温并搅拌1小时(Lipton，M.F.等人，Org.Synth.Coll.Vol.6，1988，492或Levin，J.I.等人，Synth.Comm.，1982，12，989)。将已知的甲醇1(1当量，Hadri，A.E.；Leclerc，G.Heterocyclic Chem，1993，30，631)加到铝试剂中，并将该混合物加热回流1小时。用水中止该反应，并浓缩。一般通过硅胶柱色谱(20/1乙酸乙酯/甲醇)纯化粗产物，以获得本标题化合物3。一般通过LC/MS和NMR光谱法证实终产物。
*使用二氯甲烷而不是苯作为溶剂。
实施例10制备4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)噻吩并[2，3-d]哒嗪 给25mL三颈园底烧瓶装配上搅拌棒和温度计。向烧瓶中加入实施例8产物(0.475g，1.29mmol)、硫酸铁七水合物(0.179g，0.64mmol)、甲酰胺(11.15mL，281mmol)和浓硫酸(0.14mL)。将该混合物在室温搅拌30分钟，然后向该混合物中滴加H2O2(0.2mL，6.44mmol)。将该反应在室温再搅拌1小时，然后用30分钟加热至55℃。将该反应在该温度下保持3小时，然后冷却至室温。将柠檬酸钠水溶液(0.27M，1mL)加到该反应中，然后分离各层，用乙酸乙酯(4×5mL)萃取水层。合并有机层，干燥(硫酸镁)，并通过旋转蒸发浓缩。将所得固体置于热的丙酮中，并通过过滤与任何剩余固体分离开。然后通过旋转蒸发将滤液浓缩，并将所得残余物置于热的甲醇中，并通过过滤收集白色固体。所需化合物(0.14g，0.034mmol；产率为2.7％)；熔点＝233℃；ES MS(M+H)+＝412；TLC(二氯甲烷-甲醇-丙酮，95∶2.5∶2.5)；Rf＝0.20。
实施例11制备4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)噻吩并[2，3-d]哒嗪
使用制备实施例10所用的方法，用甲基甲酰胺代替甲酰胺，来制备本标题化合物1H NMR(DMSO-d6)8.80(d，1)，8.62(d，1)，8.31(d，1)，8.09(d，2)，7.86(d，2)，7.65(d，1)，7.35(d，2)，5.74(s，2)，2.84(d，3)；ES MS(M+H)+＝426(ES)；Rf(95/2.5/2.5DCM/MeOH/丙酮)＝0.469.
实施例12制备1-(4-氯苯基氨基)-4-(2-氨基羰基-4-吡啶基甲基)异喹啉 使用制备实施例10所用的方法，用实施例4产物代替实施例8产物，来制备本标题化合物。通过制备性TLC板(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯，产率为19％)纯化粗产物，获得了本标题化合物，为黄色固体。
1H-NMR(MeOH-d4)8.42(d，1H)，8.34(d，1H)，7.94(s，1H)，7.88(s，1H)，7.55 to7.76(m，5H)，7.26 to 7.36(m，3H)，4.34(s，2H)；MS ES 389(M+H)+；TLC(1∶4v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.44。
实施例13制备1-(4-氯苯基氨基)-4-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲基)异喹啉
使用制备实施例11所用的方法，用实施例4产物代替实施例8产物，来制备本标题化合物。通过柱色谱(2∶3v/v己烷-乙酸乙酯，产率为20％)纯化粗产物，获得了本标题化合物，为黄色固体。
1H-NMR(MeOH-d4)8.42(d，1H)，8.33(d，1H)，7.88(d，2H)，7.55 to 7.77(m，5H)，7.28 to 7.36(m，3H)，434(s，2H)，2.89(s，3H)；MS ES 403(M+H)+；TLC(2∶3v/v己烷-乙酸乙酯)Rf＝0.30。
实施例14和15制备4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪和4-(4-氯苯基氨基)-2-甲基氨基羰基-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪 在室温，向实施例9终产物(19.20g，54.4mmol)在N-甲基甲酰胺(200mL)和蒸馏水(20mL)内的悬浮液中滴加浓硫酸(2.9mL，54.4mmol)。将该混合物搅拌直至其变成澄清溶液。向该溶液中一次性加入FeSO4.7H2O(1.51g，5.43mmol)，然后加入羟基胺-O-磺酸(HOSA，1.84g，16.3mmol)。以10分钟的时间间隔将加入FeSO4.7H2O和HOSA的操作重复11次。HPLC分析表明大多数原料已消耗完。用冰浴将该反应混合物冷却。在剧烈搅拌下加入柠檬酸钠溶液(600mL，1M，600mmol)。将所得悬浮液再剧烈搅拌10分钟。通过过滤收集固体，用水洗涤(3×100mL)，并在50℃真空干燥16小时。通过经由硅胶垫过滤纯化粗产物(21g)，用5％甲醇/二氯甲烷洗脱。将所得3.7g产物在CH3CN中重结晶(125mL，煮沸1.5小时)。通过过滤收集固体，用CH3CN(2×15mL)洗涤，并在50℃真空干燥16小时。终产物(4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪)是浅黄色固体(3.38g，15.2％)。熔点＝223-224℃。
通过上述硅胶垫过滤来分离主要副产物。通过1H NMR、2D NMR、元素分析、和MS来确定副产物4-(4-氯苯基氨基)-2-甲基氨基羰基-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪的结构。
1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ9.32(brs，1H)，8.93(q，1H)，8.79(q，1H)，8.63(dd，1H)，8.12(m，1H)，7.91(m，3H)，7.70(dd，1H)，7.35(m，2H)，5.76(br s，2H)，2.81(d，6H).MS m/z 467[M+H]+.
实施例14A制备4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪-方法2 在室温，向得自实施例9步骤5的中间体(10.0g，35.7mmol)、中间体H(12.4g，74.6mmol)、和18-冠-6(0.42g，1.59mmol)在甲苯(100mL)内的混合物中一次性加入KOH粉末(4.4g，85％，66.7mmol)。在剧烈搅拌下将该反应混合物加热至85±2℃。将该反应混合物在该温度下剧烈搅拌过夜。然后将其冷却至室温，倾出甲苯溶液，向树胶状残余物中加入水(100mL)。将所得混合物剧烈搅拌直至起变成自由流动的悬浮液。通过过滤收集固体，用水洗涤(2×10mL)，并在45℃真空干燥16小时。将该黄色/棕色固体悬浮在乙腈(70mL)中，并将该悬浮液在回流状态下搅拌2小时。将其冷却至室温后，通过过滤收集固体，用少量乙腈洗涤，并在45℃真空干燥过夜。以46％的产率分离出了产物(6.73g)，为浅黄色固体。
实施例16制备4-(4-氯苯基氨基)-7-(2-氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪 使用制备实施例14所用的方法，但是用甲酰胺代替N-甲基甲酰胺制备本标题化合物。该反应是用500mg实施例9终产物和按比例量的溶剂和试剂进行的。在75×30mm C18柱上通过HPLC纯化粗产物，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以10ml/分钟的速度线性梯度洗脱10分钟，获得了18mg本标题化合物，为黄色固体HPLC(50×4.6mm YMC CombiScreen_C18柱，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以3ml/分钟的速度线性梯度洗脱5分钟，在254nm进行UV检测)2.35分钟，峰；MS ES 396(M+H)+。
实施例17制备4-(4-氯苯基氨基)-7-(苯并噻唑-6-基氨基)噻吩并[2，3-d]哒嗪
向得自实施例8步骤4的二氯化物(1.00g，4.90mmol)中加入对氯苯胺(622mg，4.90mmol)和无水乙醇(10.0mL)。将该混合物在95℃回流2小时，然后冷却至室温。过滤所形成的黄色沉淀(2)，依次用异丙醇、4.0N KOH、H2O、和己烷洗涤。然后将滤液(2)与6-氨基苯并噻唑(883mg，5.88mmol)在10mL正丁醇中混合，并在150℃加热过夜。将该反应冷却至室温，然后通过旋转蒸发除去溶剂。将残余物用4.0N KOH溶液处理，用二氯甲烷(50mL)萃取，干燥(硫酸镁)，并将溶剂蒸发。通过快速硅胶色谱纯化粗产物，使用95％二氯甲烷/甲醇作为洗脱剂。通过LC/MS和NMR证实纯的本标题化合物的结构TLC(30％乙酸乙酯/己烷)Rf(3)＝0.20；1H NMR(DMSO)δ7.2(dd，3H)，7.38(dd，3H)，7.65(d，1H)，8.0(d，1H)，8.45(d，1H)，8.8(s，1H)；LC/MS m/z 410rt＝4.21min.
实施例18制备4-(二氢茚-5-基氨基)-7-(苯并噻唑-6-基氨基)噻吩并[2，3-d]哒嗪 使用制备实施例17所用的方法，用5-氨基二氢茚代替4-氯苯胺来制备本标题化合物。通过快速硅胶柱色谱纯化粗产物，用30％乙酸乙酯/己烷洗脱。通过LC/MS和NMR证实纯的本标题化合物的结构TLC(30％乙酸乙酯/己烷)Rf(3)＝0.20；(3)1H NMR(DMSO)δ2.0(m，2H)，2.85(m，4H)，7.18(d，1H)，7.8(d，1H)，7.95(d，1H)，8.10(d，1H)，8.18(d，1H)，8.7(d，2H)，9.1(d，2H)，LC/MS m/z 414rt＝4.43min.
实施例19制备4-(5-溴二氢吲哚-1-基)-7-(4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪
将得自实施例9步骤4的4，7-二氯[2，3-d]呋喃并哒嗪(95mg，0.50mmol)和5-溴二氢吲哚(100mg，0.50mmol)在60mL无水乙醇中于95℃回流2小时。将该反应混合物冷却至室温，过滤出所形成的沉淀，用异丙醇、4.0N KOH、水、和己烷洗涤，然后干燥。该中间体的纯度约为95％(rt＝4.72，(M+H)+350)，不用进一步纯化直接用于下一步骤中。将4-吡啶基甲醇(28mg，0.26mmol)和氢化钠(60％，50mg，1.25mmol)在20mL无水四氢呋喃中于0℃、氩气氛下搅拌20分钟，然后加入44mg上述中间体(0.13mmol)。将该反应在0℃搅拌2小时，将温度升至室温。将该混合物再搅拌12小时，并将溶剂减压蒸发。将所获得的固体溶解在50mL二氯甲烷中，并用碳酸钾溶液和水洗涤。分离出有机层，干燥(硫酸镁)，并减压蒸发。通过硅胶制备性TLC(Rf＝0.3)纯化粗产物，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脱。通过LC/MS和NMR证实纯的本标题化合物的结构1H NMR(CDCl3)δ3.20(m，2H)，4.30～4.50(m，2H)，5.60(s，2H)，6.9～8.0(m，7H)，8.60(m，2H)；LC/MS(M+H)+423rt＝4.49min.
实施例20制备4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪
向得自实施例9步骤4的4，7-二氯[2，3-d]呋喃并哒嗪(400mg，2.12mmol，1当量)和对甲氧基苯胺(p-MeOC6H4NH2)(260mg，2.12mmol，1当量)在DME(5mL)中的悬浮液中加入水(1mL)。将所得溶液在50℃加热48小时。冷却至室温后，通过过滤除去棕色沉淀，将滤液真空浓缩，获得了粗产物，为棕色固体。用二氯甲烷研制该棕色固体，获得了292mg(50％)通过LC/MS和NMR证实的中间体4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-氯呋喃并[2，3-d]哒嗪。将该中间体(292mg，1.06mmol，1当量)、(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基)甲醇(中间体H，529mg，3.18mmol，3当量)和18-冠-6(42mg，0.16mmol，15mol％)在甲苯(4mL)中的悬浮液于室温搅拌20分钟。然后加入KOH(178mg，3.18mmol，3当量)，并将该反应混合物在80℃加热36小时。冷却至室温后，加入水(10mL)，将该混合物剧烈搅拌直至形成细的白色悬浮液。将该悬浮液过滤，用水和乙醚洗涤，获得了125mg(29％)所需产物，为浅黄色固体(M+H)+406；Rf＝0.50(100％乙酸乙酯)。
实施例21制备4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-(4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪 使用制备实施例20所用的方法，用4-吡啶基甲醇代替(2-甲基氨基羰基-4-吡啶基)甲醇来制备本标题化合物。通过快速柱色谱分离出纯的产物(M+H)+349；Rf＝0.3(95∶5二氯甲烷/甲醇)。
实施例22制备4-(4-甲氧基苯基氨基)-7-(2-氨基羰基-4-吡啶基甲氧基)呋喃并[2，3-d]哒嗪 使用制备实施例16所用的方法，用实施例21产物代替实施例9产物来制备本标题化合物。该反应是用250mg原料和按比例量的溶剂和试剂进行的。在75×30mm C18柱上通过HPLC纯化粗产物，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以10ml/分钟的速度线性梯度洗脱10分钟，获得了16mg本标题化合物，为黄色固体HPLC(50×4.6mm YMC CombiScreen_C18柱，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以3ml/分钟的速度线性梯度洗脱5分钟，在254nm进行UV检测)1.98分钟，峰；MS ES 392(M+H)+。
实施例23-80通过方法A-1、A-2和A-3制备本发明化合物 方法A-1将等当量的二氯化物(1)与M-NH2在适当量无水乙醇中于95℃回流2小时。将该反应混合物冷却至室温，过滤所形成的沉淀(2)，并依次用异丙醇、4.0N KOH、水和己烷洗涤，然后干燥。然后将滤液(2)与1.2当量Q-NH2在适当量正丁醇中于150℃反应10小时。将该反应冷却至室温，然后将溶剂减压蒸发。用4.0N KOH水溶液处理残余物，并用二氯甲烷萃取。将有机层干燥(硫酸镁)，并蒸发。通过制备薄层色谱(TLC)或快速硅胶色谱纯化粗产物(3)，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脱。通过LC/MS和/或NMR证实终产物。下表所示实施例23-25、48、和76-80的本发明化合物是通过方法A-1制得的。
方法A-2将1当量的二氯化物(1)与2.2当量M-NH2在适当量正丁醇中于150℃回流10小时。将该反应混合物冷却至室温，过滤所形成的沉淀(4)，并依次用异丙醇、4.0N KOH、水和己烷洗涤，然后干燥。通过制备TLC或快速硅胶色谱纯化粗产物(4)，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脱。通过LC/MS和/或NMR证实终产物。下表所示实施例26-33和75的本发明化合物是通过方法A-2制得的。
方法A-3将1当量二氯化物(1)和1当量M-NH2悬浮在DME(0.3M)中，加入水直至形成溶液。将该反应混合物在65℃加热48小时。冷却至室温后，过滤出所形成的沉淀，用DME洗涤，获得了通过LC/MS和NMR证实的中间体产物(2)。在某些情况下，通过制备性TLC或用其它溶剂洗涤来进一步纯化中间体(2)。将(2)(1当量)、甲醇(3)(3当量)、和18-冠-6(10mol％)在甲苯(0.3M)中的悬浮液在室温搅拌10分钟。然后加入KOH(3当量)，并将该反应混合物在80℃加热24小时。冷却至室温后，加入水，将该混合物剧烈搅拌直至形成悬浮液。将该悬浮液过滤，并用水洗涤，获得了所需产物(4)。在某些情况下使用制备性TLC和/或用其它溶剂洗涤来进一步纯化终产物。通过LC/MS和NMR光谱确定终产物。通过LC/MS和NMR证实终产物。下表所示实施例34-47、49-74、和81-82D的本发明化合物是通过方法A-3制得的。
通过平行方法A-1、A-2或A-3制备的化合物





*该表中的所有化合物都是通过HPLC-正离子电喷雾质谱(HPLCES-MS，条件如下)进行特征确定。此外，某些化合物是在硅胶板上通过TLC进行特征确定，并示出了Rf值和溶剂。对于表中的其它实施例，给出了HPLC保留时间；aHPLC-电喷雾质谱(HPLC ES-MS)是用装配有四级泵、可变波长检测器、YMC Pro C18 2.0mm×23mm柱、和具有电喷雾电离作用的Finnigan LCQ离子阱质谱仪的Hewlett-Packard1100HPLC获得的。在HPLC上用90％A-95％B梯度洗脱4分钟。缓冲液A是98％水，2％乙腈和0.02％TFA。缓冲液B是98％乙腈，2％水和0.018％TFA。根据离子源中离子的数目使用不同的离子时间从140-1200amu扫描光谱；b除了HPLC ES-MS实验外，还实施进行UV峰检测的HPLC测定，并且条件是50×4.6mm YMC CombiScreen_C18柱，用含有0.1％三氟乙酸的10-100％乙腈在水中的混合物以3ml/分钟的速度线性梯度洗脱5分钟，在254nm进行UV检测；c在C18柱上通过RP-HPLC纯化产物，使用含有三氟乙酸的水/乙腈进行梯度洗脱，加入三氟乙酸使得可通过将纯产物蒸发来分离出三氟乙酸盐；d如所指出的那样，在方法A-1的步骤2中使用4-吡啶基甲醇而不是胺；e关于5-氨基-2，3-二氢苯并呋喃的制备，参见Mitchell，H.；Leblanc，Y.J.Org.Chem.1994，59，682-687。f关于制备已知的TBS保护的醇中间体的参考文献是Parsons，A.F.；Pettifer，R.M.J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1998，651。
下式所示结构部分 的脱保护是按照下述方法完成的在室温将3当量1.0M TBAF的THF溶液加到保护的醇在THF内的溶液(0.05M)中。将该反应混合物在室温搅拌1小时，用水中止反应，然后用乙酸乙酯萃取。
实施例83-92通过方法B-1制备异喹啉
方法B-1将在8-mL小瓶内的实施例1步骤1的二溴异喹啉(5.29mg，0.1mmol)和M-NH2(0.2mmol)在1mL正丁醇中于90℃加热36小时。将该混合物冷却至室温，将溶剂减压蒸发。向该小瓶中加入4-巯基吡啶(23mg，0.2mmol)和碳酸铯(67mg，0.2mmol)。将该混合物在180℃加热1小时，并冷却至室温。向该小瓶中加入甲醇(2mL)，将该混合物超声10分钟并过滤。收集反应混合物的甲醇溶液，并减压蒸发。通过LC/MS证实产物的形成。下表所示实施例83-92的本发明化合物是通过方法B-1制得的。
通过方法B-1制得的化合物

*HPLC-电喷雾质谱(HPLC ES-MS)是用装配有四级泵、可变波长检测器、YMC Pro C18 2.0mm×23mm柱、和具有电喷雾电离作用的FinniganLCQ离子阱质谱仪的Hewlett-Packard 1100 HPLC获得的。在HPLC上用90％A-95％B梯度洗脱4分钟。缓冲液A是98％水，2％乙腈和0.02％TFA。缓冲液B是98％乙腈，2％水和0.018％TFA。根据离子源中离子的数目使用不同的离子时间从140-1200amu扫描光谱。
实施例93-105通过平行合成制备本发明新的酞嗪化合物使用如上所述的方法A-1或A-2，由1，4-二氯酞嗪(其制备参见Novartis专利WO 98/35958，11.02.98)而不是二氯杂环并哒嗪和适当的二环化合物以及取代的苯胺来制备本发明新的邻苯二甲酰亚胺化合物93-105。
通过方法A-1或A-2制备的新的酞嗪

*HPLC-电喷雾质谱(HPLC ES-MS)是用装配有四级泵、可变波长检测器、YMC Pro C18 2.0mm×23mm柱、和具有电喷雾电离作用的FinniganLCQ离子阱质谱仪的Hewlett-Packard 1100 HPLC获得的。在HPLC上用90％A-95％B梯度洗脱4分钟。缓冲液A是98％水，2％乙腈和0.02％TFA。缓冲液B是98％乙腈，2％水和0.018％TFA。根据离子源中离子的数目使用不同的离子时间从140-1200amu扫描光谱。
实施例106-114制备实施例14的盐将实施例14的产物(1.50g，3.66mmol)作为在甲醇(20ml)中的浆状液搅拌，迅速滴加甲苯磺酸水合物(0.701g，3.67mmol)在甲醇(5ml加5ml洗涤)中的溶液。所有物质在5分钟内溶解，获得了黄色溶液。加入无水乙醚(30ml)，并继续搅拌5分钟直至开始沉淀出固体。通过在冰/水浴中搅拌45分钟将所得混合物急冷，然后通过过滤收集固体标题产物(实施例104)，用乙醚洗涤，在真空烘箱中于55℃干燥直至NMR分析不存在溶剂(1.5小时)。按照类似方法通过使用不是甲苯磺酸的不同的酸来制备其它化合物。在第一个步骤中按比例放大和使用较少甲醇一般会使得盐更快地沉淀出来，并且使用不是乙醚的所指出的不同溶剂可有助于结晶出单独的盐。在某些情况下，首先通过真空蒸发除去甲醇。最后根据物质的量和所用的特定酸干燥1.5小时-几天。
制得的实施例14的盐 *对于HCl，分离出的是二盐而不是1∶1盐。如果使用小于2当量的酸也是如此。
生物测定和体外测试数据KDR测定将KDR激酶的胞质激酶结构域作为6His融合蛋白在Sf9昆虫细胞中表达。用Ni++螯合柱纯化融合蛋白的KDR结构域。用在100μl HEPES缓冲液(20mM HEPES，pH 7.5，150mM NaCl，0.02％硫汞撒)中的5μg聚(Glu4；Tyr1)(Sigma Chemical Co.，St Louis，MO)将96-孔ELISA板于4℃包被过夜。在使用前，用HEPES，NaCl缓冲液洗涤该平板，用1％BSA，0.1％吐温20在HEPES，NaCl缓冲液中的溶液阻断。
将测试化合物在100％DMSO中以半对数稀释方式从4mM-0.12μM作系列稀释。将这些稀释液在水中进一步稀释20倍，以获得在5％DMSO中的化合物溶液。用85μl测定缓冲液(20mM HEPES，pH 7.5，100mMKCl，10mM MgCl2，3mM MnCl2，0.05％甘油，0.005％Triton X-100，1mM巯基乙醇，含有或不含有3.3μM ATP)负载测定板后，将5μl稀释的化合物加到100μl最终测定溶液中。最终浓度为10μM-0.3nM(在0.25％DMSO中)。通过加入10μl(30ng)KDR激酶结构域来开始测定。
将测定物与测试化合物或载体在轻微搅动下于室温培养60分钟，用磷酸酪氨酸(PY)洗涤这些孔，用抗-磷酸酪氨酸(PY)，mAb克隆4G10(Upstate Biotechnology，Lake Placid，NY)探测。用抗-小鼠IgG/HRP缀合物(Amersham International plc，Buckinghamshire，England)检测PY/抗-PY复合物。通过与100μl 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺溶液(Kirkegaard and Perry，TMB Microwell 1 Component过氧化物酶底物)培养来定量测定磷酸酪氨酸。通过加入100μl基于1％HCl的终止溶液(Kirkegaard and Perry，TMB 1 Component StopSolution)来停止显色。
在96-孔平板读数计SpetraMax 250(Molecular Devices)中在450nm通过分光光度法测定光密度。从所有ODs减去背景(在测定中不含ATP)OD值，并依据下述公式计算抑制百分比％抑制＝[(OD(载体对照)-OD(含有化合物))×100]/[OD(载体对照)-OD(没有加入ATP)]使用化合物浓度对抑制百分比，用最小平方分析确定IC50值。在该测定中IC50≤100nM的化合物包括实施例1、2、4、6、8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、22、23、24、34、37、38、39、40、42、43、44、47、49、51、52、53、54、56、57、59、60、62、63、65、66、68、69、70、71、72、73、74、75、78、82B、82C、82D、85、88、93、96、97、98、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、和112的化合物。IC50值为100nM-1000nM的化合物包括实施例3、5、7、21、27、28、35、36、45、46、48、50、55、58、61、64、67、76、79、82A、89、95、99、和100的化合物。IC50值＞1000nM的化合物包括实施例26、29、30、31、32、33、41、77、80、81、和94的化合物。没有列出的实施例化合物可假定具有弱的活性，其IC50值大于1μM。
细胞机械测定-抑制3T3 KDR磷酸化在补充有10％新生小牛血清、低葡萄糖、25mM/L丙酮酸钠、盐酸吡哆醇和0.2mg/ml G418(Life Technologies Inc.，Grand Island，NY)的DMEM(Life Technologies，Inc.，Grand Island，NY)中生长表达全长KDR受体的NIH3T3细胞.将细胞在胶原I-包被的T75烧瓶(Becton Dickinson Labware，Bedford，MA)中于潮湿的5％CO2气氛下在37℃保持。
将15000个细胞铺到胶原I-包被的96-孔平板的各孔内的DMEM生长培养基中。6个小时后，将细胞洗涤，并用不含血清的DMEM替换培养基。过夜培养以静止细胞后，用含有0.1％牛白蛋白(SigmaChemical Co.，St Louis，MO)的Dulbecco’s磷酸盐缓冲盐水(LifeTechnologies，Inc.，Grand Island，NY)替换培养基。向细胞(以1％终浓度在DMSO中)中加入不同浓度(0-300nM)的测试化合物后，将细胞在室温培养30分钟。然后用VEGF(30ng/ml)将细胞在室温处理10分钟。VEGF刺激后，除去缓冲液，通过加入150μl提取缓冲液(50mM Tris，pH 7.8，补充10％甘油，50mM BGP，2mM EDTA，10mM NaF，0.5mM NaVO4，和0.3％TX-100)将细胞在4℃裂解30分钟。
为了评价受体磷酸化，将100微升各细胞裂解物加到用300ng抗体C20(Santa Cruz Biotechnology，Inc.，Santa Cruz，CA)预包被的ELISA板的孔中。培养60分钟后，洗涤该平板，用抗-磷酸酪氨酸mAb克隆4G10(Upstate Biotechnology，Lake Placid，NY)探测结合的KDR的磷酸酪氨酸。将平板洗涤，将各孔与抗-小鼠IgG/HRP缀合物(Amersham International plc，Buckinghamshire，England)培养60分钟。洗涤这些孔，通过每个孔加入100μl 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺溶液(Kirkegaard and Perry，TMB Microwell 1 Component过氧化物酶底物)来定量测定磷酸酪氨酸。通过加入100μl基于1％HCl的终止溶液(Kirkegaard and Perry，TMB 1 Component StopSolution)来停止显色。
在96-孔平板读数计(SpetraMax 250，Molecular Devices)中在450nm通过分光光度法测定光密度(OD)。从所有ODs减去背景(未加入VEGF)OD值，并依据下述公式计算抑制百分比％抑制＝[(OD(VEGF对照)-OD(含有化合物))×100]/[OD(VEGF对照)-OD(未加入VEGF)]使用化合物浓度对抑制百分比，用最小平方分析确定某些实施例化合物的IC50。在该测定中IC50≤20nM的化合物包括实施例2、6、10、11、14、23、96、101、102、103、104、105的化合物。IC50值为20nM-50nM的化合物包括实施例1、4、8、9、12、13、17、24、93、98的化合物。IC50值为50nM-400nM的化合物包括实施例97、99、和100的化合物。
Matrigel_血管生成模型制备Matrigel塞和体内期Matrigel_(CollaborativeBiomedical Products，Bedford，MA)是由鼠肿瘤提取的基底膜，其主要由昆布氨酸、胶原IV和类肝素硫酸蛋白多糖组成。其是作为在4℃的无菌液体提供的，但是在37℃会迅速形成固体凝胶。
在4℃将液体Matrigel与SK-MEL2人肿瘤细胞混合，其中所述肿瘤细胞用含有具有可选择标记物的鼠VEGF基因的质粒转染过。在选择下将肿瘤细胞体外生长，并将细胞与冷的液体Matrigel以2×106/0.5ml的比例混合。用25规格针头在接近腹部中线处皮下植入0.5毫升。从植入的当天开始，将测试化合物作为在乙醇/Cremaphor EL/盐水(12.5％∶12.5％∶75％)中的溶液以30、100、和300mg/kg的剂量每天口服给药一次。植入后12天，给小鼠实施安乐死，收集Matrigel小团以分析血红蛋白含量。
血红蛋白测定在4℃将Matrigel小团置于4体积(w/v)裂解缓冲液(20mM Tris pH 7.5，1mM EGTA，1mM EDTA，1％Triton X-100[EM Science，Gibbstown，N.J.]，和完全的、不含EDTA的蛋白酶抑制剂鸡尾酒[Mannheim，Germany])中，并在4℃均化。将均化物在冰上于振摇条件下培养30分钟，并以14K×g于4℃离心30分钟。将上清液转移到急冷的microfuge管中，并在4℃贮存以进行血红蛋白测定。
将小鼠血红蛋白(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)以5mg/ml的浓度悬浮在高压灭菌水(BioWhittaker，Inc，Walkersville，MD.)中。在裂解缓冲液(见上文)中从500微克/ml到30微克/ml产生标准曲线。将标准曲线和裂解物样本以一式两份的方式、5微升/孔的量加到聚苯乙烯96-孔平板中。使用Sigma Plasma血红蛋白试剂盒(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)，在室温将TMB底物重悬在50ml乙酸溶液中。向每个孔中加入100微升底物，然后在室温加入100微升/孔过氧化氢溶液。将平板在室温培养10分钟。
在96-孔平板读数计SpetraMax 250微板分光光度计系统(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)中在600nm通过分光光度法测定光密度。从所有孔中减去背景裂解缓冲液读数。
依据下述公式计算总的样本血红蛋白含量总血红蛋白＝(样本裂解物体积)×(血红蛋白浓度)从每个含有细胞的Matrigel样本的总血红蛋白减去不含细胞的Matrigel样本的平均总血红蛋白。依据下述公式计算抑制百分比％抑制＝(平均总血红蛋白药物治疗的肿瘤裂解物)×100/(平均总血红蛋白未治疗的肿瘤裂解物)以100和300mg/kg的剂量口服给药的实施例8化合物在该测定中表现出显著活性，相对于载体对照动物，得自给药动物的Matrigel样本的总血红蛋白含量被抑制了＞60％。在该模型中未测定其它实例化合物。
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权利要求
1.具有如下所示通式的化合物或其可药用的盐或前药 其中R1和R2i)独立地代表H或低级烷基；ii)一起形成下述结构所示的桥基 其中连接是经由末端碳原子实现的；iii)一起形成下述结构所示的桥基 其中连接是经由末端碳原子实现的；iv)一起形成下述结构所示的桥基 其中一个或两个环单元T1是N，而其它环单元是CH或CG1，且连接是经由末端原子实现的；并且其中m是0或1-4的整数；且G1是独立地选自下列的取代基●-N(R6)2；●-NR3COR6；●卤素；●烷基；●环烷基；●低级链烯基；●低级环烯基；●卤素取代的烷基；●氨基取代的烷基；●N-低级烷基氨基取代的烷基；●N，N-二低级烷基氨基取代的烷基；●N-低级链烷酰基氨基取代的烷基；●羟基取代的烷基；●氰基取代的烷基；●羧基取代的烷基；●低级烷氧基羰基取代的烷基；●苯基低级烷氧基羰基取代的烷基；●卤素取代的烷基氨基；●氨基取代的烷基氨基；●N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；●N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；●N-低级链烷酰基氨基取代的烷基氨基；●羟基取代的烷基氨基；●氰基取代的烷基氨基；●羧基取代的烷基氨基；●低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；●苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；●-OR6；●-SR6；●-S(O)R6；●-S(O)2R6；●卤代低级烷氧基；●卤代低级烷硫基；●卤代低级烷基磺酰基；●-OCOR6；●-COR6；●-CO2R6；●-CON(R6)2；●-CH2OR3；●-NO2；●-CN；●脒基；●胍基；●磺基；●-B(OH)2；●任选取代的芳基；●任选取代的杂芳基；●任选取代的饱和杂环基；●任选取代的饱和杂环基烷基；●任选取代的部分不饱和杂环基；●任选取代的部分不饱和杂环基烷基；●-OCO2R3；●任选取代的杂芳基烷基；●任选取代的杂芳氧基；●-S(O)p(任选取代的杂芳基)；●任选取代的杂芳基烷氧基；●-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；●-CHO；●-OCON(R6)2；●-NR3CO2R6；●-NR3CON(R6)2；R3是H或低级烷基；R6独立地选自●H；●烷基；●环烷基；●任选取代的芳基；●任选取代的芳基低级烷基；●低级烷基-N(R3)2；和●低级烷基-OH；R4是H、卤素、或低级烷基；p是0、1、或2；X选自O、S、和NR3；Y选自●低级亚烷基；●-CH2-O-；●-CH2-S-；●-CH2-NH-；●-O-；●-S-；●-NH-；●-(CR42)n-S(O)p-(5-元杂芳基)-(CR42)s-；●-(CR42)n-C(G2)(R4)-(CR42)s-；其中n和s分别独立地为0或1-2的整数；且G2选自-CN、-CO2R3、-CON(R6)2、和-CH2N(R6)2；●-O-CH2-；●-S(O)-；●-S(O)2-；●-SCH2-；●-S(O)CH2-；●-S(O)2CH2-；●-CH2S(O)-；和●-CH2S(O)2-；Z是N或CR4；q是1或2；G3是选自下列的单价或二价基团●低级烷基；●-NR3COR6；●羧基取代的烷基；●低级烷氧基羰基取代的烷基；●-OR6；●-SR6；●-S(O)R6；●-S(O)2R6；●-OCOR6；●-COR6；●-CO2R6；●-CH2OR3；●-CON(R6)2；●-S(O)2N(R6)2；●-NO2；●-CN；●任选取代的芳基；●任选取代的杂芳基；●任选取代的饱和杂环基；●任选取代的部分不饱和杂环基；●任选取代的杂芳基烷基；●任选取代的杂芳氧基；●-S(O)p(任选取代的杂芳基)；●任选取代的杂芳基烷氧基；●-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；●-OCON(R6)2；●-NR3CO2R6；●-NR3CON(R6)2；和●结构T2＝T2-T3的二价桥基，其中每个T2独立地代表N、CH、或CG3′；且T3代表S、O、CR4G3′、C(R4)2、或NR3；其中G3′代表任意上述定义的单价G3；且末端T2与L连接，T3与D连接，形成5-元稠合环；A和D是CH；B和E是CH；L是CH；条件是形成的苯环携带所述结构T2＝T2-T3的二价桥基作为G3取代基；J是选自下列的环●芳基；●吡啶基；和●环烷基；q′代表环J上的取代基G4的数目，并且是0、1、2、3、4、或5，且G4是选自下列的单价或二价基团●-N(R6)2；●-NR3COR6；●卤素；●烷基；●环烷基；●低级链烯基；●低级环烯基；●卤素取代的烷基；●氨基取代的烷基；●N-低级烷基氨基取代的烷基；●N，N-二低级烷基氨基取代的烷基；●N-低级链烷酰基氨基取代的烷基；●羟基取代的烷基；●氰基取代的烷基；●羧基取代的烷基；●低级烷氧基羰基取代的烷基；●苯基低级烷氧基羰基取代的烷基；●卤素取代的烷基氨基；●氨基取代的烷基氨基；●N-低级烷基氨基取代的烷基氨基；●N，N-二低级烷基氨基取代的烷基氨基；●N-低级链烷酰基氨基取代的烷基氨基；●羟基取代的烷基氨基；●氰基取代的烷基氨基；●羧基取代的烷基氨基；●低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；●苯基低级烷氧基羰基取代的烷基氨基；●-OR6；●-SR6；●-S(O)R6；●-S(O)2R6；●卤代低级烷氧基；●卤代低级烷硫基；●卤代低级烷基磺酰基；●-OCOR6；●-COR6；●-CO2R6；●-CON(R6)2；●-CH2OR3；●-NO2；●-CN；●脒基；●胍基；●磺基；●-B(OH)2；●任选取代的芳基；●任选取代的杂芳基；●任选取代的饱和杂环基；●任选取代的部分不饱和杂环基；●-OCO2R3；●任选取代的杂芳基烷基；●任选取代的杂芳氧基；●-S(O)p(任选取代的杂芳基)；●任选取代的杂芳基烷氧基；●-S(O)p(任选取代的杂芳基烷基)；●-CHO；●-OCON(R6)2；●-NR3CO2R6；●-NR3CON(R6)2；和●连接于并连接环J相邻位置的形成稠合环的二价桥基，所述桥基具有下列结构a) 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG4′；T3代表S、O、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；其中G4′代表任意上述定义的单价G4；并且经由末端原子T2和T3与环J连接；b) 其中每个T2独立地代表N、CH、或CG4′；其中G4′代表任意上述定义的单价G4；和条件是最多有两个桥原子T2可以是N；并且经由末端原子T2与环J连接；和c) 或 其中每个T4、T5、和T6独立地代表O、S、CR4G4′、C(R4)2、或NR3；其中G4′代表任意上述定义的单价G4；并且经由末端原子T4或T5与环J连接；条件是i)当一个T4是O、S、或NR3时，另一个T4是CR4G4′或C(R4)2；ii)包含T5和T6原子的桥基团可含有最多两个杂原子O、S、或N；和iii)在包含T5和T6原子的桥基团中，当一个T5和一个T6是O原子，或者两个T6是O原子时，所述O原子被至少一个碳原子分隔；当G4是位于环J上与连接基团-(CR42)p-相邻的烷基，且X是NR3，其中R3是烷基取代基时，则G4和X上的烷基取代基R3可以连接形成结构-(CH2)p′-的桥基，其中p′是2、3、或4，条件是p和p′之和是2、3、或4，从而形成5、6、或7元含氮环；另外的条件是-在G1、G2、G3、和G4中，当两个基团R3或R6分别是烷基，并且位于相同N原子上时，它们可通过一个键、O、S、或NR3连接以形成具有5-7个环原子的含氮杂环；-当芳基、杂芳基、或杂环基环任选被取代时，该环可携带最高达5个独立地选自下列的取代基氨基、一低级烷基取代的氨基、二低级烷基取代的氨基、低级链烷酰基氨基、卤素、低级烷基、卤代低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基、卤代低级烷氧基、卤代低级烷硫基、低级链烷酰氧基、-CO2R3、-CHO、-CH2OR3、-OCO2R3、-CON(R6)2、-OCON(R6)2、-NR3CON(R6)2、硝基、脒基、胍基、巯基、磺基、和氰基；和-当任何烷基连接到O、S、或N上，并携带羟基取代基时，则所述羟基取代基与烷基所连接的O、S、或N被至少两个碳原子分隔开。
2.权利要求1的化合物，其中在包含A、B、D、E、和L以及结构T2＝T2-T3的二价桥基的环中，末端T2代表N，且所述桥基的T3单元代表S、O、CR42、或NR3。
3.包含权利要求1的化合物和可药用载体的药物组合物。
4.权利要求1的化合物在制备用于治疗患有特征是异常血管生成或高渗透过程的病症的哺乳动物的药物中的用途。
5.权利要求4的用途，其中所述病症是肿瘤生长；视网膜病，包括糖尿病性视网膜病、缺血性视网膜-静脉堵塞、早熟性视网膜病、和老年黄斑变性；类风湿性关节炎；牛皮癣；或与表皮下水疱形成有关的大疱性疾病，包括大疱性类天疱疮、多形性红斑、和疱疹样皮炎。
6.选自下列的化合物
全文摘要
具有血管生成抑制活性的通式(I)的取代的吡啶和哒嗪，其中含有A、B、D、E、和L的环是苯基或含氮杂环；基团X和Y可以是任意所定义的连接基团；R
文档编号C07D417/14GK1769283SQ200510127110
公开日2006年5月10日 申请日期2000年9月26日 优先权日1999年9月28日
发明者J·P·杜马斯, T·K·乔, H·C·E·克吕恩德, W·李, D·纳加拉斯纳姆, R·N·西布利, N·苏, S·J·博尔, J·A·迪克松 申请人:美国拜尔公司