专利名称：：一种具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物及合成的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种四氢异喹啉衍生物及其合成，尤其涉及一种具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物及其合成。在癌症化学疗法中，癌细胞抵抗一系列细胞毒素药物的现象是一个严重的问题，这种现象叫做多药耐药。最近，Robert回顾了大量的用于临床实验的多药耐药逆向试剂。但是，对于多药耐药调节剂的研究和开发依然处于初期阶段。由于四氢异喹啉生物碱的天然存在和生理特性，它们具有重要的价值。在过去的一百多年里，人们广泛研究了它们多样的生物活性。诸如附子碱，乌药碱，嘧啶并异喹啉等一些四氢异喹啉衍生物都具有很好的生物活性。然而，在公开的报道中未见有合成包含哒嗪并噁嗪衍生物或吡啶并噁嗪衍生物的四氢异喹啉类化合物以及对所合成的化合物多药耐药调节活性的研究。针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物及其合成。本发明为了发现多药耐药新的抑制剂，引入了一个高效切入口来合成包含哒嗪并噁嗪衍生物1或吡啶并噁嗪衍生物2的四氢异喹啉类化合物。本发明主要以合成吡啶并噁嗪衍生物2来阐述四氢异喹啉类化合物的合成和生物价值。本发明所述具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物，其特征在于是如下结构式所述的化合物2a、2b、2c、2d、2e、2f、2g、2h、2i、2j之一；R
背景技术：
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发明内容2a:Ri=R4=H,R'=RJ=OCH32b:R1=R4=H,R2=OCH3，R3=CH:2c:R1=R3=R4=H,R2=OCH32d:R1=R3=CH3,R2=OCH3，R4=H<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>2e2f2g:R1=H，Rz=RJ=R4=OCH32h:R1=R4=H,R2=OCH3，R3=CI2i:R1=R3=R4=H，R2=N(C2H5)22j:R^r4-H,r2-N(C2H5)2，R、C2H5。上述具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物的合成方法，其特征在于在k2c03的作用下，取代的苯乙基胺与2-氯乙酰氯在二氯甲垸中反应，反应条件是室温下搅拌1214小时或者回流条件下23小时，得到高产率的2-氯乙酰胺4;然后，在碳酸铯的作用下，乙腈做溶剂，2-氯乙酰胺4再与2-溴-3-羟基吡啶5反应，经由smile重排顺利得到吡啶并噁嗪衍生物6;以甲醇做溶剂，在室温下用硼氢化钠还原吡啶并噁嗪衍生物6,得到高产率的还原产物7;然后用路易斯酸作溶剂，在二氯甲烷中对还原产物进行Pictet-Spengler环化反应，生成目标产物四氢异喹啉衍生物2。上述具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物的合成方法中所述路易斯酸优选三氟化硼乙醚。上述合成反应路线如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>2本发明所述具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物在制备提高细胞积聚药物中的应用。在多药耐药MCF7-ADR人类乳癌细胞中，申请人检测到化合物(2a2j)在长春新碱的细胞积聚上的作用，1g/mL和10g/mL的维拉帕米对加速VCR的积聚显示了剂量依赖性。在本发明所述化合物中，2a，2e,2f和2g对VCR细胞积聚的作用与维拉帕米一样高效，化合物2b,2d和2h适度地提高VCR的细胞积聚，而化合物2c,2i和2j降低了VCR的细胞积聚。结果表明，苯环上有多个烷氧基的化合物是有效的药剂。本发明所述具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物在制备抗细胞毒素药物中的应用。实验证实化合物2g和2h显示出非常有效的细胞毒素活性，而化合物2e，2f，2i,和2j却没有如此高的细胞毒素活性。用垸基代替甲氧基看来起了副作用(2b,2d)，而增加甲氧基取代明显提高了细胞毒素的活性(2g)。化合物2h(氯取代了一个甲氧基)在这些化合物中具有最高的活性。具体实施例方式实施例1:化合物4a(a:Rt=R4=H，R2=R3=0CH3)的制备及表证2-氯-乙酰氯(7.36g，65.2,1)溶在CH2C12(20mL)后，在室温下，逐滴加入(3，4-二甲氧基苯基)乙基胺3a(10.7g,59.3mmol)和碳酸钾(9.0g，65.2ramol)的CH2C12溶液中，该混合溶液加热回流四小时，然后冷却到室温后加入水。该体系分层后用CH2C12萃取水层。最后有机层用MgS(X干燥后抽真空除去溶剂。粗产物通过色谱柱用CH2Cl2洗脱得到产物4a的产率82.6%。比移值^=0.35(CH2C12);熔点即95-97°C;IR(KBr，cm—1):3312,3065,2938,1646,1553,1262,848;NMR(300MHz,CDC13):6.62-6.83(m,Ar-3H),6.58(s，NH)，4.42(s,2H),3.74(s,3H)，3.70(s,3H)，3.30(q，/=6.6Hz，2H)，2.63(t，/=6.9Hz,2H);13CNMR(75MHz,CDC13)34.7,40.3，53.5，56.4，62.2，110.8，112.5，120.1，135.6，139.0,144.3，175.5;Anal.CalcdforC12H16C1N03:C,55.93;H,6.26;N,5.43.Found:C,55.90;H，6.25;N,5.47%。实施例2:化合物6a的制备及表证在lOOmL的烧瓶中加入磁子，然后加入2-氯乙酰胺4a(2.96g，11.5rnrno1)，2_溴-3-H-吡啶5(2.00g,11.5mmol),Cs线(9.38g,28.8mmol)和乙腈(50mL)，在氮气保护下10分钟后加热回流4小时，同时用薄层色谱检测。在低于标准大气压下的情况下除去溶剂后加入CH2C12/H20。该体系分层后用CH2Cl2萃取水层。混合所有的有机层由无水的MgS04干燥和真空除去溶剂。粗产物通过色谱柱用EtOAc/CH2Cl2洗脱得到产物6a的产率70.5%。IR(KBr,cnf1)3053，2983,2929，2827，1691,1578;'HNMR(300MHz,CDC13)7.93(dd，/=4.8,1.5Hz，1H),7.19(dd,/=8.1，1.5Hz,1H)，7.01(dd，/=7.8,4.8Hz，1H),6.71—6.81(m,3H)，4.80(s,2H),4.09-4.14(t,2H)，3.87(s,3H)，3.86(s,3H)，2.87-2.92(t,2H);13CNMR(75MHz,CDC13)33.1，42.8，53.2,56.5,67.6，111.9，112.3,118.8，121.2,122.5,129.3,138.5，141.8,143.0,147.6,163.0,176.8;Anal.CalcdforC17H18N204:C，64.96;H,5.77;N，8.91.Found:C，64.99;H,5.75;N,8.94%。实施例3:化合物7a的制备及表证在100mL的烧瓶中加入磁子，然后加入溶于甲醇(50mL)的化合物6a(1.73g，5.5mmol)。用冰冷却到0°C后加入NaBH4(0.25g，6.6隨ol)。在室温下搅拌2小时然后除去甲醇。然后加入CH2Cl2剩余物中搅拌10小时，再用CH2Cl2过滤和洗涤。最后真空除去溶剂。粗产物通过色谱柱用EtOAc/CH2Cl2洗脱得到产物7a的产率80.7%.比移值A=0.26(CH2Cl2/EtOAc^2:l)，熔点mp145-146。C。IR(KBr,cm—1):3250，3010，2995,2935,1638;'HNMR(300MHz，CDC13)7.95(dd，/=4.8,1.5Hz，1H)，7.18(dd,/=8.1，2.4Hz，1H)，6.98(dd,/=7.8，4.2Hz，1H),6.72—6.85(m，3H),4.76(t，1H)，4.32(d，2H)，4.08-4.15(t,2H)，3.87(s,3H)，3.86(s，3H),2.85-2.91(t,2H);13CNMR(75MHz,CDC13)32.7,41.6'54.8,56.6'67.5,68.7，111.9'112.1,118.9,121.6，122.6，128.5,138.9，142.4，143.2,149.0，162.4;Anal.CalcdforC17H2。N204:C，64.54;H，6.37;N，8.86.Found:C，64.57;H，6.32;N，8.95%。实施例4:化合物2a的制备及表证在50mL的烧瓶中加入磁子，然后加入溶于CH2C12(20mL)的7a(1.11g，3.5誦o1)，然后BF3-Et20(3.0mL，24.0mmol)逐滴加入。反应的混合物在室温搅拌10小时，然后缓慢加入过饱和的NaHC03的溶液。该体系分层后用CH2Cl2萃取水层。混合所有的有机层由无水的MgS04干燥和真空除去溶剂。粗产物通过色谱柱用EtOAc/CH2Cl2洗脱得到产物2a的产率68.1%。比移值^=0.45(CH2Cl2/EtOAc=2:1)，熔点mp157-160。C。IR(KBr，cm—1):3052,2963，2940，1635;'H腿(300MHz,CDC13)8.01(dd,/=6.0,1.8Hz，1H),7.35(dd，/=9.3，1.8Hz'1H),7.08(dd,/=7.8，4.2Hz,1H),6.91(s,1H)，6.80(s,1H)，4.55(t，/=6.6Hz，1H),4.36(d,/=4.2Hz，2H),4.15—4.21(t，2H)，3.87(s,3H)，3.86(s，3H),2.88-2.93(t,2H);13CNMR(75MHz,CDC13)33.5，45.6，49.0，53.2,59.8,66.2，111.3，115.7，118.9，121.0，126.6，130.3,138.9,142.0,142.5，145.2'162.2;Anal.CalcdforC17H18N203:C,68.44;H，6.08;N'9.39.Found:C，68.50;H，5.98;N，9.51%。实施例5:实验验证化合物2在逆转多药耐药泵中具有好的活性在多药耐药MCF7-ADR人类乳癌细胞中，申请人检测到化合物(2a2j)在长春新碱的细胞积聚上的作用，1g/mL和10g/mL的维拉帕米对加速VCR的积聚显示了剂量依赖性。在所述化合物中，2a，2e,2f和2g对VCR细胞积聚的作用与维拉帕米一样高效，化合物2b,2d和2h适度地提高VCR的细胞积聚，而化合物2c,2i,和2j降低了VCR的细胞积聚。结果表明，苯环上有多个烷氧基的化合物是有效的药剂。(见表l)表1显示在多药耐药MCF7-ADR人类乳癌细胞中化合物(2a2j)在长春新碱的细胞积聚上的作用。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表2列出了治疗白血病HU细胞和人类皮肤癌KB细胞的化合物2a-2j的细胞毒素的活性，我们可以从中发现这些化合物的一些构效关系。化合物2g和2h显示出非常有效的细胞毒素活性，而化合物2e,2f，2i，和2j却没有如此高的细胞毒素活性。用烷基代替甲氧基看来起了副作用(2b,2d)，而增加甲氧基取代明显提高了细胞毒素的活性(2g)。2h(氯取代了一个甲氧基)在这些化合物中具有最高的活性。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>本发明通过Smile重排和Pictet-Spengler环化，首次完整地得到了高产率的吡啶并噁嗪衍生物2。这些化合物在探索新型多药耐药逆转剂中具有重要的价值。其中一些化合物作为多药耐药的改性剂显示出了良好的活性。这个结果说明，在苯环上引入烷氧基对克服多药耐药性非常有效，尤其是苯环上有三个甲氧基的化合物2g显示出了高效的多药抗药调节活性和细胞毒素活性，表明了它将成为癌症化学疗法中的新型后备药物。权利要求1.一种具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物，其特征在于是如下结构式所述的化合物2a、2b、2c、2d、2e、2f、2g、2h、2i、2j之一；2aR1＝R4＝H，R2＝R3＝OCH32bR1＝R4＝H，R2＝OCH3，R3＝CH32cR1＝R3＝R4＝H，R2＝OCH32dR1＝R3＝CH3，R2＝OCH3，R4＝H2gR1＝H，R2＝R3＝R4＝OCH32hR1＝R4＝H，R2＝OCH3，R3＝Cl2iR1＝R3＝R4＝H，R2＝N(C2H5)22jR1＝R4＝H，R2＝N(C2H5)2，R3＝C2H5。2.权利要求1所述具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物的合成方法，其特征在于在K2C03的作用下，取代的苯乙基胺与2-氯乙酰氯在二氯甲烷中反应，反应条件是室温下搅拌12M小时或者回流条件下24小时，得到2-氯乙酰胺；然后，在碳酸铯的作用下，乙腈做溶剂，2-氯乙酰胺再与2-溴-3-羟基吡啶反应，经由smile重排得到吡啶并噁嗪衍生物；以甲醇做溶剂，在室温下用硼氢化钠还原吡啶并噁嗪衍生物，得到还原产物；然后用路易斯酸作溶剂，在二氯甲垸中对还原产物进行Pictet-Spengler环化反应，生成目标产物四氢异喹啉衍生物。3.如权利要求2所述具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物的合成方法，其特征在于所述路易斯酸是三氟化硼乙醚。4.权利要求1所述具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物在制备提高细胞积聚药物中的应用。5.权利要求1所述具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物在制备抗细胞毒素药物中的应用。全文摘要本发明公开了一种具有多药耐药调节活性的四氢异喹啉衍生物，包括所述的化合物2a、2b、2c、2d、2e、2f、2g、2h、2i、2j之一；是通过N-取代-2-氯乙酰铵类与2-溴-3-羟基吡啶以一锅煮的方式，通过smile重排反应构建起来，再经Pictet-Spengler环化得到。最终目标产物产率为17～37％，其中，取代基(R)的改变，化合物显示出较好的多药耐药逆转活性。文档编号C07D491/14GK101205231SQ20071011581公开日2008年6月25日申请日期2007年12月20日优先权日2007年12月20日发明者群张,亮辛,晨马申请人:山东大学