专利名称：：奇壬醇衍生物及其在制备前炎症细胞因子抑制剂中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及奇壬醇衍生物及其医药用途。技术背景炎症(inflammation)是具有血管系统的活体组织对各种炎症因子引起的损伤所发生的以防御为主的反应。由于具备血管系统，其对损伤的反应除保留了上述简单形式外，更进一步形成了以血管反应为中心的局部和全身防御反应。血管反应导致血管内的液体和白细胞渗出进入损伤部位，局限和杀灭损伤因子，清除、吸收坏死组织，使机体防御反应更复杂，更完善。血管反应是炎症过程的主要特征和防御的中心环节。抗损伤的同时，机体通过实质细胞(arenehymaleell)和间质细胞(mesenehymaleell)的再生，修复损伤组织。炎症实质上是以损伤起始、愈复告终的复杂的病理过程，损伤和抗损伤贯穿炎症反应的全过程。免疫系统是不同类型的细胞及其介体相互作用的复杂网络。介体是胞间的信号分子，它们调节例如所涉及细胞的生长、分化和功能(AraiKF,Wa丄/fez.^'oc力e瓜1990,59:783)。一组重要的介体是细胞因子，其各种各样的分子特性、作用机制、生理功能和它们在众多疾病中所起的作用是当前广泛研究的课题。目前已知有许多细胞因子负责控制对病原体的免疫防御应答。IL-1P是由单核巨噬细胞、树突状细胞、纤维母细胞等产生的一种细胞因子，能刺激T细胞和B细胞的增殖和分化、刺激造血以及参与炎症反应。据文献报道，IL-1P抑制剂可用于类风湿性关节炎、骨性关节炎、败血症、心力衰竭、中枢神经系统损伤、呼吸道病毒感染、抑郁症等多种疾病的治疗(TaylorPC,eta丄O/rr./%3ra.Zes.,2003，9(14):1095-1096;DellingerRP,ai.67i/i//'ect2003，36(10):1259—1265;DiwanA，eta丄Curr2003，3(2):161-182;HalleguaDS,a入j/m"As.'2002,61(11):960-967)。TNF-a是一种前体炎症细胞因子，主要由单核细胞和巨噬细胞产生。TNF-d具有多种生物学活性，可杀伤或抑制肿瘤细胞，提高中性粒细胞的吞噬能力，增加过氧化物阴离子产生，参与众多的炎症反应过程。TNF-ci在类风湿性关节炎病人体内过度表达，并在滑膜中，尤其是软骨-关节翳的连接处水平升高，从而导致病情进一歩恶化。TNF-a与关节破坏有关，因为它能刺激骨和软骨的重吸收，通过抑制骨胶原的合成而引起炎症并抑制骨的形成，还引起类风湿性关节炎病人疲劳、不适、发热、贫血和恶病质。TNF-a抑制剂可用于类风湿性关节炎、骨性关节炎、脊柱关节炎、炎性肠病(克隆氏病和溃疡性结肠炎)、心力衰竭、糖尿病、系统性红斑狼疮、硬皮病、结节病、败血症、感染性休克、呼吸道病毒感染等多种疾病的治疗(OgataH,"a丄Ci/rr/%ar/7Zfes.,2003，9(14):1107—1113;MollerDR,"a丄#ed,2003,253(1):31-40:NishimuraF,et3丄/尸e"W。"t。义2003,74(1):97-102;WeinbergJM,eta/.C""、2003,71(1):41-45;SackM'eta义/%sr/zscW2002，94(1-2):123-135;BurnhamE，a7.Crj'fCare#ec/'2001，29(3):690-691)。作为一种细胞信号分子，一氧化氮(NO)是一种内源的防御分子。在炎症反应中，宿主明显产生的大量NO可能为防御细胞、病毒、寄生虫的入侵建起一道防线，同时NO的非特异性免疫可阻止病原体入侵，且能杀死肿瘤细胞，诱导其凋亡。研究证实，NO能诱导COL0205细胞系(低分化人结肠癌)、H印g2细胞系(人肝癌细胞)、HL60(人早幼粒白血病细胞)、U937(人单核细胞白血病细胞)凋亡，并上调P53蛋白的表达。NO既抑制淋巴细胞增殖，又促发包括类风湿性关节炎在内的许多免疫反应及免疫病理过程。由NO促发类风湿关节炎、SLE(系统性红斑狼疮)等免疫病理过程与其合成被过度诱导有关，所合成的NO反过来抑制自身增殖Thl及许多细胞因子的分泌，恰可防止高免疫反应，从而延缓上述免疫病理过程的发展。N0作为一种自分泌或旁分泌介质，具有调节中性粒细胞的粘附、聚集、趋化反应及释放活性物质等多重功能，NO抑制中性粒细胞、巨噬细胞释放氧自由基及溶酶体酶已被实验研究证实。中性粒细胞暴露给N0，使细胞内谷胱甘肽降低，可激活HMPS"6]。用L一NMMA(N0自由基合成酶抑制剂)处理后HMPS基础活性受抑制。N0与细胞内谷胱甘肽反应并激活HMPS对抵抗NO的细胞毒作用有重要意义(IalentiA,ets丄/尸力ar/K3Co7，1992,211:177;IuvoneT,ets丄^/r/尸/ar鹏co,1994,265(l-2):89;NusslerAK，eta丄/￡耶1992，176(1):261-264;SouthamE，eta丄〃e〃rop力ar瓜1993，32:1267;DeVenteJ.Afe"5"ci，1998,87(1):207-241;MuradF./j鹏，1996,276(14):1189-1192;MuradF.力/^efr//7t^i1999,38:1856-68;MayerB，eta丄/A'WC力e冯1998,273(6):3264-3270)。类风湿性关节炎是一种不明原因的慢性全身性免疫反应性炎性疾病，免疫反应多发生于关节滑膜，可导致关节损伤，为最常见的结缔组织疾病，目前标准的治疗药物包括非甾体类抗炎药及改善病情抗风湿药(DMARDs)。这两类药主要是在不同环节上抑制前列腺素的合成，均不能影响关节损伤进程，长期耐受性和有效性也有限(谭伟.类风湿性关节炎的用药问题.医药导报，1997，16:142)。白介素-1P(IL-1P)及肿瘤坏死因子-a(TNF-a)被认为是导致关节炎的关键细胞因子，在类风湿性关节炎和其它炎症性自身免疫疾病的发展和恶化中具有重要的病理学意义。能够抑制白细胞介素和肿瘤坏死因子等细胞因子作用的物质因此应该具有治疗意义，用于治疗由这些细胞因子介导的疾病。本发明的目的即在于提供细胞因子白细胞介素IL-和肿瘤坏死因子TNF-a的非常活泼的抑制剂，以用来制备治疗由这些细胞因子介导的疾病的药物。豨莶草(/ferte^e^^Z^d/seO是中国药典收载的常用中药，始载于唐代《新修本草》，以菊科(6b，/tse,asteraceae)植物东方豨莶(57柳sZ)ech'3anz'e"tsiZsL)、腺梗豨莶(5Ye《es/ech'a,6esce/751始h'/o)或毛梗豨莶(iSe^eAec/r/sg〗3Zi"e5ce/751船h'/7c0的干燥地上部分入药。豨莶草味辛、苦，性寒，归肝、肾经，具祛风湿、利关节、解毒之功效，主治风湿痹痛、筋骨无力、腰膝酸软、四肢麻痹、半身不遂、风疹湿疮，民间常用于类风湿性关节炎的治疗。小鼠实验表明，豨莶草煎剂不仅对细胞免疫和体液免疫有明显的抑制作用，而且对非特异性免疫也有一定的抑制作用，表现出对胸腺的显著抑制作用，能使脾脏重量减轻，Ea和Et花环形成率及血清抗体滴度降低，细胞内DNA和RNA吖啶荧光染色的阳性率减少，并抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，减低血清溶菌酶的活性。因此，豨莶草祛风湿、利关节可能通过调节免疫功能而收效(卜长武，杨正娟，那爱华.豨莶对小白鼠免疫功能的影响.中国中药杂志，1989，14(3):44-45)。现代药学研究表明，奇壬醇不仅是豨莶草的主要化学成分之一，同时也是其产生抗炎、抗风湿等多种生物活性的重要的物质基础。奇壬醇单体化合物对大鼠的棉球肉芽肿有明显的抑制作用；含奇壬醇85%的豨莶草提取物可减轻佐剂性关节炎大鼠踝关节炎症病理反应，可通过调整机体免疫功能、改善局部病理反应而达到抗风湿的作用(钱瑞琴，张春英，付宏征，林文翰，高子芬.中国中西医结合杂志，2000,20(3):192-195;信红岭，毕娟，刘淼，等.奇壬醇的抗炎免疫实验研究.中草药，2005，36(6):866-867)。发明概述本发明的目的旨在提供奇壬醇衍生物、其盐以及它们新的制药用途。本发明涉及通式(I)和通式(II)所示的奇壬醇衍生物在制备TNF-a禾口/或IL-ie、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6抑制剂中的用途。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>通式(I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>通式(II)其中，通式(I)中，R,、R2、R3、R4可以相同或不同，并且独立地代表-OH、-SH、-NH2、-OR5、-0(CO)R5、_NHR5、-N(R5)2、-NHCOR5、-N(Cw垸基)(a,芳基)、-SR5、-SOR5、-S02R5、-0S03H、-OS02R5、_N02、-CN、_F、-Cl、-Br或-I，且不同时为-OH;R5独立地代表C卜s烷基、(V,4芳基、单或多不饱和的、直链或支链的C,—,2链烯基、具有3-14个环成员的单、双或三环饱和的或单或多不饱和的碳环、具有5-15个环成员和l-6个杂原子的单、双或三环饱和的或单或多不饱和的杂环；通式(II)中，Ri、R2可以相同或不同，并且独立地代表d-e烷基、C6—14芳基、-(d-e烷基)(CO)(d-e垸基)、单或多不饱和的、直链或支链的C,-12链烯基、具有3-14个环成员的单、双或三环饱和的或单或多不饱和的碳环、具有5-15个环成员和l-6个杂原子的单、双或三环饱和的或单-或多不饱和的杂环、苯基，其中苯基可被下列基团一次或多次取代-H、-0H、-SH、-NH2、-NH(C,-e烷基)、-NH(Cw烷基)2、-O(C卜6垸基)、-0(C0)(d—6烷基)、-S(Cw烷基)、-SO(C卜e烷基)、-S02(C^烷基)、-0S03H、-N02、-CN、-F、-C1、-Br、-I;或者R1、R2以交联的形式形成含5—8个环单位的饱和或不饱和碳环或杂环。上述的通式(I)化合物，其特征在于Rs优选为N、0或S的单、双或三环饱和的或单或多不饱和的杂环。上述的通式(I)化合物，R,、R2、R3、R4优选为-0H或-0CH3，且不同时为-OH;上所述的通式(II)化合物，其特征在于R,、R2优选为Cw烷基、_CH2C0CH3、其中R"R7为-H、-0H或-0CH3。上述通式(II)化合物，R,、R2可以交联为6—8个碳原子的饱和碳环；本发明还包括权利要求1的化合物的生理可接受的盐，其特征是通过将碱用无机酸或有机酸中和、或通过将酸用无机碱或有机碱中和、或将叔胺季铵化生成季铵盐得到。通式(I)和通式(II)的化合物及其盐作为治疗活性成分，用于制备治疗由前炎症细胞因子TNF-a、白介素(IL)-IP及炎性分子NO介导的疾病的药物。一种药物组合物，包括治疗有效量的通式(I)和通式(II)的化合物及其盐、常规的生理上可接收的载体和/或稀释剂或助剂。所述药物可用于治疗选自下组的一种或多种病症，这些病症包括但不限于炎性肠病、心力衰竭、糖尿病、系统性红斑狼疮、硬皮病、结节病、皮肌炎、银屑病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症、急性髓性白血病、帕金森氏症、早老性痴呆、抑郁症、艾滋病痴呆综合症、脓毒症、坏疽性脓皮病、败血症、感染性休克、白塞氏病、移植物抗宿主病、葡萄膜炎、Wegener's肉芽肿、休格连氏干燥症、慢性阻塞性肺病、哮喘、急性胰腺炎、牙周病、恶病质、癌症、中枢神经系统损伤、呼吸道病毒感染或肥胖、自身免疫病，比如类风湿关节炎、类风湿脊椎炎、红斑狼疮、多发性硬皮病、牛皮癣、肾小球肾炎、依赖胰岛素糖尿病和败血症。本发明的化合物或其药用盐另外还可用于制备细胞、组织或器官移植后的预防排斥反应的药物。本发明还涉及一种药物组合物，包括治疗有效量的选自通式的化合物或其前药的一种或多种及可药用载体。本发明所涉及的药物的剂型根据临床应用方式而定，适宜的给药形式包括口服、非经胃肠、静脉、经皮、局部、吸入和鼻内给药制剂。通常使用盖仑制剂比如片剂、包衣片、胶囊、分散粉末、颗粒、水溶液、水悬浮液或油性悬浮液、糖浆、汁液或滴剂。固体药物形式可含有比如惰性成分和载体例如碳酸钙、磷酸钠、乳糖、淀粉、甘露糖醇、藻酸盐、明胶、瓜尔胶、硬脂酸镁或硬脂酸铝、甲基纤维素、滑石、高分散硅石、硅油、高分子量脂肪酸(比如硬脂酸)、琼脂或植物或动物脂和油、固体高分子量聚合物(如乙二醇)。如果需要的话，适于口服的制剂可另外含有调味剂和/或甜味剂。液体药剂可以是灭菌的，和/或需要时可含有助剂，比如防腐剂、稳定剂、湿润剂、渗透剂、乳化剂、分散剂、增溶剂、盐、糖或糖醇，以调节渗透压或缓冲，和/或需要时可含有粘度调节剂。这些类型的添加剂的例子是酒石酸和柠檬酸缓冲液、乙醇、配位剂(如乙二胺四乙酸及其无毒盐)。适于调节粘度的是比如高分子量聚合物，例如，液态聚环氧乙烷、微晶纤维素、羧甲基纤维素、聚乙吡咯烷酮、葡聚糖或明胶。固体载体的例子是淀粉、乳糖、甘露糖醇、甲基纤维素、滑石、高分散硅石、高分子量脂肪酸(如硬脂酸)、明胶、琼脂、磷酸钙、硬脂酸镁、动物和植物脂、固体高分子量聚合物(如聚乙二醇)。非经胃肠或局部使用的油悬浮液可含有比如合成或半合成植物油，例如，各种情况下，脂肪酸链上具有8-22个碳原子的液态脂肪酸酯，如棕榈酸、月桂酸、十三烷酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、十四垸酸、二十二烷酸、十五烷酸、亚油酸、反油酸、巴西烯酸、芥酸或油酸，其被比如具有1-6个碳原子的一至三元醇酯化，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇或它们的异构体、乙二醇或丙三醇。这些类型的脂肪酸酯的例子是市售的Miglyols、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、6-癸酸PEG酯、饱和脂肪醇的辛酸/癸酸酯、多乙氧基丙三醇三油酸酯、油酸乙酯、含蜡脂肪酸酯，比如人工鸭尾脂腺脂肪、椰子脂酸异丙酯、油酸癸酯、乳酸乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、己二酸二异丙酯，特别是多元醇脂肪酸酯。同样适宜的是不同粘度的硅油或脂肪醇，比如异十三烷醇、2-辛基十二垸醇、十六烷基应制醇或油醇，脂肪酸，例如油酸。进一步地，可以使用植物油，比如蓖麻油、杏仁油、橄榄油、芝麻油、棉籽油、花生油或豆油。适宜的溶剂、凝胶剂和增溶剂是水或与水混溶的溶剂。适宜的例子是乙醇或异丙醇、苄醇、2-辛醇十二烷醇、聚乙二醇，也可以是邻苯二甲酸酯、己二酸酯、丙二醇、丙三醇、二_或三-丙二醇、蜡、甲基纤维素、溶纤剂、酯、吗啉、二噁烷、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、环己酮等。可用的成膜剂是，比如可以溶解或在水和有机溶剂中部分膨胀的纤维素醚，例如，羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素或可溶淀粉。同样地，凝胶剂和成膜剂的混合形式也是完全可能的。这种情况下使用的，特别是比如离子型大分子，例如羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸以及它们的盐，支链淀粉半乙醇酸钠、作为钠盐的藻酸或藻酸丙二醇酯、阿拉伯胶、黄原胶、瓜尔胶或角叉胶。可使用的进一步的配制助剂是甘油、不同粘度的石蜡、三乙醇胺、胶原质、尿囊素、novantisolicacid。也可能有必要对制剂使用表面活性剂、乳化剂或湿润剂，例如十二烷基硫酸钠、脂肪醇醚硫酸酯、N-十二烷基-P-亚氨基二丙酸二钠盐、多氧乙基化蓖麻油或油酸山梨醇酯、单硬脂酸山梨醇酯、多乙氧基醚(如吐温)、十六醇、卵磷脂、单硬脂酸甘油酯、多氧化乙烯硬脂酸酯、烷基酚聚乙二醇醚、十六垸基三甲基氯化铵或一/二垸基聚乙二醇醚磷酸单乙醇铵盐。，同样地也有必要加入用于稳定乳液的稳定剂，比如蒙脱土或胶态硅石；或防止活性物质被破坏的抗氧化剂，例如生育酚或丁基羟基苯甲醚；或防腐剂比如p-羟苯甲酸酯。这些产品是在通常的灭菌或无菌条件下制造和分装到容器中并密封的。图1化合物1核磁共振碳谱qrc(U-13C图3化合物3核磁共振碳谱qrc21-13C图5化合物5核磁共振碳谱qrc29a-13C图7化合物7核磁共振碳谱qrc24-2-13C图9化合物9核磁共振碳谱qrc33-13C图11化合物11核磁共振碳谱qrcl7b-13C图13化合物13核磁共振碳谱qrc28b-13C图15化合物15核磁共振碳谱qrcl9-2-13C图17化合物17核磁共振碳谱qrc34-2-13C图19化合物19核磁共振碳谱qrc02B-13C图21化合物21核磁共振碳谱qrc06a-13C图23化合物23核磁共振碳谱06c-13C具体实施方式实施例l奇壬醇衍生物的制备及结构鉴定1.将奇壬醇20mg溶于丙酮lml，加入20nl2,2-二甲氧基丙烷以及催化量的对甲苯磺酸，室温搅拌反应20min。向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和碳酸氢钠溶液萃取，以除去作为催化剂而存在反应中的对甲苯磺酸,然后用饱和食盐水萃取除水，最后用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲烷溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(3:1)洗脱，得15,16-异亚丙基奇壬醇(化合物l)18mg，产率90%。化合物1:CAOs(Mr.378)，白色固体，mp.198-200°C。MS(EI)历A(%):363.0(*T-CH3，19.0)。'HN服(400MHz,CDC13):5岬5.08(1H，s，14—H),4.00(1H，t，/=6.9Hz，15-H)，3.89(1H，t，/=7.7Hz，16—H)，3.853.81(1H，m，2—H)，3.75(1H，t,7.7Hz,16—H),3.71(1H,d，/=10.7Hz,19—H)，3.43(1H，d,/=10.7Hz，19-H),2.282.25(1H，m，7-H),2.20(1H，dt，2.48，12.76Hz，3—H),2.082.04(1H,m，l-H),1.78(1H，t,/=9.16Hz，9一H)，L801.74(1H，m,12—H),1.72~1.70(1H,m，6-H),1.701.60(2H,m,ll-H)，1.41(3H,s，CH3)，1.35(3H,s，CH3),1.21—1.18(1H，m,5_H),1.05(3H,s,CH3,18_H)，L041.02(1H，m,1—H)，0.91(3H,s,CH3,17-H),0.78(3H，s,CH3，20—H)。13CNMR(100MHz,CDC13):"139.1，127.8(Cl4)，108.8,80.l(Cl5)，66.1(CI9),65,6(C,6),65.0(C2),55.4(C5),50.8(C9)，48.5(d),44.7(G),40.7(C4)，40.4(CJ,39.9(C1())，36.5(G),36.1(CI3),32.1(CI2)，27.5(C1S)，26.5，25.5，22.8(C17),22.4(C6),18.7(C"),17.l(C加)。2.将奇壬醇50rag溶于2ml环己酮中，加入催化量的对甲苯磺酸，恥'C下搅拌反应9h。图2化合物2核磁共振碳谱qrc23-13C图4化合物4核磁共振碳谱qrc29b-13C图6化合物6核磁共振碳谱qrc24a-13C图8化合物8核磁共振碳谱qrc25-13C图10化合物10核磁共振碳谱qrcl7a-13C图12化合物12核磁共振碳谱qrc28a-13C图14化合物14核磁共振碳谱qrcl9-l-13C图16化合物16核磁共振碳谱qrc34-1-13C图18化合物18核磁共振碳谱qrc02a-13C图20化合物20核磁共振碳谱qrc02d-13C图22化合物22核磁共振碳谱qrc06b-13C向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和碳酸氢钠溶液萃取，以除去因作催化剂而存在于反应体系中的对甲苯磺酸。然后用食盐水萃取除水，并用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲垸溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(3:1)洗脱，得15,16-环己叉基奇壬醇(化合物2)42mg，产率84%。化合物2:C2eH4204(Mr.418)，白色固体，mp.201-202。C，MS(EI)历/z(D:418.2[M+，0.2]。'HNMR(400MHz，CDC13)3—5.08(1H,s,14-H),3.98(1H，t,/=7,06Hz，15-H),3.883.84(1H,m，16-H)，3.883.80(1H，m，2-H)，3.71(1H,d,10.80Hz，19一H)，3.733.70(1H,m,16—H)，3.41(1H，d'/=10.80Hz，19-H),2.282.24(1H，m,7—H)，2.21(1H,dt，/=12.68'2.44Hz,3-H)，2.072.04(1H'm，1-H)，1.03(3H，s，CH:!,18-H)'0.91(3H，s，CH3，17-H)，0.77(3H,s,CH3，20-H)。13C蘭R(100MHz,CDCl])138.7,127.7(C14)，109.0,79.5(CI5)，65.7(C19)，65.l(Cie),64.7(C2),55.1(C5)，50.5(C9),48.2(d),44.4(C3)，40.5(C4)，39.7(C10)，36.3(C7)，35.9，35.8，34.9(C12),27.2(C,8)，27.2，25.3,24.0,23.9,22.8(C17),22.2(C6),18.6(C")，16.9(C2。)。3.将奇壬醇50mg和溶于2ml丁酮中，加入催化量的对甲苯磺酸中，90°C下搅拌反应lh。向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和碳酸氢钠溶液萃取，以除去反应体系中的对甲苯磺酸。然后将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，并用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲垸溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(5:1)洗脱，得15，16-异丁叉基奇壬醇(化合物3)46mg，产率92%。化合物3:C24H4。04(Mr.392),白色固体，mp.195-196。C。MS(EI)顶/z(%):392.3[M+，0.2]。LHNMR(400MHz，CDC13)5—5.09(1H,s,14-H)，4.OO(IH,dd，/=6.68,7.84Hz，15_H)，3.88-3.83(IH，m，16-H),3.88-3.80(1H，m,2-H),3.72(1H,d,J=10.84Hz，19_H)，3.74-3.67(1H，m，16-H),3.42(1H,d,/=10.84Hz，19-H),2.28-2.24(1H,m,7_H),2.20(1H,dt,/=12.52,3.24Hz,3-H)，2.07-2.02(1H，m，1-H)，1.80-1.76(1H，m,12_H)，1.29(3H,s,CH3)，L04(3H,s，CH3,18—H),0.94(3H,s，CH3)，0.92(3H,s,CH3)，0.78(3H，s，CH3,20—H)。K'C薩R(100MHz，CDClJ5—138.8，138.7,127.6,127.5，110.6，110.3,80.4(C15),79.6'65.8(C19),65.6'65.5,64.7(C2)，55.1(C5)，50.5(C9)，48.2(d),44.5(C3)，40.5(C4)，39.7(C10),36.3(C7),35.9，35.8,32.5，32.0，31.9，31.6,27.2(C18)，23.7，23.0，22.8,22.7，22.2,18.5。4.将奇壬醇50mg溶于3ml3-甲基-2-丁酮中，加入催化量的PPTS，7080°C下搅拌反应6h。向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，并用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲烷溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(5:1)洗脱，得15，16-(4-甲基)异丁叉基奇壬醇的差向异构体混合物，经制备液相分离得化合物4和化合物5的单体，产率分别为40%、44%。化合物4:C25H4204(Mr.406)，白色固体，mp.196-197°C，MS(EI)迈A(%):406.2[M+,0.1]。'H醒R(400MHz，CDC13)5—5.09(1H,s，14_H)，4.OO(IH,dd,/=6.50，8.22Hz,16—H),3,883.80(2H，m)，3.72(1H，d,/=10.84Hz，19—H)，3.64(1H，t,/=8.06Hz，15_H)，3.42(1H,d，/=10.84Hz,19-H)，2.282.24(1H'm,7-H),2.20(1H,dt，/=12.76，3.48Hz，3-H),2.082.04(1H，m,1—H),1.85(1H，q，/=6.88Hz，12—H),1.22(3H,s,CH3),L04(3H,s，CH3,18-H),(X95(3H，s,CH3)，0.92(3H，s,CH3,17_H)，0.92(3H，s,CH3),0.78(3H，s,CH3，20-H)。13C_NMR(100MHz,CDC13)5—138.6，127.7(C14),112.1'79.5(C15)，65.8(C19)，65.7(C16),64.8(C2)，55.1(C5),50.5(C9)，48.2(C),44.4(C3)，40.5(C》，39.7(C10)，36.9，36.3(C7),35,9(C13),32.0(C,2)，27.2(C'8)，22.3(C6),22.2，19.7,18.6(CU)，17.6，17.5,16.9(C2。)。化合物5:C25H4204(Mr.406)，白色固体mp.196-197°C。MS(EI)历/z(%):363.3[M+-CH3CH3CH，,CDC13)<55.08(1H,s，14一H)，3,933.89(1H,dd，/=6.08，8.44Hz，16-H),3.873.80(2H，m)，3.72(1H，d，/=10.84Hz,19-H),3.743.68(1H，m)，3.43(1H，d，/=10.84Hz,19—H)，2.282.24(1H，m,7—H),2.20(1H，dt，/=12.78,2.92Hz，3-H),2.072.04(1H，m,l-H)，1.85(1H,t，/=6.86Hz,12-H)，1.24(3H，s，CH》，1.04(3H,s，CH3,18—H),0.93(3H,s,CH》'0.92(3H，s，CH3,17—H),0.78(3H，s,C仏，20-H)。13C-NMR(100MHz，CDCl3)^拜138.6，127.6(C14)，112.5,80.7(C15),65.7(C19),65.6(CI6)，64.7(C2),55.1(C5)，50.5(C9)，48.2(C,),44.4(C3),40.5(C4)，39.7(C1())，36.3(C7)，36.2,35.7(C,3)，32.1(C12),27.2(C,8),22.9(C,7),22.2(U),20.7，18.6(C)，17.7，17.4，16.8(C2。)。5.将奇壬醇50mg溶于3ml甲基异丁基甲酮中，加入催化量的PPTS，7080°C下搅拌反应10h。向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，然后用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲垸溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(5:1)洗脱，得15，16-(4-甲基)异戊叉基奇壬醇的差向异构体混合物，经制备液相分离得化合物6、化合物7的单体，产率分别为36%、32%。化合物6:C26H440.,(Mr.420)，白色粉末，mp.193-195。C，MS(EI)历/z(%):405.3[M+-CH3，1.0]。'H丽R(400MHz,CDC13)5卿5.09(1H，s，14-H)，3.99(1H，t，7.16Hz,15-H),3.883.81(1H,m，2-H)，3.84(1H，dd，/=6.88,7.72Hz，16-H),3.72(1H,d，/=10.76Hz，19-H)，3.68(1H，t，/=7.88Hz'16-H)，3.43(1H,d，10.76Hz,19-H)，2.282.24(1H，m'7—H)，2.222.18(1H'm，3—H),2.092.04(1H,m，1—H),L84(1H,q,/=6.52Hz'12-H)'1.29(3H,s，CH3,1，-H)，1.221.18(1H'm,5_H)，1.05(3H，s，CH3，18_H)，0.96(3H,s，CH:,),0.95(3H，s,CH3),0.92(3H，s,CH3，17-H)，0.78(3H，s，CH3，20-H)。'3CNMR(lOOMHz，CDC13)5—138.7，127.7(CH)，110.3，79.4(C15)，65.9(C19)，65.l(C丄64.8(C2)，55.2(C5)，50.5(C9)，48.2,48.1，44.5(C3),40.5(C4),39.8(Cl0)，36.3(G),36.0(C13),32.1(C,2)，27.2(C18)，24.2，23.9，23.5,22.8(C17),22.2(C6)，18.5(d》，16.9(C20)。化合物7:C26H4404(Mr.420)，白色粉末，即.193-195°C。MS(EI)历/z(%):420.3[M+,0.7]。lHNMR(400MHz,CDCL)^^:5.09(1H，s,14-H)，3.94(1H，dd'/=8.12,7.8Hz，15-H)，3.88-3.81(1H，m,2—H)，3.84(1H,t,/=5.4Hz,16-H)'3.72(1H，d，/=10.84Hz,19-H),3.70(1H，t,/=5.4Hz,16—H)，3.43(1H，d，/=10.84Hz，19-H)，2.282.24(1H,m，7-H)，2.222.18(1H，m,3—H)，2.082.04(1H,m,l-H)，1.77(1H，t，9.16Hz,9-H)，1.80L74(1H，m，12—H)，1.741.65(1H，m，6_H),L54(2H，m，11-H),1.50(2H,d，/=6.24Hz，3'—H),1.35(3H，s,CH3，1'—H),1.21—1.18(1H,m,5—H),L15L06(IH，m,12—H),1.05(3H,s，CH3，18-H)，1.041.02(1H,m，1—H)，0.94(3H,s，CH3，17—H),0.93(3H，s,CH3)，0.92(3H，s，CH3),0.78(3H，s，CH3,20-H)。'3C丽R(400MHz,CDC13)3，138.7，127.6(CI4)，110.5，80.1(C15)，65.8(C,9),65.2(CI6),64.8(C2),55.1(C5)，50.5(C9)，48.2(d),46.8(C3.),44.5(C3),40.5(C4)，39,7(C10),36.3(G),35.7(C13),32.0(C12)，27.2(C18)，24.6(C,.),24.5(C4')，24.0,23.8,22.7(C17)，22.2(C6),18.5(CU)，16.8(C2。)。6.将奇壬醇50mg溶于3ml乙酰丙酮中，加入催化量的PPTS，708(TC下搅拌反应12h。向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次，将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，并用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲烷溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(5:1)洗脱，并经制备液相分离得15，16-(2-氧)-异戊叉基奇壬醇(化合物8)23mg，产率46%。化合物8:C25H4。05(Mr.420)，白色固体mp.199-201。C。MS(EI)，4(%):402.2[M+-H20，0.1]。'H丽R(400MHz,CDC13)5卿5.08(1H，s,14_H)，4.00(1H'dd，/=6.70,7.70Hz，15-H),3.92(1H，t，/:7.88Hz,16-H)，3.883.81(1H，m，2—H)，3.76(1H，t,/=8.08Hz，16-H)，3.72(1H,d，/=10.80Hz,19-H)，3.44(1H,d，/=10.80Hz，19-H)，2.74(2H，dd,/=13.14,16.1Hz),2.282.24(1H，m,7_H),2.21(3H，s，CH3)，2.202.17(IH，m,3—H),2.082.03(1H，m,1—H),L43(3H，s，CH3),1.05(3H,s，CH3,18—H),0.92(3H，s，CH3，17-H)，0.79(3H,s，CH3，20—H)。l3CNMR(400MHz,CDC13)5—139.2，127.1(C,4)，107.9，80.5(C15),65.9(C19),65.6(C16),64.7(C2),55.1(C5),52.5，50.5(C9),48.2(d),44.5(C3),40.5(C4)，39.7(C10),36.3(C7),35.7(CI3)，31.9，31.5,27.2(C18)，24.9，22.7(C口),22.2(C6),18.5(CU)，16.8(C20)。7.将奇壬醇50mg和二苯甲酮16mg溶于4ml甲苯中，加入催化量的PPTS，7080°C下搅拌反应10h。向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，并用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲烷溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(5:1)洗脱，得15,16-(1，3-二苯基)异丙叉基奇壬醇(化合物9)33mg，产率66%。化合物9:C33H4204(Mr.502)，白色固体，mp.196-197°C。MS(EI)历/z(%):487.2[M+-CH3,0.2]。'H丽R(400MHz，CDC13)7.537.46(4H，m，Ar),7.367.23(5H，m'Ar),5.11(1H,s，14-H),3.99(1H,t'/=7.02Hz，15-H),3.93(1H,d，/=7.46Hz，16-H),3.85(1H，d，/=7.46Hz，16-H),3.833.77(1H,m，2-H),3.67(1H，d'/=10.8Hz，19-H),3.39(1H,d,/=10.8Hz，19-H)，1.77(1H，t,/=7.62Hz，12-H),L03(3H，s，CH3，18-H)，1.04L02(1H，m，1-H),0.95(3H,s,CH3，17-H),0.65(3H，s,CH3，20-H)。13CNMR(100MHz，CDC13)5卿142.9，142.4,139.0，128.1，127.9,127.8，127.7'127.4,126.2，126.1'109.2，80.6(C15)，66.0，65.8(C19),64.7(C2)，55.1(C5)，50.4(C9),48.1(d),44.5(C3),40.4(C4)，39.8(C10)，36.3(C7),36.2(C13),31.9(C12),27.2(C1S),22.9(C"),22.2(C6),18.5(CU)，16.8(C20)。8.将奇壬醇50mg和3，4-二甲氧基苯甲醛15mg溶于3ml甲苯中，加入催化量的PPTS，7080。C下搅拌反应15h。向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，并用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲烷溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(5:1)洗脱，得15，16-(3,4-二甲氧基)苯甲叉基奇壬醇差向异构体混合物，经制备液相分离得化合物10、化合物ll的单体，产率分别为38%、34%。化合物10:C29H4206(Mr.486)，白色固体，mp.191-192°C。MS(EI)tz/z(%):486.1[M+，1.2]。NMR(400MHz,CDC13)5,:7.056.85(3H,m，Ar)，5.70(1H，s),5.14(1H，s,14-H),4.11(1H,t，/=7.08Hz，15—H),3.97—3.92(2H，m，16—H),3.89(3H,s，OCH3)，3.88(3H,s,0CH3)，3.853.82(1H，ra，2-H),3.71(1H'd,/=10.84Hz，19-H),3.39(1H，d,/=10.84Hz，19-H),2.292.26(1H,ra，7—H)，2.212.18(1H,m,3-H),L04(3H，s，CH3，18-H),L01(3H，s，CH3，17-H),0.78(3H，s，CH3,20-H)。13CNMR(100MHz，CDC13)5聊149.9,149.0，139.4,130.0,127.4(CM),119.6，110.8,109.7，103.7,80.6(C1S)，66.1(C,9),65.6(C16)，64.7(C2),55.9，55.8，55.1，50.6'48.1(d),44.4,40.4(C4),39.7(C,。),36.3(C7)，36.2(C13)，31.8(CI2),27.2(C18)，22.5(C17),22.1(C6)，18.5(C")，16.9(C20)。化合物ll:C29H4206(Mr.486)，白色固体，mp.191-192°C。MS(EI)历A(%):486.1[M+，0.9]。丽R(400MHz,CDC13)7.036.85(3H,m，Ar)，5.84(1H，s),5.13(1H，s,14-H)，4.164.09(2H，m),3.90(3H，s,0CH3),3.88(3H，s,0CH3)，3.903.87(1H,m，16-H),3.853.78(1H，m，2-H),3.71(1H，d,/=10.84Hz,19—H)，3.40(1H,d，/=10.84Hz，19-H)，2.302.26(1H,m，7-H),2.19(1H，dt，./=2.32，12.60Hz,3-H),1.03(3H，s,CH3，18-H)，1.02(3H，s，CH3,17-H)，0.77(3H，s，CH3，20-H)。13C醒R(400MHz,CDC13,3，)149.7，149.1,139.4，131.2，126.8(CI4)，119.0，110.9,109.3,104.3，80.4(C15)，66.8(C19)，65.7(C16),64.7(C2)，56.0，55.9,55.1,50.5，48.1(d),44.4,40.4(C4),39.7(CI0),36.9(C7)，36.3(C13)，32.2(C,2)，27.2(C18)，22.9(C17),22.1(CB)，18.5(CU),16.8(C20)。9.将奇壬醇50mg和对羟基苯甲醛8mg溶于3ml甲苯中，加入催化量的PPTS，70-80°C下搅拌反应14h。向反应混合物中加入一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，并用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲烷溶解后硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(5:1)洗脱，得15,16-对羟基苯甲叉基奇壬醇差向异构体混合物23mg，经制备液相分离得化合物12、化合物13的单体，产率分别为30%、32%。化合物12.C27H3805(Mr.442)，白色固体，mp.190-192°C。MS(EI)历/z(%):442.3[M+，0.1]。LHNMR(400MHz,CDC13)5:7.31—6.77(4H，m,Ar)，5.61(1H,s)，5.19(1H，s，14—H)，4.12(1H,t，J=7.12Hz,15-H)，3.963.93(1H,m，16—H)，3.88(1H，t，J=7.74Hz，16-H),3.803.74(1H，m，2-H)，3.67(1H，d，/=11.0Hz)，3.343.30(1H，m,19-H)，2.30(1H，dd,/=1.84，14.36Hz,7—H)，2.192.16(1H,m,3—H),L01(3H，s，CH3，18-H)，0.98(3H,s，CH3，17—H)，0.82(3H,s,CH3,20-H)。13CNMR(100MHz'CDCl.》3w:160.0'140.9，129.6，129.4，128.3(C14),115.9,105.1，82.0(C15)，66.9，65,7(C19)，56.5(C5)，52.0(C9),45.1(C3),41.4(C4),40.7(C1()),37.5(C7),37.3(C,3)，32.9(CI2)，28.0(C18)，23.3(C17)，23.0(C6),19.6(CU)，17.3(C20)。化合物13:C27H3805(Mr.442)，白色固体，mp.190-192°C，MS(EI)//"%):442.3[M+，0.3]。'H-丽R(400MHz,CDC13)7.266.76(4H，m，Ar)，5.78(1H's)'5.17(1H，s,14-H)，4.11(1H，t，J=6.62Hz,15—H)，4.094.06(1H,m，16—H),3.89(1H，t,/=8.12Hz，16-H)，3.76(1H,m，2_H)，3.67(1H,d，/=11.00Hz),3.353.30(1H，m,19-H),2.29(1H,m,7—H)，2.192.16(1H,m，3—H)，L01(3H，s，CH3，18_H)，1.00(3H,s,CH3，17—H),0.81(3H，s，CH3,20-H)。'3CNMR(100MHz，CDC13)5卿159.4，141.0，131.0，129.0，127.9(C14)，116.0,105.9，81.8(C5)，67.8，65.7(C19),65.2'56.5(C5),52.0(C9)，45.1(C3),41.4(C4),40.7(C10),37.5(C7),33.4(C12),28.1(C18),23.4(C17)，23.3(C6)，19.6(d),17.3(C20)。10.将奇壬醇50mg溶于3ml水杨醛中，加入催化量的PPTS，7080°C下搅拌反应16h。向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，然后用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲烷溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(5:1)洗脱，得15,16-(2-羟基)苯甲叉基奇壬醇的差向异构体混合物23mg，经制备液相分离得化合物14、化合物15的单体，产率分别为36%、40%。化合物14:C27H3S05(Mr.442)，白色固体，rap.193-194°C，MS(EI):442.1[M+,0.2]。LH麵R(400MHz,CDC13)^衅7.77(1H,s)，7.276.86(4H,m'Ar)，5.85(1H,s)，5.10(1H's，14—H)，4.15(1H，t,/=7.28Hz,15-H),3.983.91(2H,m,16-H),3.863.78(1H，m，2—H),3.733.68(1H，m,19—H),3.37(1H,d，/=10.92Hz,19—H),2.29—2.25(1H,m，7-H)，2.212.18(1H，m,3-H)，2.041.98(1H,m,1—H)，1.03(3H，s,CH3，18_H)，0.96(3H,s，CH3，17-H),0.77(3H，s，CH3，20-H)。13CNMR(100MHz，CDCL)3,:130.6，128.4，127.7，126.5，120.5，119.7,116.9,104.0，80.9(C15),65.8(CI9)，65.4(C16),64.5(C2)，58.2，55.0(C5),50.5(C9)，47.9(d),44.2(C3),40.4(C4)，39.6(C10),36.1，31.8(Cl2),27.2(Cl8)，22.7(Cl7),22.0(C6),18.4，18.3，16.8(C20)。化合物15:C27H3805(Mr.442)，白色固体，mp.193-194°C，MS(EI):394.1[M+，0.2]。'H醒R(400MHz,CDC13)5—7.93(1H,s)，7.276.86(4H,m，Ar),6.07(1H，s)，5.II(IH,s，14—H)，4.184.07(2H，m),3.91(1H,t，/=7.62Hz，16—H),3.863.78(1H,m，2—H)，3.70(1H,d，/=10.80Hz,19-H)，3.39(1H，d,/=10.80Hz,19-H)，2.302.26(1H，m,7-H),2.19(1H,dt'/=2.32，12.60Hz,3-H)，1.04(3H，s，CH3,18-Ii)，1.02(3H's，CH3,17-H)，0.74(3H，s，CH3,20-H)。1:!CNMR(100MHz,CDC13)5—155.5，155.3'140.0'130.7，130.5,128.5'128.2，127.8,126.5,126.2，121.6，119.9,119.7，117.1，117.0,104.5，104.4，81.0，80.4(C15),66.3，65.8(C19)，65.7(C16),64.7,64.6，63.4，55.1(C5),50.8，50.4,48.1(d),44.4(C3)，40.4(C4)，39.7(C10),36.6,36.3,36.2,36.0,32.0,31.8，27.3(C'》，23.0(C17)，22.9(C6),22.3(C)，22.1(C20)。11.将奇壬醇50mg和香兰素20mg溶于4ml甲苯中，加入催化量的PPTS，7080°C下搅拌反应20h。向反应混合物中一定量的水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，并用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓缩，以二氯甲烷溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(5:1)洗脱，得15，16-(3-甲氧基-4-羟基)苯甲叉基奇壬醇的差向异构体混合物23mg，经制备液相分离得化合物16、化合物17的单体，产率分别为38%、34%。化合物16:C28H4。06(Mr.472)，白色固体，即.192-193。C。MS咖//"%):472.0[M+，0.2]。'H陋R(400MHz，CDCU^，7.00-6.89(3H,m,Ar),5.82(1H,s),5.12(1H，s,14-H)，4.10(1H,d，/=7.22Hz,15-H)，4.09(1H，d,/=7.26Hz'16-H),3.92(3H,s,0CH3),3.88(1H,t,/=7.62Hz,16-H),3.863.80(1H,m，2-H)，3.71(1H,d，/=10.88Hz，19-H),3.43(1H,d，/=10.88Hz,19—H)，2.302.26(1H,m，7-H),2.222.17(1H，m,3—H)，2.04(1H，dt，/=12.12,2.48Hz,1—H)，L88(1H,dt,13.24,4.12Hz，12-H),1.80(1H,t，/=7.80Hz，9-H)，1.731.66(1H,tn，6—H),1.241,21(1H,m，5-H),1.191.13(1H，m，12-H),1.05(3H,s，CH3，18-H)，1.061.00(1H，m，1-H)，1.02(3H,s,CH3,17-H),0.77(3H，s，CH3,20-H)。'3C腿(100MHz,CDCi3)5鹏146.5，139.4'130.6，126.9(C,4),119.9'114.1,108.7'104.4,80.5(CI5)，66.8(C19),65.9(C16),64.8(C2)，56.0,55.2(C5),50.6(C9)，48.2,44.6(C3),40.5(C4),39.8(C,。)，36.9(C7)，36.3(C13),32.2(C12)，27.3(C18),22.9(C17),22.2(C6)，18.5(CU),16.9(C20)。化合物17:C28H4。06(Mr.472)，白色固体，mp.192-193°C，MS(EI):472.0[M+，0.1]。'HNMR(400MHz'CDCl:,)57.036.89(3H,m，Ar),5.67(1H，s),5.14(1H，s,14-H),4.134.IO(IH,m,15—H)，3.973.92(1H,m，16—H),3.93(1H,t'J=7.72Hz,16—H)，3.90(31-1,s,OCHO,3.883.80(1H，m,2-H),3.72(1H,d，/=10.80Hz,19-H),3.42(1H，d，/=10.80Hz'19-H),2.302.26(1H,m'7-H)，2.20(1H,dt'12.70,2.40Hz,3-H)，2.062.03(1H，m，1—H)，1.88(1H'dt,13.22，4.04Hz，12—H),1.831.79(1H，m,9-H),1.231.21(1H,m,5_H)，L05(3H,s，CH3,18-H),1.00(3H's,CH3，17-H)，0.78(3H,s，CH3,20-H)。'3CNMR(100MHz，CDC13)3—146.5,139.4'129.3，127.5(C14)，120.4，114.1,109.0，103.8，80.6(C15),66.1(C,9),65.8(C16),64.7(C2)，55.9,55.1(C5),50.6(C9)，48.2(d),44.5(C3),40.5(C4),39.7(C,。)，36.3(C7),36.2(CK,)，32.0(C12),27.2(C18)，22.4(C17)，22.2(C6)，18.5(C丄16.9(C2。)12.将奇壬醇100mg溶于1.5ml乙酸酐中，于80'C搅拌反应。用TLC跟踪反应，2h后原料点消失，反应停止。反应产物加低浓度稀盐酸，以中和过量的乙酸酐。然后将产物用乙酸乙酯萃取三次，使产物全部进入乙酸乙酯相中。将乙酸乙酯相用饱和碳酸氢钠溶液萃取，以中和残留的乙酸酐。然后将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取以除去水，最后将有机相用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲垸溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮体系(3:1)洗脱，得到化合物18、化合物19、化合物20共三个单体的乙酰化衍生物，产率分别为30%、24%、15%。化合物18(2,15，16,19-四乙酰基奇壬醇)C28H4208(Mr.506)，无色油状液体。'H-刚R(400MHz，CDCl3)S，5.17(1H,s,14-H),5.135.IO(IH，dd,/=2.28,9.12Hz'15-H)，4.974.90(1H,m，2_H)，4.364.32(1H，dd,,/=2.32，11.64Hz，16_H)，4.14(1H，d,/=11.18Hz,19-H)，4.094.04(1H，dd，/=9.2，11.64Hz'16_H)，3.98(1H，d,/=11.18Hz，19—H),2.30(1H，dt，/=2.30，14.20Hz,7—H)，2.13(1H，dt，/=2.14，12.68Hz,3-H),2.08(3H，s，CH3)，2.06(3H,s'CH3),2.02(3H，s，CH:,),2.01(3H，s，CH3)，1.79(1H，t,/=8.14，9-H)，1.72(1H，dt，/=2.82，12.84Hz，6-H),L611.50(2H,m，11-H),1.36(1H，qd，/=4.36,12.88Hz,6-H),1.23(1H，dd，，/=2.08，13.08Hz，5—H),1.IO(IH，t，/=12.14Hz，3—H)，1.03(3H,s,CH3，18—H)，0.96(3H,s,CH:,，17—H)，0.91(3H，s,CH3,20-H)。"C-NMR(100MHz'CDCl3)171.0,170.9'170.4,170.2'139.2,127.2(C14)，74.4(C15)，68.0(C,9)，66.9(C2)，63.7(C16)，55.1(C5),50.7(C9)，43.9(d),41.1(C3)，39.5，38.6,36.9，36.0(C7)，31.8(C12),27.8(C,8)，23.3(CI7),22.1(C6)，21.3,20.9，20.8，20.7，18.5(CU)，16.2(C2。)化合物19(2，16，19-三乙酰基奇壬醇)C26H4。07(Mr.464)，无色油状液体。lH-刚R(400MHz，CDCl3)3,:5.18(1H，s,14-H),4.964.88(1H,m),4.23(1H'dd，，/=2.08，11.32Hz，16—H)，4.14(1H,d,/=11.2Hz'19—H)，4.05(1H，dd，/=9.16,11.32Hz，16—H),3.95(1H,d,/=11.2，19-H),3.71(1H，dd,/=1.84,9,04Hz,15-H),2.322.28(IH，m,7—H)，2.10(3H，s，CH3)，2.06(3H,s，CH3)，2.03(3H，s,CH3)'1.04(3H，s,CH3),0.92(3H,s,CH3),0.85(3H，s,CH3)。13C_NMR(100MHz，CDC13)5，171.7,171.3,170.6，138.9，128.5(CI4)，74.0(C15),68.4(C2),67.2(C19)，66.9(Cie),55.3(C5),51.0(C9),44.2(C,)，41.3(C3)，39.7，38.8，37.6，36.2(C7)，31.6(C12)，28.0(C,8),22.9(C17),22.3(C6)，21.6，21.2,21.1，18.8(C)，16.5(C20)。化合物20(16,19-二乙酰基奇壬醇)(:2晶806(Mr.422)，无色油状液体。'H-醒R(400MHz,CDC13)5聊5.17(1H，s，14-H),5,13-5.IO(IH,dd，,2.28Hz;9.12Hz,15-H),4.97-4.90(IH，m)，4.36-4.32(1H,dd，".32Hz;11.64Hz,16—H),4.14(1H'd，,11.18Hz,19_H)，4.06(1H,dd，,9.2Hz;11.64Hz，16—H),3.98(1H,d，,11.18，19-H)'2.32—2.10(2H，m)，2.08(3H，s，CH3),2.07(3H，s，CH3)，2.02(3H,s，CH3),2.01(3H，s,CH3)，1.82-1.70(2H，m)，1,61-1.50(3H，m),1.42-1.07(5H,m),1.00-0.85(lH,m)，1.03(3H,s，CH3),0.96(3H，s，CH3),0.91(3H,s，CH3)。13C-NMR(100MHz,CDC13),5卿171.4，170.5，139.0，128.2,73,8(C,5)，67.8(C2)，67.2(CI9)，66.6(CI6)，55.0(C5)，50.7(C9)，45.O(C,)，42.9(C3)，39.5,38.7，37.6,36.1(C7),31.5(C12)，28.0(C18)，23.3(C17),22.2(C6)，21.0,20.9，20.7，20.7，18.5(CU)，16.1(C2。)。12.将奇壬醇lOOmg于0°C下溶于5mlDMF中，严格无水条件下滴加NaH(120mg)、DMF(7ml)形成的悬浊液，30-50°C反应lh，再于0°C条件下滴加Me2S(X0.lml〈过量)反应0.5h。向反应混合物中加氨水，然后用乙酸乙酯萃取三次。将乙酸乙酯相用饱和碳酸氢钠溶液萃取。然后将乙酸乙酯相用饱和食盐水萃取除水，并用无水硫酸钠干燥过夜。将干燥过夜的乙酸乙酯相浓縮，以二氯甲烷溶解后上硅胶柱层析，以石油醚-丙酮梯度洗脱，得到化合物18、化合物19、化合物20共三个单体的甲醚化衍生物，产率分别为24%、22%、15%。化合物21(2，15，16-三甲氧基奇壬醇):C23H4。04(Mr.380)，白色固体，mp.195-196。C。'H-NMR(400MHz，CDCl3)5w:5,14(1H's，14-H)，3.72(1H，d,/=10.76Hz，19-H)，3.59(1H，dd，/=2.12,10.32Hz，16-H)，3.51(3H，s,0CH3),3.43(1H，d，/=10.32Hz，16-H),3.37(3H,s,0CH3)，3.35(3H，s,0CH3)，3.373.29(1H,m，2-H),3.20(1H，dd,/=2.08，7.52Hz,15-H)，3.00(1H,s)，2.89(1H，s),2.312.27(1H，m，7-H)，2.272.24(1H，m，3—H)，2.09(1H，dt，/=2.92，12.12Hz，卜H),2.121.92(1H,m，7—H),1.94(1H，dt，/=3,08，13.72Hz，12-H)1.80(1H，t，/=8.36Hz,9—H),1.721.67(1H,m，6-H)，1.631.47(2H,m，1卜H)，1.29(1H，qd，，/=4.36，12.72Hz，6—H),1.22(1H，dd,/=1.32,13.12Hz,5-H)1.271.20(lH,m,5-H),1.04(3H''s,CH3,18-H)，0.85(3H's'CH3,17_H),0.80(3H，s,CH3，20-H)。。C-醒R(100MHz,CDCl3)4:137.7，129.2(C14)，84.7(Cl5),74.6,73.7'65.8，60.4，59.0,55.4(C5)，51.1(C9)，50.7(C,)，44.5(C3)，40.5，40.1，39.2,37.9(C7)，36.2，31.9(C12)，27.3(C,》，23.3(CI7),22.2(C6),18.9(C"),16.8(C20)。化合物22(15,16，19-三甲氧基奇壬醇)C23FiA(Mr.380)，白色固体，mp.194-1%°C。'H-NMR(400MHz'CDCl3)5，5.14(1H，s,14-H)，3.89-3.81〈IH,ro,2-H)，3.60〈1H,dd，/=2,16,10.28Hz,16-H),3.50(3H，s>0CH3)，3.43(1H,dd，/=7.6,10.28Hz,16-H)，3.40(1H,d,/=9.01Hz，19—H)，3.35(3H，s,0CH》，3.29(3H,s,0CH》，3.20(1H，dd,/=2.16，7.48Hz，15—H)，3,ll(lH,d'/=9.01Hz'19-H),2.26(1H,ddd,1.96,4.32，14.12Hz,7-H)，2.24(1H,ddd，/=2.44,3.76,12.56Hz,3—H),1.961.92(1H，m,12—H),丄.79(1H，t,/=8.36Hz,9-H)，L711.67(1H，m，6-H),1,631.56(2H'm,11—H)，L29(1H,qd，/=4.46，12.88Hz，6-H)，1.13(1H,dd，2.24,12.72Hz,5-H)，1.041.02(1H,m,1-H)，1.02(3H，s,CH.,,18-H)，0.86(3H,s,CH3,17-H),0.82(3H,s，CH:i，20-H)。'3C-N服(100MHz，CDCl》^卿137.8，129.2(CM)，84.7(C5)，74.7(C16),65.O(C丄60.4,59.3,59.0，55.2(C5),51.1(G),48.1(Ck)，45.4(C3),39.7,39.6,38.0(G),36.3'32.0(Cl2),28.1(C18)，23.4(CI7)，22.3(C6),18.9(CJ,16.7(C2。〉。化合物23(15,16二甲氧基奇壬醇):C22fm(Mr.366)，白色固体，卿.198-200。C。'H-刚R(400MHz,CDC13)3啊5.18(1H's,14-H)，3.81-3.73(IH，m'2-H),3.68(1H'd，/=11.00Hz,19-H),3.62(1H，dd，/=2.12，10.40Hz，16-H),3.48(3H's，0CH3)，3.42(1H,dd，/=7.48'10.44Hz,16-H)，3.34-3.31(1H，m,19-H),3.32(3H,s,0CH3)，3.25(1H,dd,/=2.10,7.46Hz,15-H)，2.27(1H,dt，./=2.08,12.62Hz'7_H)，2.17(1H，dt，/=2.32,12.72Hz，3-H),1.95(1H,dt,.7=3.42,13.80Hz,12-H)，L83(1H't，/=8.32Hz，9-H),1.75-1.70(1H，m，6-H)，1.651.50(2H，ra,ll-H)，1.31(1H'qd,/=4.32，12.88Hz'U-H),L22(1H,dd，L76，12.84Hz,5—H)，1.06—0.99(1H,m,1-H)，1.01(3H，s，CH3，18-H),0.83(3H,s,CH3，17-H)，0.83(3H,s,CH3，20-H)。13C-NMR(100MHz,CDCl》5P，139.5,130.2(C14)，86.0(CS)'75.6(Cie),65.7(C19)，65.2(C2)，60.7,59.2，56.5(C5),52.5(C》，49.l(C')，45.l(C》，41.4，40.6,39.1,37.4(C》，33.2(C12)，28.0(C18)，23.7(C17),23.3(C6),20.l(C,)，17.2(C2。)。实施例2奇壬醇衍生物体外抑制前炎症因子TNF-a及IL-10释放的实验研究实验材料1.细胞正常人外周血单核细胞(PMBC)受试药物奇壬醇及其衍生物，由山东靶点药物研究公司分离制备。2.阳性对照地塞米松(美国Sigma公司产品)3.试剂Ficoll-PaquePlus(AmershamBioscience);内毒素(LPS'^sc力arz'c力/acoj7肌六B4，Sigma)和地塞米松(DEX，Ca皿。chetn);TNF-a及IL-1e的ELISA测定试剂盒(晶美生物工程公司)；二甲基亚砜(DMS0,Sigma);胰蛋白酶(A虹esco);RPMI1640培养基、青霉素、链霉素及胎牛血清(Gibco)。4.仪器CKX31型倒置显微镜(01卿us);恒温C02培养箱(Thermo);5810R型台式高速低温离心机(E卯endorf);全自动酶标仪(Biotek)。实验方法新鲜血液以EDTA为抗凝剂，Ficoll分离血细胞，重悬细胞于含有10%胎牛血清的RIMP1640培养基中。在96孔板中加入100nL密度为1X1()5细胞/mL新分离的细胞，每孔细胞总数为104个，每个样品作3个孔。(1)在细胞中加入指定浓度的试药(终浓度分别为3，10，30，100，300pg/mL，加样量为lOuL)和阳性对照(地塞米松，10uM)。置于37°0含5%0)2的培养箱中保温15分钟；(2)加入10yL浓度为100ug/mL的LPS，置于37。C含5%C02的培养箱中保温16小时；(3)于1000rpm下离心15分钟，将上清转移入新的板中，ELISA法测定TNF-a及IL-10的浓度；或冻藏于-2CTC，避免反复冻融。(4)按下式计算抑制率，并求算IC5。值。药物处理组一空白组抑制率(％)二(1内毒素处理组一空白组)X100实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表2.奇壬醇衍生物化合物9抑制TNF-a表达呈剂量依赖关系<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表3.奇壬醇衍生物化合物9抑制il-ie表达呈剂量依赖关系<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>以上实验表明，在正常人外周血单核细胞中奇壬醇衍生物能明显抑制内毒素诱导的前炎症因子TNF-a和IL-ip的表达，且呈剂量依赖关系。实施例3奇壬醇衍生物体外抑制RAW264.7细胞释放NO的实验研究实验材料1.细胞小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7，购自中科院上海细胞库(ATCC)受试药物奇壬醇及其衍生物，由山东靶点药物研究公司分离制备。2.试剂RPMI1640培养基、青霉素、链霉素、胎牛血清购自Gibco公司；胰蛋白酶购自Amresco公司；LPS(&c力er/c力/acoJj'W7六B4)购自Sigma公司产品。其他常用试剂均为国产分析纯。3.仪器CKX31型倒置显微镜(Olympus);恒温(302培养箱(Thermo);5810R型台式高速低温离心机(Eppendorf);全自动酶标仪(Biotek)。实验方法-RAW264.7细胞用含10%胎牛血清、100pgmL—'链霉素，IOO单位mL—'青霉素的RPMI1640培养液于37'C下在C02培养箱中常规培养，隔天传代，细胞于对数生长期呈半贴壁状态生长。取对数生长期的RAW264.7细胞，用0.25%胰蛋白酶消化，制成每毫升含5X105个细胞的单细胞悬液，接种于96孔细胞培养板(每孔200rtJ，每组设3个平行孔。培养lh后分别加入不同浓度的受试药物及LPS(终浓度lWmL—')，同时设LPS组和空白对照组，置37'C培养箱中培养24h后，吸取培养液上清100叱至酶标板屮，加入等体积的Griess试剂(Griess试剂A:1g/LN-萘乙二胺盐酸盐；Griess试剂B:体积分数^(H3P04)=5%,10g/L对氨基苯磺酰胺。使用前等体积混合试剂A和B即得)，室温反应5min后测定540nm的吸光值。用浓度为0、1、2、5、10、20、50、100MmolL—1的NaN02绘制标准曲线，计算细胞培养上清液中NO—2的浓度以及对N0释放的抑制率，并计算IQ值。N0释放抑制率(％)=100X丄PS十样品2JiKS,2J空白实验结果表4.奇壬醇衍生物体外抑制RAW264.7细胞释放NO<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>权利要求1.通式(I)和通式(II)的化合物通式(I)通式(II)其中，通式(I)中，R1、R2、R3、R4可以相同或不同，并且独立地代表-OH、-SH、-NH2、-OR5、-O(CO)R5、-NHR5、-N(R5)2、-NHCOR5、-N(C1-6烷基)(C6-14芳基)、-SR5、-SOR5、-SO2R5、-OSO3H、-OSO2R5、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br或-I，且不同时为-OH；R5独立地代表C1-6烷基、C6-14芳基、单或多不饱和的、直链或支链的C1-12链烯基、具有3-14个环成员的单、双或三环饱和的或单或多不饱和的碳环、具有5-15个环成员和1-6个杂原子的单、双或三环饱和的或单或多不饱和的杂环；通式(II)中，R1、R2可以相同或不同，并且独立地代表C1-6烷基、C6-14芳基、-(C1-6烷基)(CO)(C1-6烷基)、单或多不饱和的、直链或支链的C1-12链烯基、具有3-14个环成员的单、双或三环饱和的或单或多不饱和的碳环、具有5-15个环成员和1-6个杂原子的单、双或三环饱和的或单-或多不饱和的杂环、苯基，其中苯基可被下列基团一次或多次取代-H、-OH、-SH、-NH2、-NH(C1-6烷基)、-NH(C1-6烷基)2、-O(C1-6烷基)、-O(CO)(C1-6烷基)、-S(C1-6烷基)、-SO(C1-6烷基)、-SO2(C1-6烷基)、-OSO3H、-NO2、-CN、-F、-Cl、-Br、-I；或者R1、R2以交联的形式形成含5-8个环单位的饱和或不饱和碳环或杂环。2.根据权利要求1所述的通式(I)化合物，其特征在于R,、R2、R3、R,为-OH或-0CH3，且不同时为-0H。3.根据权利要求1所述的通式(I)化合物，其特征在于Rs优选为N、0或S的单、双或三环饱和的或单或多不饱和的杂环。4.根据权利要求1所述的通式(II)化合物，其特征在于R,、&优选为Cw烷基、-CH2C0CH3、^>其中Re、R为-H、-0H或-0CH3。5.根据权利要求l所述的通式(n)化合物，其特征在于R,、R2交联为6—8个碳原子的饱和碳环。6.权利要求1的化合物的生理可接受的盐，其特征是通过将碱用无机酸或有机酸中和、或通过将酸用无机碱或有机碱中和、或将叔胺季铵化生成季铵盐得到。7.通式(I)和通式(II)的化合物及其盐作为治疗活性成分，用于制备治疗由前炎症细胞因子TNF-a、白介素(IL)-及炎性分子NO介导的疾病的药物。8.—种药物组合物，包括治疗有效量的一种或多种权利要求1中的化合物、常规的生理上可接收的载体和/或稀释剂或助剂。全文摘要本发明涉及奇壬醇衍生物及其作为前炎症细胞因子抑制剂的应用。通式(I)及通式(II)所表示的奇壬醇衍生物能够抑制前炎症细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β、炎性分子一氧化氮(NO)的作用，并且适用于制备药物。文档编号C07C35/00GK101597212SQ20081001644公开日2009年12月9日申请日期2008年6月2日优先权日2008年6月2日发明者关玉昆,珂刘,刘军锋,梁冬冬,卉许,烽赵申请人:山东靶点药物研究有限公司