专利名称：作为taar1配体的吡啶甲酰胺和苯甲酰胺衍生物的制作方法
专利说明作为TAAR1配体的吡啶甲酰胺和苯甲酰胺衍生物 本发明涉及下式化合物或者其药学上适当的酸加成盐
其中 R1为氢、卤素、低级烷基、低级烷氧基、卤素取代的低级烷基、-O-(CH2)p-芳基或芳基； R2为卤素、卤素取代的低级烷基、NR’R”、-(CH2)p-杂芳基，或者为-O-杂环烷基，其中杂芳基或杂环烷基上的取代基为低级烷基； R’/R”彼此独立为氢、-(CH2)p-O-低级烷基、-(CH2)p-任选取代的芳基、-(CH2)p-杂芳基、-(CH2)p-杂环烷基， 或者R’和R”可以与它们所连接的N原子一起形成杂环烷基，该杂环烷基任选被下列基团取代低级烷基、-CH2-环烷基、-S(O)2CH3、-(CH2)p-O-低级烷基或取代的芳基，其中芳基上的取代基为低级烷基或低级烷氧基； W为苯基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基、吡啶-2-基、吡啶-3--基、吡啶-4-基、吲哚基或环烷基； L为-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-或-CH2CH2CH2-； X为N或CH； n为1或2；当n为2时，R1可以是相同或不同的； o为1或2；当o为2时，R2可以是相同或不同的； p为0、1、2或3， 但是不包括下列化合物 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-苯乙基-烟酰胺(CAS 199478-31-4)， N-(3，4-二氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺(CAS 424815-98-5)， N-(4-氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺(CAS 544661-83-8)， N-(3-氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺(CAS 796051-07-5)，和 N-苯乙基-6-苯基氨基-烟酰胺(CAS 571913-74-1)。
本发明包括所有的外消旋混合物、所有其相应的对映体和/或光学异构体。
已经发现，式(I)化合物对痕量的胺结合受体(trace amine associatedreceptors(TAARs))具有良好的亲和性，特别是TAAR1。
所述化合物可以用于治疗抑郁症、焦虑症、双相障碍、注意力缺失过动症(ADHD)、压力相关性疾病、精神性疾病例如精神分裂症、神经性疾病例如帕金森病、神经退行性疾病例如阿尔茨海默病、癫痫、偏头痛、高血压、药物滥用和代谢性疾病例如饮食性疾病、糖尿病、糖尿病并发症、肥胖、血脂异常、能量消耗和吸收疾病、体温动态平衡疾病和障碍、睡眠和昼夜节律疾病以及心血管疾病。
典型的生物胺类(血清素、去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、组胺)作为神经递质在中枢和外周神经系统中起到了重要作用[1]。它们的合成和储存以及它们的降解和释放后的再摄取是被密切调控的。已经知道，生物胺水平的平衡对多种病理条件下脑功能的改变负有责任[2-5]。第二类内源性胺化合物，即所谓的痕量胺(TAs)，与典型生物胺在结构、代谢和亚细胞定位方面具有显著的重叠。TAs包括p-酪胺、β-苯乙胺、色胺和羟苯乙醇胺，它们通常以较典型生物胺低的水平存在于哺乳动物神经系统中[6]。
它们的失调与各种精神性疾病有关，例如精神分裂症和抑郁症[7]，也与其它疾病有关，例如注意力缺失过动症、偏头痛、帕金森病、药物滥用和饮食性疾病[8，9]。
长期以来，人们仅基于TA-特异性受体在人类和其它哺乳动物CNS中的解剖学上的离散型高亲和性TA结合位点对其进行了假定[10，11]。因此，TA的药理学作用被认为是通过典型生物胺的已知机理通过启动其释放、抑制其再摄取或通过与其受体系统“交互作用(crossreacting)”而进行介导[9，12，13]。这种观点由于近来GPCRs新家族的多个成员(痕量胺相关受体(TAARs))的鉴定而发生了很大的改变[7，14]。人类中有9种TAAR基因(包括3种假基因)，在鼠中有16种基因(包括1种假基因)。TAAR基因不含有内含子(但是有一个例外，即TAAR2含有1个内含子)，彼此相邻位于相同的染色体片段。所述受体基因的种系发生学上的相关性与深入全面的(in-depth)GPCR药效结构相似性比较和药理学数据一致，这表明这些受体形成三个不同的亚族[7，14]。TAAR1为四种基因的第一亚类(TAAR1-4)，在人类和啮齿动物之间高度保留。TAs通过Gαs激活TAAR1。Tas的失调是各种下列疾病的病因如抑郁症、精神病、注意力缺失过动症、药物滥用、帕金森病、偏头痛、饮食性疾病、代谢性疾病，因此，TAAR1配体很有可能可以用于治疗这些疾病。
因此，有关痕量胺相关受体的知识引起了人们的广泛兴趣。
本文引用的参考文献 1.Deutch，A.Y.和Roth，R.H.(1999)，神经递质(Neurotransmitters).InFundamental Neuroscience(第二版)(Zigmond，M.J.，Bloom，F.E.，Landis，S.C.，Roberts，J.L，和Squire，L.R.，eds.)，第193-234页，Academic Press(学术出版社)； 2.Wong，M.L.和Licinio，J.(2001)，抑郁症的研究和治疗方法(Research andtreatment approaches to depression).Nat.Rev.Neurosci.2，343-351； 3.Carlsson，A.等(2001)，单胺、谷氨酸盐和GABA在精神分裂症中的相互作用新证据(Interactions between monoamines，glutamate，andGABA in schizophrenianew evidence).Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.41，237-260； 4.Tuite，P.和Riss，J.(2003)，帕金森病药理学治疗中的新进展(Recentdevelopments in the pharmacological treatment of Parkinson′sdisease).Expert Opin.Investig.Drugs 12，1335-1352， 5.Castellanos，F.X.和Tannock，R.(2002)，注意力缺失/过动症的神经病学内表型研究(Neuroscience of attention-deficit/hyperactivity disorderthe search for endophenotypes).Nat.Rev.Neurosci.3，617-628； 6.Usdin，Earl；Sandler，Merton；Editors.心理药理学丛书(Psychopharmacology Series)，第1卷痕量胺和脑(Trace Amines andthe Brain).[Proceedings of a Study Group at the 14th Annual Meetingof the American College of Neuropsychoparmacology，San Juan，Puerto Rico](1976)； 7.Lindemann，L.和Hoener，M.(2005)，新GPCR家族激发的痕量胺中的复兴(A renaissance in trace amines inspired by a novel GPCR family).Trends in Pharmacol.Sci.26，274-281； 8.Branche k，T.A.和Blackburn，T.P.(2003)，作为新疗法靶点的痕量胺受体传说、虚构和事实(Trace amine receptors as targets for noveltherapeuticslegend，myth and fa ct).Curr.Opin.Pharmacol.3，90-97； 9.Premont，R.T.等(2001)，寻找痕量隐蔽性胺(Fouowing the trace ofelusive amines).Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.98，9474-9475； 10.Mousseau，D.D.和Butterworth，R.F.(1995)，人脑中高亲和性[3H]色胺结合位点(A high-affinity[3H]tryptamine binding site in human brain).Prog.Brain Res.106，285-291； 11.McCormack，J.K.等(1986)，在大鼠和犬中枢神经系统中色胺结合位点的自动放射成相定位(Autoradiographic localization of tryptaminebinding sites in the rat and dog central nervous system).J.Neurosci.6，94-101； 12.Dyck，L.E.(1989)，在有或无单胺氧化酶抑制剂存在下某些内源性痕量胺自大鼠纹状体片的释放(Release of some endogenous trace aminesfrom rat striatal slices in the presence and absence of a monoamineoxidase inhibitor).Life Sci.44，1149-1156； 13.Parker，E.M.和Cubeddu，L.X.(1988)，苯丙胺、苯乙胺和相关药物对多巴胺流出、多巴胺摄取和吗吲哚结合的作用的比较研究(Comparativeeffects of amphetamine，phenylethylamine and related drugs ondopamine efflux，dopamine uptake and mazindol binding).J.Pharmacol.Exp.Ther.245，199-210； 14.Lindemann，L.等(2005)，痕量胺结合受体形成结构上和功能上不同的新的G蛋白偶合受体的亚族(Trace amine associated receptors formstructurally and functionally distinct subfamilies of novel Gprotein-coupled receptors).Genomics 85，372-385。
本发明的目的是新的式(I)化合物以及式(I)化合物及其可药用的盐在生产用于治疗与痕量胺相关受体亲和性相关的疾病的药物中的用途、落入式(I)范围内的新的特殊化合物、它们的制备方法、基于本发明化合物的药物和它们的生产方法以及式(I)化合物在控制或预防下列疾病中的用途，所述疾病例如抑郁症、焦虑症、双相障碍、注意力缺失过动症、压力相关性疾病、精神性疾病例如精神分裂症、神经性疾病例如帕金森病、神经退行性疾病例如阿尔茨海默病、癫痫、偏头痛、高血压、药物滥用和代谢性疾病例如饮食性疾病、糖尿病、糖尿病并发症、肥胖、血脂异常、能量消耗和吸收疾病、体温动态平衡疾病和障碍、睡眠和昼夜节律疾病以及心血管疾病。
使用本发明化合物的优选的适应症为抑郁症、精神病、帕金森病、焦虑症和注意力缺失过动症(ADHD)。
本文中使用的术语“低级烷基”是指具有1-7个碳原子的饱和的直链-或支链-基团，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、正-丁基、异-丁基、2-丁基、叔-丁基等。优选的烷基为具有1-4个碳原子的基团。
本文中使用的术语“低级烷氧基”是指其中烷基如上文所定义并通过氧原子连接的基团。
本文中使用的术语“卤素取代的低级烷基”是指如上文所定义的烷基，其中至少一个氢原子被卤素所代替，例如CF3、CHF2、CH2F、CH2CF3、CH2CH2CF3、CH2CF2CF3等。
术语“卤素”是指氯、碘、氟和溴。
术语“环烷基”是指具有3-6个碳原子的饱和的环，例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
本文中使用的术语“芳基”是指碳环环系，它具有6-10个碳原子并形成一或多个环，并且其中至少一个环为芳族环，例如苯基、萘基或5，6，7，8-四氢萘-1-基。最优选的芳基为苯基。
本文中使用的术语“杂芳基”为碳环环系，它具有5-10个碳原子并形成一或多个环，并且其中至少一个碳原子选自O、N或S的杂原子所代替，并且其中至少一个环为芳族环，例如噁唑基、吡啶基、噻吩基、喹啉基、吡咯基、呋喃基、苯并咪唑基、咪唑基等。最优选的基团为吡啶基。
术语“杂环烷基”是指不饱和的碳环，其中1或2个碳原子被N、O或S所代替，例如哌嗪基、吡咯烷基、吗啉基或哌啶基。
术语“可药用的酸加成盐”包括与无机和有机酸形成的盐，所述酸例如盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、富马酸、马来酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、对-甲苯磺酸等。
优选的式(I)化合物为其中X为N的化合物。最优选下式化合物或其药学上适当的酸加成盐
其中 R1为氢、卤素、低级烷基、低级烷氧基、卤素取代的低级烷基、-O-(CH2)p-芳基或芳基； R’/R”彼此独立为氢、-(CH2)p-O-低级烷基、-(CH2)p-任选取代的芳基、-(CH2)p-杂芳基、-(CH2)p-杂环烷基， 或者R’和R”可以与它们所连接的N原子一起形成杂环烷基，该杂环烷基任选被低级烷基、-CH2-环烷基、-S(O)2CH3、-(CH2)p-O-低级烷基取代或被取代的芳基取代，其中芳基上的取代基为低级烷基或低级烷氧基； W为苯基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吲哚基或环烷基； L为-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-、-CH2CH2CH2-， n为1或2；当n为2时、R1可以是相同或不同的； p为0、1、2或3； 但是不包括下列化合物 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-苯乙基-烟酰胺(CAS 199478-31-4)和 N-苯乙基-6-苯基氨基-烟酰胺(CAS 571913-74-1)。
该组优选的化合物包括其中-NR’R”一起形成杂环烷基(更特别是4-甲基-哌嗪-1-基)的化合物，例如下列化合物 N-苄基-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， (N-(4-氯代-苄基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， N-[2-(3-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-烟酰胺， N-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， N-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， N-(2-苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基-乙基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， N-(2-联苯-4-基-乙基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺， 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(3-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺， N-[2-(4-苄基氧基-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， N-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺， N-(2-环己基-乙基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，或 N-环己基甲基-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺。
该组优选的化合物还包括其中-NR’R”一起形成杂环烷基例如哌嗪-1-基的化合物，例如 N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺， N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺， N-[2-(3-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺，或 N-[2-(4-苄基氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺。
还优选其中R2为-O-杂环烷基(更特别为1-甲基-哌啶-4-基氧基)的化合物，例如化合物6-(1-甲基-哌啶-4-基氧基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺。
在该组中，优选其中o为2、R2之一为NR’R”并且另一个R2为卤素的化合物，例如下列化合物 5-溴-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺 5-溴-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺 5-溴-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺，或 5-溴-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺。
本发明的一个实施方案为式(I)化合物或其药学上适当的酸加成盐
其中 R1为氢、卤素、低级烷基、低级烷氧基、卤素取代的低级烷基、-O-(CH2)p-芳基或芳基； R2为卤素、卤素取代的低级烷基、NR’R”、-(CH2)p-杂芳基，或为-O-杂环烷基，其中杂芳基或杂环烷基上的取代基为低级烷基； R’/R”彼此独立为氢、-(CH2)p-O-低级烷基、-(CH2)p-任选取代的芳基、-(CH2)p-杂芳基、-(CH2)p-杂环烷基， 或者R’和R”可以与它们所连接的N原子一起形成杂环烷基，该杂环烷基任选被低级烷基、-CH2-环烷基、-S(O)2CH3、-(CH2)p-O-低级烷基或取代的芳基所取代，其中芳基上的取代基为低级烷基或低级烷氧基； Ar为苯基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基，或为吲哚基； L为-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-或-CH2CH2CH2-； X为N或CH； n为1或2；当n为2时、R1可以是相同或不同的； o为1或2；当o为2时、R2可以是相同或不同的； p为0、1、2或3； 但是不包括下列化合物 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-苯乙基-烟酰胺， N-(3，4-二氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺， N-(4-氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺， N-(3-氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺和 N-苯乙基-6-苯基氨基-烟酰胺。
本发明式(I)化合物及其可药用盐可以根据本领域已知的方法制备，例如，通过下述方法制备，该方法包括 a)使下式化合物
与下式胺反应
获得下式化合物
其中各基团定义如上所述，或者， 如果需要，将获得的化合物转化为可药用的酸加成盐。
式(I)化合物可以根据上述方法的变通方法，采用下列流程1和2制备。原料可以获自商业，或者是化学文献中已知的，或者可以根据本领域中已知的方法制备。
通用方法 流程1
其中各基团定义如上所述。
流程2
R1、R2、W、L、X、n和o如上所定义，R’和R”彼此独立为氢、-(CH2)p-O-低级烷基、-(CH2)p-任选取代的芳基、-(CH2)p-杂芳基、-(CH2)p-杂环烷基，或者R’和R”可以与它们所连接的N原子一起形成杂环烷基，该杂环烷基任选被低级烷基、-CH2-环烷基、-S(O)2CH3、-(CH2)p-O-低级烷基或取代的芳基所取代，其中芳基上的取代基为低级烷基或低级烷氧基，其中p如下所定义。
流程3
R1、R2、X、L、W、n和o如上所定义，R”’为任选被低级烷基取代的杂环烷基。
流程4
R1、R2、W、L、X、n和o如上所定义，R’和R”彼此独立为氢、-(CH2)p-O-低级烷基、-(CH2)p-任选取代的芳基、-(CH2)p-杂芳基、-(CH2)p-杂环烷基，或者R’和R”可以与它们所连接的N原子一起形成杂环烷基，该杂环烷基任选被低级烷基、-CH2-环烷基、-S(O)2CH3、-(CH2)p-O-低级烷基或取代的芳基所取代，其中芳基上的取代基为低级烷基或低级烷氧基，其中p如下所定义。
流程5
R1、R2、W、X、n和o如上所定义，R’和R”彼此独立为氢、-(CH2)p-O-低级烷基、-(CH2)p-任选取代的芳基、-(CH2)p-杂芳基、-(CH2)p-杂环烷基，或者R’和R”可以与它们所连接的N原子一起形成杂环烷基，该杂环烷基任选被低级烷基、-CH2-环烷基、-S(O)2CH3、-(CH2)p-O-低级烷基或取代的芳基所取代，其中芳基上的取代基为低级烷基或低级烷氧基，其中p如下所定义。
条件A所述酰胺偶合在溶剂中进行，例如CH2Cl2、DMF、乙腈、THF或其混合物。通过酰胺偶合试剂和添加剂进行活化，所述偶合试剂为例如BOP、BOP-Cl、TBTU、EDCI、EDCI/DMAP，所述添加剂例如HOBT、N-羟基琥珀酰亚胺或N-羟基-2-吡啶酮，该反应在碱如TEA、DIPEA、N-甲基吗啉等存在下、于0℃-100℃下进行。反应时间在1-72小时的范围内。
优选的条件为在DMF、BOP和DIPEA中于室温下过夜。
步骤B通过适当的伯胺或仲胺进行的氯代烟酸衍生物的亲核取代反应在溶剂(例如DMF)中、在碱(例如TEA、DIPEA、N-甲基吗啉)存在下于50℃至回流下进行。反应时间应在2-72小时的范围内。
优选的条件为在DMF、DIPEA中于80℃进行5hrs。
条件C酯水解通过将其溶于适当的溶剂和碱中进行，所述溶剂如MeOH、EtOH、THF、1，4-二氧六环、水或其混合物，所述碱如LiOH、NaOH、KOH、Na2CO3、K2CO3或Cs2CO3。
优选的条件为NaOH在EtOH/H2O中。
条件D通过适当的醇进行的氯代烟酸衍生物的亲核取代反应在溶剂(例如DMSO)中、在碱(例如KOH)存在下、于100℃在微波炉中进行。反应时间在5-30分钟的范围内。
条件EBoc裂解通过在溶剂(例如CH2Cl2、二氧六环或HOAc)中于0-60℃采用无机酸处理进行，所述酸例如HCl、HBr、H2SO4或H3PO4或碳酸。优选的条件为4N HCl在二氧六环中于室温下过夜。
采用下列缩写 DMF＝N，N-二甲基甲酰胺 BOP＝苯并三唑-1-基氧基-三(二甲基-氨基)膦六氟磷酸盐 EDCI＝1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 DMAP＝4-二甲基氨基吡啶 HOBT＝1-羟基苯并三唑水合物 THF＝四氢呋喃 DMSO＝甲基亚砜 化合物的分离和纯化 如果需要，本文中所述的化合物和中间体的分离和纯化可以通过适当的分离或纯化方法进行，例如，过滤、萃取、结晶、柱色谱、薄层色谱、厚层色谱、制备性低压或高压液相色谱或这些方法的组合应用。适当的分离和纯化方法的具体描述可以参考本文中下述的制备方法和实施例。然而，当然也可以采用其它相当的分离或纯化方法。手性式(I)化合物的外消旋混合物可以采用手性HPLC分离。
式(I)化合物的盐 式(I)化合物为碱性的，因此可以转化为相应的酸加成盐。该转化可以通过采用至少一种化学计算量的适当的酸处理而完成，所述酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，还包括有机酸例如乙酸、丙酸、羟乙酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对-甲苯磺酸、水杨酸等。通常，将游离碱溶于惰性有机溶剂(例如乙醚、乙酸乙酯、氯仿、乙醇或甲醇等)，然后将酸加至相似溶剂中。温度维持在0℃-50℃之间。获得的盐可以自发地沉淀出来，或者可以采用较少的极性溶剂使其从溶液中析出。
碱性式(I)化合物的酸加成盐可以通过采用至少一种化学计算量的适当的碱处理而转化为相应的游离碱，所述适当的碱例如氢氧化钠或钾、碳酸钾、碳酸氢钠、氨水等。
式(I)化合物及其可药用的加成盐具有有价值的药理学性能。已经发现，本发明化合物对痕量胺相关受体(TAARs)、特别是TAAR1具有良好的亲和性。
根据下文中所述实验对化合物进行评价。
材料和方法 TAAR表达质粒和稳定转染的细胞系的构建 为了进行表达质粒的构建，基本上采用Lindemann等[14]描述的方法，自基因组DNA扩增人类、大鼠和小鼠TAAR 1的编码序列。采用含有1.5mM Mg2+的Expand High Fidelity PCR System(Roche Diagnostics)，根据生产商的说明，将纯化的PCR产品克隆到pCR2.1-TOPO克隆载体(Invitrogen)中。将PCR产品亚克隆到pIRESneo2载体(BD Clontech，PaloAlto，California)中，在引入细胞系中之前，对表达载体进行序列鉴定。
基本上根据Lindemann等(2005)描述的方法，将HEK293细胞(ATCC#CRL-1573)进行培养。为了产生稳定转染的细胞系，根据生产商的说明(Invitrogen)，采用Lipofectamine 2000，将HEK293细胞采用包含TAAR编码序列(如上所述)的pIRESneo2表达质粒转染，转染24小时后，向培养产物中补充1mg/ml G418(Sigma，Buchs，Switzerland)。培养约10天后，分离并扩增克隆，根据生产商提供的非乙酰化EIA方法，采用cAMPBiotrak酶免疫分析(EIA)系统(Amersham)测试其对痕量胺的响应性(所有化合物购自Sigma)。采用在15代培养期中显示稳定EC50的单克隆细胞系用于所有随后的研究。
膜的制备和放射性配体结合 将汇合的细胞采用冰冷的磷酸盐缓冲的盐水洗涤，所述盐水不含Ca2+和Mg2+，含有10mM EDTA，通过于4℃以1000rpm离心5分钟沉淀。然后将沉淀采用冰冷的磷酸盐缓冲盐水洗涤二次，通过浸入液氮将细胞沉淀立即冷冻，于-80℃储存待用。然后将细胞沉淀悬浮于含有10mM EDTA的pH 7.4的20ml HEPES-NaOH(20mM)中，采用Polytron(PT 3000，Kinematica)以10,000rpm匀化10秒。将匀浆于4℃以48,000×g离心30分钟，将沉淀再悬浮于含有0.1mM EDTA(缓冲液A)的pH 7.4的20mlHEPES-NaOH(20mM)中，采用Polytron以10,000rpm均化10秒。然后将匀浆于4℃以48,000×g离心30分钟，将沉淀再悬浮于20ml缓冲液A中，采用Polytron以10,000rpm匀化10秒。通过Pierce方法(Rockford，IL)测定蛋白浓度。然后将匀浆于4℃以48,000×g离心10分钟，以200g蛋白/ml再悬浮于含有MgCl2(10mM)和CaCl2(2mM)的pH 7.0的HEPES-NaOH(20mM)(缓冲液B)中，采用Polytron以10,000rpm匀化10秒。
结合分析于4℃进行，终体积为1ml，温育时间为30分钟。采用放射性配体[3H]-rac-2-(1，2，3，4-四氢-1-萘基)-2-咪唑啉，其浓度等于60nM时的Kd计算值，结合约为总加入放射性配体浓度的0.1％，特异性结合约为总结合的70-80％。非特异性结合定义为在适当的未标记配体(10μM)存在下[3H]-rac-2-(1，2，3，4-四氢-1-萘基)-2-咪唑啉结合的量。竞争性配体在较宽的浓度范围内测定(10pM-30μM)。在本分析中最终的二甲基亚砜浓度为2％，它不影响放射性配体的结合。每一个实验都一式两份进行。所有的温育都通过经UniFilter-96板(Packard Instrument Company)和玻璃滤器GF/C(在0.3％聚乙烯亚胺中预浸泡2小时)快速过滤中止，采用Filtermate96Cell Harvester(Packard Instrument Company)收集。然后将试管和滤器采用1ml份的冷缓冲液B洗涤3次。滤膜不干燥，浸泡在Ultima gold(45μl/孔，Packard Instrument Company)中，通过TopCount MicroplateScintillation Counter(Packard Instrument Company)对结合的放射性进行计数。
优选的化合物在小鼠中对TAAR1的Ki值(μM)的范围＜0.1μM，如下表所示。
式(I)化合物以及式(I)化合物的可药用盐可以用作药物，例如以药物制剂的形式。药物制剂可以例如以下列形式口服给药片剂、包衣片剂、锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液剂、乳剂或悬浮液。然而，给药也可以通过直肠给药进行，例如以栓剂的形式，或者通过胃肠外给药进行，例如以注射用溶液的形式。
式(I)化合物可以与用于药物制剂生产的药用惰性的无机或有机载体一起加工。可以使用乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其盐等作为例如此类载体，用于片剂、包衣片剂、锭剂以及硬明胶胶囊。用于软明胶胶囊的适当的载体为例如植物油类、蜡类、脂肪类、半固体和液体多元醇类等。然而，根据活性物质的性质，通常在软明胶胶囊的情况下可以不使用载体。用于生产溶液剂和糖浆的适合的载体为例如水、多元醇类、甘油、植物油等。用于栓剂的适当的载体为例如天然的或固化的油类、蜡类、脂肪类、半固体和液体多元醇类等。
另外，药物制剂可以含有防腐剂、增溶剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、香料、用于改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂或抗氧剂。它们也可以含有其它有治疗价值的物质。
含有式(I)化合物或其可药用盐以及治疗惰性的载体的药物也是本发明的目的，它们的生产方法也是本发明的目的，该方法包括使得一或多种式(I)化合物和/或可药用的酸加成盐与一或多种其它具有治疗价值的物质(如果需要)以及一或多种治疗惰性的载体混合到一起制成盖伦制剂。
本发明的最优选的适应症为那些包括中枢神经系统疾病的适应症，例如用于治疗或预防抑郁症、精神病、帕金森病、焦虑症和注意力缺失过动症(ADHD)。
剂量可以在较宽的范围内变化，当然取决于每一个特定病例的特殊要求。在口服给药的情况下，成人剂量的范围可以是每天约0.01mg至约1000mg通式(I)化合物或其相当量的可药用的盐。日剂量可以以单一剂量给药，或者以分剂量给药，另外，如果需要的话，也可以超过该上限。
片剂制剂(湿法制粒)
生产方法 1.将项目1、2、3和4混合，采用纯化水制粒。
2.将颗粒于50℃干燥。
3.将颗粒通过适当的粉碎设备。
4.加入项目5，混合3分钟；在适当的压片机上压制。
胶囊制剂
生产方法 1.将项目1、2和3在适当的混合机中混合30分钟。
2.加入项目4和5并混合3分钟。
3.填充到适当的胶囊中。
实验 下列实施例用于说明本发明，但并非用于限定其范围。
实施例1 N-苄基-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺 a)6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酸甲酯
于室温下、氩气环境中，将6-氯代烟酸甲酯(5.0g)溶于DMF(75ml)。加入1-甲基哌嗪(3.66ml)和二异丙基乙胺(30.7ml)，将溶液于80℃搅拌5小时。反应物用水淬灭。溶液用EtOAc萃取。水相用EtOAc洗涤2次。合并的有机层用水和饱和NaCl水溶液洗涤，硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗品产物经柱色谱纯化(硅胶；梯度洗脱CH2Cl2-＞CH2Cl2/MeOH 9∶1)，获得6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酸甲酯(5.59g)，为浅黄色固体。
MS(ISP)236.1([M+H]+)。
b)6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酸
将6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酸甲酯(5.56g)的MeOH/H2O 1∶1(100ml)溶液冷却至0℃，采用NaOH(1.9g)处理。将反应混合物于0℃搅拌45分钟，于室温下搅拌5hrs，然后采用1N HCl中和，浓缩。粗品产物无需另外纯化可以直接用于下一反应步骤。MS(ISP)220.6([M-H]-)。
c)N-苄基-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
将6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酸(200mg)的DMF(2ml)悬浮液在氩气环境中采用二异丙胺(0.50ml)、苄基胺(0.12ml)和BOP(600mg)处理。将反应混合物于室温下搅拌过夜，然后用水稀释，用EtOAc萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗品产物经柱色谱纯化(硅胶；梯度洗脱CH2Cl2-＞CH2Cl2/MeOH 9∶1)，获得N-苄基-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺(120mg)，为灰白色固体。MS(ISP)311.3([M+H]+)。
根据实施例1c的方法，采用适当的胺成分制备 实施例2 (N-(4-氯代-苄基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺4-氯代苄基胺。灰白色固体。MS(ISP)345.1([M+H]+) 实施例3 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(4-苯氧基-苄基)-烟酰胺
胺4-苯氧基苄基胺。白色固体。MS(ISP)403.5([M+H]+) 实施例4 N-苄基-6-哌嗪-1-基-烟酰胺 a)4-(5-苄基氨基甲酰基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯
根据与实施例1类似的方法，采用N-Boc-哌嗪开始制备4-(5-苯乙基氨基甲酰基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯，在最后的偶合步骤中采用苄基胺。浅黄色固体。MS(ISP)397.5([M+H]+) b)N-苄基-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
将4-(5-苯乙基氨基甲酰基-吡啶-2-基)-哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯(200mg)的MeOH(5ml)溶液冷却至0℃，采用4N HCl(2.52ml)缓慢处理。将反应混合物于室温下搅拌过夜，然后用CH2Cl2稀释，通过柱色谱直接纯化(
SPE快速NH2柱，氨基丙基-功能化硅胶；梯度洗脱CH2Cl2-＞CH2Cl2/MeOH 9∶1)，获得N-苄基-6-哌嗪-1-基-烟酰胺，为灰白色固体。MS(ISP)297.5([M+H]+) 根据与实施例1c类似的方法，采用适当的胺成分制备 实施例5 (RS)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-苯基-丙基)-烟酰胺
胺2-甲基苯基乙基胺。白色固体。MS(ISP)339.3([M+H]+) 实施例6 N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺2-(4-氯代苯基)乙基胺。白色固体。MS(ISP)359.1([M+H]+) 实施例7 N-[2-(3-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺2-(3-氯代苯基)乙基胺。白色固体。MS(ISP)359.1([M+H]+) 实施例8 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-烟酰胺
胺2-(3-三氟甲基苯基)乙基胺。白色固体。MS(ISP)393.3([M+H]+) 实施例9 N-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺2-(4-甲氧基苯基)乙基胺。灰白色固体。MS(ISP)355.4([M+H]+) 实施例10 N-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺2-(3-甲氧基苯基)乙基胺。无色油状物。MS(ISP)355.4([M+H]+) 实施例11 N-(2-苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基-乙基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺3，4-亚甲二氧基苯乙基胺盐酸盐。白色固体。MS(ISP)369.4([M+H]+) 实施例12 N-(2-联苯-4-基-乙基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺2-(4-联苯基)乙基胺。白色固体。MS(ISP)401.5([M+H]+) 实施例13 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺
胺4-苯氧基乙氧苯基胺。灰白色固体。MS(ISP)417.4([M+H]+) 实施例14 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(3-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺
胺3-苯氧基苯乙基胺。灰白色固体。MS(ISP)417.4([M+H]+) 实施例15 N-[2-(4-苄基氧基-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺2-(4-苄基氧基-苯基)-乙基胺。灰白色固体。MS(ISP)431.5([M+H]+) 实施例16 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-吡啶-2-基-乙基)-烟酰胺
胺2-(2-氨基乙基)吡啶。浅黄色固体。MS(ISP)326.5([M+H]+) 实施例17 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-吡啶-3-基-乙基)-烟酰胺
胺3-(2-氨基乙基)吡啶。浅黄色固体。MS(ISP)326.3([M+H]+) 实施例18 N-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺1-甲基色胺。灰白色液体。MS(ISP)378.4([M+H]+) 实施例19 N-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
胺色胺。灰白色固体。MS(ISP)364.3([M+H]+) 实施例20 N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-环丙基甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺 a)6-氯代-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-烟酰胺
根据与实施例1.c类似的方法，使得6-氯代-烟酸与2-(4-氯代苯基)乙基胺偶合。浅黄色固体。MS(ISP)294.0([M+H]+) b)N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-环丙基甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
根据与实施例1.a类似的方法，使得6-氯代-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-烟酰胺与1-(环丙基甲基)哌嗪反应。灰白色固体。MS(ISP)399.3([M+H]+) 实施例21 N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-烟酰胺
根据与实施例21.b类似的方法，使得6-氯代-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-烟酰胺与1-(2-甲氧基乙基)哌嗪反应。浅黄色固体。MS(ISP)403.3([M+H]+) 实施例22 N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-吡咯烷-1-基-烟酰胺
根据与实施例21类似的方法，使得6-氯代-烟酸与4-苯氧基苯乙基胺偶合。中间体6-氯代-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺与哌啶反应。白色固体。MS(ISP)388.3([M+H]+) 实施例23 6-吗啉-4-基-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺
根据与实施例21类似的方法，使得6-氯代-烟酸与4-苯氧基苯乙基胺偶合。中间体6-氯代-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺与吗啉反应。白色固体。MS(ISP)404.6([M+H]+) 实施例24 6-(1-甲基-哌啶-4-基氧基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺
将6-氯代-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺(130mg，获自实施例23的中间体)的DMSO(1.4ml)溶液采用4-羟基-N-甲基哌啶(68mg)和KOH(93mg)处理。反应混合物于100℃在微波炉中加热20分钟。然后将其冷却至室温，采用CH2Cl2和水稀释。水层用CH2Cl2稀释。合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗品产物经柱色谱纯化(硅胶；梯度洗脱CH2Cl2-＞CH2Cl2/MeOH 98∶2)，获得6-(1-甲基-哌啶-4-基氧基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺(29mg)，为灰白色固体。MS(ISP)432.2([M+H]+) 实施例25 N-苯乙基-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
根据与实施例4类似的方法，自N-Boc-哌嗪制备N-苯乙基-6-哌嗪-1-基-烟酰胺，在偶合步骤中采用苯乙基胺。灰白色固体。MS(ISP)311.4([M+H]+) 根据与实施例26类似的方法，在偶合步骤中采用适当的胺，制备下列衍生物 实施例26 N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
胺2-(4-氯代苯基)乙基胺。灰白色固体。MS(ISP)345.1([M+H]+) 实施例27 N-[2-(3-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
胺2-(3-氯代苯基)乙基胺。无定形无色固体。MS(ISP)345.0([M+H]+) 实施例28 N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
胺4-苯氧基苯乙基胺。灰白色固体。MS(ISP)403.5([M+H]+) 实施例29 N-[2-(3-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
胺3-苯氧基苯乙基胺。浅黄色无定形固体。MS(ISP)403.5([M+H]+) 实施例30 N-[2-(4-苄基氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
胺2-(4-苄基氧基-苯基)-乙基胺。灰白色固体。MS(ISP)417.4([M+H]+) 实施例31 5-溴-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法，使得5-溴-6-氯代-烟酸甲酯与N-甲基哌嗪反应，然后在偶合步骤中采用4-氯代苯乙基胺，转化为5-溴-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺。灰白色固体。MS(ISP)437.0([M+H]+) 实施例32 5-溴-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺
根据与实施例32类似方法，在偶合步骤中采用4-苯氧基苯乙基胺，将5-溴-6-氯代-烟酸甲酯转化为5-溴-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺。灰白色固体。
MS(ISP)495.1([M+H]+) 实施例33 5-溴-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
根据与实施例26类似的方法，使得5-溴-6-氯代-烟酸甲酯与N-Boc-哌嗪反应，然后在偶合步骤中采用4-氯代苯乙基胺，转化为5-溴-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺。灰白色固体。MS(ISP)423.1([M+H]+) 实施例34 5-溴-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
根据与实施例26类似的方法，使得5-溴-6-氯代-烟酸甲酯与N-Boc-哌嗪反应，然后在偶合步骤中采用4-苯氧基苯乙基胺，转化为5-溴-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺。灰白色固体。MS(ISP)481.0([M+H]+) 实施例35 N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-4-三氟甲基-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法，使得6-氯代-4-(三氟甲基)烟酸甲酯与N-甲基哌嗪反应，然后在偶合步骤中采用4-氯代苯乙基胺，转化为N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-4-三氟甲基-烟酰胺。灰白色固体。MS(ISP)427.2([M+H]+) 实施例36 6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-4-三氟甲基-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法，使得6-氯代-4-(三氟甲基)烟酸甲酯与N-甲基哌嗪反应，然后在偶合步骤中采用4-苯氧基苯乙基胺，转化为6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-4-三氟甲基-烟酰胺。灰白色固体。MS(ISP)485.2([M+H]+) 实施例37 2-氯代-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺
根据与实施例21类似的方法，使得2，6-二氯代烟酸(或2，6-二氯代烟酸甲酯)与4-苯氧基苯乙基胺偶合，然后与N-甲基哌嗪反应。黄色固体。MS(ISP)451.0([M+H]+) 实施例38 2-氯代-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺 a)4-{6-氯代-5-[2-(4-氯代-苯基)-乙基氨基甲酰基]-吡啶-2-基}-哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯
根据与实施例38类似的方法，使得2，6-二氯代烟酸(或2，6-二氯代烟酸甲酯)与4-氯代苯乙基胺偶合，然后与N-Boc-哌嗪反应。浅黄色固体。MS(ISP)479.0([M+H]+) b)2-氯代-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
根据与实施例4.b类似的方法，将4-{6-氯代-5-[2-(4-氯代-苯基)-乙基氨基甲酰基]-吡啶-2-基}-哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯转化为2-氯代-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺。浅黄色固体。MS(ISP)379.2([M+H]+) 实施例39 2-氯代-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺 a)4-{6-氯代-5-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-吡啶-2-基}-哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯
根据与实施例38类似的方法，使得2，6-二氯代烟酸(或2，6-二氯代烟酸甲酯)与4-苯氧基苯乙基胺偶合，然后与N-Boc-哌嗪反应。黄色固体。MS(ISP)537.0([M+H]+) b)2-氯代-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺
根据与实施例4.b类似的方法，将4-{6-氯代-5-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-吡啶-2-基}-哌嗪-1-甲酸叔-丁基酯转化为2-氯代-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺。灰白色固体。MS(ISP)437.1([M+H]+). 实施例40 rac-N-[1-(3，4-二氯代-苯基)-乙基]-3-氟-苯甲酰胺
向143.8mg(0.75mmol)N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)和91.6mg(0.75mmol)4-二甲基氨基吡啶(DMAP)的1.5ml二氯甲烷溶液中加入142mg(0.75mmol)rac-1-(3，4-二氯代-苯基)-乙基胺，将溶液于室温下搅拌5分钟。向该溶液中加入70mg(0.5mmol)3-氟-苯甲酸，将混合物于室温下搅拌5小时。
将反应混合物通过填充有2g SCX/硅胶1∶1的短柱过滤，所述柱采用20ml甲醇和20ml二氯甲烷预洗，反应产物采用20ml二氯甲烷洗脱。蒸发后，获得rac-N-[1-(3，4-二氯代-苯基)-乙基]-3-氟-苯甲酰胺，为无色固体，MS(ISP)311.9和314.0((M+H)+.)。
实施例41 N-[2-(3，4-二氯代-苯基)-乙基]-3-氟-苯甲酰胺
根据与实施例40类似的方法，采用3-氟-苯甲酸和2-(3，4-二氯代-苯基)-乙基胺，制备N-[2-(3，4-二氯代-苯基)-乙基]-3-氟-苯甲酰胺黄色固体，MS(ISP)311.9和314.0((M+H)+.)。
实施例42 6-(2-甲氧基-乙基氨基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是在第一个步骤中采用2-甲氧基-乙基胺，在第三个步骤中采用2-(4-苯氧基-苯基)-乙基胺。MS(ISP)392.2((M+H)+.)。
实施例43 N-[2-(3-氯代-苯基)-乙基]-6-(2-甲氧基-乙基氨基)-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是在第一个步骤中采用2-甲氧基-乙基胺，在第三个步骤中采用2-(3-氯代-苯基)-乙基胺。
实施例44 N-[2-(3-氯代-苯基)-乙基]-6-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是在第一个步骤中采用1-(2-甲氧基苯基)哌嗪，在第三个步骤中采用2-(3-氯代-苯基)-乙基胺。
实施例45 6-[2-(3-氯代-苯基)-乙基氨基]-N-(2-吡啶-2-基-乙基)-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是采用在第一个步骤中采用2-(3-氯代-苯基)-乙基胺，在第三个步骤中采用2-吡啶-2-基-乙基胺。
实施例46 6-[2-(3-氯代-苯基)-乙基氨基]-N-(2-吡啶-4-基-乙基)-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是在第一个步骤中采用2-(3-氯代-苯基)-乙基胺，在第三个步骤中采用2-吡啶-4-基-乙基胺。
实施例47 N-苯乙基-6-[(吡啶-2-基甲基)-氨基]-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是在第一个步骤中采用2-(氨基甲基)吡啶，在第三个步骤中采用苯乙基胺。MS(ISP)333.2((M+H)+.)。
实施例48 6-苯基氨基-N-(3-苯基-丙基)-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是采用6-苯基氨基-烟酸作为起始原料，在第三个步骤中采用3-苯基-丙基胺。
实施例49 6-[2-(3-氯代-苯基)-乙基氨基]-N-(3-苯基-丙基)-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是在第一个步骤中采用2-(3-氯代-苯基)-乙基胺，在第三个步骤中采用3-苯基-丙基胺。
实施例50 2-(3-吗啉-4-基-丙基氨基)-N-苯乙基-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是采用2-氯代-烟酸甲酯作为起始原料，随后在第一个步骤中采用3-吗啉-4-基-丙基胺，在第三个步骤中采用苯乙基胺。
实施例51 2-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是采用2-氯代-烟酸甲酯作为起始原料，在第一个步骤中采用1-甲磺酰基-哌嗪，在第三个步骤中采用2-(4-苯氧基-苯基)-乙基胺。MS(ISP)481.1((M+H)+.)。
实施例52 N-(2-联苯-4-基-乙基)-2-(3-吗啉-4-基-丙基氨基)-烟酰胺
根据与实施例1类似的方法制备目标化合物，但是采用2-氯代-烟酸甲酯作为起始原料，在第一个步骤中采用3-吗啉-4-基-丙基胺，在第三个步骤中采用2-联苯-4-基-乙基胺。
实施例53 N-[2-(2-氟-苯基)-乙基]-4-(2-甲基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酰胺
根据与实施例1c类似的方法制备目标化合物，但是采用2-(2-氟-苯基)-乙基胺和4-(2-甲基-苯并咪唑-1-基甲基)-苯甲酸作为偶合成分。MS(ISP)388.2((M+H)+.)。
实施例54 N-(2-环己基-乙基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
根据与实施例1c类似的方法制备目标化合物，但是采用2-环己基-乙基胺作为偶合反应中的胺成分。灰白色固体。MS(ISP)331.4((M+H)+.)。
实施例55 N-环己基甲基-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺
根据与实施例1c类似的方法制备目标化合物，但是采用环己基-甲基胺作为偶合反应中的胺成分。灰白色固体。MS(ISP)317.3((M+H)+.)。
实施例A-E 采用上述类似方法，制备作为TAAR1配体的其它下列已知化合物 A6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-苯乙基-烟酰胺(CAS 199478-31-4) BN-(3，4-二氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺(CAS 424815-98-5) CN-(4-氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺(CAS 544661-83-8) DN-(3-氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺(CAS 796051-07-5) EN-苯乙基-6-苯基氨基-烟酰胺(CAS 571913-74-1)。
权利要求
1.式(I)化合物或其药学上适当的酸加成盐
其中
R1为氢、卤素、低级烷基、低级烷氧基、卤素取代的低级烷基、-O-(CH2)p-芳基或芳基；
R2为卤素、卤素取代的低级烷基、NR’R”、-(CH2)p-杂芳基，或为-O-杂环烷基，其中杂芳基或杂环烷基上的取代基为低级烷基；
R’/R”彼此独立为氢、-(CH2)p-O-低级烷基、-(CH2)p-任选取代的芳基、-(CH2)p-杂芳基、-(CH2)p-杂环烷基，
或者R’和R”可以与它们所连接的N原子一起形成杂环烷基，所述杂环烷基任选被低级烷基、-CH2-环烷基、-S(O)2CH3、-(CH2)p-O-低级烷基取代，或被取代的芳基取代，其中芳基上的取代基为低级烷基或低级烷氧基；
W为苯基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吲哚基或环烷基；
L为-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-或-CH2CH2CH2-；
X为N或CH；
n为1或2；当n为2时，R1可以是相同或不同的；
o为1或2；当o为2时，R2可以是相同或不同的；
p为0、1、2或3；
但是不包括下列化合物
6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-苯乙基-烟酰胺，
N-(3，4-二氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺，
N-(4-氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺，
N-(3-氯代-苄基)-3-氟-苯甲酰胺，和N-苯乙基-6-苯基氨基-烟酰胺。
2.权利要求1的式(IA)化合物或其药学上适当的酸加成盐
其中
R1为氢、卤素、低级烷基、低级烷氧基、卤素取代的低级烷基、-O-(CH2)p-芳基或芳基；
R’/R”彼此独立为氢、-(CH2)p-O-低级烷基、-(CH2)p-任选取代的芳基、-(CH2)p-杂芳基、-(CH2)p-杂环烷基，
或者R’和R”可以与它们所连接的N原子一起形成杂环烷基，所述杂环烷基任选被低级烷基、-CH2-环烷基、-S(O)2CH3、-(CH2)p-O-低级烷基取代，或被取代的芳基取代，其中芳基上的取代基为低级烷基或低级烷氧基；
W为苯基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吲哚基或环烷基；
L为-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-、-CH2CH2CH2-；
n为1或2；当n为2时，R1可以是相同或不同的；
p为0、1、2或3，
但是不包括下列化合物
6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-苯乙基-烟酰胺和
N-苯乙基-6-苯基氨基-烟酰胺。
3.权利要求2的式(IA)化合物，其中R’和R”与它们所连接的N原子一起形成杂环烷基。
4.权利要求3的式(IA)化合物，其中所述杂环基团为4-甲基-哌嗪-1-基。
5.权利要求4的式(IA)化合物，所述化合物为
N-苄基-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
(N-(4-氯代-苄基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
N-[2-(3-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-烟酰胺，
N-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
N-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
N-(2-苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基-乙基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
N-(2-联苯-4-基-乙基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺，
6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(3-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺，
N-[2-(4-苄基氧基-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
N-[2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
N-(2-环己基-乙基)-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，或
N-环己基-甲基-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺。
6.权利要求3的式(IA)化合物，其中所述杂环烷基为哌嗪-1-基。
7.权利要求6的式(IA)化合物，所述化合物为
N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺，
N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺，
N-[2-(3-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺，或
N-[2-(4-苄基氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺。
8.权利要求1的式(I)化合物，其中R2为-O-杂环烷基。
9.权利要求8的式(I)化合物，其中O-杂环烷基为1-甲基-哌啶-4-基氧基。
10.权利要求9的化合物，其中所述化合物为
6-(1-甲基-哌啶-4-基氧基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺。
11.权利要求1的式(I)化合物，其中o为2，R2之一为NR’R”，另一个R2为卤素。
12.权利要求11的式(I)化合物，所述化合物为
5-溴-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-烟酰胺，
5-溴-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺
5-溴-N-[2-(4-氯代-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺，或
5-溴-N-[2-(4-苯氧基-苯基)-乙基]-6-哌嗪-1-基-烟酰胺。
13.制备权利要求1的式(I)化合物的方法，该方法包括
a)使得下式化合物
与下式的胺反应
获得式(I)化合物
其中各基团定义如权利要求1所述，或者
如果需要，将获得的化合物转化为可药用的酸加成盐。
14.权利要求1的式(I)化合物，是通过权利要求13的方法制备，或者是通过相当的方法制备。
15.药物，所述药物含有一或多种式(I)化合物和可药用的赋形剂。
16.权利要求15所要求保护的药物，所述药物用于治疗抑郁症、焦虑症、双相障碍、注意力缺失过动症、压力相关性疾病、精神疾病、精神分裂症、神经性疾病、帕金森病、神经退行性疾病、阿尔茨海默病、癫痫、偏头痛、高血压、药物滥用和代谢性疾病、饮食性疾病、糖尿病、糖尿病并发症、肥胖、血脂异常、能量消耗和吸收疾病、体温动态平衡疾病和障碍、睡眠和昼夜节律疾病以及心血管疾病。
17.权利要求16的药物，所述药物含有一或多种权利要求1-13所要求保护的化合物，所述药物用于抑郁症、精神病、帕金森病、焦虑症和注意力缺失过动症(ADHD)。
18.权利要求1的式(I)化合物在制备用于治疗下列疾病的药物中的用途抑郁症、焦虑症、双相障碍、注意力缺失过动症、压力相关性疾病、精神疾病、精神分裂症、神经性疾病、帕金森病、神经退行性疾病、阿尔茨海默病、癫痫、偏头痛、高血压、药物滥用和代谢性疾病、饮食性疾病、糖尿病、糖尿病并发症、肥胖、血脂异常、能量消耗和吸收疾病、体温动态平衡疾病和障碍、睡眠和昼夜节律疾病以及心血管疾病。
19.本文中上述的本发明内容。
全文摘要
本发明涉及式(I)化合物，在式(I)中，R1、R2、W、L、X、n和o如本文中所定义。已经发现，式(I)化合物对痕量胺相关受体(TAARs)、特别是TAAR1具有良好的亲和性。所述化合物可以用于治疗抑郁症、焦虑症、双相障碍、注意力缺失过动症(ADHD)、压力相关性疾病、精神性疾病(例如精神分裂症)、神经性疾病(例如帕金森病)、神经退行性疾病(例如阿尔茨海默病)、癫痫、偏头痛、高血压、药物滥用和代谢性疾病(例如饮食性疾病)、糖尿病、糖尿病并发症、肥胖、血脂异常、能量消耗和吸收疾病、体温动态平衡疾病和障碍、睡眠和昼夜节律疾病以及心血管疾病。
文档编号C07D235/06GK101784515SQ200880101762
公开日2010年7月21日 申请日期2008年7月25日 优先权日2007年8月3日
发明者G·盖雷, K·格勒布克斯宾登, R·诺克罗斯, H·思塔德尔 申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司