专利名称：3,23,28位修饰的23-羟基白桦酸类衍生物、其制备方法、制剂及用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及天然药物及药物化学领域，具体涉及一类经修饰的23-羟基白桦酸衍 生物。本发明还公开了这些23-羟基白桦酸衍生物的制备方法、含有这些23-羟基白桦酸 衍生物的药物组合物及这类23-羟基白桦酸衍生物用于抗肿瘤的用途。
背景技术：
23-羟基白桦酸是与白桦酸结构相似的化合物，23-羟基白桦酸是从中草药白头 翁(Pulsatilla chinensis Regel)中提取的一种五环三萜类化合物，白头翁始载于《神 农本草经》，属于毛茛科白头翁属植物，具有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效。临床上 主要用于治疗细菌性痢疾、阿米巴痢疾、妇科阴道炎等。现代研究发现白头翁除了抗菌和 抗病原虫作用外，还具有抗癌、杀精、治疗内毒素血症等作用。从白头翁中分离得到皂苷元 23-羟基白桦酸(23-Hydroxybetulinic acid)，结构与白桦酸很相近。CN 1491651A公开了 23-羟基白桦酸对小鼠黑色素瘤、脑神经胶质瘤、肠道肿瘤、肺癌、肝癌以及爱滋病的预防和 治疗有很好的作用。CN1682740A公开了白桦酸具有糖原磷酸化酶抑制剂作用。从天然产物中提取有效成分并进行结构简化和修饰，以发现结构新颖的先导物 是抗肿瘤药物研究的一个重要方向。20世纪末，药物化学家们在植物抗肿瘤活性成分的 基础上，开发了很多新的具有良好疗效的药物，比如紫杉醇和喜树碱。人们对白桦酸进 行结构改造，试图找到药理活性更好的化合物，如Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 2004，14，3169-3172.中公开了对白桦酸结构修饰的一系列衍生物，并对这系列衍 生物做了药理学研究，试验结果表明，部分经修饰的化合物的抗肿瘤活性与白桦酸相当，还 有个别化合物在一些肿瘤细胞中的活性高于白桦酸。目前在抗肿瘤领域，大多数的研究者认为白桦酸及其衍生物是通过抑制血管生成 来达到抗肿瘤的目的，但多年来仍没有这类化合物进入临床试验阶段。临床需要药效更好 的抗肿瘤药物。
发明内容
为寻找具有更强抗肿瘤活性的新药，本发明选取五环三萜类的天然产物23-羟基 白桦酸进行结构修饰研究，从而提供了一系列具有通式(I)结构特性的衍生物。通式(I) 拓展了现有的23-羟基白桦酸衍生物的结构特征和结构范围。本发明要解决的技术问题是研究新结构类型的具有抗肿瘤活性的23-羟基白桦 酸衍生物，并进一步提供一种治疗肿瘤及其它疾病或病症的药物组合物。为解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案通式I所示23-羟基白桦酸衍生物或其可药用盐 其中 R1 代表 OH、OCOR4 ； R2 代表 Cl、0M、0G、OR4、NHR4, N (R4)2, OR4COOR4, NHR4COOR4, NHR4NH2, OR4OH ；R3 代表 0、NOR4、NNHR4 ；R4代表H、非取代或X取代的C1-Cltl直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、
苄基、萘基，联苯甲基；X 代表 H、Cl、Br、F、I、CN、NH2, NO2, CF3> OH、OCH3> C00H, COOCH3, C1-C10 直链或支链 的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基；M 代表 Na、K、Li;G代表糖苷或乙酰化的糖苷；本发明通式I的23羟基白桦酸衍生物或其盐，其中其中R1优选代表0H、OAc ；R2 优选代表 0G、OH、NH2, CH2CH3、CH2CH = CH2, NHCH2CH2NH2, OCH2CH2OH, N^O、
och2cooch2ch3、och2cooh、nhch2cooch3、NHCH2CooH ；R3 优选代表 0、NOH、NOAc, NNHPh, NNHTs ；G代表吡喃葡萄糖或四乙酰化的吡喃葡萄糖；本发明的部分化合物为3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸苄酯3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸3-羰基-23-羟基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸乙氧甲酰基甲酯3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(β -D_吡喃葡萄糖苷基)酯3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸N- (3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆_20 (29)-烯_28_酰基)-甘氨酸甲酯3-肟基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸乙酯本发明包括一种用于治疗哺乳动物，优选于治疗人类疾病或病症的药物组合物， 其包括治疗肿瘤疾病的的有效量的通式(I)的化合物或其盐和可药用载体。本发明还包括通式⑴的化合物或其盐在制备治疗肝癌、肺癌、胃癌、黑色素瘤、 宫颈癌、乳腺癌、白血病或脑瘤病症的药物中的应用。本发明通式I的23-羟基白桦酸衍生物可用下列方法制备得到反应1 参照反应1，将23-羟基白桦酸⑴溶于DMF，与溴节，碳酸钾反应12h，制得⑵化 合物。将所得式⑵的化合物溶于二氯甲烷中，加入4 二甲胺基吡啶，再加入叔丁基二甲基 氯硅烷，室温反应5小时制得化合物(3)，将(3)溶于二氯甲烷，用PCC氧化，2h，制得(4)化 合物。将所得式(4)的化合物溶于丙酮溶液中，加10%盐酸室温反应2h，制得(5)化合物， 将化合物(5)氢解脱苄制得化合物(6)，将(6)与溴代物反应，制得28位酯类衍生物；与羟 胺或胼反应，制得3位肟或腙类衍生物。下面是本发明部分化合物的药理实验数据
仪器超净工作台(苏州艾可林净化设备有限公司)
恒温CO2培养箱(德国Heraeus)
酶联免疫检测仪(美国BI0-RAD)
倒置生物显微镜(日本OLYMPUS)
平板摇床(江苏省光明实验仪器厂)
试剂RPMI1640(GIBCO)
胰蛋白酶(SIGMA)
胎牛血清(GIBCO)
MTT(SIGMA)
DMSO(SIGMA)
细胞株人肝癌细胞BEL7402
人肺癌细胞A549
人脑瘤细胞SF126
人早幼粒细胞白血病细胞HL60
[方法]
1.取处于指数生长期状态良好的细胞一瓶，加入0.05%胰蛋白酶消化液，消化使 贴壁细胞脱落，计数2 4X IO4个/ml，制成细胞悬液。2.取细胞悬液接种于96孔板上，180 μ 1/孔，置恒温CO2培养箱中培养24小时。3.换液，加入受试药物，20 μ 1/孔，培养72小时。4.将MTT加入96孔板中，20 μ 1/孔，培养箱中反应4小时。5.吸去上清液，加入DMS0，150 μ 1/孔，平板摇床上振摇5分钟。6.用酶联免疫检测仪在波长为570nm处测定每孔的吸光值，并计算细胞抑制。
阴性对照组OD值一化合物组OD值
细胞抑制率％= _ χ οο%
阴性对照组OD值
6
具体实施例方式实施例13，23- 二羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸苄酯将23-羟基白桦酸(1.00g，2. Immo 1)溶于N，N_二甲基甲酰胺(20mL)中，加入碳酸 钾(1.00g，7. 2mmol)，溴苄(0. 3ml, 2. 5mmol)，室温搅拌12小时，乙酸乙酯(30ml)稀释，水 洗三次，饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩(粗品可直接用于下一步反应)， 柱层析(石油醚乙酸乙酯=2 1)，得白色粉末状固体(1.07g，90% )。ESI-MS m/z 563. 3[M+H]+，585. 3[M+Na]+，601. 4[M+K] +实施例23-羟基-23-叔丁基二甲基硅氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸苄酯将3，23-二羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸苄酯(1. OOg, 1. 8mmol)溶于二氯 甲烷(30ml)中，加入4-二甲胺基吡啶(0. 3g,2. 5mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(0. 36g,
2.4mmol)，室温搅拌4小时，蒸除二氯甲烷，乙酸乙酯稀释，10 %盐酸洗至酸性，饱和食盐水 洗至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩(粗品固体可直接用于下一步反应)，柱层析(石油 醚乙酸乙酯=20 1)，得白色固体(1. llg，92% )。1H-匪R(CDCl3, 300MHz) δ 0. 06 (6Η, s, Si-(CH3)2) ,0. 75,0. 84,0. 93,1. 67 (6Hfor 0. 84, each 3H for others, s，24，25，26，27 and 30-CHs)，0. 90 (9H, s, t_Bu)，2. 13-2. 20 (1H, m)，2. 25-2. 28 (1H, m)，3· 01 (1Η, m, H-19)，
3.33，3. 65 (each 1H, d, J = 9. 3Hz，H-23)，3. 56 (1H, m, H_3)，4. 59，4. 72 (each 1H, s, H_29)， 5. 09，5. 15 (each 1H, d, J = 12. 2Hz, CH2-Ph)，7. 32-7. 35 (5H, m, H-Ph)；实施例33-羰基-23-叔丁基二甲基硅氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸苄酯将3-羟基-23-叔丁基二甲基硅氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸苄酯(1. 03g, 1. 5mmol)溶于二氯甲烷(30ml)中，加入氯铬酸吡啶(0. 5g，2. 3mmol)，室温搅拌3小时，蒸 除二氯甲烷，乙酸乙酯稀释，水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(石 油醚乙酸乙酯=30 1)，得白色固体(0.91g，89% )，mp ISl-ISrC-1H-^R(O)Cl3, 300MHz) δ 0. 07 (6Η, s, Si-(CH3)2)，0. 80，0. 83，0. 86,0. 96，1. 68 (each 3H, s，24，25，26， 27and 30_CH3)，0. 87 (9H, s, t_Bu)，1. 97 (3H, s，Ac)，2. 18-2. 32 (2H, m)，2. 37-2. 42 (2H, m)， 3. 04 (1H, m, Η-19)，3· 28,3. 56 (each 1Η, d, J = 9. IHz, H-23) ,4. 61,4. 73 (each 1H, d, J = 1· 2Hz，H-29)，5· 09，5· 16 (each lH，d，J= 12. 2Hz, CH2-Ar), 7. 35-7. 38 (5H,m,H-Ar) ； ESI-MS m/z :675. 5[M+H]+,697. 5[M+Na]+,714. 5[M+K]+.实施例4
8
3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸苄酯将3-羰基-23-叔丁基二甲基硅氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸苄酯(0_8g，
1.2mmol)溶于丙酮(30ml)中，加入10%盐酸(2ml)，室温搅拌2小时，乙酸乙酯稀释， 水洗至中性，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(石油醚乙酸乙酯= 5 1)，得白色固体 5(0. 6g，90% )，mp 175_178°C . IR(film，cnT1) 3444，3067，2950，2863， 1732，1705，1640，1459，1381，1257，1121，1087，881，835，775，701 ；1H-NMR(CDCl3, 300MHz) δ 0. 74，0. 88，0. 92，0. 95，1. 61 (each 3H, s, 24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 48-2. 60 (1H, m)，
2.95 (1H, m, H-19), 3. 33, 3. 56 (each 1H, d, J = 11. 3Hz，H-23)，4. 53，4. 66 (each 1H, s, H-29) ,5. 02,5. 09 (each 1H, d, J = 11. 1Hz, CH2-Ar), 7. 23-7. 31 (5H, m, H-Ar) ； ESI-MS m/z 561. 3[M+H]+，583. 3[M+Na]+，599. 0[M+K]+.实施例53-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸将3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸苄酯(0. 5g,0. 89mmol)溶于四 氢呋喃(15ml)中，加入10%钯碳(0. Ig)，室温常压氢化，TLC跟踪反应至原料大部分反应 但不完全反应，过滤，浓缩，柱层析(石油醚丙酮=4 1)，得白色固体(0.3g，71% )，mp 227-229 °C . IR(film, cnT1)3435，3069，2946，2870，1688，1642，1455，1376，1239，1047，882 ； 1H-NMR(DMSOdOOMHz) δ 0. 77,0. 91,0. 97,1. 66 (6Η for 0. 77, each 3H for others, s, 24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 96 (1H, m, H-19)，3. 25 (2H, m, H-23)，4. 57，4. 70 (2H, s, H-29)， 4. 82 (1H, t, J = 5. 4Hz, OH)，12. 07 (1H, s, C00H) ； ESI-MS m/z :471. 4[M+H]+，493. 4[M+Na]+.实施例63-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸乙氧甲酰基甲酯将3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(0. IOg, 0. 21mmol)溶于 DMF(8ml)中，加入碳酸钾(0. IOg,0. 72mmol)和溴乙酸乙酯(1.5 equiv mol)，室温搅拌12 小时。乙酸乙酯(15ml)稀释，水洗三次，饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩， 粗品柱层析(石油醚乙酸乙酯=3 1)，得白色固体7b(0.086g，73% )，mp 134_137°C . IR(film, cm—1)3449，3069，2947，2869，1761，1734，1680，1638，1459，1378，1213，1123， 1049，876 !1H-Wr(CdcI3JOOMHz) : δ 0. 98，1. 00，1. 04，1. 69(6H for 1. 00，each 3H for others, s，24，25，26，27and 30_CH3)，1. 29 (3H, t, J = 7. 2Hz, CH2CH3), 2. 25-2. 34 (3H, m)，
2.58-2. 62 (1H, m)，2. 98 (1H, m, H-19) ,3. 41,3. 64 (each 1H, d, J = 11. 3Hz，H-23)，4. 23 (2H, m, CH2CH3)，4. 59 (2H, s, COOCH2)，4. 60,4. 73 (each 1H, s, H-29)；实施例73-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸_ (2’ -氰基联苯_4_基)甲酯方法同上。化合物3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20(29)-烯-28-酸与4’ -溴甲 基联苯-2-腈室温反应12小时，粗品柱层析(石油醚乙酸乙酯=2 1)，得白色固体 7e(0.073g，52 % )，mp 111-114. IR(film，cnT1) 3455，3068，2946，2868，2224，1725，1696， 1641，1457，1377，1152，1122,881,764 ；1H-WR (CDCl3, 300MHz) δ 0. 84,0. 96,0. 99，1. 01， 1. 69 (each 3H, s, 24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 57-2. 66 (1H, m)，3. 04 (1H, m, H-19) ,3. 40,
3.63 (each 1H, d, J = 11. 3Hz, H-23) ,4. 61,4. 74 (each 1H，s，H-29)，5. 19 (1H，dd，J = 23. 1,12. 6Hz, CH2-Ar), 7. 46-7. 77 (8H，m, H-Ar). ESI-MSm/z :561. 3 [M+H]+，583. 3 [M+Na]+，
9599. 0[Μ+Κ]+.实施例83-羰基-23-乙酰氧基_羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸将3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20(29)-烯-28-酸(0. 50g, 1. lmmol)溶于吡啶 (IOml)中，加入乙酸酐(2ml)，室温搅拌10h，乙酸乙酯(25ml)稀释，10%盐酸洗至酸性，水 洗两次，饱和碳酸氢钠洗至无气泡产生，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(石油醚丙 酮=6 1)，得白色固体(0. 049g，90% )，mp 129_132°C . IR(film，cnT1) 3428，3065，2941， 2867，1723，1687，1640，1455，1377，1153，1126，1061，884，753，696 ；3453，2951，2868，1745， 1695，1642，1461，1377，1237，1039，883 ；1H-NMR(CDCl3, 300MHz) δ 0. 94，0. 99，1. 70(9Η for 0. 99, each 3H for others, s，24，25，26，27and 30_CH3)，2. 03 (3H，s, Ac)，2. 24—2. 31 (2H， m)，2. 43-2. 51 (2H，m), 3. 01 (1H, m, H-19)，4. 05 (2H，dd, J = 15. 5,10. 9Hz, H_23)，4. 62，
4.75 (each 1H，s，H-29) ； ESI-MS m/z :513. 3 [M+H]+，511. 5 [Μ-ΗΓ.实施例9N- (3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酰基)-吗啉将3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸(0. IOg, 0. 20mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 1ml)，室温搅拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲烷(5ml) 溶解，滴加至吗啉(0. lmia. lmmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，室温搅拌2h，浓缩，乙酸乙 酯(15ml)稀释，饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(石油醚乙酸乙 酯=4 1)，得白色固体(0. 089g，78% )，mp 124_127°C . IR(film，cnT1) 3452，3071，2947， 2866，1742，1708，1630，1458，1411，1376，1263，1239，1188，1116，1037,881 ；1H-NMR (CDCl3, 300MHz) : δ 0· 95，0· 98，1· 00，1.69 (6H for 1.00，each 3H for others，s，24，25，26，27 and 30-CH3)，2. 03 (3H, s, Ac) ,2. 42-2. 51(2H，m)，3. 03(lH，m，and H-19) ,3. 63(8H，t，J = 8. OHz, H-morpholine)，4. 02，4. 08(each 1H, d,J = 10. 8Hz，H-23)，4. 59，4. 73(each 1H, s,H-29)，
5.09，5. 17 (each 1H, d, J = 10. 5Hz) ； ESI-MS m/z :582. 5 [M+H]+.实施例10N- (3-羰基-23-乙酰氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酰基)-甘氨酸甲酯将3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20(29)-烯-28-酸(0. IOg,0. 20mmol)溶 于干燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 10ml)，室温搅拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲 烷(5ml)溶解，滴加至甘氨酸甲酯盐酸盐(0. IOg,0. 80mmol)和4-二甲胺基吡啶(0. IOg, 0. 82mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，室温搅拌4h，浓缩，乙酸乙酯(15ml)稀释，10%盐酸 洗至酸性，饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(石油醚乙酸乙酯= 4 1)，得白色固体(0. 075g，66% )，mp 96-99°C . IR(film，cnT1) 3407，3070，2951，2869， 1746，1705，1645，1521，1460，1375，1237，1038,882 ； 1H-Nmr(CdcI3JOOMHz) δ 0. 94， 0. 99,1. 69 (9Η for 0. 99, each 3H for others, s，24，25，26，27and 30_CH3)，2. 03 (3H，s, Ac) ,2. 41-2. 53 (3H, m)，3. 11 (1H, m, H-19) ,3. 76 (3H, s, COOCH3), 4. 00-4. 12 (4H, m, H-23, CONHCH2) ,4. 60,4. 74 (each 1H, s, H-29), 6. 04 (1H, t, J = 5. 3Hz, C0NH) ； ESI-MS m/z 584. 4[M+H]+，582. 4[Μ-ΗΓ.实施例110-[3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酰基]-乙二醇
将3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸(0. IOg, 0. 20mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 1ml)，室温搅拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲烷(5ml) 溶解，滴加至乙二醇(0. lml, 1. 6mmol)的四氢呋喃(5ml)溶液中，室温搅拌4h，浓缩，乙酸乙 酯(15ml)稀释，饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(石油醚乙酸乙 酯=5 1)，得白色固体(0. 069g，64% )，mp 111-114°C . 1H-WR(O)Cl3, 500MHz) δ 0· 94， 0· 98，0· 99，1· 00，1· 69 (each 3Η, s，24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 03 (3H，s，Ac)，2. 27 (2H， m)，2. 43-2. 50 (2H, m)，3. 00 (1H, m, H-19)，3. 84 (2H, t, J = 4. 7Hz, CE2OH)，4. 05 (2H, dd, J = 21. 5，10. 8Hz, H-23)，4· 24 (2H, m，28_C00CH2)，4· 62,4. 74 (each 1H, s, H-29)，6· 04 (1H, t, J =5. 3Hz, CONH) ；ESI-MS m/z :557. 3 [M+H]+·实施例123-羰基-23-乙酰氧基_羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸对腈基苯酯将3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸(0. IOg, 0. 20mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 1ml)，室温搅拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲烷(5ml) 溶解，滴加至对腈基苯酚(0. Ig,8. 4mmol)和4-二甲胺基吡啶(0. IOg,0. 82mmol)的四氢 呋喃(5ml)溶液中，室温搅拌5h，浓缩，乙酸乙酯(15ml)稀释，饱和食盐水洗两次，无水硫 酸钠干燥，过滤，浓缩，大板(石油醚乙酸乙酯=4 1)，得白色固体(0.060g，50% )，mp 108-110°C . IR(film,cm-1)3446,3072,2950,2870,2230,1748，1706，1642，1601，1502，1459， 1377，1237，1211，1076,877 ；1H-NMR (CDCl3, 500MHz) δ 0. 95，1. 00，1. 02，1. 04，1. 71 (each 3H，s，24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 03 (3H，s，Ac)，2. 13(lH，m)，2. 30(lH，m)，2. 43-2. 50 (3H, m)，3. 01 (1H, m, H-19)，4. 06 (2H, dd, J = 25. 2,10. 8Hz, H-23)，4. 64，4. 75 (each 1H, s, H-29)，7. 17，7. 70 (each 2H, d, J = 8. 6Hz, H-Ar)；实施例13N-[3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酰基]-乙二胺将3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(0. IOg, 0. 20mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(8ml)中，加入草酰氯(0. 1ml)，室温搅拌4h，蒸干，再用干燥二氯甲烷(5ml) 溶解，滴加至乙二胺(0. Ig,8. 4mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，室温搅拌lh，浓缩，乙酸乙 酯(15ml)稀释，饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析(二氯甲烷甲醇 =15 1)，得白色固体 9e(0. 044g，41% )，mp 86_89°C . IR(film，cnT1) 3415，2926，2867， 1744，1707，1640，1522，1461，1376，1240，1038，882 ；1H-NMR(CDCl3, 300MHz) δ 0.94，0.99，
1.69 (9H for 0. 99, each 3H for others, s，24，25，26，27 and 30_CH3)，2. 03 (3H，s, Ac)，
2.89 (2H, s)，3. 11 (1H, m, H-19) ,3. 37 (2H, m, C0NHCH2)，4. 02 (2H，dd, J = 16. 2,10. 8Hz, H-23)，4. 59，4. 74(each 1H, s, H-29) ；ESI-MS m/z 555. 5[M+H]+实施例143-肟基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸将3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(0. 05g)溶于吡啶(6ml)中， 加入盐酸羟胺(0. 05g,0. 7mmOl)，80°C反应4h，乙酸乙酯(15ml)稀释，10%盐酸洗至酸性， 水洗两次，饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品柱层析(二氯甲烷甲醇 =40 1)，得白色固体(0. 022g，43% )。Mp 245°C分解.IR(film，cnT1) 3439，3073，2940， 2870，1700，1640，1450，1386，1230，1189，1033,873 ；1H_NMR(DMS0，500MHz) δ 0.82,0.91，0. 94，0. 96，1. 65 (each 3H, s，24，25，26，27and 30_CH3)，1. 97 (3H, s，Ac)，2. 25-2. 33 (2H, m)，2. 62 (1H, m, H_2b)，2. 96 (1H, m, H-19)，4. 12 (2H, dd, J = 14. 6，10. 7Hz, H_23) ,4. 57, 4. 70(each 1H, s, H-29)，10. 46(1H, d, J = 18. 3，NOH)，12. 02(1H, s, COOH) ；ESI-MSm/z 484. 3[Μ-ΗΓ.实施例153-肟基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸乙酯化合物3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸乙酯与盐酸羟胺反应， 粗品柱层析(石油醚乙酸乙酯=5 1)，得白色固体(0.029g，56% )，mp 101_104°C . IR(film，cm-1)3415,2948,2869,1724，1642，1462，1379，1176，1155，1039，939，883 ； 1H-Nmr(Cdci3JOOmHz) δ ο. 95,o. 96, 1. 02,1. 05,1. 68(each 3η, s，24，25，26，27 and 30-CHs)，1. 81-1. 84 (1H, m)，1. 95 (1H, m)，2. 03-2. 12 (2H, m)，2. 24-2. 33 (2H, m)，2. 98 (1H, m, H-19) ,3. 08 (1H, m, H_2b)，3· 49，3. 62(eachlH, d, J = 11. 4Hz, Η-23)，4· 14 (2Η, m, 28-C00CH2)，4· 60,4. 73 (each 1H, s, H-29) ；ESI-MS m/z 514. 4[M+H]+.实施例163-对甲苯磺酰腙-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸苄酯将3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20(29)-烯-28-酸苄酯(0. 05g)溶于甲醇(8ml) 中，加入对甲苯磺酰胼(2equiv mol)，回流反应3h，冷却，乙酸乙酯(15ml)稀释，10%盐酸 洗至酸性，水洗两次，饱和食盐水洗两次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品柱层析(石油 醚乙酸乙酯=3 1)，得白色固体(0. 040g，61% )，mp 108-111 °C · IR(film, cnT1) 3450， 2949,2866，1724，1640，1457，1378，1167，1122，1044 ；1H-NMR (CDCl3, 300MHz) δ 0. 76， 0. 85,0. 87,0. 91,1. 67 (each 3Η，s，24，25，26，27 and 30-CHs) , 2. 43 (3H, s, CH3-Ar),
3.01 (1H，m，H-19) ,3.35，3. 54 (each 1H, d, J = 11. 5Hz，H-23)，4. 59，4. 72 (each 1H, s, H-29) ,5. 09, 5. 13 (each 1H, m, CH2-Ar)，7. 31-7. 36 (7H, m, H-Ar)，7. 82 (2H, m, H-Ar) ； ESI-MS m/z :729. 6[M+H]+，727. 3[Μ-ΗΓ，763. 6[M+Cir.实施例173-肟基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸烯丙酯化合物3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯_28_酸烯丙酯与盐酸羟胺反应， 粗品柱层析(石油醚乙酸乙酯=5 1)，得白色固体(0.039g，76% )，mp 125_128°C . IR(film, cm-1)3426,2946,2869,1725，1643，1461，1378，1172，1123，1041，982，937，883 ； 1H-Nmr(Cdci3JOOmHz) δ o. 88, o. 89, o. 89,0. 93,1. 61 (each 3Η, s，24，25，26，27 and 30-CHs) ,2. 93-3. 06 (2H, m, H-19, H-2b), 3. 41,3. 54 (each 1H, d, J = 11. 4Hz，H-23)，
4.45-4. 55 (2H, m, 28_C00CH2)，4. 53，4. 66 (each 1H, s, H-29)，5. 16 (1H, d，J = 10. 5，= CH-c is) ,5. 26(lH，dd，J = 17. 1，1. 4Hz, = CH-trans), 5. 85(lH,m,CH = CH2) ； ESI-MS m/z 526. 4[M+H]+，524. 5[Μ-ΗΓ.实施例18片剂实施例1250g羟丙甲基纤维素E5 15g微晶纤维素MCC102 18g
12
8%聚维酮K30 适量硬酯酸镁2g_1000 片取上述配方，用常规方法制备成片剂。
权利要求
通式I所示23 羟基白桦酸衍生物或其可药用盐其中R1代表OH、OCOR4；R2代表Cl、OM、OG、OR4、NHR4、N(R4)2、OR4COOR4、NHR4COOR4、NHR4NH2、OR4OH；R3代表O、NOR4、NNHR4；R4代表H、非取代或X取代的C1 C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基，联苯甲基；X代表H、Cl、Br、F、I、CN、NH2，NO2、CF3、OH、OCH3、COOH，COOCH3，C1 C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基；M代表Na、K、Li；G代表糖苷或乙酰化的糖苷。FSA00000185821500011.tif
2.权利要求1的23羟基白桦酸衍生物或盐，其中 其中R1代表OH、OAc ；R2 代表 0G、OH、NH2、CH2CH3、CH2CH = CH2、NHCH2CH2NH2、0CH2CH20H、"二0、 NC0-(Q^CNoch2cooch2ch3、och2cooh、nhch2cooch3、nhch2cooh ;R3 代表 0、NOH、NOAc、NNHPh、NNHTs ； G代表吡喃葡萄糖或四乙酰化的吡喃葡萄糖。
3.权利要求2的化合物为下列任意结构3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸苄酯；3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸；3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸乙氧甲酰基甲酯；3-羰基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸(0 -D-吡喃葡萄糖苷基)酯；3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸；N- (3-羰基-23-乙酰氧基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酰基)-甘氨酸甲酯；3-肟基-23-羟基-羽扇豆-20 (29)-烯-28-酸乙酯。
4.药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1的通式I的23-羟基白桦酸衍生物 及药学上可接受的载体。
5.权利要求1的23-羟基白桦酸衍生物用于制备治疗肿瘤疾病的药物的用途。
6.权利要求5的用途，其中肿瘤疾病是肝癌、肺癌、胃癌、黑色素瘤、宫颈癌、乳腺癌、白 血病或脑瘤。
全文摘要
本发明涉及药物化学领域，具体涉及一类23-羟基白桦酸衍生物，本发明还公开了这些23-羟基白桦酸衍生物的制备方法以及含有所述化合物的药物组合物和所述化合物在治疗肿瘤疾病或病症中的应用。
文档编号C07J63/00GK101928323SQ201010224698
公开日2010年12月29日 申请日期2010年7月13日 优先权日2010年7月13日
发明者叶文才, 吴晓明, 姚和权, 孙飞, 张陆勇, 徐进宜, 朱培清, 李赞, 查晓明, 江波, 袁胜涛 申请人:中国药科大学