专利名称：23-羟基白桦酸衍生物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于医药领域，特别涉及一种经化学修饰的23-羟基白桦酸衍生物，本发 明公开了多个系列的23-羟基白桦酸衍生物及其制备方法和用于抗肿瘤及作为肿瘤耐药 逆转剂的用途。
背景技术：
天然产物在人类与癌症的斗争中发挥着重要的作用。目前天然来源的化合物占抗 癌药物的比例已达60%以上，其中喜树碱，紫杉醇，长春碱等已经应用于临床，而继续从天 然产物中寻找、开发疗效好，毒性小，特异性强、可逆转化疗耐药的新型抗肿瘤药物仍然是 人们关注的热点。23-羟基白桦酸03-hydroxybetulinic acid，23-HBA)是从中药白头翁中分 离得到的白桦酸类似物，其结构与活性与白桦酸相似，其对黑色素瘤B16细胞系、人胃癌 SGC-7901细胞系、人卵巢癌AO细胞系、人白血病HL-60细胞系、人白血病K562细胞系、人宫 颈癌HeLa细胞系及小鼠腹水瘤S180细胞系等均有抑制作用。中国发明专利CN 1491651A 公开了 23-羟基白桦酸对小鼠黑色素瘤、脑神经胶质瘤、肠道肿瘤、肺癌、肝癌以及爱滋病 的预防和治疗有作用。目前关于白桦酸与23-羟基白桦酸诱导细胞凋亡的作用机理并未十 分明确。研究表明，白桦酸类化合物在促进细胞凋亡及抗血管生成等方面发挥重要作用。其 促进人白血病HL-60细胞凋亡的作用可能是通过抑制bcl-2基因的表达以及端粒酶活性， 导致细胞凋亡。研究显示其作用并非通过配体/受体结合机制，而是通过降低细胞线粒体 膜的通透性，使线粒体内细胞色素c进入胞质溶胶，产生活性氧分子，引起线粒体凋亡因子 释放，最终诱导细胞凋亡。此外，有研究(Journal of Ethnopharmacology, 2010,128,615-622)注意到 23-HBA具有与抗肿瘤药物协同增敏的活性，在较低浓度下能显著提高耐药性肿瘤细胞对多 种化疗药物的敏感度，增加抗肿瘤药物在细胞内的蓄积。23-HBA在体内外均可与多柔比星 (doxorubicin, D0X)发挥协同作用，将DOX与23-HBA联合用药后，对四种肿瘤细胞的生长抑 制作用显著提高，其在四种细胞中的ED5(l、ED75、ED9(l、ED9yJC平下的联合用药指数(Cl)均小 于1，表现为协同增效。研究显示23-HBA能抑制肿瘤细胞中DOX诱导的P-糖蛋白的功能， 从而阻止P-糖蛋白将DOX转运出细胞膜，增加了细胞内DOX的浓度，其深入的作用机制仍 需进一步研究。中国发明专利CN 1861627A公开了一系列23-羟基白桦酸修饰衍生物，并公开了 其对人低分化胃腺癌细胞、人肝癌细胞、人细胞、人脑瘤细胞、人早幼粒细胞白血病细胞、人 乳腺癌细胞、人卵巢癌细胞、人宫颈癌细胞、小鼠黑色素瘤细胞的抑制活性。最新研究表明，23-羟基白桦酸还具有抑制糖元磷酸化酶的活性，其具体的作用 机理仍不明确。23-羟基白桦酸本身的抑制糖元磷酸化酶的活性并不强，其对兔肌糖元磷 酸酶 a(RMGPa)抑制的 IC50 值为 103 μ M，低于咖啡因(74. 9 μ Μ)，Zhu P.等(Bioorganic Medicinal Chemistry Letter, 2009,19 :6966-6969)报道了一系列活性得到提高的 23-HBA
其中，R1为 OH、OR5, OCOR5, OSO2R5, OCONR5, OCONR5NR5, 0C0NR5C0R5, NH2, NHCH2OR5, NHNHR5、NHCOR5、OCOR5NHR5 或 0C0&C00H ；R2 为 OH、OR5, OCOR5, OSO2R5, OCONR5, OCONR5NR5, 0C0NR5NR5C0R5, 0C0NR5NR5C00R5, OCONR5COR5、NH2、NHCH2OR5、NHNHR5、NHCOR5, OCOR5NHR5 或 0C0&C00H ；R3 为 OH、OR5, NR5, OCOR5, NCOR5, OSO2R5, OCONR5, NCONR5, OCONR5NR5, NCONR5NR5, OCOnR5COR5, NCONr5COr5、NHR5NHR5, NHR5COOR5, Mffi5COMffi5COOR5、NHR5NH2, NHCH2OR5、NHNHR5、 NHCOR5, OCOR5NHR5, 0C0R5C00H, OCOCH = CR5, NHR5NHC0R5C00H 或 OIi5OCOR5COOH ；R4 为 H 或 0H;&为H、X取代的碳原子数1-10个的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃或苯基；X为H、Cl、 Br、F、I、CN、NH2, NO2, CF3> OH、OCH3> COOH 或 C00CH3。所述R1 为 OH、OCOR5 或 0C0R5C00H ；所述 Ii2 为 OH、OCOR5, OCONR5, OCONR5NR5, OCONR5OR5, 0C0NR5C00R、0C0NR5NR5C00R, 0C0NR5NR5C0R0C0NR5 或 0C0&C00H ；所述民为 0H、 NHR5, NHR5COOR5, OR5, OR5OH, OR5OCOR5, 0R50C0R5C00H, Mffi5NHCOR5COOH、NHR5COOR5, NHR5COOH, NR5NR5, NHR5C0NHR5C00R5 或 Mffi5COMffi5COOH ；所述 R1J2 和 & 为 COOH 时，Ii5 不为 H。所述衍生物为3-羟基-23-0-1,4'-哌啶基哌啶甲酰基_28_白桦酸、3_轻 基-23-0-1,4'-哌啶基哌啶甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4'-嘧啶基哌嗪甲酰 基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4' -2-吡啶基哌嗪甲酰基_28_白桦酸、3-羟基-23-0-1， 4' -N，N-二甲氨基哌啶甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4'-苄基哌嗪甲酰
衍生物，并从中发现了 3个活性较23-HBA及咖啡因显著提高的化合物。23-羟基白桦酸作为具有抗肿瘤及其它活性的天然化合物，其结构修饰正受到越 来越多的重视。由于23-羟基白桦酸作用机理独特，毒性低，对其的深入研究具有重大意 义。
发明内容
为了克服现有技术的缺点和不足，本发明的首要目的在于提供一种23-羟基白桦 酸衍生物。本发明的又一目的在于提供上述23-羟基白桦酸衍生物的制备方法。本发明的再一目的在于提供上述23-羟基白桦酸衍生物的用途。本发明的目的通过下述技术方案实现一种23-羟基白桦酸衍生物，其特征在于 该衍生物具有如式(I)所示的结构基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4'-吡咯烷基哌啶甲酰基_28_白桦酸、3-羟基-23-0-1， 4'-乙氧羰基哌啶甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1，4'-乙酰基哌嗪甲酰基_28_白 桦酸、3-羟基-23-0-1,4'-乙氧羰基哌嗪甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4' -4-甲 基哌嗪基哌啶甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4' -4-甲基哌啶基哌嗪甲酰基-28-白 桦酸、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸酰胺色氨酸甲酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸酰胺 蛋氨酸甲酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦 酸酰胺天冬氨酸二甲酯、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺色氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸 酰胺蛋氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺天冬氨 酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺丙氨酸甲酯、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺 甘氨酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸酰胺甘氨酸甲酯、3，23-二羟 基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺天冬氨酸二甲酯、3，23_二羟基-28-白桦酸酰胺蛋氨酸酰胺 蛋氨酸甲酯、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸酰胺蛋氨酸甲酯、3，23-二羟基-28-白 桦酸酰胺脯氨酸酰胺色氨酸甲酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺色氨酸甲酯、 3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺丙氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸 酰胺脯氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸酰胺甘氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸 酰胺甘氨酸酰胺天冬氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺蛋氨酸酰胺蛋氨酸、3，23-二羟 基-28-白桦酸酰胺脯氨酸酰胺蛋氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸酰胺色氨酸、 3，23_ 二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺色氨酸、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸_4'-哌 啶基哌啶酰胺、3，23-0- 二乙酰基-28-白桦酸-4‘ -[5-(吡啶-2-基)-IH-四氮唑基] 丁酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸二烯丙酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸烯丙酰 胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸胺乙基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸吗啉基酰胺、 3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸哌啶酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸哌嗪基单酰胺、3， 23-0-二乙酰基-28-白桦酸咪唑基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-N，N-二甲 氨基哌啶基酰胺、3，23-0- 二乙酰基-28-白桦酸-4'-甲基哌嗪基酰胺、3，23-0- 二乙酰 基-28-白桦酸-4'-乙酰基哌嗪基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-4'-苄基哌嗪 基酰胺、3，23-0- 二乙酰基-28-白桦酸-4 ‘-乙基哌嗪基酰胺、3，23- 二羟基-28-白桦 酸-4'-哌啶基哌啶酰胺、3，23_ 二羟基-28-白桦酸-4' _[5_(吡啶-2-基)_1Η_四氮 唑-1-基]丁酰胺、3，23_二羟基-28-白桦酸二烯丙酰胺、3，23_二羟基-28-白桦酸烯丙酰 胺、3，23-二羟基-28-白桦酸胺乙基酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸吗啉基酰胺、3，23-二 羟基-28-白桦酸哌啶酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸哌嗪基单酰胺、3，23-二羟基-28-白 桦酸咪唑基酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸-4' -N，N-二甲氨基哌啶基酰胺、3，23-二羟 基-28-白桦酸-4'-甲基哌嗪基酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸-4'-乙酰基哌嗪基酰 胺、3，23-二羟基-28-白桦酸-4'-苄基哌嗪基酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸-4'-乙 基哌嗪基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸2'-甲基烯丙酯、3，23-0-二乙酰基-28-白 桦酸-2' -[1-吗啉基]乙酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-Γ -甲基-丁炔酯、 3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-2' ,4'-己二烯酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-3‘， 5'-己二烯酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸丙腈酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸 3'-甲基-2' -丁烯酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸叔丁酯、3，23-0-二乙酰基-28-白 桦酸-1'-四氢呋喃基甲酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸戊二醇单酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸辛二醇单酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-顺丁烯二醇单酯、3， 23-0-二乙酰基-28-白桦酸三缩二乙二醇单酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸异戊酯、3， 23-二羟基-28-白桦酸2'-甲基烯丙酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-2' _[1_吗啉基]乙 酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-1'-甲基-2' -丁炔酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸-2'， 4'-己二烯酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-3' ,5'-己二烯酯、3，23-二羟基-28-白桦 酸丙腈酯、3，23-二羟基-28-白桦酸3'-甲基-2' -丁烯酯、3，23-二羟基-28-白桦酸 叔丁酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-1'-四氢呋喃基甲酯、3，23-二羟基-28-白桦酸戊二 醇单酯、3，23-二羟基-28-白桦酸辛二醇单酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-顺丁烯二 醇单酯、3，23-二羟基-28-白桦酸三缩二乙二醇单酯、3，23-二羟基-28-白桦酸异戊酯、 3，23-0-二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸叔丁酯、3，23_0_ 二乙酰基-30-羟基-28-白桦 酸-1 ‘-四氢呋喃基甲酯、3，23-0- 二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸异戊酯、3，23-0- 二乙酰 基-30-羟基-28-白桦酸吗啉基酰胺、3，23-0- 二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸哌啶酰胺、 3，23-0-二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-二羟基-30-羟基-28-白 桦酸叔丁酯、3，23_ 二羟基-30-羟基-28-白桦酸-1'-四氢呋喃基甲酯、3，23-二羟 基-30-羟基-28-白桦酸异戊酯或3，23-二羟基-30-羟基-28-白桦酸吗啉基酰胺。所述Ii1 或 Ii2 为 0C0NR5、OCONR5NR5, OCONR5OR5, OCONR5COOR、OCONR5NR5COOR, 0C0NR5NR5C0R或OCONR5NR5时，所述衍生物的制备包括以下操作步骤(1)将20 30mmol固体光气溶于30 50mL有机溶剂中，在-20°C 10°C下加 入6 Smmol碱，再向反应液中缓慢滴加胺类化合物的有机溶剂溶液30 50mL，滴加完毕 升温至25°C搅拌4 48小时，过滤，滤液旋干，得到胺甲酰氯；所述胺类化合物与固体光气 等摩尔；所述有机溶剂为吡啶、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或丙酮；所述碱为三乙胺或吡啶； 所述胺类化合物优选为4'-哌啶基哌啶、4'-嘧啶基哌嗪、4' -2-吡啶基哌嗪、4' -N, N-二甲氨基哌啶、4'-苄基哌嗪、4'-吡咯烷基哌啶、4'-乙氧羰基哌啶、4'-乙酰基哌 嗪、4'-乙氧羰基哌嗪或4' -4-甲基哌啶基哌嗪；(2)将步骤(1)所得胺甲酰氯溶于50 120mL干燥吡啶中，加入2 3mmol 23-羟 基白桦酸的有机溶剂溶液50 120mL，在温度25°C 60°C条件下搅拌反应2 48小时；(3)向步骤⑵所得反应液中加入IOOmL有机溶剂，将pH调节至彡7，分离有机层， 得到产物。所述R1或&为0C0&或OCOR5COOH时，所述衍生物的制备包括以下操作步骤(1)将0. 63mmol 23-羟基白桦酸溶于12mL有机溶剂，再加入6. 3mmol酸酐，在温 度25°C 60°C条件下反应2 48小时；(2)向步骤⑵所得反应液中加入25mL有机溶剂，将pH调节至彡7，分离有机层， 得到产物；所述有机溶剂为吡啶、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或丙酮。所述Ii1 或 Ii2 为 0C0&，R3 为 M5COOR5、NR5C00H、M5CONR5COOIi5、NI 5C0NR5C00H、NHR5, NHR5NHR5, NR5OR5, OR5, OR5OH或0&0&0&0H时，所述衍生物的制备包括以下操作步骤(1)将3，23-0-二酰基白桦酸0. 52 1. 08mmol溶于有机溶剂20 30mL中，加 入草酰氯0. 3 0. 6mL和催化剂0. 1 0. 2mL,在温度-20°C 25°C条件下反应4 12小 时；
(2)除去有机溶剂，重新加入有机溶剂20 30mL，再向溶液中加入3，23_0_ 二酰 基白桦酸4 10倍当量的醇类化合物、胺类化合物或氨基酸酯盐酸盐的有机溶液，再加入 3，23-0-二酰基白桦酸1倍当量的有机碱，反应6 M小时，温度为25°C 120°C ；(3)除去有机溶剂后，再重新加入25 IOOmL有机溶剂，依次采用盐酸、饱和食盐 水以及水进行洗涤，得到3，23-0-二酰基-17-白桦酸酯或酰胺衍生物；(4)将步骤(3)所得衍生物0. 3mmol溶解在四氢呋喃与甲醇以体积比2 5混合 得到的溶液14mL中，加入2 6mol/L强碱溶液4mL，回流2 M小时，得到3，23- 二羟 基-17-白桦酸酯或酰胺衍生物；(5)将步骤(4)所得3，23-0- 二酰基_17_白桦酸酰胺氨基酸衍生物0. 2mmol溶 于有机溶剂30mL中，加入0. 4mmol氨基酸甲酯盐酸盐、0. 4mmol 1-乙基_ (3- 二甲基氨基 丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC · HCl)和0. 5mmol无水1-羟基-苯并-三氮唑(HoBt)，反应 4 18小时，温度为25°C 80°C，得到3，23-二羟基-17-白桦酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸甲(6)将步骤(5)所得产物0. Immol溶解在四氢呋喃与甲醇以体积比1 1混合得到 的溶液8mL中，加入2 6mol/L强碱溶液2mL，回流2 M小时，得到3，23- 二羟基-17-白
桦酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸；其中，有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、四氢呋喃或丙酮；催化剂为二 甲基甲酰胺(DMF)；醇类化合物优选为甲代烯丙醇、4-羟乙基吗啉、3-甲基-1-丁炔-3-醇、 2,4-己二烯-1-醇、1，5-己二烯-3-醇、3-羟基丙腈、3-甲基-丁烯-1-醇、叔丁醇、四氢 糠醇、1，5_戊二醇、1，8_辛二醇、顺-2-丁烯-1，4-二醇、三缩二乙二醇或异戊醇；胺类化合 物优选为4-哌啶基哌啶、4-[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁胺、二烯丙基胺、烯丙 胺、乙二胺、吗啉、哌啶、哌嗪、咪唑、4-二甲胺基哌啶、4-甲基哌嗪、4-乙酰基哌嗪、4-苄基 哌嗪或4-乙基哌嗪；氨基酸酯盐酸盐为氨基酸的甲酯盐酸盐或乙酯盐酸盐；有机碱为三乙 胺、4-二甲基胺吡啶、1-羟基-苯并-三氮唑或吡啶；强碱为氢氧化钠或氢氧化钾；卤代溶 剂为二氯甲烷或氯仿。所述R1 或 Ii2 为 OCOR5, R3 为 NI 5C00R5、NR5COOH, NHR5, NR5OR5 或 OR5, R4 为 OH 时，所
述衍生物的制备包括以下操作步骤(1)将3，23-0-二酰基白桦酸0. 52 1. 08mmol溶于有机溶剂20 30mL中，加 入草酰氯0. 3 0. 6mL和催化剂0. 1 0. 2mL,在温度-20°C 25°C条件下反应4 12小 时；(2)除去有机溶剂，得到沉淀；再加入有机溶剂20 30mL向溶液中加入3， 23-0- 二酰基白桦酸4 10倍当量的醇类化合物、胺类化合物或氨基酸酯盐酸盐的有机 溶液，再加入3，23-0- 二酰基白桦酸1倍当量的有机碱，反应6 M小时，温度为25°C至 120 0C ；(3)除去有机溶剂后，再重新加入25 IOOmL有机溶剂，依次采用盐酸、饱和食盐 水以及水进行洗涤，得到3，23-0-二酰基-17-白桦酸酯或酰胺衍生物；(4)将步骤(3)所得3，23-0- 二酰基_17_白桦酸酯或酰胺衍生物0. 3 0. 6mmol 溶于30 60mL有机溶剂中，加入间氯过氧苯甲酸，反应6 M小时，温度为25°C 100°C， 依次采用饱和NaHCO3溶液、饱和食盐水和水洗涤，得到3，23-0- 二酰基-30-羟基-17-白
11桦酸酯或酰胺衍生物；间氯过氧苯甲酸的加入量是与3，23-0-二酰基-17-白桦酸酯或酰胺 衍生物等摩尔；(5)将步骤(4)所得衍生物0. 3mmol溶解在四氢呋喃与甲醇以体积比2 5混合 得到的溶液14mL，加入2 6mol/L强碱溶液4mL，回流2 M小时，用酸调pH至中性或酸 性，得到3，23- 二羟基-30-羟基白桦酸酯或酰胺衍生物；其中，有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、四氢呋喃或丙酮；催化剂为二 甲基甲酰胺(DMF)；醇类化合物优选为甲代烯丙醇、4-羟乙基吗啉、3-甲基-1-丁炔-3-醇、 2,4-己二烯-1-醇、1，5-己二烯-3-醇、3-羟基丙腈、3-甲基-丁烯-1-醇、叔丁醇、四氢 糠醇、1，5_戊二醇、1，8_辛二醇、顺-2-丁烯-1，4-二醇、三缩二乙二醇或异戊醇；胺类化合 物优选为4-哌啶基哌啶、4-[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁胺、二烯丙基胺、烯丙 胺、乙二胺、吗啉、哌啶、哌嗪、咪唑、4-二甲胺基哌啶、4-甲基哌嗪、4-乙酰基哌嗪、4-苄基 哌嗪或4-乙基哌嗪；氨基酸酯盐酸盐为氨基酸的甲酯盐酸盐或乙酯盐酸盐；有机碱为三乙 胺或吡啶；强碱为氢氧化钠或氢氧化钾。上述23-羟基白桦酸衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途。上述23-羟基白桦酸衍生物在制备肿瘤多药耐药逆转剂中的用途。所述肿瘤为肝癌、乳腺癌、宫颈癌、肺癌、黑色素瘤、肠癌、脑瘤、胃癌、卵巢癌、白血 病或腹水瘤。—种药物组合物，包括上述23-羟基白桦酸衍生物和其它抗肿瘤药物。其它抗肿 瘤药物是指P-gP的底物，其中包括蒽环类、紫杉烷类、长春碱类、鬼白毒素类以及米托蒽 醌、放线菌素D及丝裂霉素C等。本发明23-羟基白桦酸衍生物与抗肿瘤药物联用，可增加 多药耐药肿瘤细胞对抗肿瘤药物的敏感度，提高化疗效果，具有良好的开发和应用前景。本发明的23-羟基白桦酸衍生物可以用下式反应方程式表示制备过程(如未明确 标明，则Ri、R2、R3、R4W定义如前所述)反应方程式1
权利要求
1. 一种23-羟基白桦酸衍生物，其特征在于该衍生物具有如式(I)所示的结构
2.根据权利要求1所述的一种23-羟基白桦酸衍生物，其特征在于所述队为0H、 OCOR5 或 0C0&C00H ；所述 Ii2 为 OH、OCOR5, OCONR5, OCONR5NR5, OCONR5OR5, 0C0NR5C00R、 0C0NR5NR5C00R.0C0NR5NR5C0R0C0NR5 或 OCOR5COOh ；所述 & 为 OH、NHR5、Mffi5COOR5、OR5、0R50H、 OR5OCOR5, 0R50C0R5C00H, Mffi5NHCOR5COOH、NHR5COOR5, NHR5COOH, NR5NR5, NHR5C0NHR5C00R5 或 Mffi5CONHR5COOH ；所述 R1、R2 和 R3 为 COOH 时，Ii5 不为 H。
3.根据权利要求1所述的一种23-羟基白桦酸衍生物，其特征在于所述衍生物为 3-羟基-23-0-1,4'-哌啶基哌啶甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1，4'-哌啶基 哌啶甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4'-嘧啶基哌嗪甲酰基-28-白桦酸、3-羟 基-23-0-1,4' -2-吡啶基哌嗪甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4' -N，N-二甲氨 基哌啶甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4'-苄基哌嗪甲酰基-28-白桦酸、3-羟 基-23-0-1,4'-吡咯烷基哌啶甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4'-乙氧羰基哌啶甲 酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4'-乙酰基哌嗪甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1， 4'-乙氧羰基哌嗪甲酰基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4' -4-甲基哌嗪基哌啶甲酰 基-28-白桦酸、3-羟基-23-0-1,4' -4-甲基哌啶基哌嗪甲酰基-28-白桦酸、3，23_0_ 二 乙酰基-28-白桦酸酰胺色氨酸甲酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸酰胺蛋氨酸甲酯、3， 23-0-二乙酰基-28-白桦酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸酰胺天冬氨 酸二甲酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸酰胺色氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺蛋氨酸、 3，23- 二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸、3，23- 二羟基-28-白桦酸酰胺天冬氨酸、3，23- 二 羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺丙氨酸甲酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺 脯氨酸甲酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸酰胺甘氨酸甲酯、3，23-二羟基-28-白(I )桦酸酰胺甘氨酸酰胺天冬氨酸二甲酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸酰胺蛋氨酸酰胺蛋氨酸甲 酯、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸酰胺蛋氨酸甲酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸酰胺 脯氨酸酰胺色氨酸甲酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺色氨酸甲酯、3，23_ 二 羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺丙氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺脯氨 酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸酰胺甘氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨 酸酰胺天冬氨酸、3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺蛋氨酸酰胺蛋氨酸、3，23-二羟基-28-白 桦酸酰胺脯氨酸酰胺蛋氨酸、3，23- 二羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸酰胺色氨酸、3，23- 二羟 基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺色氨酸、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-哌啶基哌啶 酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-4' -[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁酰 胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸二烯丙酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸烯丙酰胺、 3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸胺乙基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸吗啉基酰胺、3， 23-0-二乙酰基-28-白桦酸哌啶酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸哌嗪基单酰胺、3， 23-0-二乙酰基-28-白桦酸咪唑基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-N，N-二甲 氨基哌啶基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-4'-甲基哌嗪基酰胺、3，23-0-二乙酰 基-28-白桦酸-4'-乙酰基哌嗪基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-苄基哌嗪 基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-4'-乙基哌嗪基酰胺、3，23_ 二羟基-28-白桦 酸-4'-哌啶基哌啶酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸-4' _[5_(吡啶-2-基)_1Η_四氮 唑-1-基]丁酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸二烯丙酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸烯丙酰 胺、3，23-二羟基-28-白桦酸胺乙基酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸吗啉基酰胺、3，23-二 羟基-28-白桦酸哌啶酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸哌嗪基单酰胺、3，23-二羟基-28-白 桦酸咪唑基酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸-4' -N，N-二甲氨基哌啶基酰胺、3，23-二羟 基-28-白桦酸-4'-甲基哌嗪基酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸-4'-乙酰基哌嗪基酰 胺、3，23-二羟基-28-白桦酸-4'-苄基哌嗪基酰胺、3，23-二羟基-28-白桦酸-4'-乙 基哌嗪基酰胺、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸2'-甲基烯丙酯、3，23-0-二乙酰基-28-白 桦酸-2' -[1-吗啉基]乙酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-Γ -甲基-丁炔酯、 3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-2' ,4'-己二烯酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-3‘， 5'-己二烯酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸丙腈酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸 3'-甲基-2' -丁烯酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸叔丁酯、3，23-0-二乙酰基-28-白 桦酸-1'-四氢呋喃基甲酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸戊二醇单酯、3，23-0-二乙 酰基-28-白桦酸辛二醇单酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸-顺丁烯二醇单酯、3， 23-0-二乙酰基-28-白桦酸三缩二乙二醇单酯、3，23-0-二乙酰基-28-白桦酸异戊酯、3， 23-二羟基-28-白桦酸2'-甲基烯丙酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-2' -[1-吗啉基]乙 酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-1'-甲基-2' -丁炔酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸-2'， 4'-己二烯酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-3' ,5'-己二烯酯、3，23-二羟基-28-白桦 酸丙腈酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸3'-甲基-2' -丁烯酯、3，23-二羟基-28-白桦酸 叔丁酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-1'-四氢呋喃基甲酯、3，23-二羟基-28-白桦酸戊二 醇单酯、3，23-二羟基-28-白桦酸辛二醇单酯、3，23-二羟基-28-白桦酸-顺丁烯二 醇单酯、3，23-二羟基-28-白桦酸三缩二乙二醇单酯、3，23_ 二羟基-28-白桦酸异戊酯、 3，23-0-二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸叔丁酯、3，23_0_ 二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸-1'-四氢呋喃基甲酯、3，23-0-二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸异戊酯、3，23-0-二乙酰 基-30-羟基-28-白桦酸吗啉基酰胺、3，23-0- 二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸哌啶酰胺、 3，23-0-二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸酰胺脯氨酸甲酯、3，23-二羟基-30-羟基-28-白 桦酸叔丁酯、3，23_ 二羟基-30-羟基-28-白桦酸-1'-四氢呋喃基甲酯、3，23-二羟 基-30-羟基-28-白桦酸异戊酯或3，23-二羟基-30-羟基-28-白桦酸吗啉基酰胺。
4.根据权利要求1所述的一种23-羟基白桦酸衍生物的制备方法，其特征在于所述R1 或 Ii2 为 0C0NR5、0C0NR5N! 5、0C0NR5( 5、0C0NR5C00R、0C0NI 5NR5C00R、0C0NI 5NR5C0R 或 OCONR5M5 时，所述衍生物的制备包括以下操作步骤(1)将20 30mmol固体光气溶于30 50mL有机溶剂中，在_20°C 10°C下加入6 Smmol碱，再向反应液中缓慢滴加胺类化合物的有机溶剂溶液30 50mL，滴加完毕升温至 25°C搅拌4 48小时，过滤，滤液旋干，得到胺甲酰氯；所述胺类化合物与固体光气等摩尔； 所述有机溶剂为吡啶、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或丙酮；所述碱为三乙胺或吡啶；所述胺 类化合物为4'-哌啶基哌啶、4'-嘧啶基哌嗪、4' -2-吡啶基哌嗪、4' -N，N-二甲氨基 哌啶、4'-苄基哌嗪、4'-吡咯烷基哌啶、4'-乙氧羰基哌啶、4'-乙酰基哌嗪、4'-乙 氧羰基哌嗪或4' -4-甲基哌啶基哌嗪；(2)将步骤(1)所得胺甲酰氯溶于50 120mL干燥吡啶中，加入2 3mmol23-羟基 白桦酸的有机溶剂溶液50 120mL，在温度25°C 60°C条件下搅拌反应2 48小时；(3)向步骤(2)所得反应液中加入IOOmL有机溶剂，将pH调节至彡7，分离有机层，得 到产物。
5.根据权利要求1所述的一种23-羟基白桦酸衍生物的制备方法，其特征在于所述 R1或&为0C0&或OCOR5COOH时，所述衍生物的制备包括以下操作步骤(1)将0.63mmol23-羟基白桦酸溶于12mL有机溶剂，再加入6. 3mmol酸酐，在温度 25°C 60°C条件下反应2 48小时；(2)向步骤⑵所得反应液中加入25mL有机溶剂，将pH调节至彡7，分离有机层，得到 产物；所述有机溶剂为吡啶、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或丙酮。
6.根据权利要求1所述的一种23-羟基白桦酸衍生物的制备方法，其特征在于所述R1 或 Ii2 为 0C0&，R3 为 NR5C00I 5、NI 5C00H、NI 5C0NR5C0( 5、NI 5C0NR5C00H、NHR5、Mffi5Mffi5、NI 50R5、 0R5> OR5OH或OR5OR5OR5OH时，所述衍生物的制备包括以下操作步骤(1)将3，23-0-二酰基白桦酸0. 52 1. 08mmol溶于有机溶剂20 30mL中，加入草酰 氯0. 3 0. 6mL和催化剂0. 1 0. 2mL,在温度_20°C 25°C条件下反应4 12小时；(2)除去有机溶剂，重新加入有机溶剂20 30mL，再向溶液中加入3，23_0_二酰基白 桦酸4 10倍当量的醇类化合物、胺类化合物或氨基酸酯盐酸盐的有机溶液，再加入3， 23-0-二酰基白桦酸1倍当量的有机碱，反应6 M小时，温度为25°C 120°C ；(3)除去有机溶剂后，再重新加入25 IOOmL有机溶剂，依次采用盐酸、饱和食盐水以 及水进行洗涤，得到3，23-0- 二酰基-17-白桦酸酯或酰胺衍生物；(4)将步骤⑶所得衍生物0.3mmol溶解在四氢呋喃与甲醇以体积比2 5混合得到的 溶液14mL中，加入2 6mol/L强碱溶液4mL，回流2 M小时，得到3，23- 二羟基-17-白 桦酸酯或酰胺衍生物；(5)将步骤(4)所得3，23-0-二酰基-17-白桦酸酰胺氨基酸衍生物0.2mmol溶于有 机溶剂30mL中，加入0. 4mmol氨基酸甲酯盐酸盐、0. 4mmol 1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基) 碳二亚胺盐酸盐(EDC .HCl)和0. 5mmol无水1-羟基-苯并-三氮唑(HoBt)，反应4 18 小时，温度为25°C 80°C，得到3，23_ 二羟基-17-白桦酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸甲酯；(6)将步骤(5)所得产物0.Immol溶解在四氢呋喃与甲醇以体积比1 1混合得到的 溶液8mL中，加入2 6mol/L强碱溶液2mL，回流2 M小时，得到3，23- 二羟基-17-白 桦酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸；其中，有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、四氢呋喃或丙酮；催化剂为二甲基 甲酰胺(DMF)；醇类化合物为甲代烯丙醇、4-羟乙基吗啉、3-甲基-1-丁炔-3-醇、2，4_己二 烯-1-醇、1，5_己二烯-3-醇、3-羟基丙腈、3-甲基-丁烯-1-醇、叔丁醇、四氢糠醇、1，5_戊 二醇、1，8-辛二醇、顺-2- 丁烯-1，4- 二醇、三缩二乙二醇或异戊醇；胺类化合物为4-哌啶 基哌啶、4-[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁胺、二烯丙基胺、烯丙胺、乙二胺、吗啉、 哌啶、哌嗪、咪唑、4- 二甲胺基哌啶、4-甲基哌嗪、4-乙酰基哌嗪、4-苄基哌嗪或4-乙基哌 嗪；氨基酸酯盐酸盐为氨基酸的甲酯盐酸盐或乙酯盐酸盐；有机碱为三乙胺、4-二甲基胺 吡啶、1-羟基-苯并-三氮唑或吡啶；强碱为氢氧化钠或氢氧化钾；卤代溶剂为二氯甲烷或 氯仿。
7.根据权利要求1所述的一种23-羟基白桦酸衍生物的制备方法，其特征在于所述 R1 或 & 为 OCOR5, R3 为 NR5COOR5, NR5COOH, NHR5, NR5OR5 或 OR5, R4 为 OH 时，所述衍生物的制 备包括以下操作步骤(1)将3，23-0-二酰基白桦酸0. 52 1. 08mmol溶于有机溶剂20 30mL中，加入草酰 氯0. 3 0. 6mL和催化剂0. 1 0. 2mL,在温度_20°C 25°C条件下反应4 12小时；(2)除去有机溶剂，得到沉淀；再加入有机溶剂20 30mL向溶液中加入3，23_0_二酰 基白桦酸4 10倍当量的醇类化合物、胺类化合物或氨基酸酯盐酸盐的有机溶液，再加入 3，23-0- 二酰基白桦酸1倍当量的有机碱，反应6 M小时，温度为25°C至120°C ；(3)除去有机溶剂后，再重新加入25 IOOmL有机溶剂，依次采用盐酸、饱和食盐水以 及水进行洗涤，得到3，23-0- 二酰基-17-白桦酸酯或酰胺衍生物；(4)将步骤(3)所得3，23-0-二酰基-17-白桦酸酯或酰胺衍生物0. 3 0. 6mmol溶 于30 60mL有机溶剂中，加入间氯过氧苯甲酸，反应6 M小时，温度为25°C 100°C， 依次采用饱和NaHCO3溶液、饱和食盐水和水洗涤，得到3，23-0- 二酰基-30-羟基-17-白 桦酸酯或酰胺衍生物；间氯过氧苯甲酸的加入量是与3，23-0-二酰基-17-白桦酸酯或酰胺 衍生物等摩尔；(5)将步骤(4)所得衍生物0.3mmol溶解在四氢呋喃与甲醇以体积比2 5混合得到 的溶液14mL，加入2 6mol/L强碱溶液4mL，回流2 M小时，用酸调pH至中性或酸性， 得到3，23- 二羟基-30-羟基白桦酸酯或酰胺衍生物；其中，有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、四氢呋喃或丙酮；催化剂为二甲基 甲酰胺(DMF)；醇类化合物为甲代烯丙醇、4-羟乙基吗啉、3-甲基-1-丁炔-3-醇、2，4-己 二烯-1-醇、1，5-己二烯-3-醇、3-羟基丙腈、3-甲基-丁烯-1-醇、叔丁醇、四氢糠醇、 1,5-戊二醇、1，8-辛二醇、顺-2- 丁烯-1，4- 二醇、三缩二乙二醇或异戊醇；胺类化合物为 4-哌啶基哌啶、4-[5-(吡啶-2-基)-1Η-四氮唑-1-基]丁胺、二烯丙基胺、烯丙胺、乙二胺、吗啉、哌啶、哌嗪、咪唑、4 - 二甲胺基哌啶、4 -甲基哌嗪、4 -乙酰基哌嗪、4 -苄基哌嗪或 4-乙基哌嗪；氨基酸酯盐酸盐为氨基酸的甲酯盐酸盐或乙酯盐酸盐；有机碱为三乙胺或吡 啶；强碱为氢氧化钠或氢氧化钾。
8.根据权利要求1所述的一种23-羟基白桦酸衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途。
9.根据权利要求1所述的一种23-羟基白桦酸衍生物在制备肿瘤多药耐药逆转剂中的 用途。
10.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述肿瘤为肝癌、乳腺癌、宫颈癌、肺癌、 黑色素瘤、肠癌、脑瘤、胃癌、卵巢癌、白血病或腹水瘤。
全文摘要
本发明公开了一种23-羟基白桦酸衍生物及其制备方法和用途。该衍生物具有如式(I)所示的结构。该23-羟基白桦酸衍生物可用于抗肿瘤和作为肿瘤耐药逆转剂的用途。所述23-羟基白桦酸衍生物能有效地抑制肿瘤细胞的增殖，且在非毒性剂量下能显著增加DOX对P-糖蛋白过表达细胞株HepG2/ADM的杀伤力。
文档编号A61P35/02GK102108092SQ20111003204
公开日2011年6月29日 申请日期2011年1月29日 优先权日2011年1月29日
发明者于淼, 叶文才, 张冬梅, 曹惠慧, 王娇, 舒畅, 蓝平, 陈卫民 申请人:暨南大学