专利名称：23－羟基白桦酸类衍生物、其制备方法、制剂及用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及天然药物及药物化学领域，具体涉及一类经修饰的23-羟基白桦酸衍生物，本发明还公开了这些23-羟基白桦酸衍生物的制备方法、含有这些23-羟基白桦酸衍生物的药物组合物及这类23-羟基白桦酸衍生物用于抗肿瘤的用途。
背景技术：
23-羟基白桦酸是与白桦酸结构相似的化合物，23-羟基白桦酸是从中草药白头翁(Pulsatilla chinensis Regel)中提取的一种五环三萜类化合物，白头翁始载于《神农本草经》，属于毛莨科白头翁属植物，具有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效。临床上主要用于治疗细菌性痢疾、阿米巴痢疾、妇科阴道炎等。现代研究发现白头翁除了抗菌和抗病原虫作用外，还具有抗癌、杀精、治疗内毒素血症等作用。从白头翁中分离得到皂苷元23-羟基白桦酸(23-Hydroxy betulinic acid)，结构与白桦酸很相近。CN 1491651A公开了23-羟基白桦酸对小鼠黑色素瘤、脑神经胶质瘤、肠道肿瘤、肺癌、肝癌以及爱滋病的预防和治疗有很好的作用。CN1682740A公开了白桦酸具有糖原磷酸化酶抑制剂作用。
人们对白桦酸进行结构改造，试图找到药理活性更好的化合物，如Bioorganic & MedicinalChemistry Letters，9(8)，1201-1204中公开了对白桦酸结构修饰的一系列衍生物，部分结构如下 该论文作者也对这系列衍生物做了药理学研究，试验结果如下
Table 1.Cytotoxicity profile of amino acid conjugates of betulinic acid against MEL-2 and KB cells lines．
NoteThe assay was performed twice in triplicates.The solubility was tested on the compounds that showed cytotoxicity against MEL-2.
从这些数据可以看出部分经修饰的化合物的抗肿瘤活性与白桦酸相当或略低，部分化合物在个别肿瘤细胞中的活性高于白桦酸，如化合物11、13，23，25。
目前在抗肿瘤领域，大多数的研究者认为白桦酸及其衍生物通过抑制血管生成来达到抗肿瘤的目的，但多年来仍没有这类化合物进入临床试验阶段。临床需要药效更好的抗肿瘤药物。
发明内容
本发明公开了一类新的23-羟基白桦酸衍生物，通过对23-羟基白桦酸的结构改造，得到通式I的23-羟基白桦酸衍生物
其中R1代表H、Br、Cl或F；R2代表OH、OR6、OCOR6、OSO2R6、OSO2NH2、NH2、NHCH2OR6、NHR6、N(R6)2、NOR6、OCOR6NHR6、NHCOR6、NHCOR6(COOH)X、NHSO2R6、NHNHR6、NHNHCH(OH)R6、OCOR6COOH、OCOCH(OH)CH(Ph)R7、OCOCOOR6、NOSO3H、NOR6或NHOR6；R3代表H、CH2OH，CHO、COOH、CH2OR6、CH2OCOR6、CH2OSO2R6、CH2OCOR6NHR6、、CH2NHCOR6、CH2NHCOR6(COOH)X、CH2NHSO2R6X、CH2NHNHR6、CH2NHNHCH(OH)R6、CH2OCOR6COOH、CH2OCOCH(OH)CH(Ph)R7、CH2OCOCOOR6、CH2NOSO3R6、CH2NOR6或CH2NHOR6；R4代表与R3相同的基团，或者代表COOM、COCl、CON3、CONH2、COOR6、CONR6、CON(R6)2、COOR6COZ、COOR6OX、COO(CH2)mCH＝CH(CH2)nOR6、COO(CH2)mC≡C(CH2)nOR6、COOCOCH＝C(R6)2、COOCOR6、COOR6OCOR6、COOR6OCOR6COOH、CONHR6NHCOR6COOH，CONHR6COOR6、CONHR6CONHR6COOR6、COOR6CHO、COOCH2CH＝NOA、COOCH2CH2NHOA、COOCH2CH＝NR6、COOCH2CH2NHNHR6或COOCH2CH2N(R6)2；R5代表CH2＝C-CH3、CH2＝C-CH2OH、CH3CHCH3或CH2＝C-CH2Br；R6代表H、非取代或X取代的C1-C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基；并且，当R2为OH、R4为COOH或CH2OH时，R6不为H；R7代表NH2或NHR6X；X代表H、Cl、Br、F、I、CN、NH2，NO2、CF3、OH、OCH3、COOH，COOCH3，C1-C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基；Z代表OH、OR6、卤素、N3或NH2；A代表H、CH3、SO2C6H4CH3、OCOR6或R6；M代表Na、K、Li；m＝1-8，n＝1-8。
上述衍生物中优选的化合物是R1代表H；R2代表OH、OCOR6、OCOR6COOH、＝O、NOH、NOCOR6、OCOCOOR6；R3代表H、CH2OH、CH2OCOR6、CH2OCOR6COOH、CH2OCOC6H5、CHO、COOH、
CH2OCOCOOR6；R4代表COOH、CONH R6、 COOR6、COOR6OH、COO(CH2)4OCOR6、COOR6OCOR6COOH、CONHR6NHCOR6COOH，CONHR6COOCH3、CONHR6COOH、CONHR6CONHR6COOR6，CONHR6CONHR6COOH或CH2OH；R5代表CH2＝C-CH3或CH2＝C-CH2OH；R6代表H、非取代或X取代的C1-C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基；并且，当R2为OH、R4为COOH或CH2OH时，R6不为H；X代表H、Cl、Br、F、I、CN、NH2，NO2、CF3、OH、OCH3、COOH，COOCH3，C1-C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基；更为优选的化合物是3，23-O-二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸甲酯3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺丙氨酸3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺谷氨酸3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺缬氨酸3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺亮氨酸3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺苯丙氨酸3，23-O-二琥珀酸单酰基白桦酸3，23-O-二苯乙酰基白桦酸3-酮-23-醛白桦酸3-O-邻苯二甲酸单酰基-23-羟基-白桦酸3-羟基-23-O-苯甲酰基白桦酸3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺甘氨酸甲酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺谷氨酸二甲酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺丙氨酸甲酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺亮氨酸甲酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺苯丙氨酸甲酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺缬氨酸甲酯3，23-二羟基-28-白桦酸正辛酯
3，23-二羟基-28-白桦酸正己酯3，23-二羟基-28-白桦酸正庚酯3，23-二羟基-28-白桦酸环己酯3，23-二羟基-28-白桦酸丙烯酯3，23-二羟基-28-白桦酸丙炔酯3，23-二羟基-28-白桦酸丁二醇单酯3，23-二羟基-28-白桦酸乙二醇单酯3，23-二羟基-28-白桦酸己二醇单酯3，23-二羟基-28-白桦酸丁炔二醇单酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸正丁酰胺3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸异丙酰胺3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸环己酰胺3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸二正丁酰胺3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸苯乙酰胺3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸二乙酰胺3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸(3，4-亚甲二氧)苯乙酰胺3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸(α-甲基)苄酰胺3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸甲酯3，23-O-乙酰基-28-白桦酸异丁酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸异丙酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丙烯酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丙炔酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇单酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丁二醇单酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丁炔二醇单酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸己二醇单酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丁二醇丁二酸双酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丁二醇戊二酸双酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸己二醇戊二酸双酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇丁二酸双酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇戊二酸双酯
3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇邻苯二甲酸双酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸己二醇丁二酸双酯3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇顺丁烯二酸双酯3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺甘氨酸甲酯本发明的23-羟基白桦酸衍生物可用下列方法制备得到(其中R2、R3、R4、R6的定义前所述)当R2为OCOR6或OCOR6COOH、＝O；R3为CH2OCOR6、CH2OCOR6COOH、CH2OCOC6H5、CHO或COOH时，制备步骤包括a、用大过量的酸酐或酰氯或氧化剂处理23-羟基白桦酸4-48个小时，温度为室温至120°C；b、向步骤a的溶液中加入水；c、用有机溶剂萃取，得到有机层，其中，氧化剂为PCC氧化剂(氯铬酸吡啶)或Jone’s氧化剂(H2CrO4/H2SO4/丙酮)，有机溶剂为二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯。
当R2为OCOR6；R3为CH2OCOR6；R4为COOR6OH、COO(CH2)4OCOR6或COOR6OCOR6COOH时，制备步骤包括a、将3，23-O-二酰基-17-酰氯白桦酸衍生物溶解在二醇中，反应1-48小时，得到3，23-O-二酰基-28-白桦酸二醇单酯衍生物；b、将a产物溶解在卤代有机溶剂中，加入酸酐或二酸酐和有机碱，反应1-48小时，得到3，23-O-二酰基-28-白桦酸二醇单酸双酯或3，23-O-二酰基-28-白桦酸二醇二酸双酯，其中卤代有机溶剂为二氯甲烷、氯仿或四氯化碳。
当R2为OH或OCOR6；R3为CH2OH、CH2OCOR6；R4为CONHR6COOCH3、CONHR6COOH、CONHR6CONHR6COOR6或CONHR6CONHR6COOH时，制备步骤包括a.将氨基酸酯或氨基酸酯盐酸盐溶解在卤代有机溶剂中，加入3，23-O-二酰基-28-白桦酸酰氯反应1-48小时，得到3，23-O-二酰基-28-白桦酸酰氨氨基酸酯；b.将a产物溶解在卤代有机溶剂或THF(四氢呋喃)与甲醇的溶液中，加入1-8mol/L的强碱溶液，回流反应1-8小时，得到3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺氨基酸；c.将缩合剂、有机碱以及氨基酸酯或氨基酸酯盐酸盐及上述产物溶解在卤代溶剂中，反应1-48小时，得到3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸酯；
d.将c产物溶解在卤代有机溶剂或醚与甲醇的溶液中，加入1-8mol/L的强碱溶液，回流反应1-8小时，得到3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸。
其中卤代溶剂为二氯甲烷、氯仿或四氯化碳；强碱溶液为氢氧化钠或氢氧化钾溶液；缩合剂为N，N-二环己基碳二亚胺、N-(3-二甲基胺丙基)-N′-乙基碳二亚胺；有机碱为4-二甲基胺吡啶、1-羟基-苯并-三氮唑或N-甲基吗啉。
当R2为OH或OCOR6；R3为CH2OH或CH2OCOR6；R4为COOR6；R5为CH2＝C-CH2OH时，制备步骤包括a.将3，23-O-酰基-28-羧酸酯白桦酸衍生物与间氯过氧苯甲酸溶解在卤代溶剂中，回流反应4-10小时，得到3，23-O-二酰基-30-羟基-28-羧酸酯白桦酸；b.将a产物溶解在卤代有机溶剂或THF(四氢呋喃)与甲醇的溶液中，加入1-8mol/L的强碱溶液，回流反应1-8小时，得到3，23，30-三羟基-17-羧酸酯白桦酸；其中卤代溶剂为二氯甲烷、氯仿或四氯化碳；强碱溶液为氢氧化钠或氢氧化钾溶液。
当R2为OH、OCOR、OCOR6COOH、＝O、NOH或NOCOR6；R3为OH时，制备步骤包括a、23-OH白桦酸或28-COOH被保护的23-羟基白桦酸用选择性保护试剂(可选自三苯基氯甲烷，二甲基叔丁基氯硅烷)保护，或直接使用；b、适量的酸酐或酰氯或氧化剂处理23-羟基白桦酸或其衍生物4-48个小时，温度为室温至120℃；c、向步骤b的溶液中加入水；d、用有机溶剂萃取，得到有机层，所述衍生物存在于有机层中；e、将d产物在甲酸溶液中脱去保护基团，得到3-O-酰基-23-羟基-28-白桦酸或3-酮-23-羟基-28-白桦酸；f、将e产物3-酮-23-羟基-28-白桦酸酯，盐酸羟胺溶解于吡啶中，室温至70℃搅拌至反应完全；g、将f产物用有机溶剂萃取，得到有机层，所述3-肟基-23-羟基白桦酸衍生物存在于有机层中；其中氧化剂为PCC氧化剂(氯铬酸吡啶)或Jone’s氧化剂(H2CrO4/H2SO4/丙酮)；有机溶剂为二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯。
部分本发明的衍生物可以用下式反应图解表示制备过程(如未明确标明，则R2、R3、R4、R6的定义前所述)反应图解1 由反应图解1可以合成的化合物类型有R2代表OH、OCOR6；R3代表CH2OH、CH2OCOR6；R4代表COOH、CONHR6、 COOR6、COOR6OH、COO(CH2)4OCOR6、COOR6OCOR6COOH、CONHR6COOCH3或CONHR6COOH。
反应图解2 由反应图解2可以合成的化合物类型有R2代表OCOR6；R3代表CH2OCOR6；R4代表COOR6OCOR6COOH或CONHR6NHCOR6COOH。
反应图解3 EDC为N-(3-二甲基胺丙基)-N′-乙基碳二亚胺，HOBT为1-羟基-苯并-三氮唑。
由反应图解3主要合成的化合物类型为R2和R3代表OH，R4代表CONHR6CONHR6COOR6或CONHR6CONHR6COOH。
反应图解4 其中m-CPBA为间氯过氧苯甲酸由反应图解4主要合成的化合物类型为R2代表OH、OCOR6；R3代表、CH2OH、CH2OCOR6R4代表COOR6；R5代表CH2＝C-CH2OH。
反应图解5
TrCl表示三苯基氯甲烷，DMAP为4-二甲胺基吡啶由反应图解5主要合成的化合物的类型有R3代表OH、OCOR6；R3代表CH2OH、CH2OCOR6R4代表COOH。
反应图解6 由反应图解6主要合成的化合物类型有R2代表OCOCOOR6；R3代表CH2OCOCOOR6；R4代表COOR6。
反应图解7
TBSCl为叔丁基二甲基氯硅烷，PCC为氯铬酸吡啶PCC氧化剂，DMAP为4-二甲基胺吡啶。由反应图解7主要合成的化合物类型主要有R2代表＝O、NOH或NOCOR6；R3代表CH2OH、CH2OCOOR6；R4代表COOR6。
反应图解8
PCC为氯铬酸吡啶PCC氧化剂，Jone’s氧化剂为H2CrO4/H2SO4/丙酮。由反应图解8可以得到的化合物类型有R2代表＝O；R3代表CHO或COOH。
本发明合成的部分化合物的结构见表1表1部分化合物结构(R1为H)
本发明的23-羟基白桦酸衍生物可以和碱形成药学上可接受的盐。所述碱可以是氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂等。
药理试验证明，本发明的23-羟基白桦酸衍生物具有抗肿瘤作用，可以用于制备抗肿瘤药物。优选治疗的肿瘤疾病是肝癌、肺癌、胃癌、黑色素瘤、宫颈癌、乳腺癌、白血病或脑瘤。
下面是本发明的部分化合物的药理学试验及数据一、体外MTT筛选方法1 取处于指数生长期状态良好的细胞一瓶，加入0.25％胰蛋白酶消化液，消化使贴壁细胞脱落，计数2～4×104个/ml，制成细胞悬液。
2 取细胞悬液接种于96孔板上，180μl/孔，置恒温CO2培养箱中培养24小时。
3 换液，加入受试药物，20μl/孔，培养48小时。
4 将MTT加入96孔板中，20μl/孔，培养箱中反应4小时。
5 吸去上清液，加入DMSO，150μl/孔，平板摇床上振摇5分钟。
6 用酶联免疫检测仪在波长为570nm处测定每孔的吸光值，并计算细胞抑制率
表2
表3
表4
表5
表6
2.Skehan，P；Storeng，R；Scudiero，D；Monks，A；McMahon，J；Vistica，D Warren，JT；Bokesch，H；Kenney，S；Boyd，MR.New colorimetric cytotoxicity assay foranticancer drug screening.J.natl cancer inst.1990，821107-12。
注表1～表8中BA为白桦酸，23HBA为23-羟基白桦酸。
细胞系代号表示为BGC-823表示人低分化胃腺癌细胞 BEL-7402表示人肝癌细胞A549表示人肺癌细胞 SF-763表示人脑瘤细胞SMMC-7721表示人肝癌细胞 MDA-MB-231表示人乳腺癌细胞HL-60表示人早幼粒细胞白血病细胞 HO-8910表示人卵巢癌细胞B16表示小鼠黑色素瘤细胞 HELA表示人宫颈癌细胞上述试验表明，本发明的部分化合物对于不同的肿瘤均有一定的抑制作用，并且作用强于23-羟基白桦酸。
二、体内抗肿瘤试验化合物BY-59对小鼠H22肝癌的实验治疗作用选用18-22克雌性ICR小鼠及生长良好的7-11天的H22瘤种，接种于小鼠右侧腋部皮下，约4.5-5×106细胞/只，接种24小时后随机分笼，腹腔给药。按不同剂量连续给药4天或给2天停2天再给2天。第8天处死动物，称体重、瘤重，计算各组平均瘤重，按下公式求出肿瘤抑制率并进行T检验。
结果见表9。表9显示化合物BY-59 20mg/kg对小鼠H22肝癌的肿瘤生长抑制作用大大高与23-羟基白桦酸。
表9
注23HBA为23-羟基白桦酸细胞计数后，检测肿瘤细胞凋亡百分率(表5)，不同比活度ReO4-组和188Re-DTPA-DG组间差异有显著性(P＜0.01)，ReO4-组和188Re-DTPA-DG组不同比活度间差异有显著性(P＜0.01)。188Re-DTPA-DG能使肿瘤细胞凋亡发生增加，能有效治疗肿瘤。
表5 不同组肺癌A549细胞凋亡百分率(x±s)
实施例33，23-二乙酰基-28-白桦酸甲酯(SZ1)用5ml精制干燥的二氯甲烷将实施例2方法制备的BYA-2(0.1g，0.17mmol)溶于10ml茄形瓶中，滴加甲醇5ml，室温搅拌6h。饱和食盐水(5ml×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯＝12∶1(v∶v)]，得白色粉末状固体0.092g，总收率90.0％，mp 110～112℃。
ESI-MS593[M+Na]+1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.78(s，3H，CH3)，0.83(s，3H，CH3)，0.87(s，3H，CH3)，0.89(s，3H，CH3)，1.68(s，3H，CH3)，1.99(s，3H，CH3)，2.04(s，3H，CH3)，2.94～3.01(m，1H，C19-H)，3.64(s，3H，CH3-O)，3.59～3.68(d，1H，23-H)，3.79～3.83(d，1H，23-H)，4.57(s，1H，29-H)，4.71(s，1H，29-H)，4.71～4.77(m，1H，3-H)实施例43，23-二乙酰基-28-正丁酰胺白桦酸(XA1)将实施例2方法制备的BYA-2(0.1g，0.17mmol)溶于干燥的二氯甲烷5ml中，滴加正丁胺3ml，再滴加0.05ml三乙胺，室温搅拌7h。9％盐酸洗涤pH至4-5，饱和食盐水(5ml×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[二氯甲烷∶丙酮＝60∶1(v∶v)]，得白色粉末状固体0.093g，总收率85.0％，mp 115～117℃。
ESI-MS612[M+H]+1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.77(s，3H，CH3)，0.85(s，3H，CH3)，0.90～0.93(m，9H，3CH3)，1.65(s，3H，CH3)，1.99(s，3H，CH3)，2.04(s，3H，CH3)，3.13～3.15(m，1H，C19-H)，3.25～3.32(m，2H，CH2-N)，3.63～3.66(d，1H，23-H)，3.80～3.84(d，1H，23-H)，4.56(s，1H，29-H)，4.70(s，1H，29-H)，4.70～4.77(m，1H，3-H)，5.52～5.56(t，1H，H-N)实施例5
3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺甘氨酸甲酯(BY-19-3)将甘氨酸甲酯盐酸盐(0.07g，0.54mmol)，DMAP(0.012g，0.1mmol)溶于10ml干燥的二氯甲烷中，滴加实施例2的BYA-2(0.1g，0.17mmol)的二氯甲烷溶液，室温搅拌12h。9％盐酸洗涤pH至7，饱和食盐水(5ml×3)洗涤，Na2SO4干燥，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[石油醚∶丙酮＝5∶1(v∶v)]，得白色固体0.062g，总收率55％，mp109-111℃。
ESI-MS628.3[M+H]+1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.80(s，3H，CH3)，0.87(s，3H，CH3)，0.91(s，3H，CH3)，0.96(s，3H，CH3)，1.58(s，3H，CH3)，2.01，2.06(s，各3H，3,23-COOCH3)，3.09(m，1H，C19-H)，3.76(s，3H，COOCH3)，3.76(dd，2H，23-H)，4.00(t，2H，N-CH2)，4.66(d，2H，29-H)，4.75(m，1H，3-H)，6.05(t，1H，CONH)实施例63，23-O-二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸乙酯(BYA-4-3)将3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙酯(0.1g，0.17mmol)，m-CPBA(0.03g，0.18mmol)溶解在10ml氯仿中，加热回流反应6h，用饱和NaHCO3(10ml*2)洗涤，然后再用10ml水洗涤，最后用饱和食盐水10ml洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1(v∶v)]，得白色固体0.05g，总收率47％，mp110-111℃。
ESI-MS623.5[M+Na]+1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.80(s，3H，CH3)，0.87(s，3H，CH3)，0.93(s，3H，CH3)，0.96(s，3H，CH3)，1.58(s，3H，CH3)，2.01，2.06(s，各3H，3,23-COOCH3)，2.89(m，1H，C19-H)，3.76(dd，2H，23-H)，4.12(m，4H，30-CH2和28-COOCH2)，4.76(m，1H，3-H)，4.94(d，2H，29-H)实施例73，23-二羟基-28-白桦酸正戊酯(BY-61)将3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸正戊酯(0.1g，0.16mmol)溶于THF和甲醇的混合溶液6ml(v/v＝1∶1)，加入4M的NaOH溶液2ml，加热回流反应4小时，用10％HCl调PH至7，有固体析出，过滤，得到白色固体0.08g,，产率95％，mp76-78℃。
ESI-MS543.4[M+H]+1HNMR(300Hz，DMSO-D6)，δ(ppm)0.51(s，3H，CH3)，0.77(s，3H，CH3)，0.84(s，3H，CH3)，0.93(s，3H，CH3)，1.65(s，3H，CH3)，2.90(m，1H，C19-H)，3.76(s，3H，COOCH3)，3.18(dd，2H，23-H)，3.45(m，1H，3-H)，4.02(m，2H，28-COOCH2)，4.10(d，1H，3-OH)，4.57(t，1H，23-OH)，4.60(d，2H，29-H)实施例8
3，23-二羟基-28-苯甲酰胺白桦酸(I1)将3，23-O-二乙酰基-28-苯甲酰胺白桦酸(0.13g，0.20mmol)溶解于3mlTHF和1.5ml的CH3OH中，向其中滴加1.5ml的NaOH水溶液(1mol/L)，反应液室温搅拌过夜，减压浓缩除去有机溶剂，加入50ml的乙酸乙酯稀释。有机相用5％盐酸水溶液洗涤至水层显弱酸性，再用水洗三次，饱和食盐水洗两次，无水Na2SO4干燥两小时。减压浓缩至干，硅胶柱层析分离，石油醚∶乙酸乙酯＝2∶3(v∶v)洗脱，得到白色固体0.10g，产率为95％，mp 144-146℃。
ESI-MS528[M+H]+1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)0.85(3H，s，CH3)，0.86(3H，s，CH3)，0.94(3H，s，CH3)，0.96(3H，s，CH3)，1.67(3H，s，CH3)，3.09～3.19(2H，m，N-CH2)，3.26～3.32(1H，m，C19-H)，3.40(1H，d，23-H)，3.58～3.63(1H，m，3-H)，3.70(1H，d，23-H)，4.58and 4.72(1H each，brs，29-H)，5.57(1H，t，N-H).
实施例93，23，30-三羟基-28-白桦酸乙酯(BY-65)将3，23-O-二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸乙酯(0.05g，0.083mmol)溶解于3mlTHF和1.5ml的CH3OH中，向其中滴加1.5ml的NaOH水溶液(4mol/L)，回流反应5h，加水稀释，调PH至7，有固体析出，过滤，得到白色固体0.04g，产率为95％，mp 248-250℃(dec)ESI-MS539.3[M+Na]+1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.86(s，3H，CH3)，0.87(s，3H，CH3)，0.91(s，3H，CH3)，0.96(s，3H，CH3)，1.25(s，3H，CH3)，2.89(m，1H，C19-H)，3.56(dd，2H，23-H)，3.61(m，1H，3-H)，4.13(m，4H，30-CH2和28-COO CH2)，4.93(d，2H，29-H)实施例103，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸(BY-26)将3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺甘氨酸甲酯(0.06g，0.096mmol)溶解于3mlTHF和1.5ml的CH3OH中，向其中滴加1.5ml的NaOH水溶液(4mol/L)，回流反应5h，加水稀释，调PH至4-5，有白色固体析出，过滤，得到白色固体0.048g，产率为95％，mp 213-215℃ESI-MS528.4[M-H]1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.52(s，3H，CH3)，0.77(s，3H，CH3)，0.83(s，3H，CH3)，0.91(s，3H，CH3)，1.62(s，3H，CH3)，2.90(m，1H，C19-H)，3.20(dd，2H，23-H)，3.29-3.73(m，4H，3-H和3-OH，23-OH，28-NCH2)，4.13(m，4H，30-CH2和28-COO CH2)，4.59(d，2H，29-H)，7.86(t，1H，28-CONH)实施例11
3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺甘氨酸甲酯(BY-63-3)将3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸(0.1g，0.19mmol)溶解在10ml二氯甲烷中，加入EDC(0.06g，0.38mmol)，HOBT(0.06g，0.48mmol)，甘氨酸甲酯盐酸盐(0.035g，0.29mmol)，室温反应过夜，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[石油醚∶丙酮＝5∶1(v∶v)]，得白色固体0.09g，总收率80％，mp213-215℃。
ESI-MS601.3[M+H]+1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.85(s，3H，CH3)，0.88(s，3H，CH3)，0.91(s，3H，CH3)，0.96(s，3H，CH3)，1.68(s，3H，CH3)，3.05(m，1H，C19-H)，3.55(dd，2H，23-H)，3.61(m，1H，3-H)，3.75(s，1H，COOCH3)，3.94-4.06(m，4H，28-NCH2*2)，4.66(d，2H，29-H)，6.33(t，1H，28-CONH)，6.66(t，1H，28-CONH)实施例123，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇单酯(BY-8)用5ml精制干燥的二氯甲烷将3，23-O-二乙酰基-28-白桦酰氯溶于10ml茄形瓶中，加入大过量的乙二醇，室温搅拌6h。饱和食盐水(5ml×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯＝3∶1(v∶v)]，得白色固体0.07g，总收率70.0％，mp 85-87℃。
ESI-MS601.6[M+H]+1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.80(s，3H，CH3)，0.87(s，3H，CH3)，0.93(s，3H，CH3)，0.96(s，3H，CH3)，1.68(s，3H，CH3)，2.01(s，3H，CH3)，2.06(s，3H，CH3)，2.98(m，1H，C19-H)，3.76(dd，2H，23-H)，3.83(m，2H，28-CH2OH)，4.23(m，2H，28-COOCH2)，4.66(d，2H，29-H)，4.74～4.77(m，1H，3-H)实施例133，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇琥珀酸双酯(BY-44)将3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酯乙基醇(0.07g，.0.12mmol)，丁二酸酐(0.05g，0.5mmol)，DMAP(0.012g，0.1mmol)溶解在10ml二氯甲烷中，室温反应16h，用10％HCl(2*10ml)，用水10ml洗涤，最后用10ml饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯∶乙酸＝50∶50∶0.4(v∶v)]，得淡黄色固体0.057g，总收率70.0％，mp 78-80℃。
ESI-MS699.3[M-H]-1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.81(s，3H，CH3)，0.87(s，3H，CH3)，0.91(s，3H，CH3)，0.96(s，3H，CH3)，1.68(s，3H，CH3)，2.01(s，3H，CH3)，2.06(s，3H，CH3)，2.66(m，4H，28-OCOCH2CH2COO)，3.00(m，1H，C19-H)，3.76(dd，2H，23-H)，3.75(m，2H，28-CH2OH)，4.29(m，4H，28-COOCH2CH2O)，4.66(d，2H，29-H)，4.73(m，1H，3-H)实施例143，23-O-二琥珀酸单酰基白桦酸(BY-24-2)将23-羟基白桦酸(0.1g，0.21mmol)，丁二酸酐(0.12g，1.2mmol)，DMAP(0.05g，0.4mmol)溶解在10ml吡啶中，加热至90℃。反应48h，反应液倒入冷水中，用10％HCl调PH至4-5，有固体析出，过滤，滤饼用二氯甲烷溶解制沙，柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯∶乙酸＝50∶50∶0.4(v∶v)]，得淡黄色固体0.09g，总收率75％，mp 153-155℃。
ESI-MS671.3[M-H]-1HNMR(300Hz，DMSO-D6)，δ(ppm)0.75(s，3H，CH3)，0.83(s，3H，CH3)，0.86(s，3H，CH3)，0.94(s，3H，CH3)，1.64(s，3H，CH3)，2.45(m，8H，3，23-COCH2CH2CO)，2.90(m，1H，C19-H)，3.70(dd，2H，23-H)，4.62(d，2H，29-H)，4.67(m，1H，3-H)，12.10(s，3H，3，23，28-COOH)实施例153-羟基-23-O-三苯基甲醚白桦酸(BY-34-1)将23-羟基白桦酸(0.1g，0.21mmol)，三苯基氯硅烷(0.12g，0.42mmol)，DMAP(0.014g，0.12mmol)，溶解在10ml吡啶中，加热至90℃。反应24h，反应液倒入冷水中，用10％HCl调PH至4-5，有固体析出，过滤，滤饼用二氯甲烷溶解制沙，柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯＝3∶1(v∶v)]，得灰白色固体0.10g，总收率65％，mp200-202℃。
ESI-MS737[M+Na]+1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.71(s，3H，CH3)，0.82(s，3H，CH3)，0.89(s，3H，CH3)，1.00(s，3H，CH3)，1.69(s，3H，CH3)，2.99～3.00(m，1H，C19-H)，2.77～2.80(d，1H，23-H)，3.18～3.21(d，1H，23-H)，3.59～3.65(m，1H，3-H)，4.61(s，1H，29-H)，4.74(s，1H，29-H)，7.23～7.46(m，15H，3ArH)实施例163-O-邻苯二甲酸单酰基-23-O-三苯基甲醚白桦酸(BY-30-3)将3-羟基-23-O-三苯基甲醚-28-白桦酸(0.1g，0.14mmol)，邻苯二甲酸酐(0.04g，0.28mmol)，DMAP(0.012g，0.1mmol)，溶解在10ml吡啶中，加热至90℃。反应24h，反应液倒入冷水中，用10％HCl调PH至4-5，有固体析出，过滤，滤饼用二氯甲烷溶解制沙，柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯∶乙酸＝50∶50∶0.4(v∶v)]，得灰白色固体0.07g，总收率60％。
ESI-MS885.5[M+Na]+
实施例173-O-邻苯二甲酸单酰基-23-羟基白桦酸(BY-30-4)将3-O-(2-酸苯甲酸酯)-23-O-三苯基甲醚-28-白桦酸(0.07g，0.08mmol)溶解在10ml氯仿中，加入2ml甲酸，回流反应4h，蒸干，加水，有固体析出，过滤，滤饼用二氯甲烷溶解制沙，柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯∶乙酸＝50∶50-0.4(v∶v)]，得黄色固体0.035g，总收率65％，mp 280℃(dec)。
ESI-MS647.4[M-H]+1HNMR(300Hz，DMSO-D6)，δ(ppm)0.74(s，3H，CH3)，0.84(s，3H，CH3)，0.89(s，3H，CH3)，0.96(s，3H，CH3)，1.65(s，3H，CH3)，2.95(m，1H，C19-H)，3.91(d，1H，23-H)，4.24(d，1H，23-H)，4.56(s，1H，29-H)，4.69(s，1H，29-H)，4.82(m，1H，3-H)，7.23～7.61(m，4H，ArH)实施例183-O-苯甲酸酯-23-三苯基甲醚白桦酸(LD-34)用10ml吡啶将3-羟基-23-O-三苯基甲醚-28-白桦酸(0.1g，0.14mmol)溶于25ml圆底烧瓶中，加入苯甲酰氯(0.1ml，0.86mmol)，再加入DMAP(0.012g，0.1mmol)，室温搅拌2h。20ml乙酸乙酯稀释，9％盐酸洗涤pH至4-5，饱和食盐水(10ml×3)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯＝10∶1(v∶v)]，得白色粉末状固体0.08g，收率70％ESI-MS841[M+Na]+实施例193-羟基-23-O-苯甲酸酯白桦酸(XB3a)将3-O-苯甲酸酯-23-三苯基甲醚-28-白桦酸(0.08g，0.097mmol)溶于10ml干燥的二氯甲烷中，滴加1ml甲酸，室温搅拌30min。饱和NaHCO3溶液洗涤pH至7-8，饱和食盐水(10ml×3)洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[石油醚(60℃～90℃)∶乙酸乙酯＝8∶1(v∶v)]，得白色粉末状固体0.033g，收率55.6％，mp 144～145℃。
ESI-MS575[M-H]-1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.88(s，3H，CH3)，0.89(s，3H，CH3)，1.02(s，6H，2CH3)，1.72(s，3H，CH3)，3.03～3.09(m，1H，C19-H)，3.42～3.50(d，1H，23-H)，3.62～3.65(t，1H，3-H)，3.73～3.74(d，1H，23-H)，4.65(s，1H，29-H)，4.77(s，1H，29-H)，7.49～8.05(m，5H，ArH)实施例203-酮-23-醛白桦酸(Y1)将23-羟基白桦酸(0.12g，0.25mmol)溶于10ml二氯甲烷25ml中，加入载于氧化铝的PCC(0.66g，0.5mmol)，室温搅拌。15min后，反应液由黄橙色变为棕色。继续搅拌5.5h，停止反应，倾出上清液。加入无水乙醚10ml，充分搅拌15min，倾出上清液。以同样的方法用无水乙醚再处理两次。合并有机层，流经一硅胶短柱，浓缩制砂。柱层析[二氯甲烷∶丙酮＝100∶1(v∶v)]，得白色粉末状固体0.082g，收率70.5％，mp 210～212℃。
1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.97～1.25(m，9H，3CH3)，1.27(s，3H，CH3)，1.70(s，3H，CH3)，2.99～3.03(m，1H，C19-H)，4.62(s，1H，29-H)，4.75(s，1H，29-H)，9.34(s，1H，H-C＝O)Anal.C30H44O4Found(％)C 76.32 H 9.74Calcd(％)C 76.88 H 9.46实施例213-酮-23-酸白桦酸(Y2)将23-羟基白桦酸(0.12g，0.25mmol)溶于10ml丙酮25ml中，滴加新鲜制备的Jones氧化剂，直到反应液短时间内不再变为绿色，再加入一倍量的氧化剂，冰浴下搅拌1.5h。加入1ml甲醇充分搅拌15min，溶液由黄褐色变为绿色。再加入10ml水，然后将有机溶剂蒸干。乙酸乙酯(10ml×3)提取水层，合并。饱和食盐水(10ml×3)洗涤合并的有机层，无水硫酸镁干燥，过滤，滤液浓缩制砂。柱层析[二氯甲烷∶丙酮＝120∶1(v∶v)]，得白色粉末状固体0.073g，收率60.7％，mp 218～220℃。
ESI-MS439[M-COOH]-1HNMR(300Hz，CDCl3)，δ(ppm)0.96～1.02(m，12H，4CH3)，1.69(s，3H，CH3)，2.98～3.03(m，1H，C19-H)，4.61(s，1H，29-H)，4.74(s，1H，29-H)实施例223-羟基-23-O-叔丁基二甲基硅醚-28-白桦酸甲酯(XP-5)将3，23-二羟基-28-白桦酸甲酯(0.23g，0.47mmol)，DMAP(0.10g，0.82mmol)溶解在10ml干燥的CH2Cl2中，迅速加入叔丁基二甲基氯硅烷(TBSCl)(0.13g，0.86mmol)，室温搅拌过夜，加入2ml水分解过量的TBSCl，搅拌半小时，再加入40ml CH2Cl2稀释反应液。有机相依次用5％盐酸水溶液(3×20ml)、水(2×20ml)和饱和食盐水(2×20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥两小时，减压浓缩至干。硅胶柱层析分离，石油醚∶乙酸乙酯＝16∶1(v∶v)洗脱，得到0.26g白色粉末状固体，产率92％，mp156～158℃。
ESI-MS623[M+Na]+1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)0.065(3H，s，SiCH3)，0.068(3H，s，SiCH3)，0.84(3H，s，CH3)，0.86(3H，s，CH3)，0.90(9H，s，3×CH3)，0.91(3H，s，CH3)，0.95(3H，s，CH3)，1.68(3H，s，CH3)，2.18～2.24(2H，m，2-H2)，2.97～3.01(1H，m，C19-H)，3.33(1H，d，23-H)，3.54～3.60(1H，m，3-H)，3.63(1H，d，23-H)，3.66(3H，s，OCH3)，4.59and 4.73(1H eaeh，brs，29-H).
实施例223-酮-23-O-叔丁基二甲基硅醚-28-白桦酸甲酯(XP-6)将3-羟基-23-O-叔丁基二甲基硅醚-28-白桦酸甲酯(0.22g，0.37mmol)溶解于10ml干燥的二氯甲烷中，室温下，加入PCC(0.24g，1.11mmol)，搅拌3小时，黑色混合物用40ml无水乙醚稀释，直接加入0.5g硅胶室温减压浓缩至干，硅胶柱层析分离，石油醚∶乙酸乙酯＝30∶1(v∶v)洗脱，得到0.14g的白色粉末状固体，产率64.5％，mp137～139℃。
ESI-MS599[M+H]+1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ0.01(6H，s，2×SiCH3)，0.84(3H，s，CH3)，0.85(3H，s，CH3)，0.87(9H，s，3×CH3)，0.96(3H，s，CH3)，0.98(3H，s，CH3)，1.69(3H，s，CH3)，2.97～3.01(1H，m，C19-H)，3.29(1H，d，J＝9.2Hz，23-H)，3.57(1H，d，J＝9.2Hz，23-H)，3.67(3H，s，OCH3)，4.60 and 4.74(1Heach，brs，29-H).
实施例233-酮-23-羟基-28-白桦酸甲酯(I1)将3-酮-23-O-叔丁基二甲基硅醚-28-白桦酸甲酯(0.16g，0.27mmol)溶于5ml的THF中，向其中滴加1ml四丁基氟化铵的THF溶液(0.5mol/L)，室温搅拌3小时，减压浓缩至干，硅胶柱层析分离，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1(v∶v)洗脱，得0.11g白色固体，产率90％，mp186～188℃。
ESI-MS485[M+H]+1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)0.97(6H，s，2×CH3)，1.00(3H，s，CH3)，1.04(3H，s，CH3)，1.68(3H，s，CH3)，2.25～2.29(1H，m，2-H)，2.55～2.63(1H，m，2-H)，3.00～3.04(1H，m，C19-H)，3.40(1H，d，23-H)，3.62(1H，d，23-H)，3.67(3H，s，OCH3)，4.60 and 4.73(1Heach，brs，29-H).
实施例243-肟基-23-羟基-28-白桦酸甲酯(III)将3-酮-23-OH白桦酸甲酯(0.30g，0.60mmol)，盐酸羟胺(0.3g，4.20mmol)溶解于10ml吡啶中，50℃搅拌4小时，反应液冷却至室温后，加入40ml乙酸乙酯稀释。分离有机层，并依次用5％盐酸水溶液(3×20ml)、水(2×20ml)、饱和食盐水(2×20ml)洗涤。有机层用无水Na2SO4干燥两小时后，减压浓缩至干。硅胶柱层析分离，石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1(v∶v)洗脱，得0.29g白色粉末状固体，产率95％，mp114～116℃。
ESI-MS500[M+H]+1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)0.92(6H，s，2×CH3)，0.95(3H，s，CH3)，1.02(3H，s，CH3)，1.68(3H，s，CH3)，2.96～3.12(2H，m；2-H，C19-H)，3.49(1H，d，23-H)，3.64(1H，d，23-H)，3.66(3H，s，OCH3)，4.60 and 4.73(1H each，br s，29-H).
实施例253-酮-23-乙酰基-28-白桦酸甲酯(II1)将3-酮-23-OH白桦酸甲酯(0.06g，0.12mmol)，DMAP(0.014g，0.12mmol)和乙酸酐(0.06g，0.6mmol)溶解于5ml干燥的CH2Cl2中，室温搅拌10h，加入20ml CH2Cl2稀释。有机相用饱和NaHCO3水溶液洗3次，5％盐酸水溶液洗2次，水洗2次，饱和食盐水洗1次，无水Na2SO4干燥2小时，减压浓缩至干，柱层析分离，石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1(v∶v)洗脱，得到白色粉末状固体0.062g，产率99％，mp58～60℃。
ESI-MS527[M+H]+1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)0.94(3H，s，CH3)，0.96(3H，s，CH3)，0.98(3H，s，CH3)，0.99(3H，s，CH3)，1.68(3H，s，CH3)，2.02(3H，s，COCH3)，2.42～2.50(2H，m，2-H2)，2.95～3.04(1H，m，C19-H)，3.67(3H，s，OCH3)，4.00～4.10(2H，m，23-H2)，4.60，4.74(1Heach，brs，29-H).
实施例263-乙酰基肟基-3-O-乙酰基-28-白桦酸甲酯(III1)将3-肟基-23-羟基-28-白桦酸甲酯(0.1g，0.20mmol)和乙酸酐(0.2g，2mmol)溶解于5ml的无水吡啶中，90℃油浴反应过夜，反应时间24小时。冷却至室温，加入40ml乙酸乙酯稀释。分离有机层，然后依次用5％盐酸水溶液(3×20ml)，饱和NaHCO3水溶液(3×20ml)、水(2×20ml)、饱和食盐水(2×20ml)洗涤。有机层用无水Na2SO4干燥两小时后，减压浓缩至干，粗产品经柱层析分离，石油醚∶乙酸乙酯＝6∶1(v∶v)洗脱，得白色固体0.11g，产率95％，mp156～160℃。
ESI-MS606[M+Na]+1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)0.85(3H，s，CH3)，0.95(3H，s，CH3)，0.96(3H，s，CH3)，1.16(3H，s，CH3)，1.68(3H，s，CH3)，2.05(3H，s，CH3-CO)，2.17(3H，s，CH3-CO)，2.58～2.66(2H，m，2-H2)，3.00(1H，m，C19-H)，3.67(3H，s，OCH3)，4.08(1H，d，23-H)，4.18(1H，d，23-H)，4.61and 4.74(1H each，br s，29-H).
实施例273，23-二羟基-28-白桦酸丙烯酯(BY-59)
用5ml精制干燥的二氯甲烷将实施例2方法制备的BYA-2(0.1g，0.17rnmol)溶于10ml茄形瓶中，滴加丙烯醇2ml，室温搅拌6h。饱和食盐水(5ml×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液蒸干用乙醇重结晶，过滤，滤饼溶于THF和甲醇的混合溶液8ml(v/v＝1∶1)，加入NaOH溶液(4mol/L)2ml，加热回流反应4小时，加水稀释，用10％HCl调PH至7，有固体析出，过滤，滤饼用丙酮溶解浓缩制砂。柱层析[石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯＝1∶1(v∶v)]，得白色粉末状固体0.07g，总收率75.5％，mp111-112℃ESI-MS513.3[M+H]+1HNMR(300Hz，DMSO-D6)，δ(ppm)0.51(s，3H，CH3)，0.77(s，3H，CH3)，0.83(s，3H，CH3)，0.93(s，3H，CH3)，1.65(s，3H，CH3)，2.90(m，1H，C19-H)，3.18(dd，2H，23-H)，3.45(m，1H，3-H)，4.55(m，2H，28-COOCH2)，，4.60(d，2H，29-H)，5.27(m，2H，CH＝CH2)，5.92(m，1H，CH＝CH2)实施例28取实施例27方法制得的化合物50mg与淀粉500mg，糊精500mg混合，用适量30％乙醇作湿润剂，制成软材，常规方法制粒，加入2mg硬脂酸镁混合，制成片剂。
权利要求
1.通式I的23-羟基白桦酸衍生物或其药学上可接受的盐 其中R1代表H、Br、Cl或F；R2代表OH、OR6、OCOR6、OSO2R6、OSO2NH2、NH2、NHCH2OR6、NHR6、N(R6)2、NOR6、OCOR6NHR6、NHCOR6、NHCOR6(COOH)X、NHSO2R6、NHNHR6、NHNHCH(OH)R6、OCOR6COOH、OCOCH(OH)CH(Ph)R7、OCOCOOR6、NOSO3H、NOR6或NHOR6；R3代表H、CH2OH，CHO、COOH、CH2OR6、CH2OCOR6、CH2OSO2R6、CH2OCOR6NHR6、CH2NHCOR6、CH2NHCOR6(COOH)X、CH2NHSO2R6X、CH2NHNHR6、CH2NHNHCH(OH)R6、CH2OCOR6COOH、CH2OCOCH(OH)CH(Ph)R7、CH2OCOCOOR6、CH2NOSO3R6、CH2NOR6或CH2NHOR6；R4代表与R3相同的基团，或者代表COOM、COCl、CON3、CONH2、COOR6、CONR6、CON(R6)2、COOR6COZ、COOR6OX、COO(CH2)mCH＝CH(CH2)nOR6、COO(CH2)mC≡C(CH2)nOR6、COOCOCH＝C(R6)2、COOCOR6、COOR6OCOR6、COOR6OCOR6COOH、CONHR6NHCOR6COOH，CONHR6COOR6、CONHR6CONHR6COOR6、COOR6CHO、COOCH2CH＝NOA、COOCH2CH2NHOA、COOCH2CH＝NR6、COOCH2CH2NHNHR6或COOCH2CH2N(R6)2；R5代表CH2＝C-CH3、CH2＝C-CH2OH、CH3CHCH3或CH2＝C-CH2Br；R6代表H、非取代或X取代的C1-C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基；并且，当R2为OH、R4为COOH或CH2OH时，R6不为H；R7代表NH2或NHR6X；X代表H、Cl、Br、F、I、CN、NH2，NO2、CF3、OH、OCH3、COOH，COOCH3，C1-C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基；Z代表OH、OR6、卤素、N3或NH2；A代表H、CH3、SO2C6H4CH3、OCOR6或R6；M代表Na、K、Li；m＝1-8，n＝1-8。
2.权利要求1的23-羟基白桦酸衍生物，其中R1代表H；R2代表OH、OCOR6、OCOR6COOH、＝O、NOH、NOCOR6、OCOCOOR6；R3代表H、CH2OH、CH2OCOR6、CH2OCOR6COOH、CH2OCOC6H5、CHO、COOH、CH2OCOCOOR6；R4代表COOH、CONHR6、 COOR6、COOR6OH、COO(CH2)4OCOR6、COOR6OCOR6COOH、CONHR6NHCOR6COOH，CONHR6COOCH3、CONHR6COOH、CONHR6CONHR6COOR6，CONHR6CONHR6COOH或CH2OH；R5代表CH2＝C-CH3或CH2＝C-CH2OH；R6代表H、非取代或X取代的C1-C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基、萘基；并且，当R2为OH、R4为COOH或CH2OH时，R6不为H；X代表H、Cl、Br、F、I、CN、NH2，NO2、CF3、OH、OCH3、COOH，COOCH3，C1-C10直链或支链的烷烃、烯烃、炔烃、环烷烃、苯基、苄基或萘基。
3.权利要求2的23-羟基白桦酸衍生物，为下列任一结构的化合物3，23-O-二乙酰基-30-羟基-28-白桦酸甲酯；3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸；3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺丙氨酸；3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺谷氨酸；3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺缬氨酸；3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺亮氨酸；3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺苯丙氨酸；3，23-O-二琥珀酸单酰基白桦酸；3，23-O-二苯乙酰基白桦酸；3-酮-23-醛白桦酸；3-O-邻苯二甲酸单酰基-23-羟基-白桦酸；3-羟基-23-O-苯甲酰基白桦酸；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺甘氨酸甲酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺谷氨酸二甲酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺丙氨酸甲酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺亮氨酸甲酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺苯丙氨酸甲酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸酰胺缬氨酸甲酯；3，23-二羟基-28-白桦酸正辛酯；3，23-二羟基-28-白桦酸正己酯；3，23-二羟基-28-白桦酸正庚酯；3，23-二羟基-28-白桦酸环己酯；3，23-二羟基-28-白桦酸丙烯酯；3，23-二羟基-28-白桦酸丙炔酯；3，23-二羟基-28-白桦酸丁二醇单酯；3，23-二羟基-28-白桦酸乙二醇单酯；3，23-二羟基-28-白桦酸己二醇单酯；3，23-二羟基-28-白桦酸丁炔二醇单酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸正丁酰胺；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸异丙酰胺；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸环己酰胺；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸二正丁酰胺；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸苯乙酰胺；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸二乙酰胺；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸(3，4-亚甲二氧)苯乙酰胺；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸(α-甲基)苄酰胺；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸甲酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸异丁酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸异丙酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丙烯酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丙炔酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇单酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丁二醇单酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丁炔二醇单酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸己二醇单酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丁二醇丁二酸双酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸丁二醇戊二酸双酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸己二醇戊二酸双酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇丁二酸双酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇戊二酸双酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇邻苯二甲酸双酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸己二醇丁二酸双酯；3，23-O-二乙酰基-28-白桦酸乙二醇顺丁烯二酸双酯；3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺甘氨酸酰胺甘氨酸甲酯。
4.权利要求1、2或3的23-羟基白桦酸衍生物的制备方法，当R2为OCOR6或OCOR6COOH、＝O；R3为CH2OCOR6、CH2OCOR6COOH、CH2OCOC6H5、CHO或COOH时，制备步骤包括a、用大过量的酸酐或酰氯或氧化剂处理23-羟基白桦酸4-48个小时，温度为室温至120C；b、向步骤a的溶液中加入水；c、用有机溶剂萃取，得到有机层，其中，氧化剂为氯铬酸吡啶或H2CrO4/H2SO4/丙酮，有机溶剂为二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯；当R2为OCOR6；R3为CH2OCOR6；R4为COOR6OH、COO(CH2)4OCOR6或COOR6OCOR6COOH时，制备步骤包括a、将3，23-O-二酰基-17-酰氯白桦酸衍生物溶解在二醇中，反应1-48小时，得到3，23-O-二酰基-28-白桦酸二醇单酯衍生物；b、将a产物溶解在卤代有机溶剂中，加入酸酐或二酸酐和有机碱，反应1-48小时，得到3，23-O-二酰基-28-白桦酸二醇单酸双酯或3，23-O-二酰基-28-白桦酸二醇二酸双酯，其中卤代有机溶剂为二氯甲烷、氯仿或四氯化碳；R2、R3、R4、R6的定义如权利要求1。
5.权利要求1、2或3的23-羟基白桦酸衍生物的制备方法，当R2为OH或OCOR6；R3为CH2OH、CH2OCOR6；R4为CONHR6COOCH3、CONHR6COOH、CONHR6CONHR6COOR6或CONHR6CONHR6COOH时，制备步骤包括a.将氨基酸酯或氨基酸酯盐酸盐溶解在卤代有机溶剂中，加入3，23-O-二酰基-28-白桦酸酰氯反应1-48小时，得到3，23-O-二酰基-28-白桦酸酰氨氨基酸酯；b.将a产物溶解在卤代有机溶剂或四氢呋喃与甲醇的溶液中，加入1-8mol/L的强碱溶液，回流反应1-8小时，得到3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺氨基酸；c.将缩合剂、有机碱以及氨基酸酯或氨基酸酯盐酸盐及上述产物溶解在卤代溶剂中，反应1-48小时，得到3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸酯；d.将c产物溶解在卤代有机溶剂或醚与甲醇的溶液中，加入1-8mol/L的强碱溶液，回流反应1-8小时，得到3，23-二羟基-28-白桦酸酰胺氨基酸酰胺氨基酸；其中卤代溶剂为二氯甲烷、氯仿或四氯化碳；强碱溶液为氢氧化钠或氢氧化钾溶液；缩合剂为N，N-二环己基碳二亚胺、N-(3-二甲基胺丙基)-N′-乙基碳二亚胺；有机碱为4-二甲基胺吡啶、1-羟基-苯并-三氮唑或N-甲基吗啉；当R2为OH或OCOR6；R3为CH2OH或CH2OCOR6；R4为COOR6；R5为CH2＝C-CH2OH时，制备步骤包括a.将3，23-O-酰基-28-羧酸酯白桦酸与间氯过氧苯甲酸溶解在卤代溶剂中，回流反应4-10小时，得到3，23-O-二酰基-30-羟基-28-羧酸酯白桦酸；b.将a产物溶解在卤代有机溶剂或四氢呋喃与甲醇的溶液中，加入1-8mol/L的强碱溶液，回流反应1-8小时，得到3，23，30-三羟基-17-羧酸酯白桦酸；其中卤代溶剂为二氯甲烷、氯仿或四氯化碳；强碱溶液为氢氧化钠或氢氧化钾溶液；R2、R3、R4、R6的定义如权利要求1。
6.权利要求1、2或3的23-羟基白桦酸衍生物的制备方法，当R2为OH、OCOR6、OCOR6COOH、＝O、NOH或NOCOR6；R3为OH时，制备步骤包括a、用三苯基氯甲烷或二甲基叔丁基氯硅烷保护23-OH白桦酸或28-COOR6；b、适量的酸酐或酰氯或氧化剂处理a所得产品4-48个小时，温度为室温至120℃；c、向步骤b的溶液中加入水；d、用有机溶剂萃取，得到有机层；e、将d产物在甲酸溶液中脱去保护基团，得到3-O-酰基-23-羟基-28-白桦酸或3-酮-23-羟基-28-白桦酸；f、将e产物3-酮-23-羟基-28-白桦酸酯，盐酸羟胺溶解于吡啶中，室温至70℃搅拌至反应完全；g、将f产物用有机溶剂萃取，得到有机层；其中氧化剂为氯铬酸吡啶或H2CrO4/H2SO4/丙酮；有机溶剂为二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯；R2、R3、R6的定义如权利要求1。
7.药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1、2或3的通式I的23-羟基白桦酸衍生物及药学上可接受的载体。
8.权利要求1、2或3的23-羟基白桦酸衍生物用于制备治疗肿瘤疾病的药物的用途。
9.权利要求8的用途，其中肿瘤疾病是肝癌、肺癌、胃癌、黑色素瘤、宫颈癌、乳腺癌、白血病或脑瘤。
全文摘要
本发明涉及天然药物及药物化学领域，具体涉及一类经修饰的23－羟基白桦酸衍生物(I)，R
文档编号A61K31/56GK1861627SQ20061004027
公开日2006年11月15日 申请日期2006年5月12日 优先权日2006年5月12日
发明者吴晓明, 徐进宜, 毕毅, 周金培, 张陆勇, 袁貹涛, 李丹, 徐萍 申请人:中国药科大学